BIOTECNOLOGÍAANIMAL

Dr. Andrés Sciara

2009

Aplicaciones en animales

• Clonación

• Animales transgénicos.

• Animales como bio-reactores

ClonaciClonacióón de organismosn de organismos

Puede definirse como la generaciPuede definirse como la generacióón de individuos n de individuos

gengenééticamente idticamente idéénticos (Clones) por transplante de nnticos (Clones) por transplante de núúcleos.cleos.

Clonación de anfibios

El desarrollo embrionario del ratón

El caso de Dolly1er mamífero clonado a partir de núcleos de células somáticas no embrionarias

Ian Wilmut, 1997

Animales TransgAnimales Transgéénicosnicos

OBJETIVOS:

- Investigación básica del control de la expresión de genes en un

determinado espacio y tiempo

- Obtención de productos farmacéuticos

- Obtención de modelo de animales que mimetizan enfermedades humanas

METODOLOGÍA:

- Micro-Inyección de huevos fecundados

- Introducción de ADN a embrioblastos

Peces Transgénicos

1

2

3

Peces Transgénicos

Peces Transgénicos

SalI

EGFP

β-Globin Splice-cassette

Promotor de α-actina

Peces Transgénicos

F0

F1

Ventajas:

- Expresan la hormona de crecimiento recombinante

- Aumentan 4 a 11 veces el tamaño al momento de la cosecha

- Hormona de crecimiento es peptídica

Desventajas:

- Posibilidad cierta de escapes

- Competencia con especies salvajes

Peces transgénicos para consumo

Microinyección de pronúcleo de ratón

Selección de individuos

Transplante de embrioblastos

Selección de células transformadas (neo)

Medicamentos en Leche

Insumos Producto

BIORREACTOR

FermentaciFermentacióón Bacterianan Bacteriana

El caso de BIOSIDUSEl caso de BIOSIDUS

Molecular Molecular farmingfarming

El caso de BIOSIDUS

Insumos Producto

BIORREACTOR

Tambo FarmacTambo Farmacééuticoutico

El caso de BIOSIDUS

Insumos Producto

BIORREACTOR

I. La clonación

Ovocito maduroOvocito maduroprevio extracciprevio extraccióón del nn del núúcleocleo

I. La clonación

IdentificaciIdentificacióón del nn del núúcleo del Ovocitocleo del Ovocitopor por fluorescenciafluorescencia

NUCLEO

I. La clonación

EnucleaciEnucleacióónn del del OvocitoOvocito

I. La clonación

Implantación de la célula somáticaen Ovocito enucleado

Ovocitoenucleado

Célulasomática

I. La clonación

FusiFusióón deln delOvocito enucleado y la cOvocito enucleado y la céélula somlula somááticatica

Célula somática con núcleo

Ovulo enucleado

I. La clonación

BLASTOCISTO

LuegoLuego de 5de 5--9 9 ddííasas de de cultivocultivo se se transfieretransfiere a la a la vacavaca receptorareceptora

PRONUCLEAR 2 CÉLULAS 4 a 8 CÉLULAS

División Celular

I. La clonación

PAMPA

I. La clonación

I. La clonación

Construcción Genética

Promotor beta caseína

SV40Poly AGen hGH G418r

II. El transgénico

II. El transgénico

PAMPA MANSA

II. El transgénico

Obtención del producto

Masa de h-GH diaria

0

10000

20000

30000

40000

50000

60000

70000

8-j

ul

18

-jul

28

-jul

7-a

go

17

-ago

27

-ago

6-s

ep

16

-se

p

26

-se

p

6-o

ct

16-o

ct

Masa (

mg)

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

7000

8000

9000

10000

Vol (

ml)

Masa Vol Polinómica (Masa)

CONCENTRACION DE SOMATROPINAEN LECHE

Obtención del producto

III. El rodeo farmacéutico

IV. Perpetuación de la estirpe

•PAMPA6 de agosto de 2002

•PAMPA6 de agosto de 2002

•PAMPA MANSA24 de setiembre de 2002•PAMPA MANSA24 de setiembre de 2002

•PAMPA MANSA II & III5 de enero 2004

•PAMPA MANSA II & III5 de enero 2004

PAMPERO •7 de diciembre de 2004

PAMPERO •7 de diciembre de 2004

Cronología

Productividad de 1 animal transgénico:Equivalente a 500.000 litros de fermentación por año. 1 animal transgénico = 1 fermentador de 5000 litros

DEMANDA ANUAL DE hGH

Mercado argentino: 10% de la produción de un animal transgénicoMercado latinoamericano: producción de un animal transgénicoMercado mundial: producción de 20 animales transgénicos

Producción de hGH