aula marcadores tumorais 2006

11

Rosario Hirata FCFUSP 2006 1

��

Bioquímica Clínica FBC0512

Rosario Hirata FCFUSP 2

��

��

Cancer Site or Type New Cases in 2001Prostate 198,100Breast 192,200Colorectal 135,400

Lymphoma 63,600Uterus 38,300Pancreas 29,200Ovarian 23,400Myeloma 14,400

Neuroendocrine 36,000Germ Cell 8,000 AACC 2001

22


��

� Modelo de estágios múltiplos

1. Lesão de DNA inicial - carcinógenos• radiação, produtos químicos, vírus e outros

2. Quebras e rearranjos cromossômicos, replicação gênica

3. Seleção de células mutantes - clonalidade• falha no controle do crescimento e/ou diferenciação celular• perda da estabilidade cromossômica• mudança no perfil de expressão gênica

• reativação de proto-oncogenes

• inativação de genes supressores de tumor


��

Célula com alteração genética

Hiperplasia(benigna)

Displasia(benigna)

Câncer in situ(benigno)

vaso sangüíneo

Câncer invasivo(maligno)

Estágios

(1) Iniciação (2) Promoção (3) Progressão

33


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�!� � "��#�� $��

www.sgpgi.ac.in/path/seminars/ccastage.html

44


��%�� "� �� $��

� Modified Duke A

• The tumor penetrates into the mucosa of the bowel wall but no further.

� Modified Duke B

• B1: tumor penetrates into, but not through the muscularis propria (the muscular layer) of the bowel wall. B2: tumor

penetrates into and through the muscularis propria of the bowel wall.

� Modified Duke C

• C1: tumor penetrates into, but not through the muscularis propria of the bowel wall; there is pathologic evidence of

colon cancer in the lymph nodes.

• C2: tumor penetrates into and through the muscularis propria of the bowel wall; there is pathologic evidence of

colon cancer in the lymph nodes.

� Modified Duke D

• The tumor, which has spread beyond the confines of the lymph nodes (to organs such as the liver, lung or bone).

www.oncologychannel.com/coloncancer/staging.shtml#mod


�!� �� $��

www.sgpgi.ac.in/path/seminars/ccastage.html

55


�� $��

� � ��&��&��

� Tumor• T1: Tumor invades submucosa.

T2: Tumor invades muscularis propria. T3: Tumor invades through the muscularis propria into the subserosa, or into the pericolicor perirectal tissues. T4: Tumor directly invades other organs or structures, and/or perforates.

� Node• N0: No regional lymph node metastasis.

N1: Metastasis in 1 to 3 regional lymph nodes. N2: Metastasis in 4 or more regional lymph nodes.

� Metastasis• M0: No distant metastasis.

M1: Distant metastasis present.



�� '�� (��

� Stage I: T1 N0 M0; T2 N0 M0

Cancer has begun to spread, but is still in the inner lining.

� Stage II: T3 N0 M0; T4 N0 M0

Cancer has spread to other organs near the colon or rectum. It has not reached lymph

nodes.

� Stage III: any T, N1-2, M0

Cancer has spread to lymph nodes, but has not been carried to distant parts of the body

� Stage IV: any T, any N, M1

Cancer has been carried through the lymph system to distant parts of the body. This is

known as metastasis. The most likely organs to experience metastasis from colorectal

cancer are the lungs and liver.


66


��)��%��*+��,-��

� Fatores

• tipo de tumor

• tecido afetado

• estágio de desenvolvimento do tumor

� Exemplos

• TGI - obstrução, hemoptise, sangue nas fezes

• Pulmão - hipóxia, dor torácica, sintomas neurológicos


�.�,��*��,�/��,

� Detecção (triagem)

