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Headquarters - Siège social: Langdorpsesteenweg 160 • 3201 Langdorp • Belgium • www.diagnostics.be

Factory - Fabrique: Industriepark 36 • Zone B5 • 2235 Hulshout • Belgium • Tel: ++ 32 15 67 67 68 • e-mail: [email protected]

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Instrucciones de uso Bioquímica

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Actualización 05/07/2018

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En este momento no disponemos de todas las traducciones. Por favor, consulte las instrucciones de uso en inglés si es el caso.

Cypress Diagnostics: Langdorpsesteenweg 160 • 3201 Langdorp • Belgium

www.diagnostics.be • Tel: ++ 32 15 67 67 68 • e-mail: [email protected]

-Amilasa Test cinético colorimétrico Con CNPG3. Ref. HBE03 20 x 2 ml,

Almacenar a 2-8°C. Líquido.

Significado clínico La -amilasa es una enzima que facilita la digestión del glucógeno y el almidón, producida principalmente en el páncreas exocrino y las glándulas salivares. La determinación de esta enzima se realiza principalmente para el diagnóstico o el seguimiento de enfermedades pancreáticas como las pancreatitis aguda y crónica. Esta actividad enzimática refleja también la presencia de enfermedades biliares o gastrointestinales y otras patologías. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La determinación cinética colorimétrica de la actividad α-amilasa es llevada a cabo como indica la reacción siguiente:

-amilasa 10 CNPG3 9 CNP + 1 CNPG2 +G3 + G La α-amilasa hidroliza el 2-cloro-4-nitrofenil-α-D-maltotriósido (CNPG3) a 2-cloro-4-nitrofenilo (CNP), 2-cloro-4-nitrofenol-α-D-maltósido (CNPG2), maltotriosa (G3) y glucosa (G). La tasa de formación de CNP puede ser detectada espectrofotométricamente a 405 nm para medir directamente la actividad α-amilasa en la muestra. Dicha reacción no es inhibida por factores endógenos.

Composición de los reactivos

Reactivo

Buffer MES pH 6.0 ...................................................... 100 mmol/lCNPG3 ......................................................................... 2.25 mmol/l Cloruro de sodio ....................................................... 350 mmol/l Acetato de calcio ............................................................ 6 mmol/l Tiocianato de potasio ............................................... 900 mmol/l Azida de sodio .................................................................. 0.95 g/l

Únicamente para uso diagnóstico in vitro.

Preparación El reactivo está listo para su uso.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes de este kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan firmemente cerrados, al abrigo de la luz y se previenen contaminaciones durante su uso. El reactivo es estable 60 días tras su apertura si es cerrado apropiadamente tras su uso y se almacena a 2-8°C inmediatamente tras su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 405nm es ≥ 0,40, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 405 nm - Baño termostático a 37°C (nota 1) - Cubetas de 1,0 cm de camino óptico - Equipamiento habitual de laboratorio

Muestras - Suero o plasma, separado de la fracción celular lo antes posible. Se

recomienda el uso de heparina como anticoagulante. - Orina: ajustar el pH a 7,0 aproximadamente antes de almacenar la muestra. Estabilidad de la actividad enzimática: 1 mes a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 405nm. Temperatura: 37°C. Cubetas de 1 cm de camino

óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Suero o plasma Orina Reactivo Muestra

1,0 ml 20 μl

1,0 ml 10 μl

Mezclar bien e incubar durante 2 minutos a 37°C. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto ( abs/min).

Cálculo Actividad α-amilasa (U/l)

= Abs/min x 3954 para muestras de suero o plasma = Abs/min x 7908 para muestras de orina

Una unidad internacional (UI) representa la cantidad de enzima necesaria para procesar 1 μmol de sustrato por minuto en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro de muestra (U/l).

Factor de conversión: U/L x 0,01667 = μkat/L

Control de calidad Se recomienda el uso de sueros de control para verificar la validez del ensayo. Si los valores de los controles no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores de los controles no se incluyen dentro de los rangos establecidos. Sueros humanos de control para valores normales y patológicos están disponibles (HBC01, HBC02).

Valores de referencia Suero o plasmaOrina

<90 U/l <450 U/l

Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 0.2439 U/l (límite de detección) a 2200 U/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 2200 U/l, diluir la muestra 1:2 con solución salina, repetir la determinación, y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (U/l) 77 194 77.2 197

SD 1.12 2.22 1.08 2.96CV (%) 1.45 1.15 1.39 1.50

Sensibilidad: 1 U/l = 0.00025 A/min Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Procesos de hemólisis interfieren en los resultados obtenidos. Una lista de drogas y otras sustancias interferencias con la determinación de α-amilasa ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. La actividad de la enzima α-amilasa depende de la temperatura. Los ensayos

realizados a temperaturas diferentes de 37°C mostrarán por consiguiente actividades incrementadas o reducidas.

2. La saliva y el sudor contienen -amilasa. Para reducir la posibilidad de contaminación de la muestra con estas sustancias, evitar pipetear con la boca y evitar el contacto del reactive y los materiales utilizados con la piel.

3. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics (CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos que utilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puede descargarse las fichas de automatización de nuestra página web (www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía Ying Foo et al. Clin Chim 272, 1998: 137-147. McNeely M. Amylase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1112-1116 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 05. 2015



Fosfatasa ácida (ACP) Test cinético colorimétrico. -Naftilfosfato. Hillmann

Ref. HBE01 18 x 2 ml

Almacenar a 2-8°C.

Significado clínico La actividad fosfatasa ácida está ampliamente distribuida en el organismo, y es secretada por la próstata en humanos. Elevados niveles de fosfatasa ácida no prostática se observan en pacientes con la enfermedad de Paget, hiperparatiroidismo con afectación ósea, y en neoplasias invasivas del tejido óseo. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La actividad fosfatasa ácida de la muestra es determinada de acuerdo al método de Hillman modificado: ACP -naftilfosfato + H2O -naftol + fosfato -naftol + Fast Red TR Colorante Diazo La tasa de formación del colorante es proporcional a la actividad fosfatasa ácida presente en la muestra.

Composición de los reactivos Reactivo 1 Buffer

Citrato de sodio pH 5,2 .................................50 mmol/l

Reactivo 2 Sustrato

-naftilfosfato ...............................................10 mmol/lFast Red TR ...................................................... 6 mmol/l

Reactivo 3 Tartrato

Tartrato sódico ................................................ 2 mmol/lHidróxido sódico ....................................... 1800 mmol/l

Reactivo 4 Ácido acético ................................................... 0,5 mol/lÚnicamente para uso diagnóstico in vitro.

Precaución Reactivo 3: H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Disolver un comprimido de sustrato R2 en 2 ml de buffer R1. Tapar y agitar suavemente hasta disolver su contenido. La estabilidad del reactivo de trabajo es de 2 días a 2-8°C o 6 horas a temperatura ambiente. Los reactivos R3 y R4 están listos para su uso.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan firmemente cerrados, al abrigo de la luz y se previenen contaminaciones durante su uso. No utilizar aquellos comprimidos que estén fragmentados. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o la presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 405 nm es ≥ 0,44, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 405 nm - Baño termostático a 30°C o 37°C (±0.1°C) - Cubetas de 1,0 cm de camino óptico - Equipamiento habitual de laboratorio.

Muestras Suero claro, separado del coágulo lo antes posible. No utilizar plasma o suero hemolizado. La fosfatasa ácida es extremadamente lábil, por lo que debe ser estabilizada añadiendo 50 μl de ácido acético (R4) por ml de muestra. Estabilidad: 7 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 405 nm; Temperatura constante: 30°C/37°C; Cubetas:

camino óptico de 1 cm. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada o aire.

3. Pipetear en una cubeta: ACP total ACP no prostáticaReactivo de trabajo Tartrato (R3) Muestra

1,0 ml --- 100 μl

1,0 ml 10 μl 100 μl

Mezclar bien e incubar 5 minutos. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto ( abs./min).

Cálculo ACP total (U/l) = 750 x Abs/min

Fosfatasa ácida prostática = ACP total –ACP no prostática.

ACP prostática (U/l) = 750 x ( Abs/min ACP total - Abs/min ACP no prostática)


Control de calidad Se recomienda el uso de sueros de control para verificar la validez del ensayo. Si los valores de los controles no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores de los controles no se incluyen dentro de los rangos establecidos.

Sueros humanos de control para valores normales y patológicos se encuentran disponibles (HBC01, HBC02).

Valores de referencia 30°C. 37°C.

Fosfatasa ácida total:Hombres Mujeres

< 4,3 U/l < 3,1 U/l

< 5,4 U/l < 4,2 U/l

Fosfatasa ácida prostática < 1,5 U/l < 1,7 U/lEstos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo (ACP total) Rango de medición: de 0 U/l (límite de detección) a 150 U/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 150 U/l, diluir la muestra 1:2 con solución salina, repetir la medición, y multiplicar el resultado por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (U/l) 26.3 57.5 29.3 63.0

SD 0.15 0.19 1.70 2.48CV (%) 0.58 0.34 5.82 3.94

Sensibilidad: 1 U/l = 0.00156 Abs/min Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Procesos de hemólisis interfieren en los resultados debido a la alta concentración de ACP en los glóbulos rojos. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de ACP ha sido publicada por Young et al.

Notas Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics (CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos que utilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puede descargarse las fichas de automatización de nuestra página web (www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía Abbott et al. Acid phosphatase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1079-1083 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995 Langdorp, 09.2016



Albúmina Ensayo colorimétrico. “Verde de bromocresol”

Ref. HB001 1 x 1000 ml HB0010 2 x 125 ml

Almacenar a 2-25°C. Líquido. Estándar incluído.

Significado clínico La albúmina es la más abundante de las proteínas en suero. Elevados niveles de albúmina sérica se asocian con deshidratación. Niveles bajos de albúmina sérica son indicadores de malnutrición, enfermedad hepática, afecciones renales, y artritis reumatoide. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La albúmina sérica une de forma selectiva el colorante verde de bromocresol a un pH de 4.0, lo que provoca la formación de un complejo albúmina-colorante. El incremento de absorbancia a 630 nm es proporcional a la concentración de albúmina de la muestra.

Composición de los reactivos Reactivo 1 Verde de bromocresol, pH 4.0 ................. 0,12 mmol/l

Estándar Albúmina, solución acuosa ... ver valor en la etiqueta

Únicamente para uso diagnóstico in vitro. Precaución: Reactivo 1: H319: Provoca irritación ocular grave. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Estándar y reactivo están listos para su uso.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-25°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Una vez abierto, el estándar es viable hasta 3 meses. No exceder una temperatura de 25°C durante el almacenamiento del kit. El reactivo debe mostrar un aspecto claro y amarillo verdoso. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 630 nm es ≥ 0,40, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 630 nm - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero o plasma libre de hemólisis. Estabilidad: 1 mes a 2-8°C o 1 semana a 15-25°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 630 (600-650) nm. Temperatura: 15-25°C.

Cubetas de 1 cm de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco Estándar MuestraEstándar Muestra Reactivo

--- ---

1,0 ml

5 μl ---

1,0 ml

---5 μl

1,0 ml Mezclar bien e incubar durante 10 minutos a temperatura ambiente. Leer la absorbancia (Abs) de la muestra y el estándar contra el blanco. El color es estable durante 1 hora.

Cálculo

estándar conc. x BlancoAbsEstándarAbsBlancoAbsMuestraAbs

(g/dl) Albúmina

Factor de conversión: g/dl x 144,9 = μmol/l

Control de calidad Se recomienda el uso de sueros de control para verificar la validez del ensayo. Si los valores obtenidos no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores obtenidos no se incluyen dentro de los rangos establecidos. Sueros humanos de control para valores normales y patológicos (HBC01, HBC02) están disponibles.

Valores de referencia 3,5 – 5,0 g/dl. Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 0,038 g/dl (límite de detección) a 5,8 g/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 5,8 g/dl; diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2.

Precisión: Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)

Media (g/dl) 4.56 2.98 4.62 3.06SD 0.16 0.08 0.12 0.08

CV (%) 3.43 2.78 2.54 2.77

Sensibilidad: 1 g/dl = 0,126 Abs

Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Los resultados de las características del ensayo dependen del analizador utilizado para llevar a cabo los estudios de rendimiento.

Interferencias Concentraciones de hemoglobina de 22 mg/dl no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de albúmina ha sido publicada por Young et al.

Notas La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos en sistemas automatizados. En estos casos, se recomienda el uso de sueros de calibración (HBC03). Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics (CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos que utilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puede descargarse las fichas de automatización de nuestra página web (www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía Rodkey F L. Clin Chem 1965; 11: 478-487 Webster D. Clin Chem. 1974: Acta 53: 109-115 Doumas BT. Clin Chem 1971: Acta 31: 87-96 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 4rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 4rd ed AACC 1995.

Langdorp, 08.2015



ALP Líq. (Fosfatasa alcalina)

Método cinético colorimétrico. IFCC. Líquido.

Ref. HBE12 60 + 15 ml

Almacenar a 2-8°C.

Significado clínico La fosfatasa alcalina (ALP) se encuentra en casi todos los tejidos del organismo, siendo sus niveles séricos de interés para el diagnóstico de trastornos hepáticobiliares y enfermedades óseas. La mayoría de la ALP sérica en adultos proviene del hígado o los túbulos biliares. Los niveles normales de fosfatasa alcalina varían con la edad, siendo especialmente elevados durante periodos de crecimiento óseo. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio Ensayo cinético colorimétrico, como establece la International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicines (IFCC). La fosfatasa alcalina (ALP) cataliza la transferencia del grupo fosfato del sustrato p-nitrofenilfosfato al aceptor 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP), lo que provoca la liberación de p-nitrofenol como indica la reacción siguiente: ALP p-Nitrofenilfosfato + AMP p-Nitrofenol + Fosfato

La tasa de formación de p-nitrofenol puede medirse fotométricamente y es directamente proporcional a la actividad fosfatasa alcalina de la muestra.


2-Amino-2-metil-1-propanol ..................................0.35 mol/lSulfato de zinc ............................................................ 1 mmol/l Acetato de magnesio ................................................. 2 mmol/l EDTA ............................................................................2 mmol/l

Reactivo 2 Sustrato

p-nitrofenilfosfato .................................................. 10 mmol/l


Preparación Mezclar 4 volúmenes de R1 (buffer) con 1 volumen de R2 (sustrato). La solución de trabajo es estable durante 21 a 2-8°C o 5 días a temperatura ambiente (15-25°C).

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. No congelar los reactivos. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 405 nm es > 1.5, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 405 nm - Baño termostático a 25°C, 30°C ó 37°C (± 0.1°C) - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero o plasma heparinizado. Utilizar muestras de suero no hemolizadas, separadas del coágulo lo antes posible. Estabilidad: 3 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 405 nm. Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C. Cubetas de 1 cm

de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada o aire. 3. Pipetear en una cubeta:

Reactivo de trabajo Muestra

1.0 ml 20 μl

Mezclar bien e incubar durante 1 minuto. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto ( abs/min).

Cálculo ALP (U/l) = Abs/min x 2764 Una unidad internacional (UI) representa la cantidad de enzima necesaria para procesar 1 μmol de sustrato por minuto en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro de muestra (U/l).

Factores de conversión para diferentes temperaturas de ensayo: Temperatura de ensayo Factor de conversión para

25°C 30°C 37°C25°C30°C 37°C

1.00 1.22 1.640.82 1.00 1.33 0.61 0.75 1.00

Control de calidad Se recomienda el uso de sueros de control para verificar la validez del ensayo. Si los valores obtenidos no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores obtenidos no se incluyen dentro de los rangos establecidos.

Sueros humanos de control para valores normales y patológicos (HBC01, HBC02) están disponibles.

Valores de referencia 25°C. 30°C. 37°C.

