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  • 7/25/2019 SONDASGENICAS MODIFICADO

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    UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICL

    pg. 1FACULTAD DE MEDICINA

    015 EMBRIOLOGA

    INTEGRANTE:

    CLAUDIA INGRID WILLISSAMAME

    SONDAS GENICASCOMERCIALES

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    UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICL

    CONTENIDO

    INTRODUCCIN...................................................................................................

    OBJETIVOS:.........................................................................................................!MARCO TEORICO:................................................................................................5

    SONDAS GNICAS............................................................................................5

    1.1.- Definicin..........................................................................................5

    1.2.- Tipos de sondas................................................................................5

    1.3.- Clases de marcae para !is"ali#acin de las mol$c"las dianas............."

    1.%.- &reparacin de la sonda....................................................................#

    1.'.- (en)aas de las sondas *en$)icas.........................................................10

    CONCLUSIONES................................................................................................20

    BIBLIOGRAFA....................................................................................................21

    pg. 2FACULTAD DE MEDICINA

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    INT+OD,CCIN

    Una sonda es un reac!"o #!o$%&!co cons!u!do 'or un (ra&)eno de ADN *ue 'osee una

    sec"encia de ases complemen)ariaa $a de$ &eno)a de un )!croor&an!s)o+

    Las sondas &,n!cas son )o$,cu$as de ADN se-a$adas con un )arcador *ue !enen e$

    'oder de reconocer &enes en $os cro)oso)as . esa#$ecer s! d!c/os &enes son nor)a$es

    o 'oradores de a$erac!ones+

    Enre $as 'r!nc!'a$es "ena0as de $as sondas &en,!cas /a. *ue desacar $a senc!$$e1 de su

    )an!'u$ac!%n2 *ue 'er)!e su ada'ac!%n a cua$*u!er $a#oraor!o+ E$ 'r!nc!'a$

    !ncon"en!ene es su cose+ Es una ecno$o&3a )u. u!$!1ada en $a acua$!dad en

    $a#oraor!os n!"e$ II

    Una de sus a'$!cac!ones )4s e5end!da cons!se en e$ esa#$ec!)!eno de d!a&n%s!cos

    'renaa$es2 *ue son rea$!1ados so#re )uesras de c,$u$as (ea$es+ E$ an4$!s!s &en,!co de$

    (eo 'er)!e esa#$ecer s! e$ n!-o *ue "a a nacer es 'orador o no de un &en de(ecuoso o

    de$e,reo+

    6or $o ano2 desde e$ 'uno de "!sa ,!co2 e$ d!a&n%s!co 'renaa$ es ace'a#$e . "4$!do s!res'ea $a "!da e !ne&r!dad de$ e)#r!%n . de$ (eo /u)ano2 . s!e)'re *ue de su esud!o

    "a.an a der!"arse #ene(!c!os 'ara su curac!%n o conser"ac!%n+ E$ d!a&n%s!co 'renaa$

    de#e ener co)o (!n $a curac!%n . no una senenc!a de )uere *ue2 !rre)ed!a#$e)ene2

    condu1ca a$ a#oro de$ (eo+ E$ 'orador de una )a$(or)ac!%n con&,n!a no '!erde 'or eso

    $as 'rerro&a!"as 'ro'!as de un ser /u)ano2 a *u!en de#e r!#u4rse$e e$ res'eo a *ue

    !ene derec/o odo 'ac!ene+

    E$ d!a&n%s!co )ed!ane e$ e)'$eo de sondas &,n!cas 'uede u!$!1arse a)#!,n des'u,s

    de$ nac!)!eno2 'or e0e)'$o2 'ara 'rec!sar $a naura$e1a . a)'$!ud de una a$erac!%n

    &en,!ca7 o 'ara e$ caso de 'are0as 'rocedenes de (a)!$!as 8de r!es&o8 en 'ar!cu$ar 'ara

    $as )u0eres *ue deseen sa#er s! son 8'oradoras 8 de un deer)!nado 'recursor de

    en(er)edad 9Gros ;;