� Confirmação

� Classificação e estadiamento

� Monitoramento da terapia

77


�� (��*��(��Local Teste

Bexiga Análise citológica da urina

Mamas Mamografia, exame físico, auto-exame

Colo uterino Papanicolaou, exame pélvico

Colon e reto Pesquisa de sangue nas fezes, sigmoidoscopia

Pulmões Raios-X, citologia do escarro

Cavidade oral Exame visual

Próstata PSA, apalpação digital pelo reto

Pele Exame visual

Estômago Endoscopia, exame citológico e pesquisa de sangue nas fezes

Kaplan LA et al, 2003


�� ,

� Substância encontrada em grande quantidade no sangue e

outros líquidos biológicos ou tecidos e pode indicar a

presença de um tipo de câncer

� Substância produzida por células tumorais em quantidade

anormal ou em condições anormais

88


0��1��

ANO AUTOR MARCADOR

1846 H. Bence-Jones Proteína de Bence-Jones

1928 W.H. Brown Sindrome hormônio ectópico

1930 B. Zondek hCG

1932 H. Cushing ACTH

1949 K. Oh-Uti Deleções dos antígenos degrupo sanguíneo

1959 C. Markert Isoenzimas

1963 G.I. Abelev AFP

1965 P. Gold & S. Freeman CEA

1969 R. Heubner & G. Todaro Oncogenes

1975 H. Kohler & G. Milstein Anticorpos monoclonais

1980 G. Cooper, R. Weinberg & M. Bishop Sondas de oncogene etransfecção

1985 H. Harris, R. Sager & A. Knudson Gene supressor


�� ,��,

� Ter ensaio de fácil execução e de custo baixo

� Ser indicador específico e sensível do tumor

� Concentração plasmática do marcador ter correlação com a massatumoral (volume do tumor)

� Ser indicador útil no prognóstico e no monitoramento da terapia

� Ter valor preditivo de recorrência

� Possibilitar a detecção de estágios muito precoces do tumor


99


�,��

CLASSE EXEMPLOS USO

Substâncias endógenas

Hormônios, enzimas, poliaminas e outros

Confirmação, diagnóstico e monitoramento

Proteínas expressas na vida fetal

Proteinas oncofetais, antígenos de superfície, enzimas

Monitoramento e prognóstico

Receptores Receptor de estradiol (cancer de mama) receptor de andrógenos (cancer de prostata)

Prognóstico e tratamento

Função celular ou orgânica modificada

Gama-GT diagnóstico


��-��%��

• Antígeno carcinoembrionário (CEA)

• Alfa-fetoproteína (AFP)

• Gonadotrofina coriônica humana (hCG)

• Antígeno SCC (SSCA)

• carcinoma de células escamosas

1010


��-��%��Marcador Natureza Tipo de Câncer

AFP Glicoproteína, 70 kDa(4% carboidrato)

Hepatocelular, célulasgeminativas (nonseminoma)

CEA Glicoproteína, 22 kDa(50% carboidrato)

Coloretal, gastrointestinal,pancreático, pulmonar, mama

SSCA Glicoproteína, 44-48 kDa Cervical, pulmonar, pele,cabeça e pescoço

hCG Glicoproteína Células germinativas

Tietz, 2001


��-��%�� Imunohistoquímica Sorologia

Classificação WHO

AFP hCG AFP hCG Comentários

Seminoma - +/- - +/- hCG em células gigantes

Carcinoma embrionário

+ + +/- +/- hCG em células gigantes

Tumor de saco vitelino

+ - +/- -

Coriocarcinoma - + - +

Teratoma - - - -


1111


� � ��2, ,�� .��

Marcadores tumorais no prognóstico

PROGNÓSTICO MARCADORES

Bom LD < 1,5 x N

AFP < 1.000 ng/mL

hCG < 1.000 ng/mL (5.000 mU/mL)

Intermediário LD 1,5-10 x N

AFP 1.000-10.000 ng/mL

hCG 1.000-10.000 ng/mL (50.000 mU/mL)

Ruim LD > 10 x N

AFP > 10.000 ng/mL

hCG > 10.000 ng/mL (50.000 mU/mL)


�� ,��/0�' ��3�� (1�� 4�� 3�&�

(�� ,-��(1��5��6��

Limite de referência superior

Jun Set Dez Mar Jun Set Dez1995 1996

AFP

(ng.

ml),

hCG

(U/L

)

