Page 1

International Journal of Environmental Bioremediasi & Biodegradasi, 2014, Vol.2, No. 5, 220-227Tersedia secara online di http://pubs.sciepub.com/ijebb/2/5/2 Sains dan Penerbitan PendidikanDOI: 10,12691 / ijebb-2-5-2Isolasi dan Karakterisasi Linuron MerendahkanBakteri dari Tanah di bawah Production Hortikultura diKenyaPhilip Miriti1, *, Gabriel Magoma.2, Hamadi I. Boga3, Aggrey Nyende B41Lembaga Penelitian Bioteknologi Jomo Kenyatta Universitas pertanian dan Teknologi PO Box 62000 (00200) Nairobi, Kenya2Pan Afrika Universitas Institut Teknologi Dasar Ilmu Pengetahuan Dan Inovasi Jomo Kenyatta Universitas pertanian danTeknologi - AICAD Blok C, Room 101 P. O Box 62000 00200 Nairobi, Kenya3Hamandi Iddi, Jomo Kenyatta Universitas pertanian dan Teknologi PO Box 62000 (00200) Nairobi, Kenya4Lembaga Penelitian Bioteknologi Jomo Kenyatta Universitas pertanian dan Teknologi PO Box 62000 (00200) Nairobi, Kenya* Penulis korespondensi: philipmwenda2012@gmail.comDiterima 24 Juni 2014;Revisi 1 September 2014;Diterima 8 September 2014AbstrakPestisida digunakan telah menjadi salah satu faktor utama dalam meningkatkan produktivitas usaha pertanian di Kenya.Phenylurea herbisida adalah salah satu kategori utama produk perlindungan tanaman yang membunuh gulma dan lainnyatanaman yang tumbuh di mana mereka tidak diinginkan.Dalam beberapa tahun terakhir para peneliti telah membayar perhatian yang lebih besar ini keluarga herbisida karena biotoxicity tinggi dan mungkin sifat karsinogenik dan periode panjang waktu untuk menghilangkan mereka dari lingkungan.Namun, penelitian sistematis tentang penghapusan mikroba pestisida ini residu yang langka di negara-negara berkembang termasuk Kenya.Sebuah survei di empat wilayah hortikultura dari pusat dan keretakan-lembah Kenya menunjukkan bahwa dari Twenty Two (22) formulasi pestisida yang digunakan linuron memiliki tertinggi frekuensi aplikasi pada 45,9%.Melalui pengayaan dan isolasi total enam isolate diperoleh dari linuron terkontaminasi tanah.Kinetika degradasi pestisida residu dipantau oleh cairan tekanan tinggi kromatografi (HPLC).Tingkat degradasi dicetak oleh data sesuai dengan regresi linier oleh garis y = 49508x dengan nilai R2 dari 0,9831.The pembuktian berbagai degradasi metabolit menengah dibantu dengan mesin GC-MS.Metabolit yang diidentifikasi dari linuron adalah 3, 4 dichloroanilline, 3, -chloroanalline, 4 chloroanalline N, O dimethylhydroxylamine, dan N-metil-N-metoksi karbamat asam metil ester.Isolat ditunjuk LoG-8A, Lwa-2A, LSH-6B, LJK-5C, Lla-1A dan Lwa-2C menunjukkan kemampuan untuk menurunkan 70.7- 98.9% dari 50mgl- 1 dari linuron berjarak 84 hari.Analisis morfologi, biokimia dan 16S rRNA urutan isolat tersebutdiidentifikasi mereka dengan genusPseudomonas, Stenotrophomanas, Burkholderia, Lysinibacillus, Arthrobacterdan Flavobacteria.Studi ini menunjukkan bahwa tanah dari peternakan hortikultura di Kenya pelabuhan biodegrades untuk linuron. Pekerjaan lebih lanjut dapat menunjukkan apakah mikroba ini dapat digunakan untuk pengembangan strategi bioremediasi.

Kata Kunci:Pestisida, biotoxicity, bioremediasi, Linuron dan kontaminasiCite Pasal ini:Philip Miriti, Gabriel Magoma., Hamadi I. Boga, dan Aggrey Nyende B, "Isolasi danKarakterisasi Linuron Bakteri Pendegradasi dari Tanah di bawah Produksi Hortikultura di Kenya. "International Journal of Environmental Bioremediasi & Biodegradasi,vol.2, no.5 (2014): 220-227.doi:10,12691 /-ijebb 2-5-2.