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    O/0ETI(OS

    Deer)!nar *ue es una sonda . cu4nos . cu4$es son $os !'os *ue e5!sen+

    Iden!(!car e$ d!se-o de una sonda . $a (or)a en $a *ue se 're'ara+

    Deer)!nar e$ a)a-o de $a sonda . $a re$ac!%n *ue !ene con su esa#!$!dad+

    pg. !FACULTAD DE MEDICINA

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    A+CO TEO+ICO

    1. SONDAS GNICAS

    1.1.Definicin

    B!o*u3)!ca)ene una sonda es una )o$,cu$a de ADN o ARN /o)o$o&a a una

    secuenc!a de ARN o ADN d!ana2 con $a *ue /3#r!da de (or)a esa#$e . es'ec!(!ca 9'or

    asoc!ac!%n de #ases co)'$e)enar!as=+

    La sonda es una co'!a (!e$ de un &en o de un (ra&)eno de ARN o ADN . se un!r4

    e5c$us!"a)ene esa secuenc!a de $a *ue es co'!a+ Eso es $o *ue se $$a)a es'ec!(!c!dad

    de $a sonda+

    Una "e1 *ue $a sonda se une a $a secuenc!a d!ana se deeca . cuan!(!ca+ La

    deecc!%n so$o es 'os!#$e s! $a sonda se /a )arcado con un &ru'o deeca#$e+

    De'end!endo de$ n>)ero de esos &ru'os !ncor'orados . de $a se-a$ *ue e)!an $a sonda

    'uede ener d!(erene sens!#!$!dad+

    1.2.Tipos de sondas

    D!s!nos !'os de sondas de 4c!dos nuc$e!cos 'ueden ser u!$!1adas 'ara $a

    /!#r!dac!%n !n s!u:

    + Sondas de DNA do#$e cadena+ 6ueden ser 're'aradas u!$!1ando ,cn!cas co)o?n!c@ rans$a!on2 rando) 'r!)!n& o 6CR2 en $as cua$es e$ nuc$e%!do )arcado es

    !ncor'orado+ 6CR . rando) 'r!)!n& 'ro'orc!onan una #uena ac!"!dad

    es'ec3(!ca+ Esas sondas 'ueden ser desnaura$!1adas anes de usar+ Cuando se

    usan 'ara deecar una cadena s!)'$e co)o )RNA2 esas son )enos sens!#$es

    de#!do a *ue $a concenrac!%n de $a sonda )arcada es reduc!da+

    pg. 5FACULTAD DE MEDICINA

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    + Sondas de DNA de cadena s!)'$e 9$ar&as=+ 6ueden ser 're'aradas u!$!1ando

    ?'r!)er e5ens!on en e)'$ados de cadena s!)'$e o 'or 6CR con un nuc$e%!do

    )arcado+ se >$!)o es e$ )4s usado 'or*ue es )4s (4c!$ de $$e"ar a ca#o . $as

    )arcas 'ueden s!ne!1arse con 'oca can!dad de )aer!a$+

    E$ 6CR 'er)!e una &ran ($e5!#!$!dad en $a e$ecc!%n de $as secuenc!as )arcadas'or e$ uso de 'r!)ers+ Esas )arcas /an s!do a)'$!a)ene usadas+

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    E$ )arca0e 'uede ser en d!(erenes 'os!c!ones+ E$ 6

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    *ue una sonda ade)4s de /o)%$o&a2 de#e ser $o su(!c!ene)ene a)'$!a 'ara

    $$e"ar a ca#o $a /!#r!dac!%n++ 6ara sondas 'e*ue-as 9o$!&onuc$e%!dos de n

    &en d!s!no a$ de !ner,s en&a una secuenc!a !d,n!ca+A$erna!"a)ene se 'uede /acer un screen!n& . ,se 'uede ser rea$!1ado 'or

    #>s*ueda de secuenc!as en #ases de daos+

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    $a sonda 'ero ase&urar *ue $a sonda &enerada es $o su(!c!ene)ene 'e*ue-a 'ara 'oder