Sintomas clínicos

Cirurgia

Cirurgia Sem sintomas clinicos

RecorrênciahCG

AFP

1000

100

10

1212



1313


',��(��-�� -��

Marcador Antígeno Anticorpo Tipo de Cancer

CA 125 Glicopt, > 200kDa OC 125 Ovário, endométrio

CA 15-3 Glicopt, > 400 kDa DF3 e 115D8 Mama, ovário

CA 549 Glicopt, ↑PM BC4E549 Mama, ovário

CA 27.29 Glicopt, ↑PM B27.29 Mama

MCA Glicopt, 350 kDa b-12 Mama, ovário

DU-PAN-2 Mucina, 1000 KDa DU-PAN-2 Pâncreas, ovário,gastrointestinal,pulmonar


http://pathology2.jhu.edu/ovca/typesca.cfm

��.7��

1414


��89:��2��)�� ,-�� (��,��,�.��

� No período pós-operatório

• aumenta 25% durante a quimioterapia inicial

� Recorrência: 20% das pacientes

� Valor preditivo de progressão após o tratamento

• 73% pacientes tem aumento de CA125 sérico

Meyer T et al Br. J. Cancer 82:1535, 2000


�� .7��

�� *+��89: �� ;<��

CA 125

CEA

99% de controles sadios

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Uni

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s C

A 1

25/m

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ngC

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/mL

8/97 12/97 4/98 8/98 12/98 8/2002

1515


��8:=>��9?496��

� CA 15-3 e CA 27.29 são marcadores restritos ao

monitoramento de pacientes com cancer de mama com

doença avançada

� A utilidade clínica nos estágios iniciais da doença ainda

precisam ser confirmados


�� :@6�� (��

CA

-549

(kU

/L)

MesesN

Pacientes com câncer de mama submetidas a mastectomia e quimioterapia

Paciente com possível recorrênica

Paciente estável

Paciente com recorrência evidente

Tietz Fundamentals, 2001

1616


',��(��-�� -��

Marcador Anticorpo Tipo de Cancer

CA 19-9 19-9 Pâncreas, gastrointestinal, fígado

CA 19-5 19-5 Gastrointestinal, pâncreas, ovário

CA 50 C50 Pâncreas, gastrointestinal, colon

CA 72-4 B27.3, cc49 Ovário, mama, gastrointestinal,colon

CA 242 C242 Gastrointestinal, pâncreas


��86��86��86��86====6666

� É produzido por adenocarcinomas de colon, pancreas, estomago, vesicula, ovário e pulmão.

� Marcador de monitoramento da terapia

Ni XG et al, Eur J Surg Oncol. 31:164, 2005

1717





1818




Enzima Tipo de tumor Ensaio

Amilase Pâncreas atividade

ALP Osso, fígado, leucemia, sarcoma atividade

ALP placentária Ovário, pulmão, gastrointestinal, seminoma e outros

atividade

CK-BB Próstata, pulmão, mama, ovário, colon atividade

GGT Fígado atividade

PAP Próstata Atividade/EIE

PSA Próstata EIE

LD5 Metástase hepática eletroforese

LD2 e LD3 Linfomas eletroforese

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1919



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Com metastase Sem metastase

Núm

ero

de in

diví

duos

2020



2121


��B �� 7��=��(��-%��

� Serina-protease (enzima quimiotripsina-like)

� Glicoproteína secretada pelas células epiteliais da próstata

� Cliva seminogelinas – liquefação do semem

� Aumentada no líquido seminal [106 x concentração do plasma]

� Expressão regulada por androgenos e progestinas

� Utilidade clínica: diagnóstico/triagem, prognostico, monitoramento da terapia


��(��7��

� Concentração plasmática < 4,0 ng/mL

� > 20% homens tem ca prostatico com PSA < 4,0 ng/mL

� > 50% homens com BPH tem PSA > 4,0 ng/mL

� 40% cancer prostaticos estão confinados na prostata

quando detectados

2222


��%��

� Isoformas A e B

• PSA intacto (70%),

• Tem atividade enzimática

• liga-se rapidamente a ACT, AMG

� Isoformas C, D, E

• PSA clivado (30%)

• Sem atividade enzimática

• Liga-se lentamente a AMG


��/�,��,��

��

� Primeira geração – 0,2 ng/mL

� Segunda geração – 0,03 ng/mL

� Terceira geração – 0,003 ng/mL (immulite, Elecsys)