Adultos 17-77 U/l 21-94 U/l 26-117 U/lAlgunos factores que provocan una alteración en los niveles de ALP en individuos normales incluyen ejercicio físico, periodos de crecimiento en niños y embarazo. Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 1,307 U/l (límite de detección) a 1400 U/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 1400 U/l; diluir la muestra a 1:10 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 10. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (U/l) 73 194 78 209

SD 1.67 3.03 2.13 4.90CV (%) 2.27 1.58 2.72 2.34

Sensibilidad: 1 U/l = 0.0004 Abs/min Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Fluoruros, oxalatos, citratos y EDTA inhiben la actividad alcalina fosfatasa y por consiguiente no deben utilizarse como anticoagulantes. Los procesos de hemólisis de la muestra interfieren con el ensayo debido a las altas concentraciones de fosfatasa alcalina en los glóbulos rojos. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de fosfatasa alcalina ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía Wenger C. Et al..Alkaline phosphatase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1094-1098 Rosailki S et al. Clin Chem 1993; 39/4: 648-652. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. IFCC Methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. J. Clin. Biochem. 1983, 21, 731-784. Langdorp, 03.2015



Bilirrubina total Test colorimétrico. DMSO.

Ref. HB0270 2 x 125 ml

Almacenar a 2-25°C. Líquido

Uso destinado Determinación cualitativa de los niveles de bilirrubina directa y total en muestras de suero o plasma. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Significado clínico La bilirrubina es un metabolito del grupo hemo de las hemoproteínas (principalmente de la hemoglobina) que normalmente es excretado por el hígado con la bilis al intestino. Incrementos de los niveles de bilirrubina sérica pueden ocurrir debido a una hemólisis o destrucción excesivas de los glóbulos rojos (enfermedad hemólitica del recién nacido), enfermedades hepáticas (hepatitis, cirrosis) y obstrucciones de los túbulos biliares (cálculos biliares). Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio En solución alcalina y presencia de ácido sulfanílico y sales de diazonio, la bilirrubina forma azobilirrubina, un compuesto coloreado rojo. De las dos fracciones de bilirrubina séricas, los complejos bilirrubina-glucurónido y bilirrubina libre débilmente unida a albúmina, sólo la primera reacciona directamente en solución acuosa (bilirrubina directa), mientras que la bilirrubina libre requiere solubilización previa con dimetilsulfóxido (DMSO) para reaccionar (bilirrubina indirecta). La intensidad de color obtenida es proporcional a la concentración de bilirrubina de la muestra.

Composición de los reactivos Reactivo T Ácido sulfanílico ...................................... 30 mmol/l

Ácido clorhídrico ................................... 150 mmol/l Dimetilsulfóxido (DMSO) ............................ 7 mol/l

Reactivo N Nitrito sódico ........................................... 29 mmol/l Únicamente para uso diagnóstico in vitro.

Precauciones Reactivo T: H290: Puede ser corrosivo para los metales. H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Los reactivos están listos para su uso.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-25°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si se ha producido la formación de color en el reactivo N, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 555 nm (530-580) - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero o plasma no hemolizados. Almacenar las muestras al abrigo de la luz. La bilirrubina es estable hasta 4 días a 2-8°C y 2 meses a -20°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 555 nm (530-580). Temperatura: 15-25°C. Cubetas de 1 cm

de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco de muestra / calibrador

Muestra / Calibrador

Muestra nota 1/ Calibrador notas 2,3

Reactivo N Reactivo T

100 μl ---

750 μl

100 μl 25 μl

750 μl Mezclar bien e incubar exactamente 5 minutos a temperatura ambiente. Medir la absorbancia (Abs.).

Cálculo Notas 2-4

*factor x muestra de BlancoAbsMuestraAbsa(mg/dl)Bilirrubin

Calibrador BlancoCalibrador AbsAbs

Conc:Factor*

Calibrador.

Factor de conversión: mg/dl x 17,1 = μmol/l.

Control de calidad Se recomienda el uso de sueros de control para verificar la validez del ensayo. Si los valores obtenidos no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores obtenidos no se incluyen dentro de los rangos establecidos. Sueros humanos de control para valores normales y patológicos (HBC01, HBC02) están disponibles Nota 3.

Valores de referencia Bilirrubina total: hasta 1,10 mg/dl (18,81 μmol/l). Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 0.10 mg/dl (límite de detección) a 20 mg/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 20 mg/dl; diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (mg/dl) 1.64 4.54 1.63 4.25

SD 0.05 0.14 0.04 0.19 CV (%) 2.93 3.06 2.66 4.38

Sensibilidad: 1 mg/dl = 0,0639 Abs. Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Los procesos de hemólisis en la muestra provocan una disminución de los valores de bilirrubina obtenidos. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de bilirrubina ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. Para la determinación de bilirrubina en neonatos, pipetear 50 μl de muestra.

Multiplicar el resultado por 2. 2. El factor programado de antemano puede ser utilizado siempre que los

controles (QC) se encuentren dentro de los rangos preestablecidos. Si no, recomendamos el uso de un calibrador. Puede utilizarse un calibrador de suero (HBC03) tanto para el ensayo de bilirrubina directa como para el de bilirrubina total.

3. Los valores de los controles y calibradores pueden diferir en función del método empleado (con o sin blanco de muestra).


Bibliografía Kaplan A. et al. Bilirubin. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1238-1241, 436 and 650 Malloy H.T. et al. J. Biol Chem. 1937:112, 2: 481-491 Martinek R. Clin. Chim. 1966: Acta 13: 61-170 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. 01.2017, Rev. 13.0



Bilirrubina directa Test colorimétrico. DMSO.

Ref. HB0260 2 x 125 ml





Composición de los reactivos Reactivo D Ácido sulfanílico ...................................... 30 mmol/l

Ácido clorhídrico ................................... 150 mmol/l Reactivo N Nitrito sódico ........................................... 29 mmol/l

Precauciones Reactivo D: H290: Puede ser corrosivo para los metales. H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.



Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 555 nm (530-580) - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero o plasma no hemolizados. Almacenar las muestras al abrigo de la luz. Estabilidad: 2 meses a -20°C, 4 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 555 nm (530-580). Temperatura: 15-25°C. Cubetas de 1 cm

de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco de muestra / calibrador


Muestra nota 1/ Calibrador notas 2,3

Reactivo N Reactivo D

100 μl --- 750 μl

100 μl 25 μl 750 μl

Mezclar bien e incubar exactamente 5 minutos a temperatura ambiente. Medir la absorbancia (Abs.).

Cálculo Nota 2-4

*factor x AbsAbsa(mg/dl)Bilirrubin muestra de BlancoMuestra

;

.

Calibrador BlancoCalibrador AbsAbsConc

:Factor*Calibrador



Valores de referencia Bilirrubina directa: hasta 0,25 mg/dl (4,27 μmol/l). Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.


Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (mg/dl) 0,75 2,53 0,78 2,59

SD 0,02 0,07 0,02 0,08 CV (%) 3,07 2,69 2,83 2,94

Sensibilidad: 1 mg/dl = 0,0554 Abs. Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.



Multiplicar el resultado por 2. 2. El factor programado de antemano puede ser utilizado siempre que los

controles (QC) se encuentren dentro de los rangos preestablecidos. Si no, recomendamos el uso de un calibrador. Puede utilizarse un calibrador de suero (HBC03) tanto para el ensayo de bilirrubina directa como para el de bilirrubina total.

3. Los valores de los controles y calibradores pueden diferir en función del método empleado (con o sin blanco de muestra).


Bibliografía Kaplan A. et al. Bilirubin. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1238-1241, 436 and 650 Malloy H.T. et al. J. Biol Chem. 1937:112, 2: 481-491 Martinek R. Clin. Chim. 1966: Acta 13: 61-170 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. 01.2017, Rev. 13.0



Bilirrubina directa / total Test colorimétrico. DMSO.

Ref. HB0020 2 x 125 ml





Composición de los reactivos Reactivo D Ácido sulfanílico ............................................ 30 mmol/l

Ácido clorhídrico ......................................... 150 mmol/l Reactivo T Ácido sulfanílico ............................................ 30 mmol/l

Ácido clorhídrico ......................................... 150 mmol/l Dimetilsulfóxido (DMSO) ................................... 7 mol/l

Reactivo N Nitrito sódico ................................................. 29 mmol/l

Precauciones Reactivo D, Reactivo T: H290: Puede ser corrosivo para los metales. H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.




Muestras Suero o plasma no hemolizados. Almacenar las muestras al abrigo de la luz. La bilirrubina es estable hasta 4 días a 2-8°C y 2 meses a -20°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 555 nm (530-580). Temperatura: 15-25°C. Cubetas de 1 cm de

camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Bilirrubina total Bilirrubina directa Blanco

muestra / calibrador


Blanco muestra / calibrador

Muestra / calibrador

Muestra note 1 / Calibradornote2,3

Reactivo N Reactivo D Reactivo T

100 μl --- ---

750 μl

100 μl 25 μl

--- 750 μl

100 μl ---

750 μl ---

100 μl 25 μl

750 μl ---

Mezclar bien e incubar exactamente 5 minutos a temperatura ambiente. Medir la absorbancia (Abs.).

Cálculonote2-4

*factor x muestra de BlancoAbsMuestraAbsa(mg/dl)Bilirrubin

;Calibrador BlancoAbsCalibradorAbs

Calibrador.Conc:Factor*



Valores de referencia Bilirrubina total: hasta 1,1 mg/dl (18,81 μmol/l). Bilirrubina directa: hasta 0,25 mg/dl 4,27 μmol/l) Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: desde un límite de detección de 0.06 mg/dl (bilirrubina directa) y 0.10 mg/dl (bilirrubina total) hasta un límite de linealidad de 20 mg/dl. Si los resultados obtenidos son mayores que 20 mg/dl; diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Bilirrubina Directa Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (mg/dl) 0.75 2.53 0.78 2.59

SD 0.02 0.07 0.02 0.08CV (%) 3.07 2.69 2.83 2.94

Bilirrubina Total Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (mg/dl) 1.64 4.54 1.63 4.25

SD 0.05 0.14 0.04 0.19CV (%) 2.93 3.06 2.66 4.38

Sensibilidad: 1 mg/dl = 0,0554 Abs (bilirrubina directa) 1 mg/dl = 0,0639 Abs (bilirrubina total)

Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.



Multiplicar el resultado por 2. 2. El factor programado de antemano puede ser utilizado siempre que los controles

(QC) se encuentren dentro de los rangos preestablecidos. Si no, recomendamos eluso de un calibrador.Puede utilizarse un calibrador de suero (HBC03) tanto para el ensayo de bilirrubinadirecta como para el de bilirrubina total.

3. Los valores de los controles y calibradores pueden diferir en función del métodoempleado (con o sin blanco de muestra).

4. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics (CYANSmart,CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos que utilice las fichas deespecificaciones del analizador correspondiente. Puede descargarse las fichas deautomatización de nuestra página web (www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía Kaplan A. et al. Bilirubin. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1238-1241, 436 and 650 Malloy H.T. et al. J. Biol Chem. 1937:112, 2: 481-491 Martinek R. Clin. Chim. 1966: Acta 13: 61-170 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.

01.2017, Rev 13.0



Calcio Arsenazo III Test colorimétrico. Monorreactivo.

Ref. HB0030 2 x 125 ml

Almacenar a 2-8°C. Líquido. Estándar incluido.

Uso previsto Determinación cuantitativa de la concentración de calcio en muestras humanas de suero, plasma u orina. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Significado clínico Más del 99% del calcio del organismo se localiza en huesos y dientes, mientras que el 1% restante se encuentra en sangre y tejidos blandos y sirve como cofactor para procesos de coagulación sanguínea, metabolismo y fisiología neuromuscular. Numerosos factores influyen en los niveles séricos de calcio. Se observa hipercalcemia (niveles elevados de calcio en suero) en caso de hiperparatiroidismo, hipervitaminosis, sarcoidosis, mieloma y ciertas neoplasias óseas. Por otro lado, se produce hipocalcemia (niveles reducidos de calcio en suero) en caso de hipoparatiroidismo, raquitismo, nefrosis, nefritis, esteatorrea y pancreatitis. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio A pH neutro, los iones calcio se unen a las moléculas de arsenazo III [ácido 1,8-dihidroxi-3,6-disulfo-2,7-naftalenen-bis(azo)-dibencenarsónico] para dar producir la formación de complejos coloreados azules. La intensidad de color de la mezcla resultante es directamente proporcional a la concentración de calcio en la muestra.

Composición de los reactivos Reactivo: Arsenazo III

Buffer de imidazol pH 6,75 .......................100 mmol/l Arsenazo III ................................................ 0,120 mmol/l

Estándar Calcio, solución acuosa .................................. 10 mg/dl

Precaución Reactivo: H360: Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Reactivo y estándar están listos para su uso.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con precaución a fin de evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 620 nm es ≥ 0.80, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 620 nm - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero o plasma: separar de las células lo antes posible. No utilizar EDTA y oxalato como anticoagulantes, puesto que éstos compuestos tienen una gran afinidad por los iones calcio, con los que forman quelatos. Orina: recolectar muestras de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio. Los frascos recolectados deben contener 10 ml de ácido nítrico diluido (50% v/v). Anotar el volumen, diluir la muestra a 1:2 con agua destilada y mezclar bien. Multiplicar los resultados obtenidos por 2 (factor de dilución). Los iones calcio son estables durante 10 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 620 (610-660) nm. Temperatura: 15-25°C. Cubetas de 1 cm

de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada.3. Pipetear en una cubeta:

Blanco Estándar MuestraEstándar Muestra Reactivo

--- --- 1,0 ml

20 μl. --- 1,0 ml

--- 20 μl. 1,0 ml

Mezclar bien e incubar durante 2 minutos a 15-25°C. Leer la absorbancia (Abs) del estándar y la muestra contra el blanco. El color ese stable durante 1 hora como mínimo.

Cálculo estándar) (conc. 10 x

BlancoAbsEstándarAbsBlancoAbsMuestraAbs

(mg/dl) Calcio :maSuero/Plas

f x orina/24h (dl) x volestándar) (conc. 10xBlancoAbs-EstándarAbs

BlancoAbs-MuestraAbs)h/mg(Calcio:hOrina 2424

f = factor de dilución Factor de conversión: mg/dl x 0,25 = mmol/l.


Valores de referencia8

Suero o plasma: Adultos 8,6 – 10,2 mg/dl 2,15 – 2,55 mmol/l Niños 8,4 – 11,0 mg/dl 2,10 – 2,75 mmol/l Neonatos 7,6 -10,4 mg/dl 1,90 – 2,60 mmol/l

Orina: Adultos 100 – 300 mg/24h 2,50 – 7,50 mmol/24h Niños de hasta 6,0 mg/kg/24h de hasta 6,0 mmol/kg/24h


Características del ensayo Rango de medición: de 0.163 mg/dl (límite de detección) a 20 mg/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 20 mg/dl, diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:


SD 0,19 0,20 0,08 0,12CV (%) 2,16 1,43 0,97 0,87

Sensibilidad: 1 mg/dl = 0.03323 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Concentraciones de ácido ascórbico de hasta 20 mg/dl y de bilirrubina de hasta 15 mg/dl no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de calcio ha sido publicada por Young et al.

Notas1. Se recomienda el uso de material desechable. En caso de que se emplee

material de vidrio, lavar escrupulosamente con una solución acuosa 1:1 deHNO3 y enjuagar con cantidades copiosas de agua destilada.

2. La mayoría de los detergentes y productos suavizantes de agua utilizados enlos laboratorios contienen agentes quelantes. Un enjuague defectuosoinvalidará el procedimiento

3. La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos ensistemas automatizados. En estos casos, se recomienda el uso de sueros decalibración (HBC03).

4. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics(CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos queutilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puededescargarse las fichas de automatización de nuestra página web(www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía 1. Farell E C.. Calcium. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Toronto.

Princeton 1984; 1051-1255 and 418. 2. Kessler G. et al. Clin Chem 1964; 10(8); 686-706 3. Connerty H.V. et al. Am J Clin Path 1996 ; 45(3) ; 200-2964. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 5. Young DS. Efeects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. 8. Wu A.H.B. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th ed. 2006

11.2017, Rev. 8.0



Cloruro Test colorimétrico. Tiocianato.

