Salicylic acid has a role in regulating gene expression during leaf senescence

9
Salicylic acid has a role in regulating gene expression during leaf senescence Karl Morris 1 , Soheila A.-H.-Mackerness 1 , Tania Page 1 , C. Fred John 1 , Alex M. Murphy 2 , John P. Carr 2 and Vicky Buchanan-Wollaston 1,* 1 Department of Plant Genetics and Biotechnology, Horticulture Research International, Wellesbourne, Warwick CV35 9EF, UK, and 2 Department of Plant Sciences, University of Cambridge, Downing Street, Cambridge CB2 3EA, UK Received 25 April 2000; revised 15 June 2000; accepted 22 June 2000. *For correspondence (fax +44 1789 470552; e-mail [email protected]). Summary Leaf senescence is a complex process that is controlled by multiple developmental and environmental signals and is manifested by induced expression of a large number of different genes. In this paper we describe experiments that show, for the ®rst time, that the salicylic acid (SA)-signalling pathway has a role in the control of gene expression during developmental senescence. Arabidopsis plants defective in the SA-signalling pathway (npr1 and pad4 mutants and NahG transgenic plants) were used to investigate senescence-enhanced gene expression, and a number of genes showed altered expression patterns. Senescence-induced expression of the cysteine protease gene SAG12, for example, was conditional on the presence of SA, together with another unidenti®ed senescence-speci®c factor. Changes in gene expression patterns were accompanied by a delayed yellowing and reduced necrosis in the mutant plants defective in SA-signalling, suggesting a role for SA in the cell death that occurs at the ®nal stage of senescence. We propose the presence of a minimum of three senescence-enhanced signalling factors in senescing leaves, one of which is SA. We also suggest that a combination of signalling factors is required for the optimum expression of many genes during senescence. Keywords: Arabidopsis, leaf senescence, signalling factors, gene expression, salicylic acid, cell death. Introduction Leaf senescence is the ®nal stage of leaf development that marks the transition from net carbon and nitrogen assimilation to a period of catabolism followed by nutrient diversion to the developing sinks (Feller and Fischer, 1994; Matile, 1992). Senescence is a programmed event responding to external and internal signals, it requires de novo gene expression and protein synthesis, and is controlled in a highly co-ordinated manner (Buchanan-Wollaston, 1997; Smart, 1994). Many genes have been isolated that show enhanced expression during senescence, and the sequencing and characterization of these has made a valuable contribution to our under- standing of the processes that occur during leaf senes- cence (Buchanan-Wollaston, 1997; Gan and Amasino, 1997). However, despite such advances our understanding of the intricate nature of leaf senescence is still at an early stage, and little is known about the regulatory signals and pathways that control this process. Many plant hormones have been implicated in the regulation of senescence (Smart, 1994), and there is good evidence for the roles of both ethylene and cytokinin. Transgenic plants that express low ethylene levels and mutants that are insensitive to ethylene both show delayed leaf senescence although, once senescence is initiated, the progression is normal (Grbic and Bleecker, 1995; Picton et al., 1993). These experiments indicated that ethylene is a modulator rather than an absolute controller of senescence. The onset of senes- cence, at least in some plants, appears to be controlled by levels of cytokinin. Experiments with transgenic tobacco plants, expressing a cytokinin biosynthesis gene auto- regulated from a senescence-enhanced promoter, showed that tobacco leaf senescence was inhibited while cytokinin levels remained high (Gan and Amasino, 1995). However, genes that control the onset of senescence, and those involved in the signalling pathways that lead to the The Plant Journal (2000) 23(5), 677±685 ã 2000 Blackwell Science Ltd 677

Transcript of Salicylic acid has a role in regulating gene expression during leaf senescence

��������� ���� �� � ��� � ������� � �� � ������ ��� � ���� � ��� ��

��� ����� ������� ����������� ��� �� �� ������ �� �� !�� �� ���� �� �����"� !�� �� ��" � �

#���� $���� � �%������ ��&

���������� � � �� ������� �� ������ ��� ������ ���� �������� �������� � �� ������� ������� !"# $%&�

'(� ��)��������� � � �� *������� '�+������ � ��������� ���� *������ �������� �) "%,� '(

�������� �� ��� � � ������� �� ���� � � ������� �� ���� � ����� ������������� ���� ��� �� ! �� ���� �"#��� ���$%�&"'��������()�������$*�

��''��

(��� � ��� �� � � ��'���� ���� ���� � �� ������ )� '������� ��*����'� ��� � � � *�� '� ���

�� �� � � � '� ������ )� � ����� ������ �� � ���� �')� �� ������ � �� �� + ��� ���� ,�

����)� �����'� � ���� ��,� �� ��� -� ��'�� ���� ��� �������� ���� .��/��� ���� � ����,�� �� �

��� � ��� �� ��� �� �� � ������ ��� � ��*����'� ��� � ��� ��� ��)����� ��� � �������*� �

��� ����� ���� � ����,�� .���� � � ���� '��� � � � �� �� �� �� ��� �/ ,�� ��� ��

� *������� � ��� ���� �� ��� �� � ������ � � � � �')� �� �� � ��,�� ������ ������

����� � �� ��� ���� ����� ������ �� ��� ����� � ������ �� � ��� � �� ���'���� ,�

�� ����� �� � ��� ��� �� �� ��� ������� ,��� � ���� � ��� ��-�� � ��� �������-� ������

��� �� � �� � ������ ����� ,�� ����'�� ��� )� � ������� �����,� � � � ������ ���� �

��� '��� � ��� � �������*� � ����� ���� �� ������ � � ��� �� �� � ��� ���� ����� ���� ���� �� ���

- �� ���� �� � ��� ��� %� ����� ��� ��� �� �� � '� �'�' �� ���� � ��� ���� �� ���

�� ���� � ����� � � ��� � ���*�� � � �� ,���� � ��� %� ��� ����� ���� � ��')� ���� ��

�� ���� � ����� � �0���� �� ��� ����'�' ������ �� '� � �� � ��� � � ��� ���

���,��1 ��)������ ���� � ��� ��� �� ���� � ������ �� � ������ � �������� ����� ���� ������

+ ��������

+��� ���������� �� �)� ,��� ���-� �� ���� ������#��� �)��

#��$� �)� ���������� ���# ��� ���&�� ��� �����-��

����#������� �� � ����� �� ����&����# �����'�� &%

�������� ��������� �� �)� ��������- ���$� ������� ���

����)��. �!!�� /�����. �!!�*� 0��������� �� � ��-��##��

����� ��������- �� �������� ��� �������� ��-����. ��

��1����� �� + -��� ��������� ��� ������ �%��)����.

��� �� ���������� �� � )�-)�% ��"��������� #�����

�2��)����"3��������. �!!�� 0#���. �!!�*� /��% -����

)��� &��� �������� �)�� �)�' ��)����� ��������� �����-

����������. ��� �)� ��1������- ��� �)��������4����� ��

�)��� )�� #��� � �����&�� ������&����� �� ��� �����"

�������- �� �)� �������� �)�� ����� �����- ���� �����"

����� �2��)����"3��������. �!!�� 5�� ��� #�����.

�!!�*� 6�'����. ������ ���) �������� ��� ������������-

�� �)� ��������� ������ �� ���� ���������� �� ����� �� �� ����%

���-�. ��� ������ �� $��'� �&��� �)� ��-������% ��-���� ���

��)'�%� �)�� ������� �)�� �������

/��% ���� )��#���� )��� &��� �#������� �� �)�

��-������� �� ���������� �0#���. �!!�*. ��� �)��� ��

-��� �������� ��� �)� ����� �� &��) ��)%���� ���

�%��$����� 7����-���� ����� �)�� ������ ��' ��)%����

������ ��� #������ �)�� ��� ����������� �� ��)%����

&��) �)�' ����%�� ���� ���������� ���)��-). ����

���������� �� ���������. �)� ��-������� �� ���#�� �5�&��

��� 2����$��. �!!�� 8����� �� � �. �!!9*� 7)��� �����#����

��������� �)�� ��)%���� �� � #�������� ���)�� �)�� ��

�&������ ���������� �� ����������� 7)� ����� �� �����"

�����. �� ����� �� ��#� �����. ����� �� &� ���������� &%

������ �� �%��$����� :����#���� '��) �����-���� ��&����

�����. ��������- � �%��$���� &���%��)���� -��� ����"

��-������ ���# � ����������"��)����� ��#����. �)�'��

�)�� ��&���� ���� ���������� '�� ��)�&���� ')��� �%��$����

������ ��#����� )�-) �5�� ��� #�����. �!!�*� 6�'����.

