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UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
OBTENCIÓN DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum.
APLICADA EN MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES.
LABORATORIO DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
T.S.U. DAVID ALEJANDRO URANGA LEO
LCDO. FRANKLIN HORACIO LOZADA MALDONADO
San Diego, Julio de 2017.
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
OBTENCIÓN DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum.
APLICADA EN MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES.
LABORATORIO DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
Trabajo presentado de Grado como requisito parcial para la obtención del
Título de Licenciado en Citotecnología.
T.S.U. DAVID ALEJANDRO URANGA LEO
LCDO. FRANKLIN HORACIO LOZADA MALDONADO
San Diego, Julio de 2017.
ii
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ACTA DE EVALUACIÓN FINAL DEL TRABAJO DE GRADO
Nosotros, Profesora. Lcda. Daniela Monsalve. Portador de la DNI: Nro. V- 20.031.006
y Profesora. Lcda. Marlene Capote. Portador del documento Nacional de Identidad Nro.
DNI: Nro. V-6.544.255, miembros del jurado evaluador del Trabajo de Grado titulado:
OBTENCIÓN DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum.
APLICADA EN MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES.
LABORATORIO DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
Cuyo Autor es:
T.S.U. Uranga Leo David Alejandro, DIN Nro. V- 20.157.875
Certificamos que hemos evaluado el mencionado Trabajo de Grado, con el Siguiente
resultado:
Reprobado. Aprobado. Aprobado Mención Excelencia.
OBSERVACIONES:
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
Firma y Documento de Identidad de los miembros del Jurado:
Jurado Evaluador
____________________________
DIN - Nro.: V-6.544.255
Lcda. Marlene Capote
Jurado Evaluador
___________________________
DNI - Nro. V- 20.031.006
Lcda. Daniela Monsalve
iii
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
CONSTANCIA DE CONFORMIDAD DE
ASESOR DE CONTENIDO Y ASESOR METODOLÓGICO
DEL TRABAJO DE GRADO
Nosotros, Licdo. Franklin H. Lozada M., portador de la DIN Nro. V- 18.858.528, y Licda.
Marbet E. Conde A., portadora de la DIN Nro. V- 7.121.317, por medio de la presente
dejamos constancia de nuestra conformidad como Tutor Académico y Tutor Metodológico y
damos fe que hemos leído y corregido el Trabajo de Grado titulado:
OBTENCIÓN DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum.
APLICADA EN MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES.
LABORATORIO DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
AUTOR:
T.S.U. David Alejandro Uranga Leo. C.I. Nro. V- 20.157.875
Fecha: 26/06/2017
___________________________
Firma del asesor de Contenido Licdo. Franklin H. Lozada M.
C.I. Nro. V-18.858.528
___________________________
Firma del asesor Metodológico
Licda. Marbet E. Conde A.
C.I. Nro. V- 7.121.317
iv
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
OBTENCIÓN DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum.
APLICADA EN MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES.
LABORATORIO DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
T.S.U. David Alejandro Uranga Leo
Licenciado. Franklin Horacio Lozada Maldonado
Julio de 2017
RESUMEN
El presente trabajo consistió en una investigación cuasi experimental de tipo descriptivo, de
corte trasversal, retrospectivo. El mismo tuvo como objetivo fundamental obtener un
colorante natural a partir de la Solanum betaceum, aplicada en muestras citológicas Cervico-
Vaginales, provenientes del Laboratorio de Citodiagnóstico Avanzado CITOPAP C.A. La
técnica utilizada consistió en la observación y como instrumento de recolección de datos, se
utilizaron la lista de cotejo y escala de estimación. El colorante procesado fue obtenido del
tomate de árbol el cual constituye una fruta tropical. El mismo se utilizó como reactivo en 10
frotis. En primera instancia la lista de cotejo permitió verificar la eficacia del uso del
colorante para los elementos celulares arrojando resultados óptimos. Al mismo tiempo, con
la escala de estimación se evidencio la afinidad del colorante con el citoplasma. Demostrando
así la utilidad del colorante propuesto como alternativa para la aplicación en protocolos de
coloración en el área de citológica ginecológica.
Palabras Claves: Solanum betaceum, Colorantes, morfología, células
10
INTRODUCCIÓN
La citología hace referencia al
estudio integral de las células
desprendidas de los órganos y
tejidos de un ser vivo o no,
apreciando así sus diferentes
aspectos fisiológicos,
arquitecturales, biofísicos,
bioquímicos, funcionales,
inmunológicos, patológicos, y
genético.(1)Siendo así de gran
utilidad en el ámbito de la
medicina y el diagnóstico
primario preventivo en la
pesquisa del cáncer
cervicouterino y de los
diferentes proceso que incluye
múltiples factores en el
desarrollo de este, entre ellos,
las infecciones de transmisión
sexual de origen bacteriano,
hongos, parásitos y virus, los
cuales alteran el ecosistema
vaginal siendo factores de
riesgo. (2)
De igual forma, el estudio
citomorfológico de las
estructuras celulares permite
detectar las diferentes
anormalidades o patologías
inflamatorias que pueden ser de
origen funcional o no, y que al
ser observadas estas
alteraciones, causadas por los
mecanismo antes mencionados
puede arrojar un diagnóstico
primario preventivo que
permita una conducta clínica
determinante, es por ello que la
citología juega un papel
importante en el diagnóstico y
detección de lesiones pre-
malignas y malignas del cuello
uterino, donde se ha
demostrado su especificidad y
sensibilidad a lo largo de su
evolución.(3)
Por otra parte, el cuello uterino,
es un órgano segmentado en
diferentes porciones, donde
una de ellas queda expuesta a la
vagina, denominado exocervix,
o porción vaginal, esta posee
una superficie convexa,
redondeada con una abertura
circular o hendidura
denominado orificio cervical
externo que da paso a otra de
las porciones denominada
conducto endocervical, el cual
mide de dos a tres centímetros
de longitud, y se abre en
sentido proximal en la cavidad
endometrial a nivel del orificio
cervical interno. La mucosa
cervical en general contiene
tanto epitelio escamoso
estratificado no queratinizado,
característico del exocérvix,
como epitelio cilíndrico
secretor de mucina, que es
típico del conducto
endocervical. (4)
En continuidad de lo antes
mencionado, la intersección
por la cual se unen ambos
epitelios, que es la unión
escamocilíndrica, es variable
desde el punto de vista
anatómico y depende de la
estimulación hormonal. Esta
zona de transformación es más
vulnerable al desarrollo de
neoplasias escamosas. (4)
Al principio de la infancia,
durante el embarazo o cuando
se toman anticonceptivos, el
epitelio cilíndrico puede
extenderse desde el conducto
cervical hacia el exocervix,
trastorno conocido como
eversión o ectopia. (5)
Sin embargo, después de la
menopausia, la zona de
transformación suele
retroceder por completo hacia
el interior del conducto
endocervical. La producción de
mucina cervical se encuentra
bajo la influencia hormonal.
