Transcripcion diapositivas
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FREDY ZEGARRA ARAGON
DNA RNA PROTEINAS mRNA
rRNA tRNA
RE
PL
ICA
CIO
N
TRANSCRIPCION TRADUCCION
DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGIA MOLECULAR
( PPi )n4 ( NTP )n
Mg2+
ARN
+ + +
ADN
( NMP )n
ADN
( NMP )n ( NMP ) n + 1
RNA Polimerasa5’ 3’
TRANSCRIPCION : REACCION GENERAL CATALIZADA POR LA RNA POLIMERASA
RNA Polimerasa
5’
3’
RNA
DNA
5’ 3’
3’
5’ 3’
5’
RBP 1
RBP 2
CTD
9 10
6
8
5
11
312Tipo α
Tipo ω
ADN
( 12 subunidades )
MODELO DE ESTRUCTURAS DE RNA POLIMERASAS BASADOS EN ANALISIS CRISTALOGRAFICOS
RNA POLIMERASA DE BACTERIAS
( procariote )
RNA POLIMERASA II DE LEVADURAS
( eucariote )
β
β ’
α I
α II
ω
ADNσCaja -10: TATAAT
Caja -35: TTGACA
Caja TATA
Caja CAAT
N U C L E A R E S
I II III
Subunidades de alto Peso
Molecular
195 – 197 Kd 117 – 126
240 – 214 Kd 140
155 Kd 138
Subunidades de bajo Peso Molecular
Varias, entre 16 a 61 Kd
Varias, entre 16 a 41 Kd
Varias, entre 19 a 89 Kd 65 Kd
Formas Variables
2 a 3 tipos 3 a 4 tipos 2 a 4 tipos 1 tipo
RNA sintetizado
Nucleolo rRNA (28S, 18S y 5.8S)
HnRNA, mRNA ARN
viral SnARN
tRNA rRNA 5S
SnRNA
mt RNA
Inhibición por alfa amanitina
No Si (muy sensible)
Si (menos sensible)
No
MITOCONDRIAL
RNA POLIMERASAS DE EUCARIOTES
SECUENCIAS PROMOTORAS Y REGULADORAS DE UN GEN DE LA CLASE II
P R O M O T O R
TATAGCCAATSDE
INTENSIFICADOR- 50 - 30 - 20 + 1 20 - 200- 150
3’ 5’ 3’ 5’
Sitio de Inicio de la Transcripción
Pol II
TF II HTF II F
TF II E
TF II BTF II A
TBP
TF II D
TAFs
CRE Factores Generales de Transcripción
AGGTCA TGACCT.
HAT
CREB
Enhancer
Transcripción
GCCATCGGGC
Caja TATA: -25
Caja CAAT
5’ 3’
3’ 5’
5’ 3’
ADN
Top : Codificante
botton
ARN (Transcripto)
TRANSCRIPCION EN PROCARIOTES
A
RNA POLIMERASA
COMPLEJO CERRADO
Factor σ
Iniciación de la transcripción por unión de la RNA Polimerasa en el sitio de inicio.
