Gliederung
• Phasenkontrast – wozu?
• Geschichtliches
• Funktionsprinzip
we bring technologies together. optics – electronics – precision mechanics © Helmut Hund GmbH, 2008
• Funktionsprinzip
• Dunkelfeldmikroskopie
• Polarisationsmikroskopie
• Das inverse Mikroskop
Phasenkontrast – wozu?
• Hellfeldmikroskop:
Detektion von “Amplitudenobjekten”:
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Obje
kt
Phasenkontrast – wozu?
• Hellfeldmikroskop:
Detektion von “Amplitudenobjekten”:
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Phasenkontrast – wozu?
• Hellfeldmikroskop:
Detektion von “Phasenobjekten”:
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Obje
kt
Phasenkontrast – wozu?
• Hellfeldmikroskop:
Detektion von “Phasenobjekten”:
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Schleimhautzellen
Phasenkontrast – wozu?
• Hellfeldmikroskop:
Detektion von “Phasenobjekten”:
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Schleimhautzellen,Aperturblende geschl.
Geschichtliches
Frits Zernike (1888 – 1966):
1930: Erfindung Phasenkontrastmikroskop,
1941: Industrielle Umsetzung (Wehrmacht),
1953: Nobelpreis für Physik
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Funktionsprinzip
Strahlengang:
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Funktionsprinzip
Objektive:
• Ph-Objektiv ↔ Lichtring!
• Numerierung nach Positionim Kondensor
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im Kondensor
• Vorsicht: Zählkammern!
• Achtung: Aperturblende vollöffnen!
Funktionsprinzip
Kontrolle: Einstellfernrohr
Phasenring
Lichtring
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FALSCH!
RICHTIG!
Funktionsprinzip
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Schleimhautzellen
Funktionsprinzip
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Schleimhautzellen
Dunkelfeldmikroskopie
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Warum sind Lichtstrahlen sichtbar?
Photo: © Dr. Jörg Haus, 2007
Dunkelfeldmikroskopie
Schattenwurf: Geometrische Optik
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Physikalisch: Licht als Teilchen bzw. ebene Wellenfront, ohneBeugung, Lichtstrahlen entsprechen Normalen
Dunkelfeldmikroskopie
Schattenwurf: Kleine Strukturen, Wellenoptik?
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Physikalisch: Licht als Wellenfront,Huygenssches Prinzip
Dunkelfeldmikroskopie
Schattenwurf: Kleine Strukturen, Wellenoptik?
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Doppelspaltversuch nach Young
Dunkelfeldmikroskopie
Vergleich Hellfeld - Dunkelfeld
ObjektivObjektiv
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Kondensor
Präparatebene Präparatebene
Kondensor
Hellfeld Dunkelfeld
Dunkelfeldmikroskopie
Kondensor: Blende oder Kardioid-System
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Dunkelfeldmikroskopie
H600 LL HP 100: Optische Komponenten
Objektiv, SPL 100/1,25,mit Irisblende
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Kondensor,NA 1,4
Dunkelfeldmikroskopie
H600 LL HP 100: Optische Komponenten
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Dunkelfeldmikroskopie
H600 LL HP 100: Nativblut im Dunkelfeld
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Dunkelfeldmikroskopie
Wettbewerb: Billiges Dunkelfeld???
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Dunkelfeldmikroskopie
Wettbewerb: Billiges Dunkelfeld???
Hund H600 LL HP 100 Novex B mit DF
Tubus (Standard) binokular trinokular, 100/100
Okulare WF 10x/18 WF 10x/(k. A.)
Objektive Achro 10/0,25 Plan 4/0,10
SPL 100/1,25 – 0,60 Oel Plan 10/0,25
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SPL 100/1,25 – 0,60 Oel Plan 10/0,25
Plan S40/0,65
Plan 100/1,25 Oel
Dunkelfeldkondensor NA 1,4 NA 1,2
Beleuchtung an Stativ angeflanscht, extern,
100 W Halogen 150 W Halogen
Preis inkl. MWSt. [€] 4474,40 1649,95
Dunkelfeldmikroskopie
Wettbewerb: Billiges Dunkelfeld???
Novex
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Hund
Dunkelfeldmikroskopie
Wettbewerb: Billiges Dunkelfeld???
Novex:Schließen derIrisblende amObjektiv.
Kein hoch-auflösendes DF
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auflösendes DFmöglich!!!
Polarisation smikroskopie
Physikalisch: Welleneigenschaft
UnpolarisierteLichtwelle
PolarisierteLichtwelle
Vollständige
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Polfilter(Polarisator)
VollständigeLöschung
Polfilter(Analysator)
Polarisation smikroskopie
Physikalisch: Welleneigenschaft
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Photo: © Dr. Jörg Haus, 2008
Polarisationsmikroskopie
Doppelbrechung: Drehung Polarisationsebene
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Polarisationsmikroskopie
Doppelbrechung: Drehung Polarisationsebene
Glaskeramik zwischengekreuzten Polarisatoren,
mit Verzögerungsplatte
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Glaskeramik zwischengekreuzten Polarisatoren
Polarisationsmikroskopie
Doppelbrechung: Drehung Polarisationsebene
H 600 mit Polarisationseinheit HP I:
Analysator mit Kompensator Rot 1. Ordng.
Spannungsfreie Optik
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Spannungsfreie Optik
Dreh- und Zentriertisch mit Objektführer
Polarisator
Polarisationsmikroskopie
Zwei Beobachtungstechniken:
• Orthoskopisch:Polarisator – Präparat – Analysator,Beobachtung durch Okulare
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• Konoskopisch:Beobachtung der hinteren Objektiv-Fokus-ebene mit klappbarer Bertrand-Linse oderEinstellfernrohr, hohe Kondensor-NA!!
Polarisationsmikroskopie
Zwei Beobachtungstechniken:
• Konoskopisch:
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Das inverse Mikroskop
Spezielle Gefäße für Zellkulturen
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Petri-Schale
Terasaki-(96-well-) Platte
Kulturflasche
Das inverse Mikroskop
Anwendungen:
• In-Vitro-Fertilisation(mit Mikromanipulatoren)
• Untersuchungen an
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• Untersuchungen anZellkulturen
• Untersuchungen “vonunten”
Wilovert Standard HF 40
Eigenschaften:
• Lampe 12 V / 30 W
• Kondensor NA 0,25 mit Aperturblende
• Objektive mit großem
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• Objektive mit großemfreiem Arbeitsabstand:
A 4/0,10A 10/0,25SPL 20/0,50 (LD)SPL 40/0,60 (LD),Korrektionsfassg
Wilovert Standard PH 40
Eigenschaften:
• Lampe 12 V / 30 W
• Kombikond. NA 0,25mit Aperturblende
• Objektive mit großem
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• Objektive mit großemfreiem Arbeitsabstand:A 4/0,10A PH1 10/0,25SPL PH2 20/0,50 (LD)SPL PH2 40/0,60 (LD),Korrektionsfassung
Wilovert AFL 40 PH
Zusätzl. Eigenschaften:
• HBO 100 W
• Filterschieber
• Objektführer
• Objektive mit großem
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• Objektive mit großemfreiem Arbeitsabstand:AC 4/0,10A PH1 10/0,25SPL 20/0,35 (LD)SPL PH2 20/0,50 (LD)SPL PH2 40/0,60 (LD),Korrektionsfassung
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