Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

25
Laura María Pineda Jiménez Maria Sarah Restrepo Medicina UPB 2011

description

laura pinedamaria sarah restrepo

Transcript of Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Page 1: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Laura María Pineda Jiménez

Maria Sarah Restrepo

Medicina UPB

2011

Page 2: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

INTRODUCTION

Pseudomonas literally means "false unity" is a type of straight or slightly curved bacillus, gram negative, oxidase positive, aerobic and in them is common presence of plasmids.

Page 3: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

INTRODUCTION

P. Aeruginosa is a nosocomial opportunistic pathogen that survives in moist environments and colonizes the respiratory tract of mechanically ventilated patients, too often detected in urinary tract infections.

This type of pseudomonas has a natural type bacterial resistance to support the effects of antibiotics that eliminate or control them.

Page 4: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Analyze the rate of increase presented by P. Aeruginosa MDR as an infectious agent.

GENERAL OBJECTIVE

Page 5: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Aislamientos de pacientes con P. Aeruginosa MDR

• Hospital del centro de Japón.

• Información del laboratorio de microbiología desde Enero del 2006 a Junio del 2009.

• 59 pacientes hospitalizados con MDR P. Aeruginosa detectados por cultivos de orina y aislamiento de muestras del tractos respiratorio.

MATERIALES Y MÉTODOS

Page 6: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

MATERIALES Y MÉTODOS

ANTIBIÓTICO CMI ACCIÓN

Imipenem 16 mg / LInhibe síntesis de la pared bacteriana. Estable en presencia de betalactamasas

Levofloxacino 8 mg / LInhibe enzimas de la replicación y transcripción del ADN bacteriano

Amikacina 64 mg / LSe une la subunidad 30S del ribosoma bacteriano, impide lectura del ARNm

Colistina -Cambia permeabilidad de la membrana citoplasmática barcteriana

P. Aeruginosa resistente a:

Page 7: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

La información incluía:

MATERIALES Y MÉTODOS

• Edad.

• Género.

• Tiempo en riesgo.

• Transferencia de otro hospital.

• Salas de hospitalización.

• Actividades cotidianas.

• Resultados clínicos.

• Atención médica previa a la exposición.

Page 8: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Aislamientos bacterianos:

El medio ambiente fue tomado como parte de las medidas de control de infecciones en Septiembre de 2006, Marzo de 2007 y Junio de 2009.

El ácido nalidíxico centrimide (NAC) agar.

MATERIALES Y MÉTODOS

Page 9: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Detección de los productores de MBL y en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de genes MBL:

• Aislamientos de P. Aeruginosa MDR seleccionados para producción de MBL mediante prueba de sinergia de doble disco (ceftazidima y ác. de Na+ tioglicólico-SMA).

MATERIALES Y MÉTODOS

Page 10: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

• Preparación del ADN plantilla y la amplificación por PCR para la detección de bla IMP-1-, bla IMP-2- y blaVIM-2-tipo genes MBL se realizó con los primers.

Pasos:

La reacción requiere:

MATERIALES Y MÉTODOS

Page 11: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

MATERIALES Y MÉTODOS

Page 12: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Análisis en electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE):

• Técnica para separar fragmentos según carga y PM, utilizando enzimas de restricción, para hallar polimorfismos.

• Aislamientos incorporados en geles de agarosa y digerido con enzimas de restricción SpeI. Electroforesis.

MATERIALES Y MÉTODOS

Page 13: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Análisis (MLST) de tipo de secuencia de multilocus:MLST:

• Prueba para comparación de la secuencia de 7 genes conservados de los 7 loci, permitiendo establecer secuencias ST.

• El ADN genómico fue extraído, secuencias de nucleótidos comparadas con secuencias en la base de datos online de MLST.

MATERIALES Y MÉTODOS

Page 14: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

Análisis estadístico:

• Análisis univariable.

• Las variables candidatas para el estudio con p <0,05 en el análisis univariable.

MATERIALES Y MÉTODOS

Page 15: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

RESULTADOS

• El número de pacientes con la P. Aeruginosa MDR fluctuaba pero los resultados encontrados fueron los que se mantuvieron consistentes durante el periodo de estudio.

• Tiempo de estudio: Enero de 2006 - Julio de 2009

• Muestra: 59 pacientes

Page 16: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

RESULTADOS

• Esquema del brote:

Page 17: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

RESULTADOS

• Perfil bacteriano:

Page 18: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

RESULTADOS

• Electroforesis:

Page 19: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

DISCUSSION

AUTHOR RESULTS YES NO

Tsuji A, et al

MDR P. aeruginosa was mostly isolated from urine samples, ranging from 44% to 73%

Hota S, et al

The respiratory tract became the main source of MDR P. aeruginosa isolation in the ICU, accounting for around 50%

Rossolini GM, et al

High mortality ranging from 40% to more than 60% has been reported in bacterial nosocomial pneumonia and ventilator associated pneumonia

Nishio H, et al

In Japan, the predominant type of MBL is IMP-1, whereas VIM-2 is rarely detected, accounting for less than 10%

Page 20: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

CONCLUSION

1. The P. Aeruginosa is one of the most serious nosocomial pathogens, which survives in wet environments and causes infections like pneumonia. 2. The most affected patients are the ones that have critically illness and immunocompromised, in those patients the P. Aeruginosa mainly colonises the respiratory tract. 

Page 21: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

CONCLUSION

3. The P. Aeruginosa MDR is associated with an increased in the mortality because it produces metallo-b-lactamases (MBL) that inhibits the effect of the antiobiotics, this is problem that in the future is going to affect us all. 4. The reinforcement in disinfection and hygienic precautions reduced the number of patients with MDR P. Aeruginosa infections. However, it continued to colonise high risk inpatients.

Page 22: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

MAPA CONCEPTUAL #1 Laura María Pineda Jiménez

Page 23: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

MAPA CONCEPTUAL #2Maria Sarah Restrepo

Page 24: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

• RAFAEL MARIN GALVIN. Fisioquimica y microbiologia de los medios acuáticos, tratamiento y control de calidad de aguas. Ediciones díaz de santos S.A. Madrid. 2003. Pág. 121 - 122.

• OTTO ALBERTO SUSSMANN, LORENZO MATTOS Y ANDRÉS RESTREPO. Resistencia bacteriana.

• MLST, tomado de: http://www.ivami.com/noticia_indiv.php?id_noticia=1956&opc=5&id=362&lang=es, 2011.

• LINA M. MARTÍNEZ, NATALIA VARGAS, ANDRÉS E. TORO, ANA P. PAMPLONA Y ESTEBAN QUEVEDO. Biología molecular: Libro de clase. Sexta edición. Pág. 113 - 114.

BIBLIOGRAFÍA

Page 25: Seminario 2 (2)_3 laura pineda y maria sarah rpo

GRACIAS