Kasmera 42(2): 116 - 130, julio-diciembre 2014ISSN 00755222 / Depósito legal 196202ZU39

Tipo de cas set te cro mo só mi co es ta fi lo có ci coen ce pas clí ni cas de Staphylo coccus au reus re sis ten tesa me ti ci li na

Staphylococcal Chromosomal Cassette Type in Clinical Strainsof Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus

Cas te lla no Gon zá lez, Ma ri bel J.1,Ca vazza Po rro, Ma ría E.2

y Pe ro zo Mena, Ar min do J.3

1Cá te dra de Bac te rio lo gía Ge ne ral. De par ta men to de Mi cro bio lo gía.Es cue la de Bioa ná li sis. LUZ, Ma ra cai bo, Ve ne zue la.

2Ser vi cio Au tó no mo Ins ti tu to de Bio me di ci na Dr. Ja cin to Con vit.La bo ra to rio de Mi cro bio lo gia Mo le cu lar. Ca ra cas, Ve ne zue la.

3Cá te dra de Prác ti ca Pro fe sio nal de Bac te rio lo gía.Cen tro de Re fe ren cia Bac te rio ló gi ca Ser vi cio Au tó no mo Hos pi tal

Uni ver si ta rio de Ma ra cai bo. De par ta men to de Mi cro bio lo gía.Es cue la de Bioa ná li sis. LUZ. Ma ra cai bo, Ve ne zue la.

Re su men

Staphylo coccus au reus re sis ten te a me ti ci li na (SAMR) pre sen ta una pro teí na de unión a lape ni ci li na, la PBP2a co di fi ca da por el gen mecA, que se en cuen tra en un ele men to ge né ti co mó villla ma do cas set te cro mo só mi co es ta fi lo có ci co (SCCmec). El pre sen te es tu dio se rea li zó para exa mi-nar la sus cep ti bi li dad an ti mi cro bia na, pro duc ción de leu co ci di na de Pan ton- Va len ti ne (PVL) ytipo de SCCmec pre sen te en ce pas ais la das de 54 pa cien tes en un hos pi tal du ran te un pe río do detres me ses. Las prue bas de sus cep ti bi li dad an ti mi cro bia na se rea li za ron me dian te el mé to do de di-fu sión en agar y el mecA, PVL y los ti pos de SCCmec se de ter mi na ron usan do la reac ción en ca de nade po li me ra sa (PCR). Vein ti nue ve (29) ce pas co rres pon die ron al SCCmec tipo IV (54%), 22 alSCCmec tipo I (40%), 2 al SCCmec tipo IA (4%) y 1 al SCCmec IIIB (2%). Die ci nue ve ce pas (35%)re sul ta ron po si ti vas para PVL, to das SCCmec tipo IV. Cua ren ta ce pas (74%) ex pre sa ron mul ti- re-sis ten cia. To dos los ais la mien tos fue ron sen si bles a van co mi ci na, tei co pla ni na, li ne zo lid, ti ge ci cli-na y mo xi flo xa ci na. No se en con tró aso cia ción es ta dís ti ca men te sig ni fi ca ti va en tre la pre sen cia delgen PVL, la re sis ten cia an ti mi cro bia na y el tipo de SCCmec (p>0,05). Los SCCmec ti pos IV y I sonlos más fre cuen tes en las ce pas SAMR cir cu lan tes en la ins ti tu ción.

Pa la bras cla ve: S. au reus me ti ci li no-re sis ten te; SCCmec; re sis ten cia; PVL.

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Re ci bi do: 03-09-14 / Acep ta do: 29- 09- 14

Abs tract

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) presents a protein that binds topenicillin, the PBP2a, encoded by the gene mecA, located in a mobile genetic element called thestaphylococcal chromosomal cassette (SCCmec). This study was conducted to examine theantimicrobial susceptibility, Panton-Valentine leukocydine (PVL) production and thestaphylococcal chromosomal cassette mec (SCCmec) type for MRSA isolates from 54 patients in ahospital during a three-month period. Antimicrobial susceptibility testing was performed using anagar diffusion method; mecA, PVL and SCCmec types were determined using polymerase chainreaction (PCR). Twenty-nine strains (29) corresponded to type IV SCCmec (54%), 22 to type ISCCmec (40%), 2 to type IA SCCmec (4%) and 1 to SCCmec IIIB (2%). Nineteen strains (35%) werepositive for PVL, all of type IV SCCmec. Forty strains (74%) expressed multiresistance. All MRSAisolates were susceptible to vancomycin, teicoplanin, linezolid, tygecicline and moxifloxacina. Nostatistically significant association was found between the presence of the PVL gene, antimicrobialresistance and the SCCmec type (p>0.05). SCCmec types IV and I are the most frequent in theMRSA strains circulating in the institution.

Key words: Methicillin-resistant S. aureus, SCCmec, resistance, PVL.

In tro duc ción

Staphylo coccus au reus re sis ten te a me-ti ci li na (SAMR) es un pa tó ge no im por tan teque pre sen ta una pro teí na de unión a pe ni ci-li na, la PBP2a, co di fi ca da por el gen mecAque se en cuen tra en un ele men to ge né ti comó vil lla ma do cas set te cro mo sómico es ta fi-lo có cico (SCCmec) (1).

Se han des cri to cin co cla ses de com ple-jos ge né ti cos mec (A, B, C1, C2 y D), y cin coalo ti pos de com ple jos ge né ti cos ccr (ti pos 1,2, 3, 4 y 5). Di fe ren tes com bi na cio nes de lascla ses de com ple jos ge né ti cos mec y de losalo ti pos ccr dan lu gar a va rios ti pos deSCCmec ( I [1B], II [2 A], III [3 A], IV [2B], V[5C2], VI [4B]), que son cla si fi ca dos a su vezde acuer do con las va ria cio nes en la re gión“J” (2), y se di fe ren cian tam bién, se gún losde ter mi nan tes ge né ti cos ad qui ri dos comore sul ta do de la in te gra ción de plás mi dos ytrans po so nes, ta les como Tn554, el cual co di-fi ca re sis ten cia a ma cró li dos, clin da mi ci na yes trep to gra mi na B (3).

Más re cien te men te, un nue vo tipo deSCCmec: 5C1, de sig na do tipo VII, se des cri-

bió en Sue cia en una cepa SAMR ad qui ri daen la co mu ni dad (SAMR-C) y otro tipo decas set te lla ma do tipo VIII, en una cepa epi dé-mi ca SAMR ad qui ri da en un cen tro hos pi ta-la rio (SAMR-H) de Ca na dá (2).

Ade más, en el si tio web del gru po de tra-ba jo in ter na cio nal so bre la cla si fi ca ción delos ele men tos del cas set te es ta fi lo có ci co(IWG- SCC) (4), se enu me ran al gu nos mec,ccr y ti pos de SCCmec adi cio na les que no sehan des cri to en la li te ra tu ra pu bli ca da. De bi-do a la am plia di ver si dad que se ha ob ser va doen la or ga ni za ción ge né ti ca de los ele men tosdel SCCmec, el IWG- SCC es ta ble ció cri te riospara es tan da ri zar la cla si fi ca ción de los ele-men tos del cas set te, por lo que se re quie rease so ra mien to y que la se cuen cia com ple tade nu cleó ti dos sea de ter mi na da para cadanue vo ele men to del cas set te an tes de su asig-na ción a un tipo de ter mi na do de SCCmec (5).

