1

Flow Cytometry

By Elham Hasheminasab

2

فلوسایتومتری تعریف

فلوسایتومتری مطالعه علم

و ها سلولدر ذرات

از جریانیمایع سیال

.است

3

تاریخچه1953 :اولین رونمایی

فلوسایتومتری دستگاه1968 :آن توسعه

WolfgangتوسطGohde

1969 :تجاری استفادهآلمانی شرکت توسط

1988 :پالس از نام تغییربه سایتوفتومتری

فلوسایتومتری

4

فلوسایتومتری درباره نکاتی با مايع در معلق صورت به آزمايش مورد ذرات

حدود منفذي 50تا 5سرعتي ميان از ثانيه در مترعبور ليزر نور از باريك پرتوي مقابل از و باريك

مي‌كنند. حدود آزمايش مورد نمونه از نياز مورد حجم

100 . مي‌باشد ميكروليتر :تعداد ميان 1دقت در سرطاني 10000سلول

مغز 100000تا نمونه در موجود عادي سلول. كند شناسايي را استخوان

5

6

فلوسایتومتری دستگاه اجزای

( سلولی (Fllow Cellجریان گیری اندازه سیستم نوری سیستم دیجیتال به آنالوگ سیستم کننده تبدیل یا خطی کننده تقویت سیستم

لوگاریتمی

7

8

9

10

فلوسایتومتری اساسروشتوسط( 1 نور سازي پراكنده

سلول‌ها

11

فلورسانس( 2 نشر برها ازسلول

12

Schematic of a fluorescence microscope.

13

گیری اندازه های پارامتر

لنفوسیتی 1( لوسمی تشخیص تاییدمزمن

سلول 2( حجم و مورفولوژیک پیچیدگیسلول رنگدانه و

کلی 3( اسالید) DNA,RNAمحتوای18)

کپی 4( DNAتعدادپروتئین 5( بیان و بندی بخش

14

آنزیمی 7( فعالیت)8( اسالید کرومزوم آنالیز و سازی (16مرتب)9pHدر( 10 دارویی چند مقاومت های مشخصه بررسی

سرطانی سلول11 ( تخریب( آن نشانه آپوپتوز

DNA نفوذپذیری تغییر و وغشامیتوکندریغشا(

سلول،درون( 12 سطح های ژن آنتی گیری اندازهسلول هسته درون و سلول

13 ( سطح( ژن آنتی ویروسی ترکیبات گیری اندازهDNA)

14) - ( میزبان( پاتوژن سلول چسبندگی گیری اندازه

15

Fluorescence image of brain cells

16

Chromosomal spread

17

مختلف • مـحتویات مـقـدار تـعـیـیـنچربی، پروتئین، مثل DNAسلولی ،

RNA… و• •Fluorescenc

e microscopy of DNA Expression in the Human Wild-Type.

18

مرحلة • در كه سلول‌هايي شناساييهستند میتوز یا و میتوز پیش

19

An inverted fluorescence microscope (AMG EVOS fl) with an LCD display instead of oculars for fluorescence microscopy

های کاربردفلوسایتومتری

20

: دریا شناسی زیست در کاربردپالنکتون اتوفلورسنت خواص

به فلوسایتومتری با را فتوسنتزاجتماعی ساختار توصیف منظور. کرد استخراج میتوان فراوانی و

21

: فلوسایتومتری پروتئین مهندسی درو باکتریایی نمایشگر ترکیب با

گونه شناسایی برای مخمر نمایشگرخواصمعین با پروتئینی های

. میشود استفاده: بالینی های کاربرد زیرمجموعه شمارش تشخیصو

لنفوسیت انسان Tهای خون سفید سلول افتراقی شمارش

22

پالکت بادی اتوآنتی مطالعات سلول نشانگرسطح آنالیز آنیوپلوئیدی تشخیص لوسمی،لنفوم،بیماری تشخیص

HIVخودایمنی، پیوند موفقیت ارزیابی) ( خون سرطان بویژه تشخیصسرطان تولد از پیش تشخیص

23

Green: RNA-binding protein ,

Blue: Axon endings of MJ94 positive neurons Axons :Red

24

فلوسایتومتری چگونگی ( تهیه سلول سازی آماده و تخلیص

سوسپانسیون( اختصاصی آمیزی رنگ و شدن دار نشان

باد بودن یآنتی

ژن آنتی غلظتبادی آنتی غلظت

منفی و مثبت کنترل

25

فلوسایتومتری افزارهای نرم از استفادهجهت:

اطالعات آوری جمعاطالعات پردازش

بعدی سه و بعدی دو نمودار ترسیمروی آماری و ریاضی محاسبات انجام

اطالعات

26

cells’ microtubule networks (green)golgi-matrix protein (yellow)DNA (blue)

27

روشهای با فلوسایتومتری مقایسهمیکروسکوپی

: روشمیکروسکوپی اشکاالت ( در است کندی و پرزحمت روش

بررسی 100دقیقه میتوان را سلولکرد(

خستگی سبب نمونه تحلیل و تجزیه ( سلول اثردارد برنتایج نتیجه در چشمامر این و بوده آنالیز قابل کمی هایبست آماری خطای در معکوس اثر

) دارد آمده

28

( به قادر است کمی حالت بهترین در و کیفی آنالیزغالبامورد در ولی هستیم شده رنگ و نشده رنگ سلول تمیز

) اظهارنظرکرد نمیتوان رنگ شدت: فلوسایتومتری مزایای سازی کمی و بررسی قابل نمونه غیریکنواختی

میگیرد) انجام سلول تک روی بررسی است نتیجه در شده بررسی سلول یک مختلف خصوصیات

نتیجه در است انجام قابل پارامتر چندین گیری اندازه. است باال هم کار سرعت

PMT مختلف سطوح تمیز جهت در آن از استفاده مورد. است انسان چشم از بهتر بسیار رنگی

29

منابع: ( و اصول فلوسايتومتري كتاب از برداشتي

روش‌ها( پزشکیشماره مهندسی فاطمه/ 139نشریه

یاوریhttp://pcfcij.dbs.aber.ac.uk/index.htm:// . . /http www cosmosmagazine com gallery

/ - - - / /41649secret world of cells attachment

30

Thanks‌For‌Your‌Attention