Ref. HB005 2 x 125 ml

Almacenar a 2-8°C

Uso previsto Determinación cuantitativa de la concentración de cloruro en muestras humanas de suero, plasma u orina. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Significado clínico El cloruro es el principal anión del organismo y como tal desempeña un papel esencial en el mantenimiento del balance iónico entre los fluidos intracelular y extracelular, siendo imprescindible para el control del equilibrio hídrico y ácido/base así como de la presión osmótica. Niveles reducidos de cloruro son frecuentes en pacientes con quemaduras extensas, vómitos excesivos, obstrucciones intestinales, nefritis, acidosis metabólica, y enfermedad de Addison. Por otro lado, se detectan niveles elevados de cloruro en casos de deshidratación, hiperventilación, enfermedad valvular cardiaca, y obstrucciones prostáticas y urinarias. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio Los iones cloruro forman un complejo coloreado como indica la reacción siguiente:

2 Cl- + Hg (SCN)2 HgCl2 + 2 SCN- SCN- + Fe3+ FeSCN2+

La intensidad de color de la mezcla resultante es proporcional a concentración de cloruro de la muestra.

Composición de los reactivos Reactivo 1 Tiocianato de mercurio ........................................ 4 mmol/l.

Nitrato férrico ...................................................... 40 mmol/l. Ácido nítrico ........................................................ 45 mmol/l. Nitrato de mercurio .............................................. 2 mmol/l.

Estándar Cloruro, solución acuosa.................................. 125 mmol/l.





Muestras - Suero, plasma: libres de hemólisis y separados de la fracción celular lo antes

posible. Evitar el uso de anticoagulantes como EDTA u oxalato, puesto que interfieren con el ensayo.

- Orina: recolectar muestras de orina de 24 horas en recipientes libres de cloruro. Diluir la muestra 1:2 con agua destilada y mezclar bien. Multiplicar los resultados obtenidos por 2 (factor de dilución).

La estabilidad del ion cloruro es de 1 semana a temperatura ambiente (15-25°C), 15 días en muestras refrigeradas (2-8°C) y 1 mes en muestras congeladas (-20°C).

Procedimiento 1. Longitud de onda: 480 (440-500) nm. Temperatura: 37°C/15-25°C. Cubetas de

1 cm de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Utilizando una micropipeta, añadir en una cubeta:

Blanco Estándar MuestraEstándar Nota 4 Muestra Reactivo 1 Nota 3

--- --- 1,00 ml

10 μl --- 1,00 ml

--- 10 μl 1,00 ml

Mezclar bien e incubar a 37°C/15-25°C durante 5 minutos. Leer la absorbancia del estándar y las muestras contra el blanco. El color es estable durante 30 minutos como mínimo.



(mmol/l) Cloruro

Orina 24h: Cloruro (mmol/24h orina)

orina/24h (dl) x volestándar) (conc.125xBlancoAbs-EstándarAbs

BlancoAbs-MuestraAbs

Factor de conversión: mmol/l. = mEq/l.


Valores de referencia Suero o plasma: 95 – 115 mmol/l Orina: 110-250 mmol/24h. Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 0.454 mmol/l (límite de detección) a 190 mmol/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 190 mmol/l, diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (mmol/l) 84,2 114 82,5 111

SD 0,81 0,62 1,07 1,87CV (%) 0,96 0,55 1,30 1,68

Sensibilidad: 1 mmol/l = 0.00471 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias La presencia de hemólisis y anticoagulantes con la excepción de la heparina interfieren con el ensayo. Concentraciones de hasta 120 mg/l de bilirrubina, 150 g/l de albúmina sérica bovina y 6 g/l de triglicéridos no interfieren con el ensayo significativamente. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de cloruro ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. Se recomienda el uso de material desechable. En caso de que se emplee

material de vidrio, lavar escrupulosamente con una solución de H2SO4-K2Cr2O7 y enjuagar copiosamente con agua destilada.

2. La mayoría de detergentes y agentes suavizadores de agua contienen agentes quelantes en su composición. Por ello, un deficiente enjuagado del material empleado invalida el ensayo.

3. Evitar el contacto con metales. 4. La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos en

sistemas automatizados. En estos casos, se recomienda el uso de sueros de calibración (HBC03).


Bibliografía 1. Miller W.G. Chloride. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto.

Princeton 1984; 1059-1062, 417 2. Ibbott F.A. et al. New York Academic Press 1965:101-111. 3. Schoenfeld R.G. et al. Clin. Chem. 1964, 10: 533-539. 4. Levinson S.S. et al. In Faulkner W.R. et al. Eds,9, AACC 1982:143-148. 5. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 6. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 7. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 8. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. 03.2017, Rev. 13.0



Colesterol Líq.

Ensayo enzimático colorimétrico. CHOD-POD. Líquido.

Ref. HBL010 2 x 125 ml

Almacenar a 2-8°C. Estándar incluído.

Intended use Determinación cuantitativa de los niveles de colesterol en suero o plasma. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Significado clínico El colesterol es un lípido que se encuentra en la sangre, la bilis y el tejido cerebral; y es precursor de los ácidos biliares, los esteroides y la vitamina D. La determinación de colesterol en suero es de gran ayuda para el diagnóstico y clasificación de lipemia. Concentraciones elevadas de colesterol en sangre constituyen uno de los mayores riesgos de enfermedad cardiovascular. Otros trastornos como la enfermedad hepática tiroidea influyen en los niveles de colesterol 4,5. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio El colesterol y sus ésteres son liberados de las lipoproteínas por acción de detergentes. La colesterol esterasa hidroliza los ésteres y la colesterol oxidasa lleva a cabo la oxidación del colesterol liberado, produciendo H2O2 en el proceso, como se indica en las reacciones a continuación. En la última reacción se produce la formación de un colorante quinonimina rojo, que confiere a la mezcla de reacción un color cuya intensidad es proporcional a la concentración de colesterol de la muestra.

CHE Éster de colesterol + H2O Colesterol + Ácido graso

CHOD Colesterol + O2 Colest-4-en-3-ona + H2O2

POD H2O2 + 4-AAP + Fenol Colorante quinonimina + 2H2O

Composición de los reactivos Reactivo

PIPES pH 7,0 ....................................... 70 mmol/l Fenol ..................................................... 6 mmol/l 2,4-Diclorofenol ................................ 0,5 mmol/l Colesterol esterasa (CHE) ....................... 400 U/l Colesterol oxidasa (CHOD) ..................... 400 U/l Peroxidasa ............................................. 1000 U/l 4-Aminoantipirina (4-AAP) ............... 0,5 mmol/l

Estándar Solución acuosa, colesterol ............... 200 mg/dl


Precaución Estándar: H225: Líquido y vapores muy inflamables. H318: Provoca lesiones oculares graves. H412: Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.


Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con precaución para evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 510 nm es ≥ 0,26, el reactivo debe ser descartado.


Muestras Suero o plasma 1,2: la estabilidad de la muestra es de 7 días a 2-8°C o de 3 meses si es congelada a -20°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 510 (500-550) nm. Temperatura: 37°C / 15-25°C. Cubetas

de 1 cm de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada.

3. Pipetear en una cubeta:

Blanco Estándar Muestra Estándarnota1,2

Muestra Reactivo

------ 1 ml

10 μl --- 1 ml

---10 μl 1 ml

Mezclar bien, incubar durante 10 minutos a 37°C o 15 minutos a 15-25°C. Leer la absorbancia (Abs) del estándar y la muestra contra el blanco. El color es estable durante 45 minutos como mínimo.



(mg/dl) Colesterol

Factor de conversión: mg/dl x 0,0259 = mmol/l.


Valores de referencia Evaluación de riesgo en adultos: Menos de 200 mg/dl Deseable 200-239 mg/dl Límite 240 mg/dl o mayor Alta Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.


Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (mg/dl) 90,11 187,44 94,41 183,53

SD 1,33 2,39 1,23 1,55CV (%) 1,48 1,28 1,30 0,85


Interferencias Concentraciones de hasta 3.5 g/l de hemoglobina, 8 mg/dl de ácido ascórbico y 10 mg/dl de bilirrubina no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de colesterol ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos en


2. Es posible que parte del volumen del estándar permanezca en la punta de la micropipeta en uso durante pipeteo manual. En consecuencia, asegúrese la punta desechable siempre sea completamente vaciada en el proceso.

Bibliografía 1. Naito H.K.. Cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.

Princeton 1984: 1194-1206 and 437. 2. Meiattini F. et al. The 4-hydroxybenzoate/4-aminophenazone Chromogenic System. Clin

Chem 1978; 24(12): 2161-2165. 3. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. 6. Burtis C.A. and Bruns D.E. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry and Molecular

Diagnostics, 7th ed. Elsevier 2015

12.2016, Rev 5.0



Creatina Kinasa MB Inmunoinhibición. Cinético U.V.

Ref. HBE10 19 x 2.5 ml

Almacenar a 2-8°C. Control incluido.

Significado clínico La CK-MB está compuesta por dos fracciones: CK-M (músculo) y CK-B (cerebro, “brain”), y se encuentra normalmente en bajas concentraciones en suero. Sus niveles aumentan en caso de infarto agudo de miocardio y más tarde descienden a niveles normales. Raramente se produce un incremento en los niveles de CK-MB en caso de daño en el músculo esquelético5,6. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio Un anticuerpo específico inhibe la fracción CK-M sin afectar a la fracción CK-B. La fracción CK-B representa la mitad de la fracción CK-MB, que es determinada por el método del NAC activado. La tasa de formación de NADPH es determinada fotométricamente y es proporcional a actividad CK-B de la muestra.


Imidazol pH 6,7 ..................................................... 100 mmol/lGlucosa .................................................................... 20 mmol/l Acetato de magnesio .............................................. 10 mmol/l EDTA ........................................................................... 2 mmol/l

Reactivo 2 Anti CK-M

*Anti CK-M ..................................................................2000 U/lADP............................................................................. 2 mmol/l AMP ............................................................................ 5 mmol/l Diadenosina-5-P ..................................................... 10 mmol/l NADP+ ........................................................................ 2 mmol/l Hexokinasa (HK) ......................................................... 2500 U/l G-6-PDH ...................................................................... 1500 U/l N-acetilcisteína ....................................................... 20 mmol/l Creatina-fosfato ..................................................... 30 mmol/l

Control CK Suero humano liofilizado.................................................2 mlValor (ensayo a 37°C) indicado en la etiqueta

*Anti-CK-M suficiente para inhibir hasta 2000 U/l de la fracción CK-M. Únicamente para uso diagnóstico in vitro.

Precaución El control ha sido preparado a partir de suero humano, que fue analizado y dio negativo para la presencia de HBsAg y anticuerpos contra VHC y VIH. No obstante, toda muestra de origen humano debe ser considerada potencialmente infecciosa y manipulada en consecuencia. Reactivo 1: H360: Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Reactivo de trabajo: Disolver un comprimido de sustrato R2 en 2,5 ml de buffer R1.La estabilidad del reactivo de trabajo es de 8 días a 2-8°C o 24 horas a temperatura ambiente (15-25°C). Control: Disolver el contenido en 2 ml de agua destilada. Tapar y mezclar con cuidado hasta disolver el contenido del vial. Estabilidad: 8 horas a 15-25°C, 5 días a 2-8°C o 1 mes a -20°C. Dejar que alcance temperatura ambiente unos 30 minutos antes de usar.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. No utilizar si los comprimidos están fragmentados. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 340 nm es ≥1.60, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 340 nm - Baño termostático a 25°C, 30°C o 37°C (± 0.1°C) - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero o plasma: estabilidad de 7 días a 2-8°C, al abrigo de la luz. La actividad CK-MB disminuye un 10% tras 24 horas a 4°C o 1 hora a 25°C.

Procedimiento para el método manual 1. Longitud de onda: 340 nm. Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C. Cubetas de 1 cm de

camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada o aire. 3. Pipetear en una cubeta:


1.0 ml 40 μl

Mezclar bien e incubar durante 10 minutos. Leer la absorbancia inicial (Abs1) de la muestra, accionar el cronómetro y leer la absorbancia tras 5 minutos (Abs2). Calcular las diferencia entre las absorbancias medidas: ΔAbs= Abs2 -Abs1

Procedimiento para CYANStart / CYANSmart 1. Longitud de onda: 340 nm. Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C. Cubetas de 1 cm de

camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada o aire.

3. Pipetear en una cubeta: Reactivo de trabajoMuestra

1.0 ml40 μl

Mezclar bien y aspirar inmediatamente. El programa siguiente se iniciará: 3 minutos de incubación y 2 minutos de medición cinética.

Cálculo Método manual: Abs x 825 = U/l CK-B Abs x 1651 = U/l CK-MB

CYANStart / CYANSmart / analizadores automáticos y semiautomáticos: Abs/min x 4125 = U/l CK-B Abs/min x 8255 = U/l CK-MB


Porcentaje de actividad CK-MB en la muestra: % actividad CK-MB = (actividad CK-MB / actividad CK total) x 100


25°C 30°C 37°C25°C30°C 37°C

1.00 1.53 2.380.65 1.00 1.56 0.42 0.64 1.00

Control de calidad Se recomienda el uso del control CK para verificar la validez del ensayo. Si los valores obtenidos no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores obtenidos no se incluyen dentro de los rangos establecidos.

Valores de referencia La probabilidad de infarto de miocardio es alta cuando se cumplen las tres condiciones siguientes: 1. La actividad CK-MB aumenta por encima de los valores indicados a continuación:

25°C. 30°C. 37°C.CK-MB > 10 U/l > 15 U/l > 24 U/l

2. La actividad CK total (CK-NAC) aumenta por encima de los valores indicados a continuación:

CK Total 25°C. 30°C. 37°C.Men > 80 U/l > 130 U/l > 195 U/l Women > 70 U/l > 110 U/l > 170 U/l

3. La actividad CK-MB constituye el 6-25% de la actividad CK total. Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 3.11 U/l (límite de detección) a 1000 U/l (límite de linealidad). La actividad CK total debe ser determinada por el método del NAC activado antes de realizar la determinación de la actividad CK-MB. Si los resultados obtenidos son mayores que 1000 U/l; diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (U/l) 54.2 138.3 55.7 141.6

SD 1.45 1.33 1.62 1.39CV (%) 2.67 0.96 2.92 0.98

Sensibilidad: 1U/l = 0.00029 ΔAbs/min. Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Los procesos de hemólisis interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de CK-MB ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía 1. Abbot B et al. Creatine kinase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis.

Torronto. Princeton 1984; 1112-1116. 2. Gerhardt W et al. Clin Chem 1979 (25/7):1274-1280. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 4. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 07.2016

Cypress Diagnostics: Langdorpsesteenweg 160 • 3201 Langdorp • Belgium www.diagnostics.be • Tel: ++ 32 15 67 67 68 • e-mail: [email protected]

Creatina Kinasa MB Líq. Inmunoinhibición. Cinético U.V. Líquido.

Código HBEL05 1 x 60 ml + 1 x 15 ml

Almacenar a 2-8°C. Control incluido.

Significado clínico La CK-MB está compuesta por dos fracciones: CK-M (músculo) y CK-B (cerebro, “brain”), y se encuentra normalmente en bajas concentraciones en suero. Sus niveles aumentan en caso de infarto agudo de miocardio y más tarde descienden a niveles normales. Raramente se produce un incremento en los niveles de CK-MB en caso de daño en el músculo esquelético5,6. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Principio Un anticuerpo específico inhibe la fracción CK-M sin afectar a la fracción CK-B. La fracción CK-B representa la mitad de la fracción CK-MB, que es determinada por el método del NAC activado. La tasa de formación de NADPH es determinada fotométricamente y es proporcional a actividad CK-B de la muestra.