1. PerkenalanIndustri hortikultura sektor sub di bidang pertanian adalah salah satu yang paling cepat berkembang di Kenya dan yang kedua devisa terbesar penghasil setelah teh di Kenya[21]. Rupanya hama dan penyakit bertanggung jawab atas 30-40% kerugian hasil pertanian di daerah tropis[5].Yang paling Cara konvensional dan umum pengendalian hama dan penyakit adalah melalui penggunaan pestisida.Di antara zat ini,keluarga herbisida phenylurea telah menerima khusus perhatian dalam beberapa tahun terakhir karena biotoxicity tinggi dan mungkin sifat karsinogenik.Selain itu, ini Senyawa memerlukan beberapa minggu sampai beberapa bulan untuk mereka penghapusan dari lingkungan[4].Sayangnya, ini Senyawa menimbulkan toksisitas melekat yang membahayakan kesehatan operator pertanian, konsumen danlingkungan[5].Banyak dari senyawa ini telah diamati untuk bertahan dalam lingkungan, biomagnify saat melewati rantai makanan dan bioakumulasi dalam jaringan [27].Namun, industri hortikultura di Kenya adalah konsumen utama pestisida.Pada tahun 2005 sekitar 7047 metrik ton pestisida yang diimpor keKenya untuk mengendalikan hama dan penyakit tanaman[25]. Di seluruh dunia, gulma menyebabkan lebih banyak kehilangan hasil dan menambahkan lebih banyak ke biaya produksi petani dari hama serangga, tanaman patogen, akar-makan nematoda, atau berdarah panas hama (tikus, burung, rusa, dan grazers besar lainnya).Selain itu, Gulma bersaing dengan tanaman untuk ruang, cahaya, kelembaban dan nutrisi, dan mengurangi hasil panen sebesar 17 sampai 25%[22].Phenylureas, yang tersedia secara komersial selama lebih dari 50 tahun, merupakan salah satu yang paling banyak kelas digunakan herbisida untuk mengendalikan berkecambah danrumput dan gulma berdaun lebar muncul di lapangan dan buah tanaman[25].Dalam beberapa tahun terakhir para peneliti membayar lebih besar memperhatikan hal ini keluarga herbisida karena tinggi biotoxicity dan kemungkinan sifat karsinogenik dan mereka memerlukan beberapa minggu sampai beberapa bulan untuk pemindahan mereka dari lingkungan[5]. Sebagian besar beban herbisida memasuki lingkungan sebagai kontaminasi menyebar dari sumber pertanian berikut praktek penyemprotan normal.Beberapa faktor seperti dinamika aliran air, penyerapan ke fase padat, tanaman serapan, mikroba dan (foto) degradasi kimia, dan dibubarkan dan migrasi fase koloid mempengaruhi herbisida dispersi dalam kondisi alami[13].Phenylureas adalah rentan terhadap degradasi fotokimia;Namun, proses dapat menyebabkan photoproducts seperti demethylated atau derivatif formylated yang memiliki toksisitas lebih tinggi dari bahwa senyawa ibu[1].phenylurea berbeda herbisida telah terdeteksi sebagai polutan dari tanah dan air permukaan dan dalam beberapa kasus residutelah terdeteksi tiga tahun setelah aplikasi akhir [16-31]. Dampak lingkungan dari Linuron terutama perhatian ekosistem air sejak linuron telah terbukti sangat beracun bagi tanaman dan invertebrata air[13].Itu Uni Eropa sudah termasuk Linuron dalam daftar II dari Dangerous Substances Directive (76/464 / EEC) ke mendorong negara-negara anggota untuk mengurangi penggunaan ini senyawa[36].Juga metabolit potensial terbentuk selama degradasi abiotik dan / atau biotik phenylureas (untukcontoh anilines chlorinated) termasuk dalam daftar ini sebagai mereka dapat menyebabkan efek merugikan jangka panjang dalam air yanglingkungan.