THE MICRO HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA LEEWENHOECK. Inventó el microscopio. Padre de la...

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HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA

LEEWENHOECK.

Inventó el microscopio.

Padre de la Histología.

Iniciador de la Microbiología

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EDWARD JENNER

Padre de la Medicina Preventiva.

Elaboró la vacuna de la Viruela.

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LOUIS PASTEUR

Padre de la Microbiología. Ideo el proceso de

PASTEURIZACION. Refutó la Teoría de la Gene-

ración espontánea. Elaboró la vacuna de la

RABIA. Fermentación alcohólica.

Padre de la Microbiología. Ideo el proceso de

PASTEURIZACION. Refutó la Teoría de la Gene-

ración espontánea. Elaboró la vacuna de la

RABIA. Fermentación alcohólica.

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ROBERTO KOCH.

Padre de la Investigación Científica.

Descrubrió el agente causal de la tuberculosis y lo llamó Bacilo de Koch.

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PAUL ERLICH

Padre de la Inmunidad Humoral.

Mecanismo de protección por medio de ANTICUERPOS:

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ELIE METCHNIKOFF

Padre de la Inmunidad Celular.

Describió el proceso de fagoci- tosis.

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ALEXANDER FLEMING

Padre de la Antibioticoterápia.

Del hongo Penicillum sp., obtu- vo el antibiótico PENICILINA.

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CRICK.

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WATSON

HISTORIA DE LA MICRONIOLOGIA

• ARISTOTELES

Primera organización que diferencia todas las entidades vivas de la naturaleza en dos reinos.

ANIMAL VEGETAL


• LINNEO

Distinguió también animal, vegetal agregando el reino mineral e introdujo la nomenglatura binominal.

Dividiendo los reinos en.

FILOS CLASES ORDENES FAMILIAS GENEROS ESPECIES

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TAXONOMIA BINOMINAL DE LINNEO.

REINO.CLASE.ORDEN.FAMILIA.GENERO.ESPECIE.

SchizomycestesEubacteriales.Enterobacteriaceae.Escherichia.

coli.

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TAXONOMIA BINOMINAL DE LINNEO.

GENERO.

ESPECIE.

Apellido del Investigador.Característica de la bacteria.

Adjetivo calificativo.


• ROBERT WITTAKER 1969

Clasifico en el sistema de los 5 reinos, basada en las diferencias en material de nutrición.

• Plantae pluricelular (autótrofo)• Animalia pluricelular (heterótrofo)• Fungi pluricelular (saprofito)• Protista• Monera

CLASIFICACION DE WITHAKER.CLASIFICACION DE WITHAKER.19661966

ProcariotProcarioteses

EucariotEucarioteses


•ERNST HAECKEL

En 1866 fue el primero en distinguir entre organismos unicelulares(protistas) y pluricelulares (plantas y animales)


•ERNST HAECKEL

En 1866 fue el primero en distinguir entre organismos unicelulares(protistas) y pluricelulares (plantas y animales)

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• CARLOS WOESE

Divide a los procariotas en 2 reinos

Los agrega con los otros 4 reinos

EL SISTEMA DE LOS 6 REINOS

EUBACTERIAS ARCHAEBACTERIAS

PLANTAS ANIMALES HONGOS PROTISTAS


• CARL WOESE 1990

Estableció el sistema de los 3 dominios.

• Bacteria

• Archaea

• Eukarya PROTISTA FUNGI PLANTAE ANIMALIA

Clasificación de Woese (1977)Clasificación de Woese (1977)

MORFOLOGÍA MORFOLOGÍA MICROBIANAMICROBIANA

MORFOLOGIA BACTERIANAMORFOLOGIA BACTERIANA

MORFOLOGIA BACTERIANA

• PROCARIOTAS

• Posee 1 sola molecula circular de doble cadena.

Tienen núcleo o nucleoide?

Cual es la diferencia entre estas 2?


• PLASMIDO

• Moléculas extracromosomicas circulares y cortas de DNA.

Que bacterias son las que poseen en mayor cantidad?

Una de las propiedades mas importantes que tiene?


• RIBOSOMAS

• 2 Subunidades

Procariotas presentan 30s-50s forman ribosoma 70s.

Eucariotas presentan ribosomas 40s-60s forman un ribosoma 80s.

Son muy distintos a los de los eucariotas constituyen un señalado objetivo de los fármacos antibacterianos.


• MEMBRANA CITOPLASMATICA1. Estructura lipídica doble.

2. No posee esteroide a diferencia de los eucariotes.

3. Transporta y produce energía que normalmente se realiza en las mitocondrias.

4. Contienen una proteína de transporte que permite la captación de metabolitos y liberación de otras substancias.


• MESOSOMA

1.Invaginación de la membrana citoplasmática.

2.Actúa en la replicación del cromosoma, uniéndose a el, asegurando su distribución a las células hijas durante la división celular.


• CARA INTERNA DE MEMBRANA

1.Tapizada de filamentos proteicos tipo actina.

2.Participan en la forma de la bacteria.

3.Forma el tabique en la división celular.

BacteriasBacterias

MORFOLOGIA BACTERIANAMORFOLOGIA BACTERIANA

Gram positivasGram positivas Gram negativasGram negativas

FijaciònFijaciòn

Cristal violetaCristal violeta

Yodo GramYodo Gram

Alcohol-AcetonaAlcohol-Acetona

SafraninaSafraninavioletas

rosarosass


• GRAM POSITIVAS1. Estructura de peptidoglicanos.

2. Rodea membrana citoplasmática.

3. Poroso.

4. Pueden degradarse al contacto con la lisozima.

5. Al ser eliminada la pared produce un protoplasto.


• FACTORES DE VIRULENCIA

1.Ac. Teicoico polímero hidrosoluble unido a peptidoglicanos mediante enlace covalente, fundamental para la viabilidad celular.

2.Ac. Lipoteicoico unido a la membrana también, funciona como antígeno de superficie, diferencia serotípos de bacterias.


