Patologia en Neón Tetra

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    Rev Inv Vet Per 2015; 26(3): 469-483http://dx.doi.org/10.15381/rivep.v26i3.11176

    1Laboratorio de Histologa, Embriologa y Patologa Veterinaria, 2Laboratorio de Microbiologa y

    Parasitologa Veterinaria, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San

    Marcos, Lima, Per3E-mail: [email protected]

    Recibido: 21 de agosto de 2014

    Aceptado para publicacin: 20 de marzo de 2015

    Estudio Microbiolgico e Histopatolgico en Peces Tetra Nen(Paracheirodon innesi) de la Amazona Peruana

    MICROBIOLOGICALANDHISTOPATHOLOGICALSTUDYINFISHESNEONTETRA(PARACHEIRODONINNESI) FROMTHEPERUVIANAMAZON

    Shirley Palacios H.1,3, Nieves Sandoval C.1 , Chen Bueno M.1 , Alberto Manchego S.2

    RESUMEN

    El objetivo del presente estudio fue determinar la presencia de agentes infecciososmediante estudios microbiolgicos e histopatolgicos en tetra nen (Paracheirodoninnesi), pez amaznico ornamental. Se colectaron 168 peces, al azar, del acuario de unacopiador minorista de peces ornamentales de Iquitos, Per. En la necropsia de 84 pecesse tomaron muestras de rin y bazo para el aislamiento de bacterias en agar tripticasa desoya (TSA), Citophaga (AO) y Middlebrook 7H9, haciendo la identificacin mediantecoloracin Gram y anlisis bioqumico. El estudio histopatolgico se hizo con los 84peces restantes. Se aislaron bacterias de los gneros Flavobacterium, Staphylococcus,Carnobacterium , Pseudomonas, Ente ro cocc us , Bac illus y de la familiaEnterobacteriaceae. En branquias se observ hiperplasia lamelar, fusin de lamelas, ascomo presencia de esporas deMixosporidia en los pices de las lamelas; en intestino se

    encontr hiperplasia del epitelio y presencia de esporas deMicrosporidiumen enterocitos;en hgado se encontr degeneracin hidrpica, grasa y presencia de un granuloma para-sitario; en riones se encontr edema peritubular y degeneracin hidrpica tubular; y enmsculo esqueltico se encontr necrosis, granulomas y presencia de quistes deMixosporidiumy esporas deMicrosporidium, PleistophorayHeterosporis.

    Palabras clave: tetra nen, estudio microbiolgico, estudio histopatolgico,Microsporidium

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    S. Palacios et al.

    ABSTRACT

    The aim of this study was to determine the presence of infectious agents by

    microbiological and histopathological studies in the neon tetra (Paracheirodon innesi),an Amazonian ornamental fish. A total of 168 fish were randomly collected from theaquarium of an ornamental fish retail collector in Iquitos, Peru. For the microbiologicalstudy, kidney and spleen samples were collected during the necropsy of 84 specimens,and bacteria were isolated in trypticase soy agar (TSA), Citophaga (AO) and Middlebrook7H9, while identification was done through Gram staining and biochemical analysis. Thehistopathological study was conducted in the remaining 84 fish. Bacteria isolated were ofgenera Flavobacterium, Staphylococcus , Carnobacterium, Pseudomonas,Enterococcus, Bacillus and of the Enterobacteriaceae family. In gills was observedlaminar hyperplasia, fusion of lamellae andMixosporidia spores at the tips of the lamellae;in the intestine was observed epithelial hyperplasia of the bowel and spores ofMicrosporidium in the intestinal villi; in the liver was found hydropic and fattydegeneration and a parasitic granuloma; in kidneys was found peritubular edema and

    hydropic degeneration; and in the muscular skeletal was found necrosis, presence ofMixosporidium cysts, granulomas, and spores of Microsporidium, PleistophoraandHeterosporis.