Varía entre profuso, claro y
diluido alrededor del momento
de la ovulación hasta escaso y
denso de la fase post-ovulatoria
del ciclo. En la profundidad de
la mucosa y la submucosa, el
cuello está compuesto por
tejido conectivo fibroso y por
una pequeña cantidad de
músculo liso de distribución
circular. (5)
Es por ello que, el diagnóstico
basado en las características
1. Solomon D. El sistema Bethesda para Informar la Citología Cervical, Ediciones Journal 2013.
2. Yoshio I. Citodiagnóstico Práctico. Barcelona: Científico - Medica. 1975.
3. Lacruz C, Faria J. Citología Ginecológica de Papanicolaou a Bethesda. Editorial Complutense; 2003.
4. Palacios J. Sistema Reproductor Femenino. Anatomía, [en línea] De Infermera Virtual. 2010. [25/08/2016]. Disponible en:
https://www.infermeravirtual.com/files/media/file/105/Sistema%20reproductor%20femenino.pdf?1358605661.
5. Parrondo P, Pérez M, Álvarez-Heros J. Anatomía del Aparato Genital Femenino, [en línea] De Univadis 2010. [25/08/2016]. Disponible en: http://www2.univadis.net/microsites/area_salud_mujer/pdfs/1-Anatomia_del_aparto_genital_femenino.pdf
11
citomorfológicas obtenidas
mediante el análisis
microscópico de células y
elementos agregados,
desprendidos de los órganos de
forma espontánea,
específicamente del cuello
uterino u obtenidos por
procedimientos de impronta,
rasprontas o exfoliación,
siendo menos invasivos que la
biopsia, permitirán arrojar un
análisis cualitativo y
cuantitativo de dichos
elementos encontrados en los
extendidos citológicos. Para la
valoración citomorfológica es
necesario la aplicación de
diferentes métodos y técnicas
de coloración que permitan la
visualización de las células
mediantes la evaluación de las
alteraciones de la morfología
del núcleo, citoplasma y de las
relaciones entre estas. Es por
ello que existen los
profesionales especialistas en
el área de la citología como lo
es el Citólogo y el
Citopatólogo.(6)
Ahora bien, todos los tejidos
son incoloros, salvo que
posean algún tipo de pigmento,
en cuyo caso adoptan el color
que aquél les proporciona,
como la piel que reside su
color por la melanina o la
sangre por la hemoglobina, de
esta forma el fundamento de
cualquier método de tinción
radica en la propiedad que
poseen todos los tejidos para
incorporar y fijar de modo
variable diversas sustancias
denominadas colorantes, por su
característica al exponerse con
un soporte adecuado, este se
une a él de forma perdurable
trasmitiendo sus propiedades
de color.(7)
Por consiguiente, los
colorantes se clasifican según
diferentes criterios, en
colorantes artificiales o
sintéticos y colorantes
naturales. En efecto, los
colorantes artificiales o
sintéticos son colorantes
derivados de la anilina, estos a
principios del siglo XIX se
obtenían a partir del alquitrán
de carbón, en la actualidad se
sintetizan en el laboratorio
permitiendo la modificación de
sus estructuras químicas a
conveniencia. La anilina es una
sustancia incolora, pero las
modificaciones químicas
producidas en el anillo
bencénico le confieren a los
compuestos nuevos, un color
determinado.(7)
Los colorantes artificiales o
sintéticos se clasifican a su vez,
en ácidos, básicos, neutros e
indiferentes. Los colorantes
ácidos son sales cuya parte
básica es incolora y su
componente ácido posee color,
los colorantes básicos son sales
que poseen la base coloreada, e
incolora la porción ácida, los
colorantes neutros son sales en
las que tanto la parte básica
como la parte ácida
proporcionan color, y los
colorantes indiferentes son
aquellos que aunque estos
poseen color, en realidad
estrictamente hablando no son
colorantes, se definen como
sustancias insolubles en agua
pero solubles en solventes
orgánicos. (8)
Sin duda, los colorantes
naturales se extraen de
animales o vegetales, tal es el
caso del Carmín de Best, de
color rojo intenso, extraído de
la cochinilla, artrópodo
parásito de los tallos del Nopal.
En cuanto a los colorantes
extraídos de vegetales, se
encuentran la hematoxilina,
obtenida del palo de
Campeche, la safranina
extraída de una liliácea y la
orceína obtenida de un liquen.(7)
Por consiguiente, según su
naturaleza química los
colorantes artificiales y
naturales poseen un soporte
químico fundamental
denominado anillos aromáticos
de benceno, ya que poseen
dobles enlaces entre los
átomos de carbono, estos
anillos quedan fijos, por lo
tanto, puedan ser reordenados
es la causa de la gran diversidad
6. Abad J. Cómo Interpretar un Informe Citológico Cervicovaginal Zaragoza. 2005.
7. García R. Manual de laboratorio de anatomía patología. España: S.A Mcgraw-Hill/ Interamericana de España; 1993.
8. Montenegro E. Manual de coloraciones Especiales. Venezuela: BOD 1985.
12
de los derivados del benceno,
en consecuencia de los
colorantes de anilina, los
radicales químicos
responsables de la
modificación molecular, a la
que se debe la aparición del
color se le denomina grupos
cromóforos, siendo el
cromógeno el conjunto
formado por este, el cromógeno
no es sinónimo de colorante, ya
que no siempre posee apetencia
especifica con los tejidos, por
no ligarse fuertemente a ellos.(8)
En el mismo orden, la
conversión de un cromóforos
en colorante está vinculada a la
adicción sobre la molécula
aromática, de otros grupos
atómicos que le confieren la
propiedad de disociarse
electrolíticamente o de forma
tales con los tejidos. Estos
radicales reciben la
denominación genérica de
grupos auxocromos o
potenciadores de color, y por lo
común están dotados de carga
eléctrica, es decir, poseen
carácter acido o básico siendo
los responsables de que el
colorante tenga mayor o menor
afinidad por la estructura que se
va a teñir.(8)
En este sentido, la Solanum
betaceun, denominado tomate
de árbol, entre otros numerosos
vocablos vernáculos, es un
árbol pequeño de dos a tres
metros de altura, tallo de único,
monopodial, ramificado a la
altura de uno a uno coma
quince metros en dos o tres
ramas. En la rama se repite el
mismo modelo de
ramificación. Hojas
cordiformes, de 17 a 30 cm de
longitud, cáliz persistente en el
fruto, corola blanco-rosada,
rotado-campanulada con los
ápices reflexos, estambres
conniventes, más cortos que la
corola, anteras amarillas,
dehiscentes por dos poros
apicales, estilo emergente entre
las anteras. Fruto de cinco a
siete centímetros de largo,
ovoide, glabro, de color
amarillo verdoso a anaranjado
en su estado de maduración
puede presentar una coloración
rojiza a vinotinto oscuro con
jaspes longitudinales. La planta
es perennifolia y la emisión de
hojas es continua. Sin embargo,
las hojas inferiores caen
sucesivamente, quedando el
tallo principal y la parte inferior
de las ramas desprovistas de
hojas(9) .Por ende, esta planta
puede reproducirse en regiones
con temperaturas entre 18° C y
22° C y precipitaciones de 600
a 800 mm anuales. Estas
características climáticas se
presentan en los Andes a
altitudes medias (1800 a 2000
msnm) se le encuentra en
regiones de clima subtropical,
siendo originario de América
del Sur. En países como
Colombia, tiene importancia
comercial. En Argentina,
Brasil, y Venezuela es un
producto de exportación.(10)
Por otra parte, la reproducción
de esta planta pude darse en
cultivos que formen un
microclima más húmedo, con
menor deshidratación del suelo
y una luz difusa. Las plantas de
tomate de árbol no soportan
bajas temperaturas (heladas).