• GRAM NEGATIVAS

1. Delgada capa peptidoglicanos.

2. No posee ac. Teicoico ni lipoteicoicos.

3. Membrana externa sobre peptidoglicanos, forma saco de lona alrededor de la bacteria actuando como barrera impermeable a moléculas de gran tamaño.

4. Espacio entre membrana externa y membrana citoplasmática se denomina espacio periplasmático.


• GRAM NEGATIVOS

1.Espacio periplasmático, posee diversas enzimas hidrolíticas (proteasas, fosfatasas, lipasas, nucleasas).

2.Estos son los algunos de los factores de virulencia liticos.


• GRAM NEGATIVOS

1. Membrana externa• Formada por molecula anfipatica (terminaciones

hidrófobas e hidrófilas).• Lipopolisacaridos (LPS) conocidos como

endotoxinas (potente estimulador de la respuesta inmune)

• Produce CID o reacción de Schwartzman

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ESTRUCTURA DE UNA BACTERIA GRAM POSITIVAS.

Membranacitoplasmática

Pared celular

Cápsula

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ESTRUCTURA DE UNA BACTERIA GRAM NEGATIVA

Membranainterna

Pared celular

Membrana externa

Endotoxinao

Lipopolisacárido

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Fusobacterias Bacilos filamentosos

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Tetradas

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Estafilococos

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Estreptococo

Diplococos

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Estreptococo

Diplococos

Estreptobacilos

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Espiroquetas

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ENDOTOXINAS EXOTOXINAS

Gram (-) Gram (+) y Gram (-)

Es parte de la pared celular Son secretadas por la bacteria

Lipopolisacáridos Proteínas.

No la destruye el calor Se desnaturalizan con calor

No son antigénicas Son antigénicas.

No se transforman en toxoides Se transforman en toxoides

D.L.= miligrámos D.L.= nanogramos.

Toxicidad= Fiebre, leucopeniaActiva Complemento, trombo-citopenia, C.I.D., <de presiónArterial, Sock y muerte.

Toxicidad= Si se fijan a S.N.C.,provocan paro cardíaco o respi-ratorio.Si es Enterotoxina, provoca queEl intestino secrete agua.

Algas superioresAlgas superiores

ClosteriuClosteriumm

DiatomeaDiatomeaEuglenaEuglena

MORFOLOGÍA MICROBIANAMORFOLOGÍA MICROBIANA

LevadurasLevaduras


LevadLevadurasurasLevadLevadurasuras


HongHongosos

Características de los HongosCaracterísticas de los Hongos

EucariotesEucariotes Heterótrofos (digestión Heterótrofos (digestión ingestión)ingestión) Membrana citoplásmica: ergosterolMembrana citoplásmica: ergosterol Pared celular: quitinaPared celular: quitina Crecimiento vegetativo: unicelular Crecimiento vegetativo: unicelular (levaduras)(levaduras) hifas (hongos hifas (hongos filamentosos)filamentosos) Reproducción por medio de esporas o Reproducción por medio de esporas o conidiasconidias Reproducción sexual y asexualReproducción sexual y asexual

Hongos DematiáceosHongos Dematiáceos

Hongos Hongos HialinosHialinos

HongHongosos

Aspergillus Aspergillus sp.sp.

Penicillum sp.Penicillum sp.


Sporothrix Sporothrix shenkiishenkii

ProtozoarioProtozoarioss


ProtozoarioProtozoarioss

ParameParameciocio


VirusVirus

MORFOLOGÍAMORFOLOGÍA

DEFINICIÓN Y PROPIEDADES DE LOS DEFINICIÓN Y PROPIEDADES DE LOS VIRUSVIRUS

Son agentes filtrablesSon agentes filtrables

Son parásitos intracelulares Son parásitos intracelulares obligadosobligados No pueden fabricar energía ni No pueden fabricar energía ni proteínas proteínas independientemente de una independientemente de una célula hospedera ya que célula hospedera ya que No poseen un No poseen un sistema generador de ATP. No sistema generador de ATP. No poseen poseen

ribosomas o un sistema de síntesis ribosomas o un sistema de síntesis de proteínas.de proteínas. Los componentes virales son Los componentes virales son ensamblados y los virus ensamblados y los virus no se replican no se replican por «división»por «división»

Los genomas virales pueden ser Los genomas virales pueden ser ADN o ARN, pero ADN o ARN, pero no de ambos tiposno de ambos tipos

Tienen una morfología con cápside Tienen una morfología con cápside desnuda o con desnuda o con envolturaenvoltura

Murray P.R., et al. Microbiología. 4a Edición. Ed Harcourt.

Forma de los Forma de los virusvirus

Replicación ViralReplicación Viral

NutrientesTemperatura Oxígeno pH Agua

CONDICIONES NECESARIAS PARA EL CONDICIONES NECESARIAS PARA EL DESARROLLO BACTERIANODESARROLLO BACTERIANO

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Lag

Log

CURVA DE CRECIMIENTO BACTERIANO(SISTEMA CERRADO)

Fase de Latencia:Fase de Latencia: Es la fase de adaptación al medio, existe Es la fase de adaptación al medio, existe aumento de la masa celular pero no hay aumento en el número aumento de la masa celular pero no hay aumento en el número de células. (adaptación, lag, metabólica)de células. (adaptación, lag, metabólica)

Fase de Crecimiento Exponencial:Fase de Crecimiento Exponencial: Es la fase donde se produce Es la fase donde se produce un incremento exponencial del número de microorganismos.un incremento exponencial del número de microorganismos.(logarítmica, log)(logarítmica, log)

Fase Estacionaria:Fase Estacionaria: Es la fase a la que se llega cuando se ha Es la fase a la que se llega cuando se ha agotado la fuente de energía.agotado la fuente de energía.

