7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
1/31
LP 9:Diagnostic de laborator in virozerespiratorii. Izolarea virusurilor gripale pe oul
de gaina embrionat. Reactia dehemaglutinare. Identifcarea virusurilorgripale. Reactia de hemaglutinoinhibare. Cazclinic prezentat de studenti.
LP 12: Diagnosticul in inectia cupapipomavirusuri umane - algoritm.Diagnostic serologic versus diagnosticulmolecular. Importanta tehnicilor degenotipare si corelarea cu diagnosticulcitologic. Posibilitati de vaccinare in cancerede etiologie virala. Caz clinic prezentat de
studeni.
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
2/31
PapovaviusesPapilomavirusuri(>100 genotipuri)
Poliomavirus (la rozatoare)
Virusul simian vacuolizant SV40
Papillomavirusurile determina:
tumori benigne ale pielii negi sau veruci! care pot regresa spontan" inectie litic# $n celule permisive cu productia de virioni inectanti
leziuni ale mucoasei genitale si anale care pot maligniza dacapersista mai multi ani " inectie persistent# $n celule nepermisive care
duce la transormare malign#
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
3/31
Frecventa inectiilor asimptomatice! su"clinicesau atipice
Persistenta virusurilor si capacitateatransormanta #$isplazie cervicala intraepiteliala
si carcinom cervical scuamos % &PV 1'! 1! 1!! *)
+a,oritatea cancerelor $e cervi-! vulvare sipeniene sunt asociate cu &PV tipurile 1'! 1!
1! ! *! 9! 4*! *1! *2! *'! ''! '! .0 caretransorma /eratinocitele umane
Principalul actor $e risc pentru cancer $e coluterin %a"senta screening
F356 7 P6PL8+6V7S7L3 7+63(&PV)
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
4/31
Epiteliu Normal
Suprafata cervicala
Membrana bazala
Celule bazale
Celule
Parabazale
Strat scuamos
%tratscuamosmatur
. .
. .
.
.
.
Epiteliu Infectat
Adaptat dupa Frazer IH. Nature Rev Immunol. 2004;4:4654.
Eliberarea virionilor
cu cel descuamate (3 sapt)
Infectia celulelor
bazale (keratinocite)
(gene E1 si E2)
A! viral Episomal
in nucleul celulei
(E1 and E2" E# and E$)
%eplicare de A! viral
odata cu multiplicarea cel(E#
and E$)
Asamblare virala(gene &1 and &2)
nectia cu &PV are anumiteparticularitati
&
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
5/31
iagnostic &PV ; $iagnostic $irect
1
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
6/31
?enotipare &PVPCR urmat de hibridizareaacizilor nucleici!
26 genotipuri
Rezultatul poate fi:
1' pozitiv(cu decelarea urmatoarelor
genotipuri: 6, 11, 1#, 1, 31, 33, 4,
*, *1, !", !4, *, *+, ##, #,$3, #$,
2' negativ sau
"% pozitiv pentru alt genotip -./ fara
a se cunoaste genotipul -./
responsabil de leziune" rezultat
notat 0-./ ')* genotipuri
+, , 1', 1, +, 1, , *, 9,/0, /, 4*, *1, *2, 1), 1/, 11, *',*, *9, +, +, +/, '', +*, ', +2,
*0, *, *, .332!, 4, 233/!,4) 33*!, 4/ 334!, I%)2, and
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
7/31
Vaccinarea este utila in anumite situatii
Vaccin
6ntigen 6$,uvant
SS53+ 6@7V65: 6S04-+onoosoril lipi$ 6 a"sor"it pe
- &i$ro-i$ $e aluminiu
Garcon N. evelopment and evaluat!on o" A#04$ a novel and !mproved ad%uvant &'&tem conta!n!n( )*+ andalum!num &alt. In: #c,!%n& -$ Ha(an $ ed&. Immunopotent!ator& !n modern vacc!ne&. +ondon: Academ!c*re&&$ 2005: /6/1.