2323


��,��.�,= ��

www.aacc.org


C�,��(��,�� ,��-.�,

� Avalia doença residual após prostectomia

� Reconhecimento precoce do aumento de PSA

� Diferencia a doença agressiva da doença de progressão

lenta

� Possibilita intervenção terapeutica precoce

2424


C�,��(��1��

(��=�(��1��

� PSA total < 10 mg/L• Paciente provavelmente tem doença

localizada que é potencialmente curávelcom cirurgia

� PSA total > 10 mg/L• Está correlacionado com outros

indicadores prognósticos desfavoráveis(nódulos +; margens +; penetraçãocapsular; metástase distante, envolvimento de vesicula seminal)

Catalona & Smith. J Urol 1998; 160:2428


��,�= �� (1��(1��(1��(1��

� PSA diminui (abaixo de 0,1 mg/L) - remissão

� PSA não diminui (abaixo 0,1 mg/L) - doença residual

� PSA aumenta (acima de 0,1 mg/L) - paciente teve umarecorrencia local ou distante

� PSA aumenta (0,5 a 2,0 mg/L) - requer intervençãoterapêutica (radioterapia, antiandrogenos, ou outra)* o monitoramento com PSA ultrasensível é necessário

2525


��,�.��D��,

� baixo no cancer de prostata

� alto nas doenças prostaticas benignas

� não se correlaciona com o volume da BPH

� depende dos ensaios utilizados


Bunting et al Clin Biochem 1999;32:591-594

3��%�� 7�� (��7��

� Isoenzima da próstata

� Tem baixa especificidade diagnóstica

• Aumento de PAP pode ocorrer em outros tipos de

neoplasias

� Pode ser util para o estadiamento do tumor

2626


0�� E��(��!�� E��

� ACTH, insulina, catecolaminas e outros

� receptores de estrogenos e de progesterona

� receptores de andrógenos


0�� E��

H o rm ô n io T ip o d e tu m o r

A C T H S índ rom e de C u sh ing , tu pu lm ona r (cé ls . peq .)

A D H tu pu lm on a r (cé ls . peq .), c o rte x ad re n a l,p â nc re as , d uod en o

G H A de nom a h ipo fisá rio , rena l, p u lm o na r

P ro lac tin a A de nom a h ipo fisá rio , rena l, p u lm o na r

P ara to rm o n io H ep á tico , re na l, m am á rio , pu lm on a r e o u tros

C alc ito n in a T ireo id e (m e du la r)

h C G E m b rion á rio , c o rio ca rc ino m a, tes ticu la r

L ac to g ên iop lac en tário h um an o

T ro fob lá stico , gon ad a l, p u lm onar, m am á rio

G a strin a G lu ca go n om a

2727


Melmed S. J Clin Invest. 112: 1603, 2003


��(��!�� E��

Marcador Tipo de tumor

Receptor de estrógenos eprogesterona

mama

Catecolaminas emetabólitos

Neuroblastoma, feocromocitoma

Hidroxiprolina Metastase ossea (mama), mielomamúltiplo

Poliaminas (LCR) cérebro, (urina) vários

2828


��-�� /��

Marcador Tipo de tumor

B2-microglobulina Mieloma múltiplo, linfoma cel.B, LLC,macroglobulinemia de Waldenstrom

Pepídeo C Insulinoma

Ferritina Hepático, pulmonar, mamário, leucemia

Imunoglobulinas Mieloma múltiplo

Antígeno associado aoMelanoma

Melanoma

Antígeno associado aopâncreas

Pancreático, estômago

Precursor de protrombina Hepatocelular

Tumor associado aoinibidor de tripsina

Pulmonar, gastrointestinal, ovariano


��

Cancer Type Recommended Tumor Marker

Breast CA15-3 or CA27.29 for monitoring advanced disease.

Ovarian CA125 as a diagnostic aid and monitoring therapy.

Prostate PSA with digital rectal examination (DRE).

% fPSA when PSA is between 4-10 ng/mL and DRE negative.

Germ Cell AFP, hCG and LD for detecting and monitoring testicular tumor.

