Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Química

Laboratorio de Química Orgánica 1

Práctica 7: Cromatografía en columna Integrantes:

Ferrer Zaldívar José Luis Rodríguez Cruz Laura Mariela

Observaciones experimentales.

En esta práctica llevamos a cabo la técnica de cromatografía en columna para la

purificación del ácido acetilsalicílico de una pastilla de aspirina.

Después de armar la columna con la sálica gel se obtuvieron los eluatos de los

cuales se realizaron una cromatografía en capa fina para determinar en que eluato

comenzábamos a obtener el compuesto que queremos purificar, en este caso el

ácido acetilsalicílico.

En cada coromatoplaca se colocó un testigo y se pusieron muestras de 3 eluatos

para hacer más eficiente el proceso de determinar el eluato que contenía al ácido

acetilsalicílico, se detectó que el ácido acetilsalicílico comenzó a salir a partir del

eluato número 6 y detuvo su aparición en el eluato número 11.

Cromaplacas utilizadas

Pt 1 2 3 Pt 4 5 6 Pt 7 8 9 Pt 10 11 12

Después de obtener identificados los eluatos en los cuales de detecto ácido

acetilsalicílico se realizó una destilación simple para separar por completo el ácido

acetilsalicílico de la pastilla de aspirina.

Discusión de los resultados

Algunos constituyentes de la muestra se adsorben más fuertemente, otros se

disuelven más fácilmente en la fase liquida y se eluyen más fácilmente. La retención

se puede explicar en base a la competencia entre el soluto a separar y la fase móvil

por adsorberse a los centros activos polares de la fase estacionaria. Así las

moléculas de soluto se encuentran adsorbidas en la ase estacionaria y a medida

que se produce la elución van siendo desplazados por la fase móvil. La retención y

la selectividad en la separación depende de la polaridad del compuesto,

determinada por los grupos funcionales presentes. Los solutos más polares más

retenidos puesto que se adsorben más firmemente a los centros activos de la fase

estacionaria, mientras que los no polares se eluiran con mayor facilidad. También

depende de la naturaleza del disolvente, para un mismo compuesto, un aumento en

la polaridad del disolvente facilita su desplazamiento en la placa.

Cuestionario final

. 1. Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografía de adsorción.

Capa fina: Identificación de sustancias, separación de aminoácidos. Columna: Separación de colorantes, proteínas, separa mayores cantidades de producto principal.

2. Diga cuál es la diferencia entre una cromatografía en capa fina y la de columna.

En la CCF la separación se realiza por distancias mientras que en columna se hace

por tiempos o volúmenes. En cromatografía en columna la separación de varias

muestras se realiza de forma secuencial, separando la sustancia en fracciones o

eluatos y en CCF por el contrario, la separación de varias muestras se realiza de

forma simultánea, siendo todas ellas sometidas al mismo tiempo al proceso

separativo.

3. Qué debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para un compuesto

que se purificara en cromatografía en columna?

Escoger al eluyente en base a la polaridad que tenga la sustancia, es decir, que

sus polaridades sean afines, para que el adsorbente, como la sílica gel que es

muy polar, no retenga a la muestra.

Para esto se hacen pruebas de cromatografía en capa fina.

4. ¿Por qué es necesario realizar una cromatografía en capa fina a los eluatos

obtenidos de la columna cromatográfica?

Para poder identificar en qué fracción de la cromatografía realizada o en qué eluato

se encuentra la sustancia que intentamos separar del resto, para posteriormente

destilar la disolución y secar el producto que se obtenga.

5. Escriba una lista de eluyentes utilizados en cromatografía en columna en

orden de polaridad creciente. Anote su bibliografía. 1. Hexano

2. Tolueno

3. Cloroformo

4. Diclorometano

5. Acetona

6. Acetato de etilo

7. Etanol

8. Metanol

9. Agua

Bibliografía: DOMINGUEZ, Xorge Alejandro/ Experimentos de Química

Orgánica/ Editorial Limusa/ 1ª Edición/ México 1980.

Estructura de los reactivos

Acetato de etilo

Conclusiones

En esta práctica se realizó la separación por columna de una pastilla de aspirina,

para obtener fracciones (eluatos) colectadas y después por cromatografía en capa

fina compararlas con una muestra testigo para poder identificar los eluatos que

contenían ácido acetilsalicílico y por destilación simple obtener la muestra deseada.

La cromatografía por columna se emplea para la separación de mezclas o

purificación de sustancias, reteniendo en su fase estacionaria (en este caso la sílica

gel) a algunos compuestos por su propiedad de adsorción, por la que a través de

ella se hará pasar una corriente de disolventes o mezcla de disolventes (fase móvil:

eluyente) que arrastrará a los compuestos constituyentes de la mezcla, haciéndoles

avanzar a través de la columna. Este tipo de cromatografía se utiliza para saber en

qué recipientes se encuentra un componente buscado y para determinar la cantidad

de este cuantitativamente, contrario a la cromatografía por capa fina donde solo se

puede hacer un análisis cualitativo.