-���� �)�� ������� �)� ����� �� ����������. ��� �)���

�������� �� �)� ��-������- ��)'�%� �)�� ���� �� �)�

-�� � �� .��� �� * "2��*. ;��<; �

�� 2���$'��� 0������ +�� ;��

��������� �� ����������"��)����� -����. )��� ��� &���

������,���

� '��� �� &���- � $�% ��� �� ���� ������#���. ����

���������� �� ���� ������� ��#������% &% #��% &�����

��� �&����� �������� �5�� ��� #�����. �!!�� 0#���.

�!!�*� 8����� �)�� )��� &��� ������ �� ���������

�)�#����� ���) �� �4���. �� ��#�-��- ��������� ���) ��

=>"2. �)�' ����������"��$� �%#��#� ��� ������4�� ����

����) ������� �� � �. �!! � 8��� �� � �. �!!�*� 7)��� �����"

#���� ������ �� ��������� ��������� ������. ')��) ����� ��

������� ������������ �� )����%��)���� -����. ��-���"

����� �� �)����)%�� ��� ������. ��� �)� �������� ��

����% ���������� �%#��#� ��"6�"/��$������ �� � �. �!!��

8��� �� � �. �!!�*� ?�������� &% ��)�-��� ��� ���� ������ ��

����������"��$� �%#��#�. '��) %����'��- �� ��������

������ ����� ��������- �/���)�'�. �!!�*� ?� ��������.

��������� &% ����#���&�� ��)�-��� ����� ������� ��

������4�� ���� ����) ��)� )%����������� �������. /����

��� @��-�. �!!�*�

7)� )������ ��#���� �����%��� ���� �0* )�� &���

������,�� �� � $�% ��-������- ��#����� �� ��#�����

���� �������� �� ������. ��������- ��)�-�� ��������

�5�����% �� � �. �!!9� 5��4�&���$. �!!!*� ��� ������� ��

�4��� ���� ��� @����. �!!!� 0)��#� ��� @����. �!!�* ���

=>"2 �0����� �� � �. �!! *� 7����-���� ��&������ �����

��������- �)� �������� ������ ��� -���. �������-

� �����%���� )%����%����. ������ ����#����� 0 ���. �� �

�����1�����. �)�' ������� �� 4��� ��)�-������"�������

���* -��� ��������� ��� ��� ��#��#���� �� �)��� �&����%

�� ������ ��)�-�� -��'�) �5�����% �� � �. �!!9*� 7)���

����� ���� )��� � ������� ��������� �� �4��� ���� ���

@����. �!!!* ��� =>"2 �0� �"6�"/��$������. ���&���)��

�������*�

������ �������� �� ��� ������������- �� �)� 0 ��)"

'�% )��� &��� ���-��% ��� �� �)� ������,������ �� �

��#&�� �� #������ '��) ������� '��)�� �)�� ��)'�% �A��

�� � �. �!!�� A�� �� � �. �!!�� 5��4�&���$ �� � �. �!!�� B)��

�� � �. �!! *� 7)� #������ ��� ��� ���/ �A�� �� � �. �!!��

5��4�&���$ �� � �. �!!�* )��� �&��������� �� ��������� -����

')��� ������� ��� �������� �� �����#������ �� �)� 0

��-���� 7)� ��� #����� ����� $��'� �� ��� ��� ����*

����� �� ������ �� -���� ����� ��������� �����#���� ���

���� �)�'� ��������� �������&����% �� ��)�-�� �����$�

7)� 0��� -��� ������� � ������ ���������- ��$%���

������ �A�� �� � �. �!!�* �)�� )�� &��� ��������� �� &� �

��-������ ������ ����������- '��) ������� 4���"��������"

���� ������� �)�� &��� �� ��������� ��1������ �� �)� ��1�

��#���� �@����� �� � �. � � B)��- �� � �. �!!!� B)��

�� � �. � *� 7)� ���/ #����� '�� ������,�� �� � #�����

��������� �� ��#������ &���%��)���� �)�� �)�'� ������� ��

-��� ��������� ��� ��'�� 0 ������ ')�� �������� '��)

��)�-��� �B)�� �� � �. �!! *� 7)� ������ �� �,�/

��������� �� ������� �� 0 �����#��� �� ��)�-��

��������� ��--���� �)�� �)� 8@� ������ ���� ��-��)��

'��) 0 �� � ������� ��-������% ��� �)�� ��������� 0

������. �)�� �#���%��- �)� ��-��� �������� �����-� �� � �.

�!!!*�

3� )��� #��� ��� �� ��&������ #������ ��� �����"

-���� ����� ��������� �� �)� 0"��-������- ��)'�% ��

����% �)� �#������� �� 0 �� �)� ������� �� -���

��������� �����- ������#����� ����������� 3� �������

-��� ��������� �� ���. ���/ ��� ��� ����� �� �)�%

'��� �����-���- ����������. ��� ����� �)�� � ��#&�� ��

����������"��)����� -���� �)�'�� ������� ���������

�������� 7)�� '�� ����#����� &% � ����%�� %����'��-

��� ������� �������� �� �)� ����� ��������� �� 0

��-������-� 7)��� ������� �)�'. ��� �)� ,��� ��#�. �)�� �)�

0"��-������- ��)'�% )�� � ����. ��� ���% �� �������� ��

������. &�� ���� �� �)� ������� �� -��� ��������� �����-

������#����� �����������

3����

*, ������ ��� � ����� ��� �2������ �������

����� ��������

/�����. �����-���� ��� '���"�%� �A���#&��* ����� '���

-��'� �� � ���������� �������#��� '��) � ��) )���"

������ ����� �)��� ���������� ����� -��' �� � ������#

#������ ?� ��������. ����� -��'� �� �)� -����)����

����� � �;) )�������� �)�'�� � #��$�� ��������� ��

������#���� 7)������� ����� -��'� �� � ����������

�������#��� '��� ���� ��� �)��� �����#����� +���

#������� '�� )�������� �� �)��� ���-��� � �)� C����

#������#� ������� �� &���. �)� ������ ������� '��

)�������� ��� ����-����� #����� -���� �/5*� � �)��

���-� �� ������#��� �)��� '�� �� ����&�� ��-� ��

�)�������� 3��)�� �'��$� �� �)� /5 ���-�. �)� ��'��

������� ������ �� �)� '���"�%� ����� '��� �����"

#����% ��D �)�������. ��� �)��� �������% %����' ������

'��� )�������� ��� ����-����� ��������� ���-� � �0�*�

� �)� ��#� ��#�. �)� ���"�)�������. ����% �������

��� ������ �� �)� ��#� �������� '��� )�������� ��

��������� ���-� � �0�*� 7)� #������ ��� ��� ���/ ���

�)� �����-���� ��� ����� '��� ����%�� �� ����)��- �)�

�)������� ���-� ��� ����)�� � ��#���� ���-� �� ������"

#��� ���%� ����� ����� ��� �)�'�*� 7)�% '��� )��"

������ �� �)�� ���-� ��������- �� �)� �������� ��������

�&����

�E '�� �������� ���# ������ )�������� �� �)� �)���

���-�� �� ������#��� ��� ���)�� ���� �� E���)���

)%&����4����� ����%��� ���-��� �* �� ���� �� #�$� �@E

��� ������� E���)��� ����%��� ���-��� �*� 7)� ������������

������ �� �������"������� )����%��)���� -���� ��� ��#"

