Flow cytometry

30
Flow Cytometry By Elham Hasheminasab 1

Transcript of Flow cytometry

Page 1: Flow cytometry

1

Flow Cytometry

By Elham Hasheminasab

Page 2: Flow cytometry

2

فلوسایتومتری تعریف

فلوسایتومتری مطالعه علم

و ها سلولدر ذرات

از جریانیمایع سیال

.است

Page 3: Flow cytometry

3

تاریخچه1953 :اولین رونمایی

فلوسایتومتری دستگاه1968 :آن توسعه

WolfgangتوسطGohde

1969 :تجاری استفادهآلمانی شرکت توسط

1988 :پالس از نام تغییربه سایتوفتومتری

فلوسایتومتری

Page 4: Flow cytometry

4

فلوسایتومتری درباره نکاتی با مايع در معلق صورت به آزمايش مورد ذرات

حدود منفذي 50تا 5سرعتي ميان از ثانيه در مترعبور ليزر نور از باريك پرتوي مقابل از و باريك

مي‌كنند. حدود آزمايش مورد نمونه از نياز مورد حجم

100 . مي‌باشد ميكروليتر :تعداد ميان 1دقت در سرطاني 10000سلول

مغز 100000تا نمونه در موجود عادي سلول. كند شناسايي را استخوان

Page 5: Flow cytometry

5

Page 6: Flow cytometry

6

فلوسایتومتری دستگاه اجزای

( سلولی (Fllow Cellجریان گیری اندازه سیستم نوری سیستم دیجیتال به آنالوگ سیستم کننده تبدیل یا خطی کننده تقویت سیستم

لوگاریتمی

Page 7: Flow cytometry

7

Page 8: Flow cytometry

8

Page 9: Flow cytometry

9

Page 10: Flow cytometry

10

فلوسایتومتری اساسروشتوسط( 1 نور سازي پراكنده

سلول‌ها

Page 11: Flow cytometry

11

فلورسانس( 2 نشر برها ازسلول

Page 13: Flow cytometry

13

گیری اندازه های پارامتر

لنفوسیتی 1( لوسمی تشخیص تاییدمزمن

سلول 2( حجم و مورفولوژیک پیچیدگیسلول رنگدانه و

کلی 3( اسالید) DNA,RNAمحتوای18)

کپی 4( DNAتعدادپروتئین 5( بیان و بندی بخش

Page 14: Flow cytometry

14

آنزیمی 7( فعالیت)8( اسالید کرومزوم آنالیز و سازی (16مرتب)9pHدر( 10 دارویی چند مقاومت های مشخصه بررسی

سرطانی سلول11 ( تخریب( آن نشانه آپوپتوز

DNA نفوذپذیری تغییر و وغشامیتوکندریغشا(

سلول،درون( 12 سطح های ژن آنتی گیری اندازهسلول هسته درون و سلول

13 ( سطح( ژن آنتی ویروسی ترکیبات گیری اندازهDNA)

14) - ( میزبان( پاتوژن سلول چسبندگی گیری اندازه

Page 15: Flow cytometry

15

Fluorescence image of brain cells

Page 17: Flow cytometry

17

مختلف • مـحتویات مـقـدار تـعـیـیـنچربی، پروتئین، مثل DNAسلولی ،

RNA… و• •Fluorescenc

e microscopy of DNA Expression in the Human Wild-Type.

Page 18: Flow cytometry

18

مرحلة • در كه سلول‌هايي شناساييهستند میتوز یا و میتوز پیش

Page 19: Flow cytometry

19

An inverted fluorescence microscope (AMG EVOS fl) with an LCD display instead of oculars for fluorescence microscopy

های کاربردفلوسایتومتری

Page 20: Flow cytometry

20

: دریا شناسی زیست در کاربردپالنکتون اتوفلورسنت خواص

به فلوسایتومتری با را فتوسنتزاجتماعی ساختار توصیف منظور. کرد استخراج میتوان فراوانی و

Page 21: Flow cytometry

21

: فلوسایتومتری پروتئین مهندسی درو باکتریایی نمایشگر ترکیب با

گونه شناسایی برای مخمر نمایشگرخواصمعین با پروتئینی های

. میشود استفاده: بالینی های کاربرد زیرمجموعه شمارش تشخیصو

لنفوسیت انسان Tهای خون سفید سلول افتراقی شمارش

Page 22: Flow cytometry

22

پالکت بادی اتوآنتی مطالعات سلول نشانگرسطح آنالیز آنیوپلوئیدی تشخیص لوسمی،لنفوم،بیماری تشخیص

HIVخودایمنی، پیوند موفقیت ارزیابی) ( خون سرطان بویژه تشخیصسرطان تولد از پیش تشخیص

Page 23: Flow cytometry

23

Green: RNA-binding protein ,

Blue: Axon endings of MJ94 positive neurons Axons :Red

Page 24: Flow cytometry

24

فلوسایتومتری چگونگی ( تهیه سلول سازی آماده و تخلیص

سوسپانسیون( اختصاصی آمیزی رنگ و شدن دار نشان

باد بودن یآنتی

ژن آنتی غلظتبادی آنتی غلظت

منفی و مثبت کنترل

Page 25: Flow cytometry

25

فلوسایتومتری افزارهای نرم از استفادهجهت:

اطالعات آوری جمعاطالعات پردازش

بعدی سه و بعدی دو نمودار ترسیمروی آماری و ریاضی محاسبات انجام

اطالعات

Page 26: Flow cytometry

26

cells’ microtubule networks (green)golgi-matrix protein (yellow)DNA (blue)

Page 27: Flow cytometry

27

روشهای با فلوسایتومتری مقایسهمیکروسکوپی

: روشمیکروسکوپی اشکاالت ( در است کندی و پرزحمت روش

بررسی 100دقیقه میتوان را سلولکرد(

خستگی سبب نمونه تحلیل و تجزیه ( سلول اثردارد برنتایج نتیجه در چشمامر این و بوده آنالیز قابل کمی هایبست آماری خطای در معکوس اثر

) دارد آمده

Page 28: Flow cytometry

28

( به قادر است کمی حالت بهترین در و کیفی آنالیزغالبامورد در ولی هستیم شده رنگ و نشده رنگ سلول تمیز

) اظهارنظرکرد نمیتوان رنگ شدت: فلوسایتومتری مزایای سازی کمی و بررسی قابل نمونه غیریکنواختی

میگیرد) انجام سلول تک روی بررسی است نتیجه در شده بررسی سلول یک مختلف خصوصیات

نتیجه در است انجام قابل پارامتر چندین گیری اندازه. است باال هم کار سرعت

PMT مختلف سطوح تمیز جهت در آن از استفاده مورد. است انسان چشم از بهتر بسیار رنگی

Page 29: Flow cytometry

29

منابع: ( و اصول فلوسايتومتري كتاب از برداشتي

روش‌ها( پزشکیشماره مهندسی فاطمه/ 139نشریه

یاوریhttp://pcfcij.dbs.aber.ac.uk/index.htm:// . . /http www cosmosmagazine com gallery

/ - - - / /41649secret world of cells attachment

Page 30: Flow cytometry

30

Thanks‌For‌Your‌Attention