TINCION PAPANICOLAOU

8/17/2019 TINCION PAPANICOLAOU

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Propósito.

Realizar un proceso de calidad, el técnico en tinción o el citotecnólogo capacitado para la tinciónmuestras citológicas.

Campo de aplicación.

La coloración descrita se aplica a las laminillas portadoras de muestras de frotis cérvico vaginal padiagnóstico citológico.

Requisitos para una tinción de calidad.

El procesamiento manual de las muestras de frotis cervical fijado comprende los siguientes sub-pa

Reparación ocasional de las lminas !uebradas aceptadas.

"reparación y manejo de la bater#a de tinción.

$inción de las muestras.

%ontaje de las muestras.

&istribución de las lminas en las bandejas.La técnica será exitosa si:

$odas las lminas aceptadas son procesadas en el tiempo establecido y se mantiene su integride identificación durante el procesamiento.

$odas las lminas estn te)idas en forma apropiada lo !ue significa:

*. +na buena definición del detalle nuclear.

**. +na transparencia del citoplasma.

***. +na diferenciación celular.

$odas las lminas estn montadas adecuadamente lo ue si nifica ue el frotis est rote ido


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Las bandejas para los citotecnólogos están preparadas correctamente losignifca que contienen el número de láminas que corresponde, están lsí (no pegadas), y colocadas en el orden correlativo del número de regcitológico. Los insumos involucrados en el procesamiento de las muestras se uefcientemente. l personal se mantiene libre de problemas de salud asociada al trasala de procesamiento de muestras.


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Área de tinción.

!aracterísticas" #ísicamente separada de otros espacios. !on una e$celente ventilación %acia el e$terior, ya que debido a loscontaminantes químicos, es un área de alto riesgo. &e'aliadas las medidas a tomar en caso de siniestro. !on regadera antiincendios y e$tintores. !ampana de e$tracción de gases tanto para la tinción, como para &e recomienda que los insumos sean de buena calidad. !ontar con un área de bodega protegida de incendios para los reactinciones in*amables. La sala debe contar con un sector de lavado, equipado con lavadero

Los recursos de una sala de procesamiento manual se clasifca en"

a. +obiliario.b. quipos.c. nsumos.


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Mobiliario y equipos del área de procesamiento de muestras.Mobiliario.• Lavatorio dotado de llaves de agua potable con fltro de agua, en lo• posible de acero ino$idable.• +esón de acero ino$idable de -/ $ 0/ $ / cm. donde esta montado • lavatorio.• +esas altas de laboratorio de -/ $ 0/ $ / cm. en lo posible, de ace• ino$idable.• stantes con vidriera para insumos.• &illas. Equipos e insumos.• !ampana de e$tracción de gases.• 1orno de secado de láminas (opcional).• +ec%ero de 2unsen.• !ronómetro.• !ubetas de tinción de -/// ml. con tapa.• 3radilla de tinción para laminillas.


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• 2andejas para lectura de laminillas con capacidad para 4/ y de -/• laminillas por corrida cómodas.• 5robetas graduadas de -///, 6//, -// y -/ ml de vidrio.• #rascos de rlenmeyer de 5yre$ de -/// y 7/// ml.• 8asos de precipitado de 5yre$ de -/, -// y -/// ml.• mbudo de plástico.• 5ipetas graduadas de -/ ml.• 3arra9ón de agua destilada.• 5apel fltro :%atman no. ;• #rascos de vidrio color oscuro para almacenamiento -/// ml.• 3asa para montar y limpiar laminillas.• 2alana.• 5ina peque'a.• Lápi con punta de diamante.• Láminas portaobjetos de vidrio de 06 $ 76 $ /.4 a -.7 mm.• Laminas cubreobjetos de vidrio de 6/ $ 7; $ /.76 mm.• 3uantes desec%ables• nsumos. (!olorantes y reactivos.)• 1emato$ilina de 1arris.• !olorante • tanol -//> !1?!17


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Principio y ventaja del método de tinción de Papanicolaou.La tinción de 5apanicolaou es un mAtodo de tinción poli crómico que consta de unatinción nuclear y un contraste citoplasmático. Biene como ventaja"a. Cna buena defnición del detalle nuclear, evidenciando el patrón de cromatinade las cAlulas.b. Cn aspecto transparente de los citoplasmas y una di9erenciación celular, quepermite apreciar grados de maduración celular y actividad metabólica.

s un mAtodo basado en la di9erenciación de color de los diversos componentescelulares, se aplica a los diversos tipos celulares para el diagnóstico de cambiosmalignos y la tipifcación celular.