Fase de Muerte:Fase de Muerte: Es la fase que se caracteriza por una Es la fase que se caracteriza por una disminución exponencial del número de microorganismos. disminución exponencial del número de microorganismos. (declinación)(declinación)

Curva de CrecimientoCurva de Crecimiento

Nutrientes

HipotróficosHipotróficos

Quimiotrofos:Fototrofos

Clasificación nutricional de los Clasificación nutricional de los microorganismosmicroorganismos

Medio de Cultivo:Medio de Cultivo:

Medio que proporcione substancias nutritivas para los Medio que proporcione substancias nutritivas para los microorganismos y que les permita desarrollarse, puede microorganismos y que les permita desarrollarse, puede ser considerado como tal.ser considerado como tal.

CULTIVO DE MICROORGANISMOSCULTIVO DE MICROORGANISMOS

LaboratorioLaboratorio Medio de cultivoMedio de cultivo

Medio de Cultivo:Medio de Cultivo:

Se pueden clasificar en:Se pueden clasificar en:

Naturales:Naturales: Están constituidos por substancias naturales tales Están constituidos por substancias naturales tales como papa, leche, huevo, sangre, etc.como papa, leche, huevo, sangre, etc.

Artificiales:Artificiales: Si esta elaborado con substancias de composición Si esta elaborado con substancias de composición química conocida se le llama química conocida se le llama sintético.sintético.

Si esta elaborado con substancias de composición Si esta elaborado con substancias de composición química desconocida y cuyos componentes no química desconocida y cuyos componentes no pueden ser analizados se le llamapueden ser analizados se le llama no sintéticono sintético

CULTIVO DE MICROORGANISMOSCULTIVO DE MICROORGANISMOS

Medio sintéticoMedio sintético Medio complejoMedio complejo

Medio enriquecimientoMedio enriquecimiento

Medio selectivoMedio selectivo

Medio diferencialMedio diferencial

Medios de CultivoMedios de Cultivo

Medio SintéticoMedio Sintético

NHNH44ClCl 0.52 g0.52 g fuente de Nfuente de N

KHKH22POPO44 0.28 g0.28 g fuente de P y Kfuente de P y K

MgSOMgSO44.7H.7H22OO 0.25 g0.25 g fuente de S y Mgfuente de S y Mg

CaClCaCl22.2H.2H22OO0.07 g0.07 g fuente de Cafuente de Ca

SS 1.56 g1.56 g fuente de energíafuente de energíaCOCO22 5 %5 % fuente de Cfuente de C

HH22O O 1000 mL1000 mL

pH 3.0 pH 3.0

Medio ComplejoMedio Complejo

Extracto de carneExtracto de carne 1.5 g fuente de vitaminas y factores 1.5 g fuente de vitaminas y factores de crecimientode crecimientoExtracto de levadura 3.0 g Extracto de levadura 3.0 g fuente de vitaminas y factoresfuente de vitaminas y factores de crecimientode crecimientoPeptona 6.0 gPeptona 6.0 g fuente de aminoácidos, N, S y fuente de aminoácidos, N, S y

PPGlucosa 1.0 gGlucosa 1.0 g fuente de C y energía fuente de C y energíaAgar 15. 0 g Agar 15. 0 g agente gelificante agente gelificante inerteinerteAgua 1000 mLAgua 1000 mL

pH 6.6pH 6.6

Medio de EnriquecimientoMedio de Enriquecimiento

Casamino AcidoCasamino Acido 7.5 g7.5 g fuente de aminoácidos, N, S y Pfuente de aminoácidos, N, S y PExtracto de levaduraExtracto de levadura 10.0 g10.0 g fuente de factores de crecimientofuente de factores de crecimientoCitrato trisódicoCitrato trisódico 3.0 g3.0 g fuente de C y energíafuente de C y energíaKClKCl 2.0 g2.0 g fuente de Kfuente de KMgSOMgSO44.7H.7H22OO 20.0g20.0g fuente de S y Mgfuente de S y MgFeClFeCl22 0.023g0.023g fuente de Fefuente de FeNaClNaCl 250 g250 g fuente de Na para halófilos e fuente de Na para halófilos e inhibitorio para no-halófilosinhibitorio para no-halófilosHH22OO 1000 mL1000 mL

pH 7.4pH 7.4

Medio SelectivoMedio Selectivo

Medio DiferencialMedio Diferencial

Colonias Colonias

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FISIOLOGIA BACTERIANA.

NUTRICION:

AUTOTROFAS: Aquellas bacterias que utilizan sustancias inorgánicas para nutrirse, transformarmandolas en órgánicas.

Estas son saprófitas, viven generalmente en el suelo, en el agua, etc.

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NUTRICION:

HETEROTROFAS: Aquellas bacterias que utilizan sustancias orgánicas para nutrirse.

Estas son patógenas al ser humano y a los animales.

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NUTRICION:

MEDIOS DE CULTIVO SIMPLES: Aquellos medios que solo poseen los requerimientos mínimos para lograr un crecimiento bacteriano.

Por ejemplo el Agar Tripticase de Soya: Donde crecen bacterias como la E. coli, El Proteus sp., y otras bacterias no muy exigentes.

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NUTRICION:

MEDIOS DE CULTIVO ENRIQUECIDO: Aquellos medios que poseen los máximos requerimientos nutritivos y que permite el crecimiento de las bacterias patógenas al ser humano.

Por ejemplo el Agar Sangre : Donde crecen bacterias patógenas, tales como el Staphylococcus aureus o el Streptococcus pyogenes.

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Condiciones físicas necesarias para el desarrollo microbiano:

TemperaturaTemperatura

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ACIDOFILICAS: Son aquellas bacterias que crecen enp.H ácidos (1-6). Ejem. Lactobacillus acidophilus.

NEUTROFILICAS: Crecen en medio neutro (p.H=6.8), Aquí crecen las bacterias patógenas al hombre.

