UNIVERSIDA TÉCNICA DE

MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

Y DE LA SALUD

ECUELA DE ENFERMERIA

ASIGANTURA:

BIOQUIMICA

TEMA:

COMO DETERMINAR BIOMOLECULAS

CATEDRATICO:

BIOQ. CARLOS GARCIA MSC

ALUMNA:

GABRIELA VEGA

MACHALA-EL ORO-ECUADOR

¿¿¿QUE SON BIOMOLECULAS???

GLUCIDOS

ACIDOS

NUCLEICOS

PROTEINAS

LIPIDOS

Son la unión de distintos

grupos funcionales a la

cadena de carbono

determinan un conjunto

muy variado de

moléculas que son

esenciales para la vida.

¿¿QUÉ SON GLUCIDOS??¿GLUCOSA…??

• Denominados también hidratos de carbono

están formados generalmente por:

C,H,O,s,p

• Son depósitos de energía química que es

liberada en cuanto el cuerpo la necesita.

• La cadena de glucosa tiene 6carbonos ,1

aldehído, varios grupo de alcohol, y

completando las 4 uniones de carbono

tenemos átomos de hidrogeno, así:

!!PARA RECORDAR!!

En todas las biomoleculas :

MONOMERO:son las partículas

individuales

OLIGOMERO: formados por la

union de 2 a 10 monómeros.

POLIMERO:formados por la

unión de mas de 10 monomeros

En forma general los glúcidos se clasifican así:

Características que diferencian a los glúcidos:

¿¿¿QUÉ SON LOS LÍPIDOS???

• Son la fuente de reserva energética que se caracteriza por ser insolubles en agua,

además ,por ser buenos aislantes térmicos además de actuar como lubricantes ,

protección , impermeabilizantes y de ser componentes importantes de la

membrana plasmática de las células tanto en vegetales como en animales.

Clasificación de los lípidos :

¿¿¿QUÉ SON LAS PROTEÍNAS???

• Son moléculas complejas formada por la unión de aminoácidos ,es uno

de os componentes mas importante de los seres vivos ,tiene

importancia a nivel estructural que al degradarse se convierten en

aminoácidos ,algunos aminoácidos son producidos por el mismo

organismo deben ser incorporados necesariamente a la dieta.

Observarás también que esta proteína tiene una

forma muy compacta que se la clasifica como

proteína globular.

Aquellas proteínas en donde la cadena está mucho

más “estirada” se clasifican como fibrosas.

¿¿¿QUÉ SON LAS ENZIMAS???

• Las enzimas cumplen la función vital de acelerar la velocidad

de las reacciones químicas ,es decir que las enzimas hacen

que las transformaciones químicas de las sustancias ocurran

en tiempos que sean compatibles para la vida .

CARACTERÍSTICAS DE LAS ENZIMAS

• Todas las enzimas son proteínas

• Son especificas ,es decir que cada enzima solo puede acelerar un tipo de reacción

• No son alteradas por la reacción en la que intervienen , es decir, luego de la reacción pueden

actuar nuevamente.

• Son eficientes en cantidades muy pequeñas

• Cada enzima, por la forma del sitio activo,

puede unirse sólo a aquel sustrato que tenga

una forma complementaria. Por eso decimos

que la acción de las enzimas es específica.

• Se establece una cadena enzimática donde el

sustrato inicial sufre sucesivas

transformaciones para obtener un producto

final muy diferente. En los seres vivos

generalmente existe gran cantidad de este

tipo de cadenas.

¿¿CÓMO DETERMINAR BIOMOLECULAS??

• Podemos determinar las

biomoleculas por métodos :

• De modificación selectiva

• Métodos químicos

• Métodos clásicos

• Métodos electroquímicos:

Nitración ,cloración ,bromacion y

iodacion en residuos de ácidos.

• Ingeniería de proteínas.

• Modificación química de los

residuos de metionina y tirosina

• Tratamiento con aldehídos

• Aplicación de radiación

electromagnética.

• Fotooxidación

• Espectrofotometría

Reacción de Biuret

• Reacciones de saponificación

• Hidrolisis de oxidación

electroquímica (directa o indirecta)

• Microscopía de fuerza atómica.