Composición de los reactivos Reactivo 1 Imidazol pH 6,7 ..................................................... 125 mmol/l

D-Glucosa ................................................................ 25 mmol/l N-acetilcisteína ......................................................... 25 mmol Acetato de magnesio ........................................... 12.5 mmol/l NADP+ ................................................................... 2.52 mmol/l EDTA...................................................................... 2.02 mmol/l Hexokinasa (HK) ....................................................... ≥6800 U/l

Reactivo 2 ADP ....................................................................... 15.2 mmol/l AMP .......................................................................... 25 mmol/l Diadenosina-5-P ................................................... 103 mmol/l G-6-PDH .................................................................... ≥8800 U/l Creatina-fosfato ................................................... 250 mmol/l *Anti CK-M .................................................................. 2000 U/l

Control CK Suero humano liofilizado ................................................. 2 ml Valor (ensayo a 37°C) indicado en la etiqueta

*Anti-CK-M suficiente para inhibir hasta 2000 U/l de la fracción CK-M.

Precaución El control ha sido preparado a partir de suero humano, que fue analizado y dio negativo para la presencia de HBsAg y anticuerpos contra VHC y VIH. No obstante, toda muestra de origen humano debe ser considerada potencialmente infecciosa y manipulada en consecuencia.

Preparación Reactivo de trabajo: Mezclar 4 volúmenes de R1 con 1 volumen de R2. La estabilidad del reactivo de trabajo es de 7 días a 2-8°C o 12 horas a temperatura ambiente (15-25°C). Control: Disolver el contenido en 2 ml de agua destilada. Tapar y mezclar con cuidado hasta disolver el contenido del vial. Estabilidad: 8 horas a 15-25°C, 5 días a 2-8°C o 1 mes a -20°C. Dejar que alcance temperatura ambiente unos 30 minutos antes de usar.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 340 nm es ≥1.20, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 340 nm - Baño termostático a 25°C, 30°C o 37°C (± 0.1°C)- Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero libre de hemólisis o plasma de heparina1: estabilidad de 7 días a 2-8°C, al abrigo de la luz. La actividad CK-MB disminuye un 10% tras 24 horas a 4°C o 1 hora a 25°C.

Procedimiento para el método manual 1. Longitud de onda: 340 nm. Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C. Cubetas de 1 cm de



1,0 ml 40 µl

Mezclar bien e incubar durante 10 minutos. Leer la absorbancia inicial (Abs1) de la muestra, accionar el cronómetro y leer la absorbancia tras 5 minutos (Abs2). Calcular las diferencia entre las absorbancias medidas: ∆Abs= Abs2 -Abs1

Procedimiento para CYANStart / CYANSmart 1. Longitud de onda: 340 nm. Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C. Cubetas de 1 cm de



1,0 ml 40 µl

Mezclar bien y aspirar inmediatamente. El programa siguiente se iniciará: 3 minutos de incubación y 2 minutos de medición cinética.

Cálculo Método manual: ∆Abs x 825 = U/l CK-B ∆Abs x 1651 = U/l CK-MB

CYANStart / CYANSmart / analizadores automáticos y semiautomáticos: ∆Abs/min x 4125 = U/l CK-B ∆Abs/min x 8255 = U/l CK-MB

Una unidad internacional (UI) representa la cantidad de enzima necesaria para procesar 1 µmol de sustrato por minuto en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro de muestra (U/l). Porcentaje de actividad CK-MB en la muestra: % actividad CK-MB = (actividad CK-MB / actividad CK total) x 100

Factores de conversión para diferentes temperaturas de ensayo: Temperatura de ensayo Temperatura deseada

25°C 30°C 37°C 25°C 30°C 37°C

1.00 1.53 2.38 0.65 1.00 1.56 0.42 0.64 1.00

Control de calidad Se recomienda el uso del control CK para verificar la validez del ensayo. Si los valores obtenidos no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores obtenidos no se incluyen dentro de los rangos establecidos.

Valores de referencia La probabilidad de infarto de miocardio es alta cuando se cumplen las tres condiciones siguientes: 1. La actividad CK-MB aumenta por encima de los valores indicados a continuación:

25°C. 30°C. 37°C. CK-MB > 10 U/l > 15 U/l > 24 U/l

2. La actividad CK total (CK-NAC) aumenta por encima de los valores indicados acontinuación:

CK Total 25°C. 30°C. 37°C. Hombres > 80 U/l > 130 U/l > 195 U/lMujeres > 70 U/l > 110 U/l > 170 U/l

3. La actividad CK-MB constituye el 6-25% de la actividad CK total. Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propiosrangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 1.9 U/l (límite de detección) a 318 U/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 318 U/l; diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (U/l) 33.7 166.5 31.3 161.0

SD 1.00 3.76 1.19 3.47 CV (%) 2.96 2.26 3.81 2.15

Sensibilidad: 1U/l = 0.000134 ∆Abs/min. Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales. Las características de rendimiento obtenidas dependen del analizador utilizado.

Interferencias Bilirrubina (mezcla de isómeros): Menos del 10 % de interferencia hasta 600 µmol/l de bilirrubina. Hemólisis: Menos del 10 % de interferencia hasta 1,25 g/l de hemoglobina. Lipemia: menos del 10 % de interferencia hasta 2,5 g/l intralípido Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de CK-MB ha sido publicada por Young et al3,4.

Límites del procedimiento 1. El método también medirá cualquier isoenzima CK-BB presente en el suero. La

actividad de la isoenzima es desdeñable. Sin embargo, si una cantidad significativa de actividad CK-BB está presente, la actividad CK-MB será sobreestimada.

2. Se ha observado una macroforma de BB (inmunoglobulina en complejo) que semedirá como B en el ensayo. Si la actividad CK-B medida excede el 20 % de laactividad CK total, debe sospecharse la presencia de macro BB.


Bibliografía 1. Abbot B et al. Creatine kinase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis.

Torronto. Princeton 1984; 1112-1116.2. Gerhardt W et al. Clin Chem 1979 (25/7):1274-1280. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 4. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. 7. Mathieu M. et al. Ann. Biol. Clin. 1982 (40): 87 8. Neumeier D. Et al. Clin. Chim. Acta 1976 (73) : 445

Langdorp, 07.2016



Creatina Kinasa - NAC Ensayo cinético U.V. NAC activado.

Ref. HBE04 20 x 2.5 ml

Almacenar a 2-8°C

Significado clínico La creatina kinasa (CK) juega un importante rol en el almacenamiento de energía en los tejidos del organismo, catalizando la fosforilación de creatina a creatina fosfato utilizando un grupo fosfato del ATP y generando ADP en el proceso. La CK está distribuía en diversos órganos, siendo su actividad la más elevada en músculo esquelético, corazón y cerebro en este orden. La determinación de la actividad CK permite el diagnóstico de distrofia muscular y otras enfermedades del músculo esquelético, infarto de miocardio, hipotiroidismo, y enfermedades y trastornos de la función renal. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio Determinación de la actividad creatina kinasa tras su reactivación mediante N-acetilcisteína, de acuerdo a la reacción siguiente:

CK Creatina-fosfato + ADP creatina + ATP

HK ATP + glucosa glucosa-6-P + ADP

G6PDH Glucosa-6-P + NADP+ gluconato-6-P + NADPH + H+ La tasa de formación de NADPH, medida fotométricamente, es proporcional a la actividad CK de la muestra.


Reactivo 1 Buffer

Imidazol pH 6.7 ............................. 100 mmol/lGlucosa ............................................ 20 mmol/l Acetato de magnesio ...................... 10 mmol/l EDTA ................................................... 2 mmol/

Reactivo 2 Sustrato

ADP .................................................... 2 mmol/lAMP .................................................... 5 mmol/l Diadenosina-5-P .............................. 10 mmol/l NADP .................................................. 2 mmol/l Hexokinasa (HK) ................................. 2500 U/l G-6-PDH .............................................. 1500 U/l N-acetilcisteína ............................... 20 mmol/l Creatina-fosfato .............................. 30 mmol/l

Únicamente para uso diagnóstico in vitro. Precaución Reactivo 1: H360: Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Disolver un comprimido de sustrato R2 en 2.5 ml de buffer R1. La estabilidad del reactivo de trabajo es de 10 días a 2-8°C o 3 días a temperatura ambiente.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. No utilizar si los comprimidos están fragmentados. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 340 nm es ≤ 1.00, el reactivo debe ser descartado.


Muestras Suero o plasma: estabilidad de 7 días a 2-8°C al abrigo de la luz. La actividad creatina kinasa disminuye un 10% después de 1 día a 2-5°C o de 1 hora a 15-25°C.



25-30 °C 37°CReactivo de trabajo Muestra

1 ml 40 μl

1 ml 20 μl

Mezclar bien e incubar durante 2 minutos. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto ( abs/min).

Cálculo A 25-30°C Abs/min x 4127 = U/l CK A 37°C Abs/min x 8095 = U/l CK



25°C 30°C 37°C25°C30°C 37°C

1.00 1.56 2.440.64 1.00 1.56 0.41 0.63 1.00


Sueros humanos de control para valores normales y patológicos (HBC01, HBC02) están disponibles, así como un control para CK-NAC / CK-MB (HBC08).


HombresMujeres

Hasta 80 U/l Hasta 70 U/l


Hasta 195 U/lHasta 170 U/l



Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (U/l) 144 478 146 494

SD 3,88 6,98 4,55 9,57CV (%) 2,69 1,49 3,11 1,94

Sensibilidad: 1 U/l = 0.00014 ΔAbs/min Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Concentraciones de bilirrubina hasta 20 mg/dl y de hemoglobina hasta 10 g/l no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de CK ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía Abbot B et al. Creatine kinase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1112-1116. Gerhardt W et al. Clin Chem 1979 (25/7):1274-1280. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 10.2015


Creatina Kinasa – NAC Líq Ensayo cinético U.V. NAC activado. Líquido.

Código HBEL03 1x 60ml + 1x 15 ml

Almacenar a 2-8°C

Significado clínico La creatina kinasa (CK) juega un importante rol en el almacenamiento de energía en los tejidos del organismo, catalizando la fosforilación de creatina a creatina fosfato utilizando un grupo fosfato del ATP y generando ADP en el proceso. La CK está distribuía en diversos órganos, siendo su actividad la más elevada en músculo esquelético, corazón y cerebro en este orden. La determinación de la actividad CK permite el diagnóstico de distrofia muscular y otras enfermedades del músculo esquelético, infarto de miocardio, hipotiroidismo, y enfermedades y trastornos de la función renal1,5,6. El diagnóstico clínico no se debe realizar con un solo resultado de prueba, sino que debe integrar datos clínicos y otros datos de laboratorio. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Principio Determinación de la actividad creatina kinasa tras su reactivación mediante N-acetilcisteína, de acuerdo a la reacción siguiente:

CK Creatina-fosfato + ADP Creatina + ATP

HK ATP + glucosa Glucosa-6-P + ADP

G6PDH Glucosa-6-P + NADP+ Gluconato-6-P + NADPH + H+

La tasa de formación de NADPH, medida fotométricamente, es proporcional a la actividad CK de la muestra1,2.


Reactivo 1

Imidazol pH 6.7 .............................. 125 mmol/l D-Glucosa ..........................................25 mmol/l N-acetilcisteína .................................25 mmol/l Acetato de magnesio ................... 12.5 mmol/l NADP ............................................. 2.52 mmol/l EDTA .............................................. 2.02 mmol/l Hexokinasa .......................................... 6800 U/l

Reactivo 2

ADP ................................................ 15.2 mmol/l AMP....................................................25 mmol/l Diadenosina-5-P ............................ 103 mmol/l G-6-PDH ............................................ ≥ 8800 U/l Creatina-fosfato ............................ 250 mmol/l

Preparación Mezclar 4 volúmenes de R1 con 1 volumen de R2. La estabilidad del reactivo de trabajo es de 2 semanas a 2-8°C o 48 horas a temperatura ambiente (15-25°C).

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 340 nm es ≥ 1.00, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 340 nm- Baño termostático a 25°C, 30°C o 37°C (± 0.1°C) - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero libre de hemólisis o plasma de heparina: estabilidad de 7 días a 2-8°C, al abrigo de la luz. La actividad creatina kinasa disminuye un 10% tras 24 horas a 2-5°C o de 1 hora a 15-25°C.


de camino óptico.2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

25-30 °C 37°C Reactivo de trabajo Muestra

1 ml 40 µl

1 ml 20 µl

Mezclar bien e incubar durante 2 minutos. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto (∆ abs/min).

Cálculo A 25-30°C ∆ Abs/min x 4127 = U/l CK A 37°C ∆ Abs/min x 8095 = U/l CK

Una unidad internacional (UI) representa la cantidad de enzima necesaria para procesar 1 µmol de sustrato por minuto en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro de muestra (U/l).


25°C 30°C 37°C 25°C 30°C 37°C

1.00 1.56 2.44 0.64 1.00 1.56 0.41 0.63 1.00


Sueros humanos de control para valores normales y patológicos (HBC01, HBC02) están disponibles, así como un control para CK-NAC / CK-MB (HBC08).


Hombres Mujeres






Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (U/l) 147 494 145 485

SD 1,23 3,60 2,91 8,97 CV (%) 0,84 0,73 2,01 1,85

Sensibilidad: 1 U/l = 0.00012 ∆Abs/min Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Concentraciones de glucosa hasta 7 g/l, de hemoglobina hasta 5 g/l y de triglicéridos hasta 7 mmol/l no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de CK ha sido publicada por Young et al.

Bibliografía 1. Abbot B et al. Creatine kinase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St. Louis.

Torronto. Princeton 1984; 1112-1116. 2. Gerhardt W et al. Clin Chem 1979 (25/7):1274-1280. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 4. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.7. Mathieu M. et coll. Recommandation pour la mesure de la concentration catalytique

de la créatinine kinase dan la sérum humain. Ann. Biol. Clin.,40, (1482), 87. Langdorp, 02.2016



Creatinina Ensayo cinético. Jaffé sin desproteinización.

Ref. HB0080 2 x 125 ml

Almacenar a 2-25°C. Líquido. Estándar incluído.

Significado clínico La mayor parte de la creatinina se produce en el tejido muscular a partir de creatina fosfato, una molécula que sirve como reservorio de alta energía para la generación de ATP. En este proceso de generación de ATP se genera creatinina como producto de desecho, que es transportada al riñón y subsecuentemente eliminada. La concentración de creatinina en suero es independiente de la dieta y depende casi exclusivamente de su tasa de excreción por los riñones. Por ello, elevados niveles séricos de creatinina se asocian a patologías renales. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio En medio alcalino, las moléculas de creatinina de la muestra unen el ácido pícrico en solución para dar lugar a complejos coloreados de color rojizo, como está descrito por Jaffé. El incremento de absorbancia resultante en intervalos de tiempo predeterminados es proporcional a la concentración de creatinina de la muestra. Los intervalos de tiempo escogidos para la medición evitan interferencias de otras moléculas presentes en suero.

Composición de los reactivos Reactivo 1 Reactivo de ácido pícrico Solución de ácido pícrico ........................ 25 mmol/l

Reactivo 2 Reactivo alcalino Hidróxido sódico ..................................... 0,29 mol/l Estándar Creatinina, solución acuosa ....................... 2 mg/dl


Precaución Reactivo 1: EUH001: Explosivo en estado seco. H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. Reactivo 2: H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. Estándar: H290: Puede ser corrosivo para los metales. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Mezclar los reactivos R1 (solución de ácido pícrico) y R2 (reactivo alcalino) en una proporción de 1:1 en volumen. La solución de trabajo es estable durante 10 días a 15-25°C.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-25°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con cuidado para evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 505 nm es ≥ 1,80, el reactivo debe ser descartado.


Muestras Utilizar muestras de suero o plasma heparinizado. La creatinina es estable durante 24 horas a 2-8°C. Utilizar orina diluida a 1:50 con agua destilada y multiplicar los resultados obtenidos por 50. La creatinina en orina es estable durante 7 días a 2-8°C.


de 1 cm de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco Estándar MuestraEstándar Muestra Reactivo de trabajo

--- --- 1 ml

100 μl --- 1 ml

--- 100 μl 1 ml

Mezclar bien y accionar el cronómetro. Leer la Abs. 1 tras 30 segundos la Abs. 2 tras 90 segundos desde la adición de la muestra.