La ma yo ría de los ais la mien tos pro ve-nien tes de los hos pi ta les per te ne cen a los ti-pos I, II y III; mien tras que los ais la mien tosde ri va dos de la co mu ni dad, en su ma yo ríaper te ne cen al tipo IV. Re cien te men te, elSCCmec tipo IV ha sur gi do en hos pi ta les, y

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este cam bio en la epi de mio lo gía hos pi ta la riaha te ni do im pac to en las op cio nes te ra péu ti-cas para las in fec cio nes re la cio na das con es-tas ce pas y su con trol (1).

Las ce pas de S. au reus ad qui ri das en laco mu ni dad (SAMR-C) di fie ren de las ce pashos pi ta la rias (SAMR-H) en la sus cep ti bi li-dad a otros gru pos de an ti bió ti cos; por lo ge-ne ral, las ce pas hos pi ta la rias son más re sis-ten tes a los an ti mi cro bia nos. Por otra par te,las ce pas de SAMR-C po seen nu me ro sos fac-to res de vi ru lencia, que las dis tin guen, en treellos la to xi na Pan ton–Va len ti ne (PVL), unaleu co ci di na res pon sa ble de des truir leu co ci-tos y pro du cir ne cro sis ti su lar, la cual es co-di fi ca da por dos ge nes co trans cri tos(lukS–PV y lukF–PV) que re si den en un pro-fa go, y cuya pre sen cia se ha aso cia do con elagra va mien to de las in fec cio nes oca sio na-das por es tas ce pas en jó ve nes y ni ños (6).

Es im por tan te des ta car que las ce pas deSAMR-C han sido ais la das en los es ta ble ci-mien tos de sa lud, lo que ha oca sio na do queam bos ti pos de ce pas cir cu len en los hos pi ta-les y las co mu ni da des. En Ve ne zue la, es pe cí-fi ca men te, en el Es ta do Zu lia, se des co no ce laexis ten cia de es tu dios que per mi tan de ter mi-nar el pre do mi nio de al gu no de los ti pos decas set te cro mo somómi cos SCCmec pre sen-tes en las ce pas SAMR cir cu lan tes. La in tro-duc ción de téc ni cas de ti pi fi ca ción mo le cu larha pro vis to de nue vas he rra mien tas para eles tu dio de este mi cro or ga nis mo y su re sis-ten cia a los an ti bió ti cos. Por ello, su apli ca-ción en esta in ves ti ga ción, per mi tió co no cerlas ca rac te rís ti cas de las ce pas cir cu lan tes enuna de las ma yo res uni da des hos pi ta la rias deMa ra cai bo, lo que pro por cio na in for ma ciónde im por tan cia epi de mio ló gi ca para los pro-gra mas de con trol de las in fec cio nes es ta fi lo-có ci cas, a tra vés del lo gro de los si guien tesob je ti vos: es ta ble cer el tipo de SCCmec pre-

sen te, de tec tar el gen que co di fi ca para PVL yde ter mi nar la re sis ten cia an ti mi cro bia na ence pas SAMR.

Ma te ria les y mé to dos

Po bla ción de es tu dio y mues trasSe es tu dia ron 54 ce pas SAMR ais la das

de dis tin tos ti pos de mues tras de pa cien teshos pi ta li za dos, que fue ron pro ce sa das en ella bo ra to rio de bac te rio lo gía del cen tro hos pi-ta la rio, en un pe río do de tres me ses.

To dos los pro ce di mien tos du ran te laeje cu ción de la pre sen te in ves ti ga ción se rea-li za ron de acuer do a las nor mas es ta ble ci daspor la Or ga ni za ción Mun dial de la Sa lud(OMS) para tra ba jos de in ves ti ga ción en se-res hu ma nos, la de cla ra ción de Hel sin ki, ra ti-fi ca da por la 52ª Asam blea Ge ne ral, Edim-bur go, Es co cia en el año 2000 (7) y el Có di gode Bio se gu ri dad y Bioé ti ca de la Re pú bli caBo li va ria na de Ve ne zue la (8). Se con tó ade-más, con la au to ri za ción del Co mi té de Éti cadel Hos pi tal.

Ais la mien to bac te ria no yde ter mi na ción de la sus cep ti bi li dadan ti mi cro bia na

Las mues tras fue ron ino cu la das y pro ce-sa das de acuer do a la me to do lo gía con ven-cio nal (9) y las ce pas de S. au reus fue roniden ti fi ca das uti li zan do el sis te ma au to ma ti-za do VI TEK II® (BIO MÉ RIEUX). La sus cep-ti bi li dad a me ti ci li na fue de ter mi na da uti li-zan do el mé to do de di fu sión con dis co de ce-fo xi ti na (30ug), de acuer do a los li nea mien-tos del Cen tro para la Es tan da ri za ción de La-bo ra to rios Clí ni cos (CLSI) (10) y ve ri fi ca dame dian te am pli fi ca ción del gen mecA porme dio de la reac ción en ca de na de la po li me-ra sa (PCR) .

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Am pli fi ca ción del gen mecA y pvl porPCR

Ex trac ción del ADN ge nó mi co deS. au reus: se uti li zó la téc ni ca de li sis en zi-má ti ca. A par tir de un cul ti vo puro de 24 ho-ras, se tomó un mí ni mo de 10 co lo nias, y setrans fi rió a un tubo con 400 µl de buffer de li-sis (buffer TE) (10mM Tris- HCl, pH 8,0; 1mM EDTA, pH 8,0; 25 ng/µl de li sos ta fi na)se in cubó a 37°C por 1 hora. Se le agregó 40 µlde SDS (do de cil- sul fa to de so dio) al 1% y 10µl de pro tei na sa K a una con cen tra ción de250 ng/µl, y se in cubó a 50ºC por 1 hora. Serea li zó la ex trac ción con fe nol- clo ro for mo 1:1(agre gando 400 µl de la mez cla).

La mez cla se agi tó y se cen tri fu gó a14.000 rpm por 20 mi nu tos. Con una pi pe ta,se ex tra jo la fase acuo sa y se pasó a un nue votubo eppen dorf. El ADN con te ni do en la faseacuo sa fue pre ci pi ta do con 1 ml de eta nol ab-so lu to (100%) y se guardó a -20°C du ran tetoda la no che. Al día si guien te, pre via des-con ge la ción, este tubo se cen tri fu gó a 14.000rpm por 10 mi nu tos. Se des car tó el so bre na-dan te y al se di men to se le agre gó 400 µl deeta nol al 70%.

El so bre na dan te fue des car ta do por in-ver sión. El se di men to se dejó se car du ran te30 mi nu tos, co lo can do los tu bos eppen dorfdes ta pa dos so bre un pa pel ab sor ben te. El se-di men to se re sus pen dió en 100 µl de bufferTE 10 mM. Se uti li za ron 3 µl de la mues trapara rea li zar los en sa yos de am pli fi ca ción.

Am pli fi ca ción del gen mecA y PVLme dian te la Reac ción en ca de na de lapo li me ra sa: Los pri mers uti li za dos du ran-te el pro ce so de am pli fi ca ción, fue ron: 5’- A-AC AGG TGA ATT ATT AGC ACT TGT AAG- 3’ y 5’- ATT GCT GTT AAT ATT TTT TGA GTTGAA- 3’, para mecA y 5’- A AT CTT TGTCGGTAC ACG ATA TTC TTC ACG- 3’ y 5’- CGT AAT GAG ATT TCA GTA GAT AAT ACA

ACA- 3’, se uti li za ron como con tro les para laiden ti fi ca ción de S. au reus. (11).