#���% ���� �� -��� ���������� ��� �)� ��-������� �� ����

���������� �6����� �� � �. �!!9*. ��� ��� �� �)� ��������

#�������� �)��-�� �)�� ��� &� �������� �� �)� �������

��������� �� -���� ���) �� �)�� �������- �)� �#���

;� (�� 3���� �� ���

� 2���$'��� 0������ +��. -�� � �� .��� � �� *. "2� ;��<; �

��&���� �� ��&���� ��� **� 7)�� -��� �)�'�� )�-) ������ ��

��������� �� �)� -���� ���� /5 ��#��� �� ��� ���� �� �)�

���� ����� ������. '��) � ���������&�� ��������� ��

��������� �� &��) ��������� ���� ��#���. 0� ��� 0�

���-��� �*�

7)� ��������� �� �� -���� ���) �� ����. ��� -����

�������- )%����%��� ��4%#�� ���) �� �)�������� ���

-��������� �����- ��)�-�� ��������. )�� &���

�)�'� �� &� ����� �)� ������� �� �)� 0 ��)'�%

������'�� &% F�����- ��� /���#%. �!!�*� ?� ��������. �'�

�� -���� �������- ���� ��� � ����� ?> �)������� �4* $/

��� 4* ))). ����������%* '��� ������,�� �� �)�'��-

��)����� ��������� �����- ���������� �� )����)%

�������� ������ �6�����% �� � �. �!!;*� ?� �-���#��� '��)

�)��� �&����������. '� ����� �)�� �)��� �'� -����

�)�'�� ��)����� ��������� �� ���������� �����������%

�)� 0� ���-�* �� �)� '���"�%� ������ 7)�� �������� ��

��������� '��. )�'����. ���������&�% ������� �� �)�

��� ��� ���/ #������. ��� ���������&�� �� �)� ���

����� ���-��� �*� 7)�������. �� �� ��)�-�� ��������. �)�

������� �� 0 �� ��1����� ��� ��������� �� �)��� ��

-���� �����- �����������

7)� *,��) -���. ������,�� �� ��&������ &% +�)#��

�� � � ��!!�*. ������� � �%������ �������� 7)� ���������

�� �)�� -��� ����� �� &� ������% ���$�� �� ���������� ���

�)������� ��� �� ��� ��������� &% #��% �� �)� ������

�����#���� �)�� ������ ��)�� ����������"��)�����

-���� �E�) ��� #�����. �!!!� 3����� �� � �. �!! *�

?���������-�%. �)� ��������� �� �)�� -��� �� )�-)�% ��������

&% �)� ������� �� �)� 0"��-������- ��)'�%� ��-��� �

�)�'� �)�� �)� ��������� �� *,��) '�� �����-�% �������

�� �)� 0� ���-� �� '���"�%� �����. &�� �)�� ��������� '��

���������&�% ������� �� �)� ���/ ��� ��� #������. ���

���������&�� �� �)� ��� ������ 7)������� �)� ������� ��

0 �� ��������- ������ �� ��������� ��� �)� ���#��

��������� �� �)� *,��) -����

4* #/ �� ����)�� ����������"��)����� -��� ')��) )��

&��� ������� �� ������ �2��� �� � �. �!! *� 7)�� -��� �������

� #�������)������. ��� ����%��� )�� �)�'� �)�� �)�

��������� �� �)�� -���. �� '��� �� &���- ������� �����-

����������. �� ���� ������� &% #��% ������ ���������� ���)

�� ��)�-�� ��������� ��� '������- �2��� �� � �. �!! * ���

=>"2 ������� �0� �"6�"/��$������. ���&���)�� �������*�

7)� ���� �� 0 �� ����������- -��� ��������� �����- �)���

�%�� �� ������ )�� &��� '��� ����� �� ������&�� �&����

6�'����. ��-��� � �)�'� �)�� ����������"��)�����

��������� �� 4* #/ �� ��� �������� �� �)� �'� #������ ��

�)� ��� ���� ')�� ��#���� �� '���"�%� ������

7)������� 4* #/ ��������� ����� �� &� ����������

�� �)� ������� �� 0 �����- �����������

���� �� E���)��� )%&����4����� ����%��� �)�'��- ��������� ������ ������������"��)����� -���� �� �E �������� ���# ������ ���# '���"�%�.0��� �����-���� �����. ��� ��� ���/ #������ �� �)��� ���-�� ��������#����/5. #����� -����� 0�. ����% ����������� 0�. #��"��������� �)�'��-��-�� �� %����'��-� � �- �E '�� �������� �� ���#����)%�� �-�����-���. &������ �� �%��� #�#&���� ��� )%&����4�� '��) 9�8"��&����� �@E���-#����� �� *. ��&����� &��)��)��� ���&��%���� �#��� ��&�����4* $/. ����� 4* ))). �)�������� *,��). �%������ �������� 4* #/.#�������)������� 4* /56. -����#��� �%��)������ 7)� ������� ��� ���)��&� ��� �)�'� �� 7�&�� �� :1��� ������- �� �E ��#��� '�����,�#�� &% ��)����# &��#��� �������-�

���� "� >������ E���)��� ����%��� �� -��� �����������@E '�� �%��)���4�� ���# � ��������� �� �)� �E ��#��� �����������# ������ ���# '��� �%�. 0��� �����-���� �����. ��� ��� ���/#������ �� ������&�� �� �)� ��-��� �� ��-��� �� 8A�"�#��,�� �@E�� �-*. #��� ���# '���"�%� /5. 0� ��� 0�. 0��� ��� ���. 0� ������/ 0� ��� /5 ���� �E ��#���. '�� �������� �� �� �-����� -��.&������ �� �%��� #�#&���� ��� )%&����4�� '��) 9�8"��&����� �@E���-#���� ����������- ��������� ����������"��)����� -����� 4* 7.�%������ �������� 4* "6. ��������� 4* 756. ������� �������� 4* ")5.�������� ��������- �������� 4* /�/. ��$��'� ������� 7)� ������� ������) ��&� ��� �)�'� �� 7�&�� �� :1��� ������- �� @E ��#��� '�����,�#�� &% ��)����# &��#��� �������-�

*, ��� � ��� �2������ ����� �������� ;�!

� 2���$'��� 0������ +��. -�� � �� .��� � �� *. "2� ;��<; �

�)��� �%� �� ��������� ������ �� �)�'� &% �)�

)%&����4����� ����%��� �� 4* /56 ')��) ������� � �����"

�����"��)����� �%������� -����#��� �%��)����� -���� 7)��

-��� �� ��� ��#�����% �������� �� 0 ��� ����������"

��)����� ���������. �� �� �������� �� ��������� ��

�������&�� �����- ���������� �� �)� #������ ��� ��)5

����� ���-��� �*� 6�'����. �)� ����� �� ��������� ��

���������&�� ������� �� �)��� 0 ��������� �����. ��-"

-�����- �)�� �)� 0 ��)'�% �� �#������ ��� #���#��

��������� �� 4* /56 �����- ����������� 7)�� ���������

������ �� ��������� ���# �)�� �)�'� &% 4* ))) ��� *,��).

')��� ��' ����� �� ��������� �� �)� #������ �� ��$��% �� &�

��� �� �)� ���$����� �� �)� #��������� ��� ���#��. 0

������ �� �)� ���/#����� ��� ������� &�� ��� �&���� �B)��

�� � �. �!! 89

7)� ��������� ����%��� '�� �������� �� ���#��� �

��#&�� �� ��)�� -���� �)�� '� )��� �)�'� �� &�

����������"��)����� �� �������� ���� �2��)����"

3��������. �!!�*� 3� ������� ��� �)��� �����#���� &%

G�������H E���)��� )%&����4�����. ����-#�#&����� ����%��-

�@E #��� ���# ���) �� �)� �E ��#��� ������&��

�&���� 7)��#��)�� ��������� �)� ����������% �� �)� ����%���.