    Key words: neon tetra, microbiological study, histopathological study,Microsporidium

    INTRODUCCIN

    La actividad pesquera ornamental en

    una importante fuente de ingreso de divisaspara el pas y de sustento para miles de fami-lias dedicadas a este rubro del quehacer eco-nmico regional. En el Per, la actividad decomercializacin del recurso peces ornamen-tales se inicia a partir de la dcada del cin-cuenta, desde la ciudad de Iquitos hacia elexterior; en ese entonces, principalmente conla ciudad de Miami, EEUU (Rojas, 1972). Elnivel de extraccin de peces ornamentalesen las diferentes cuencas del pas ha ido va-

    riando a travs del tiempo. La cuenca del roNapo fue la ms importante en la dcada delos 70, la cuenca del Nanay en la dcada delos 80 y la cuenca del Ucayali en la dcadade los 90 hasta la actualidad (Ruz et al.,2003).

    Diversos eventos relacionados al me-dio ambiente acutico o de manejo de los

    peces pueden conducir a alteraciones en lasalud de los peces; especialmente por efectode enfermedades de tipo infecciosas y no in-

    fecciosas (Centeno et al.,2004).

    Dentro del grupo de enfermedades in-fecciosas que afectan la salud de los pecesornamentales amaznicos, figuran las enfer-medades bacterianas, virales, fngicas y pa-rasitarias que a menudo ocasionan lesionesexternas e internas, muchas de las cuales

    pueden ocasionar la muerte y ser una fuentede dispersin de la enfermedad en el agua(Centeno et al., 2004). Las bacterias rela-cionadas con enfermedad pueden provenir dela flora bacteriana de los peces, as como por

    bacterias introducidas por una mala prcticaen el manejo; lo cual sumado a alguna condi-cin estresante en los peces, los conviertenen individuos susceptibles de padecer algunainfeccin. Algunas bacterias, a la vez, pue-den tener cierta capacidad zoontica, oca-sionando problemas en la salud pblica(Roberts, 2001).

    Los peces tetra nen pertenecen al Or-den Characiformes, familia Characidae, siendouna especie muy apreciada en la acuariofilia

    por su carcter pacfico, su llamativo color ysus desplazamientos en cardumen que danvida al acuario. Presentan una franja azul

    fosforescente que recorre su cuerpo desde

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    Estudio microbiolgico e histopatolgico en peces tetra nen

    el morro hasta la aleta adiposa. La parte in-ferior es de un rojo luminoso que se extiendedesde la parte anterior hasta la mitad del cuer-

    po. Son peces pequeos, de 2 a 4 cm de lon-

    gitud, adaptados a temperaturas entre 21 a28 C. Pueden vivir entre 6 y 7 aos. Sonomnvoros, con especial predileccin por elalimento vivo, como artemia salina, tubifex,larvas de mosquito, daphnias y pequeos gu-sanos, as como alimento liofilizado (Herberty Dauner, 2002). Se les encuentra en el cur-so principal del ro Amazonas y sus tributa-rios en Brasil, Colombia y Per (Petracini,2013).

    El presente trabajo tuvo como objetivorealizar un estudio histopatolgico y micro-biolgico en peces tetra nen (Parachei-rodon innesi) de la amazonia peruana.

    MATERIALESYMTODOS

    Lugar de Estudio y Material Biolgico

    Se trabaj con muestras de peces tetra

    nen (Paracheirodon innesi), adquiridos deun acopiador minorista de peces ornamenta-les amaznicos de la ciudad de Iquitos,Loreto, Per. Este acopiador adquiere pe-ces capturados en los ros por pescadoresartesanales y abastece los comercios loca-les de la ciudad de Lima. El estudio micro-

    biolgico e histopatolgico se desarroll enla seccin de ictiopatologa del Laboratoriode Histologa, Embriologa y Patologa Vete-rinaria de la Facultad de Medicina Veterina-ria (FMV), Universidad Nacional Mayor deSan Marcos (UNMSM), Lima. La calidaddel agua de los acuarios donde fueron adqui-ridos los peces no se pudo determinar.