Para la de tec ción de PVL, se uti li zó el mis-mo ci clo de reac ción, em plean do como ini cia-do res de la reac ción los si guien tes: Luk- PV-1:5’- ATC ATT AGG TAA AAT GTC TGG ACATGA TCC A-3’ y Luk- PV-2: 5’- GCA TCA ASTGTA ATT GGA TAG CAA AAG C-3’(12).

Se tomó una alí cuo ta de 3 µl del ADNpre via men te ex traí do de S. au reus, la cual setrans fi rió di rec ta men te a 20 µl de mez cla paraPCR, con te nien do: 50 mM KCl; 10 mM Tris- HCl (pH 9,0); 0,1% Tri tón X- 100; 2,5 mMMgCl2; 0,4 µM de cada uno de los pri mers,200 µM de cada uno de los cua tro de so xi nu-cleó ti dos tri fos fa to y 0,5 U de ADN po li me ra saTaq (Pro me ga®). Las mez clas de PCR fue ronso me ti das a un ci clo tér mi co en un ter mo ci-cla dor mo de lo PTC- 200 (MJ Re search, Inc®,Massa chu setts, USA), como se des cri be a con-ti nua ción: 5 mi nu tos a 96ºC; 35 ci clos de 20se gun dos a 95ºC, 30 se gun dos a 55°C y 30 se-gun dos a 72ºC. Lue go, 5 mi nu tos a 72°C y con-ser va dos in de fi ni da men te a 4°C.

Los pro duc tos de la am pli fi ca ción (5 µl)se se pa ra ron me dian te elec tro fo re sis en gelde aga ro sa al 2,5% con te nien do 0,5 µg/ ml debro mu ro de eti dio, en buffer tris- bo ra to- EDTA (89 mM Tris, 89 mM áci do bó ri co, 2mM EDTA) a 80 V/cm, du ran te 90 mi nu tos.Los ge les fue ron vi sua li za dos bajo luz ul tra-vio le ta (254 nm) y se fo to gra fia ron con unacá ma ra di gi tal. El ta ma ño de los pro duc tos deam pli fi ca ción del PCR fue es ti ma do por com-pa ra ción con un mar ca dor de peso mo le cu larde 100 pb. De ma ne ra que, la pre sen cia deuna ban da de 174 pb fue in di ca ti va de la pre-sen cia de mecA y una de 433 pb, de la pre sen-cia del gen que co di fi ca para PVL. To das lasce pas am pli fi ca ron la ban da de 108 pb, co-rres pon dien te al con trol in ter no de iden ti fi-ca ción de S. au reus.

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De ter mi na ción del tipo de SCCmecpre sen te en las ce pas SAMR

La ti pi fi ca ción del ele men to cro mo só mi coque por ta el gen de re sis ten cia a me ti ci li na seefec tuó me dian te PCR de tipo múl ti plex ba sa-da en el uso de ini cia do res para de tec tar las se-cuen cias de los di fe ren tes ti pos de SCCmec. Sese lec cio na ron 8 lo cus con base a se cuen ciaspre via men te des cri tas (Ta bla 1) (13).

En cada reac ción se uti li za ron los si-guien tes com po nen tes: tam pón de PCR a unacon cen tra ción de X1, MgCl2 2 mM, dNTP(dinu cleó ti do tri fos fa to) 25 µm, y los si guien-tes ini cia do res y sus con cen tra cio nes paracada lo cus: para el lo cus A (CIF2 F2 65 pM yCIF2 R2 75 pM), para el lo cus B (KDP F1 YKDP R1, am bos a 29 pM), para el lo cus C(MECI P2 y MECI P3, am bos a 81 pM), parael lo cus D (DCS F2 77 pM y DCS R1 63 pM),para el lo cus E (RIF4 F3 y RIF4 R9, am bos a34 pM), para el lo cus F (RIF5 F10 y RIF5 R13,

am bos a 66 pM), para el lo cus G (IS431 P4 75pM y pUB110 R1 65pM) y para el lo cus H(IS431 P4 75 pM e ini cia dor pT181 R1 70 pM).

Para los ini cia do res del con trol in ter node am pli fi ca ción (me cA-1 y me cA-2) se uti li zóuna con cen tra ción de 50 pM. A esta mez clapara la am pli fi ca ción se le aña dió ade más, 1uni dad de Taq DNA po li me ra sa, 3 µl del ADNmol de y, fi nal men te, agua gra do ana lí ti cohas ta com ple tar un vo lu men fi nal de 50 µl.

Las con di cio nes para la am pli fi ca ciónfue ron las si guien tes: 12 mi nu tos para la des-na tu ra li za ción a 94°C, 30 ci clos de am pli fi ca-ción (45 se gun dos para des na tu ra li za ción a94°C, 45 se gun dos para la hi bri da ción a 55°Cy 1 mi nu to a 72°C para el pro ce so de ex ten-sión) y se le adi cio nó una úl ti ma fase de ex-ten sión de 2 mi nu tos a 72°C y pos te rior en-fria mien to has ta 4°C.

Los pro duc tos de la am pli fi ca ción fue-ron se pa ra dos, te ñi dos, vi sua li za dos y fo to-

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120 Cas te lla no González, L. et al.

Ta bla 1. Lo cus, se cuen cias de oli go nu cleó ti dos, ta ma ño es pe ra do del pro duc to y tipo de SCCmec.

Locus Iniciador Secuencia TamañoAmplificado

Tipo SCCmec

A CIF2 F2 5’TTCGAGTTGCTGATGAAGAAGG3’ 495 pb I

CIF2 R2 5’ATTTACCACAAGGACTACCAGC3’

B KDP F1 5’AATCATCTGCCATTGGTGATGC3’ 284 pb II

KDP R1 5’CGAATGAAGTGAAAGAAAGTGG3’

C MECI P2 5’ATCAAGACTTGCATTCAGGC3’ 209 pb II, III

MECI P3 5’GCGGTTTCAATTCACTTGTC3’

D DCS F2 5’CATCCTATGATAGCTTGGTC3’ 342 pb I, II, IV

DCS R1 5’CTAAATCATAGCCATGACCCG3’

E RIF4 F3 5’GTGATTGTTCGAGATATGTGG3’ 243 pb III

RIF4 R9 5’CGCTTTATCTGTATCTATCGC3’

F RIF5 F10 5’TTCTTAAGTACACGCTGAATCG3’ 414 pb III

RIF5 R13 5’GTCACAGTAATTCCATCAATGC3’

G IS431 P4 5’CAGGTCTCTTTCAGATCTACG3’ 381 pb IA

Pub110 R1 5’GAGCCATAAACACCAATAGCC3’

H IS431 P4 5’CAGGTCTCTTCAGATCTACG3’ 303 pb IIIA

pT181 R1 5’GAAGAATGGGGAAAGCTTCAC3’F. de I: Oli vei ra D, de Len cas tre H 2002 (13).

gra fia dos como se men cio nó an te rior men te.Los di fe ren tes seg men tos am pli fi ca dos fue-ron cla si fi ca dos como per te ne cien tes a cadatipo de cas set te es ta fi lo có ci co como se des cri-be en la Ta bla 1.

De ter mi na ción de la re sis ten ciaan ti mi cro bia na

Para de ter mi nar la re sis ten cia a losagen tes an ti mi cro bia nos, se uti li zó el mé to dode Kir by & Bauer y para la de ter mi na ción dela sus cep ti bi li dad a van co mi ci na se em pleó elmé to do de E- test®, am bos de acuer do a loscri te rios del CLSI (10). La in for ma ción ob te-ni da fue pro ce sa da me dian te el pro gra maWHO NET TM (ver sión 5,6).