Cálculo Calcular el incremento de absorbancia: ΔAbs. = (Abs. 2- Abs. 1). Suero y plasma:

)estándar conc.(xEstándarΔAbsMuestraΔAbs

)dl/mg(Creatinina 2

Orina 24h:

paciente del (kg) Peso*fx 24horina(dl) Volumen

x)estándar conc.(xEstándar ΔAbsMuestraΔAbs

)h/kg/mg(Creatinina 224

*f = factor de dilución Factor de conversión: mg/dl x 88,4 = μmol/l Control de calidad Se recomienda el uso de sueros de control para verificar la validez del ensayo. Si los valores obtenidos no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores obtenidos no se incluyen dentro de los rangos establecidos.


Valores de referencia Suero o plasma Hombres 0,7 – 1,4 mg/dl ≈ 61,8 – 123,7 μmol/l Mujeres 0,6 – 1,1 mg/dl ≈ 53 – 97,2 μmol/l Orina: Hombres 10 – 20 mg/kg/24h ≈ 88 – 177 μmol/kg/24h Mujeres 8 – 18 mg/kg/24h ≈ 71 – 77 μmol/kg/24h Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 0,115 mg/dl (límite de detección) a 15 mg/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 15 mg/dl; diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (mg/dl) 1,07 3,47 1,05 3,41

SD 0,021 0,04 0,018 0,052CV (%) 1,99 1,17 1,68 1,53

Sensibilidad: 1 mg/dl = 0,0288 Abs/min Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales. Las características de rendimiento obtenidas dependen del analizador utilizado.

Interferencias Concentraciones de hemoglobina de hasta 22 mg/dl y de ácido ascórbico hasta 34 mg/dl no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de creatinina ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía Murray R.L. Creatinine. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1261-1266 and 418. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 4th ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 4th ed AACC 1995. Langdorp, 07.2016



γ-GT Líq. (Gama-glutamil transferasa)

Ensayo cinético. Carboxi sustrato. Líquido

Ref. HBEL06 1 x 240 + 1 x 60 ml Ref. HBEL061 1 x 60 + 1 x 15 ml

Almacenar a 2-8°C

Significado clínico La gama-glutamil transferasa es miembro de un gran grupo de enzimas conocidas como peptidasas. Las peptidasas son enzimas que catalizan la hidrólisis de péptidos para liberar aminoácidos y péptidos de menor tamaño. La γ-GT cataliza la transferencia de radicales γ-glutamilo de péptidos o compuestos similares a un péptido aceptor. Aunque los mayores niveles de γ-GT se encuentran en el tejido renal, la principal fuente de enzima en suero es principalmente el hígado. Niveles elevados de γ-GT se asocian a trastornos hepaticobiliares y pancreáticos, una tasa de consumo de alcohol elevada o alcoholismo, enfermedades de miocardio, y diabetes. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La determinación cinética de la actividad γ-glutamil transferasa tiene lugar como indica la reacción siguiente: γ-GT L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitranilida + glicilglicina L-γ-glutamil-glicilglicina + 5-amino-2-nitrobenzoato La tasa de formación de 5-amino-2-nitrobenzoato, que es medida fotométricamente, es proporcional a la actividad γ-GT de la muestra.


Buffer TRIS pH 8,6 .................................................... 100 mmol/l Glicilglicina ............................................................... 100 mmol/l

Reactivo 2 Sustrato

L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitranilida ........................... 3 mmol/l


Preparación Mezclar 4 volúmenes de R1 (buffer) con 1 volumen de R2 (sustrato). La solución de trabajo es estable durante 21 días a 2-8°C o 5 días a temperatura ambiente (15-25°C).

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 405 nm es ≥ 1.80, el reactivo debe ser descartado.


Muestras Suero: la actividad γ-GT es estable como mínimo 3 días a 2-8°C, 8 horas a 15-25°C o 1 mes a -20°C.




1.0 ml 0.1 ml

Mezclar bien e incubar durante 1 minuto. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto (∆ abs/min).

Cálculo γ-GT (U/l) = ∆Abs/min x 1190



25°C 30°C 37°C 25°C 30°C 37°C

1.00 1.37 1.79 0.73 1.00 1.30 0.56 0.77 1.00



Valores de referencia 25°C. 30°C. 37°C. Mujeres Hombres

4-18 U/l 6-28 U/l

5-25 U/l 8-38 U/l

7-32 U/l 11-50 U/l


Características del ensayo Rango de medición: de 2 U/l (límite de detección) a 300 U/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 300 U/l; diluir la muestra a 1:10 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 10. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (U/l) 38,3 190 40,1 198

SD 0,39 0,53 0,82 2,30 CV (%) 1,03 0,28 2,05 1,16


Interferencias No utilizar plasma, puesto que los anticoagulantes inhiben esta actividad enzimática. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de γ-GT ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía Gendler S. γ-GT. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1220-1123 Persijn J P et al. J Clin Chem Biochem 1976; (14) 9: 421-427. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 10.2015



Glucosa Líq Test enzimático colorimétrico. GOD-POD. Líquido. Ref. HBL04 2 x 125 ml HBL05 1 x 1000 ml

Almacenar a 2-8°C. Estándar incluido.

Significado clínico La glucosa es el principal carbohidrato presente en la circulación periférica y su oxidación de glucosa constituye la principal fuente de energía para las células del organismo. Las determinaciones de glucosa se llevan a cabo principalmente como auxilio para el diagnóstico y tratamiento de diabetes mellitus. Elevados niveles de glucosa pueden estar asimismo asociados con pancreatitis o alteraciones de la función pituitaria o de la tiroides, fallo renal y patologías hepáticas; mientras que niveles bajos de glucosa se relacionan con insulinoma, hipopituitarismo, neoplasias, o hipoglucemia inducida por insulina. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La glucosa es oxidada por la enzima glucosa oxidasa (GOD) a ácido glucónico y peróxido de hidrógeno (H2O2), el cual es detectado por un aceptor de oxígeno cromogénico, la fenol-4-aminoantipirina, en presencia de peroxidasa (POD).

GOD Glucosa + O2 + H2O H2O2 + Ácido glucónico

POD H2O2 + Fenol + 4-AP Quinona + 4H2O

La intensidad del color resultante es proporcional a la concentración de glucosa de la muestra.


Reactivo

Buffer fosfato pH 7,4 ..................... 13 mmol/l Clorofenol ..................................... 7,3 mmol/l Glucosa Oxidasa(GOD) ................... 11500 U/l Peroxidasa (POD) ............................... 750 U/l 4-Aminoantipirina ........................ 0,3 mmol/l

Estándar Solución acuosa de glucosa .......... 100 mg/dl



Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan firmemente cerrados, al abrigo de la luz y se previenen contaminaciones durante su uso. Manipular el estándar muy cuidadosamente a fin de evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o la presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 505 nm es ≥0,32, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 505 (490-550) nm - Cubetas de 1,0 cm de camino óptico - Equipamiento habitual de laboratorio

Muestras Suero o plasma no hemolizados. El suero debe ser separado del coágulo lo antes posible. Las concentraciones de glucosa se mantienen estables durante 3 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda de 505 (490-550) nm; temperatura de 37°C;

cubetas de 1 cm de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada.

3. Pipetear en una cubeta: Blanco Estándar Muestra

EstándarMuestra Reactivo

------ 1,00 ml

10 μl --- 1,00 ml

---10 μl 1,00 ml

Mezclar bien e incubar 15 minutos a 37°C. Leer la absorbancia (Abs) de la muestra y el estándar contra el blanco. El color es estable 45 minutos como mínimo.

Cálculo

estándar) . (conc 100 x BlancoAbsEstándarAbsBlancoAbsMuestraAbs

(mg/dl) Glucosa


Control de calidad Se recomienda el uso de sueros de control para verificar la validez del ensayo. Si los valores de los controles no se encuentran dentro de los rangos establecidos, comprobar si el instrumento, los reactivos o el calibrador presentan problemas. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores de los controles obtenidos no se incluyen dentro de los rangos establecidos. Sueros humanos de control para valores normales y patológicos (HBC01, HBC02) están disponibles.

Valores de referencia Suero o plasma: 60 – 110 mg/dl 3,33 – 6,105 mmol/l Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 1,18 mg/dl (límite de detección) a 600 mg/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 600mg/dl, diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media(mg/dl) 94,8 252 92,1 255

SD 1,78 3,51 1,26 5,31CV (%) 1,88 1,39 1,37 1,87

Sensibilidad: 1 mg/dl = 0,005 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Concentraciones de hemoglobina de hasta 4 g/l y de bilirrubina hasta 22 mg/dl no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de glucosa ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía Kaplan L.A. Glucose. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1032-1036 Trinder P. Ann. Clin. Biochem.1969, 6: 24-33 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 11.2015


GOT (ast) Líq. Ensayo cinético U.V. Según IFCC. Líquido.

Ref. HBEL010 1 x 240 ml + 1 x 60 ml

Almacenar a 2-8°C.

Uso previsto Determinación cuantitativa de GOT (AST) en suero o plasma humano. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Significado clínico La aspartato aminotransferasa (AST), también conocida como glutamato oxalacetato transaminasa (GOT), es una enzima que cataliza el intercambio de radicales amino y ceto entre α-aminoácidos y α-cetoácidos. La AST está ampliamente distribuida en los tejidos cardiaco, hepático, muscular y renal. Por tanto, la lesión de estos tejidos provoca la liberación de la AST (GOT) al torrente circulatorio. Tras sufrir un infarto de miocardio, los niveles séricos de AST (GPT) del paciente se incrementan hasta alcanzar un pico a las 48-60 horas. Enfermedades hepáticas y biliares tales que cirrosis, carcinomas metastatizados y hepatitis viral producen asimismo un incremento de los niveles de AST en suero. A pesar de que una concentración sérica elevada de AST no indica específicamente enfermedad hepática, su determinación se realiza principalmente para diagnosticar y llevar a cabo el seguimiento de esta patología junto con la determinación de otras enzimas como la ALT (GPT) y la ALP 1,4,5. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio Determinación cinética de la actividad GOT (AST) de acuerdo con la reacción siguiente:

AST -cetoglutarato + L-aspartato Glutamato + Oxalacetato

MDH Oxalacetato + NADH + H+ Malato + NAD+

La tasa de consumo de NADH, determinada fotométricamente, es directamente proporcional a la actividad GOT(AST) de la muestra1.


Buffer TRIS pH 7,8 ......................................... 100 mmol/l Lactato deshidrogenasa (LDH) ....................... 2500 U/l Malato deshidrogenasa (MDH) ....................... 1000 U/l L –Aspartato ................................................... 300 mmol/l

Reactivo 2 Sustrato

NADH .................................................................... 1 mmol/l -cetoglutarato ............................................... 80 mmol/l


Preparación Mezclar 4 volúmenes de R1 (buffer) con 1 volumen de R2 (sustrato). La solución de trabajo es estable durante 24 horas a 15-25°C o 14 días a 2-8°C.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 340 nm es < 1.00, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 340 nm - Baño termostático a 25°C, 30°C o 37°C (± 0.1.°C)- Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero o plasma: estabilidad de 2 días a 2-8°C6. Se recomienda un ayuno de al menos 12 horas antes de la recolección de muestras.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 340 nm. Temperatura: 25°C, 30°C o 37°C. Cubetas de 1 cm

de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada o aire.3. Pipetear en una cubeta:


1.0 ml 0.1 ml

Mezclar bien e incubar durante 1 minuto. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto ( abs/min).

Cálculo GOT (AST) (U/l) = Abs/min x 1750Note 1



25°C 30°C 37°C 25°C 30°C 37°C

1.00 1.37 2.080.73 1.00 1.540.48 0.65 1.00




Hombres Mujeres






Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (mg/l) 48.77 142.58 47.57 142.6

SD 0.65 0.77 1.581 2.203CV (%) 1.32 0.54 3.323 1.545


Interferencias Anticoagulantes de uso habitual en la actualidad como la heparina, el EDTA, el oxalato y el fluoruro no interfieren con el ensayo, ni lo hacen concentraciones de hemoglobina de hasta 48 mg/dl. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de AST ha sido publicada por Young et al. La hemólisis y la lipaemia interfieren con el ensayo.

Notas El factor se basa en las condiciones oficiales de IFCC. Para obtener resultados más precisos, recomendamos utilizar un calibrador de suero (HBC03) en lugar de un factor. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics (CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos que utilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puede descargarse las fichas de automatización de nuestra página web (www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía 1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St

Louis. Torronto. Princeton 1984; 1112-1116 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 3. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.6. Rifae N.,Horvath A.R. and Wittwer C.T. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular

Diagnostics, 6th ed. AACC Press 2018. 7. Nikolac. N. Biochemia Medica. 2014, 24: 57-67.

02.2018, Rev. 4.0


Hemoglobina Estándar

Código HBS02 1 x 1 ml

Almacenar a 2-8°C

Uso destinado El estándar es para la determinación de la concentración de hemoglobina en sangre humana. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Reactivos Sangre animal, estabilizada. Concentración: 15 g/dl.

Precauciones El estándar no contiene componentes de origen humano. Sin embargo, se recomienda manipularlo con el debido cuidado. H412: Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. P273: Evitar su liberación al medio ambiente. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes

Preparación El estándar está listo para usar.

Almacenamiento y estabilidad El estándar es estable a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados y se previene su contaminación durante su uso.

05.2018, Rev. 4.0


Δ


Hemoglobina Drabkin. Ensayo colorimétrico.

Ref. HB011 4 x 5 ml (conc.)

Almacenar a 2-8°C. Líquido.

Uso previsto Determinación cuantitativa de la concentración de hemoglobina en muestras Sangre capilar o venosa. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Significado clínico La hemoglobina es una ferroproteína porfirínica que transporta oxígeno de los pulmones a los tejidos, donde es utilizado en el metabolismo energético. La medición de hemoglobina en sangre de origen venoso o capilar se emplea para la detección de diversas condiciones que alteran los niveles normales de hemoglobina en sangre, por ejemplo anemia o policitemia. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La hemoglobina es oxidada por ferricianuro potásico a metahemoglobina, la cual es convertida en cianometahemoglobina por acción de cianuro de potasio. La absorbancia de la solución resultante de cianometahemoglobina es proporcional a la concentración de hemoglobina de la muestra.

Composición de los reactivos Reactivo 1 Fosfato potásico dihidrógeno ......................... 2,00 mmol/l

Ferricianuro potásico ....................................... 0,60 mmol/lCianuro potásico ...................................................77 mmol/l

Estándar de hemoglobina HBS02 no incluido

Origen animal............................................................. 15 g/dl

Únicamente para uso diagnóstico in vitro. Precaución: Reactivo 1: H301+H311+H331: Tóxico en caso de ingestión, en contacto con la piel o en caso de inhalación. H412: Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes. Estándar: H412: Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes. El estándar no contiene componentes de origen humano. Sin embargo, se recomienda manejarlo con el debido cuidado.

Preparación Reactivo de trabajo: - 4,9 ml agua destilada + 2 gotas de reactivo, mezclar bien. O - 245 ml de agua destilada + 5 ml de reactivo, mezclar bien. El reactivo de trabajo es estable durante 2 meses a 2-8°C si es conservado al abrigo de la luz. El estándar de hemoglobina (HBS02) está listo para su uso.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 540 nm es ≥ 0.01, el reactivo debe ser descartado. El estándar de hemoglobina (HBS02) es estable a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacena bien cerrado, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso.


Muestras Sangre capilar o venosa. Utilizar EDTA, heparina u oxalato como anticoagulante. Estabilidad: 7 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 540 nm. Temperatura: 15-25°C. Cubetas de 1 cm de

camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada.

3. Pipetear en una cubeta: 3.

MACROMÉTODO Blanco Muestra EstándarReactivo de trabajoMuestra Estándar

5 ml--- ---

5 ml 20 μl ---

5 ml--- 20 μl

MICROMÉTODO Blanco Muestra EstándarReactivo de trabajoMuestra Estándar

2,5 ml --- ---

2,5 ml 10 μl ---

2,5 ml--- 10 μl

Mezclar bien e incubar durante 3 minutos a temperatura ambiente (15-25°C). Leer la absorbancia (Abs) contra el blanco.