Las altas temperaturas también
afectan a la floración y
fructificación, al igual que las
sequías prolongadas.(9) por
consiguiente, el fruto de
Solanum betaceun, es una
importante fuente de vitaminas
A, B y C siendo el contenido de
vitamina A (2475 IU/100)
gramo porción comestible
atribuido principalmente a los
carotenoides con actividad
provitamina A. La pulpa de
tomate de árbol presenta
además minerales tales como
calcio, fósforo y potasio,
carbohidratos fructosa, fibra
9. Contreras J. Solanum Betaceun Características y aplicaciones de la planta. 2014. [25/08/2016]. Disponible en:
https://ecograins.wordpress.com/2014/05/02/caracteristicas-del-tomate-de-arbol/
10. Torres A. Caracterización física, química y compuestos bioactivos de pulpa madura de tomate de árbol (Cyphomandrabetacea)
(Cav.) Sendtn [Fecha de acceso 26 de septiembre 2016]. Disponible en:
http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0004-06222012000400010
11. Kou MC. Yen JH. Hong JT. Wang ChL, Lin ChW, Wu M.J. ChyphomandrabetaceaSendt. Phenolics protect LDL from oxidation
and PC12 cells from oxidative stress. LWT. Food Sci and Technol 2009; [25/08/2016]. Disponibleen: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=514817&pid=S0004-0622201200040001000005&lng=es
13
dietaria, ácido gamma amino
butírico, el cual se ha asociado
a reducción de la presión
arterial y compuestos con
capacidad antioxidante como
licopeno, polifenoles y
antocianinas. En la literatura se
reporta un efecto protector de
los compuestos fenólicos de C.
betacea, dependientes de la
dosis y relacionado a su efecto
antioxidante envolventes de
radicales libres), en células
PC12 (línea celular adrenal
feocromocitoma de la rata)
luego de la adición de peróxido
de hidrógeno para inducir
estrés oxidativo. (10,11)
Así mismo se puede definir
qué, los alcaloides son
metabolitos secundarios de las
plantas sintetizados,
generalmente, a partir
de aminoácidos, teniendo en
común su hidrosolubilidad a
pH ácido y su solubilidad en
solventes orgánicos a pH
alcalino. Los alcaloides
verdaderos derivan de
un aminoácido, por lo tanto son
nitrogenados. Todos los que
presentan el grupo
funcional amina o imina son b
ásicos. La mayoría de los
alcaloides poseen acción
fisiológica intensa en los
animales incluso a bajas dosis
con efectos psicoactivos, sus
estructuras químicas son
variadas, por definición un
alcaloide es un compuesto
químico que posee un
nitrógeno heterocíclico
procedente del metabolismo de
aminoácidos; de proceder de
otra vía, se define
como pseudoalcaloide, El pH
del Tomate de árbol es ácido
ente 2,0 a 8,7.(11)
A partir de ahí, la Solanum
betaceun de la cual se puede
extraer sus cualidades naturales
y en especial, aquella que se
obtiene mediante el método de
maceración que consiste en la
extracción de los principios
activos que posee dicha planta
denominada tomate de árbol
específicamente sus frutos, del
cual se extrae un líquido de
color rojizo a vino tinto,cuyas
propiedades serán utilizadas
como pigmentos tintoriales,
tras mecanismos químicos que
darán potencia y afinidad hacia
estructuras compatibles con
ella.(11) .
Por su parte, un estudio
referente a la Obtención de un
colorante natural para
alimentos a partir de la
zanahoria Daucus Carota,
llevada a cabo en Maracaibo,
Venezuela, Universidad Rafael
Urdaneta, en el año 2008, en la
cual, se realizó la extracción del
β-caroteno de la zanahoria con
el fin de obtener un colorante
natural, siendo este aplicado
sobre alimentos grasos como
margarinas, aceites y quesos,
por ser un compuesto
liposoluble, lo que demostró,
que el colorante obtenido de la
zanahoria es sensible a
condiciones ambientales
externas, sin embargo en
condiciones de
almacenamiento controladas
presenta estabilidad,
determinando de esta manera,
el gran potencial como
colorante para alimentos que
esta posee, proporcionándoles
una coloración amarillo-
naranja tenue de aspecto
natural.(12)
Asimismo, en un estudio
realizado sobre la Aplicación
de Bixa Orellana como
colorante natural para
estructuras histológicas
animales y vegetales, en
Maracay, Venezuela,
Laboratorio de Biotecnología
del Instituto Nacional de
Investigaciones Agrícolas
(I.N.I.A), en el año 2012, donde
fueron utilizadas las semillas
del Bixa Orellana para la
obtención del colorante, siendo
estas sometidas a varios
procesos de extracción en
diferentes soluciones químicas
y tratadas con diversos
mordientes para determinar el
más apropiado y así lograr un
concentrado de solución
colorante final, esta solución se
aplicó sobre cortes histológicos
de tejido animal y vegetal,
dando como resultado en tejido
animal un colorante rojo pálido
12. Silva A, Izaguirre N. Aplicación de Bixa Orellana como colorante natural para estructuras histológicas en animales y vegetales
[Tesis]. Maracay, Venezuela: Universidad Arturo Michelena; 2012.
14
con una función de contraste y
afinidad básica; en el caso de
las plantas, se observaron fibras
de color azul, cutina azul,
estroma amarillo, xilema azul y
floema amarillo.(13)
Posteriormente, en el año 2016
en la Universidad Arturo
Michelena, un trabajo de
investigación que llevo por
nombre obtención de un
colorante natural a partir de la
Polygonum aviculare
(sanguinaria). Aplicada en
muestra citológica de la
mucosa bucal. Cuya planta
empleada como colorante
natural posee cierta afinidad
con las estructuras celulares
(células epiteliales escamosas)
permitiendo así a los
profesionales en el área de la
citología las exploraciones en
el campo de la citoquímica así
como también su estrecha
relación con el presente trabajo
de investigación.(14)
Al mismo tiempo, en el año
2015 en la Universidad Arturo
Michelena se realizó un trabajo
de investigación denominado,
Obtención de colorante para
cortes histológicos a partir de
Cúrcuma Longa, laboratorio
de procesamiento de la
universidad Arturo Michelena,
cuyo objetivo es obtener un
colorante para cortes
histológicos, a partir de
Cúrcuma Longa donde se
determinó mediante la
observación microscópica que
estructuras tienen afinidad por
este colorante, para esto se
analizaron muestras de
pulmón, piel (fina), intestino
delgado (duodeno) e intestino
grueso (colon); Se obtuvieron y
analizaron 12 láminas del
material procesado, las cuales
se colorearon utilizando el
colorante Cúrcuma Longa, es
por ello que se considera como
un estudio que permite no solo
la obtención de un colorante
natural sino que permite la
aplicación de técnicas
protocolares para la tinción de
estructuras celulares. (15)
Por consiguiente, en la
actualidad existen diferentes
técnicas de coloración que
llegan a ser contaminantes
tanto para el medio ambiente o
entono laboral como para el
personal que manipula el
material debido a las
propiedades químicas que estos
poseen y la aplicabilidad de
estas técnicas, partiendo de la
manipulación u obtención de
métodos de coloración
extraídos de plantas que
generen pigmentos tintoriales a
las estructuras celulares y los
elementos agregados en un
frotis citológico para que
puedan ser evidentes ante los
métodos implementados para la
observación citomorfológica,
por parte de los especialistas.