Aná li sis es ta dís ti coPara de ter mi nar si exis te aso cia ción en-

tre las ca rac te rís ti cas fe no tí pi cas y ge no tí pi-cas es tu dia das se uti li zó la prue ba de Chi- cua dra do con un va lor de p<0,05; uti li zan doel pa que te es ta dís ti co SPSS TM ver sión 21.

Re sul ta dos

La to ta li dad de las ce pas ana li za das am-pli fi ca ron el frag men to de 108 pb (S. au reus)y el de 174 pb (mecA) de mos tran do que ver-da de ra men te se tra ta ba de ce pas SAMR (Fi-gu ra 1).

La dis tri bu ción de las ce pas SAMR deacuer do al aná li sis de la es truc tu ra del cas-set te cro mo só mi co de ter mi na da me dian tePCR se pre sen ta en la Fi gu ra 2.

La Figu ra 3 mues tra los pa tro nes de ban-das para cada tipo de cas set te cro mo sómico(SCCmec); ob ser ván do se que las ce pas por ta-do ras del SCCmec tipo I am pli fi ca ron dos ban-das, una de 342 pb y la otra de 495 pb. Las deltipo SCCmec IA pre sen ta ron ade más, una ban-da de 381 pb. Por su par te, las ce pas conSCCmec tipo IIIA mos tra ron 3 ban das: una de

209 pb,una de 243 pb y la úl ti ma de 303 pb.En las ce pas con el cas set te tipo IV se ob ser vóúni ca men te una ban da de 342 pb.

La sus cep ti bi li dad y re sis ten cia de lasce pas SAMR es tu dia das a los di ver sos an ti-bió ti cos se pre sen ta en la Ta bla 2. Cua ren tace pas (74%) ex pre sa ron mul ti- re sis ten cia(re sis ten cia a tres o más gru pos de an ti mi cro-bia nos). No se ob ser vó re sis ten cia a li ne zo lid,tei co pla ni na, fos fo mi ci na, mu pi ro ci na, qui-nu pris tin/dal fo pris tin, van co mi ci na y ti ge ci-cli na. Se en con tró re sis ten cia a eri tro mi ci na,clin da mi ci na, te tra ci cli na, ci pro flo xa ci na, le-vo flo xa ci na, ga ti flo xa ci na, ami ka ci na, gen ta-mi ci na, clo ran fe ni col, ri fam pi ci na, y co tri-mo xa zol. La dis tri bu ción de la re sis ten cia portipo de SCCmec se mues tra en la Ta bla 3.

Die ci nue ve ce pas (35%) re sul ta ron po si-ti vas para PVL, to das por tado ras del SCCmectipo IV (Fi gu ra 4).

Al apli car el chi–cua dra do, no se en contróaso cia ción sig ni fi ca ti va en tre el tipo deSCCmec pre sen te, la sus cep ti bi li dad an ti mi-cro bia na y la pre sen cia de PVL con el ori gen“hos pi ta la rio” de las ce pas SAMR es tu dia das.

Dis cu sión

S. au reus po see una co no ci da ha bi li dadpara ge ne rar cam bios ge né ti cos rá pi dos y es-ta bi li zar los en su ge no ma. Esta ca rac te rís ti cahace in dis pen sa ble rea li zar la ti pi fi ca ción fe-no tí pi ca y ge no tí pi ca de los ais la mien tos ob-te ni dos, para que la vi gi lan cia epi de mio ló gi-ca per mi ta en ten der el com por ta mien to ydis tri bu ción del pa tó ge no; y asi es ta ble cerme di das apro pia das de con trol de la in fec-ción y su di se mi na ción (14).

La pre va len cia de los SCCmec va ría deun área geo grá fi ca a otra. No se en con tra ronmu chos es tu dios en re la ción al tema en la li-te ra tu ra na cio nal; sin em bar go, una in ves ti-ga ción rea li za da en el orien te del país por

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122 Cas te lla no González, L. et al.

Fi gu ra 1. Detección del gen mecA por PCR en cepas SAMR.

Carril 1 MPM (100bp); carril 2 SCC mec tipo I;carril 3 SCCmec tipo IA; carril 4 Sccmec tipo II; carril 5 SCCmec tipo III; carril 6 SCCmec tipoIIIA; carril 7 SCCmec tipo III B; carril 8 SCCmec IV; carriles 9 al 21: muestras.Fi gu ra 3. Patrones de bandas obtenidos para los diferentes tipos de SCCmec.

Fi gu ra 2. Tipo de SCCmec presente en las cepas SAMR.

Acu ña (15) re fie re re sul ta dos con tra rios:SCCmec tipo I (66,67%) y el IV con 14,28%.En este tra ba jo, el SCCmec más fre cuen te-

men te en con tra do fue el tipo IV (54%), se gui-do del tipo I (22%); si tua ción si mi lar a la des-cri ta en Bu ca ra man ga (Co lom bia) por Ma-

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Ta bla 2. Sus cep ti bi li dad y Re sis ten cia An ti mi cro bia na en ce pas SAMR.

Antibiótico Resistentes(%)

Sensibles(%)

Eritromicina 83,33 16,67

Clindamicina 64,81 35,19

Amikacina 64,81 35,19

Gentamicina 64,81 35,19

Ciprofloxacina 66,67 33,33

Levofloxacina 64,81 35,19

Gatifloxacina 62,96 37,04

Trimetoprim/Sulfametoxazol 1,85 98,15

Rifampicina 1,85 98,15

Cloranfenicol 7,40 92,60

Tetraciclina 7,40 92,60

Otros* - 100,00

*Li ne zo lid, van co mi ci na, tei co pla ni na, qui nu pris tin/dal fo pris tin, fos fo mi ci na, mu pi ro ci na y ti ge ci cli na.

Ta bla 3. Re sis ten cia an ti mi cro bia na se gún tipo de SCCmec en ce pas SAMR.

Perfil de Resistencia Resistencia Tipo de SCCmec

No de cepas % I IA IIIB IV

PG-OX 6 11,11 - - - 6

PG-OX-E 5 9,26 - - - 5

PG-OX-CIP 1 1,85 - - - 1

PG-OX-GM 1 1,85 - - - 1

PG-OX-TE 1 1,85 - - - 1

PG-OX-TE-E 2 3,70 - - - 2

PG-OX-E-CC 1 1,85 - - - 1

PG-OX-E-AK 1 1,85 - - - 1

PG-OX-E-CIP-LEV 1 1,85 - - - 1

PG-OX-TE-E-TSX-RA 1 1,85 - - - 1

PG-OX-AK-GM-E-CC-CIP-LEV-GAT 30 55,57 22 1 - 7

PG-OX-AK-GM-CIP-LEV-GAT-E-CC-C 4 7,41 - 1 1 2

PG: pe ni ci li na G; OX: oxa ci li na; CIP: ci pro flo xa ci na; LEV: le vo flo xa ci na; GAT: gati flo xa ci na; E: eri tro mi ci na;CC: clin da mi ci na; TSX: tri me to prim/sul fa me to xa zol; RA: ri fam pi ci na; C: clo ran fe ni col: AK: ami ka ci na; GM: gen-ta mi ci na.

chu ca en 2012 quien ob tu vo un 79% (42 ais-la mien tos) de SCCmec tipo IV; se gui do porSCCmec I con 15% (8 ais la mien tos); pero adi fe ren cia de este es tu dio, don de to das las ce-pas fue ron ca te go ri za das en su SCCmec co-rres pon dien te, 5,67 % (3 ais la mien tos) re sul-ta ron no ti pi fi ca bles (14).