    'enerar+ Muc/os 'roced!)!enos es4n #asados en *ue $a sonda de HH #ases 'or*ue

    e)!en se-a$es %'!)as 'ara $a /!#r!dac!%n en secc!ones de c!eros e0!dos+ Se /a

    enconrado *ue $as sondas de RNA *ue )!den 'or arr!#a de @# 'ro"een se-a$es

    %'!)as 'ara $a /!#r!dac!%n !n s!u2 en e)#r!ones (!0ados en 'ara (or)a$d/e3do+ La'enerac!%n es4 !n($uenc!ada 'or e$ a)a-o de $a sonda aun*ue a)#!,n de'ende de $a

    naura$e1a de$ e0!do2 de $a (or)a de (!0ac!%n . s! e$ 're raa)!eno /a s!do rea$!1ado 'ara

    re)o"er $as 'roe3nas ce$u$ares+

    E$ a)a-o de $a sonda 'uede ser conro$ado durane $a reacc!%n de s3nes!s:

    a+ Sondas de DNA2 s!ne!1adas 'or ?n!c@ rans$a!on2 e$ $ar&o es4 deer)!nado 'or

    $a can!dad de DNasa en $a reacc!%n+#+ Sondas )arcadas 'or ?rando) 'r!)!n& e$ a)a-o es4 deer)!nado 'or $a

    concenrac!%n de$ 'r!)er+c+ 6r!)ers *ue 'uedan ser e$e&!dos 'ara dee)!nar e$ a)a-o de $a sonda s!ne!1ada

    'or 6CR+d+ Sondas $ar&as de DNA 'ueden ser coradas 'arc!a$)ene 'or !ncu#ac!%n a a$as

    e)'erauras+e+ Sondas $ar&as de RNA son 'arc!a$)ene coradas 'or /!dr%$!s!s a$ca$!na $!)!ada+ S!

    e$ a)a-o de $a sonda es corada 'or /!dr%$!s!s /a. *ue re"!sar e$ a)a-o de $a

    sonda2 'or*ue s! ,sa es )u. 'e*ue-a2 ,sa no /!#r!dar4 #a0o cond!c!ones

    se$ec!"as sandard2 dando una #a0a se-a$+

    +++ Esa#!$!dad de $a sonda . $a !neracc!%n con su #$anco:

    En e5'er!)enos de /!#r!dac!%n $os 'uenes enra $a sonda . $a secuenc!a #$anco

    0ue&a un ro$ !)'orane+ E$ $ar&o decre)ena $a esa#!$!dad en e$ s!&u!ene orden RNA

    RNA2 DNARNA2 DNADNA+ La esa#!$!dad de $os /3#r!dos es4 !n($uenc!ada 'or $as

    cond!c!ones de /!#r!dac!%n2 'or $a concenrac!%n de (or)a)!da2 sa$es . $a e)'eraura+

    ++H+ Sondas de do#$e cadena conra cadena senc!$$a:

    Un n>)ero de reacc!ones co)'eenes ocurren durane $a /!#r!dac!%n !n s!u con

    sondas de do#$e cadena+ Las sondas de cadena senc!$$a 'ro"een $as s!&u!enes "ena0as:

    a+ La sonda no se a&oa 'or*ue no se auo$!&a+#+ No son cadenas $ar&as 'or*ue de#en 'enerar en $a secc!%n de e0!do o en $os

    cro)oso)as+

    pg. %FACULTAD DE MEDICINA

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    1.'.(en)aas de las sondas *en$)icas

    Las "ena0as de esas ,cn!cas son *ue nos 'er)!en !n"es!&ar d!reca)ene a$)!croor&an!s)o2 s!n neces!dad de *ue se encuenre "!a#$e2 n! de *ue es, en cu$!"o 'uro+

    o. en d3a se u!$!1a 'ara !den!(!car )!croor&an!s)os no cu$!"a#$es2 de $eno crec!)!eno

    o d!(3c!$ . de !den!(!cac!%n co)'$e0a+ Es 'os!#$e u!$!1ar$o en cua$*u!er !e)'o de )uesra

    #!o$%&!ca . 'er)!e $a !den!(!cac!%n de &enes no e5'resados (eno3'!ca)ene+ Son

    ,cn!cas )u. "4$!das2 'ues e$ ADN es )u. esa#$e+

    Los !ncon"en!enes )4s !)'oranes son *ue se neces!an un n>)ero )3n!)o de

    co'!as de$ (ra&)eno de 4c!do nuc$e!co 'ro#$e)a *ue se *u!ere deecar2 'or eso en $as