    Se seleccionaron 168 peces con un ta-mao promedio de 2.07 0.02 cm de longi-tud total. Los peces eran adultos pues lasgnadas estaban desarrolladas. La toma demuestras se vio dificultada por el tamao pe-queo de los peces y de sus rganos (bazo:0.2 mm de dimetro; rin: 0.3 mm de ancho

    y 1 cm de largo), de all que se opt por utili-

    zar la mitad de los peces para el estudio mi-crobiolgico y la otra mitad para el estudiohistopatolgico.

    Toma de Muestras

    Los peces fueron trasladados al labora-torio de la FMV-UNMSM en tres grupos (60,60 y 48 individuos) en bolsas de polietileno,conteniendo de agua y de oxgeno. Alarribo al laboratorio, los peces fueron colo-cados en tres acuarios por 72 h hasta el iniciodel estudio. Los acuarios fueron de igual ta-mao, con un volumen de 25 L de agua y conuna temperatura del agua de 26 C, apropia-

    da para este tipo de pez amaznico. Duranteeste tiempo, se tuvo una observacin conti-nua de los peces para detectar posibles alte-raciones de la conducta. As mismo, se con-trol la calidad de agua (temperatura, pH,retiro del sedimento).

    Los peces recibieron alimento a las 24 hdespus de su arribo, consistente enmicropellets (Kubitza, 2009; AuburnUniversity, 2014).

    Los peces fueron sacrificados a las 72horas de la llegada al laboratorio. Previamen-te, los peces se colocaron en un recipientecon agua conteniendo benzocana 1 g/20 L(Ross y Ross, 2008) por espacio de 10 a 15segundos, siguiendo las recomendaciones delComit de tica y Bienestar Animal de laFMV-UNMSM. Se realiz el examen exter-no para identificar lesiones o parsitos exter-nos y luego se desinfect la superficie del

    pez con alcohol al 70%. El sacrificio se hizo

    mediante la tcnica de corte medular con hojade bistur, entre el cerebro y la mdula espinal(Roberts y Shepherd, 1980; Rosenthal, 2007)y se procedi a la necropsia segn las tcni-cas de rutina (Reimschuessel et al., 1988).

    Estudio Microbiolgico

    Con ayuda de una lupa, se hizo una pun-cin en la superficie del rin y del bazo, y seutiliz el ansa estril de punta para el aisla-

    miento de bacterias. Las muestras fueron

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    S. Palacios et al.

    sembradas por triplicado en medio TripticasaSoya Agar (TSA), Agar Cytophaga yMiddlebrook 7H9. La incubacin se hizo a28 C por 24 h (TSA), 96 h (Cytophaga) y

    por 2 a 4 semanas (Middlebrook 7H9). Losaislados obtenidos fueron sembrados en agarLuria y conservados en refrigeracin (8 C)hasta completar el proceso de siembra de lasmuestras de los 84 peces.

    Los aislados fueron reactivados a tra-vs del cultivo en caldo de tripticasa de soya(TSB) a 28 C por 24 h y en caldo Cytophagaa 28 C por 96 h, y resembrados en agar TSAy Cytophaga a 28 C por 24 h y 96 h, respec-

    tivamente.

    La caracterizacin cultural de cada co-lonia se hizo mediante la coloracin Gram y

    pruebas bioqumicas (oxidasa, catalasa, Me-dio LIA, Agar Simmons Citrato, Caldo denitritos, Medio TSI, Medio Rojo de Metilo,Medio base de Hugh y Leifsony Medio SIM).Para la deteccin de indol se agreg elreactivo de Kovacs. Se hizo una lectura ini-cial a las 24 h y una final a las 48 h. La in-terpretacin de los resultados de cada colo-nia aislada se hizo de acuerdo a lo descrito

    por Buller (2004).