Es por ello que, este método de
tinción permite la innovación
de diferentes protocolos para la
observación diagnostica de los
elementos celulares extraídos
mediante exfoliados, así como
acortar el tiempo en los
diferentes protocolos de
coloración de rutina
implementados.
Finalmente, se justifica ya que
se demostró toda la
información específica
requerida de Solanum betaceun
para sustraer sus propiedades
naturales, como lo es su tinte y
así mismo indagando su
funcionamiento químico al
hacer utilizada como
coloración natural en muestra
citológica, permitiendo al
especialista implementar un
protocolo significativo en base
a la estructuración específica de
una técnica de coloración que
permita la tinción de las
arquitecturas de un frotis a
observar, así como la
disminución de la
contaminación producida por
las propiedades químicas que
poseen los colorantes utilizados
hoy día.
En base a las ideas expuestas, el
objetivo de este trabajo de
investigación consistió en
13. Díaz M. Pelayo A. Obtención de un colorante natural para alimentos a partir de la zanahoria (Daucus Carota) [Tesis]. Maracaibo,
Venezuela: Universidad Rafael Urdaneta, Facultad de Ingeniería; 2008.
14. Rodriguez E. obtención de un colorante natural a partir de la polygonumaviculare (sanguinaria). aplicada en muestra citológica de la
mucosa bucal. Universidad Arturo Michelena 2016.
15. Salorio A, Delgado E. Obtención de colorante para cortes histológicos a partir de cúrcuma longa, laboratorio de procesamiento de
la universidad Arturo Michelena, 2015
15
obtener un colorante natural a
partir de la Solanum betaceun
aplicada en muestra citológica
Cervico-Vaginales. Muestras
procesadas y analizadas en el
Laboratorio de Citodiagnóstico
Avanzado CITOPAP C.A. Con
la finalidad de que se pueda
aplicar este método de
coloración natural que permita
el ejercer de manera propicia y
efectiva un análisis
citomorfológico mediante un
nuevo mecanismo de
coloración.
Por consiguiente, el
planteamiento de la
investigación prevalece debido
a que hace algunos años las
coloraciones utilizadas para la
tinción de los frotis citológicos
se han visto inalcanzables tanto
por el valor económico y la
situación que afronta el país
que hace que los reactivos
necesario para su posterior
trabajo radique en inoperar la
labor del despistaje de cáncer
nivel citológicas, así como
también la contaminación que
general tanto al personal que
los manipula como el entorno
laboral o medio ambiente, por
eso el crear un nuevo
mecanismo de coloración
natural que nos ayude a definir
las estructuras morfo-
fisiológicas de las células
obtenidas del paciente para su
observación, es la alternativa
necesaria para seguir
trabajando en el desarrollo de la
buena salud mediante un buen
diagnóstico de la muestra a
observar.
PROCEDIMIENTO
El diseño de la investigación es
cuasi experimental, el cual es
un plan en el que se asigna a los
sujetos diferentes condiciones
experimentales, para ello es
necesario la formulación de
hipótesis, el establecimiento de
reglas de decisión para poner a
prueba dichas hipótesis, la
recolección de datos de acuerdo
a un plan que permita evaluar
las hipótesis, el análisis de los
datos, la toma de decisiones
respecto a las hipótesis y la
formulación de inferencias
inductivas respecto a las
hipótesis de investigación, es
decir, es el plan, la estructura y
la estrategia de investigación
concebidos para obtener
respuestas a preguntas de
investigación y controlar la
varianza.(16),
Es necesario resaltar, el
carácter observacional de la
investigación, ya que el
investigador considera los
fenómenos tal como se
presentan y se sustenta en el
uso de técnicas que permiten
obtener información por medio
de la observación directa. (17)
Para la realización del
presente estudio se procedió
a solicitar la autorización un
documento dirigido al
presidente ejecutivo y
vicepresidente de la
institución de investigación
y análisis Citomorfológico
para el uso de las
instalaciones, equipos y
material biológico,
propiedad del Laboratorio de
Citodiagnóstico Avanzado
CITOPAP C.A, ubicada en
el municipio Guacara, estado
Carabobo, Venezuela, en la
cual, fue necesario
seleccionar una población y
una muestra, cabe
considerar, que la población
se define como un conjunto
finito o infinito de personas,
casos o elementos, que
presentan características
comunes, por otra parte, la
muestra se obtiene cuando la
población es tan grande o
inaccesible que no se puede
estudiar toda, entonces el
investigador seleccionará
una muestra, con el
propósito de reducir el
campo de estudio y facilitar
el mismo. (18) .
16. Hernández T. Definición de Porspectiva, [Sitio en internet]. Disponible en: http://www.zonaeconomica.com/definicion-de-
prospectiva; Consultado: 22 de Mayo de 2015.
17. Kerlinger K. Grupo de Investigación de ingeniería tisular, [Sitio en internet]. Disponible en: http//histoii.ugr.es/postgrado/2007-
2008/metodología/MetodologíaII.pdf, pág. 12; Consultado: 22 de Mayo de 2015.
18. Pineda E. Alvarado E. Metodología de la investigación. 3ra edición. Washington, D.C: Organización Panamericana de la Salud;
2008.
19.
16
En el mismo orden de ideas,
la población de esta
investigación se compone de
la planta denominada
Solanum betaceun, de la cual
se tomó como muestra los
frutos de esta, para la
obtención del colorante,
aplicado a los diferentes
extendidos o frotis cervico-
vaginales provenientes de
servicios especialidades de
Ginecoobstetricia adscritos
al Laboratorio de
Citodiagnóstico Avanzado
CITOPAP C.A, obteniendo
un número de muestras
considerables para la
realización de esta
investigación, lo que
confiere un mayor margen
de pruebas sobre la
aceptación de la coloración.
Por otra parte, entre las
variables que surgieron para
el desarrollo de la
investigación, se encuentra,
el colorante de la Solanum
betaceun, para la cual, se
tomaron en cuenta los
siguientes factores, como
fue: la permanencia del
mismo durante el proceso de
coloración, la
compatibilidad con el uso de
Hematoxilina, la afinidad
por estructuras ácidas y la
afinidad por estructuras
básicas, como segunda
variable se encuentran los
frotis citológicos, por lo
cual, se tomaron en cuenta
indicadores como lo son, la
afinidad de la solución
colorante de Solanum
betaceun, por los
extendidos, la posible
visualización de células
epiteliales planas, células de
metaplasia escamosa, flora
bacteriana, la probable
distinción de elementos
sanguíneos, además, la
presencia o ausencia de
intensidad de color en los
extendidos cervico
vaginales. Con esta
finalidad, se utilizó como
instrumento de recolección
de datos una escala de
estimación y una lista de
cotejo. La escala de
estimación la comprendían
cuatro criterios a evaluar;
bueno, regular, deficiente o
malo para la valoración de
los aspectos que se
presentaron: la capacidad
tintorial del colorante y su
afinidad por los núcleos o los
citoplasmas de las células
antes mencionadas, al
mismo tiempo se empleó una
lista de cotejo que permitió
recopilar la información
referente al contraste del
colorante resaltando si el
componente celular está
presente o ausente tales
como: células epiteliales
escamosas, células de
metaplasia escamosa
polimorfonucleares,
hematíes o eritrocitos y flora
bacteriana.