[35]telah menunjukkan bahwa kedua 4- isopropylaniline (4-IA) (berasal dari isoproturon) dan 3, 4-DCA (berasal dari linuron) ditampilkan jauh lebih tinggitoksisitas dari ibu mereka senyawa dalam Microtoxassay.Tingkat biodegradasi alami lambat phenylureaherbisida yang diamati di kedua lapangan dan laboratorium penelitiandan deteksi beberapa herbisida ini dan merekametabolit sebagai kontaminan dalam air tanah dan permukaanPenelitian badan air, termasuk air laut telah mendoronguntuk mengidentifikasi phenylurea-mikroorganisme pengurai.ItuTujuan penelitian ini adalah untuk mengisolasi bakteristrain, ciri potensi degradasi danmemastikan kemampuan degradasi dalam pemanfaatanlinuron sebagai sumber karbon tunggal dalam medium cair.2. Bahan dan Metode2.1.Zat KimiaAnalitis kelas linuron (Fluka CAT 36141; 99,5%kemurnian) dibeli dari KOBIAN terbatas (Nairobi,Kenya).Larutan stok dari 100 mg L-1disusuntekanan tinggi kromatografi cair HPLC kelasmetanol (Sigma Aldrich Inggris).HPLC kelas asetonitrildan air (Sigma Aldrich Jerman) digunakan sebagai ponselfase.Heksana (99,9%, Sigma Aldrich St. Louis, MO,USA) dan Na2SO4(S) ACS (Sigma Aldrich Inggris) digunakanuntuk GC / MS analisis residu degradasipestisida.2.2.Tanah SampelSampel tanah diambil dari pusat dan keretakan-lembahwilayah Kenya dari delapan peternakan di bawah hortikulturaProduksi yang telah secara rutin diobati dengan berbagaiherbisida urea.Delapan belas sampel tanah (50 g masing-masing) yangdiambil di berbagai bagian masing-masing plot menggunakan auger tanah.Itutanah pucuk atas (5 cm) tanah mineral dikumpulkancross-sectional dalam plot tertentu 100 m2dan ditempatkandi steril kertas plastik.Sampel serupa dilakukan 100m jauh dari peternakan untuk bertindak sebagai kontrol.Sampel darisetiap plot kemudian dicampur untuk mendapatkan homogen danditempatkan dalam wadah plastik steril.Sampel kemudiandisimpan dalam termos yang berisi es dan dipindahkan kelaboratorium dalam waktu 12 jam dan disimpan pada suhu 4 C.2.3.Pertumbuhan MediaMedia garam mineral (MSM) yang terdiri dariNa2HPO4.12H2O30,5 mg, KH2PO412 mg, MgSO4.7H2O2,5 mg, CaCl2.2H2O 1,5 mg, H3BO3.62 mg,Na2MoO4.2H2O242pg,MnCl2.6H2O198pg,FeCl3.6H2O 54 mg, CuSO4.5H2O1.3 pg, dan ZnSO4.7H2O1.4 mg dilarutkan dalam satu liter Milli-Q air.Setiap batchmedium disterilkan dengan autoklaf pada 121 C.Untukmempersiapkan media padat, setiap bahan kimia terlarut dalam Milli-Qair ditambahkan ke setiap media oleh filter sterilisasi.Untukmenyiapkan media cair, setiap bahan kimia dilarutkan dalam metanoldituang ke dalam botol kaca panas disterilkan atau botol, danpelarut organik kemudian dihapus oleh filter-disterilkanaliran nitrogen.5 ml medium cair kemudiandituangkan ke dalam botol atau botol dan didiamkansemalam untuk memastikan bahwa bahan kimia yang cukupdilarutkan dalam cairan2.4.Pengayaan dan Prosedur Isolasi2,5 g tanah diayak ( 0,05) pada tingkat degradasi linuron(Gambar 2) sedangkan Isolat LJK-5C diamati memilikitingkat tertinggi degradasi linuron di 25,24%.Gambar 2.Degradasi linuron oleh isolat LOG-8A, Ljk-5B dan Lwa-2A.Titik data dan error bar menunjukkan sarana dan standar deviasi

Halaman 5