    Estudio Histopatolgico

    Debido al pequeo tamao de los pe-ces, se les coloc en casetes histolgicosseccionando la aleta caudal (cola) y se lesfij en formol tamponado al 10%. Se les pro-ces mediante el protocolo histolgico con-vencional para tejidos fijados, utilizando alco-

    holes en concentraciones ascendentes, xilolpara el aclaramiento de los tejidos e infiltra-cin en parafina hasta la obtencin de blo-ques de tejidos parafinados.

    Se hicieron cortes de 5 m. Las lmi-nas fueron coloreadas con hematoxilina yeosina (H&E) y observadas con un micros-copio ptico de luz con objetivos de 10, 40 y100X. Se realiz un corte histolgico sagitalde cada muestra parafinada que permitiera

    observar los rganos internos.

    Los peces fueron colocados en casetteshistolgicos y fijados en formol tamponado al10%. Las lminas fueron coloreadas conhematoxilina y eosina (H&E) y observadas con

    un microscopio ptico de luz con objetivos de10, 40 y 100X. Se realizaron ensayos previos

    para determinar el corte histolgico sagitaladecuado que permitiera observar los rga-nos internos debido a su reducido tamao.

    Anlisis de Datos

    Las lesiones histopatolgicas fueron cla-sificadas para cada rgano en trastornosinflamatorios, circulatorios, del crecimiento,

    degenerativos y parasitarios (Reimschuesselet al., 1992). Las lesiones fueron clasifica-das de acuerdo al grado de afeccin por suextensin, segn se indica en el Cuadro 1, y

    para el caso de hgado, la degeneracin gra-sa se categoriz segn lo indicado en el Cua-dro 2.

    Se hizo un anlisis de frecuencia, indi-cando el porcentaje de cada variable con res-

    pecto al total de poblacin analizada para cadaanlisis. Asimismo, los resultados microsc-

    picos de las lesiones se presentan segn elgrado de afeccin en una escala de 1 a 4.

    RESULTADOS

    A partir de las muestras de rin y bazose obtuvieron 39 aislados que crecieron enlos agares TSA y Cytophaga. No se obtuvie-ron aislados deMycobacteriumsp en el agarMiddlebrook 7H9.

    Se identificaron seis gneros bacte-rianos: Flavobacterium (8/39; 20.6%),Staphylococcus (7/39; 17.9%), Carnobac-terium(7/39; 17.9%), Pseudomonas(6/39;15.4%), Enterococcus (4/39; 10.3%) yBacillus(2/39; 5.1%), as como bacterias dela familiaEnterobacteriaceae (5/39; 12.8%).

    Dentro de las alteraciones histolgicasen las branquias, se observ la hiperplasia del

    epitelio de revestimiento de las lamelas y la

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    Estudio microbiolgico e histopatolgico en peces tetra nen

    Cuadro 1. Clasificacin de la lesiones histopatolgicas segn el grado de afeccin por suextensin

    Grado Extensin de la lesin

    I Escasa presencia de lesin (hasta 25% de toda la muestra)

    II Leve presencia de lesin (entre ms de 25% hasta 50% de toda la muestra)

    III Moderada presencia de lesin (entre ms de 50% hasta 75% de toda la muestra)

    IV Severa presencia de lesin (ms de 75% de toda la muestra)

    Fuente: Reimschuessel et al.(1992)

    Cuadro 2. Clasificacin de la degeneracin grasa en el hgado de acuerdo a la severidad yextensin de la lesin

    Grado Severidad Extensin

    I Escasa presencia de microvacuolasintracitoplasmticas

    Multifocal (hasta 25% de toda lamuestra)

    II Leve presencia de micro y/omacrovacuolas intracitoplasmticas

    Multifocal (entre ms de 25% hasta50% de toda la muestra)

    III Moderada presencia de macro ymicrovacuolas intracitoplasmticas

    Difuso (entre ms de 50% hasta 75%de toda la muestra)

    IV Severa presencia de macrovacuolasintracitoplasmticas.