BASOFILICAS: La bacterias que crecen a p.H.= 8.

p.H:

Requerimientos de pHRequerimientos de pH

AcidófilosAcidófilos NeutrófilosNeutrófilosAlcalófilosAlcalófilos

Oxígeno

Condiciones físicas necesarias para el desarrollo microbiano:

Concentración de SalesConcentración de Sales

NaClNaCl Halófilos:Halófilos:

halófilos bajos halófilos bajos 1-6 %1-6 %

halófilos moderados halófilos moderados 6-15 %6-15 %

halófilos extremos halófilos extremos 15-30 %15-30 %

HalotolerantesHalotolerantes

GENETICA BACTERIANA.GENETICA BACTERIANA.GENGENGregorio Mendel, Wilhem Johannsen Gregorio Mendel, Wilhem Johannsen 19091909

La información genética se organiza en La información genética se organiza en

unidades funcionales llamadas genesunidades funcionales llamadas genes..

Es la unidad de la herencia y su papel Es la unidad de la herencia y su papel

en el organismo se revela mediante en el organismo se revela mediante

cambios en el fenotipo llamados cambios en el fenotipo llamados

mutaciones, esto es cuando secuencias mutaciones, esto es cuando secuencias

de ADN son alteradas, ya sea que se de ADN son alteradas, ya sea que se

pierda o sea modificada la función del pierda o sea modificada la función del

gen codificado.gen codificado.

GENETICA BACTERIANA.GENETICA BACTERIANA.

ADN significaADN significa:: ácido desoxirribonucleicoácido desoxirribonucleicoEs el portador de la información Es el portador de la información genéticagenética

Características de los genomas Características de los genomas procariotas procariotas

Estabilidad y variabilidad de la Estabilidad y variabilidad de la información genética información genética

Fuentes de variabilidad genética: Fuentes de variabilidad genética: MutaciónMutaciónRecombinaciónRecombinaciónTransferencia horizontalTransferencia horizontal

VirusVirus

Genética microbianaGenética microbiana

Genética microbianaGenética microbiana

En cada En cada operónoperón se diferencian dos clases de se diferencian dos clases de genes: genes:

•Los Los genes estructuralesgenes estructurales ( E1, E2, E3...), que ( E1, E2, E3...), que codifican proteínas, participantes en un codifican proteínas, participantes en un determinado proceso bioquímico. determinado proceso bioquímico. •Un Un gen reguladorgen regulador (R) (R), que codifica a una , que codifica a una proteína represoraproteína represora (PR) que puede (PR) que puede encontrarse en la forma encontrarse en la forma activaactiva o o inactiva inactiva y es y es el agente que controla materialmente la el agente que controla materialmente la expresión.expresión.

OPERÓNOPERÓNGENETICA BACTERIANA.GENETICA BACTERIANA.

GENETICA BACTERIANA.GENETICA BACTERIANA.Replicación del ADN Replicación del ADN

bacterianobacteriano

Ocurre en tres etapas:Ocurre en tres etapas:

1ª etapa: desenrrollamiento y apertura de la 1ª etapa: desenrrollamiento y apertura de la doble doble hélice, en el punto hélice, en el punto ori-cori-c

2ª etapa: síntesis de dos nuevas hebras de 2ª etapa: síntesis de dos nuevas hebras de ADN.ADN.

3ª etapa: corrección de errores.3ª etapa: corrección de errores.

Replicación del ADN Replicación del ADN bacterianobacteriano


Pequeños fragmentos circulares de ADN. Pequeños fragmentos circulares de ADN.

Contienen de 2 a 30 genes. Algunos tienen Contienen de 2 a 30 genes. Algunos tienen

la capacidad para incorporarse o salir del la capacidad para incorporarse o salir del

cromosoma bacteriano. Se denomina cromosoma bacteriano. Se denomina

episomaepisoma a un plásmido incorporado al a un plásmido incorporado al

cromosoma bacteriano. cromosoma bacteriano.

PLÁSMIDOSPLÁSMIDOS

Intercambio genético en los Intercambio genético en los procariotasprocariotas


PLÁSMIDOSPLÁSMIDOS

Plásmidos en Plásmidos en Escherichia coli:Escherichia coli:

F ("factor sexual") contiene 25 genes, algunos de los F ("factor sexual") contiene 25 genes, algunos de los

cuales controlan la producción de los pilis , "tubos" cuales controlan la producción de los pilis , "tubos"

que se extienden desde la superficie de las células que se extienden desde la superficie de las células

bacterianas"machos"( F+), a la de las células bacterianas"machos"( F+), a la de las células

bacterianas hembras ( F-)bacterianas hembras ( F-)

R (resistencia a los antibiótico). R (resistencia a los antibiótico).



Virus Virus

bacterianosbacterianos

BACTERIÓFAGBACTERIÓFAG

OSOS


Mecanismos de transferencia genética entre Mecanismos de transferencia genética entre célulascélulas

GENETICA BACTERIANAGENETICA BACTERIANA

TransformaciónTransformación TransducciónTransducción

Mecanismos de transferencia genética Mecanismos de transferencia genética entre célulasentre células


ConjugaciónConjugación TransposiciónTransposición


El paso de material El paso de material genético de un virus genético de un virus llamado bacteriófago a una llamado bacteriófago a una bacteria.bacteria.

Citoplasma Citoplasma bacterianobacteriano

TRANSDUCCION:TRANSDUCCION:


TRANSDUCCION:TRANSDUCCION:

Por medio de estaPor medio de esta se transmite información se transmite información para:para:

a) a) Resistencia a antibióticosResistencia a antibióticos

b) b) Toxina diftérica (difteria)Toxina diftérica (difteria)Corynebacterium diphtheriae

c) c) Toxina eritrogénica (escarlatina) Toxina eritrogénica (escarlatina) Streptococcus Streptococcus pyogenespyogenes


El paso de material genético El paso de material genético a través de un pelo sexual, la a través de un pelo sexual, la que lo posee actúa como que lo posee actúa como masculina y la receptora masculina y la receptora como femenina.como femenina.