Estu dios en otros paí ses con fir man elpre do mi nio de los SCCmec tipo IV y I (16- 18),don de el tipo IV es uno de los ele men tos fre-cuen te men te ob ser va dos en ce pas SAMR ad-qui ri das en los hos pi ta les; aun que ini cial-men te el SCCmec tipo IV fue des cri to jun tocon la de tec ción de PVL, como un mar ca dormo le cu lar para la cla si fi ca ción de los ais la-mien tos SAMR como co mu ni ta rios (19), laiden ti fi ca ción de ce pas SAMR por ta do ras delSCCmec tipo IV cau san do in fec cio nes en hos-pi ta les ha sido ma si va (20).

La pre sen cia del SCCmec tipo IV en ce-pas hos pi ta la rias se ría ex pli ca ble de dos ma-ne ras: 1) La pre sen cia de ce pas SAMR co mu-ni ta rias cau san do in fec ción en el hos pi tal, fe-nó me no que se ha des cri to en si tios con altapre va len cia de SAMR co mu ni ta rio, don deuna vez que las ce pas SAMR pro ve nien tes de

la co mu ni dad han pe ne tra do en el hos pi tal,ha cen su ni cho en él, fa vo reci das por su ma-yor vi ru len cia; 2) Pue de tra tar se de ce pasSAMR no so co mia les, las cua les a di fe ren ciade las co mu ni ta rias son PVL ne ga ti vo.

Los re sul ta dos pre sen ta dos se di fe ren-cian de los re por ta dos por Mar tí nez y cols (21)quie nes re fie ren pre do mi nio del SCCmec tipoII hos pi ta la rio (98,8%; 82/83); aun que in di-can el ais la mien to de una cepa SAMR hos pi ta-la ria por ta do ra del SCCmec tipo IV (1,2%).Por su par te, Lu li ta nond y cols 2010 (22)encon tra ron en un es tu dio rea li za do en Tai-lan dia, el pre do mi nio del SCCmec tipo III con93,83% (76/81) se gui do de 2,47% (2/81) deltipo II; mien tras que el 3,70% de los ais la-mien tos no re sul ta ron ti pi fi ca bles (3/81).

De igual ma ne ra, en Irán, Fatho lahza-deh y col (23), re fie ren 87%; 11% y 2% de losSCCmec tipo III, IIIA y IV, res pec ti va men te.Mo ri mo to y cols (24) rea li za ron un es tu dioen ce pas SAMR en Ja pón, se gún el cual 2,1%co rres pon dió a SCCmec tipo I; 71,2%“ tipo II18,8%“ tipo III; 2,1% tipo V y 1%“ tipo VIIIcon un 5,8% no- ti pi fi ca bles; nin gún ais-lamien to re sul tó pro duc tor de PVL.

Se gún di ver sos au to res, SAMR-C po seeun tipo de com ple jo ge né ti co SCCmec tipo IVo V (24- 26); en este es tu dio no se ais la ron ce-pas per te ne cien tes al tipo V; pero si del IV.Este cas set te es el más pe que ño has ta aho rare co no ci do y ge ne ral men te, no con tie ne otrosde ter mi nan tes de re sis ten cia (24,26). Esto escon sis ten te con la no ta ble ca rac te rís ti ca deSAMR-C, su sen si bi li dad a otros an ti mi cro-bia nos (24,27) a di fe ren cia del pa trón tí pi ca-men te mul ti-re sis ten te de los ais la mien tosSAMR de ori gen hos pi ta la rio. A este res pec to,los re sul ta dos ob ser va dos no guar dan re la cióncon los ob te ni dos en los en sa yos de di fu sióncon dis cos en agar en la pre sen te in ves ti ga-ción; ya que en la ma yo ría de los ais la mien tosdel SCCmec tipo IV, la re sis ten cia a me ti ci li na

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124 Cas te lla no González, L. et al.

Fi gu ra 4. Detección de PVL mediante PCRen cepas SAMR.

es tu vo aso cia da con re sis ten cia a otros an ti-bió ti cos, par ti cu lar men te, a eri tro mi ci na,clin da mi ci na, ami no gli có si dos, qui no lo nas oal gún otro an ti mi cro bia no (clo ran fe ni col).

En este es tu dio, nin gún ais la mien to ex-pre só el SCCmec tipo V ni re sul tó no ti pi fi ca-ble a di fe ren cia de lo re por ta do en un tra ba jorea li za do en Egip to por Sobhy y cols (28)quie nes re fie ren 50% (9/18) de SCCmec tipoV; 16,67% (3/18) de tipo IV y 33,33%(6/18)re sul ta ron no ti pi fi ca bles de un to tal de 28ce pas SAMR; 33,33% de las ce pas re sul ta ronpro duc to ras de PVL; de las cua les 3 fue ronSCCmec tipo V; 1 tipo IV y 2 no ti pi fi ca bles.

Adi cio nal men te, las ce pas SAMR, pre-sen tan por lo ge ne ral, re sis ten cia a otras fa-mi lias de an ti bió ti cos (ma cró li dos, lin co sa-mi das, te tra ci cli nas, fe ni co les, ami no gli có si-dos e, in clu so, qui no lo nas) (29), de bi do a queen S. au reus, el SCCmec, al in te grar se al cro-mo so ma bac te ria no, pue de trans por tar enfor ma va ria ble ge nes de re sis ten cia a otrosan ti bió ti cos (30).

A di fe ren cia de otras in ves ti ga cio nes, seen con tró un 2% de ce pas co rres pon dien tes alSCCmec tipo III B; sin em bar go, es tas ce paspresen ta ron mul tire sis ten cia a los an ti bió ti-cos (30- 35).

El he cho que las ce pas con SCCmec tipoIV ex pre sen mul ti rre sis ten cia pue de de ber sea que han ad qui ri do de ter mi nan tes de re sis-ten cia pro ve nien tes de otras es pe cies de es ta-fi lo co cos, in clu yen do los coa gu la sa ne ga ti va.Aun que usual men te las ce pas SCCmec tipoIV son ad qui ridas en la co mu ni dad, Trin da dey cols (36) las mues tran como cla ra men te no-so co miales. Se ha re por ta do un in cre men toen la fre cuen cia del SCCmec tipo IV en ce pasSAMR-H, lo que in di ca una po si ble di se mi-na ción de ce pas co mu ni ta rias en el hos pi tal oque las ce pas SAMR-C son des cen dien tes dece pas sal va jes de clo nes en dé mi cos hos pi ta-la rios pero con au sen cia de la mul tire sis ten-

cia an ti mi cro bia na Por esta ra zón, el mo ni to-reo de la di se mi na ción de los ais la mien tosSAMR es un ele men to im por tan te para el es-tu dio del es ce na rio epi de mio ló gi co (37).

La mul tire sis ten cia a las dro gas enSAMR está bien do cu men ta da des de hace va-rios años; sin em bar go, en las úl ti mas dé ca-das, la si tua ción en Eu ro pa, Asia y Amé ri caestá cam bian do con la apa ri ción de ce pasSAMR que pre sen tan un aba ni co es tre cho dere sis ten cia a los an ti bió ti cos. En un tra ba jorea li za do por Zriouil y cols (32) en Ma rrue-cos, 27/28 (96,4%) de las ce pas SAMR ex pre-sa ron mul ti- re sis ten cia, por cen ta je su pe rioral ex pre sa do en este es tu dio (74%).