    Difuso (Ms de 75% de toda lamuestra)

    Fuente: Reimschuessel et al. (1992), modificado por Rosenthal (2007)

    Cuadro 3. Frecuencia de alteraciones histolgicas de las branquias segn tipo de trastorno ysu grado de afeccin en peces tetra nen (Paracheirodon innesi), procedentes deIquitos, Per (n=84)

    Tipo de trastorno /Lesiones

    Grado de afeccinTotal deafectados

    No hayEscaso

    (I)Leve(II)

    Moderado(III)

    Severo(IV)

    n %

    Del crecimiento

    Hiperplasia delepitelio lamelar

    0 0 48 36 0 84 100

    Fusin lamelas 0 0 18 65 1 84 100

    Parasitarios

    Esporas de

    Mixosporidios sp

    0 0 39 45 0 84 100

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    Rev Inv Vet Per 2015; 26(3): 469-483474

    S. Palacios et al.

    Figura 1. Cortes histolgicos de las branquias de tetra nen (Paracheirodon innesi). A.Hiperplasia epitelial (flecha negra) y fusin de lamelas (flecha blanca). H&E. 400X.B. En el pice de las lamelas (flechas), se observan esporas de Mixosporidium sp.H&E. 1000X

    Figura 2. Cortes histolgicos del intestino de tetra nen (Paracheirodon innesi). A. Hiperplasiadel epitelio de las vellosidade (flechas). H&E. 1000X. B. Se observa presencia deesporas deMicrosporidium sp en las vellosidades intestinales (flechas). H&E. 1000X

    fusin de lamelas en todas las muestras (Cua-dro 3, Fig. 1A), siendo estas de manera levea moderada. Adems, se encontraron espo-ras de mixosporidios, predominantemente enlos pices de las lamelas, con esporas indivi-duales, cada una con cuatro cpsulas polares

    (Fig. 1B). No obstante la presencia de estaslesiones, los peces no presentaron alteracio-nes externas en las branquias ni signos clni-cos aparentes de hipoxia (boqueo); posible-

    mente debido a la lenidad de las lesiones.

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    475Rev Inv Vet Per 2015; 26(3): 469-483

    Estudio microbiolgico e histopatolgico en peces tetra nen

    Cuadro 4. Frecuencia de alteraciones histolgicas del intestino segn tipo de trastorno y sugrado de afeccin en tetra nen (Paracheirodon innesi), procedentes de Iquitos,Per (n=84)

    Tipo de trastorno /Lesiones

    Grado de afeccin Total deafectados

    No hayEscaso

    (I)Leve(II)

    Moderado(III)

    Severo(IV)

    n %

    Del crecimiento

    Hiperplasia delepitelio

    0 0 74 10 0 84 100

    Parasitarios

    Esporas deMicrosporidios

    0 3 47 34 0 84 100

    Cuadro 5. Frecuencia de alteraciones histolgicas del hgado segn tipo de trastorno y sugrado de afeccin en tetra nen (Paracheirodon innesi), procedentes de Iquitos,Per (n=84)

    Tipo de trastorno /Lesiones

    Grado de afeccinTotal deafectados

    No hayEscaso

    (I)Leve(II)

    Moderado(III)

    Severo(IV)

    n %

    Degenerativos

    DegeneracinHidrpica

    74 7 2 1 0 10 11.9

    Degeneracingrasa

    53 0 0 1 30 31 36.9

    Inflamatorios

    Granulomasparasitarios

    0 1 0 0 0 1 1.2

    Dentro de las alteraciones histolgicasen el intestino, se evidenciaron trastornos decrecimiento caracterizados por una leve amoderada hiperplasia del epitelio y leve amoderada presencia de esporas deMicrosporidium sp en las vellosidades in-testinales en todas las muestras (Cuadro 4,Fig. 2).

    Los trastornos degenerativos ms fre-cuentes en el hgado fueron la degeneracinhidrpica (11.9%), predominando la formaescasa, y una severa degeneracin grasa(36.9%), (Cuadro 5, Fig. 3). Adems, se ob-serv la presencia de un granuloma parasita-rio en el parnquima heptico de uno de los

    peces (Fig. 3).