224International Journal of Environmental Bioremediasi & BiodegradasiPada 21sthari mengisolasi LJK-5C mencatat tertinggiTingkat degradasi linuron dari 37,74% sementara isolat Lla-1a dan log-8A memiliki perbedaan yang signifikan (P> 0,05) ditingkat degradasi linuron dan kedua isolat dicatattingkat terendah degradasi linuron dari 9,58%.Pada28thhari isolat LSH-6B dan LWA-2A telah samaTingkat degradasi linuron dari 30%, sementara logging 8A memilikitingkat degradasi terendah 20%.Pada 35thhari itudiamati bahwa tingkat degradasi linuron olehisolat uji berbeda nyata (P 0,064) pada tingkatdegradasi linuron.Isolat LJK-5C tercatat sebagaitercepat linuron merendahkan mengisolasi dengan 18% dari50mgL-1dari linuron tersisa dalam medium oleh ke-49 yanghari inkubasi (Gambar 3).Gambar 3.Degradasi Linuron oleh isolat Ljk-5C, Lwa-2C dan Lla-1A.Titik data dan error bar menunjukkan sarana dan standar deviasiPada 56thKonsentrasi hari Linuron di kontrolmenengah adalah 84% penurunan hanya 16% sedangkankonsentrasi Linuron di Linuron merendahkan paling lambatmengisolasi LoG-8A adalah 46%, suatu indikasi bahwa tesorganisme yang jalur utama kerugian Linuron darimedium kultur.Pada 84thLJK-5C telah terdegradasiLinuron menjadi 0,32 mg / l, tingkat pengurangan 99,3%.Di sanaperbedaan yang signifikan (P 0,076) di tingkat Linurondegradasi pada 77thdan 84thhari inkubasi.Itutingkat Linuron degradasi oleh proses kimiadiamati dalam labu kendali seluruh eksperimentalPeriode hanya 18,6%.3.3.GC-MS Identifikasi LinuronDegradasi Menengah MetabolitSpektrum yang diperoleh dari massa kromatografi gasspetrometry menunjukkan bahwa degradasi mikrobalinuron mengakibatkan menjadi lima pengenceran menengah(Tabel1) Di jalur degradasi mereka.Analisis GC-MS dibantuidentifikasidarilinuronmetabolitsebagai:TAK ADAdimethylhydroxylamine, 3-chloroanalline, 4-chloroanlline,3, 4 dichloroanalline dan N-metil-N-methxy-karbamatac id.Strain terdegradasi metabolit ini selektif dantidak ada strain memiliki kemampuan untuk menurunkan semua limametabolit secara bersamaan.Tabel 1. Metabolit Degradasi LinuronMetabolit LinuronSenyawa NamaWaktu retensi (min)Berat molekulN, O dimethylhydroxylamin5,006613-chloroanalline10,0081274-chloroanlline10,0091273,4 dichloroanalline18,520161N-metil-N-methxy karbamat asam.24,580232Tabel 2. morfologi dan biokimia Karakterisasi Linuron Merendahkan IsolatIsolatLinuron IsolatLla-1ALjk-5CLwa-2ALog-8ALwa-2CLSH-6BBentuk selbatangbatangbatangbatangbatangBatangGram stain+-+++-motilitas++++++pewarnaan pigmenjerukKrim putihKrim putihwarna kuningwarna coklatKuning pucatUji biokimiaOksidase+-+-++Katalase+--+-+urease-----+Reduksi nitrat-+--++TSIK / KA AK / KK / KK / KA AMR-----+VP+-+-+-Indole--+---Gelatinase++++-+Legenda: (+) Positif, (-): Negatif, MR: Methyl Red, VP Voges-Proskeaur, TSI tiga besi gula, A / A;laktosa dan / atau dan fermentasi glukosa, KK Nofermentasi karbohidrat atau produksi hidrogen sulfida.

Halaman 6

International Journal of Environmental Bioremediasi & Biodegradasi2253.4.MorfologidanBiokimiaKarakterisasi IsolatLinuron isolat biodegradative dikarakterisasimenggunakan morfologi, seluler dan biokimia karakterseperti yang dijelaskan oleh[15].uji Gram isolat adalahditentukan dengan 3% KOH (w / v) seperti yang dijelaskan oleh[11].Itukemampuan isolat untuk mengeluarkan enzim ekstraseluler adalahdiuji melalui hidrolisis Tween 80 dan gelatin.Itukemampuan isolat untuk mengeluarkan enzim intraseluler yangditentukan melalui tes pada fermentasi gula,produksi sulfida hidrogen, reduksi nitrat, katalasereaksi, urease, metil merah, Voges Proskauer-dan tripleTes besi gula-Tabel 2.3.5.Analisis filogenetik dari IsolatGambar 4.Pohon filogenetik menunjukkan posisi isolat LoG-8A, Lwa-2A, LSH-6B, LJK-5C, Lla-1A dan Lwa-2C.Bar skala menunjukkan sekitar2% urutan perbedaan.Angka pada node menunjukkan nilai bootstrap dari