Cálculo Con factor: Conc. hemoglobina (g/dl) = 36,77 x Abs

Con estándar:

estándar) (conc. 15 x BlancoAbsEstándarAbsBlancoAbsMuestraAbs

(g/dl) aHemoglobin

Control de calidad Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores obtenidos no se incluyen dentro de los rangos establecidos.

Valores de referencia

Hombres: .................................................................... 14–18 g/dl (8,7 – 11,2 mmol/l) Mujeres: ......................................................................... 12–16 g/dl (7,5 – 9,9 mmol/l)


Características del ensayo Rango de medición: de 0.1 g/dl (límite de detección) a 20 g/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 20 g/dl; diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (g/dl) 8,00 15,2 7,81 15,1SD 0,29 0,33 0,19 0,26CV (%) 3,59 2,19 2,51 1,74

Sensibilidad: 1 g/dl = 0,027 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado

Interferencias Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de hemoglobina ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía 1. Franco R.S. Hemoglobin. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto.

Princeton 1984; 1294-1296 and 418 2. Van Kampen E.J. et al. Standardization of hemoglobinometry. Clin. Chem. 1961; 6: 438-

544. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 4. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. 05. 2018, Rev. 10.0



Hemoglobina glicada A1c

Ensayo cromatográfico-espectrofotométrico Método de intercambio iónico

Ref. HB031 20 tests Almacenar a 15-30°C.

Uso destinado Determinación cuantitativa de hemoglobina glicada A1c en muestras humanas de sangre entera. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Significado clínico La diabetes mellitus es una enfermedad crónica cuya principal característica es la hiperglicemia, lo cual lleva a trastornos del metabolismo de glúcidos, lípidos y proteínas. Los pacientes diabéticos que no se encuentren bajo control metabólico corren un mayor riesgo de padecer complicaciones tales que nefropatías, retinopatías y enfermedades cardiovasculares. Las individuos con diabetes poseen los niveles de glucosa en sangre constitutivamente más elevados de lo normal, lo que produce la formación de hemoglobina HbA1c como consecuencia de la glicosilación no enzimática del extremo N-terminal de la cadena polipeptídica β de la hemoglobina. La concentración de HbA1c es por tanto proporcional a los niveles de glucosa en sangre y de hecho está ampliamente aceptada como indicador de la concentración de glucosa diaria media durante las 6-8 semanas precedentes. Los niveles de HbA1c son por consiguiente un indicador para el control de la diabetes a largo plazo, mientras que los niveles de glucosa en sangre sólo representan un indicador a corto plazo. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio Tras la preparación del hemolisado, donde la facción lábil es eliminada, las hemoglobinas son retenidas por una resina de intercambio iónico. La elución específica de la hemoglobina HbA1c tiene lugar tras la eliminación mediante lavado de la fracción Hb1a+b; y es subsiguientemente cuantificada por medición fotométrica directa a 415 nm. Para calcular el porcentaje de HbA1c se necesitan dos parámetros: la absorbancia de la fracción HbA1c y la absorción de la hemoglobina (Hb) total.

Composición de los reactivos Nota 6

Reactivo 1 (1x6 ml)

Biftalato potásico .................................................... 50 mmol/lDetergente, pH 5.0

Reactivo 2 (1x 47 ml)

Buffer fosfato, pH 6.5 ............................................. 48 mmol/lAzida sódica .................................................................0.95 g/l

Reactivo 3 (2x180 ml)

Buffer fosfato, pH 6.4 ............................................. 72 mmol/lAzida sódica .................................................................0.95 g/l

Reactivo 4 20 udds.

Microcolumnas: contienen una cantidad predeterminada de resina equilibrada con buffer fosfato.

Preparación Los reactivos están listos para su uso. Dejar que la columna y los reactivos alcancen temperatura ambiente (21-26°C) algunos minutos antes de proceder a su utilización Nota 1.

Preparación de las columnas Notas 2,3: siempre sacar en primer lugar el tapón de la parte superior de la columna y luego el de la parte inferior. Presionar suavemente el disco superior hasta que contacte con la resina, con cuidado de no comprimirla. Dejar que la columna escurra y descartar el eluyente resultante.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 15-30°C hasta la fecha de caducidad especificada.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 415 nm - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Tubos de ensayo (16x160 mm) - Equipamiento general de laboratorio

Muestras Sangre entera con heparina o EDTA. Estabilidad de 7 días a 2-8°C como mínimo.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 415 (405-425) nm. Temperatura: 21-26°C. Cubetas de 1

cm de camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Preparación del hemolisado y eliminación de la fracción lábil

Pipetear en un tubo de ensayo: Sangre 50 μl Reactivo 1 200 μl Agitar vigorosamente e incubar a temperatura ambiente durante 10-15 minutos. El hemolisado será utilizado en los pasos 5 y 6.

4. Preparar una columna: ver preparación. 5. Separación y lectura de la HbA1c Nota 4:

Pipetear cuidadosamente sobre el filtro superior: Hemolisado 50 μl Dejar escurrir la columna y descartar el

eluyente resultante. Para eliminar todo residuo de la muestra remanente en el disco superior, pipetear:

Reactivo 2Nota 5 200 μl Dejar escurrir la columna y descartar el eluyente resultante.

Para eliminar la fracción “no HbA1c”, pipetear:

Reactivo 2Nota 5 2.0 ml Dejar escurrir la columna y descartar el eluyente resultante.

Para la elución de la fracción HbA1c, colocar la columna sobre un tubo de ensayo (16x100 mm) y agregar:Reactivo 3 4.0 ml Recolectar el eluyente (fracción HbA1c)Agitar vigorosamente y leer la absorbancia (Abs) de la fracción HbA1c a 415 nm contra agua destilada (AbsHbA1c)

6. Lectura de la Hb total

Pipetear en un tubo de ensayo (16x160 mm): Reactivo 3 12.0 ml Hemolisado 50 μl Agitar vigorosamente y leer la absorbancia (Abs) a 415 nm contra agua destilada (AbsHbTOTAL)

Cálculo %HbA1c (CYPRESS) = AbsHbA1c / (3 x AbsHbTOTAL) x100

Factor de conversión: %HbA1c (NGSP) = 0.86 x [%HbA1c (CYPRESS)] + 0.24 NGSP = National Glycohemoglobin Standarization Program

mmol HbA1c / mol HbTOTAL (IFCC) = 0.94 x [%HbA1c (CYPRESS)] – 2.9 IFCC = International Federation of Clinical Chemistry.

Valores de referencia Rango de valores normales: 4.2 – 6.2 % (CYPRESS) Pacientes diabéticos bien controlados: 6.7 – 9.1 % (CYPRESS) Pacientes diabéticos no controlados > 9.1 % (CYPRESS)


Control de calidad Se recomienda el uso de sangre de control para verificar la validez del ensayo. Corresponde a cada laboratorio establecer sus protocolos de control de calidad y acciones correctivas si los valores de los controles no se incluyen dentro de los rangos establecidos.

Características del ensayo Rango de medición: de 4.0% (NGSP) / 20 mmol/mol (IFCC) (límite de detección) hasta como mínimo 17.0% (NGSP) / 162 mmol/mol (IFCC). Precisión:

NGSP Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (%) 5.7 9.2 5.7 9.2CV (%) 0.80 0.80 2.3 1.9

IFCC Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (mmol/mol) 39 77 39 77

CV (%) 1.20 1.00 3.70 2.50Sensibilidad: 1 mmol/l HbTOTAL = 0.00905 Abs 1 mmol/l HbA1c = 1.19 Abs Interferencias: Las siguientes sustancias no interfieren con la determinación de HbA1c a las concentraciones indicadas: 60 mg/dl bilirrubina, 6 g/l triglicéridos y < 750 UI/ml factor reumatoide. Algunas drogas y otras sustancias pueden interferir4. Otras variantes de hemoglobina como HbE, HbF, carbamil-Hb y acetil-Hb pueden interferir con el ensayo5,6.

Notas 1. Los valores obtenidos son independientes de la temperatura si el ensayo se

realiza dentro del rango de temperaturas recomendado (21-26°C). Si la temperatura de trabajo está fuera de este rango, multiplicar el valor obtenido por el factor correspondiente de los mostrados a continuación: Temperatura de trabajo Factor 18°C 1.29 19°C 1.18 20°C 1.12 27-30°C 0.91

2. El almacenamiento de las columnas a largo plazo conlleva una compactación excesiva de la resina, lo que disminuye el flujo e incrementa la duración del paso de elución. Para recuperar la eficiencia de flujo es recomendable hacer lo siguiente 10 minutos antes de llevar a cabo el ensayo: invertir las columnas para resuspender su contenido, colocarlas de nuevo en posición vertical y dejar que la resina se deposite durante algunos minutos.

3. Las columnas pueden ser utilizadas una única vez. No reutilizar. 4. Ocasionalmente pueden aparecer burbujas de aire en la matriz de la resina.

Su presencia no afecta el rendimiento del test. 5. Durante el paso 5 y para todos los reactivos, todo el volumen de reactivo

debe atravesar completamente la columna por acción de la gravedad antes de añadir el siguiente reactivo o continuar con el protocolo. La columna debe mantenerse siempre en posición vertical. La realización del paso 5 completo lleva más de una hora.

6. El reactivo 2 debe ser adicionado 2 veces: primero 200 μl y a continuación 2 ml, una vez que el primer volumen ha atravesado la columna completamente y ha sido descartado. No pipetear 2.2 ml de una vez.

7. Usar únicamente columnas y reactivos 2 y 3 con el mismo número de lote.

Referencias 1. Bisse E, Abraham EC. J Chromatolog 1985; 344:81-91 2. Tietz NW. Clinical guide to laboratory tests, 3rd ed. Saunders Co., 1999 3. N. Engl. J. Med. 1993; 329: 977-986 4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press, 1995 5. Roberts WL et al. Clin. Chem. 2002; 48: 383-385 6. Bry L. et al. Clin Chem 2001; 47:153-163 01.2017, Rev. 6.0


Hierro Test colorimétrico. “Ferrozina”

Código HB012 4 x 50 ml

Almacenar a 2-8°C. Estándar incluido. Ver también determinación de TIBC, código HB017.

Uso destinado Determinación cuantitativa de hierro en suero humano o plasma heparanizado. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Significado clínico El contenido de hierro del cuerpo humano puede dividirse en tres clases: hierro en almacenamiento, hierro en uso y hierro en transporte. Los aumentos en los niveles de hierro en suero podrían indicar un aumento en la destrucción de eritrocitos, disminución en la formación de eritrocitos, aumento en la absorción o defectos en la capacidad de almacenamiento. La disminución de los niveles de hierro en suero podría indicar deficiencia de hierro o incapacidad para recuperar el hierro almacenado. La capacidad de fijación del hierro suele aumentar en la anemia ferropénica y disminuir en la hemocromatosis, las neoplasias malignas, la fiebre reumática, las enfermedades de Hodgkin y las enfermedades vasculares del colágeno. El diagnóstico clínico no se debe realizar con un solo resultado de prueba, sino que debe integrar datos clínicos y otros datos de laboratorio.

Principio El hierro en suero está ligado a la transferrina. En la acidez débil, el hierro se disocia de este complejo y las proteínas séricas permanecen en solución. Después de la reducción con ascórbico, el hierro se convierte en un complejo por el reactivo de color específico de la ferrozina.

Transferrina (Fe 3+)2 + e- Ácido ascórbico 2 Fe2+ + Transferrina

Fe2+ Ferrozina Complejo coloreado

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hierro.

Composición del reactivo Reactivo 1 Buffer Acetato pH 4,9 .............................................. 100 mmol/l

Reactivo 2 Reductor Ácido ascórbico .................................................... 99.7%

Reactivo 3 Color Ferrozina ......................................................... 40 mmol/l

Estándar Hierro acuoso ................................................... 100 µg/dl

Preparación Añadir el contenido de un tubo R2 reductor a los contenidos de una botella R1 buffer. Tapar y agitar suavemente hasta disolver su contenido. La estabilidad del reactivo de trabajo es de 3 meses a 2-8°C o 1 mes a temperatura ambiente (15-25°C).

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar muy cuidadosamente para prevenir su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados o si la absorbancia del blanco a 562 nm es ≥ 0.020, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 562 nm - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio (nota 1)

Muestra Suero o plasma heparinizado. Libre de hemólisis y separado de las células lo más rápidamente posible. El hierro es estable durante 7 días a 2-8 °C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 562 nm (530-590); Temperatura: 37°C/15-25°C;


Reactivo blanco

Estándar blanco Estándar Muestra

blanco Muestra

Estándarnota 2 Muestra Agua destilada Reactivo de trabajo R3

--- --- 200 µl 1,0 1 gota

200 µl --- --- 1,0 ml ---

200 µl --- --- 1,0 ml 1 gota

--- 200 µl --- 1,0 ml ---

--- 200 µl --- 1,0 ml 1 gota

Mezclar y esperar 5 minutos a 37 ° C o 10 minutos a temperatura ambiente. Leer la absorbancia (Abs) de estándar y muestra contra blanco estándar / de muestra. El color es estable por al menos 30 minutos.

Cálculo

Hierro (µg/dl) = Abs Muestra - Abs Blanco de muestra x 100 (conc. estándar) Abs Estándar - Abs Blanco Estándar

Factor de conversión: µg/dl x 0.179= µmol/l.


Valores de referencianota 3

Hombres: 65-175 µg/dl (11.6 – 31.3 µmol/l). Mujeres: 40-150 µg/dl (7.16 – 26.85 µmol/l).

Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia

Características del ensayo Rango de medición: de 0,850 µg/dl (límite de detección) a 1000 µg/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 1000 µg/dl, diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2 Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (µg/dl) 113 250 111 249

SD 0.89 0.72 3.51 6.29 CV (%) 0.79 0.29 3.17 2.52

Sensibilidad: 1 µg/dl = 0.00104 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Las muestras hemolizadas son rechazadas. Una lista de drogas y otras sustancias interferencias con la determinación de hierro ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. Se recomienda usar material desechable. Si se usa material de vidrio, el

material se debe remojar durante 6 horas en HCl diluido (20 % v/v) y luegoenjuagarlo completamente con agua destilada y secarlo antes de usarlo.

2. La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos ensistemas automatizados. En estos casos, se recomienda el uso de sueros decalibración (HBC03).

3. Los valores de referencia dependen considerablemente del método.4. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics

(CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos queutilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puededescargarse las fichas de automatización de nuestra página web(www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía 1. Perotta G. Iron and iron-binding capacity. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St

Louis. Torronto. Princeton 1984; 1063-1065 2. Itano M.M.D. Cap Serum Iron Survey 1978, 70: 516-522 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 4. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.

02.2018, Rev. 9.0



LDH (Lactato deshidrogenasa)

Test cinético U.V. DGKC.


Almacenar a 2-8°C.

Significado clínico La lactato deshidrogenasa (LDH) está distribuida en muchos de los tejidos del organismo, en particular corazón, hígado, músculo y riñones. Los niveles de LDH en el torrente circulatorio son una mezcla de cinco isozimas diferentes. Los niveles de LDH en suero son elevados en caso de infarto de miocardio, enfermedad hepática, trastornos renales, algunos tipos de anemia, neoplasias y distrofia muscular progresiva. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La LDH cataliza la reducción de piruvato utilizando NADH, como se muestra en la reacción siguiente: LDH Piruvato + NADH + H+ Lactato + NAD+

La tasa de consumo de NADH es medida fotométricamente y es directamente proporcional a la actividad LDH de la muestra.


Imidazol ..........................................................65 mmol/lPiruvato .......................................................... 0,6 mmol/l

Reactivo 2 Sustrato

NADH ............................................................0,18 mmol/l

Únicamente para uso diagnóstico in vitro. Precaución Reactivo 1: H360: Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Disolver un comprimido de sustrato R2 en 3 ml de buffer R1. Tapar y agitar suavemente hasta disolver su contenido. La estabilidad del reactivo de trabajo es de 2 días a 2-8°C o 12 horas a temperatura ambiente (15-25°C).