5’
3’
RNA
4 (NTP)n
(PPi)nC Elongación de la cadena de
RNA por adición de NTPs
Apertura de la doble hélice del ADN e Iniciación de la cadena de ARN con la unión de los primeros dos
Ribonucleósidos Trifosfatos
5’
3’
ARN POLIMERASA
RNA NACIENTE
B
Factor σ ( bacterias )
COMPLEJO ABIERTO
40 nucleótidos / Segundo
Nus A
Rho
5’
3’
RNA
5’
3’RNA
RNA POLIMERASA
DNA
Terminación y liberación de la Polimerasa y el RNA completado dependiente de Rho
D
Rho
C....G
C.…G
U.…A
C….G
G….C
G….C
A….U
A….U
A….U
U
U U
U
U – U – U – U – U – OH A – U – U
Secuencias desapareadas
de Us
Tallo rico en G + C
ESTRUCTURA DE TALLO – BUCLE DEL EXTREMO 3’ QUE INDICA TERMINACION DE UN RNA TRANSCRITO INDEPENDIENTE DE RHO
5’
3’
RNA
5’
3’
RNA
PAUSA
ISOMERIZACION
Modelo de terminación de la transcripción independiente de rho ( ρ )
E
TERMINACION
Intrones
HnRNA5’ 3’
mRNA
A A A A A A A A …….. A
5’ 3’
Cap
Cola de poli A
Añadido de Poli A
Añadido del Cap
IntronesExones
PROCESAMIENTO DE LOS mRNAs EUCARIOTICOS
AGUAGG AGC C A 5’
3’
sn RNP U1
sn RNP U2
AGUAGG AG
sn RNP U1 sn RNP U2
snRNP U4/U6 + snRNP U5
U2 U1
U4 / U6
U5
A
snRNPs
5’
RNASecuencia señal de
Poli-A en el RNA
Secuencia Señal de Poli-A en el DNA
P P P PP
CstFCPSF
Corte del RNA
AAAAAAA
AAAAAAAAAAAAAA
Poli-A Polimerasa (PAP)
CstF
CPSF
Proteína Unidora de Poli-A
Proteína Unidora de Poli-A Adicional
3’5’
5’
3’
3’
5’
5’
PAP
Figura Nº 4.15. Poliadenilación y Terminación de la síntesis de un mRNA eucariótico.
Dominio CTD
AAUAAA
Factor Específico de Corte y
Poliadenilación
Factor Estimulante de Corte
CTD
Dominio del extremo C-Terminal
AAAAAAA
AAAAAAAAAAA
AA
Receptor de Transporte
nuclear
Proteína de unión al poli-A
Casquete 5’
Complejo del Poro Nuclear
NUCLEO CITOPLASMA
AAAAAAAAAA …. A
AAAAAAAAAA …. A
TRANSCRIPCION
PROCESAMIENTO
ADN
Hn RNA
m RNA
m RNA
TRADUCCION (Síntesis Proteica)
NUCLEO CITOPLASMA
rRNA 28 S 5.8 S rRNA 18 S
DNA
Pre-rRNA 45 S
TRANSCRIPCION POR LA RNA POLIMERASA I
Estructura de una unidad de transcripción de rRNA
Nucleolo: Cromosoma ---- GEN Organizador Nucleolar
“TANDEM”
ESQUEMA DE LA TRANSCRIPCION Y PROCESAMIENTO DE LOS rRNAs EUCARIOTICOS
DNA
3’ 5’
28 S 18 S5.8 S Pre- rRNA 45 S
Pre – rRNA 32 S Pre – rRNA 20 S
rRNA 18 S
rRNA 28 S
rRNA 5.8 S
Transcripción y metilación
3’5’
28 S 18 S5.8 S
Pre- rRNA 41 S
RNA Polimerasa I
G E N D E D N A R I B O S O M A L
CORTE CORTE
CORTE
CORTE
CORTE
RNA Polimerasa III
TF III A
TF III A
+1
+1
+47
+47
+96
+96
+121
+121
Contactos Proteína-Proteína entre TF III A y la RNA Polimerasa III
TRANSCRIPCION POR LA RNA POLIMERASA III
Factores de Transcripción para genes eucarióticos de la Clase III
DNA INTRON
Transcripción
OH 3’ 5’ P – P – P – Endonucleasa Exonucleasa
RNAasa P
TRANSCRIPTO PRIMARIO
Intrón
Añadido de CCA – OH y modificaciones en el
extremo 3’
ESQUEMA PARA EL PROCESAMIENTO DE UN tRNA
EUCARIOTICO
RNA Polimerasa III
Añadido de CCA – OH y modificaciones en el
extremo 3’
ESQUEMA PARA EL PROCESAMIENTO DE UN tRNA
EUCARIOTICO
Intrón
ACC
HO 3’
5’ P
ACC
HO
3’
5’ P
tRNA MADURO
ELIMINACION DEL INTRON
ESQUEMA PARA EL PROCESAMIENTO DE UN tRNA
EUCARIOTICO
INHIBIDORES DE LA TRANSCRIPCION
Actinomicina D
Acridina
Alfa amanitina
Rifampicina
EUCARIOTES RNAs (núcleo) Salida al citosol
(Procesamiento)
PROCARIOTES RNAs (procesamiento: Excepto mRNA)