setiap node dari 100 bootstrap resampling.Urutan gen 16S rRNA dariEscherichia coli X80725digunakan sebagai kelompok keluarAnalisis filogenetik menunjukkan bahwa isolat berkerumundalam genera yaitu,Pseudomonas sp, Stenotrophomonassp, lysinibacillus sp, Arthrobacter sp Myroides spdanBurkholderia spuntuk degraders linuron.FilogenetikPola pengelompokan isolat LoG-8A di filogenetikpohon (Gambar 4) menunjukkan bahwa isolat yang berkerumun denganLysinibacillus sp.peledakan lanjut mengungkapkan bahwa LoG-8Amemiliki 98% kesamaan denganlysiniBacillus sphaericus.IsolasiLwa-2AclusteredrapatuntukArthrobacternitroguajacolicusdengan kesamaan urutan 99%.Pola pengelompokan isolat Lwa-2C, LSH-6B, Ljk-5Cdan Lla-1A yang mereka bergerombol dengan genusBurkholderia, Stenotrophomonas, PseudomonasdanMyroides spmasing didukung oleh bootstrap tingginilai antara 50 - 100%.4. DiskusiIdentitas enam isolat melalui polifasik sebuahPendekatan mengungkapkan bahwa isolat anggotageneralysinibacillus,Burkholderia,pseudomonas,Arthrobacter Flavobacterium dan Stenotrophomonas.Analisis filogenetik diperbolehkan mengidentifikasi galur Ljk-5C sebagaiaspPseudomonas.Para Pseudomonades genus ada diStudi sebelumnya telah dilaporkan untuk menurunkan aromatikhidrokarbon dan pestisida[26].Dalam studi HPLCAnalisis menunjukkan bahwa isolat Ljk-5C memiliki tertinggiTingkat penghapusan linuron di 99,3% selama periode inkubasidari 84 hari.Analisis GC-MS menunjukkan bahwa isolat jugamemiliki kemampuan untuk mendegradasi salah satu perantarametabolit 4CA dengan tingkat penghapusan 83,8% dalam 38hari budaya dibandingkan dengan anilin lain Namun,metabolisme ini antara terlalu lambat setelah 38thhari percobaan ini bisa saja sebagai akibat dariinhibisi oleh 4-chlorocatechol metabolit daridegradasi lengkap 4CA sebelumnya dilaporkan oleh[32].Isolat LSH-6B diidentifikasi sebagaiStenotrophomonassp,posisi filogenetik genus isolat menunjukkanbahwa berkerumun lebih dekat keStenotrophomonasmaltophila.Saring LSH-6B memiliki laju degradasi linuron dari71,7% selama 84 hari masa percobaan denganakumulasi 3, 4 DCA dalam medium.Profil GCMStidak adanya diwahyukan 4CA metabolit dalam kapal budayadari isolat pada akhir masa inkubasi.Hasil inimenunjukkan bahwa isolat memiliki kemampuan untuk mendegradasi 4-chlorocatechol senyawa perantara yang memilikisebelumnya dilaporkan menjadi langkah tingkat-membatasi dalammetabolisme 4CA olehpseudomonas spmengikutiorto-pembelahan jalur[6].Isolat Lwa-2C yang diidentifikasi untukBurkholderia spdengan99% kesamaan urutan keBurkholderia cenocepacia.Isolat memiliki persentase penghapusan 95,5% dari linuron olehakhir 84 hari masa inkubasi Namun, GC-MS

Halaman 7

226International Journal of Environmental Bioremediasi & BiodegradasiAnalisis mengungkapkan bahwa strain tidak mampu untuk melanjutkanbreakdown metabolit antara lain linurondegradasi.Dalam laporan sebelumnya banyak anggota genusBurkholderiatelah ditemukan sebagai pestisida degrader,spesies sepertiBurkholderia kururiensis, Burkholderiasacchari, Burkholderia cepacia terraedanBurkholderia[2-14].Analisis filogenetik dari isolat LLA-1A menunjukkan bahwaisolat milikMyroidesgenera.Urutanditampilkan identitas tertinggi (97%) dengan 16S rRNAgen dariFlavobacterium sp.Isolat memiliki 93,8%Kapasitas penghapusan linuron pada 84thhari inkubasi.Degradasi anilines isolat memiliki kemampuan untukmetabolisme 3CA dan 4CA pada tingkat penghapusan 18% dan11% masing-masing Namun, 3, 4 DCA diamati