CONJUGACION SEXUAL:CONJUGACION SEXUAL:


El paso del material El paso del material genético de una genético de una bacteria a otra, a bacteria a otra, a través de la pared través de la pared celularcelular

TRANSFORMACION:TRANSFORMACION:

Descubierto por Griffith en 1928 propuso un principio transformante

GENETICA BACTERIANA.GENETICA BACTERIANA. TRANSFORMACION:TRANSFORMACION:

Cepas lisas(L, S) y Cepas (R) deCepas lisas(L, S) y Cepas (R) de Streptococcus pneumoniae Streptococcus pneumoniae

Se fragmenta el ADN

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GENETICA BACTERIANA.

TRANSDUCCION:El paso de material genéticoDe una un virus llamadobacteriófago a una bacteria.

Citoplasma bacteriano

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CONJUGACION SEXUAL:El paso de material gen´etico aTravés de un pelo sexual, la queLo posee actúa como masculinaY la receptora como femenina.

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TRANSFORMACION:El paso del material genéticode una bacteria a otra, a través de la pared celular

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DEFINICIONES

SEPSIS= CONTAMINACION

ASEPSIA= SIN CONTAMINACION

ESTERILIZACION= ELIMINACION TOTAL DE MICROORGANISMOS.

DESINFECCION= ELIMINACION PARCIAL POR DESINFECTANTES.

ANTISEPSIA= ELIMINACION DE MICROORGANISMOS POR MEDIO DE ANTISEPTICOS, EXCLUSIVO PARA PIEL Y TEJIDOS VIVOS.

MECANISMOS DE ESTERILIZACIÓNMECANISMOS DE ESTERILIZACIÓN

Muerte Muerte microbianamicrobiana

Se define como la pérdida Se define como la pérdida

irreversible de la reproducciónirreversible de la reproducciónSépticoSéptico Material ContaminadoMaterial Contaminado

AsépticAsépticoo

Material libre de Material libre de microorganismos capaces de microorganismos capaces de causar infección o causar infección o contaminacióncontaminaciónEstéril Estéril Material libre de cualquier Material libre de cualquier forma de vidaforma de vida

EsterilizacióEsterilizaciónn

Proceso que se utiliza para Proceso que se utiliza para obtener el material estérilobtener el material estéril

ESTERILIZACIÓN:ESTERILIZACIÓN:

Es la muerte o eliminación de Es la muerte o eliminación de todos los organismos viables todos los organismos viables de un medio, incluyendo de un medio, incluyendo grandes cantidades degrandes cantidades de esporas esporas bacterianas altamente bacterianas altamente resistentesresistentes. . Ésta se logra por Ésta se logra por medio de algún agente físico o medio de algún agente físico o químicoquímico..


AsepsiaAsepsia Ausencia de microorganismos capaces Ausencia de microorganismos capaces de causar infección o contaminación.de causar infección o contaminación.

Conjunto de procedimientos que Conjunto de procedimientos que impiden la llegada de impiden la llegada de microorganismos a un medio, ej. microorganismos a un medio, ej. Técnicas de aislamiento, Técnicas de aislamiento, indumentarias adecuadas, flujo indumentarias adecuadas, flujo laminar.laminar.AntisepsiaAntisepsia Proceso de destrucción de los Proceso de destrucción de los microorganismos contaminantes de los microorganismos contaminantes de los tejidos vivos.tejidos vivos.

Conjunto de procedimientos Conjunto de procedimientos destinados inhibir o destruir destinados inhibir o destruir microorganismos patógenos. ej. microorganismos patógenos. ej. Antisépticos y Desinfectantes.Antisépticos y Desinfectantes.


AGENTES QUÍMICOSAGENTES QUÍMICOS

Desinfección:Desinfección:

Se define como la Se define como la eliminación de toda eliminación de toda forma de forma de microorganismos, con microorganismos, con excepción de las excepción de las esporas, presentes en esporas, presentes en cualquier objeto cualquier objeto inanimado.inanimado.


AGENTES QUÍMICOSAGENTES QUÍMICOS

Desinfectantes:Desinfectantes:

Son sustancias químicas capaces de destruir un Son sustancias químicas capaces de destruir un germen patógenogermen patógeno que debido a su que debido a su alta alta toxicidad celulartoxicidad celular se aplican solamente se aplican solamente sobre tejido inanimado, es decir sobre tejido inanimado, es decir material material inerteinerte, objetos, ambiente y superficies, objetos, ambiente y superficies


AGENTES AGENTES QUÍMICOSQUÍMICOS

Antisépticos:Antisépticos:

Son sustancias químicas capaces de destruir Son sustancias químicas capaces de destruir un germen patógeno, que sí pueden un germen patógeno, que sí pueden aplicarse en aplicarse en tejido vivotejido vivo, ya que son de , ya que son de baja toxicidadbaja toxicidad, pero sólo localmente, , pero sólo localmente, de forma tópica, en piel y mucosasde forma tópica, en piel y mucosas


ANTIBIOTICOSANTIBIOTICOS

ANTIBIOTICO:ANTIBIOTICO: Vida vs. Vida.Vida vs. Vida.

BACTERICIDA:BACTERICIDA:Antibiótico que mata a las Antibiótico que mata a las bacteriasbacterias

BACTERISTATICO:BACTERISTATICO:Antibiótico que inhibe la Antibiótico que inhibe la reproducción reproducción bacterianabacteriana

ANTIBIOTICO DE AMPLIO ESPECTRO:ANTIBIOTICO DE AMPLIO ESPECTRO:Son aquellos que mata tanto a las Gram (+) como Son aquellos que mata tanto a las Gram (+) como a las Gram(-).a las Gram(-).

ANTIBIOTICO DE ESPECTRO REDUCIDO:ANTIBIOTICO DE ESPECTRO REDUCIDO:Sólo destruyen a las Gram Sólo destruyen a las Gram positivaspositivas o a las Gram o a las Gram negativas.negativas.