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. No utilizar los comprimidos si están fragmentados. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 340 nm es < 1.00, el reactivo debe ser descartado.


Muestras Suero, separado de la fracción celular lo antes posible. No emplear oxalatos como anticoagulantes porque inhiben esta actividad enzimática. No utilizar muestras hemolizadas. La actividad LDH en suero es estable durante 2 días a 2-8°C.



25-30 °C 37°CReactivo de trabajo Muestra

3,0 ml100 μl

3,0 ml50 μl

Mezclar bien e incubar durante 1 minuto. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto (Abs/min).

Cálculo A 25-30°C LDH (U/l) = ΔAbs/min x 4925 A 37°C LDH (U/l) = ΔAbs/min x 9690 Una unidad internacional (UI) representa la cantidad de enzima necesaria para procesar 1 μmol de sustrato por minuto en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro de muestra (U/l).


25°C 30°C 37°C25°C30°C 37°C

1.00 1.33 1.920.75 1.00 1.43 0.52 0.70 1.00




120-240 U/l 160-320 U/l 230-460 U/l Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 2 U/l (límite de detección) a 1500 U/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 1500 U/l; diluir la muestra a 1:10 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 10.


Media (U/l) 388 731 402 757SD 7.44 12.49 12.45 16.96

CV (%) 1.92 1.71 3.10 2.24

Sensibilidad: 1 U/l = 0.00010 ΔAbs/min Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Los procesos de hemólisis interfieren con el ensayo. Algunos anticoagulantes como los oxalatos interfieren con la reacción de determinación de LDH. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de LDH ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía Pesce A. Lactate dehydrogenase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1124-1127, 438. Persijn J P et al. J Clin Chem Biochem 1976; (14) 9: 421-427. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 02.2016


LDH Líq. (Lactato deshidrogenasa)

Test cinético U.V. DGKC. líquido

Code HBEL04 1 x 240 ml + 1 x 60 ml Code HBEL041 1 x 60 ml + 1 x 15 ml

Almacenar a 2-8°C.

Significado clínico La lactato deshidrogenasa (LDH) está distribuida en muchos de los tejidos del organismo, en particular corazón, hígado, músculo y riñones. Los niveles de LDH en el torrente circulatorio son una mezcla de cinco isozimas diferentes. Los niveles de LDH en suero son elevados en caso de infarto de miocardio, enfermedad hepática, trastornos renales, algunos tipos de anemia, neoplasias y distrofia muscular progresiva1,4,5. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Principio La LDH cataliza la reducción de piruvato utilizando NADH, como se muestra en la reacción siguiente:

LDH Piruvato + NADH + H+ Lactato + NAD+

La tasa de consumo de NADH es medida fotométricamente y es directamente proporcional a la actividad LDH de la muestra1.


Imidazol........................................................... 65 mmol/l Piruvato .......................................................... 0,6 mmol/l

Reactivo 2 Sustrato

NADH ............................................................ 0,18 mmol/l

Preparación Mezclar 4 volúmenes de R1 (buffer) con un volumen de R2 (sustrato). La estabilidad del reactivo de trabajo es de 15 días a 2-8°C o 5 días a temperatura ambiente (15-25°C).

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 340 nm es < 1.00, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 340 nm- Baño termostático a 25°C, 30°C o 37°C (± 0.1°C) - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio

Muestras Suero1, separado de la fracción celular lo antes posible. No emplear oxalatos como anticoagulantes porque inhiben esta actividad enzimática. No utilizar muestras hemolizadas. La actividad LDH en suero es estable durante 2 días a 2-8°C.


de camino óptico.2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada o aire. 3. Pipetear en una cubeta:

25-30 °C 37°C Reactivo de trabajo Muestra

3,0 ml 100 µl

3,0 ml 50 µl

Mezclar bien e incubar durante 1 minuto. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 3 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto (∆Abs/min).

Cálculo A 25-30°C LDH (U/l) = ∆Abs/min x 4925 A 37°C LDH (U/l) = ∆Abs/min x 9690



25°C 30°C 37°C 25°C 30°C 37°C

1.00 1.33 1.92 0.75 1.00 1.43 0.52 0.70 1.00




120-240 U/l 160-320 U/l 230-460 U/l


Características del ensayo Rango de medición: de 3,42 U/l (límite de detección) a 1600 U/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 1600 U/l; diluir la muestra a 1:10 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 10.


Media (U/l) 400 785 392 773 SD 3.15 10.97 6.23 9.93

CV (%) 0.79 1.40 1.59 1.28


Interferencias Los procesos de hemólisis interfieren con el ensayo. Algunos anticoagulantes como los oxalatos interfieren con la reacción de determinación de LDH1. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de LDH ha sido publicada por Young et al2,3.


Bibliografía 1. Pesce A. Lactate dehydrogenase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis.

Torronto. Princeton 1984; 1124-1127, 438. 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 3. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.

Langdorp, 01.2015


Δ



Lipasa Ensayo enzimático colorimétrico


Almacenar a 2-8°C. Estándar incluido. Líquido.

Significado clínico La lipasa es una enzima pancreática necesaria para la absorción y digestión de nutrientes, que cataliza la hidrólisis de ésteres de glicerol y ácidos grasos. La determinación de la actividad lipasa se emplea para el diagnóstico de enfermedades de páncreas como las pancreatitis aguda y crónica, así como obstrucciones de los conductos pancreáticos. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La secuencia de reacciones a continuación permite la determinación directa de la actividad lipasa enzimáticamente: 1-2-O-dilauril-rac-glicerol-3-glutaril-(6' -metilresorufin)-éster

Lipasa 1-2-O-dilauril-rac-glicerol + glutaril-6'-metilresorufin-éster (no estable)

OH- Ácido glutárico + Metilresorufina

La tasa de formación de metilresorufina es proporcional a la actividad catalítica de la lipasa.


TRIS pH: 8,3 ..............................................................40 mmol/lColipasa ...................................................................... > 1 mg/l Desoxicolato ........................................................... 1,8 mmol/l Taurodesoxicolato .................................................7,2 mmol/l

Reactivo 2 Sustrato

Tartrato pH 4,0 ........................................................15 mmol/lSustrato lipasa .................................................... > 0,7 mmol/l CaCl2 ........................................................................0,1 mmol/l

Estándar Suero humano liofilizado. La actividad lipasa (U/l de metilresorufina a 37°C) se indica en la etiqueta del vial.


Preparación R1 y R2: listos para su uso. Estabilidad de 90 días a 2-8°C tras su apertura. R2: Mezclar cuidadosamente antes de usar (nota 1). Estándar: Reconstituir los contenidos de un vial con 1 mL de agua destilada, mezclar cuidadosamente hasta conseguir su disolución completa. Estabilidad: 7 días a 2-8°C. Dividir la solución de calibración en pequeñas alícuotas y congelarlas. Estabilidad: 3 meses a -20°C.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 580 nm es ≥ 1.4, el reactivo debe ser descartado. El reactivo R2 es una emulsión túrbida anaranjada, descartar si se vuelve roja.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 580 nm - Baño termostático a 37°C (± 0.1°C) - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio (nota 2)

Muestras Suero reciente o plasma con citrato de sodio, EDTA o heparina. Estabilidad: 2 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 580 nm. Temperatura: 37°C. Cubetas de 1 cm de camino

óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco de reactivo Estándar Muestra

Agua destilada Estándar Muestra Reactivo 1 Reactivo 2

10μl -- -- 1ml 200μl

--10μl -- 1ml 200μl

-- -- 10μl 1ml 200μl

Mezclar bien e incubar a 37°C durante 1 minuto. Leer la absorbancia (abs) inicial, accionar el cronómetro y leer las absorbancias cada minuto durante los 2 minutos siguientes. Calcular las diferencias entre absorbancias consecutivas y su media para obtener la diferencia de absorbancia media por minuto ( abs/min).

Cálculo Δabs/min (muestra) - Δabs/min (blanco)

Lipasa (U/l) = x Actividad lipasa (estándar) Δabs /min (estándar) - Δabs/min (blanco)




Valores de referencia < 38 U/l (U/l de metilresorufina a 37ºC)


Características del ensayo Rango de medición: de 5 U/l (límite de detección) a 250 U/l (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 250 U/l; diluir la muestra a 1:10 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 10. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (U/l) 40.2 59.35 38.5 58.9SD 0.410 0.875 1.10 1.25CV (%) 1.02 1.47 2.86 2.13

Sensibilidad: 1 U/l = 0.0006 Δabs/min Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Niveles de triglicéridos de 300 mg/dl interfieren con el ensayo provocando una disminución de la actividad lipasa del 6%. Concentraciones de hemoglobina hasta 150 mg/dl y de bilirrubina hasta 20 mg/dl no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de lipasa ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. Bajo ciertas condiciones de almacenamiento (temperaturas menores de las

indicadas) pueden aparecer precipitados en el vial, lo que no afecta al rendimiento del reactivo. Sin embargo, se recomienda resuspender el producto rotando el vial suavemente.

2. Para evitar contaminación se recomienda el uso de material desechable. 3. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics

(CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos que utilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puede descargarse las fichas de automatización de nuestra página web (www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía McNeely M. Lipase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1130-1134, 892 Neumann U. et al. Comptes Rend. 4 colloque de Pont-a-Musson, Masson 1979, 627-634. Junge W. et al. J.Clin. Chem.Clin.Biochem., 1983, 21 : 445-451. Neumann U. et al. Method of Enzymatics analysis, 3rd ed. 1984, vol 4: 26-34. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 10.2015


Magnesio Azul de Xilidilo Test colorimétrico. Azul de xilidilo-EGTA.



Significado clínico El magnesio es uno de los cationes más abundantes en el cuerpo y es esencial para muchos procesos fisiológicos. Aproximadamente la mitad del magnesio corporal está presente en los huesos, la mayor parte del resto se encuentra en los tejidos blandos y las células sanguíneas con una pequeña cantidad presente en la sangre. Se han observado niveles reducidos en casos de diabetes, alcoholismo, diuréticos, hipertiroidismo, absorción deficiente, hiperalimentación, infarto de miocardio, insuficiencia cardíaca congestiva y cirrosis hepática. Se ha encontrado un aumento en los niveles de magnesio en suero en la insuficiencia renal, la acidosis diabética, la enfermedad de Addison y la intoxicación por vitamina D. El diagnóstico clínico no se debe realizar con un solo resultado de prueba, sino que debe integrar datos clínicos y otros datos de laboratorio. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Principio Los iones de magnesio reaccionan con el azul de xilidilo en una solución alcalina sobre la que se forma un complejo de color. La intensidad del color es proporcional a la cantidad de magnesio presente en la muestra. La interferencia del calcio se contrarresta al combinarse con EGTAnota 1.


Reactivo 1 TRIS pH 11,4 ........................................................ 200 mmol/l EGTA ...................................................................... 0,1 mmol/l Azul de xilidilo ...................................................... 0,1 mmol/l

Estándar Magnesio, solución acuosa ...................................... 2 mg/dl

Precaución Reactivo 1: H318: Provoca lesiones oculares graves. H412: Tóxico para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.


Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-25°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar muy cuidadosamente para prevenir su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 510 nm- Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio nota 2

Muestras Suero, plasma heparinizado, libre de hemólisis y separado de las células lo más rápidamente posible. No use oxalatos o EDTA como anticoagulante. Estabilidad: 7 días a 2–8 °C. Orina: Recoja la muestra de orina de 24 horas en un recipiente que no contenga magnesio. La orina se debe acidificar a pH 1 con HCl. Si la orina está turbia, caliente la muestra a 60 °C durante 10 minutos para disolver los precipitados. Diluya en una proporción de 1:10 con agua destilada y multiplique el resultado por 10. Estabilidad: 3 días a 2–8 °C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 510 nm (500-550). Temperatura: 37°C/15-25°C. Cubetas de

1 cm de camino óptico.2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco Estándar Muestra Estándar notas 3-4 Muestra Reactivo

--- --- 1,00 ml

10 µl --- 1,00 ml

--- 10 µl 1,00 ml

Mezclar bien y leer la absorbancia (Abs) tras un periodo de incubación de 3 minutos a 37°C o 5 minutos a temperatura ambiente (15-25°C). Leer la absorbancia de las muestras y el estándar contra el blanco. El color es estable al menos 45 minutos.

Cálculo Suero y plasma:


(mg/dl) Magnesio−−

=

Orina 24h: Magnesio (mg/24h) *f x orina/24h (dl) x volestándar) (conc.2x

BlancoAbs-EstándarAbs BlancoAbs-MuestraAbs

=

*f = factor de dilución

Factores de conversión: mg/dl x 0,4114 = mmol/l 0,5 mmol/l = 1,0 mEq/l = 1,22 mg/dl = 12,2 mg/l



Valores de referencia Suero o plasma: 1,6 – 2,5 mg/dl (0,66 – 1,03 mmol/l) Orina: 24 – 244 mg/24h (2 – 21 mEq/l/24h) Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: de 0.05 mg/dl (límite de detección) a 6.6 mg/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 6.6 mg/dl, diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:


SD 0,06 0,08 0,06 0,15 CV (%) 2,80 2,26 2,95 4,10


Interferencias La presencia de hemólisis y anticoagulantes distintos de la heparina interfieren con el ensayo. Concentración de hemoglobina de hasta 22 mg/dl no interfieren con el ensayo, pero sí lo hacen elevados niveles de albúmina (> 4.9 g/dl). Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de magnesio ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. La interferencia del calcio se contrarresta con el uso de EGTA. 2. Se recomienda usar material desechable. Si se usa material de vidrio, se debe limpiar escrupulosamente con una solución de H2SO4-K2Cr2O7 y luego se debeenjuagar a fondo con agua destilada.3. La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos ensistemas automatizados. En estos casos, se recomienda el uso de sueros decalibración (HBC03).4. Use puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación.

Bibliografía 1. Farell E.C. Magnesium. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1065-10692. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 3. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.6. Burtis C.A. and Bruns D.E. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry and MolecularDiagnostics, 7th ed. Elsevier 2015

Langdorp, 02.2016


Fósforo Test UV. Fosfmolibdato.



Significado clínico La mayor parte del fósforo corporal se encuentra en el hueso como hidroxiapatita. El resto del fosfato está presente como fosfato inorgánico y ésteres de fosfato. El fósforo está implicado en el metabolismo intermedio de los carbohidratos y es un componente de otra sustancia fisiológicamente importante. Por lo tanto, el aumento del fósforo en suero puede ocurrir en la hipervitaminosis, el hipoparatiroidismo y la insuficiencia renal. En el raquitismo (deficiencia de vitamina D), el hiperparatiroidismo y el síndrome de Fanconi se observan niveles reducidos de fósforo en suero. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Principio El fosfato inorgánico reacciona en medio ácido con el molibdato amónico para formar un complejo de fosfomolibdato de color amarillo. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de fósforo inorgánico en la muestra.


Reactivo 1 Ácido sulfúrico ............................................. 210 mM Molibdato de amonio ................................. 0,40 mM Detergente

Estándar Fósforo, solución acuosa .............................. 5 mg/dl




Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 340 nm- Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio (nota 1)

Muestras Suero o plasma, libre de hemólisis y separado de las células lo más rápidamente posible. Estabilidad: 7 días a 2–8 °C. Orina: Recoja la muestra en un frasco que contenga 10 ml de ácido clorhídrico (HCl) al 10 % v/v para evitar precipitaciones de fosfato. Ajuste a pH2. Diluya la muestra en una proporción de 1:10 con agua destilada. Mezcle. Multiplique el resultado por 10 (factor de dilución). Estabilidad: 10 días a 2–8 °C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 340 nm. Temperatura: 37/30/25°C. Cubetas de 1 cm de

camino óptico.2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco Estándar Muestra Estándar nota2-3

Muestra Reactivo 1

--- --- 1,00 ml

10 µl. --- 1,00 ml

--- 10 µl. 1,00 ml

Mezclar bien e incubar durante 5 minutos a 25, 30 o 37°C. Medir la absorbancia (Abs) del estándar y la muestra contra el blanco.

