MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS

Elemento %PS

(E. coli) Función Fuente

Macronutrientes

C

O

N

H

P

Micronutrientes

S

K

Mg

Ca

Fe

Elementos traza

Mn

Co

Cu

Zn

Mo

Na, Cl

(95%)

50

20

14

8

3

(3.2%)

1

1

0.5

0.5

0.2

(1.8%)

Compuestos orgánicos (COr)

COr, aceptor de e- en la CR

Proteínas, ácidos nucleicos, coenzimas

COr

Acidos nucleicos, fosfolípidos, coenzimas, ATP

Metionina, Cisteína, varias coenzimas

Principal catión inorgánico, cofactor

Cofactor (ATP), pared celular, membrana, clorofila

Cofactor, endosporas de bacterias

Cofactor (citocromos)

Cofactor (reemplaza al Mg)

Vitamina B12

Enzimas especiales (ej. citocromo oxidasa)

Enzimas especiales (ej. ADN polimerasa)

Reacciones de asimilación de nitrógeno

Todos requieren, pero halófilos mucho

COr, CO2

O2, H2O, COr

COr, NH3, NO3-, N2

H2O, COr, H2

PO4---

SO4--, H2S, S°, COr

Sales de potasio

Sales de magnesio

Sales de calcio

Sales de hierro

Normalmente

contenidos en el agua

y otros ingredientes

Requerimientos Nutritivos

Composición química de la célula microbiana (E. coli)

Compuesto %PS Función

Macromoléculas totales

Proteínas

Polisacáridos

Lípidos

Lipopolisacáridos

ADN

ARN

Monómeros totales

Aminoácidos

Azúcares

Nucleótidos

Iones Inorgánicos

96

55

5

9.1

3.4

3.1

20.5

3

0.5

2

0.5

1

Estructuras, Enzimas

Reserva a corto plazo

Reserva a largo plazo, membrana (fosfolípidos)

Pared celular

Información genética

Síntesis de proteínas

Proteínas

Polisacáridos

Acidos nucleicos

Cofactores

Bacterias quimioautótrofas, que oxidan S

S en polvo

(NH4)2SO4

K2HPO4

CaCl2

MgSO4.7H2O

FeSO4

Agua destilada

10g

0.4g

4g

0.25g

0.5g

0.01g

Hasta 1000 ml

Material Característica Valor nutritivo Cantidad

Extracto de carne

Peptona

Agar

Agua destilada

Acuoso de carne de res

sin grasa

Degradación parcial de

material proteico

Polisacárido complejo de

algas rojas (ficoeritrina)

-

Carbohidratos, N, vitaminas

y sales

N, vitaminas y carbohidratos

Ninguno (solidificante)

Ninguno (solvente)

3g

5g

15g

~1000ml

Medio sintético

Agar Nutritivo

Expulsión de aire Expulsión de vapor

Temperatura Presión

Temperatura

Presión Tiempo

Programación

Esterilización por calor: Autoclave

Esterilización por Filtración

Esterilización por Radiaciones

Equipos y Materiales para el Cultivo de Microorganismos

Medio de cultivo

Esterilizar asa luego de

cada juego de estrías

Cultivo en Estrías

Medio de cultivo

Incubación

Difusión en Placa

Suspensión

microbiana

Alícuota

Incubación

Medio de cultivo

con agar, estéril y

líquido

Caja petri estéril

Mezclar bien

Vertido en Placa

Almacenamiento de cultivos

Corto tiempo Largo tiempo

Liofilización

Temperatura

Ve

loc

ida

d d

e C

rec

imie

nto

Mínima Máxima

Optima

Membrana pierde

fluidez; transporte muy

lento; no hay

crecimiento

Desnaturalización

proteica; membrana

colapsa; lisis térmica

Velocidad de reacciones

enzimáticas en

constante aumento

Reacciones enzimáticas

a máxima velocidad

Requerimientos de Temperatura

Requerimientos de Oxígeno

Aerobio Anaerobio

facultativo

Anaerobio

obligado

Anaerobio

aerotolerante Microaerobio

Cultivo de Aerobios Cultivo de Anaerobios obligados