HEMOGRAMA DE SHILLING

HEMOGRAMA DE SHILLINGANALISIS CLINICO I

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICAE. A. P. DE FARMACIA Y BIOQUMICA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE BIOQUIMICA

AO ACADMICO 2015

SEMESTRE ACADMICO:2015 - I

ASIGNATURA:ANLISIS CLINICO I

PRCTICA N4:HEMOGRAMA DE SCHILLING

MESA 2: DA: VIERNES HORARIO: 10 A.M. 2 P.M.

ESTUDIANTE: QUIONEZ SOLIS LIZET LUZ

PROFESOR: DR. JUAN MANUEL PARREO TIPIAN AO: 2015

INTRODUCCINLa frmula leucocitaria se define como el recuento porcentual de las diferentes subpoblaciones leucocitarias. El hemograma incluye la frmula leucocitaria y la determinacin de otras magnitudes celulares sanguneas, tales como recuento de leucocitos, hemates y plaquetas, concentracin de hemoglobina, hematocrito y volumen medio de los hemates entre otras. La determinacin de los parmetros hematolgicos bsicos mediante contadores hematolgicos especializados, junto al examen morfolgico de los elementos sanguneos en sangre perifrica, son de gran utilidad para la deteccin de alteraciones cuantitativas y cualitativas de dichas clulas sanguneas, lo que contribuye al diagnstico de enfermedades hematolgicas y no hematolgicas.El trmino hemograma tiene su origen en la clasificacin de los neutrfilos en sub grupos en funcin del nmero de lobulaciones realizada por J Ameth en el ao 1904. Posteriormente, en 1930 J. Schilling defini la desviacin a la izquierda del hemograma como aumento de los neutrfilos juveniles o en banda, as como el procedimiento para el recuento de las diferentes subpoblaciones leucocitarias. Por ello, la frmula leucocitaria realizada a 100 elementos se conoce con el trmino de Hemograma de Schilling. A partir de 1980, con la llegada de los analizadores hematolgicos automatizados, que determinan otras magnitudes importantes de las clulas sanguneas (como concentracin de las diferentes clulas sanguneas y de hemoglobina [Hb], hematocrito [Hto], volumen corpuscular medio [VCM], etc., se ha denominado hemograma a toda la informacin que proporcionan estos instrumentos.El hemograma, junto al recuento diferencial manual de los diferentes leucocitos o frmula leucocitaria, es una de las pruebas diagnsticas ms solicitadas, dado que forma parte del estudio inicial de la gran mayora de pacientes y tiene una gran utilidad diagnstica no slo en la hemopatas, sino tambin en muchos otras enfermedades. (1) Las causas ms frecuentes del hallazgo de una leucocitosis son los procesos infecciosos e inflamatorios agudos y crnicos. Determinadas infecciones muy graves, como neumona, meningitis o tuberculosis, pueden incluso dar lugar a lo que se denomina como reaccin leucemoide. En una reaccin leucemoide se observa: una leucocitosis (cifra de leucocitos superior a 20 X 109/l), un aumento del nmero absoluto de neutrfilos y una desviacin a la izquierda y/o mielemia (presencia en sangre perifrica de precursores granulocticos, como metamielocitos, mielocitos, promielocitos, e incluso algn elemento blstico).(2)

I. OBJETIVOS Determinacin de la morfologa de las clulas sanguneas de una muestra de sangre. Determinar la frmula leucocitaria. Diagnosticar posibles hemopatas u otras enfermedades.

II. MARCO TEORICOLa frmula leucocitaria se dene como el recuento porcentual de las diferentes subpoblaciones leucocitarias. El hemograma , conocido usualmente como Cell Blood Count o CBC, por sus siglas en ingls, es una prueba comn de sangre que incluye la frmula leucocitaria y la determinacin de otras magnitudes celulares sanguneas, tales como recuento de leucocitos, hemates y plaquetas, concentracin de hemoglobina, hematocrito y volumen medio de los hemates entre otras. La determinacin de los parmetros hematolgicos bsicos mediante contadores hematolgicos especializados, junto al examen morfolgico de los elementos sanguneos en sangre perifrica, son de gran utilidad para la deteccin de alteraciones cuantitativas y cualitativas de dichas clulas sanguneas, lo que contribuye al diagnstico de enfermedades hematolgicas y no hematolgicas. (2)El recuento diferencial manual o estudio citolgico de la sangre perifrica sigue siendo en la actualidad una herramienta imprescindible para el diagnstico. La sangre constituye un udo orgnico fcilmente accesible, por lo que es el punto de partida ms idneo para el estudio de las enfermedades y procesos hematolgicos que tienen expresin perifrica.LEUCOCITOSPORCENTAJE