    )uesras con escasos n>)ero de un!dades !n(ecc!osas se o#!ene una #a0a sens!#!$!dad+

    En ocas!ones ese 'ro#$e)a se resue$"e deecando ARN en "e1 de ADN2 'ues e$ 'r!)ero

    sue$e esar en )a.or can!dad+

    Ora (or)a de !nenar reso$"er ese 'ro#$e)a cons!se en au)enar en "!ro e$

    n>)ero de co'!as )ed!ane ,cn!cas de a)'$!(!cac!%n+

    Acua$)ene d!s'one)os de sondas 9Gen6ro#eP2 S.n&eneP= 'ara !den!(!cac!%n

    de M+ u#ercu$os!s2 M+ a"!u)2 M+ !nrace$$u$are2 M+ @ansas!! . M+ &ordonae+ Enre $as

    'r!nc!'a$es "ena0as de $as sondas &en,!cas /a. *ue desacar $a senc!$$e1 de su

    )an!'u$ac!%n2 *ue 'er)!e su ada'ac!%n a cua$*u!er $a#oraor!o+ E$ 'r!nc!'a$!ncon"en!ene es su cose+ Es una ecno$o&3a )u. u!$!1ada en $a acua$!dad en

    $a#oraor!os n!"e$ II+

    pg. 10FACULTAD DE MEDICINA

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    2. TECNOOG4AS GENTICAS

    Los c!en3(!cos /an desarro$$ado una ser!e de ,cn!cas #!o*u3)!cas . &en,!cas )ed!ane

    $as cua$es e$ ADN 'uede ser se'arado . rans(er!do de una c,$u$a a ora+ A$&unos de esos

    ),odos de $a#oraor!o a.udan a $os !n"es!&adores a esud!ar $as 'ro'!edades de $os&enes en $a naura$e1a 9'er)!en2 'or e0e)'$o2 co)'arar $os ADN de d!(erenes an!)a$es

    'ara esa#$ecer d!sanc!as e"o$u!"as=+

    Oras ,cn!cas de ADN cons!u.en /erra)!enas #4s!cas en e$ ca)'o de $a !n&en!er3a

    &en,!ca 9a$erac!%n de &enes de un or&an!s)o=+

    6ara $oca$!1ar un &en es'ec3(!co en un cro)oso)a deer)!nado se u!$!1a una

    sonda de ADN2 *ue es un &en c$onado o co'!ado a$ *ue se a&re&a un 4o)orad!ac!"o+ La sonda )arcada se$ecc!ona un se&)eno de ADN co)'$e)enar!o .

    se une a d!c/o se&)eno7 $a sonda en cues!%n se 'uede deecar enonces

    )ed!ane so(!s!cadas ,cn!cas de (oo&ra(3a+ Con ese 'roced!)!eno se

    d!a&nos!ca un #uen n>)ero de en(er)edades anes de$ nac!)!eno o des'u,s de$

    )!s)o+

    2.1.So")5ern lo)

    E$ Sou/ern #$o2 deno)!nado as3 en /onor de Ed Sou/ern2 *ue desarro$$% $a ,cn!ca2

    cons!se en $a d!&es!%n de$ ADN )ed!ane una en1!)a de resr!cc!%n . *ue a con!nuac!%n

    se so)ee a e$ecro(orores!s en un &e$ de a&arosa+ Con e$$o se cons!&ue se'arar $os

    (ra&)enos de resr!cc!%n de$ ADN 'or a)a-os2 s!endo $os (ra&)enos )4s 'e*ue-os $os

    *ue corren )4s r4'!do en e$ &e$+ Los (ra&)enos de ADN de$ &e$ se desnaura$!1an a

    con!nuac!%n con 4$ca$!s2 con"!r!,ndose en (ra&)enos de /e#ra s!)'$e+ Una co'!a

    pg. 11FACULTAD DE MEDICINA

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    ?'er)anene)ene de esos (ra&)enos se rans(!eren a un (!$ro de n!roce$u$osa *ue se

    une a$ ADN )onocaenar!o )arcado rad!ac!"a)ene con

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    )a.or de $os "!rus *ue causan !n(ecc!ones !)'oranes en $a co)un!dad2 /an /ec/o

