CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS DE ALTA PRESION.M E D I A N T E E L U S O D E M AT E R I A L E S D E S O P O R T E D E TA M A O P E Q U E O Y U N I F O R M E , S E P U E D E N O B T E N E R RE AS DE SUPERFICIE PERMITIENDO S E PA R A C I O N E S C R O M AT O G R A F C A S E N C O L U M N A A LTA M E N T E E F I C I E N T E S , P E R O L A S C O L U M N A S E M PA C A D A S C O N E S O S M AT E R I A L E S OFRECEN GRAN RESISTENCIA AL FLUJO DE LQUIDOS, POR L O Q U E S E R E Q U I E R E N A LTA S P R E S I O N E S PA R A F O R Z A R Q U E L A S F A S E S M V I L E S Q U E PA S E N D E U N E X T R E M O A OTRO.

INSTRUMENTACION Los detectores de la CLAP deben posibilitar la

deteccin de cambios muy pequeos en la concentracin de compuestos orgnicos disueltos en la fase liquida mvil y por tanto, deben tener sensibilidad relativamente baja a la fase mvil.

En uso general hay dos tipos de detectores que

satisfacen estos requisitos. La absorcin UV La deteccin por IR

ABSOSION UV. es el sistema de deteccin mas til y de dispone de

fotmetros adecuados con longitudes de onda fijas, usualmente 254 o 280 nm o bien, espectrofotmetros de longitud de onda variable.

DETECCION POR IR.Particularmente, el sensor infrarrojo es un dispositivo electrnico capaz de medir la radiacin electromagntica infrarroja de los cuerpos en su campo de visin. Todos los cuerpos reflejan una cierta cantidad de radiacin, esta resulta invisible para nuestros ojos pero no para estos aparatos electrnicos, ya que se encuentran en el rango del espectro justo por debajo de la luz visible.

INSTRUMENTACION La cromatografa de adsorcin en CLAP es la ms

til para la Reparacin de compuestos no polares, mezclas de ismeros y de compuestos con diferentes grupos funcionales.

REPRESENTACION ESQUEMATICA DE CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS DE ALTA PRESION

CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS DE ALTA PRESION La cromatografa de lquidos de alta presin (HPLC)

es, dentro de las tcnicas cromatogrficas, la mas utilizada. El proceso de separacin cromatogrfica puede definirse como la transferencia de masas entre una fase estacionaria y una mvil. La mezcla que contiene los compuestos a separar es disuelta e inyectada en una columna rellena de fase estacionaria a travs de la cual es forzada a pasar por una fase mvil impulsada por la bomba de alta presin. Dentro de la columna la mezcla se separa en sus componentes en funcin de su interaccin entre las dos fases. Esta separacin puede ser

CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS DE ALTA PRESION modificada eligiendo adecuadamente tanto la fase

mvil como la estacionaria, el flujo de la fase mvil o la temperatura de la separacin. De esta forma la tcnica de HPLC adquiere un alto grado de versatilidad difcil de encontrar en otras tcnicas, siendo capaz de separar los componentes de una gran variedad de mezclas.

CAMPO DE APLICACIN DE HPLC para solutos con masas moleculares superiores a 10.000,

a menudo se utiliza la cromatografa de exclusin por tamao, aunque ahora tambin es posible tratar estos compuestos con cromatografa de reparto en fase inversa. Para especies inicas de masa molecular mas pequea, se utiliza con frecuencia la cromatografa de intercambio inico. Los mtodos de reparto se aplican a las especies poco polares pero no inicas. Adems, este procedimiento se utiliza muchas veces para la separacin de los integrantes de una serie homloga. La cromatografa de adsorcin se elige con frecuencia para separar especies no polares, ismeros estructurales y grupos de compuestos como, por ejemplo, los hidrocarburos alifticos de los alcoholes alifticos.

GRACIAS POR SU ATENCION!