En consideración a lo antes
expuesto, se realizó la
preparación del colorante, con
el fruto de la planta Solanum
betaceun, la cual es obtenida de
forma natural en campos
rurales, de esta se observaron
las características
macroscópicas de la planta,
comenzando por sus hojas,
tallo y frutos, siendo estos
últimos los más importantes
para dicha investigación los
cuales estuvieron en óptimas
condiciones para la preparación
del protocolo de coloración,
siguiendo con este protocolo,
se procedió a descartar el tallo
y las hojas, dejando solo los
frutos en mejores condiciones y
en un proceso de maduración
terminal, separando
cuidadosamente de los
peciolos, tomando una cantidad
de dos frutos,
consecutivamente los frutos
fueron sumergidos en un baño
de agua destilada para la
eliminación de impurezas,
insectos, u otros agregados,
dejando secar para su posterior
utilización, una vez secos se
procedió a la eliminación de la
concha del fruto dejándolo
expuesto. En el mismo orden,
se preparan los instrumentos
para la extracción del producto
proveniente de los frutos,
donde fue necesario medir 100
mL de alcohol etanol al 96% de
su pureza, utilizando un
17
cilindro graduado de una
capacidad de 100 mL, ulterior
a la selección de los frutos, se
agrega al cristalizador los 100
mL de alcohol etanol
previamente medidos, durante
un tiempo aproximado de 78
horas, este reposo bajo estricta
vigilancia y en un contenedor
sellado para evitar la
evaporación de los gases
producidos por el alcohol.
luego de haber trascurrido este
tiempo se procede a macerar y
extraer el contenido de los
frutos, dejando que esta
reposar por un periodo de
8horas, supervisando
contantemente los cambios que
pudieran ocurrirle a la
preparación, utilizando como
instrumento contenedor un
matraz erlenmeyer de una
capacidad de 500 mL, un
embudo de boca ancha y papel
filtro, se procede a la
eliminación de residuos o
partículas excedentes no
miscibles en la preparación,
mediante el filtrado del
producto obtenido, este
proceso se repitió por segunda
vez, hasta conseguir una
solución homogénea libre de
sobrenadantes.
Consecuentemente y una vez
obtenido el colorante se
procede a medir el pH del
mismo con cinta de pH
arrojando un valor de 2 en su
escala cromática de valor,
posterior a efectuada esta
medición se almacenó en un
frasco color ámbar para su
conservación, evitando con ello
que se alteraran las moléculas
del contenido, por efecto de la
luz.
Una vez preservado el material,
se llevó a cabo la preparación
de los extendidos citológicos
para su coloración, en primer
lugar se implementó la
deshidratación de los frotis en
alcohol etanol al 50% de su
concentración durante 3
minutos, eliminando así el
fijador celular utilizado en los
mismos, seguidamente se
desalcoholizar las muestras con
agua durante 1 minuto y
después de dejar secar al aire
libre, para la eliminación de las
moléculas de agua se procedió
a colorear las muestras con
Hematoxilina de Meyer,
colorante básico el cual posee
apetencia por los ácidos
nucleicos, durante un tiempo
aproximado de 6 minutos,
posterior a este paso se eliminó
el excedente de coloración con
agua corriente en un tiempo
mayor comprendido por 12
minutos al implementado en la
coloración nuclear dada por la
Hematoxilina de Meyer, una
vez efectuado este paso, se
procedió a la deshidratación de
la muestra y la preparación de
la misma para un entorno
alcohólico, sumergiendo el
preparado durante 30
segundos, en alcohol etanol al
100% de su concentración,
posterior a ello se procede a
implementar la coloración
citoplasmática dada por
Solanum betaceun, este
proceso se realizó en un tiempo
de 8 minutos. El siguiente paso
fue sumergir las muestras
citológicas 15 veces en una
cubeta de agua destilada para
eliminar el excedente del
colorante, este proceso se repite
una segunda vez para la
eliminación del excedente del
mismo, luego en una bandeja o
gradilla de secado fueron
colocadas las muestras durante
15 minutos para proceder al
montaje con resina acrílica, a
base de tolueno, marca Flo-
Texx®, el siguiente paso fue la
observación de las láminas en
un microscopio óptico modelo
G012018984 marca Omax®
con cámara integrada, para
evidenciar las estructuras
coloreadas y determinar la
morfología de dichas
estructuras. En un lapsus de
tiempo de 1 a 2 semanas las
muestras coloreadas fueron
observadas en repetidas
ocasiones para evidenciar la
calidad y duración del
colorante aplicado,
demostrando que la captación
tintorial en las muestras
citológicas siguen siendo
satisfactorias al trascurrir
periodos de tiempo
prolongados si presentar
desmejora en la calidad.
DISCUSION
En vista de que los colorantes
poseen características
tintoriales que facilitan o
permiten teñir las diferentes
18
estructuras celulares al
momento de ser aplicados
como métodos de tinción para
la observación diagnostica de
dichos elementos, es relevante
mencionar que el uso de la
Solanum betaceun como
colorante neutro, resultó
factible para frotis citológicos
cervico-vaginales, como
muestra seleccionada para el
estudio de esta investigación;
es así que durante la aplicación
del mismo, transmitiendo su
propiedades tintoriales de color
rojizo o vino tinto pálido a los
diferentes componentes
celulares tales como células
epiteliales escamosas, células
de metaplasia, polimorfos,
bacterias tales como cocos y
bacilos, de esta manera es
significativo acotar que las diez
muestras citológicas, teñidas
con el colorante natural y
observadas mediante el
microscopio óptico, fueron
interpretadas y esa información
fue plasmada en los
instrumentos de recolección de
datos utilizados, tales como
lista de cotejo y escala de
estimación, haciendo
referencia a este último
instrumento, el cual permitió
medir la capacidad tintorial del
colorante hacia las estructuras
celulares, demostrando una
apetencia tintorial acentuada en
el citoplasma, respecto al
núcleo la tinción fue de
captación más tenue o difusa
que la coloración
citoplasmática antes descrita,
es por ello que se implementó
la coloración nuclear dada por
la Hematoxilina de Meyer, por
otra parte se pudo constatar
que, la solución colorante final
obtenida de Solanum
betaceum, posee una buena
calidad tintorial.
Respecto a las listas de cotejo la
cual permitió poner en
evidencia los tipos celulares
presentes en los frotis y si estos
obtuvieron captación del color,
arrojando un 100% de las
células epiteliales escamosas,
células de Metaplasia escamosa
según su aparición en los frotis
citológicos, los elementos
celulares agregados como
polimorfonucleares, eritrocitos
y Floras bacterias las cuales
tuvieron una relevancia
notable.
En el mismo orden de ideas, se
demostró mediante la
aplicación de esta técnica de
coloración con Solanum
betaceum que las células
escamosas provenientes del
exfoliado de la mucosa cervical
fueron teñidas
satisfactoriamente, definiendo
las estructuras citoplasmáticas
de las misma, permitiendo su
visualización y análisis
citomorfológico, así mismo
sucedió con las células de
metaplasia en los diferentes
extendidos con la presencia de
estas, las bacterias tales como
bacilos de Döderlein o
lactobacullus y cocos fueron
teñidos satisfactoriamente
permitiendo su observación
detallada, algunas estructuras
del tejido sanguíneo tales como
eritrocitos así como los
polimorfonucleares pudieron
apreciarse en los extendidos
inflamatorios. Aunque todas
las láminas fueron
satisfactorias a la hora de la
evaluación.
