Sterilisation Produits Et Materiels

STERILISATION PRODUITS ET MATERIELS

GENERALITES

Notions gnrales

Strilisationuvre dun ensemble de mthodes et de moyens visant liminer tous les micro organismes vivants de quelle nature que ce soit et sous quelle forme que ce soit, ports par un objet parfaitement nettoy ou un produit

Mise en

Notions gnrales

Strilisationstriliser

- Sans altration du matriel ou du produit

- Avec un conditionnement permettant le maintien de la strilit - Permanent (tant qu'il n'y a pas rupture de la barrire) - Ncessite de protger le matriel contre la recontamination

Notions gnrales

Etat strile

Absence de micro organismes vivants

Deux objectifs

- Destruction des micro organismes - Conservation de ltat strile tout en respectant lintgrit du matriel ou du produit utilis

Notions gnrales

Nettoyage

limination des souillures et biofilms qui protgent les micromicro-organismes temporaire

Notions gnrales

Dsinfection

rduction de la charge microbienne globale d'un environnement, dun matriel Temporaire Mthodes: nettoyage trempage pulvrisation

Notions gnrales

Dsinfection

Les dsinfectants empche les contaminations - vapeurs ( formol, gaz sulfureux, oxyde d'thylne ) - liquides ( phnols, sulfate de cuivre, de fer, eau de Javel, permanganate de potassium ) - solide ( chaux vive ) Utilisation sur milieux extrieurs: eau, air, sol, objets inanims, dsinfection du matriel plastique utilis en microbiologie

Notions gnrales

Antisepsie

rduction de la charge microbienne sur un individu Peau, muqueuses (prparation une opration chirurgicale..) Temporaire

Notions gnrales

Antisepsie

Les Antiseptiques tuent les cellules vivantes, microorganismes et autres action est quasi instantane: l'intrieur de l'organisme ou sa surface ex: teinture d'iode, mercryl lauryl, permanganate de potassium, eau oxygne ... Utilisation locale: plaies, muqueuses

Notions gnrales

Antibiotiques

Substances d'origine naturelle ou obtenues par synthse chimique Utilisation in vivo

Notions gnralesDcontamination

destruction d'un germe donn dans un environnement Permanent Ex: dcontamination de dchets: produits biologiques prsentant un risque sanitaire pour l'homme et/ou l'environnement dchets hpitaux, laboratoires

Notions gnrales

Incinration

procd terminal de traitement des dchets biologiques/hospitaliers et cadavres animaux prsentant un risque sanitaire. elle doit tre ralise par une structure spcialise

NOTIONS SUR LA STERILISATION

Notions de strilisation

La strilit est labsence de microorganismes viables tat strile = tat dun dispositif mdical exempt de microorganismes

Dfinition de la strilit

Dfinition de la strilisation

soumettre les agents infectieux un procd physique ou chimique en vue de leur limination et strile rendre

Notions de strilisationOpration qui consiste liminer les micromicroorganismes d'un objet, dun milieu et ce, de manire durable En microbiologie, le but de la strilisation est:-

matriser les micro-organismes introduits dans le micromilieu viter la contamination du milieu extrieur et des personnes

-

Nature des agents infectieux- les bactries - les levures et champignons - les virus - les prions

Cibles

Milieux et produits de laboratoire

Milieux de culture Ractifs Vaccins

Cibles

Matriels de laboratoire

Matriels de prlvements: coton, spculum Verrerie Ballons dhmoculture

Cibles

Surfaces

Paillasses Air ambiant Espace de travail

Notions gnrales

Etapes prliminaires- Matriels de laboratoire

Rduire au maximum le nombre initial de micro organismes Prtraitement ou pr dsinfection Nettoyage Conditionnement Strilisation Stockage

Notions gnrales

- Matriels de laboratoire Prtraitement ou dsinfection

Etapes prliminaires

= dcontamination Sur objets et matriels souills pour diminuer le nombre de microorganismes Produit efficace sur les germes, dtergent, non nocif, facile demploi, stable dans le temps Immersion pendant un temps dtermin Rinage leau

Notions gnrales

Etapes prliminaires- Matriels de laboratoire Nettoyage

Machine laver A la main avec un champ propre Suivi dun schage

Notions gnrales

Etapes prliminaires- Matriels de laboratoire Conditionnement

Emballage adapt Maintenir le niveau de propret obtenu aprs nettoyage Permettre le contact avec lagent strilisant Maintenir ltat de strilit jusqu utilisation

Notions gnrales

Etapes prliminaires- Pour les milieux et produits de laboratoires

Pas de prtraitement et de nettoyage Fabrication dans des conditions strictes dasepsie: contamination initiale faible strilisation optimale

TECHNIQUES DE STERILISATION

Strilisation par chaleur scheAgent strilisant: oxygne de lair Oxydation des protines

Strilisation par chaleur sche

Chauffage direct

Effectuer trois ou quatre passages lents des objets striliser dans la flamme bleue du bec Bunsen afin de dtruire sa surface toute matire organique Oui: Oui: objets en verre ( pipettes, baguettes de verre...) certains objets en mtal (anse , pince) Non: Non: plastique objets tranchants instruments de chirurgie dlicats ...