• Técnicas ópticas

ASPECTOS INNOVADORES

La aplicación de estas técnicas tienen consecuencias estructurales y

funcionales .de este modo se puede obtener novedosas aplicaciones tales

como la obtención de factores

IDENTIFICACION DE HIDRATOS DE CARBONO:GLUCOSA

• En u tubo de ensayo mezclar 3ml de solución al 1% de glucosa con 2 o 3

gotas de reactivo de BENEDICT.la mezcla tiene una coloración verde

azul

• Con el mechero a baño maria (37°)calentar el tubo de ensayo con la

mezcla durante 1 o 3 minutos ,hasa que la mezcla cambie a color

amarilloverdoso,que luego cambia a color naranja y luego a color rojo

ladrillo .

• El calor favorece a la reacción

La aparición de la coloración amarillo verdoso ,anaranjado, y finalmente

rojo ladrillo,es precisamente la reaccione que indicaque en la solución

hay prescencia de glucosa, sin embargo el color determina la

concentración ya sea en mayor o menor proporción.

ENSAYO REACTIVO DE BENEDICT:

IDENTIFICACION DE ALDOSAS Y CETOSAS

ENSAYO REACTIVO DE SELINWANOF:

• El reactivo consiste en resorcinol y

acido clorhídrico concentrado

• Al calentarlas ,las cetosas son

deshidratadas mas rápido que las

aldosas

• La cetosa deshidratada reacciona con el

resorcinol para producir un color

rojo,en algunas casos suelen reaccionar

produciendo un color rosa

IDENTIFICACION DE LIPIDOS

• A un tubo de ensayo agregar 1ml de éter,a otro 1

ml de alcohol,a otro 1ml de agua destilada y

finalmente el ultimo con 1ml de gasolina .

Se podrá observar que:

• En el tubo 1, el aceite es soluble en éter

• En el tubo 2,existe poca solubilidad en el alcohol

• En el tubo 3 se aprecia uuna emulsion que luego

desaparecerá.(no hay solubilidad)

• En el tubo 4 también se ve solubilidad en la

gasolina.

IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS

• En un tubo de ensayo mezclamos 2ml de clara de

huevo con 2ml de agua destilada .Agitamos

• Luego procedemos a unir con 30% de (NaOH) y 2

o 4 gotas de biuret

• Podemos obsevar que aparece una zona

superficial de color morada o violeta (reacción en

zona). Al transcurrir el tiempo el contenido del

tubo toma el color violáceo,debido a que de esta

manera es como se indica la pescencia de un

aminoácidos y por ende una proteína

• La clara de huevo puede ser también reemplazada

por leche.

ENSAYO REACTIVO DE BIURET:

IDENTIFICACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS• La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones

salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y

posterior extracción de la célula.

• Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su

contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese

momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,

carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas

asociadas al ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más

pequeñas y separado de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto,

extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza

alcohol isoamílico, probablemente el único reactivo de esta práctica que no suele

haber en una cocina.

• El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que,

entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se

realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se

unan al ADN.

GLUCOSA EN PLASMA SANGUÍNEO

• Determinado atravez del metodo de espectrofotometría

• Como ya sabemos la glucosa es la fuente principal de energía en todo ser vivo.

• Mediante esta técnica podemos determinar cuantitativamente la prescencia de este

compuesto,para valorar la glucosa en el suero sanguíneo enzimático calorimétrico en el cual

en que la glucosa presente en el suero sanguíneo es transformada por la GOD en acido

gluconico y peroxido de hidrogeno,el cual en presencia de POD se convierte en un

compuesto de color rojo que absove entre 492 y 550 nm,con un pico máximo de absrvancis a

500nm.

• Mediante este métodos obtienen valore cuantitativos por medio de la absorbancia que el

compuesto presente ,es decir a mayor absorbancia mayor concentración de glucosa ,cabe

recalcar que para esto tenemos diversas muestras que varían en concentración, que a su vez

son las que nos sirven de base para realizar la escala definitoria de la concentración y

absorbancia ,este procedimiento se lo realiza en un laboratorio que nos brinde las

condiciones optimas en cuales es indispensable el espectrofotómetro.

BIBLIOGRAFÍA

• -Antonio Jimeno, M. Ballesteros, A. Pardo; L, Ugedo; Biología COU, Editorial Santillana,

1992

• -Carlos A, Miguel González, Araceli del Cañizo, Ángel Costa Pérez; Biología 2º

Bachillerato; Editorial Everest 1999

• -Juan Ángel España, José G. Conde Domínguez, Antonio Fernández Diez...Actividades

Prácticas de Ciencias Naturales /1 Editorial Dossat, s.a. , 1980

GRACIAS