Colon CEA for monitoring therapy.

Neuroendocrine Urinary Catecolaminas totais (CAT), VMA, HVA for

Pheochromocitoma and Neuroblastoma.

Calcitonin for medullary thyroid carcinoma.Sturgon. Clin Chem, 48:1115, 2002

2929


F�� (��

marcadores de risco de câncer

� Oncogenes• genes que são reativados

� Genes supressores: p53• genes que regulam a divisão celular e a apoptose


F��

Oncogene Função Produto Tipo de tumor

N-ras mutação Transdução dosinal

Tirosina kinase LMA,neuroblastoma

c-myc translocação Regulação datranscrição

Liga-se ao DNA Linfoma cel. B eT, pulmonar

c-erb B-2 amplificação Receptor de fatorde crescimento

Tirosina kinase Mama, ovário,gastrointestinal

c-abl-bcr translocação Transdução dosinal

Tirosina kinase LMC

N-myc amplificação Regulação datranscrição

Liga-se ao DNA Neuroendócrino

3030


Cromossoma Philadelphia (Ph)

- gene de fusão bcr-abl

- proteína de fusão BCR-ABL com

atividade tirosina quinase

- falha no controle da proliferação celular

- Leucemia mielóide crônica (LMC)

www.ncbi.nlm.nih.gov/disease/

Translocaçãorecíproca

Gene BCR-ABL

Proteina de fusão BCR-ABL

��,��*��


Nashed e cols. J Mol Diag. 5:63, 2003

3��0

��,��*+��

��

3131


'�� (��

Gene supressor Cromossomo Tipo de tumor

DCC 18q21.3 Carcinoma de colon

NF-1 17q11.2 Neurofibromatose

RB 13q14 retinoblastoma

p53 17q Colon, pulmonar e outros

WT 11p13 Tumor de Wilms

BRCA-1 17q21 Cancer de mama

BRCA-2 13q12-13 Cancer de mama


�:>�:>�:>�:>

� P53 é um gene supressor de tumor localizado no

braço curto do cromossomo 17

• regula a transcrição de outros genes

• Deleções e mutações no gene p53 ocorrem na

carcinogenese do cancer de colon

3232


��,��,��C�,��

Estágios de progressão Genes envolvidos Mecanismo molecular

APC, herdado ou mutação somática em 1 alelo e perda de parte do outro alelo

Epitélio normal

Epitélio hiperproliferativo

Adenoma precoce

Adenoma intermediário

Adenoma avançado

Carcinoma

Metástase

Perda de função supressora de tumor normal das porteínas APC

desconhecido

K-rasS2, mutação em 1 alelo

DCC, DCPA (MADH4)

P53

Outros genes ??

Hipometilação em vários loci

Ativação de oncogene dominante

Perda da função supressora de tumor normal da proteína p53: controle do ciclo celular, apoptose e outros

APC - adenomatosis polyposis colon DCC - deleted in colorectal carcinomaK-rasS2 - Kirsten rat sarcoma 2 viral oncogene P53 - gene da proteína p53

Vogelstein B et al. Engl J Med. 319: 525, 1988


��!��7�� .7�� *+��G��8��9

� Genes suppressores de tumor (cromossomo 17)

� Mutações no BRCA-1• cancer de mama herditário: 50% das mulheres com 50 anos e 85% das

com 70 anos

• outros tipos de neoplasias mamárias: 5% das mulheres

� Risco de cancer de ovário

• 60-70% das mulheres com mutações do BRCA-1

Cole et al; In: Cancer in Women, Blackwell Science 1998

3333


Bjorge T et al. Br J Cancer.91: 1829, 2004

� ��*+��G��8 ��.��


��,�� H��

��

��

3434


Macgregory PF. Clin Chem. 2002 Aug;48:1170-7


Sanchez-Carbayo M. Clin Chem. 2003 49:23-31

Use of high-throughput DNA microarrays to identify biomarkers for bladder cancer

3535


Haab et al. Genome Biology 2000;1:1-22

Label all Proteins in Mixture

Website:www.acdclab.org

��7,�� E� ��

Protein array now commerciallyavailable by BD Biosciences (2002)

aula marcadores tumorais 2006

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