    'os!#$e *ue en e$ )o)eno se d!s'on&a de (ra&)enos de ADN de$ )aer!a$ &en%)!co

    es'ec3(!co . a$a)ene conser"ado de un deer)!nado "!rus *ue se u!$!1a co)o sonda+

    6ara esud!os de ARN se re*u!eren e0!dos (rescos con&e$ados r4'!da)ene conn!r%&eno $3*u!do . 'ara esud!os de ADN se 'ueden e)'$ear ano e0!dos (!0ados

    co)o con&e$ados+

    Las sondas 're'aradas a 'ar!r de$ ADN o ARN es'ec3(!co se 'ueden 'ur!(!car 'or

    c$onac!%n o co'!a en un '$4s)!do de$ ADN o de$ ADNc 9co)'$e)enar!o= o#en!do

    de ranscr!'c!ones de ARN+ U!$!1ando e$ '$4s)!do co)o "ecor . #acer!as co)o

    /u,s'edes2 es 'os!#$e 'roduc!r sondas &en,!cas en &randes can!dades+

    Los (ra&)enos de ADN o ARN 9sondas= se so)een a un an4$!s!s de /!#r!d!1ac!%n

    9o a'area)!eno con e$ co)'$e)enar!o *ue se encuenra en e$ )aer!a$ *ue se "a

    a 'ro#ar=7 ,se se 'uede /acer .a sea

    con ADN o ARN !su$ar en so$uc!%n2 d!reca)ene en e0!dos o c,$u$as 'or

    /!#r!d!1ac!%n !n s!u2 o se 'uede e(ecuar so#re ADN o ARN rans(er!dos en

    )e)#ranas de n!roce$u$osa a 'ar!r de una e$ecro(ores!s en &e$ de a&arosa+

    La sens!#!$!dad de $as sondas de'ende de $a can!dad de )aer!a$ &en,!co 'ara $a/!#r!d!1ac!%n . su es'ec!(!c!dad de'ende de $a ca$!dad de $a sonda+

    Una de $as 'r!nc!'a$es $!)!ac!ones de esa ,cn!ca se "e cuando e5!se una #a0a can!dad

    de ADN o ARN . ,se no se descu#re+ Muc/as de esas 'rue#as !enen una sens!#!$!dad

    *ue $es 'er)!e descu#r!r H )o$,cu$as o aun

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    3. DEOST+ACI7N DE AGENTE

    6ueden ser:

    A$a)ene sens!!"os+

    Ad!c!ona$)ene u!$!1ados 'ara una de)osrac!%n de(!n!!"a de *ue un or&an!s)o

    'erenece a una es'ec!e 'ar!cu$ar

    Se 'ueden dar a ra",s de:

    An3&enos: son susanc!as )o$ecu$ares co)'$e0as . $os an!cuer'os es'ec3(!cos

    For)ados 'ara e$$os2 reconocen (!&uras 'ar!cu$ares conoc!das co)o deer)!nadores de

    an3&enos o e'3o'os+

    E'3o'os: son cada uno de $os s!!os d!screos de una )acro)o$,cu$a *ue son

    reconoc!dos !nd!"!dua$)ene 'or un an!cuer'o es'ec3(!co o 'or un TCR es'ec3(!co+

    An!cuer'os: La R+C+ son )4s co)unes 'ara $os an!cuer'os 'o$!c$ona$es *ue 'ara $os