����'��- �)� ��������� ������� �� -���� �������� �� ��'

������ �� &� �����% �������� �A������). 0#��� 8A� �@E $��.

���� #�����. A������) +�&��������� ?���. 8��� ���. A.

=0*� 7)� �����&����% �� �)�� #��)�� '�� ���,�#�� &%

)%&����4��- �)� #�#&����� '��) 4* #/ ��� 4* /56. ���

�)�� �������� �� �)� ��#� ��������� ������� �� �)��� ����

�� �)� E���)��� )%&����4����� ����%��� ����� ��� �)�'�*�

:�������� �� ������� ����������"��)����� -���� '��

���������� �� 0 ���-��� ��*� 4* 7 ������� � �%������

������� ��������� ���# �)�� ������� &% *,��)� 4* 756

������� �� ������� �������� ��� 4* "6 ������� �

��������� 7)��� -���� �)�'�� � ��#���� �������� �� �����"

���� �����- ���������� �� &��) �)� '���"�%� ����� ���

�)� ��������- ������ ���# �)� �)��� #����� �����

��,����� �� �)� 0"��-������- ��)'�%� 7)������� �)�

��������� �� �)��� -���� �����- ����������. ��$� �)�� ��

4* #/. �� ���������� �� 0�

?� ��������. ����������"��)����� ��������� �� �)� �'�

-���� 4* ")5 �� � �������� ��������- ��4%#�* ���

4* /�/ ��������- � ������� ��&������ ������ ��

��$��'� ��������* �� ���������� �� E8��. &�� )�� ��#�

��1����#��� ��� 8@� ��� 0 ���-��� �&*� ?� �)���

���������� )%&����4����� �����#����. �)� ���������

������ �� 4* ")5 ��� 4* /�/ '��� ����� �� &� �������

&% �����#����% � D �� �)� ���/ #������ ��� ���

�����. &�� ���������� �� �)� ��� #������ 7)������� �)���

�'� -���� #�% ��1���� �� 0"��������. E8��"������"

���� ��)'�% ��� ���� ��������� �����- ����������� ?� )��

&��� �)�'� ��������% �)�� ��� ��� 0"�������� ��"

������ ��� E8��"��������� ��� ���#��. �)� �%��)����

�� �)� ����#����&��� ��#���� ��#������ ��1����� 0 &��

��� E8�� �B)�� ��� +���. �!!;*�

������ � ��� �2������ �� *, ��������

7)� ������� �)�'� �� ��-���� � ��� � �)�' ������% �)��

������� ����������"��)����� -���� ��� �������� ��

�)� ������� �� 0 ��� #���#�� ���������� ?� ����� ��

�����#��� ')��)�� 0 �����#��� ����� ����� #�#�� �)�

������� �� ������#����� ����������. '� �������-����

�)� ��������� ������ �� �������� ����������"��)�����

-���� �� '���"�%� ����� ���%�� '��) 0� 6�����% �� � �

��!!;* �)�'�� �)�� ���%��- �������� ������ '��) 0

�������� �� ��)����� ��������� �� �)� ����������"

��)����� -���� 4* $/ ��� 4* ))). &�� �)��� '�� ��

�1�������� ��������� �� �)� 4* #/ -���� /��% ��)��

-���� )��� ���� �)�'� �)�� �� -���� ��� &� �������

&% ���%��- -����. )����)% ������ '��) 0 ���-� I������

�� � �. �!!!*�

3� ���� ����� �)�� ��������� �� �)� ���� �4* $/* -���

'�� �����-�% ������� �� -���� ������ ������� '��) 0

���-��� 9*� ?� ��������. �)� *,��) -��� �)�'�� ��

��������� �����'��- �)�� �����#���. ���������- �)�� �)�

��������� �� *,��) ������ &� �����% �������� �� 0�

��#� ��)�� ������. �&���� �� -���� ������ &�� ������ ��

��������� ������. �� ���� ��1������ 3� ���� ������ �)�

��������� �� 4* /56. �)� ����������"��)����� -��� �)��

�)�'�� ��#� 0 ��1����#��� ��� ���� ��������� �����-

���������� ���-��� �*� ?���������-�%. ��������� �� 4* /56

��%������� -����#��� �%��)�����* '�� ������� �� �)� 0"

������� ������� 7)������� 4* /56 ��������� �� ������� ��

�)� �&����� �� 0 &% ��#� ����������"����,� ������. ���

&��) �)�� ������ ��� 0 ��� ��&�&�% ������ ��� ����

��������� �����- �����������

���� 2� :������ �� 0 �����#��� �� -��� ��������������"'��$"��� ��&������ ����� '��� ���%�� '��) �#/ 0 �� '������ ��������� ����� �����#��� �; ��� 9 )* �)� ������� ������ '��� ���������.��� �E �������� ��� ���� �� E���)��� )%&����4����� '��) 9�8"��&������@E ���-#���� �� ��&�� ��� 4* $/ �����*. *,��) ��%������ �������*��� +0A�; �-����#��� �%��)�����*� :1��� ������- �� �E ��#��� '�����,�#�� &% ��)����# &��#��� �������-�

; (�� 3���� �� ���

� 2���$'��� 0������ +��. -�� � �� .��� � �� *. "2� ;��<; �

*, �+� � ����� ��� ��+� ����

7)� ������� ������&�� �&��� -��� � �����- ���������� �)��

�)��� �� � ���� ��� 0 �� ����������- �)� ��������� �� � �����

� ������� ��#&�� �� -���� �����- ���� ����������� 7)��

'���� �#�% �)�� 0 ������ �������� �����- ����������� 7�

���,�# �)�� )%��)����. '� #������� �)� ������ �� 0 ��

-���� ��� ��������� ���� ������ �� '���"�%� ������ 7)�

������� ���# �)�� ����%��� ��� �)�'� �� 7�&�� �. ���

�������� �)�� 0 ������ ��� ��-��,�����% )�-)�� �� ��������-

������ ���������- �����#����% �������� �� �)� 0� ���-��

, ����� ������ � �������� � � ��� �������+� � ���

*, �������

� '� )��� ������&��. ������� -���� ��� ������� ��

��������� ������ �����- ���������� �� ����� ���������

�� �)��� 0 ������� ��)'�%� 7)�������. �� '�� �� ��������

�� �������-��� ')��)�� �)�� �������� �� ��% �)��-�� ��

)����%� �����- ����������� 7)� ����� '��� -��'�

����� ��������� ���- ��%� ���)* ��� ������ ��������&��

���������� �� �)��� ���� )����%� '�� �&������ �����-

������#���� +����� )�������� ���# �)� ���� ����� �� �)�

/5. 0� ��� 0� ���-�� '��� ��#���� ���)��-). �� ������&��

�&���. �)� '���"�%� ����� �)�'�� ���-)��% ������� ��-�� ��

�)�������� 6�'����. �� �)� ����� �������� ����)��. �� ���-

�� �)�% ��#����� )����)% ��� ���� ���# ���������. � #��$��

���������� '�� ����. ����������% &��'��� �)� ���/ �����

��� �)� '��� �%� ��%���� ���#��� �)�'� �� ��-��� �*� ?�

'���"�%� �����. �� �)� ���� ������� �� �������. �)�������

&���#� ����&�� �� �)� ��-�� �� �)� ����. -�������% �����"

��- � �)� ����� 7)�� �)������� '�� �����% �����'�� &%

��������. �)� ��������- ������ ���#���% �%��- '��� &�����

�)� ������ ���� &���#� �)�������� ?� ��������. �)� ���/

#����� ����� �)�'�� ������# �)������� ���� �)� ������

���� ��#���. &�� ��-��-�&�� ��-�� �� ��������� 7)������� �)�

������ �� �)�� #������� ����� �� &� �� ����% �� ����

��)�&�� �������� �� �)� ��������- ������� 7)� )����%� ��

�)� ��� #����� ��� ��� ����� '�� ��� �� ������%

��������� ���# �)� '���"�%�. ���)��-) ��#���#�� �)� ���

#������ ���� �)�'�� ��#� ����% �� ���������

4�����

@����- �)� ��� ������ ��� $��'���-� �� �)� ������ �)��

����� �� �)� ��#��� ���� ���������� ������ )�� &���

������� &% �)� ������,������ �� ��#����� ����������"

��)����� -���� ���� �����'� ��� 2��)����"3��������.