Acerca del resultado obtenido
en la presente investigación se
puede concluir que por medio
de la utilización de este
colorante natural permitirá el
ejercer de manera propicia y
efectiva las técnicas de
coloraciones y el proceso de
análisis arrojando así un reporte
citomorfológico completo, así
mismo, el personal capacitado
de laboratorio podrá realizar el
procesamiento técnico de las
muestras sin la utilización de
reactivos de alto impacto y
riesgo biológico, sanitario y de
costos elevados.
En relación a lo antes
mencionado, se recomienda a
los profesionales en el ámbito
de la salud en las áreas de
Citotecnología,
Histotecnología, Patología y
Medicina en general, mismos
que deberán tener en
consideración el impacto que
generan algunas técnicas de
coloración no solo a el entorno
laboral y de salud sino también
al ambiente, es por ello, que
quienes manejen o ejecuten
esos protocolos de tinción
deberán tener experticia o
capacitación en el área para así
disminuir el margen de errores
19
en la ejecución de
procedimiento técnico del
material biológico. Así mismo,
deberán tomar en cuenta la
factibilidad de la aplicación de
este innovador protocolo de
coloración que les permitirá
reducir los tiempos y arrojar así
un diagnóstico más rápido,
certero y confiable, así mismo
se recomienda realizar estudios
a mayor escala de población y
en muestras de índole no
ginecológico para visualizar su
eficacia y ser comparado.
MATRIZ DE DATOS LISTA DE COTEJO
Numero de Laminas Lamina
01
Lamina
02
Lamina
03
Lamina
04
Lamina
05
Lamina
06
Lamina
07
Lamina
08
Lamina
09
Lamina
10
Asp
ecto
s M
icro
scóp
icos
Indicadores SI NO SI NO SI NO SI NO SI NO SI NO SI NO SI NO SI NO SI NO
Células Epiteliales
Escamosas X X X X X X X X X X
Células de Metaplasia X X X X X X X
Polimorfonucleares X X X X X X X X X X
Eritrocitos X X X
Flora Bacteriana X X X X X X X X X X
Fuente: Uranga D. (2017).
MATRIZ DE DATOS ESCALA DE ESTIMACIÓN
Fuente: Uranga D. (2017)
Leyenda
B (Bueno)
R (Regular)
D (Deficiente)
M (Malo)
Numero de Laminas Lamina 01 Lamina 02 Lamina 03 Lamina 04 Lamina 05 Lamina 06 Lamina 07 Lamina 08 Lamina 09 Lamina 10
Asp
ecto
s M
icro
scó
pic
os
Indicadores B R D M B R D M B R D M B R D M B R D M B R D M B R D M B R D M B R D M B R D M
Células Epiteliales
Escamosas X X X X X X X X X X
Células de
Metaplasia X X X X X X X
Polimorfonucleares X X X X X X X
Eritrocitos X X X
Flora Bacteriana X X X X X X X X X X
Núcleos X X X X X X X X X X
Citoplasmas X X X X X X X X X X
Calidad de la
Tinción X X X X X X X X X X
ANEXOS
ANEXO Nro. 1
TABLA DE OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES.
OBTENCION DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum. APLICADA EN MUESTRAS
CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES. LABORATORIO DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
OBJETIVO VARIABLE DEFINICIÓN
CONCEPTUAL DIMENSIONES INDICADORES INSTRUMENTO FUENTE
Elaborar un colorante natural a partir de la Solanum betaceum,
aplicada en muestras citológicas
Cervico - Vaginales.
Colorante natural
Solanum betaceum.
(tomate de árbol)
Son colorantes naturales
provienen de materias primas
naturales, de plantas y
fuentes orgánicas y son el
resultado de un proceso
selectivo de enriquecimiento
de color.
Extracción del
colorante
Escala de Estimación
Muestras citológicas Cervico - Vaginales.
Laboratorio de Citodiagnóstico
Avanzado CITOPAP C.A 2017.
Núcleo
Citoplasma
Calidad de la tinción
Citología
Cervico - Vaginales.
Técnica para la visualización
morfológica de células
epiteliales escamosas
mediante microscopia óptica.
Aspectos
Microscópicos
Células epiteliales escamosas
Lista de Cotejo
Células de metaplasia
Polimorfonucleares
Eritrocitos
Flora bacteriana
Otros
Fuente: Uranga D. (2017).
Nro. Nombres y Apellidos Documento de
Identidad Profesión Nivel Académico Fecha Firma
1 V-
/ /
2 V- / /
3 V- / /
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.:
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico:
Diagnóstico:
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas
2. Células de metaplasia
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora Bacteriana
6. Otros
Firma: _________________________
Nro. Nombres y Apellidos Documento de
Identidad Profesión Nivel Académico Fecha Firma
1 V- / /
2 V- / /
3 V- / /
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
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ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.:
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas
2. Células de metaplasia
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana
6. Otros
7. Núcleos
8. Citoplasmas
9. Calidad del Colorante
Nro. Nombres y Apellidos Documento de
Identidad Profesión Nivel Académico Fecha Firma
1 V- / /
2 V- / /
3 V- / /
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Lista de Cotejo
OBTENCION DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum.
APLICADA EN MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES. LABORATORIO
DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
Autor: David Alejandro Uranga Leo CI Nro.: V-20.157.875
Formato de validación de expertos de instrumentos de recolección de datos.
(Lista de Cotejo)
CRITERIOS
PERTINENCIA
(OPORTUNIDAD
CONVENCIONAL)
CLARIDAD
(REDACCIÓN)
COHERENCIA
(CORRESPONDENCIA) DECISIÓN
Indicadores Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Dejar Modificar Quitar
1. Células epiteliales
escamosas
2. Células de
metaplasia
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana
6. Otros
DATOS DEL EXPERTO
Nombres y Apellidos Documento de Identidad Firma
V-
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Escala de Estimación
OBTENCION DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum.
APLICADA EN MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES. LABORATORIO
DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
Autor: David Alejandro Uranga Leo CI Nro.: V-20.157.875
Formato de validación de expertos de instrumentos de recolección de datos.
(Escala de Estimación)
CRITERIOS PERTINENCIA
(OPORTUNIDAD
CONVENCIONAL)
CLARIDAD (REDACCIÓN)
COHERENCIA (CORRESPONDENCIA)
DECISIÓN
Indicadores Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Dejar Modificar Quitar
1. Células epiteliales
escamosas
2. Células de
metaplasia
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana
6. Otros
7. Núcleos
8. Citoplasmas
9. Calidad del
Colorante
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DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
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Formato de validación de expertos de instrumentos de recolección de datos.
(Lista de Cotejo)
CRITERIOS
PERTINENCIA
(OPORTUNIDAD
CONVENCIONAL)
CLARIDAD
(REDACCIÓN)
COHERENCIA
(CORRESPONDENCIA) DECISIÓN
Indicadores Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Dejar Modificar Quitar
1. Células epiteliales
escamosas
2. Células de
metaplasia
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana
6. Otros
DATOS DEL EXPERTO
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Formato de validación de expertos de instrumentos de recolección de datos.
(Escala de Estimación)
CRITERIOS PERTINENCIA
(OPORTUNIDAD
CONVENCIONAL)
CLARIDAD (REDACCIÓN)
COHERENCIA (CORRESPONDENCIA)
DECISIÓN
Indicadores Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Dejar Modificar Quitar
1. Células epiteliales
escamosas
2. Células de
metaplasia
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana
6. Otros
7. Núcleos
8. Citoplasmas
9. Calidad del
Colorante
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DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
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Formato de validación de expertos de instrumentos de recolección de datos.