6S04
irus Li/e Particles (VLP)articule asemanatoare virusului
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
8/31
Majoritatea Ac IgG de lanivelul epiteliului genital seconsidera a fi rezulatultransudarii la nivel epitelial aanticorpilor serici
Un raspuns imunumoral puternic estenecesar pentru a realizaniveluri sustinutedetectabile de anticorpila nivelul mucoaseicervicale (infectiaprimara)
HPV are mecanisme proprii
prin care scapa mecanismelorsistemului imun natural deaparare
Nu determina viremieHPV nu distruge keratinocitele
Lamina Aazala
Vas $e sange
5piteliu
Adaptat dupa :
)unoz N et al. ,apter /: H*- !n t,e et!olo(' o" ,uman cancer.-acc!ne 24#3 2006 #3/#3/0
G!ann!n! #. et al. 7n,anced ,umoral and memor' 8 cellular !mmun!t' u&!n( H*-/6/1 +/ -+* vacc!ne "ormulated 9!t, t,e)*+alum!n!um &alt com!nat!on A#04 compared to alum!n!um &alt onl'. -acc!ne$ -olume 24$ I&&ue& 3334$ /4 Au(u&t 2006$*a(e& 5
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
9/31
1'!1! 4*! 1Prevenirea cancerului $e col
uterin6vem 2 vaccinuri pe piata:
impotriva 9P6 +, , +, 4
impotriva 9P6 + si 4
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
10/31
Diagnostic in inectia cu virusuri gripale
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
11/31
ORTHOMIXOVIRUSURI-V. GRIPALE A, B, C
myxa-mucus
tip A, B, C : NP, M
subtipuri: HAsi NA16 tipuri de HA si 9 de NA
+atrice
ucleocapsi$a Belicoi$ala6ss
&6 # Bemaglutinina
transcriptaza
anvelopa
6 # neuramini$aza
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
12/31
iagnostic clinic $e gripa
ebra )-1 zile!, mialgie, cealee, astenie saptamani!, tuse uscata, aringita,rinoree.
;ripa nu se diagnosticheaza clinic.Simptomatologie asemanatoare cu inectii $eterminate $e:
)'copla&ma pneumon!ae, adenovirusuri,virusul respirator sincitial, rhinovirusuri,virusuri paragripale, si +e(!onellaspp.
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
13/31
EI4&45IE
.4SI6I&A
.rodus
.atologic
I74&A%E g' I%EC
8detectiedirecta
g' I!I%EC
8serologie
/' 5%I.A&E A" 6" CS!9
A!9A6
45E
Culturicelulare
A
: .C% si I9
A
studii epidemoiologice
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
14/31
Pro$use patologice:
a)spalatura nazo aringianase obtine cuan! nu sunt indicate
$n diagnosticul virozelor respiratorii.
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
15/31
Spalatura nazo aringiana(SF)ecoltare
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
16/31
isc $e la"orator asociat manevrarii $epro$use patologice supuse $iagnosticului in
ve$erea izolarii virusurilor gripale
6irusurile gripale sunt prezente intractul respirator in concentratiiridicate si pot usor disemina din
e?udate, spalaturi nazoaringiene siaspirate traheobronsice la personalulcare manipuleaza aceste probe
clinice prin intermediul aerosolilor.Culturile de celule inectate sunt siele sursa de inectie si diseminare a
virusurilor.
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
17/31
iagnostic $e la"orator in gripairectii $e $iagnostic
IEF'R5GID5(BIIC'R5
G7$ RHA= RHAI
D5B5CBI5 DIR5CB' PCR si I
DI';(E%BIC %5REFE;IC
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
18/31
.-pe culturi primare de rinichi demaimuta rhesus.
-pe linia continua epiteliala derinichi de ciine " 3DCH - 3adin-Darb Canine Hidne.
.pe ou de gaina embrionat,de 2-zile, inoculat intraamniotic sauintraalantoidian.
Izolare virala ! e"amenul optim pentru diag gripei
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
19/31
&ema$sor"tie$emonstreaza izolarea v
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
20/31
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
21/31
Izolareape E;5
Izolarea se dem prin proprietatea v. gripalede a aglutina hematii
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
22/31
Etape#
ag viral dilutii binaresuspensie de $ematii
%e incubeaza la temperatura camerei
%e citesc rezultatele in &' minute
Martorul reactiei contine suspensie $ematii
ol &6:Demonstrarea prezentei virusului hemaglutinant
Bitrarea antigenului hemaglutinant inaintea reactiei de hemagutino-inhibare
HA
3+8S5636 P3C353V7S7L73656 3 &3+6?L7563
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
23/31
ID5(BIIC'R5' 6. ;RIP'F5R. 953';FJBI(E-I(9IK'R5
)e$nica reactiei#
dilutii binare din serul testato cantitate constanta de ag viral $emaglutinant%e lasa la incubat *' min la *+,-%e adauga sistemul indicator . suspensia de $ematii%e incubeaza &' min la temperatura camerei
/eactia de identificare a virusurilor gripale
HAI
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
24/31
Reactia de953';FJBI('R5 si953';FJBI(E-I(9IK'R5
7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx
25/31
('B nucleic acid tests!RB PCR
Duic/ iagnosis o Flu Strains Possi"le EitB eE +icrocBip 5est(ational nstitute o 6llergG an$ nectiousiseases) # FluBip!
ne-pensive 5est etects inHuenza nections Duic/lGan$ 6ccuratelG(ational nstitute o 6llergG an$ nectiousiseases) % +Bip
SEine Hu real#time P /it (PrimeresignLt$ # 7I) ! 5Be real#time P /it # rapi$lGmultiplGing a sample ta/en rom a
suspecte$ sEine Hu patient< 5Bis testJuic/lG $iKerentiates common strains o tBeHu virus rom otBer &11
Top Related