MÉTODOS:MÉTODOS:

CALORCALOR

QUÍMICOQUÍMICO

RADIACIÓNRADIACIÓN


Tipo de microorganismoTipo de microorganismo

Número de microorganismoNúmero de microorganismo

Cantidad de materia orgánica Cantidad de materia orgánica presentepresente

Tipo & configuración del material Tipo & configuración del material que será tratadoque será tratado

Tipo & concentración del agente Tipo & concentración del agente químicoquímico

Tiempo y temperatura de Tiempo y temperatura de exposición exposición

pHpH

HumedadHumedad

Eficiencia del agenteEficiencia del agente

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓNMÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓNMÉTODOS DE ESTERILIZACIÓNAGENTES FÍSICOS

CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACCIÓN ANTIMICROBIANAACCIÓN ANTIMICROBIANA

Tipo de MicroorganismoTipo de Microorganismo

Estado fisiológico de los Estado fisiológico de los microorganismosmicroorganismos

Medio ambienteMedio ambiente

AGENTES FÍSICOS:AGENTES FÍSICOS:

Temperatura (calor y frío)Temperatura (calor y frío)

DesecaciónDesecación

Radiación ionizante y no Radiación ionizante y no ionizanteionizante

Vibraciones sónicasVibraciones sónicas

Presión, etc.Presión, etc.


Calor -Seco-

Calor Húmedo

-Húmedo sin presión-

-Húmedo con presión-

Filtración

Radiación


AGENTES FÍSICOSAGENTES FÍSICOS

Esterilización por calorEsterilización por calor **

Su acción sobre los microorganismos Su acción sobre los microorganismos es consecuencia de la es consecuencia de la

desnaturalización de sus proteínasdesnaturalización de sus proteínas..Las técnicas más utilizadas en el laboratorio Las técnicas más utilizadas en el laboratorio

para la esterilización de material son las para la esterilización de material son las siguientes:siguientes:

Esterilización por ebulliciónEsterilización por ebullición

Esterilización por vapor fluyente Esterilización por vapor fluyente (Arnolización)(Arnolización)

Esterilización en autoclaveEsterilización en autoclave

Esterilización en hornoEsterilización en horno

IncineraciónIncineración

AGENTES FÍSICOS

**Método de esterilización más Método de esterilización más efectivoefectivo

Esterilización por calorEsterilización por calorIncineración:Incineración:

Esterilización del Esterilización del asa bacteriológicaasa bacteriológica

Eliminación de animales de laboratorioEliminación de animales de laboratorio..

En hospitales para la En hospitales para la eliminación de desechoseliminación de desechos como como los son los apósitos, vendas u otro material los son los apósitos, vendas u otro material contaminado.contaminado.

AGENTES FÍSICOS

El incinerador requiere El incinerador requiere certificacióncertificación


Esterilización por calor húmedoEsterilización por calor húmedoEbullición:Ebullición:

Consiste en la introducción del material que Consiste en la introducción del material que se requiere esterilizar en el seno de un se requiere esterilizar en el seno de un líquido que tiene una líquido que tiene una temperatura superior a temperatura superior a 70ºC70ºC y de preferencia a y de preferencia a 100ºC100ºC. .

Funcionamiento:Funcionamiento:

ConvecciónConvección

Esterilización por calor secoEsterilización por calor seco (en (en hornohorno))AGENTES FÍSICOSAGENTES FÍSICOS

Mecanismo de acción del calor Mecanismo de acción del calor seco:seco:

Desnaturalización de las Desnaturalización de las proteínas yproteínas y oxidación de la oxidación de la materia orgánica.materia orgánica.Características:Características:

Recipiente rectangular, de Recipiente rectangular, de doble pared, entre las doble pared, entre las cuales puede haber aire cuales puede haber aire estático u otro material estático u otro material aislante como la lana de aislante como la lana de vidrio. vidrio.

Aire Aire fríofrío

Aire Aire caliencalien

tete

fuente de calor

fuente de calor

termómetrotermómetro

Condiciones:Condiciones:

180ºC/1 hora, 160ºC/2 h180ºC/1 hora, 160ºC/2 h, , 160-170ºC /2-4 h160-170ºC /2-4 h, 171ºC /1h, , 171ºC /1h, 121ºC /16h121ºC /16h

Esterilización por calor secoEsterilización por calor seco (en (en hornohorno))


Material que se puede Material que se puede esterilizar:esterilizar:

*Vidrieria, aceite Vidrieria, aceite mineral, polvos (talcos), mineral, polvos (talcos), material quirúrgico material quirúrgico (especialmente (especialmente cromado), jeringas de cromado), jeringas de vidrio, agujas vidrio, agujas hipodérmicas metálicas, hipodérmicas metálicas, objetos de vidrio, objetos de vidrio, porcelanas, drogas porcelanas, drogas oleosas y otro tipo de oleosas y otro tipo de material que no sea material que no sea combustible a combustible a temperatura cercana a temperatura cercana a 200ºC200ºC

*Impenetrables no orgánicos

Esterilización por calor húmedo con Esterilización por calor húmedo con presiónpresión (en (en autoclaveautoclave))


Características:Características:

Recipiente cilindrico Recipiente cilindrico metálico, de doble metálico, de doble pared, tiene tapa que pared, tiene tapa que cierra cierra herméticamente.herméticamente.