untukterakumulasi dalam media budaya.Tindakan bersamadariMyroides sptelah diamati untuk degradasiatrazin oleh[30]yang melaporkan bahwaMyroides spmemilikikapasitas untuk menurunkan atrazin herbisida dengan penghapusan sebuahpersentase 90% dalam waktu 3 hari.Sebuah studi oleh[10]mengungkapkan bahwa gen atrazin-merendahkan yang sangatdilestarikan, luas dan sering dikaitkan denganurutan penyisipan (IS) yang terletak di plasmid akibatnya,dan kombinasi IS-dimediasi penataan ulang danTransfer plasmid telah diusulkan untuk berkontribusi padaperakitan dan penyebaran atrazin-merendahkankemampuan dalam lingkungan.Dari sebelumnyaTemuan itu mungkin bagi gen ini memilikimemberikan kontribusi untuk strain kemampuan LLA-1A untuk menurunkanmempelajari senyawa linuron.Isolat LWA-2C, 16S rRNA gene sequencing dan ledakanAnalisis menunjukkan bahwa Lwa-2A adalah 99% homolog denganGen 16S rRNA dariArthrobactersp.Lwa-2A adalah terdekatuntukArthrobacter nitroguajacolicus.Isolat terdegradasi98,9% dari 50mg / l linuron selama 84 hari.DiStudi terkait lainnyaArthrobacter sptelah dilaporkan kephenylureas memetabolisme metoksi-metil-tersubstitusi sepertisebagai linuron, monolinuron dan metobromuron tetapi tidak diurondan monuron[8-38].Analisis filogenetik berkerumunmengisolasi LOG-8A denganLysinibacillus sp.Isolat LOG-8Amenunjukkan 62,7% penurunan konsentrasi linuron oleh70thhari inkubasi yang diikuti oleh tajampenurunan massa sel isolat indikator kematian sel.Pengamatan setuju dengan karya[9]yang terisolasiBacillus sphaericusATCC 12123 yang bisa menggunakan alkilrantai linuron sebagai satu-satunya N dan C sumber.Namun, iajuga mengamati bahwa galur murni hanya bisa sebagianmenurunkan linuron, karena akumulasi (3, 4-DCA)menjadi racun bagi ketegangan.5. KesimpulanPemahaman yang lebih baik tentang mekanismebiodegradasi memiliki makna ekologi tinggi yangtergantung pada mikroorganisme adat untuk mengubahatau termineralisasi kontaminan organik.MikrobaProses degradasi membantu penghapusan linuron darilingkungan dengan cara biaya yang efektif.Hal ini dimungkinkankarena mikroorganisme memiliki sistem enzim untuk mendegradasidan memanfaatkan herbisida sebagai sumber karbon dan energi.Pengetahuan tentang degradasi mikroba linuron mungkinberfungsi sebagai dasar untuk penggunaan sistem bioremediasi untukpenghapusan herbisida lainnya dalam waktu dekat.PengakuanBantuan keuangan dari Jomo Kenyatta UniversitasPertanian dan Teknologi (JKUAT) adalah rasa syukurdiakui oleh penulis pertamaReferensi[1]Amine-Khodja., A. Boulkamh, A. dan Boule, P. "Fotokimia.Perilaku herbisida phenylurea."Fotokimiadanilmu photobiology.3: 145-156.2004.[2]Anthony, R., Smith, W., dan Carol, A, "Induksi enzim dari 2,Degradasi 4 dichlorophenoxyacetate diBurkholderia cepacia 2adan toksisitas intermediet metabolisme ",Biodegradasi.,19, (5).669-681.September 2008.[3]Alexander, K. Steve., K., dan Strete.D,Mikrobiologi: aatlas fotografi untuk laboratorium.Benjamin Cummingspenerbit, California, 2001.[4]Benitez, FJ, Acero, JL, Real FJ, dan Garcia, C, "Penghapusanherbisida fenil-urea dalam air ultra murni dengan ultrafiltrasi danproses nanofiltrasi ".Penelitian Air,43 (2) 267-276.Februari2009.[5]Birech, R., Bernhard, F., dan Yusuf, M .. "Menuju mengurangiimpor pestisida sintetik yang mendukung tersedia secara lokaltumbuhan di Kenya "dalamKonferensiInternasionalPenelitian Pertanian untuk Mengembangkan,Bonn Jerman 8-12.