�!!�� 5�� ��� #�����. �!!�*� 6�'����. ��� �����"

�������- �� �)� ��-���� ��� �)� �����������- ��-������-

��)'�%� �)�� -��� ���� �� �)� &���� �� ��������������

�������% �)�� ��$�� ���� �����- ���������� ��#���� �����%

����#�����%� /��% &����� ��� �&����� �������� ��� ��������

�)� ����� �� ����������. ��� ��#����� -���� �)�� ���

��##���% ������� �� ������� �� ������ ��� ���� �����"

��� �����- ����������� 7)�� ��������� �)�� �)��� ��� ��$��%

�� &� ��##�� ��)'�%� ������- �� -��� ���������

�����- ���������� ��� �� ������� �� ������ �2��� �� � �.

�!! � /����� �� � �. �!!!� 8������ �� � �. �!!!� ��� ��� @����.

�!!!*� 8�������� �����"���$ &��'��� ��-������- ��)'�%� ��

����� ��������% �����'�� &% 5����� ��� /������. �!!!*

��#��� �� �� ���#��� ����������"������� -��� �����"

���� �� '��� �)��������4�� #������ �� ��&������� ?� �)��

���. '� ������&� �)� ��� �� #����� ��� �����-���� �����

��������� �� �)� 0"��-������- ��)'�% �� �)�' �)�� 0 �� �

��-������- #������� ���� &% �)� ���� �� �������� �)�

��������� �� � ��&��� �� -���� �����- ���� �����������

2��) �,�/ ��� 0��� ��� �#������� �� ��-������% -����

�������� �� ����������- -��� ��������� �����- ����

�����������

3� ������ � #���� ���-��� �* �� ')��) '� ������ �)�

������� �� �� ����� �)��� ����������"��)����� �������

�0:�* ����������- -��� ��������� �� ��������- �������

7)��� ������� #�% &� ����������"����,�. �-�"�������

������� ���* �6����� �� � �. �!!9*. �� #�% ���� ����� ��

��)�� ��#�� �� ������#��� �� �� ������� �� ������� 7)�

��������� �� *,��) �� �������� �� �� ����� ��� ��

�E�) ��� #�����. �!!!* ��� '� )��� ��' �)�'� �)�� 0

�� ����)�� 0:�. ')��) �� ��� ����������"����,�. �)�� ��

��)�� �� A)��-�� �� 0 ������ �����- ����������� ��&������'�� )�������� �� �)��� ���-�� �� ������#���. /5. 0� ��� 0��0 ������ '��� �����#���� ���# �)� ������ ��� �������� ���)� &���� �� ����) '��-)�� >����� ��� &���� �� �)��� �� ,������������ ��#���. ��� ��� �)�'� �0:

@�����#����� ���-� 0 ����� ��- -<� �3*

/5 �� � ��0� � ;� �!0� �!�� ��;

���� 5� 8)����%� �� �%���� '���"�%� ��� ���/ #����� ����� �� ���������������8����� '��� -��'� �� � ���������� �������#��� ��� ��'��$�� 0������������ ������ �� �)� '���"�%� ����� �)�'�� ���� �������� ���� �����%����'��-. ')��� �� �)� ���/ #����� ����� �)� %����'��- ��������#����� �����������% ����� ��� �)�'�� ��' ��-�� �� ���������A����1�����%. �)� �������� �� �)� ���/ ����� '�� ������% ������������# �)� '��� �%��

*, ��� � ��� �2������ ����� �������� ; �

� 2���$'��� 0������ +��. -�� � �� .��� � �� *. "2� ;��<; �

��1����� ��� ��������� �� *,��) �����- ����������� 7)�

0"������� ��������� �� �)� �'� �� -���� 4* $/ �����*

��� 4* ))) ��)�������* �����- ���������� �� ��$��% �� &�

���������� �� ��% ���������� 0:�. �� �)��� -���� ���

�������� �� 0"������� -���� ������� 7)� ���������

��������� �� ���� �4* $/* �� ��������- ������ �� #�����

')�� ��#���� '��) �)� ������ ��������% ������� ��� �)��

-��� �� ������� �� ��)�-��� �� =>"2. �� �� ������

���%�� '��) 0 �6�����% �� � �. �!!;� 0�##��#����� �� � �.

�!!�� 0����� �� � �. �!! � 3��� �� � �. �!!�*� 7)�� ����������

'��) �)� ���������% �#��� �������� �� 0 �)�� '� �������� ��

��������- ������ �7�&�� �* �� ��#���� �� ������ ��"

������% ������� �� ������� �� ������ �0)��#� �� � �. �!!;�

0����� �� � �. �!! � =$��� �� � �. �!!9*� I������ �� � � ��!!!*

������� �)�� �� ��������� '�� ��� �������� �����-

���������� �� ��� �����-���� ������ 7)�� �������������

����� &� ��� �� ����������� �� �)� �� -���� ���� �� �)� �'�

�������� �� �� ����&�� �)�� ��#� �� -���� �)�' � ���������

��������� ��� 0 �����- ����������� �����������%. �)���

#�% &� � ����� �� 0"���������� ��������� �� �)���

-���� �� ��#� ��#� �����- ���������� �)�� '�� ���

�������� �� ��� �����#�����

7)� ����������"��)����� ��������� �� ������� ��)��

-���� '�� ���% ����% �������� �� �)� ������� �� 0�

4* /56 �-����#��� �%��)�����* �)�'�� ������� ������ ��

��������� �� &��) �)� ���/ ��� ��� #������ ��� ��

0��� ������ ?� ��������. ����������"��)����� �����"

���� �� 4* ")5 ��!�%* ��� 4* /�/ ���$��'� ������* ���

��� ������� �)� E8�� ������� ������ ������� &% F����)���

�� � � ��!!!* )��� �)�'� �)�� ��������� �� �)�� �!�% -���

�� ������� �� ������ ���%�� '��) 0� 7)������� ���������

�� �)�� -���. ��� ���� 4* /56. �����- ���������� ��

�������% �������� �� 0 ��� �������% �������� ��

��#� ��)�� 0:� ���-��� �*� ������%. �)� ��������� ��

������� ��)�� -���� ���-� 4* #/* ���� ��� ����� �� ���)��

�� �� 0. ��� �)������� ��� �� #��� ��������� 0:�� #���

������� ��������� �� �)��� -���� �����- ����������

���-��� �*�

8����� ��������� �� 0 ��-������- ��� �)�' ��#� ��&���

����������� �� �)��� ���� �� �)������� ��� �������� �����-

����������� 6�'����. �)� #������ ��� �)� ��� �����

���������� � ��#���� ���� &��) �� �)� �� * ���������

���-��� �* ��� �� ������ ������ ����� ��� �)�'�* �� �)��

�)�'� &% '���"�%� �����. ���������- �)�� #��% �����"

����� �������� '��� ��������- ���#���%� 7)� %����'��-

)����%� �� �)� ���/ #����� ����� �����- ���� �����"

����� ���-��� �* ���� �#���� �)�� �)� ���������� ������

������ �� ��� �������� �� �)��� ������

6�'����. �)� 0"��-������- ��)'�% �&������% )�� �

���� �� ��-������- �)� ��������� �� ������� -���� �����-

���������� ��� �)� 1������� ��#����J ')�� �� �)�

�������� �� �)��� -����K :�������� �� �� -���� �����-

���������� �� ��&�&�% �#������ �� ������ ��������-

������ ���# �������� &% ����������� ��)�-���. &��)