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    Rev Inv Vet Per 2015; 26(3): 469-483476

    S. Palacios et al.

    Cuadro 6. Frecuencia de alteraciones histolgicas del rin segn tipo de trastorno y sugrado de afeccin en tetra nen (Paracheirodon innesi), procedente de Iquitos,Per (n=84)

    Tipo de trastorno /Lesiones

    Grado de afeccin Total deafectados

    No hayEscaso

    (I)Leve(II)

    Moderado(III)

    Severo(IV)

    n %

    Degenerativa

    Edemaperitubular

    0 0 71 13 0 84 100

    Degeneracinhidrpica

    0 0 78 6 0 84 100

    Cuadro 7. Frecuencia de alteraciones histolgicas del msculo esqueltico segn tipo detrastorno y su grado de afeccin en tetra nen (Paracheirodon innesi),

    procedentes de Iquitos, Per (n=84)

    Tipo de trastorno /Lesiones

    Grado de afeccin Total deafectados

    No hayEscaso

    (I)Leve(II)

    Moderado(III)

    Severo(IV)

    n %

    DegenerativaNecrosismuscular

    0 0 54 27 3 84 100

    Trastornos inflamatorios

    Granulomasparasitarios

    0 2 0 0 0 2 2.4

    Granulomasbacterianos

    0 1 0 0 0 1 1.2

    Los trastornos degenerativos ms fre-cuentes en rin fueron un leve a moderadoedema peritubular y degeneracin hidrpicatubular, los cuales se presentaron en todaslas muestras (Cuadro 6, Fig. 4).

    En el caso del msculo esqueltico seobservaron trastornos degenerativos, siendoestos de una leve a moderada necrosis mus-cular en todos los peces (Fig. 5A), as como

    alteraciones inflamatorias incluyendo granu-lomas de tipo parasitario (Figs. 5E, 6) y

    bacterianos (Cuadro 7). Adems, se encon-tr esporas de Microsporidium sp, en ungrado de leve a moderado en todos los peces(Fig. 5A), as como un quiste de Mixos-poridium sp con estadios esporognicosinmaduros (Fig. 5B) en un pez, esporas dePleistophorasp en un pez (Fig. 5C), y espo-ras deHeterosporissp en otro pez (Fig. 5D).

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    477Rev Inv Vet Per 2015; 26(3): 469-483

    Estudio microbiolgico e histopatolgico en peces tetra nen

    Figura 3. Corte histolgico de hgado de tetra nen (Paracheirodon innesi). A. Se observanlos hepatocitos hinchados con uni y multivacuolas intracitoplasmticas desplazando alncleo a la periferie (flechas). Degeneracin grasa Grado 4. H&E. 400X. B.Granuloma parasitario (flecha blanca). Se observa externamente fibroblastos commelanomacrfagos (flecha negra corta) que rodean al parsito que se encuentrainternamente (flecha roja corta). H&E. 1000X

    Figura 4. Corte histolgico de rin de tetra nen (Paracheirodon innesi). A. Edema peritubular(flecha a) y degeneracin hidrpica (flecha b). H&E. 1000X. B. Edema peritubular(flecha). H&E. 1000X

    Asimismo, se observaron mltiplesgranulomas de tamao diverso, cercanos alhgado, intestino y gnadas (Fig. 7), los cua-les son caractersticos en algunos procesos

    infecciosos de tipo bacteriano. La leve amoderada presencia de formas parasitariasen el msculo esqueltico de algunos pecesno les caus signos clnicos aparentes.