[6]Boon, N., Goris, J., De Vos, P., Verstraete, W., dan Top, E."Keanekaragaman genetik antara 3-chloroaniline-dan anilin-merendahkanstrain dariComamonadaceae ". appllied dan LingkunganMikrobiologi.67 (3) 1107-1115.Mar 2001.[7]Caux, PY, Kent, RA, Fan, GT, dan Grande, C. "Canadianpedoman kualitas air untuk Linuron. "Lingkungan Toxicololgy jiwadan Kualitas Air 13 (1).1-41.Desember 1998.[8]Cullington, J., dan Walker A. "A biodegradasi cepat diurondan herbisida phenylurea lainnya oleh bakteri tanah"Tanah.Biolology dan Biokimia.31 (5).677-686.Mei 1999.[9]Dejonghe, W., Goris J., Dierickx, A., De Dobbeleer, V., CRUL, V.,De Vos, P., Verstraete, W., dan Top, E. "Keragaman 3-Bakteri merendahkan chloroaniline dan 3,4-Dichloroaniline terisolasidari tiga tanah yang berbeda dan keterlibatan mereka dalam plasmidchloroaniline degradasi."janinmikrobiologi dan ekologi.42(2).315-325.Jan 2006.[10]Devers, M. Azhari, NE Udikovic Kolic, N. dan Martin Laurent, F.Deteksi dan organisasi atrazin merendahkan potensi genetiktujuh belas isolat bakteri milik taksa yang berbeda menunjukkanasal mula yang sama baru-baru ini fungsi katabolik mereka,janinMikrobiologi Surats 273 (1) 78-86.Juni 2007.[11]Gregersen T, "metode cepat untuk membedakan Gram-negatifdari Gram-positif Bakteri ".European Journal of terapanMikroba Bioteknologi5 (2) 123-127.1978[12]Gooddy, DC, Mathias SA, Harrison I., Lapworth.DJ dan KimAW, "Arti penting dari koloid dalam transportasi pestisidamelalui Kapur."IlmuLingkungan Total.385 (1-3) 262-271.Oktober 2007.[13]Guzzella, L., Capri, L., DiCorcia, A., Barra Caracciolo, A. danGuiliano, G. "Nasib Diuron dan Linuron di Lapangan lysimeterPercobaan"Journalof Kualitas Lingkungan35:.312-323.2006.[14]Hiroaki, I., Kazuya, A. dan Yoshie, H. "Isolasi dankarakterisasi bakteri 2, 4-dinitrophenol-merendahkan baruBurkholderiasp.strainKU-46 dan degradasi jalur nya. "Janin Mikrobiologi Letters,274 (1).112-117.September 2007.[15]Holt, JG, Krieg, NR, Sneath, PHA, Staley, JT danWilliams, manual ST Bergey tentang penentu Bakteriologi,9thEd.Williams dan Wilkins penerbit, London, 1994.[16]Johnson, A. Besien, T. Bhardwaj, C. Dixon A, Gooddy, D. Haria,A. dan Putih, C. "Penetrasi herbisida ke air tanah dalamterbatasi kapur akuifer berikut aplikasi tanah biasa. "Hidrologi kontaminan.53: 101-117.2001.[17]Lambright, C., Ostby J., Bobsiene K., Wilson V., Hotchkiss K.,Mann C dan E Gray, "Seluler dan Molekuler Mekanismeaksi Linuron sebuah herbisida antiandrogenic yang MenghasilkanMalformasi pada Tikus Pria ".Toksikologi Science,56 (2).389-399. Aug 2000.[18]Lamoree, M., Swart, C., van der Horst, A. dan van Hattum B."Penentuan diuron dan cat antifouling biosida

Halaman 8

International Journal of Environmental Bioremediasi & Biodegradasi227Irgarol1051 di marina Belanda dan perairan pesisir. "Journal ofKromatografi A,970: 183-190, 2002.[19]Macharia, I., Mithofer, D.and Waibel, H. "Potensi lingkungandampak pestisida digunakan dalam sayuran sub-sektor di kenya. "African Journal of Hortikultura Ilmu2, 138-151.2009.[20]Marmur, J. "Prosedur untuk isolasi deoksiribonukleat. asam dari mikro-organisme "Journal of Molecular Biolology3:208-218.Jan 1961.[21]Mehrdad, E., Wabule, MN, Ngaruiya, PN, Kimmins, FK danSilverside, PJ "Masalah yang dihadapi industri bunga danpendaftaran Biocontrol Agen di Kenya, "dalamProsidingyang PCPB / KARI / DFID CPP Workshop, Nakuru, Kenya, 14-16Mei 2003.