�� #������� ���&����% �� �)� ��������- ���� ����� #�&���4�"

���� �� ��#����. ��� ���� �� ������ ��������� �� �)�

���� �� �)� ����� *,��) ������� � �%������ �������

���. ����������- �)� #������ #�&���4����� �� ������

�)�� ������ �����- ���� ����������. �� #�-)� &� �������

�)�� �)�� ��4%#� )�� � ���� �� ������ ��-�������� ����

�� #�&���4������ 6�'����. �)� ���� ��������� �� �)�

*,��) -��� �����- ����������. ��-��)�� '��) �)�

�������% ���#�� �)����)%�� ��� ������ ��-��������

�)�� ������ �� �)� #������ �)�� �)�' ������� *,��)

���������. #�% �#�% �)�� �)�� ������� ���� ��� )���

� #�&���4����� ����� ?� ����. �)� ���"�������� )����%�

�� �)� ���/ #����� ����� ���-��� �* #�% ����� � ����

��� �)� 05�� ������ �� �)� ���������� ���# ����������

�� ��������� 05�� #�% ��$� ��� �� � ��-������%

��)'�% ������- �� ��-��##�� ���� ����). ��#���� ��

�)�� ������ ��� ������� �����- ������� �8������

�� � �. �!!!� ��� 8�4� ��� +�#. �!! *�

���� 6� /���� �������- ��-������- ��)'�%� ������- �� -��� ��������������- ���� �����������0���������"��)����� ��-������- ������� ��� ���������� &% -��% &�����0���� ����'� �������� �� �&������ ��������� �� �)� ������ �������������"��)����� -��� ���������� &��$�� ����'� � ���������������� 3)�� �)� ����� �� ���������� �� �������. '� ����� �)��� ��#&�� �� ��������� ��-������- ������� ����������� ��)����� �������.0:��* )��� � ���� �� ����������- ��������� ���� �� -���� �)�� ��-��)�������� ��4%#�� �)�� ����% ��� �)� ���������� ������� 7)��� 0:�� ���&� ��&�������� ?� �)�� ��� '� )��� �)�'� �)�� 0 �� � ��-������- ��������������� ��� �)� ��������� �� ������� ����������"��)����� -����. ��#��� ')��) �4* $/ ��� 4* )))* ��� ��&�&�% ���������� �� ��% ��)���������� *,��) ��1����� 0. ��� '� )%��)���4� �)�� �)��� �� ��������)�� ������ ')��) �� �-�" �� ����������"����,� ��-� ������� ������.��*� 7)�� �� �� ������ ���% �� ��������- ������� L�)�� -���� ������������� �� 0 ��� ��� ���� �������� �� ������� �)�� ��� �������������% ��������� ���-� 4* #/*� ?������ ��������� �� �)��� -���������- ���������� ��1����� �)� ������� �� �� ����� ��� ��)��)%��)������ 0:��

; � (�� 3���� �� ���

� 2���$'��� 0������ +��. -�� � �� .��� � �� *. "2� ;��<; �

7)� ������� �������� �&������ �� �)� ���/ #�����

����� �� ���� ���������� )�� ���������. ��� �)� ,��� ��#�.

�)�� �)��� #�% &� � -���������% ���������� �'���) ��-����"

��- �)� ���������� ���# ���������� �� ��-��##�� ����

����) �8A@*� ?� �� ��$��% �)�� ��������- ������ ��� #���"

������ �� � ���&�� ����� ����� ��,����� �����#����� ��

��������� )�� ��������. ��� �)�� ���������� ����� ���

������%�� &% 8A@� ?� �)� ���/ #�����. �)� ��������-

������ �� ��� ����� �)�� ��-��##�� ���� ����) ��)'�%�

7)�� ������ �#������� � ��-������- ��)'�% ��������- 8@�

��� 0 �� �)� ����������- #��)����# ��� �)� 8A@ �)��

������ �� �)� ,��� ���-� �� ����������� 6�'����. �)�

�������� )����%� ���� '��) �)� ��������- ���

����� '���� ���������� �)�� )%��)���� ����� 0 ��

��#�����% �&���� �� �)��� ������ 7)�� �������������

#�% &� �������� &% �)� ������� �� ��� ��� @���� ��!!!*.

')� �)�'�� �)�� �)� �������� ��)�&���� &% �4���"�������

��� ����� '�� ��� �� � �������% ��#��#���� ����"

������� ������� �� �)��� ������ 7)� ��������- ������ ��

�)� ��� ����� #�% &� �������- �������� ��� &% �� 0"

���������� 8A@ ��)'�%. &�� ���)�� &% ����������"

��)����� ��������� ��#�-� ')��) �� ������������ ��� ��

� ��,�����% �� ������������� 7)� ����� �� 0 �� ��������

���/ #����� ����� '�� �������. &�� ��� �&���� �B)��

�� � �. �!! *. ��� �)��� ���)��� ��������� ����������

��)'�%� ������- �� 0 ����#�������� 7)�� �)��� #�%

&� ���,����� 0 �� �)� ��� #����� �� #������� ������ ��

������������ ���,������% �� ������ �)� ��������- ����

����� ���# ��#����� ����)�

?� �)�� ��� '� )��� �)�'� �)�� �)� 0"��-������-

��)'�% )�� � ���� �� ����������- �)� ��������� �� �������

-���� �����- ����������� ?� ��������. �� )�� &���#�

�&����� �)�� ������� -���� ��� �������% ��-������ &% 0.

��� ���� �������% ��-������ &% ��#� ���������� ������

������ �� ��������- ������� 7)�� ���������� ���������% ��

�����"���$��- ��-������- ��)'�%� #�%. �� ���. ������

')% ��' �����#����� ���������� #������ )��� &���

������,�� �� ��&������� /��% �� �)� -���� ��������

�����- ���������� #�% ��1���� � ��#&������� �� ��)"

'�%� ��� #���#�� ���������. ��� ��#���� �� � ���-��

��)'�% '��� ����� ��� )��� �� �&����� ������� 7)������� ��

#�% &� ��������% �� $���$ ��� #��� �)�� ��� ��-������-

��)'�% �� #�$� � ��-��,���� ���������� �� �)� ����������

������ �������

7����'� ��� �������

� �� �����

,��������� ��� ��� ��������� A���#&��. �)� #������ ���9� ������/9� ��&������ ���# @� M� @��- ��� @� �� 5��4�&���$.����������%* ��� �)� 0��� �����-���� ����. ��������- &�������������%���� )%����%���� �� � A��" &��$-����� ��&������ ���#E������� -��&������� 2�����)����-% �������). EA. =0*. '���-��'� �� #������% ��� )�������� �� ���������� 0���� '��� -��'��� -��'�) �)�#&��� �� ��N�;�A ���%N��-)�* ��#������� ���9 3#<� �<� '��) � ��) )��������� +�'�� ������� ������ '���)�������� ���# ����% ������� ����� �)�� '��� �&��� �� &����/5*� 0�������� ���-�� '��� )�������� ���# ����� �� ���� C�'��N