    an!cuer'os )onoc$ona$es+

    3.1.&r"eas de de)eccin "sando an)ic"erpos

    In)uno($uorescenc!a . E$!sa2 se usa 'ara $a deecc!%n de an3&enos "!ra$es en $a

    're'arac!%n de d!a&n%s!cos+

    E$ an!cuer'o ($uorescene es usado 'ara deecar an3&enos en $os e0!dos+

    ELISA2 es usado 'ara deecar an3&enos en ($u!dos o e5racos crudos de e0!dos+

    Todos $os or&an!s)os "!"!enes 'oseen ADN e5ce'o $os "!rus * 'oseen ARN+

    S+G+ es un 'e*ue-o se&)eno de #ases de ADN2 e$ cua$ se co)#!nara con un

    (!$a)eno /o)o$o&o de ADN+

    La S+G+ 'uede ser a$a)ene sens!#$e . )u. es'ec!(!ca+

    E$ )!croor&an!s)o de ADN 'uede ser deecado en $as secc!ones de e0!do (!0adas

    pg. 1!FACULTAD DE MEDICINA

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    con un 'roceso $$a)ado /!#r!d!1ac!on !n s!u+

    3.2.Sondas de ADN 8 A+N

    6ara !den!(!car cada (ra&)eno no es necesar!o deer)!nar $a secuenc!a oa$ de

    sus #ases $os ),odos )as usados 'ara !den!(!car un ADN o un ARN

    Las sondas de ADN son )u. >!$es 'ara (!nes d!a&n%s!cos

    Fra&)eno de cadena s!)'$e de ADN o ARN de "ar!os c!enos o )!$es de

    nuc$e%!dos de $on&!ud2 *ue 'er)!e 'oner de )an!(!eso $a 'resenc!a de una

    secuenc!a co)'$e)enar!a en una )uesra #!o$%&!ca

    La !#r!dac!%n de$ ADN 'or una sonda de ADN se $$a)a ,cn!ca de Sou/ern B$o+

    Las sondas &,n!cas 'er)!en enconrar un deer)!nado ro1o de ADN de unas

    'ocas #ases 'ares en una cadena de 5 ; #ases 'ares+ . e$$o $o cons!&ue

    &rac!as a$ )arca0e con 6$!)o2

    $os ),odos *ue usan e$ 'o$!)or(!s)o de secuenc!as nuc$eo3d!cas coras

    re'e!das en ande) co)o son $os )!crosa,$!es

    Esa !den!(!cac!%n 'er)!e:

    pg. 15FACULTAD DE MEDICINA

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    Se$ecc!onar $os 'ro&en!ores en un 'ro&ra)a de )e0ora)!eno &en,!co

    Iden!(!car e$ &en 9o &ru'os de e$$os= *ue cod!(!can 'ara $a caracer3s!ca a

    se$ecc!onar2 'ero cu.o &eno!'o es d!(3c!$ de "!sua$!1ar a s!)'$e "!sa+

    Deer)!nar a *u, "ar!edad &en,!ca 'erenece un !nd!"!duo2 es!)ar su 'oo$

    &en,!co . deer)!nar su or!&en+

    %. 6I/+IDACI7N IN SIT, 9,O+ESCENTE :9IS6;

    FIS 9de$ !n&$es ($uorescen !n s!u /.#r!d!1a!on= es una /erra)!ena ecno$%&!ca

    re$a!"a)ene nue"a *ue co)#!na $a c!o&en,!ca con"enc!ona$ con $a &en,!ca )o$ecu$ar

    *ue se #asa en $a ca'ac!dad >n!ca de una /e#ra senc!$$a de ADN2 'or e0e)'$o2 una sonda

    'ara un!rse o /!#r!dar con su secuenc!a co)'$e)enar!a donde *u!era *ue ,sa es,

    $oca$!1ada en $a e5ens!%n )ea(as!ca aun*ue con )enos (recuenc!a *ue oros ),odosusados 'ara e$ an4$!s!s cro)os%)!co2 FIS 'uede a)#!,n usarse 'ara esud!ar

    cro)oso)as durane $a !ner(ase2 'er!odo de descanso enre $as d!"!s!ones ce$u$ares de

    a*u3 *ue ese 4rea de esud!o se deno)!ne !ner(ace c!o&en,!ca+En esa ,cn!ca $a sonda de ADN se con0u&a con nuc$e%!dos )od!(!cados2 $os cua$es2

    des'u,s de /!#r!dar con $a )uesra 'ro#$e)a2 'er)!en *ue $a re&!%n en $a cua$ /a

    ocurr!do $a /!#r!dac!%n se 'ueda "!sua$!1ar con $u1 u$ra"!o$ea+ Esa ,cn!ca FIS !ene