NEUTRFILOSCAYADO3-5%

SEGMENTADO55-65%

EOSINFILOS2-4%

BASFILOS0-1%

LINFOCITOS20-25%

MONOCITOS3-8%

VALORES NORMALES DE LEUCOCITOS

Granulocito neutrfilo

En individuos sanos, representan alrededor del 1% de la sangre. 1 El recuento normal de glbulos blancos es por lo general entre 4000 y 11000/L para un adulto y entre 9000 y 30000/L para un recin nacido. El hemograma completo es un anlisis de sangre que incluye el recuento de glbulos blancos en general. La proporcin de leucocitos en la sangre se puede utilizar como un diagnstico de muchos tipos de enfermedades.LEUCOCITOS ALTOS. Es el aumento en el recuento total de leucocitos. Las leucocitosis ms frecuentes son las neutroflicas, seguidas de las linfocitosis. En nios suelen ser secundarias a infecciones, frmacos y enfermedades sistmicas. El aumento desproporcionado y acompaado de importante desviacin izquierda se llama reaccin leucemoide y a veces puede ser difcil de diferenciar de una leucemia. Las leucocitosis persistentes no etiquetadas deben ser derivadas al hematlogo para estudio.LEUCOCITOS BAJOS. Estas clulas se reducen en nmero y puede ser debido a una enfermedad, exposicin a la radiacin, o deficiencia de la mdula sea. Esta condicin se conoce como leucopenia. TIPOS DE LEUCOCITOSHay cinco tipos diferentes de leucocitos, cada uno con funciones especficas. Se pueden dividir en dos tipos principales: los granulocitos y agranulocitos.GRANULOCITOSLos granulocitos tienen pequeos grnulos de material dentro de sus membranas celulares, que desempean un papel importante en su funcin, ya que las clulas pueden liberar los grnulos para matar las bacterias, hongos y otros invasores. Hay tres tipos de granulocitos: eosinfilos, neutrfilos y basfilos. Eosinfilos. Estn diseados para atacar a los parsitos, y tambin desempean un papel en las reacciones alrgicas. Neutrfilos. Son los ms abundantes y son el primer tipo de clula inmune que responde y llega al sitio de la infeccin. Basfilos. Representan menos del uno por ciento. Desempean un papel en la respuesta inmune. AGRANULOCITOSLos agranulocitos carecen de grnulos en sus membranas celulares. Los agranulocitos pueden ser divididos en linfocitos y monocitos. Linfocitos. Constituyen alrededor del 20-40% del recuento total de leucocitos, e incluyen los linfocitos B, linfocitos T y clulas NK.Los linfocitos pueden defender el cuerpo contra las infecciones, ya que distinguen las clulas del propio cuerpo de las extranjeras. Monocitos. Conforman del 2 al 9% de la cantidad de glbulos blancos, y estn diseados para presentar antgenos a los linfocitos para estimular la respuesta inmune. Estas clulas eventualmente maduran a macrfagos, leucocitos especializados que tragan material extrao para neutralizarlo. 3 SIGNOS DE ALARMA DEL HEMOGRAMAExisten ciertos indicadores o signos de precaucin que deben tenerse en cuenta en un hemograma para los que est indicado la realizacin de la valoracin morfolgica de los elementos formes de la sangre.Algunos hallazgos dentro de un hemograma y su interpretacin diagnstica, son: Ante la deteccin de una leucocitosis junto a plaquetopenia y anemia debe descartarse una hemopata. Una leucocitosis acompaada de trombocitosis sugiere un posible sndrome mieloproliferativo crnico. El hallazgo de una leucopenia aislada puede ser el primer signo de una enfermedad hematolgica maligna (leucemia aguda o sndrome mielodisplsico). Frecuentemente el diagnstico de una leucemia linftica crnica se realiza por el hallazgo casual de un aumento de linfocitos en sangre perifrica (>5 x 10/L). Los leucocitos suelen registrar cifras superiores a 10 x (10)9 /L y, en ocasiones, pueden ser muy elevados (300 x (10)9/L). En la leucemia mielomonoctica crnica se observa una monocitosis superior a 1 x (10)9/L en sangre perifrica. Una plaquetopenia aislada puede ser el nico signo anmalo en el hemograma de un paciente con malaria.1