Mecanismo de acción del calor Mecanismo de acción del calor húmedo:húmedo:

Desnaturalización de las proteínas.Desnaturalización de las proteínas.

manóm

etro

manóm

etro

válv

ula

de e

scape

válv

ula

de e

scape

válv

ula

de s

eguri

dad

válv

ula

de s

eguri

dad

Funcionamiento:Funcionamiento:

El vapor de agua cuando El vapor de agua cuando es comprimido dentro es comprimido dentro del espacio adquiere del espacio adquiere presión logrando presión logrando temperaturas altas.temperaturas altas.Condiciones: 15 min a 15 Condiciones: 15 min a 15

lb/pulglb/pulg22/121ºC /121ºC

OLLA DE PRESION

Esterilización por calor húmedo con Esterilización por calor húmedo con presiónpresión (en (en autoclaveautoclave))


Material que se puede esterilizar:Material que se puede esterilizar:

Medios de cultivo, guantes, cajas de Medios de cultivo, guantes, cajas de Petri desechables, instrumental Petri desechables, instrumental quirúrgico no cortante, soluciones quirúrgico no cortante, soluciones acuosas, batas, apósitos, sondas, acuosas, batas, apósitos, sondas, material textil.material textil.Precauciones:Precauciones:

El vapor de agua saturado tiene El vapor de agua saturado tiene acción acción únicamente por contacto,, los materiales deberán los materiales deberán disponerse de tal manera que se disponerse de tal manera que se asegure éste en todas sus partes; asegure éste en todas sus partes;

AUTOCLAVAUTOCLAVEE

Esterilización por calor húmedo con Esterilización por calor húmedo con presiónpresiónAUTOCLAVE

AUTOCLAVE

AGENTES FÍSICOS

Esterilización por calor húmedo Esterilización por calor húmedo con presióncon presión (en autoclave) (en autoclave)

Sólo en los casos de emergencia se acepta la Sólo en los casos de emergencia se acepta la aplicación del procedimiento denominado aplicación del procedimiento denominado "Flash""Flash", bajo las siguientes condiciones:, bajo las siguientes condiciones:

Temperatura Temperatura 134°C, tiempo de 134°C, tiempo de exposición 3 exposición 3 minutosminutos

CONTROLESCONTROLES

ESTERILIZACIÓN EN HORNO Y ESTERILIZACIÓN EN HORNO Y AUTOCLAVEAUTOCLAVE


Ampolletas con Ampolletas con Bacillus Bacillus sterothermophilussterothermophilus

CONTROLESCONTROLESESTERILIZACIÓN EN HORNO Y ESTERILIZACIÓN EN HORNO Y

AUTOCLAVEAUTOCLAVE


Attest™ Biological Indicators

Viales con Viales con Bacillus Bacillus stearothermophilusstearothermophilus


AUTOCLAVEAUTOCLAVE


Attest™ Attest™ BiologicalBiological Monitoring Monitoring SystemSystem

CONTROLESCONTROLES

ESTERILIZACIÓN EN HORNO Y ESTERILIZACIÓN EN HORNO Y AUTOCLAVEAUTOCLAVE


Autoclave Steam Indicator Tape


AUTOCLAVEAUTOCLAVE


Tirillas de papel cromatográfico Tirillas de papel cromatográfico impregnadas con esporas de impregnadas con esporas de Bacillus Bacillus subtilis var Niger o subtilis var Niger o Bacillus Bacillus stearothermophilusstearothermophilus

ESTERILIZACIÓN EN HORNO DE ESTERILIZACIÓN EN HORNO DE MICROONDASMICROONDAS


Efecto De Las Radiaciones Sobre Los Efecto De Las Radiaciones Sobre Los MicroorganismosMicroorganismos

RADIACIÓN:RADIACIÓN:

Es una forma de Es una forma de propagación de la energía propagación de la energía a través del espacioa través del espacio

Efecto De Las Radiaciones Sobre Los Efecto De Las Radiaciones Sobre Los MicroorganismosMicroorganismos

ElectromagnéticaElectromagnética

Rayos X, rayos gamma, Rayos X, rayos gamma, ultravioletaultravioleta, visible, , visible, infrarrojos, ondas hertzianasinfrarrojos, ondas hertzianas

ParticuladaParticulada

Rayos beta (eRayos beta (e-- de alta velocidad), rayos alfa de alta velocidad), rayos alfa (núcleos de helio) o neutrones.(núcleos de helio) o neutrones.

RADIACIÓN:RADIACIÓN:

ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICOESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

EFECTO DE LAS RADIACIONES EFECTO DE LAS RADIACIONES SOBRE LOS MICROORGANISMOSSOBRE LOS MICROORGANISMOS

3,75x103,75x10-7-7 a 8x10 a 8x10-9-9

8 nm a 375 nm8 nm a 375 nm

EFECTO DE LAS RADIACIONES SOBRE EFECTO DE LAS RADIACIONES SOBRE LOS MICROORGANISMOSLOS MICROORGANISMOS

RADIACIÓN ULTRAVIOLETARADIACIÓN ULTRAVIOLETA

Longitud de onda de mayor efecto Longitud de onda de mayor efecto bactericidad es debactericidad es de 265 nm265 nm

Mecanismo de Acción:Mecanismo de Acción:

Formación de dímeros de timinaFormación de dímeros de timina, , causando alteraciones importantes en la causando alteraciones importantes en la transcripción del DNA y por lo tanto en transcripción del DNA y por lo tanto en la replicación de éste.la replicación de éste.

Causando mutaciones incompatibles con Causando mutaciones incompatibles con la vida.la vida.


Se obtiene de una lámpara de Se obtiene de una lámpara de vapor de mercurio y cuarzo,vapor de mercurio y cuarzo, de de longitud de onda 265nm. longitud de onda 265nm.

•"limpiar" el aire"limpiar" el aire

•Superficies expuestas, Superficies expuestas,

•Estuches de instrumental,Estuches de instrumental,

•En bodegas donde se empacan En bodegas donde se empacan productos farmacéuticos.productos farmacéuticos.

APLICACIONES:APLICACIONES:

RADIACIÓN ULTRAVIOLETARADIACIÓN ULTRAVIOLETAAPLICACIONES:APLICACIONES:

Lámpara de Lámpara de

luz luz ultravioletaultravioleta


APLICACIONES:APLICACIONES:

Algunos materiales particularmente los Algunos materiales particularmente los líquidos biológicos como el suero de los líquidos biológicos como el suero de los animales, soluciones de enzimas, animales, soluciones de enzimas, algunas vitaminas o antibióticos son algunas vitaminas o antibióticos son termolábiles (son destruidos por el termolábiles (son destruidos por el calor). Otro agente físico como es la calor). Otro agente físico como es la radiación es perjudicial para estos radiación es perjudicial para estos materiales e impráctico para materiales e impráctico para esterilizarlos.esterilizarlos.