Four Pasteur ou four Poupinel

strilisateurs air chaud Chauffage grce un four classique utilis 180C pendant 1 2 heures 180 140 C pendant 4 heures Spores et germes sont dtruits


Four Pasteur ou four Poupinel

Emballer le matriel dans du papier aluminium, les rcipients et tubes col doivent tre bouchs avec du coton card Oui: Oui: verrerie porcelaine instruments mtalliques Non: Non: objets en matire plastique ou caoutchouc objets dlicats

Strilisation par chaleur humideDnaturation des protines Les agents strilisants sont la vapeur d'eau sature sous pression ou l'eau surchauffe La chaleur associe l'humidit provoque la destruction des germes en ralisant une dnaturation protique par hydrolyse partielle des chanes peptidiques

Strilisation par chaleur humide

bullition

- chauffage de 30 minutes 100C par bullition ou 100 - maintien dans la vapeur d'eau bouillante (bain marie) dtruit toutes les formes vgtatives les spores ne sont pas dtruites: elles peuvent rsister jusqu' 8h30 100C 100 Oui: Oui: milieux albumineux lait glatine solutions concentres de glucides, ...


Pasteurisation

- chauffage une temprature dfinie, pendant une dure elle aussi dfinie, suivi de refroidissement rapide tempratures varient entre 70 et 85 C - rduit de manire significative le nombre de micromicroorganismes dans le produit pasteuris, mais certaines formes rsistent comme les spores Application: industrie alimentaire


Procd UHT

Utilis pour le traitement du lait au cours duquel la chaleur peut atteindre jusqu' 150 C afin de dtruire tous les micro-organismes microOn parle alors de strilisation Application: industrie alimentaire


Appertisation

Conserve Procd qui consiste mettre dans des rcipients que lon rend tanche lair et que lon chauffe ensuite pour dtruire les micro-organismes contaminants microTemprature: 110 120 C mthode de prservation des aliments


Tyndallisation

- procd de strilisation modre qui permet d'liminer du milieu les formes de rsistance des bactries que sont les spores - chauffage discontinu basse temprature : on ne chauffe environ une trentaine de mns toutes les 24h, pendant plusieurs jours, en ne dpassant pas les 60-70C 60-70 dans un bain marie thermostat


Tyndallisation

Les intervalles laisss entre les chauffages permettent donc aux spores de donner des bactries, qui sont limines lors de l'augmentation de temprature suivante De cette faon, on limine progressivement toutes les spores du milieu, ce qui contribue le striliser


Tyndallisation

Oui: Oui: substances thermolabiles (mulsion de jaune d'oeuf, vaccins) prparation de milieux base de srum ou de jaune d' uf solutions glucidiques


Autoclavage

mthode de strilisation la plus efficace strilisation la vapeur appareil utilis: autoclave = rcipient parois paisses et fermeture hermtique conu pour fonctionner sous pression invent par Denis Papin en 1679 utilis et dvelopp par Nicolas Appert amlior par Charles Chamberland en 1879



Autoclavageune enceinte close (vase clos) pour augmenter la pression (surpression) et donc dpasser les 100C 100 d'bullition

cette technique consiste faire bouillir de l'eau dans

Formes vgtatives et formes sporules


Autoclavage

Deux lments: temprature et dure du procd 18 mns 134C; 20mns 121C ou 10mns 134C 134 121 134 - verrerie bouche au coton et recouvert de papier aluminium - rcipients contenant un milieu de culture remplis aux - instruments mtalliques dposs sur un plateau de boites spciales contenant une solution de carbonate de soude 2% contre la rouille ...


Autoclavage

But de lautoclavage Le but est gnralement d'atteindre la strilit microbiologique: Pour qu'un matriel soit considr comme strile, la probabilit thorique d'isoler un germe doit tre infrieure 1% niveau d'assurance de strilit (NAS) rglement par la norme EN 556


Autoclavage

Quatre lments importants : la qualit de la vapeur, qui doit tre sature et vapeur, homogne; la temprature, qui doit tre rgule au plus proche temprature, du barme; la pression suivant la loi de Regnault la qualit de l'eau, la prsence de chlore dans l'eau l'eau, peu endommager l'inox de manire irrmdiable


Autoclavage

Cycle de strilisation Phase 1 : Montes simultanes en pression par injection d'air comprim et en temprature par injection de fluide caloporteur (vapeur ou eau surchauffe) Phase 2 : Phase de palier ou strilisation. La temprature de palier est maintenue pendant un temps donn par le barme de strilisation


Autoclavage

Phase 3 : Phase de refroidissement. Diminution du couple temprature / pression Phase 4 : retour la pression atmosphrique Un cycle d'autoclave une dure variable en fonction du barme appliqu et du type d'objet striliser


Autoclavagematriel en caoutchouc verrerie instruments de prlvement strilisation du matriel aprs son utilisation

Oui: Oui: Milieux de culture

Non: Non: liquides dlicats ( milieux albumineux, lait, glatine)

Strilisation par filtration

Dfinitiontravers un filtre dont les pores ont un diamtre dtermin ; les micro-organismes sont trop gros micropour passer et sont donc retenus par le filtre

procd qui consiste faire passer un liquide


Techniquedeux solutions:

Pour forcer ce liquide traverser le filtre on utilise - mise en pression du liquide par l'intermdiaire d'un piston - aspiration du liquide en crant par exemple une enceinte dpressurise de l'autre ct du filtre


Types de filtres

- Bougies de type Chamberland : tubes fond arrondi en porcelaine avec des pores quelques m 1/10me de m - Disques : en verre frit de porosit de 150 1 m - Membranes: plastiques minces comportant des Membranes: pores dont la taille varie de 8 0.01 m En bactriologie: filtres dont les pores 0.45 m retiennent peu prs tous les microorganismes en dehors des virus

Strilisation par filtrationOui: Oui: produits thermolabiles: certains acides amins aromatiques, vitamines, srums, solutions hydrolysables, solutions glucidiques hormones de croissance, acides nucliques une bonne partie des antibiotiques


Cas des filtres HEPA

Sterilisation Produits Et Materiels

Documents

Transcript of Sterilisation Produits Et Materiels