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    Rev Inv Vet Per 2015; 26(3): 469-483478

    S. Palacios et al.

    Figura 5. Corte histolgico de msculo esqueltico de tetra nen (Paracheirodon innesi). A.Necrosis (flecha a) y presencia de esporas deMicrosporidium sp (flecha b). H&E.400X. B. Quiste deMixosporidiumsp. H&E. 1000X. C. Esporas de Pleistophorasp(flecha). H&E. 1000X. D.Heterosporissp. H&E. 1000X. E. Granuloma parasitario.Externamente se observa fibroblastos y escasos melanomacrfagos (flecha) rodean-

    do a uma cercaria. H&E. 1000X

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    479Rev Inv Vet Per 2015; 26(3): 469-483

    Estudio microbiolgico e histopatolgico en peces tetra nen

    Figura 6. Granuloma parasitario. A. Granuloma sealado con la fecha. 1000X. B. Obsrvese ladistribucin de fibroblastos que han reemplazado a los macrfagos. 400X. C. La figu-ra previa a mayor aumento. 1000X. H&E

    DISCUSIN

    Estudios relacionados a las alteracioneshistopatolgicas y al estudio microbiolgicoen peces ornamentales amaznicos comotetra nen, no han sido descritos hasta elmomento en el pas. En el presente estudio,las lesiones halladas en las branquias fueronuna leve a moderada hiperplasia del epiteliodel revestimiento lamelar, as como de fusinlamelar. Noga (2000) afirma que este tipo delesiones son respuestas comunes ante el dao

    branquial; asimismo, indica que las lesionesen branquias tienen un alto grado deinespecificidad, y pueden ser originadas por

    bacterias, parsitos o una pobre calidad delagua.

    Las lesiones en branquias en el presen-te estudio podran ser explicadas por las pre-sencia deMixosporidiumsp y a la mala ca-lidad del agua, debido a que los peces provie-nen de la captura en ros y las fuentes deagua del Amazonas, que contienen general-

    mente altas cargas de materia orgnica y

    desechos txicos (Verjn, 2002). No obstan-te, los peces muestreados no presentaron al-

    teraciones externas en las branquias ni sig-nos clnicos aparentes de hipoxia, dada la le-nidad de las lesiones.

    Las lesiones de tipo leve a moderadade hiperplasia del epitelio intestinal pudieronser debidas a un periodo de ayuno prolonga-do o por situaciones de estrs por la capturay traslado, lo cual puede generar cambios enla permeabilidad intestinal (Farhadi et al.,2003; Lambert, 2003). As mismo, lahiperplasia de los enterocitos y clulasmucosas pueden ser consecuencia de la pre-sencia de parsitos en la mucosa (Jubb etal., 2007). En este estudio, los peces pasaron

    por un ayuno de casi 72 horas desde su tras-lado desde Iquitos hasta el inicio de alimenta-cin en el laboratorio en Lima, lo cual favo-recera a la presentacin de este cambioadaptativo; sin embargo, la causa ms pro-

    bable est relacionada a la presencia deMicrosporidium sp, enquistados en losenterocitos, que indujo, adems, el acorta-

    miento y prdida de las vellosidades.

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    Rev Inv Vet Per 2015; 26(3): 469-483480

    S. Palacios et al.

    Figura 7. Granulomas bacterianos (flechas azules). H&E. 1000X. A. Fase inicial con forma-cin nodular, constituida por macrfagos con citoplasma espumoso, un ligero centronecrtico y una leve presencia de fibroblastos alrededor (flecha). H&E. 1000X. B.Se observa un centro necrtico grande intensamente acidfilo, rodeados por variascapas laminares de fibroblastos (flecha). H&E. 1000X

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    Estudio microbiolgico e histopatolgico en peces tetra nen

    La degeneracin hidrpica encontradaen el rin, segn Hibiya et al.(1982), ante-cede a la presentacin de la degeneracinhialina, la cual, en exceso, podra conllevar a

    la necrosis del epitelio. Por otro lado, Ferguson(2006) menciona que la necrosis inducida porel hexaclorobutadieno (HCBD) en goldfish(Carassius auratus auratus), provoca de-generacin hidrpica haciendo que se veaclaramente la hinchazn celular en lastinciones con H&E. No obstante, las lesio-nes renales encontradas en el presente estu-dio, podran ser explicadas por causas rela-cionadas a una mala calidad del agua.