Pé rez y cols. (35) en una in ves ti ga ciónefec tua da en Bra sil, se ña lan al tas ta sas de re-sis ten cia an ti mi cro bia na para la ma yo ría de losan ti bió ti cos. De ma ne ra si mi lar, en el pre sen tetra ba jo, se ob ser van ele va dos por cen ta jes dere sis ten cia a eri tro mi ci na, ci pro flo xa ci na, gen-ta mi ci na, clin da mi ci na, ami ka ci na, le vo flo xa-ci na y ga ti flo xa ci na. La re sis ten cia ob ser va da ate tra ci cli na, clo ran fe ni col, tri me to prim/sul fa-me to xa zol y ri fam pi ci na, fue baja (1-7%).

En for ma si mi lar, en un es tu dio rea li za-do en el 2002 en Croa cia por Bu di mir y cols(34), la to ta li dad de ais la mien tos SARM mos-tró mul ti- re sis ten cia a los an ti mi cro bia nos;89% re sul tó SCCmec tipo I y 11% al ber ga ba elSCCmec tipo III, todos los ais la mien tos fue-ron ne ga ti vos a PVL. Por otra par te, en Tur-quía en una inves ti ga ción con 97 ce pasSAMR; 87,72% (85) te nían un SCCmec tipoIII; 3,09%(3) eran tipo IV, 3,09% (3) per te-ne cie ron al tipo IIIA; 1,03% (1) co rres pon dióal tipo B e igual can ti dad para el tipo II; mien-tras que 4 (4,12%) no pu die ron ti pi fi car se; noen con trán do se la pro duc ción de PVL en ce-pas SAMR sino un 2,2% de ce pas PVL po si ti-vas en ce pas me ti ci li no- sen si bles (33).

Las ce pas SAMR-C tie nen un cur so másagre si vo que las SAMR-H, lo que su gie re la

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Tipo de cas set te cro mo só mi co es ta fi lo có ci co en ce pas clí ni cas de Staphylo coccus 125

ex pre sión de fac to res de vi ru len cia di fe ren-tes. Esta vi ru len cia se ha re la cio na do prin ci-pal men te a la pre sen cia de la leu co ci di naPVL. La alta fre cuen cia con que se ha des cri tola pro duc ción de PVL, hace que la de tec cióndel gen que la co di fi ca se con si de re un he chodis tin ti vo de es tas ce pas (38).

Al igual que lo plan tea Pa lom ba ra ni y suequi po (25), la de tec ción de PVL en este tra-ba jo solo fue rea li za da como mar ca dor deltipo de cas set te; su ex pre sión y fun cio na li daden la pa to ge nia de las in fec cio nes des cri tasno fue uno de los fi nes de la pre sen te in ves ti-ga ción. Re sul ta dos muy di fe ren tes se en-cuen tran re por ta dos. Así, Ross ney y col. enun es tu dio rea li za do en Ir lan da, en con tra ronque solo 6,70% de las ce pas SAMR-C ais la dasre sul ta ron po si ti vas para PVL, con clu yen doque esta pro teí na no de be ría ser usa da comoun úni co mar ca dor para SAMR-C (39).

La pro duc ción de PVL en las ce pas es tu-dia das es in fe rior a la re por ta da por Gius ti ycols (40) quie nes de 142 ce pas SAMR-C, 92(65%) re sul ta ron pro duc to res de PVL y porLina y cols, se gún los cua les, 93% de las ce pasSAMR eran PVL po si ti vas (41). En esta in ves-ti ga ción, las ce pas pro duc to ras de PVL, eranpor ta do ras de SCCmec tipo IV, ca rac te rís ti code las ce pas de ori gen co mu ni ta rio; no obs-tan te, és tas fue ron ce pas pro ve nien tes de pa-cien tes hos pi ta li za dos.

Al igual que lo re por ta do por otros au to-res, to das las ce pas re sul ta ron sen si bles avan co mi ci na, tei co pla ni na y li ne zo lid (30- 35), pre sen tan do ade más sus cep ti bi li dad amo xi flo xa ci na, qui nu pris tin/dal fo pris tin,fos fo mi ci na, mu pi ro mi ci na y ti ge ci cli na.

Es preo cu pan te lo co mún que se está vol-vien do en con trar ce pas SAMR-C en am bien tesno so co mia les y ce pas hos pi ta la rias en la co mu-ni dad (42- 47), de he cho ya exis te un so la pa-mien to clo nal y pron to, la uti li dad de la elec tro-

fo re sis de cam po pul sa do y los clo nes que da-rían sin va lor epi de mio ló gi co (47).

Para con cluir pue de afir mar se que enlas ce pas SAMR cir cu lan tes en la ins ti tu ción,exis te pre do mi nio de los ti pos de SCCmec I yIV, con ce pas mul ti rre sis ten tes a los an ti bió-ti cos y sólo las ce pas SCCmec tipo IV por tanel de ter mi nan te pvl; in for ma ción re le van tedes de el pun to de vis ta epi de mio ló gi co parael di se ño de las me di das de con trol de las in-fec cio nes cau sa das por este pa tó ge no.

Re fe ren cias bi blio grá fi cas

(1) Cav al cante F, Schuenck R, Cabo clo R,Fer reira D de C, Nouér S, Dos San tos K.Tet ra cy cline and tri methoprim/sul-famethoxa zole at clini cal labo ra tory:can they help to char ac ter ize Staphy lo-coc cus au reus car ry ing dif fer entSCCmec types?Rev Soc Bras Med Trop.2013; 46(1):100- 102.

(2) Zhang K, McClure J, El sayed S, Conly J.Novel Staphy lo coc cal Cas sette Chro mo-some mec Type, Ten ta tively Des ig natedType VIII, Har bor ing Class A mecType 4ccr Gene Com plexes in a Ca na dian Epi-demic Strain of Methicillin- ResistantStaphy lo coc cus au reus. An ti mi crob.Agents Che mo ther. 2008;53(2):531-540.

(3) Ito T, Ka ta yama Y, Asada K, Mori N,Tsut su mi moto K, Ti ensa si torn C. Struc-tural com pari son of three types ofstaphy lo coc cal cas sette chro mo somemec in te grated in the chro mo some inmethicillin- resistant Staphy lo coc cusau reus. An ti mi crob Agents Che mo ther.2001; 45(5):1323–1336.

(4) In ter na tional Work ing Group ofClassi fi ca tion of Staphy lo coc cal cas-sette chro mo some mec ele ments. Dis-poni ble en:www.sccmec.org/Pages/

Kas me ra 42(2): 116 - 130, 2014

126 Cas te lla no González, L. et al.

SCC_Type sEN.html. Fecha de ac-ceso:17/06/2013.

(5) Shore A, Deasy E, Slick ers P, Bren nan G,O’Con nell B, Monecke S. et al. De tec tionof Staphy lo coc cal Cas sette Chro mo-some mec Type XI Car ry ing Highly Di-ver gent mecA, mecI, mecR1, blaZ, andccr Genes in Hu man Clini cal Iso lates ofClonal Com plex 130 Methicillin- Resistant Staphy lo coc cus au reus. An ti-mi crob Agents Che mo ther 2011;55(8):3765- 3773.

(6) Jimé nez J, Cor rea M. Staphy lo coc cusau reus re sis tente a me ti cil ina: basesmo lecu lares de la re sis ten cia, epi de mi-ología y ti pifica ción. IA TREIA 2009;22(2):147- 158.

(7) Roth man K. Dec la ra tion of Hel sinkishould be strength ened. BMJ 2000 Aug12; 321(7258):442- 445.

(8) Min is te rio del Po der Popu lar para la Ci-en cia, Tec nología e In dus trias In ter me-dias. Fondo Na cional de Ci en cia, Tec-nología e In no va ción. Código de Bioé-tica y Bio se guri dad. Ter cera Edi ción.Repúb lica Bo li vari ana de Vene zuela.Ca ra cas, 2009.