(Lista de Cotejo)
CRITERIOS
PERTINENCIA
(OPORTUNIDAD
CONVENCIONAL)
CLARIDAD
(REDACCIÓN)
COHERENCIA
(CORRESPONDENCIA) DECISIÓN
Indicadores Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Dejar Modificar Quitar
1. Células epiteliales
escamosas
2. Células de metaplasia
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana
6. Otros
DATOS DEL EXPERTO
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Escala de Estimación
OBTENCION DE COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum.
APLICADA EN MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES. LABORATORIO
DE CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
Autor: David Alejandro Uranga Leo CI Nro.: V-20.157.875
Formato de validación de expertos de instrumentos de recolección de datos.
(Escala de Estimación)
CRITERIOS PERTINENCIA
(OPORTUNIDAD
CONVENCIONAL)
CLARIDAD (REDACCIÓN)
COHERENCIA (CORRESPONDENCIA)
DECISIÓN
Indicadores Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Adecuado Inadecuado Dejar Modificar Quitar
1. Células epiteliales
escamosas
2. Células de metaplasia
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana
6. Otros
7. Núcleos
8. Citoplasmas
9. Calidad del Colorante
DATOS DEL EXPERTO
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LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 01
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células superficiales e
intermedias bien conservadas, propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un
agrandamiento Nuclear entre un 50 y un 70%, binucleación, núcleos de contornos lisos redondos u ovales,
cromatina finamente granular, uniforme bien distribuida, halos perinucleares sin engrosamiento periférico,
presencia de células de metaplasia escamosa, presentando una flora cocoide, Polimorfonucleares Moderados,
Eritrocitos ausentes.
Diagnóstico: Cambios celulares reactivos asociados con inflamación.
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
7. Células epiteliales escamosas √
8. Células de metaplasia √
9. Polimorfonucleares √
10. Eritrocitos √
11. Flora Bacteriana √
Firma: _________________________
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
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LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 02
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células superficiales e
intermedias bien conservadas, propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un
agrandamiento Nuclear entre un 50 y un 100%, binucleación, núcleos de contornos lisos redondos u ovales,
cromatina finamente granular, uniforme bien distribuida, halos perinucleares sin engrosamiento periférico,
presencia de células de metaplasia escamosa, presentando una flora cocoide, Polimorfonucleares Moderados,
Eritrocitos ausentes.
Diagnóstico: Cambios celulares reactivos asociados con inflamación.
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora Bacteriana √
Firma: _________________________
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LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 03
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células intermedias y
profundas, propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un agrandamiento Nuclear
entre un 50 y un 100%, binucleación, presencia de degeneración nuclear (cariorrexis) núcleos de contornos
lisos redondos u ovales, cromatina finamente granular, uniforme bien distribuida, halos perinucleares sin
engrosamiento periférico, presencia de células de metaplasia escamosa, presentando una flora cocoide,
Polimorfonucleares abundantes, Eritrocitos ausentes.
Diagnóstico: Cambios celulares reactivos asociados con inflamación.
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora Bacteriana √
Firma: _________________________
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ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 04
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células superficiales e
intermedias propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un agrandamiento
Nuclear entre un 50 y un 100%, binucleación, núcleos de contornos lisos redondos u ovales, cromatina
finamente granular, uniforme bien distribuida, halos perinucleares sin engrosamiento periférico, células
endocervicales bien conservadas, en agrupamientos típico (panal de abeja), Presentando elementos fúngicos
consistentes con esporas e hifas de Candida spp. Apreciándose una flora bacteriana mixta, Polimorfonucleares
Moderados, Leucocitos escasos, Eritrocitos moderados.
Diagnóstico: Estructuras Fúngicas consistentes con Candida spp.
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora Bacteriana √
Firma: _________________________
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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 05
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológicos identificado como Cervico-Vaginal,
Utilizando un Protocolo de Coloración: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células superficiales e
intermedias, propias del epitelio pavimentos estratificado no queratinizado, evaluándose las células en pequeñas
laminas con un agrandamiento nuclear de moderado a evidente Aumento de la relación núcleo citoplasma,
hipercromasia, binucleación, núcleos de contornos irregulares, cromatina Granular, citoplasmas de contornos
difusos, halos perinucleares (cavidades Coilociticas) características propias de una infección por VPH células
abundantes células de metaplasia escamosas Inmadura, presentando una Flora Bacilar - Bacilos de Döderlein,
Polimorfonucleares Moderados, Leucocitos Moderados, Hematíes moderados.
Diagnóstico: Lesión Intraepitelial escamosa de bajo grado, comprendiendo VPH
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora Bacteriana √
Firma: _________________________
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 06
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células intermedias y
profundas, propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un agrandamiento Nuclear
entre un 50 y un 100%, binucleación, presencia de degeneración nuclear (cariorrexis) núcleos de contornos
lisos redondos u ovales, cromatina finamente granular, uniforme bien distribuida, halos perinucleares sin
engrosamiento periférico, presencia de células de metaplasia escamosa, presentando una flora cocoide,
Polimorfonucleares abundantes, Eritrocitos ausentes.
Diagnóstico: Cambios celulares reactivos asociados con inflamación.
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
6. Células epiteliales escamosas √
7. Células de metaplasia √
8. Polimorfonucleares √
9. Eritrocitos √
10. Flora Bacteriana √
Firma: _________________________
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LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 07
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células intermedias y
profundas, propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un agrandamiento Nuclear
entre un 50 y un 100%, binucleación, presencia de degeneración nuclear (cariorrexis) núcleos de contornos
lisos redondos u ovales, cromatina finamente granular, uniforme bien distribuida, halos perinucleares sin
engrosamiento periférico, presencia de células de metaplasia escamosa, presentando una flora cocoide,
Polimorfonucleares abundantes, Eritrocitos ausentes.
Diagnóstico: Cambios celulares reactivos asociados con inflamación.
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora Bacteriana √
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LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 08
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células superficiales e
intermedias, propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un agrandamiento
Nuclear moderado, núcleos de contornos lisos redondos u ovales, cromatina uniforme bien distribuida,
presentando una flora cocoide, Polimorfonucleares abundantes, Eritrocitos ausentes.
Diagnóstico: Cambios celulares de tipo inflamatorio
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora Bacteriana √
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LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 09
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células intermedias y
profundas, propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un agrandamiento Nuclear
entre un 50 y un 100%, binucleación, presencia de degeneración nuclear (cariorrexis) núcleos de contornos
lisos redondos u ovales, cromatina finamente granular, uniforme bien distribuida, halos perinucleares sin
engrosamiento periférico, presencia de células de metaplasia escamosa, presentando una flora cocoide,
Polimorfonucleares abundantes, Eritrocitos ausentes.
Diagnóstico: Cambios celulares reactivos asociados con inflamación.
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora Bacteriana √
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LISTA DE COTEJO
Lamina Nro.: 10
Fuente: Uranga D. (2017).
Análisis Microscópico: Se evalúa un extendido citológico identificado como Cervico-Vaginal, Utilizando
un Protocolo de Coloración a base de: Solanum betaceum, apreciándose abundantes células intermedias y
profundas, propias del epitelio pavimentos estratificado, evaluándose las células con un agrandamiento Nuclear
entre un 50 y un 100%, binucleación, presencia de degeneración nuclear (cariorrexis) núcleos de contornos
lisos redondos u ovales, cromatina finamente granular, uniforme bien distribuida, halos perinucleares sin
engrosamiento periférico, presencia de células de metaplasia escamosa, presentando una flora cocoide,
Polimorfonucleares abundantes, Eritrocitos ausentes.