[22]Muhammad, S., Asif, T., Muhammad, A., Khuram, M., Naeem, S.,Muhammad, I. dan Imran, T. "Pengaruh kompetisi gulma-tanaman dipertumbuhan dan hasil kebun cressLepidium sativumL ".Journal ofTanaman Obat Penelitian.5 (26), 6169-6172.Nov 2011.[23]Philip B., Pieter Jan-, D., Rene De, M., dan Dirk, S."Karakterisasi novel konsorsium bakteri linuron-mineralisasidiperkaya dari jangka panjang tanah pertanian Linuron-diobati. "janinmikroba dan ekologi62: 374-385.Nov 2007.[24]Polz, M. dan Cavanaugh, C. "Bias dalam rasio template-to-produk dimultitemplate PCR. "Terapan Mikrobiologi Lingkungan64 (10)3724-3730.Oktober 1998.[25]PCPB (2005).Pest Produk Pengendalian Dewan, Juli 2004-Juni 2005Laporan Tahunan.[26]Ramanathan, M. dan Lalithakumari, D. "mineralisasi Lengkapdari methylparathion oleh Pseudomonas sp.A3 ".Diterapkanbiokimia dan bioteknologi.80 (1) 1-12.April 1999.[27]Ritter, R. Scheringer, M. MacLeod, M. Moeckel, C. Jones, K. danHungerbhler K. "intrinsik manusia penghapusan setengah kehidupanpolychlorinated biphenyls berasal dari evolusi temporalData biomonitoring cross-sectional dari populasi Inggris. "Kesehatan Lingkungan perspect 119: 225-231,2011[28]Richardson, M. "Pestisida-teman atau musuh?"Ilmu Air danTeknologi37 (8) 19-25.Agustus 1998.[29]Scassellati-Sforzolini, G. Pasquini, R. Moretti, M. Villarini, M.Fatigoni, C. Dolara, P. Monarca, S. Caderni, G. Kuchenmeister, F.Schmezer, P. dan BL Pool-Zobel."Dalam vivostudigenotoxicity linuron murni dan komersial.Mutat.Res.Genet.Toxicol. "Lingkungan mutagen mental.390 (3) 207-22.1997.[30]Smith, D. Alvey, S. dan Crowley, D. "katabolik Koperasijalur dalam budaya pengayaan merendahkan atrazin terisolasidari tanah. 'janin Mikrobiologi dan Ekologi.53 (2): 265-273.Juli2005.[31]Sorensen, SR, Bending, GD, Jacobsen, CS, Walker, A. danAamand, J. "degradasi mikroba dari isoproturon dan terkaitherbisida phenylurea di dan di bawah bidang pertanian. "janinMikrobiologi Ekologi,45 (1) 1-11.Juli 2003.[32]Surovtseva, EG Sukhikh, AP dan Ivoilov, VS "Isozim darijalur untuk anilin dan 4-chloroaniline persiapanmetabolisme diAlcaligenes sp.Mikrobiologiy,61: 99-106.1993[33]Tamura, K. Dudley, J. Nei, M. dan Kumar, S. "MEGA4:Molecular Evolutionary Genetics Analysis (MEGA) softwareversi 4.0 ".Molecular Biology and Evolution24 (8): 1596-1599.Agustus 2007[34]Thompson, J. Higgins, D. dan Gibson, T. "Clustal W:meningkatkan sensitivitas beberapa urutan progresifkeselarasan melalui urutan bobot,-posisi tertentu gapdenda dan pilihan matrix berat badan. "Oxford jurnal nukleatPenelitian asam.22 (22) 4673-4680.Sep 1994.[35]Tixier., C. Sancelme., M. Bonnemoy., F. CUER., A. danVeschambre. Produk, H. "Degradasi herbisida phenylurea,diuron:sintesis,ekotoksisitas,danbiotransformasi. "LingkunganToksikologi &Kimia, 20: 1381-1389, 2001.[36]US Environmental Protection Agency (US EPA) (1995) REDFaktaLinuron(EPA-738-F-95-003).pp.1-11(Http://www.epa.gov).[37]Uyttebroek, M. Breugelmans, P. Janssen, M. Wattiau, P. Joffe, B.Karlson, U. Ortega-Calvo, JJ.Bastiaens, L. Ryngaert, A. Hausner,M. Springael, D. "Distribusi komunitas Mycobacteriumdan hidrokarbon aromatik polycylic (PAH) antara ukuran yang berbedafraksi tanah PAH terkontaminasi jangka panjang. "LingkunganMikrobiologi 8 (5) 836-847.Mei 2006.[38]Ware, GW dan Whitacre, DMThe Pestisida Buku, MeisterProSumber Daya Informasi,Willoughby, Ohio.pp. 496.[39]Widehem P, Ait-Aissa S, Tixier C, Sancelme M, Veschambre Hdan Truffaut, N. "Isolasi, karakterisasi dan diuronkapasitas transformasi dari bakteri galurArthrobacter sp.N2. "Chemoshere, 46 (4) 527-534.Jan 2002.