(9) Ver sa lovic J, Car roll K, Funke G, Jor-gensen J, Lan dry M, War nock D. 2011.Man ual of Clini cal Mi cro bi ol ogy. 11th ed.Ameri can So ci ety for Mi cro bi ol ogy.Wash ing ton, DC. USA. Volu men I.

(10) CLSI (Clini cal Labo ra tory Stan dardi za-tion In sti tute). An ti mi cro bial sus cep ti-bil ity test ing. Twen ti eth In for ma tionalSup ple ment. Docu ment M100/S23 Vol:30 Nº1.2013; pp: 72- 89.

(11) Mar tineau F, Picard F, Lan sac N,Menard C, Roy P, Ou el lette M, Berg eronM. Cor re la tion be tween the Re sis tanceGeno type De ter mined by Mul ti plexPCR As says and the An ti bi otic Sus cep ti-bil ity Pat terns of Staphy lo coc cus au-reus and Staphy lo coc cus epi der midis.

An ti mi crob Agents Che mo ther 2000;44(2):231- 238.

(12) Bor ras C. 2006. Epi de mi ología de la re-sis ten cia a me ti cil ina en ce pas de Staphy-lo coc cus au reus ais la das en hos pi ta leses pañoles. Te sis Doc toral. Pro grama deDoc to rado: Mi cro bio logía Médica. De-par ta mento de Pa tología y Terapéu ticaEx peri men tal. Fac ul tad de Me dicina.Uni ver si dad de Bar ce lona. Es paña.

(13) Ol iveira D, De Len cas tre H. Mul ti plexPCR strat egy for rapid iden ti fi ca tion ofstruc tural types and vari ants of the mecele ment in methicillin- resistantStaphy lo coc cus au reus. An ti mi crobAgents Che mo ther 2002; 46:2155- 2161.

(14) Ma chuca M. 2012. Iden ti fi ca ción mo lecu-lar de clones de Staphy lo coc cus au reusre sis tente a me ti cil ina en ais lamien tosobteni dos de pa ci en tes pe diátri cos delHos pi tal Uni ver si tario de San tander. Te-sis de grado para op tar al título de Ma gis-ter en Ci en cias Bási cas Biomédi cas. Uni-ver si dad Cen tral de San tander. De par ta-mento de Ci en cias Bási cas. Bu cara-manga, Co lom bia.

(15) Acuña Ramírez Sarai Del Valle. Carac-teri za ción Mo lecu lar de ce pas deStaphy lo coc cus me ti cil ino re sis tentesais la das en el Labo ra to rio de Bac te ri-ología del Servi cio Autónomo Hos pi talUni ver si tario “An to nio Patri cio De Al-calá” de Cu maná. Tra bajo de Grado pre-sen tado como req uisito par cial para Op-tar al título de Li cen ci ado en Bio logía.Uni ver si dad de Ori ente. Núcleo de Su-cre. Es cu ela de Ci en cias De par ta mentode Bio logía. Tu tora: Dra. Lo renaAbadía. Cu maná; Vene zuela, 2008.

(16) Men des R, Lali ta gauri M, Smyth D,Shop sin B, Far rell D, Jones R. Char ac-teri za tion of methicillin- resistantStaphy lo coc cus au reus strains re cov-ered from a phase IV clini cal trial for li-ne zolid ver sus Van co my cin for Treat-

Kas me ra 42(2): 116 - 130, 2014

Tipo de cas set te cro mo só mi co es ta fi lo có ci co en ce pas clí ni cas de Staphylo coccus 127

ment of No so comial Pneu mo nia. J ClinMi cro biol 2012; 50(11):3694-3702

(17) Reyes J, Rincón S, Díaz L, Panesso D,Contre ras G, Zu rita J. et al. Dis semi na-tion of methicillin- resistant Staphy lo-coc cus au reus USA300 se quence type 8line age in Latin Amer ica. Clin In fectDis. 2009; 49(12):1861- 1867.

(18) Olarte N, Val der rama I, Reyes K,Garzón M, Es co bar J, Cas tro B, Va ne gasN. Colo ni za ción por Staphy lo coc cus au-reus re sis tente a la me ti cil ina en unauni dad de cui da dos in ten sivos de adul-tos de un hos pi tal co lom bi ano: carac-teri za ción fe notípica y mo lecu lar conde tec ción de un clon de cir cu la ción en lacomu ni dad. Biomédica. 2010;30(3):353- 361.

(19) Ito T, Ma X, Takeuchi F, Okuma K, Yu-zawa H, Hi ra matsu K. Novel type Vstaphy lo coc cal cas sette mec driven by anovel cas sette chro mo some re com bi-nase, ccrC. An ti mi crob Agents Che mo-ther 2004; 48(7):2637-2651.

(20) Be noit S, Es ti variz C, Mog dasy C, Pe-dreira W, Ga li ana A, Bag nulo H. et al.Com mu nity strains of methicillin- resistant Staphy lo coc cus au reus as po-ten cial cause of healthcare- associated in-fec tions, Uru guay, 2002- 2004. EmergIn fect Dis 2008; 14(8):1216- 1223.

(21) Martínez- Aguilar G. 2010. Anál isis degeno ti pos y de los tiem pos de du pli ca-ción de ce pas de Staphy lo coc cus au reusre sis tentes a me ti cil ina ais la das de in-fec cio nes noso comia les y ad quiri das enla comu ni dad. Te sis de grado para op taral título de Doc tor en Ci en cias Médi cas.Fac ul tad de Me dicina. Uni ver si dad deCo lima. México.

(22) Luli tan ond A, Chana wong A, Sriben jaluxR, Wi lailuckana C, Kaewkes W, Vo ra chitM, Ito T, Hi ra matsu K. Pre limi nary re-port of SCCmec-types and an ti mi cro bial

sus cep ti bili ties of methicillin- resistantStaphy lo coc cus au reus iso lates from auni ver sity hos pi tal in Thai land. South-east Asian J Trop Med Pub lic Health2010; 41(4):920- 927.

(23) Fatho la zadeh B, Ema ne imi M, Gil bert G,Udo E, Alig holi M, Mo dar ressi M. Staphy-lo coc cal cas sette chro mo some mec(SCCmec) analy sis and an ti mi cro bial sus-cep ti bil ity pat terns of methicillin- resistant Staphy lo coc cus au reus (MRSA)iso lates in Te hran, Iran. Mi crob Drug Re-sist 2008; 14(3):217- 220.

(24) Mo ri moto M, Mi ya moto H, Mu rakamiS, Fu kuoka M, Nishimiya T, Osawa H.Staphy lo coc cal Cas sette Chro mo somemec Types and An ti mi cro bial Sus cep ti-bili ties of Methicillin- Resistant Staphy-lo coc cus au reus Iso lated from Our Hos-pi tal. Rin sho Bi seibut shu Jin soku Shin-dan Kenkyu kai Shi. 2013;23(2):61- 67.

(25) Palomabar ini S, Gar della N, Tuduri A,Figueroa S, Sly R, Co razza R. et al. In fec-cio nes ad quiri das en la comu ni dad porStaphy lo coc cus au reus re sis tentes ame ti cil ina en un hos pi tal de agu dos. RevAr gent Mi cro biol 2007; 39:151- 155.

(26) Baba T, Takeuchi F, Ku roda M, Yu zawaH, Aok K, Oguchi, A. et al. Ge nome andviru lence de ter mi nants of high viru-lence community- adquired MRSA. Lan-cet. 2002; 359(9320):1819- 1827.