    En el hgado solo se encontr una esca-sa degeneracin hidrpica en el 11.9% de lospeces y una severa degeneracin grasa en el36.9% de los mismos, sin que hubiera mani-festacin de signos clnicos; mientras queLpez et al. (2001) reportaron 82% de cam-

    bios degenerativos en el hgado desalmondeos, donde la degeneracin grasa yvacuolar fueron las ms frecuentes. Tacon(1992) y Ferguson (2006) describen como unade las principales causas de degeneracinhidrpica y grasa, los altos niveles de cidosgrasos poliinsaturados en las dietas, lo quelleva a cambios oxidativos en los lpidos(rancidez) si se almacenan en altas tempera-turas y expuestas al oxgeno atmosfrico, oen ausencia de un adecuado antioxidantecomo la vitamina E.

    Los cambios degenerativos en el hga-do tambin pueden deberse a un exceso delpidos y nutrientes energticos en la dieta(Kalogeropoulos et al., 1992; Reyna, 1993;

    Wolf y Wolfe, 2005). Vigliano et al. (2002),por su lado, los relacionan con ayunos pro-longados. Asimismo, la deficiencia de colina

    puede ocasionar degeneracin grasa ya quees un factor lipotrpico, indispensable en eltransporte de grasas, siendo necesaria en ladieta de los peces (Cowey y Roberts, 1981).Por otro lado, Wolf y Wolfe (2005) sostienenque debido a que una diversidad de pecestiene la capacidad de almacenar grandes can-tidades de lpidos, se hace difcil distinguir las

    clases de vacuolas lipdicas que son conside-

    radas excesivas, por lo que no hay un ade-cuado criterio para el diagnstico de lipidosisheptica.

    La presencia de esporas y quistes pa-rasitarios no ocasionaron una reaccininflamatoria en la periferia ni daos en el te-

    jido. Ferguson (2006) sostiene que la mayo-ra de los microsporidios con estadiosinmaduros parecen producir una leve o nularespuesta inflamatoria y, generalmente, sonencontrados como hallazgos incidentales enel trabajo de rutina diagnstica. La presenciade microsporidios podra deberse a las condi-ciones del medio ambiente, manejo, grado de

    infestacin o inmunidad del hospedero(Gonzlez y Heredia, 1998).

    La necrosis muscular en el msculo es-queltico en todos los peces que no presen-taban quistes parasitarios, se manifestaron enforma leve y moderada. Este tipo de lesio-nes, aunque en forma ms severa han sidodescritas en el bagre de canal (Ictaluruspunctatus) alimentados con dietas de nive-les bajos de -tocoferol (Lovell et al., 1984)y con altos niveles de cidos grasos

    poliinsaturados (Murai y Andrews, 1974); sinembargo, en el presente estudio se puededescartar esto ltimo debido a la ausencia denecrosis del epitelio en el tubo digestivo.

    CONCLUSIONES

    La mayor frecuencia de lesiones en teji-dos de peces tetra nen (Paracheirodoninnesi) fueron por causas infecciosas de

    tipo parasitario, especialmente porMicrosporidium.

    Estos peces puede ser afectados por msde un gnero deMicrosporidium, iden-tificndose por su morfologa aPleistophorasp yHeterosporissp, por

    primera vez en el pas. El msculo fue el tejido donde ms agen-

    tes infecciosos fueron identificados. Se aislaron bacterias potencialmente

    patgenas tales como Flavobacterium

    sp, Staphylococcus sp, Carnobac-

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    S. Palacios et al.

    terium sp, Pseudomonas sp, Entero-coccus sp, Bacillus sp y de la familiaEnterobacteriaceae.

    A pesar de no haberse encontrado lesio-

    nes histopatolgicas caractersticos de losagentes bacterianos aislados, se pudoobservar mltiples granulomas, caracte-rsticos en algunos procesos infecciososde tipo bacteriano.

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