Diagnóstico: Cambios celulares reactivos asociados con inflamación.
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Presente Ausente
1. Células epiteliales escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora Bacteriana √
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ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 01
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
10. Células Epiteliales
Escamosas √
11. Células de metaplasia √
12. Polimorfonucleares √
13. Eritrocitos
14. Flora bacteriana √
15. Núcleos √
16. Citoplasmas √
17. Calidad del Colorante √
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ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 02
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
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ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 03
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
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ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 04
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
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ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 05
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
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ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 06
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
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ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 07
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 08
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 09
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares √
4. Eritrocitos √
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
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ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
ESCALA DE ESTIMACIÓN
Lamina Nro.: 10
Fuente: Uranga D. (2017).
INDICADORES COLORACIÓN NATURAL DE LA
Solanum betaceum
Aspectos Microscópicos Bueno Regular Deficiente Malo
1. Células Epiteliales
Escamosas √
2. Células de metaplasia √
3. Polimorfonucleares
4. Eritrocitos
5. Flora bacteriana √
6. Núcleos √
7. Citoplasmas √
8. Calidad del Colorante √
FIGURA Nro. 1: Frutos de la pantas Solanum betaceum.
Fuente: Uranga D. (2017).
Frutos de la planta Solanum betaceum (Tomate de árbol).
FIGURA Nro. 2: Frutos de la pantas Solanum betaceum.
Fuente: Uranga D. (2017).
Frutos de la planta Solanum betaceum, visualización interna de los frutos.
FIGURA Nro. 3: Materiales utilizados para la extracción del colorante.
Fuente: Uranga D. (2017)
Materiales utilizados para la extracción del colorante.
FIGURA Nro. 4: Protocolo para la obtención del colorante natural de Solanum betaceum.
Fuente: Uranga D. (2017).
Imprecación de alcohol.
Fuente: Uranga D. (2017)
Introducción de Alcohol en el fruto seleccionado.
FIGURA Nro. 5: Protocolo para la obtención del colorante natural de Solanum betaceum.
Fuente: Uranga D. (2017).
Estado del fruto luego de 24 horas durante la inmersión en alcohol.
FIGURA Nro. 6: Protocolo para la obtención del colorante natural de Solanum betaceum.
Fuente: Uranga D. (2017).
Proceso de macerado.
Fuente: Uranga D. (2017).
Maceración del fruto luego de las 78 horas.
FIGURA Nro. 7: Protocolo para la obtención del colorante natural de Solanum betaceum.
Fuente: Uranga D. (2017).
Embazado del producto final.
FIGURA N°4:Muestrascervico - vaginales.
Fuente: Uranga D. (2017).
Faltado de la Coloración.
FIGURA Nro. 8: Coloración de los extendidos celulares.
Fuente: Uranga D. (2017).
Aplicación de coloración en los extendidos citológicos cervico - vaginales.
FIGURA Nro. 9: Células Epiteliales Escamosas.
Fuente: Uranga D. (2017).
TIPO DE MUESTRA: Cervico - Vaginal.
TECNICA DE COLORACION: Solanum betaceum
CAMPO: Células Epiteliales Escamosas, en aumento de 4X. AUMENTO: Objetivo 4 x (0,1) Ocular de 10x Total de aumento: 40x
MICROSCOPIO: G0120189840 Marca Omax Resolución de 9,0 Pixeles
.
LEYENDA:
A.- Células Superficiales.
B.- Células Profundas.
A
B
FIGURA Nro. 10: Células de Metaplasia Escamosas.
Fuente: Uranga D. (2017).
TIPO DE MUESTRA: Cervico - Vaginal.
TECNICA DE COLORACION: Solanum betaceum
CAMPO: Células de metaplasia escamosa. AUMENTO: Objetivo 10 x (0,25) Ocular de 10x Total de aumento: 100 x
MICROSCOPIO: G0120189840 Marca Omax Resolución de 9,0 Pixeles
LEYENDA:
A.- Células metaplásicas.
A
FIGURA Nro. 11: Polimorfonucleares.
Fuente: Uranga D. (2017).
TIPO DE MUESTRA: Cervico - Vaginal.
TECNICA DE COLORACION: Solanum betaceum
CAMPO: polimordonucleares. AUMENTO: Objetivo 10 x (0,25) Ocular de 10x Total de aumento: 100 x
MICROSCOPIO: G0120189840 Marca Omax Resolución de 9,0 Pixeles
LEYENDA:
A.- Polimorfonucleares.
A
FIGURA Nro. 12: Flora Bacteriana.
Fuente: Uranga D. (2017).
TIPO DE MUESTRA: Cervico - Vaginal.
TECNICA DE COLORACION: Solanum betaceum
CAMPO: Flora Bacteriana. AUMENTO: Objetivo 10 x (0,25) Ocular de 10x Total de aumento: 100 x
MICROSCOPIO: G0120189840 Marca Omax Resolución de 9,0 Pixeles
LEYENDA:
A.- Flora Cocoide.
A
Dirección: Laboratorio de Citodiagnóstico Avanzado CITOPAP. C.A RIF: J-40708044-0 Venezuela, Estado Carabobo, Ciudad de Guacara Municipio Guacara, Av.- González Arévalo con cruce con calle Girardot 300 metros de distancia del Centro Comercial Guacara Plaza Nro.: 10.230622, - 67.879046. Teléfono: (0424) 4219080 E-mail: [email protected] Página Web: www.citopap1.wordpress.com
Sello Húmedo de la
Institución
Guacara Estado Carabobo 12 de febrero de 2017
Nro. 022 -A
CONSENTIMIENTO INFORMADO
Yo, Jhean Michael Zerpa González Titular de la Cedula de Identidad Nro. V- 10.637.949,
en mi condición de Vicepresidente Ejecutivo del Laboratorio de Citodiagnóstico Avanzado
CITOPAP C.A. RIF: J-40708044-0 he hablado con Técnico Superior Universitario. David
Alejandro Uranga Leo, Titular de la Cedula de Identidad Nro. V- 20.157.875, también he leído
la información que se me ha entregado y he podido hacer preguntas sobre el estudio, las cuales
han sido respondidas satisfactoriamente, por lo que acepto facilitar las Muestras Biológicas
cervico - vaginales Necesarias para el desarrollo del trabajo de grado titulado: OBTENCION DE
COLORANTE NATURAL A PARTIR DE LA Solanum betaceum. APLICADA EN
MUESTRAS CITOLÓGICAS CERVICO - VAGINALES. LABORATORIO DE
CITODIAGNÓSTICO AVANZADO CITOPAP C.A 2017.
Vicepresidente Ejecutivo:
Citólogo. Jhean Michael Zerpa González
C.I Nro.: V- 10.637.949 MPPS: 119 CNPC: 047
Firma: _______________________
Fecha: 12/02/2017 Hora: 06:30:06 a.m.
.
Investigador: Citólogo. David Alejandro Uranga Leo
C.I Nro.: V- 20.157.875 MPPS: 251 CNPC: 026
Firma del Investigador: _________________________
Fecha: 12/02/2017 Hora: 08:30:06 a.m.