III. FUNDAMENTO DE LOS PROCEDIMIENTOSEl HEMOGRAMA DE SCHILLING llamado tambin frmula leucocitaria o recuento diferencial, utiliza la TINCIN DE WRIGHT. Esta tcnica de tincin deriva del mtodo de Romanowsky que se utiliza principalmente para el coloreo de un frotis sanguneo. Esta tcnica nos ayuda de diferenciar cualitativamente y cuantitativamente los principales elementos formes de la sangre.El fundamento de la coloracin se basa en el colorante Wright, que es un colorante de tipo policromtico es decir, que est compuesto de dos colorantes; el primero un colorante aninico que es la eosina y el segundo un colorante catinico que es el azul de metileno, ambos disueltos en metanol. Estos colorantes se encuentran en estado no ionizado mientras se mantienen en solucin alcohlica, al agregar el agua destilada de ionizan y se unen selectivamente a los componentes celulares precipitando como sales insolubles.La base de la coloracin es que los componentes celulares de naturaleza aninica (cida) presentan tendencia a unirse a los tintes catinicos, generando como resultado una coloracin en varias tonalidades de azul. A estos componentes se les denomina BASFILOS (ADN, mitocondrias, ribosomas, etc.).Por el contrario los componentes celulares de naturaleza catinica (bsico) se unen selectivamente al tinte cido que es la eosina, dando como resultado una coloracin en varias tonalidades de anaranjado y rojo. A estos componentes se les denomina ACIDFILOS o EOSINFILOS (hemoglobina, etc.)Pero existen aquellos componentes celulares que presentan afinidad por ambos tipos de colorantes, a estos elementos se les denomina NEUTRFILOS, los cuales se tien en diferentes tonalidades de violeta.

COLORACIN DE WRIGHT: Colorante de Wright 0.3 grAzul de metileno + eosina Tiozina eosinato Metanol 97 ml Glicerol 3 ml

Tabla: Componentes del colorante de Wright.

COLORACIONES OBTENIDAS DE LOS COMPONENTES CELULARES

NCLEOSTonalidades de color azul a prpura negro.

CITOPLASMA DE LAS CLULAS MADURASColor violeta muy plido o marrn muy plido

ERITROCITOS RICOS EN HEMOGLOBINATonalidades de color rosado y beige.

GRNULOS DE NEUTRFILOSColores entre violeta y marrn.

GRNULOS DE EOSINFILOSColor anaranjado.

GRNULOS DE BASFILOSColores entre azul y negro.

GRNULOS DE LINFOCITOSColor prpura.

Las coloraciones obtenidas son dependientes del pH de las soluciones de tincin y de las soluciones de lavado, lo cual podra generar variaciones en las tonalidades. Cuando el pH final que se tiene es cercano a pH =5, presente una coloracin ms verdosa y en cambio cuando el pH es cercano a 9, se dar un tono rojizo. Para prevenir estos efectos se suelen utilizar soluciones amortiguadoras de pH neutro para preparar las soluciones de tincin y las soluciones de lavado.4.5

RESULTADOSPACIENTE: LIZET QUIONEZ SOLISHEMOGRAMA DE SCHILLINGI. FORMULA RELATIVA: %Formula Leucocitaria o Recuento diferencial.LEUCOCITOSPORCENTAJE

NEUTRFILOSCAYADO4%

SEGMENTADO58%

EOSINFILOS2%

BASFILOS0%

LINFOCITOS30%

MONOCITOS6%

II. FRMULA ABSOLUTA: Recuento de Leucocitos x % (Formula Relativa) 100

Los leucocitos totales fueron de 6800 / mm3LEUCOCITOSFORMULA ABSOLUTA

NEUTRFILOSCAYADO 6800 X 4 = 272 mm3 100

SEGMENTADO 6800 X 58 = 3944 mm3 100

EOSINFILOS 6800 X 2 = 136 mm3 100

BASFILOS 6800 X 0 = 0 mm3 100

LINFOCITOS 6800 X 30 = 2040 mm3 100

MONOCITOS6800 X 6 = 408 mm3 100

CONCLUSIONES Las morfologas de las clulas sanguneas demostraron ser normales ya que son parecidas a las formas que la literatura menciona. Se determin la formula Leucocitaria , encontrndose valores Normales para los leucocitos tanto granulocitos como agranulocitos Debido a la obtencin de Valores Normales en la formula leucocitaria puedo decir que la paciente se encuentra aparentemente sana libre de Hemopatas u otras enfermedades

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Merino A. Criterios para la realizacin de la frmula leucocitaria manual, Servicio de Hemoterapia-Hemostasia. . Universidad de Barcelona. Espaa 2010; 13: 49-582. Merino A. Interpretacin de resultados: Valores normales del hemograma. Servicio de hemoterapia-hemostasia. Universidad de Barcelona. Espaa 2008; 1: 42-43.3. Boletn educativo para el paciente. National Institutes of Health Clinical Center.4. Esau L. Hernndez M. Las tinciones bsicas en el laboratorio de microbiologa. Investigacin en discapacidad 2014; 3; 1 :10-185. TINCIN DE WRIGHT . (Accesado el 18 de Abril del 2014 ) . Disponible en : https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigmaaldrich/docs/Sigma/General_Information/1/insert_es_ws.pdf