(27) Lu P, Chin L, Peng C, Chi ang Y, Chen T,Ma L. et al. Risk fac tor and mo lecu laranaly sis of com mu nity methicillin- resistant Staphy lo coc cus au reus car riage.J Clin Mi cro biol 2005; 43:132- 139.

(28) Sobhy N, Aly F, El Kader, Ghazal A, El-ba radei A. Com mu nity-a cquiredmethicillin- resistant Staphy lo coc cusau reus from skin and soft tis sue in fec-tions (in a sam ple of egyp tian popu la-tion): analy sis of mec gene and staphy-

Kas me ra 42(2): 116 - 130, 2014

128 Cas te lla no González, L. et al.

lo coc cal cas sette chro mo some. Braz JIn fect Dis 2012; 16(5):426- 431.

(29) Ma X, Ito T, Ti entsa si torn C, JamklangM, Chong trakool P, Boyle- Vavra S. et al.Novel type of staphy lo coc cal cas settecro mo some mec iden ti fied incommunity- acquired methicillin- resistant Staphy lo coc cus au reusstrains. An ti mi crob Agents Che mo ther.2002; 46:1147- 1152.

(30) Lon doño J, Or tiz G, Ga vi ria A. Preva len-cia de Staphy lo coc cus au reus re sis tentea me ti cil ina en per sonal de la uni dad detera pia in ten siva de la Clínica Uni ver si-taria Bo li vari ana, Me dellín 2004. In fec-tio. 2006; 10(3):160- 166.

(31) Ti bav izco D, Ro dríguez J, Cu ervo S,Cortes J. En fo que terapéu tico de la bac-ter iemia por Staphy lo coc cus au reus.Rev. Biomédica.2007; 27 (2):294- 307.

(32) Zri ouil, S, Bek kali, M, Zerou ali K. Epi-de mi ol ogy of Staphy lo coc cus au reus in-fec tions and na sal car riage at the IbnRochd Univer sity Hos pi tal Cen ter,Casa blanca, Mo rocco. Braz J In fect Dis2012; 16(3):279- 283.

(33) Gül mez D, San cak B, Er cis S, KarakayaJ, Hasçe lik G. In ves ti ga tion of SCCmectypes and Panton- Valentine leu ko cidinin community- acquired and no so comialStaphy lo coc cus au reus strains: com-par ing skin and soft tis sue in fec tions tothe other in fec tions. Mik ro byol Bul.2012; 46(3):341- 351.

(34) Bu di mir A, Deuren berg R, Plecko V,Vink C, Ka lenic S, Stob ber ingh E. Mo-lecu lar char ac teri za tion of methicillin- resistant Staphy lo coc cus au reus blood-stream iso lates from Croa tia. J. An ti mi-crob Che mo ther 2006; 57(2):331- 334.

(35) Perez L, D’Azevedo P. Clonal types andan ti mi cro bial re sis tance pro files ofmethicillin- resistant Staphy lo coc cusau reus iso lates from hos pi tals in south

Bra zil. Rev Inst Med Trop Sao Paulo.2008; 50(3):135- 137.

(36) Trin dade P, Pacheco R, Costa S, Rossi F,Bar one A, Mami zuka E. et al. Preva-lence of SCCmec type IV in no so comialblood stream iso lates of methicillin- resistant Staphy lo coc cus au reus. J ClinMi cro biol 2005; 43:3435- 3437.

(37) Okuma K, Iwakawa K, Tur nidge J,Grubb W, Bell J, O’Brien F. et al. Dis-semi na tion of new methicillin- resistantStaphy lo coc cus au reus clones in thecom mu nity. J Clin Mi cro biol 2002;40:4289- 4294.

(38) Ho P, Che ung C, Mak G, Tse C, Ng T,Che ung C. et al. Mo lecu lar epi de mi ol-ogy and house hold trans mis sion ofcom mu nity as so ci ated methicillin- resistant Staphy lo coc cus au reus inHong Kong. Di agn Mi cro biol In fect Dis2007; 57:145- 151.

(39) Ross ney A, Shore A, Mor gan P, Fitzgib-bon M, O’Con nell B, Cole man D. TheEmer gence and Im por ta tion of Di verseGeno types of Me thi cil lin- Re sis tantStaphy lo coc cus au reus (MRSA) Har-bor ing the Panton- Valentine Leu ko cid-ine Gene (pvl) Re veal that PVL is a PoorMarker for Community- AcquiredMRSA Strains in Ire land. J Clin Mi cro-bi ol ogy. 2007; 45: 2554– 2563.

(40) Gi usti A, Ba roni M, Men dosa M, NagelA, Vir go lini S, Ocho teco C. et al. Staphy-lo coc cus au reus meticilino- resistentead quiridos en la comu ni dad: De tec ciónde leu co cidina de Panton- Valentine y surela ción con el si tio de ais lamiento enpa ci en tes de la ciu dad de Santa Fe – Ar-gen tina. Rev Panam In fect 2011;13(2):8-11.

(41) Lina G, Piémont Y, Godail- Gamot F, BesM, Pe ter M, Gauduchon V. et al. In-volve ment of Panton- Valentineleukocidin- producing Staphy lo coc cusau reus in pri mary skin in fec tions and

Kas me ra 42(2): 116 - 130, 2014

Tipo de cas set te cro mo só mi co es ta fi lo có ci co en ce pas clí ni cas de Staphylo coccus 129

pneu mo nia. Clin In fect Dis. 1999;29(5):1128- 1132.

(42) Taki zawa Y, Ta neike I, Naka gawa S,Oishi T, Ni ta hara Y, Iwa kura N,et al. APan ton- Val en tine Leu ko cid ine(PVL)-Pos itive Com mu nity- Ac quiredMethicillin- Resistant Staphy lo coc cusau reus (MRSA) Strain, An other SuchStrain Car ry ing a Multiple- Drug Re sis-tance Plas mid, and Other More- Typi calPVL- Negative MRSA Strains Found inJa pan. J Clin Mi cro bi ol ogy 2006; 43:3356–3363.

(43) Tama riz J, Agapito J, Horna G, Tapia E,Vicente W, Silva M. et al. Staphy lo coc-cus au reus re sis tente a me ti cil ina ad-quirido en la comu ni dad ais la dos en treshos pi ta les de Lima- Perú. Rev MedHered. 2010;21(1):4-10.

(44) No riega L, González P, Hor mazábal J,Pinto C, Ca nals M, Mu nita J. et al.Staphy lo coc cus au reus comu ni tario re-

sis tente a cloxa cil ina: Comu ni ca ción delos prime ros cinco ca sos de scri tos enChile. Rev. Med. Chile. 2008;136(7):885- 891.

(45) Miller L, Kaplan S. Staphy lo coc cus au-reus: A Com mu nity Patho gen. In fec-tious Dis eases Clini cal of North Amer-ica. 2009; 23: 35–52.

(46) Cam pana S, Coc chi P, Dör ing G, Tac-cetti G, Mo roney S. Emer gence of anepi demic clone of com mu nity as so ci-ated me thi cil lin- re sis tant panton- valentine leukocidin- negative Staphy-lo coc cus au reus in cys tic fi bro sis pa tientpopu la tions. J Clin Mi cro biol 2007;45:3146- 3147.

(47) Lo zano D, Díaz L, Ech everry M, Pin edaS, Mát tar S. Staphy lo coc cus au reus re-sis tentes a me ti cil ina (SARM) posi ti vospara PVL ais la dos en in di viduos sa nosde Montería- Córdoba. Uni ver si tas Sci-en tia rum 2010; 15 (2):159-165.

Kas me ra 42(2): 116 - 130, 2014

130 Cas te lla no González, L. et al.