    a/ora una a)'$!a d!(us!%n 'ara d!a&n%s!cos c$3n!cos2 .a *ue sus resu$ados se o#!enen

    r4'!da)ene+

    %.1.Diferen)es )ipos de sondas 9IS6

    %.1.1. Sondas cen)rom$ricas

    Cons!sen en secuenc!as re'e!!"as de ADN a n!"e$ cenro),r!co en un cro)oso)a

    es'ec3(!co+ Se u!$!1an en d!a&nos!co 'renaa$ 'ara una deecc!%n r4'!da de aneu'$o!d3as

    9r!so)!a

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    Cons!se en $a )e1c$a de sondas de d!(erenes 'ares de un cro)oso)a en 'ar!cu$ar+

    Cuando esa )e1c$a de sondas se usa en una /!#r!dac!%n2 e$ cro)oso)a enero ($orece2

    'or $o *ue dec!)os *ue esa ?'!nado+ 6!nar cro)oso)as es )u. >!$ 'ara caracer!1ar

    reordena)!enos co)'$e0os2 a$es co)o rans$ocac!ones su!$es . 'ara !den!(!car e$ or!&en

    de )aer!a$ ad!c!ona$ de un cro)oso)a2 co)o 'e*ue-os )arcadores de su'ernu)erar!oso an!$$os+

    %.1.%. &in)ar a la in!ersa

    En ese 'roced!)!eno una 'orc!%n de )aer!a$ cro)os%)!co no !den!(!cado2 'e*ue-os

    )arcadores su'ernu)erar!os o an!$$os2 se usa 'ara '!nar 'or /!#r!dac!%n una )ea(ase

    nor)a$+ E$ cro)oso)a no !den!(!cado se o#!ene 'or se'arac!%n de c,$u$as ac!"adas 'or

    ($uorescenc!a2 e$ cua$ es a)'$!(!cado u!$!1ando $a reacc!%n en cadena de $a 'o$!)erasa

    96CR= 'ara 're'arar d!c/a '!nura+ E$ or!&en de$ se&)eno no !den!(!cado se o#!ene

    )ed!ane $a !den!(!cac!%n de$ cro)oso)a so#re e$ cua$ se /!#r!da+

    Deecc!%n a n!"e$ de reacc!ones !n)uno$%&!cas

    a. nu)erosos )arcadores en $os an3&enos de $os er!roc!os

    pg. 1#FACULTAD DE MEDICINA

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    '. SONDEOS GNICOS EN

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    CONC,SIONES

    Las sondas son )o$,cu$as de ADN o ARN /o)o$o&as a una secuenc!a de ARN

    o ADN d!ana .son de cuaro !'os+

    6ara $a esa#$ecer e$ d!se-o . $a 're'arac!%n de una sonda se de#e ener en cuena

    en a)a-o . $a /!#r!dac!%n+

    E$ $ar&o de $a sonda decre)ena su esa#!$!dad+

    pg. 1%FACULTAD DE MEDICINA

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    /I/IOG+A9>A

    L.nn B+ Jorde2 Jo/n C+ Care.2 M!c/ae$ J+ Ba)s/ad+ ?Gen,!ca ),d!ca+ Cuara

    Ed!c!%n+Barce$ona:E$se"!er7 +

    B$anca Ra)os Cerr!$$o+ ?!#r!dac!%n !n s!uUn!"ers!dad Nac!ona$ Au%no)a de

    M,5!co+ Acceso de A#r!$ de$ + D!s'on!#$e en:

    /':KK+!#+una)+)5Kco)'uoK'd(sK)eK/!#r!dac!on!ns!u+'d(

    6edro Fern4nde1 Ru!1+ ?!#r!dac!%n de $os 4c!dos nuc$e!cos+ os'!a$ C$3n!coK

    IDIBA6SKUn!"ers!dad de Barce$ona+ Acceso de A#r!$ de$ + D!s'on!#$e en:

    /':KK+sea'+esKcKdocu)en$!#rar.K&e(!$euu!dWddQae#Q;e

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