��)�� "� 5���� ���� �� )%&����4����� �����#����

0����� �� @E ��������� �������- ����������"5��� ��#� 8������ ������� ���� �� ��&� ��)����� ���������

�� * ��&����� &��)��)��� ���&��%����.�#��� 0=

��&������ :07 ������7 9!;�*

4* $/ 8��� ��&������ �@E �������)�� ���*

6�����% �� � � ��!!;*

4* ))) A)������� ��&������ �@E �������)�� ���*

6�����% �� � � ��!!;*

*,��) A%������ ������� �������� ���� �@E �������)�� ���*

+�)#�� �� � � ��!!�*

4* #/ /�������)������ ��&������ �@E �������)�� ���*

2��)����"3�������� ��!!�*

4* 7 A%������ ������� ��&������ �@E �������)�� ���*

2��)����"3�������� ��!!�*

4* "6 �������� ��&������ :07 ������ � 7�*

2��)����"3�������� ��� ���'���) ��!!�*

4* 756 ������ ������� ��&������ :07 ���������E�7�*

2��)����"3�������� ��� ���'���) ��!!�*

4* /56 5����#��� �%��)����� ��&������ :07 ������:�5��7�*

2��)����"3�������� ��� ���'���) ��!!�*

4* ")5 � �������� ��������- ��4%#� ��&������ :07 ������! +� 7�*

7)�� ���

4* /�/ =�$��'� ������ ��#���� �� )%��)��������&������ ������

�9 ���� �@E ����� 7)�� ���

*, ��� � ��� �2������ ����� �������� ; 9

� 2���$'��� 0������ +��. -�� � �� .��� � �� *. "2� ;��<; �

����1�� ������#��� ')�� �)� ��'�� ������ '��� �)�'��- �)�,��� ��-�� �� ��������� 7)� ����% ������� ��� ������� ������'��� )�������� �� ��������� ���-� � �0�*. ')���� �)� ��'�� ������������� '��� )�������� �� ��������� ���-� � �0�*���� �)� �����#��� '��) 0. �"'��$"��� ��&������ ����� '���

���%�� '��) ���)�� 0 �� �#/ �� '���� ����� �)� �������� ��� ����)� ������� +����� '��� �)�� )�������� ����� ; ��� 9 ). ���4�� ����1��� �����-��. ��� ���� ��� �E ��������� �����'�� &% E���)�������%����

0����� �� ����

E���)��� ����%��� '�� ������� ��� �� ������&�� ��������%�2��)����"3�������� ��� ���'���). �!!�*� >������ E���)�������%��� '�� ������� ����- �@E �%��)���4�� '��) �)�0#����@E $�� �A������)*. ��� �@E '�� ��-����� '��) 3������ 3��� ��� ���$��� ������ 7)� ��-����� �@E '�� �)�� 8A��#��,��. ��� � �)��� �������� �� �� �-����� -��. �)�� &������ ���%��� #�#&����� 6%&����4����� '�� ������� ��� �� �&���� 7)�-���� �)�'� �� 7�&�� � '��� ���� �� ��&��. ��&����� '��) 9�8����- �)� 6%����#� $�� �2������. +�����. =F*� /��% �����"�����"��)����� -���� )��� &��� �������� �� �@E ������ �� �9���� �2��)����"3��������. �!!�� 2��)����"3��������. �!!��2��)����"3�������� ��� ���'���). �!!�� 6�����% �� � �. �!!;*�3� )��� ������,�� �)� ��&������ )�#���-��� ��� #��� ���)���. ���)�� �� �@E ������ ���# ��� �'� ��&���% �� �� :07������ ���# �)� ��&������ 0���$ A����� �� L)��� 05�� �� ����&������ -��� ������,�� &% +�)#�� �� � � ��!!�*� '� ������,���)� �9 ���� �1�������� �� �)�� �� � ������������ �������

3��������� � �� ��� �� ����

7)�� '�� ������� ��� �� ������&�� &% 0����� �� � � ��!! *�

��� �,�����'� �

7)�� '��$ '�� ������ &% �)� =F 2�����)����-% ��� 2����-����0������� �������) A������� 3� '���� ��$� �� �)��$ �)� ��&�"����� 2����-���� �������� A�����. L)�� 0���� =��������% ����������- :07 ������� 3� �)��$ @� M� @��- ��� �)� #����� ���9�.@� �� 5��4�&���$ ��� ���/9�. ��� E������� A��������� ����������- �)� ��� ��&������ ����� 3� ���� �)��$ ��# 2�%������ :��� 6���& ��� �������� ������- �� �)� #���������

3���� ��

����������� �� ��� !��� � $�3� � � ���'�� $� ��!!�* =>"2������� �� �)� ��������� �� -���� �������- ������� ���������� )����%��)����� ?� � ��� �� '!1�: ������� �%+������ ���� �+�#����. 8���. ���*� A�#&���-�JA�#&���-� =��������% 8����. � ��9<�9��

$���� � �%������ � #� ��!!�* ?�������� �� �@E ������ ��� -�����)�� ��� �������� �����- ���� ���������� �� �������� ����9� �� ����� 9 �86. 9!< �;�

$���� � �%������ � #� ��!!�* 7)� #�������� &����-% �� ��������������� .9 %2�9 ��9 59. � �<�!!�

$���� � �%������ � #� � � �� ,���� �� ��!!�* +������������� �� �������� ����J ������- �� ���������� �������-���� &% ��&�������� )%&����������� � �� 3 9 �� 9 22. ��< 9��

$���� ��� ������� ��� ���� ��� $�� � � !�� �� � ��� ����)� 7��:�� )��� !��� � � $���� � �%������ � #� ��!! * @�����������

��������� �� � ����������"��)����� #�������)������ -��� ��,��������� �� ������� �� �������� �� ������� ������������� �������� �������9 � �� .9 �;. � !<����

���� ��� $�,�� �� ����� :��� � �� � � 4� �� <� ��!!�*A)�������������� �� �� ,��������� #����� �)�� �������������� �� �������� �� �%���#�� ��1����� ������������ �� � 9 ;. �� 9<��!��

���� ��� :��=�)���� !�� ������ !�4�� #����� �� � � 4� �� <� ��!!�*7)� ,��������� 0��� -��� �)�� �������� �%���#�� ��1��������������� ������� � ����� ������ ���������- ��$%��� ������� � . 99. ��<;9�

4���� ��� 4�(� �� ��� :��=�� ��� (��� 7� � � �)��� ��3� �� *7)� ��&������ E8��NE?/� ������ ��)����� �)� @E &�����-�������% �� � ��&-��� �� �)� 75 ��#��% �� &B?8 �������������������� � �� � . �". ��!<�! �

����� >� � � ����� �� ��!!�* E����-��"#���&����# �� ��������-������� ���9 ��+9 � �� *��9 �2. ���<��9�

:��� ��� ��� ������� (�� #� ���?� $�� @������� 4�� @��� :��>� �� ��� %��� 7�� ��'� � �� � � 3���� !� ��!!9*��1����#��� �� �����%��� ���� ��� �)� ��������� �� �%���#����1����� ����������� *�����. ";�. ���<��;�

:� � �� � � �'�� �� 3��� ��!!�* ?�)�&����� �� ���� ���������� &%������-������ ��������� �� �%��$����� *�����. "A8. �!;;<�!;��

:� � �� � � �'�� �� 3� ��!!�* /�$��- ����� �� ����������� � ������� 9 ��2. 9�9<9�!�

:� ���� �� � � ������� !���� ��!!!* A�������$ �� ���� ������-������-J ��������� ��� �������� �� �)� -������ ���'��$�-���� � �� *��9 5. � 9<� ��

:��=�)���� !� ��!!!* 5���� ����������- ��������� �� ��������������� �� ,���������� ��9 ;�9 � �� �� 9 ". � <� ;�

:��=�)���� !�� B���� ��� ���� �� ���� � +�� 3���� 7�7�� �����+�3�� ����)� 7�$�� ��''���'���� 3� � � ���)��� ��� ��!!�*8)%��������"��,����� #������ �� ,��������� ������ �)�� �,�/������� � ��-������% ������ ��� �)�� ���� �,� -���� ������&����� ��'�% #����' ����������� �������. �5;. 9 �<9!��

:)��� #� � � $������� ��$� ��!!�* :�)%���� ��-������ �)� ��#��-�� ���� ���������� �� ��&������� � �� .9 9. �!�<; ��

�� ���� ��� ���� �� � � $���� � �%������ � #� ��!!;* +������������� �� �������� ����J ��������� �� -���� �������-��)�-������"������� �������� � �� 3 9 �� 9 28. �!�<; !�

�� ��� (�(�� :)��� #�� $��'���� � 4��� � � $������� ��$� ��!!9*@�����#����� ��� �-�"������� �������� �)�� ��C����� �)����-����% ��� ���������� �� )����%��)���� ������� ����&������� � �� � . 6. ��9<�;��

!� � � ������� :�)�� #� � � :�� )��� $��� ��!! * 6�-)������� ��� =>"2 ���������J &�������- ��#�-�. ����� ��������#������ -���� � �� *��9 2. �9�<�9��

!����� 4�� ������� ��(�� 3��)�� ��(�� ��� (�@�� ��� $�!�� �����!�7�� ���)��� ��� � � :��=�)���� !� ��!!!* ,������������ ��� �,�/ ������� � �����"��$� -��� �)�� �� �#������ ��������%���� ���� ��-������-� ���9 0�� ,���9 *��9 '*,9 C;. �9� 9<�9� �

�� ������ ��� D�'���� ��� ����,�� @�� �� ��� ��� @���'��� ��

� � ����@���'��� +� ��!!!* >������� ��������- ��4%#� �����-������ �� �)� �%��� �������� �� ��-������� ������� �����-���������� ��� ����� ������� ������ ����������� � �� .9 �C.�9<�9�

������ 4� � � � ����'�� !� ��!!�* 7)� �����%��� ���� ��-��� �������� � �� 3 9 �� 9 A". ���<����

(��'� � ��@�� :� � ��� !�� � ���� � � �'�� �� 3��� ��!!�*

/�������� ����%��� �� ������� ���� ���������� �� ,���������

��� ���� ����� 9 � ��9 C". 9��<9� �������� �� ��!!�* A)�������� ����������� ?� �� �����������:

; � (�� 3���� �� ���

� 2���$'��� 0������ +��. -�� � �� .��� � �� *. "2� ;��<; �

*����� �� -����� ���������� �2�$��. E� ��� 7)�#��. 6�.���*� #������#J :������� 0������. � ��9<�� �

������,� 3� ��!!�* @������ �%#��#� ��� ������� ��#���&����#� ?� � �� !�� ��� 9�� ���� +�����J ����#��8����. � 9 <����

������ !�4�� ������ 3�@� � � ����� 7�!� ��!!!* 0���������"���������� -��� ��������� �����- �4���"������� �������������� �� ,���������� � �� ����� 9 �"8. � ��<� �9�

����� !� � � 4� ��� !� ��!!�* 7)� )%����������� ������� ����)� ��������� �� ���� ����) �� ������ � ����� ����9 5. ;��<; 9�

@��� D���� � � �'�� �� 3� ��!!!* ?�����,������ �� � ��#������-��� �������&�� ��� �)� ����������"����,� ��������� ��*���)9 � �� 3 9 �� 9 5�. � �<�!��

����� 7�!�� ������ ������ ��4� � � ������ 3�@� ��!!�* L4���"������� ��������� ������J #��)����#� �� ������ ��� �������������� 9 � ��9 �88. �;�<��9�

����� � ��� $��� � ��(�� $��=��� � ��� ��'���� � ��!� � �:��� � 4� ��!!9* ������ ����� ������- ��� ���� ������������ ��#����� ��������- �� ��������� ��)%����"���#��- ��4%#������-���� � �� .9 2. �;!<� ��

�� ���� 4�� :� � ��� �'�� �� 3���� 3�)�� 4� � � (�'� 7� ��!!!*/��$��� ��� )%����������� ������� ��� ���������� �)�'�������� ������� �� ���������� � �� 3 9 �� 9 2C. ���9<�����

��� ��=�� E� � � (�'� 7� ��!! * A������ ��� ��-��##�� ��������) �� �)� )%����������� ������� �� ����� �� ��)�-���� ����� �� 9 9. ���!<��9��

F��� �� $�� @�'� ��� !� � � �'�� �� 3� ��!!!* @������ ���-� ��-��� �������% �����- ,��������� ��� ��� ���� ������������������ ��)�-�� ���������� ��������� �� ������� �������-����� � �� 3 9 �� 9 58. �;�<�� �

3��� ��#�� ��4�*�� ��3� ��!!!* L4���"������� ���� ����) ��� �'��������� #��)����#� �� ,���������J �)� ���� �� �����%��� ������ �� .9 �A. ; 9<;���

���'�� D��� � � 4�*�� ��3� ��!!�* 7)� ������� �� �4��� ������������� �������� �� ������ &��� ���9 �� 9 3��9 "2. � <� �

���'�� D���� (�� � !�� 3��� � +� � � 4�*�� ��3� ��!!;* L4���"������� �������� �� ,��������� ��� ���J �)� ���� �� �����%���

���� �� �)� ����#������� �� �������"������� ���������� ���������� ����������� ���9 0�� ,���9 *��9 '*,9 C2. � !!<�� ��

�'��� ���� ��!!�* 5��� ��������� �����- ���� ����������� 0������ 9 �";. ��!<�� �

��''�'����� ��� ���,��� ��� ��G ���� %� � � ��H ����� !�����!!�* 0����%��� ���� ������ �� ,��������� ��� ��� ����������#��� '��) �������� ������� �� �%��)���� ���������,��� ���9 29�. 9;�<9� �

������ ��(�� !��� � $�3�� ������ ����� ��� !���� ���'�� $�� � ����������� �� �� ��!! * =>"2 ������� �������� ��,��������� ��� ���J ���� �� �����%��� ���� ��� �L0 �� �)���-������� �� ���������� �������- )����%��)���� ��� ������ 8��������� � ��� � %+��9 "�. ; �<;!��

>� �� ��� %� ��� ����� 4��� ��� �� �� ��� ��!!9* 2����-������������� �� �%���#�� ��1����� ���������� �� ,���������� 3 9� ��<3����� �������9 ;. ;!�<;! �

%��� 7�3�� >� �� ��!�� %�����'� ����� 4� ���� ����� %���������4�(�� ����� ��� 4���� ����:��� ��� ������� !���� � � 3���� !�����!!�* A�"�������� -��� �������% �� ������� �� �-���� �)�������� �%���#�� ��1����� ����������� � �� � . 2. � �<� !��

%��*�� (���� :� � ��� F��� �� $� � � �'�� �� 3��� ��!! * ��#������ �� �)� ��������� ������� �� ������� �������������������� -���� �� ������� �� ������ ��� )��#��� �����#����� �� 3 9 �� 9 2A. ���<�;!�

B�� �� D�� � � %�� �� ��'�� ��� (�� <� � � 4� �� <� ��!!!*?���������� �� E8�� '��) &���� ������� 4��� ������������������� �)�� &��� ��1������ ��1����� ��� �����%��� ���� ����������� �)� ��1� -���� ���9 0�� ,���9 *��9 '*,9 C;. ;��9<;�� �

B���� !� � � (��� 3�(� ��!!;* A��������� ��-������� �� �)���%��)�� &���%��)���� ��)'�% ��� ������� )%������������#������� �� ��&������� � �� � . 9. ��9�<�����

B���� !����� ����� D�� ���*�� ��� �� ���� 4�� (�'� 7�� ����� !� � ������� 4� � �� * E8�� �������������% ��������� '��) #�#&����� �)� 75NL2� ��#��% �� ������������ ������� �)�� &��� �����#��� �� �)� ��1� -��� ��1����� ��� ��������� &% �����%�������� 3 9 � ��<3����� �������9 �2. �!�<� ��

B���� @�� ������� ��(�� ���� �� ������ 4� � � � :��=�)���� !���!! * 8@� ��������� ������# ���# �����%��� ���� �� �������������� �������� �� ,���������� � �� � 9 �8. � ��<� 9 �

*, ��� � ��� �2������ ����� �������� ; �

� 2���$'��� 0������ +��. -�� � �� .��� � �� *. "2� ;��<; �