FiltraciónFiltración



TIPOS DE FILTROS:TIPOS DE FILTROS:

Filtro de Profundidad,Filtro de Profundidad,

Filtro de MembranaFiltro de Membrana

Filtro NucleoporeFiltro Nucleopore

FILTRACIÓNFILTRACIÓN


ObjetivoObjetivoEliminar microorganismosEliminar microorganismos y partículas y partículas en suspensión de una solución.en suspensión de una solución.

Se debe tener en cuenta que Se debe tener en cuenta que los filtroslos filtros que se utilizan generalmente en los que se utilizan generalmente en los laboratorios laboratorios no retienen virus ni no retienen virus ni micoplasmasmicoplasmas**, estos últimos están en , estos últimos están en el límite de separación según el el límite de separación según el diámetro de poro que se utilicediámetro de poro que se utilice



Materiales de los Filtros:Materiales de los Filtros:

Placas de asbesto en los filtros Placas de asbesto en los filtros SeitzSeitz

Tierra de diatomeas en los Tierra de diatomeas en los BerkefeldBerkefeld

Porcelana en los Chamberland-Porcelana en los Chamberland-PasteurPasteur

Fibra de vidrio (Ej. Fibra de vidrio (Ej. HEPAHEPA)) Filtros de membrana estan Filtros de membrana estan

compuestos de ésteres de celulosa compuestos de ésteres de celulosa inertesinertes



USOS:USOS:

Para esterilizarPara esterilizar aceites, algunos aceites, algunos tipos de pomadas, soluciones tipos de pomadas, soluciones oftálmicas, soluciones oftálmicas, soluciones intravenosas, drogas intravenosas, drogas diagnósticas, radiofármacos, diagnósticas, radiofármacos, medios para cultivos celulares, medios para cultivos celulares, soluciones de antibióticos y soluciones de antibióticos y vitaminas.vitaminas.

Desinfección del aireDesinfección del aire



Pressure Driven Devices Pressure Driven Devices Millex Filters (33 mm)Millex Filters (33 mm)

MillexÔ Filters (4, 13, 25 mm)

Tamaño de poro:0.1-0.22, Tamaño de poro:0.1-0.22,

0.45,0.8,5.0µm0.45,0.8,5.0µm

FILTRACIÓNFILTRACIÓNMÉTODOS DE ESTERILIZACIÓNMÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

SterivexTM Filter UnitsMillex 50 mm Filter Capsules

Tamaño de poro 0.1-0.45µmTamaño de poro 0.1-0.45µm



THE MICRO

METODOS DE ESTERILIZACION (Esterilizantes físicos)

Vapor a presion o Autoclave= 121ºC/121lbs/15 min.

Calor seco= 180ºC o 160ºC durante 1 o 2 horas.

Rayos Ultravioleta= Para esteilizar cuartos o Quirófanos el tiempo es variable.

Filtración= Método de supresión de microorganismos, especialmente para líquidos o medios de – cultivo.

THE MICRO

METODOS DE ESTERILIZACION (Esterilizantes gaseosos))

Oxido de Etileno

Vapor de Formaldehido.

Vapor de Peróxido de Hidrógeno.

Gas de Dióxido de cloro.

THE MICRO

ESTERILIZACION “EN FRIO “

GLUTERALDEHIDO (Cidex)

CLORO (Clorox)

CRESOLES (Lysol)

THE MICRO

DESINFECTANTES.

GERMICIDA= Si destruye cualquier tipo de microorganismo.

BACTERICIDA= Si destruye bacterias.

VIRICIDA= Destruye virus.

FUNGICIDA= Destruye honngos.

THE MICRO

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS.

Alcohol etílico y metílico (A,D). Peróxido de Hidrógeno (A) Formaldehido 5 o 10% (D). Fenol (D). Nitrato de plata (A). Yodo (Isodine, Iodex) (A). Jabones de mano (A). Detergentes (D). Clorhexidina (A):

THE MICRO

PUNTOS BASICOS DE LA ACTIVIDAD ANTIBIOTICA.

ACTUAN CONTRA:

• LA PARED CELULAR.• LA MEMBRANA CITOPLASMATICA.• LA SINTESIS DE PROTEINAS.• EL A.D.N. BACTERIANO.• COMO UN ANTIMETABOLITO.

A.D.N.

THE MICRO

Sitio de Accion de la penicilinasa

ESTRUCTURA DE LA PENICILINA

DESTRUYE PARED CELULAR

THE MICRO

PENICILINAS DEL Penicillum spp.•Penicilinas naturales: Penicilina G, penicilina V.• Penicilinas sintéticas: Oxaclina, Dicloxacilina, etc.• Penicilinas de amplio espectro: Ampicilina, Amoxicilina, Carbencilina.

PENICILINA AISLADAS DEL Cephalosporium spp.• Cefalosporinas.

TIPOS DE PENICILINAS

THE MICRO

INHIBEN SINTESIS DE PROTEINAS

AMINOGLUCOSIDOS:Tetraciclinas.GentamicinaAmikasina.

MACROLIDOS:Clindamicina.Eritromicina.Cloranfenicol.

THE MICRO

DESTRUYEN MEMBRANA CITOPLASMATICA

GRISEOFULVINAS.KETOKONAZOL.ANFOTERICINA B.MICONAZOLNISTATINA

THE MICRO

CONTRA EL A.D.N.

METRONIDAZOL

NO

THE MICRO

ANTIMETABOLITO

TRIMETROPIMSULFAMETOXAZOL

THE MICRO

ANTIBIOGRAMA

METODO MEDIANTEEL CUAL SE DETERMINA

LA RESISTENCIA O SUSCEPTIBILIDAD

DE UNA BACTERIAA LOS ANTIBIOTICOS.

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