La tinción de 5apanicolaou tiene cuatros pasos principales" #ijación (realiada al momento de tomar la muestra). Binción del núcleo con la %emato$ilina. Binción del citoplasma con


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Tinción.s importante se'alar que Aste es un procedimiento que tiene variaciones e incluso pre9erencias personales en

Enjuague.l enjuague se realia con agua corriente yDo agua destilada, pero siempre %ay que verifcar que el p1 del agu4.6 y 0.

Hidratación.La %idratación antes del colorante de %emato$ilina puede ser" 3radual usando alco%ol en concentraciones decrecientes E/0/6/ > =brupta, sumergiendo el material celular desde altas concentraciones de alco%ol y al agua directamente.

Tinción del ncleo.$isten dos mAtodos para te'ir el núcleo"

Método progresivo. &e ti'e el núcleo con la intensidad de color deseada. Método regresivo. &e sobreti'e con %emato$ilina no acidifcada, luego se remueve el e$ceso de tinción cdiluido. !espués de la "emato#ilina, las laminillas se lavan en agua.

Tinción del citoplasma.


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'claramiento.s el paso fnal de la tinción y produce transparencia celular. &e suele ussolución aclaradora.

Montaje.


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$,-ET/$ !E *'!' 0E'*T/$.

1unción general.


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1unción especi2ca


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Hematoxilina

#órmula" !-41-;


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EosinaC20H6Br4Na2O5

es un colorante ácido de color rosado oscuro usado en preparaciones %istológicas cuya propiedad estásu polaridad negativa lo que le permite enlaarse con constituyentes celulares de carga positiva. 5or ecomponentes y orgánulos citoplasmáticos mas nolos nucleares (por estar el =GF cargado negativamente). =quellos componentes que se ti'en con eosinconocidos como acidóflos o eosinóflos. Los demás componentes que se ti'en con colorantes básicos sbasóflos.$isten dos tipos" eosina 2 y eosina K, las cuales producen los mismos resultados.5ara re9orar la tonalidad rosada de la eosina, con anticipación se diluye la eosina al -> con agua destprepara con ácido acAtico glacial (- gota por cada -// ml de eosina al ->).sta solución se calienta a 4/ grados ! por media %ora (?/ minutos).1emato$ilina osinas costumbre y rutina %istológica usar la eosina conjuntamente con la %emato$ilina para te'ir tejidos aobservados bajo el microscopio. Cna ve completada el procedimiento de tinción de los tejidos, los núccAlulas se verán de color morado oscuro (producto de la%emato$ilina) y el citoplasma, así como las fbras de colágeno se verán de color rojo o rosado oscuro.


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$0'3%E %!-41-/F7Fa7/0&7

s un colorante del que se %abla muy poco y al que se le da poca &olucióncolorante modifcada por su punto de solubilidad en tanol para obtener undefnida de las cAlulas con citoplasma orangeo9ílicas. #ormulada para la idesustancias orangeo9ílicas, como sustancia queratósica en cAlulas queratiniuntinte anaranjado encendido. &u tiempo óptimo de tinción es de 7 minutos

La 4ueratina o 5eratina es una sustancia proteica6 muy rica en a7uconstituye elcomponente principal de las capas más e$ternas de la epidermis de los verotrosórganos derivados del ectodermo, como pelos, u'as, plumas, cuernos o peLa queratina es la responsable de la durea y resistencia de los cuernos y us una proteína con una estructura secundaria, es decir, la estructura primproteína,

se pliega sobre sí misma, adquiriendo tres dimensiones. Msta 9orma nueva,es iral llamándose así roteína a-hélice. Esta estructura se mantiene con


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