Cálculo Suero: Fósforo (mg/dl)

= ∆ Abs Muestra - ∆ Abs Blanco

x5 (conc. estándar) ∆ Abs Estándar - ∆ Abs Blanco

Orina 24 h: Fósforo en la orina 24h (mg/24h)

= ∆ Abs Muestra - ∆ Abs Blanco

x5 (conc. estándar) x vol (dl) orina/24h ∆ Abs Estándar - ∆ Abs Blanco




Suero: Adultos 2,5 – 5,0 mg/dl ≅ 0,80 – 1,61 mmol/l Niños 4,0 – 7,0 mg/dl ≅ 1,29 – 2,26 mmol/l

Orina: Adultos 0,4 – 1,3 g/24h


Características del ensayo Rango de medición: de 0.000 mg/dl (límite de detección) a 35 mg/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 35 mg/dl, diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2.


Media (mg/dl) 4,09 7,12 4,11 7,09 SD 0,03 0,046 0,09 0,06

CV (%) 0,62 0,80 2,15 0,80 Sensibilidad: 1 mg/dl = 0.0798 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Los especímenes hemolizados son inaceptables.Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de calcio ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. La mayoría de los detergentes y productos descalcificadores de agua que se usan en los laboratorios contienen agentes quelantes y fosfatos. Se recomienda enjuagar el material de vidrio con ácido nítrico diluido y agua antes de usarlo.2. La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos ensistemas automatizados. En estos casos, se recomienda el uso de sueros decalibración (HBC03).3. Use puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación.

Bibliografía Farrell E C. Phosphorus Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1072-1074 and 418. Daly J A. et al. Clin Chem 1972: 18(3): 263-265. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.

Langdorp, 08.2015


Potasio Test colorimétrico. NaTPB.



Significado clínico El potasio es el catión principal del líquido intracelular. También es un componente importante del líquido extracelular debido a su influencia en la actividad muscular. Su función intracelular se equipara a la de su función extracelular, es decir, influye en el equilibrio ácido-básico y en la presión osmótica, incluida la retención de agua. Los niveles elevados de potasio (hipercaliemia) a menudo se relacionan con insuficiencia renal, shock hipovolémico o insuficiencia suprarrenal. La disminución de los niveles de potasio (hipocaliemia) se relaciona con la desnutrición, el balance negativo de nitrógeno, las pérdidas de líquido gastrointestinal y la hiperactividad de la corteza suprarrenal. El diagnóstico clínico no se debe realizar con un solo resultado de prueba, sino que debe integrar datos clínicos y otros datos de laboratorio. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Principio La cantidad de potasio se determina, tras la precipitación de las proteínas, usando tetrafenilboro sódico en un medio alcalino para producir una suspensión coloidal. La turbidez producida es proporcional a la concentración de potasio.

Composición de los reactivos Reactivo 1 NaTBP Tetrafenilboro de sodio ....................... 0,2 mol/l

Reactivo 2 NaOH Hidróxido de sodio ............................... 2,0 mol/l

Reactivo 3 PREC Ácido tricloroacético ............................. 0,3 mol/l

Estándar Solución de potasio .............................. 5,0 mEq/l

Precaución Reactivo2: H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. H318: Provoca lesiones oculares graves. Reactivo 3, Estándar : H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. H318: Provoca lesiones oculares graves. H335: Puede irritar las vías respiratorias. H411: Tóxico para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.

Preparación Reactivo de trabajo: Agitar R2 (NaOH) antes de usar. Mezcle proporcionalmente 1:1 el reactivo 1 y el reactiva 2. Después de mezclar, deje reposar por 30 minutos antes de usar. Antes de cada uso, el reactivo de trabajo debe agitarse. La solución de trabajo es estable durante 7 días a temperatura ambiente (15-25°C) o 30 días a 2-8°C.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con precaución a fin de evitar su contaminación. No congele ni exponga a temperaturas elevadas.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 578 nm- Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio Notas 1,2

Muestras Suero no hemolítico o plasma de heparina.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 578 nm; Temperatura: (37°C/15-25°C); Cubetas de 1 cm de

camino óptico.2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. PASO DE PRECIPITACIÓN Nota 3: pipetear en una cubeta:

Reactivo 3 Muestra

500 µl 50µl

Mezclar cuidadosamente. Centrifugar a alta velocidad (5000 rpm) durante 5-10 minutos. Separar el sobrenadante claro.

4. PASO DE PRUEBA: pipetear en una cubeta: Blanco Estándar Muestra

Reactivo de trabajo SobrenadantesEstándar

1,00 --- ---

1,00 ml ---

100 µl

1,00 ml 100 µl

---

Para producir una turbidez homogénea, el estándar o el sobrenadante claro debe agregarse al centro de la superficie del reactivo de trabajo en la cubeta. Mezclar cuidadosamente cada cubeta antes de pasar a la siguiente muestra. Mezclar y dejar reposar durante 5 minutos. Leer la absorbancia(Abs) del estándar y las muestras contra el reactivo de trabajo en blanco entre 5 y 30 minutos .

Cálculo

Potasio (mEq/l)= Abs Muestra – Abs Blanco

x5 (conc. estándar) Abs Estándar - Abs Blanco

Factor de conversión: mEq/l = mmol/l.


Valores de referencia1

Suero: 3,60 – 5,50 mEq/l Plasma: 4,00 – 4,80 mEq/l Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.

Características del ensayo Rango de medición: Este método es lineal de 2 a 10 mEq/l. Si los resultados obtenidos son mayores que 10mEq/l, diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (mg/dl) 4.64 7.60 4.61 7.63

SD 0.095 0.10 0.113 0.148 CV (%) 2.05 1.32 2.45 1.94

Sensibilidad: 1 mEq/l = 0,537 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales.

Interferencias Las siguientes sustancias no interfieren con la determinación de potasio en las concentraciones indicadas: bilirrubina 40 mg/dl, hemoglobina 450 mg/dl, triglicéridos 2500 mg/dl y ascorbato 20 mg/dl.

Notas

1. Como los glóbulos rojos contienen aproximadamente 25 veces la cantidad de potasio, deben separarse del suero en un plazo de 1 hora después de laextracción de sangre. De lo contrario, se encontrarán concentraciones depotasio elevadas erróneamente.2. Los rastros de detergentes producen turbidez que produce concentraciones de potasio elevadas erróneamente. Se deben evitar. Por lo tanto, serecomiendan tubos de plástico desechables para la determinación. Si a pesarde todo se usa material reutilizable, se debe enjuagar cuidadosamente conagua destilada.3. Las muestras, los sueros de control humano (HBC01, HBC02) y el calibradorhumano (HBC03) se deben precipitar. El estándar NO se debe precipitar.4. La calibración con el estándar acuoso puede causar un error sistemático enlos procedimientos automáticos. En este caso, se recomienda usar uncalibrador de suero (HBC03).5. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics(CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos que utilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puede descargarse las fichas de automatización de nuestra página web (www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía Hillmann G and Beyer GZ. Klin Chem. Klin. Biochem. 5, 93 (1967) Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry WB, Saunders Co., Phila, PA, 2nd Ed., p. 876 (1976)

Langdorp, 05.2016


Sodio Enzimático Test colorimétrico. Enzimático

Código HB0340 40 + 20 ml

Almacenar a 2-8°C. Líquido. Estándares incluidos.

Uso destinado Determinación cuantitativa de sodio en suero humano. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Significado clínico El sodio es el catión principal del líquido extracelular. Desempeña un papel central en el mantenimiento de la distribución normal del agua y de la presión osmótica en los distintos compartimentos de fluidos. La principal fuente de sodio corporal es el cloruro de sodio contenido en los alimentos ingeridos. Solo alrededor de un tercio del sodio total del cuerpo se encuentra en el esqueleto, ya que la mayor parte se encuentra en los fluidos extracelulares del cuerpo. La hiponatremia (nivel bajo de sodio en suero) se encuentra en diversas afecciones, incluyendo las siguientes: poliuria severa, acidosis metabólica, enfermedad de Addison, diarrea y acidosis tubular renal. La hipernatremia (aumento del nivel de sodio en suero) se presenta en las siguientes afecciones: hiperadrenalismo, deshidratación severa, coma diabético después de terapia con insulina, exceso de tratamiento con sales de sodio. El diagnóstico clínico no se debe realizar con un solo resultado de prueba, sino que debe integrar datos clínicos y otros datos de laboratorio.

Principio El sodio se determina enzimáticamente a través de la actividad β-galactosidasa dependiente de sodio con ONPG como sustrato. La absorbancia a 405 nm del producto O-nitrofenilo es proporcional a la concentración de sodio.

Na+ ONPG O-nitrofenilo + galactosa

β-galactosidase

ONPG = o-nitrofenilo-β-D- galactopiranosa


Reactivo 1 Buffer de Good ........................................ pH 8,5 Cryptand ....................................... > 0,4 mmol/l β-D-galactosidasa ................................< 8 U/ml

Reactivo 2 Buffer de Good ........................................ pH 6,5 O-Nitrofenilo β-D-glycosida ....... > 0,5 mmol/l

Estándar 1 Estándar 2

Sodio Nivel 1 ............... ver valor en la etiqueta Sodio Nivel 2 ............... ver valor en la etiqueta

Preparación Todos los reactivos están listos para usar. Deje que los estándares se equilibren a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de usar. Remueva suavemente unas cuantas veces antes del primer uso. Procure evitar la formación de burbujas.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con precaución a fin de evitar su contaminación. No congele los reactivos. Las condiciones anteriores son válidas si los frascos se abren solo durante el tiempo necesario para tomar el reactivo, se cierran inmediatamente con su tapa y se almacenan a la temperatura de almacenamiento indicada.

Muestras Suero.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 405 nm - Baño termostático a 37°C (± 0,1°C) - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio (nota 1)

Procedimiento 1. Longitud de onda: 405 nm. Temperatura: 37°C. Cubetas de 1 cm de

camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada.

3. Pipetear en una cubeta:

Estándar 1 Estándar 2 Muestra Muestra Estándar 1 Estándar 2 Reactivo 1 Reactivo 2

--- 24 µl --- 600 µl 300 µl

--- --- 24 µl 600 µl 300 µl

24 µl --- --- 600 µl 300 µl

Mezclar bien e incubar a 37°C. Leer la Abs. 1 tras 2 minutos y la Abs. 2 tras 3 minutos de la adición de la muestra.

Cálculo Calcular la ∆ Abs. = (Abs. 2 - Abs. 1). Trace el ∆Abs calculado para cada estándar contra su concentración (las concentraciones se indican en la etiqueta del vial estándar). Los resultados se encuentran comparando la ∆Abs de la muestra con la curva trazada. Se sugiere un software de sistema de ajuste de curvas para lograr resultados más precisos.

Factor de conversión: = mmol/l = mEq/l; mmol/l x 2,299 = mg/dl.



136 – 146 mmol/l ≅ 313 – 336 mg/dl


Características del ensayo Rango de medición: de 80 mmol/l (límite de detección) a 180 mmol/l (límite de linealidad). Precisión:

Intra-ensayo (n=40) Inter-ensayo (n=40) Media (mmol/l) 128,94 155,84 128,94 155,84

SD 1,57 1,72 2,01 2,56 CV (%) 1,20 1,10 1,56 1,65

Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales

Interferencias Las siguientes sustancias normalmente presentes en el suero produjeron una desviación de menos del 10 % a las concentraciones indicadas: Bilirubina: 40 mg/dl; Bilirubina conjugada: 40 mg/dl; Ácido ascórbico: 10 mmol/l/l; Glucosa: 5 mmol/l; Hemoglobina: 500 mg/dl; Triglicéridos: 1000 mg/dl; NH4Cl: 1.5 mmol/l; CaCl2: 7.5 mmol/l; ZnCl2: 0.5 mmol/l; FeCl3: 0.5 mmol/l; CuCl2: 0.5 mmol/l; KCl: 10 mmol/l; KPi: 2 mmol/l.

Notas 1. Para evitar contaminación, se recomienda usar material desechable. 2. Cuando el sodio y el potasio se solicitan juntos, el sodio se analizainmediatamente antes del potasio. 3. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics(CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos queutilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente.Puede descargarse las fichas de automatización de nuestra página web(www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía 1. Berry, M. N. et al., Clin. Chem. 34:2295 (1988). 2. Tietz, N. Clinical guide to Laboratory tests, p. 384 W.B. Saunders Co., Philadelphia

(1983). 11.2017, Rev. 2.0


TIBC (Capacidad total de fijación del hierro) Saturación y reactivos precipitantes

Código HB017 100 pruebas.

Almacenar a 2-8°C. Ver también determinación de hierro, código HB012.

Uso destinado Determinación cuantitativa de la capacidad total de fijación del hierro en suero humano o plasma heparanizado. Para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional únicamente.

Significado clínico El contenido de hierro del cuerpo humano puede dividirse en tres clases: hierro en almacenamiento, hierro en uso y hierro en transporte. La capacidad de fijación del hierro suele aumentar en la anemia ferropénica y disminuir en la hemocromatosis, las neoplasias malignas, la fiebre reumática, las enfermedades de Hodgkin y las enfermedades vasculares del colágeno. Es de fundamental importancia tener en cuenta que se debe analizar tanto el hierro como la capacidad de fijación de hierro de una muestra debido a la necesidad de ambos valores en el diagnóstico diferencial de varios tipos de anemia y enfermedades hepáticas. El diagnóstico clínico no se debe realizar con un solo resultado de prueba, sino que debe integrar datos clínicos y otros datos de laboratorio.

Principio El hierro en suero está ligado a la proteína (siderofilina/transferrina). Normalmente, esta proteína está saturada con hierro en alrededor de un tercio. La transferrina en suero se analiza saturando con exceso de hierro. La parte no ligada se precipita con polvo de carbonato de magnesio. Luego se analiza el hierro en el sobrenadante.

Composición de los reactivos Reactivo 1 Solución de saturación

Solución de hierro .......................... 500 µg/dl

Reactivo 2 Agente precipitante

Polvo de carbonato de magnesio

Reactivos adicionales (no incluidos) HB012 Reactivos de hierro (Ferrozina)

Preparación Los reactivos están listos para usar.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Centrífuga por muestras - Equipamiento general de laboratorionota 1

Muestras Suero, plasma heparinizado, libre de hemólisis y separado de las células lo más rápidamente posible. El hierro es estable durante 7 días a 2-8 °C.

Procedimiento PASO DE PRECIPITACIÓN

Introduzca la pipeta en el tubo de la centrífuga: Muestra/Estándarnota 2,3................................................................. 0,50 ml Solución de saturación (R1) ......................................................... 1,00 ml Mezcle e incube a temperatura ambiente (15–25 °C) durante 10 minutos. Añada a cada tubo: *Agente precipitante (R2) .............................. 3 dosis (Nivel cucharada) Mezcle e incube 10 min a temperatura ambiente (15–25 °C). Luego centrifugue 15 minutos a 3000 rpm. *Polvo: Dispense con la cuchara adjunta (Dosis: aprox. 70 mg) PASO DE PRUEBA

Recoja el sobrenadante (nota 4) y mida la concentración de hierro siguiendo las instrucciones de determinación de hierro (código HB012).

Cálculo -Con el estándar de hierro Nota 2

TIBC (µg/dl) = Abs Muestra - Abs Blanco de muestra x100 (conc. Estándard) x3 (factor de dilución)Abs Estándar - Abs Blanco Estándar

-Con calibrador de suero Nota 3

TIBC (µg/dl) = Abs Muestra – Abs Blanco de muestra x conc. CalibradorAbs Calibrador – Abs Blanco calibrador


Valores de referencia Seuro o plasma: .......................200 - 400 µg/dl (36-72 µmol/l)

Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia

Características del ensayo Rango de medición: de 0,850 µg/dl (límite de detección de Hierro) a 1000 µg/dl (límite de linealidad de Hierro). Si los resultados obtenidos son mayores que 1000 µg/dl, diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2 Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (µg/dl) 371 406 359 565

SD 1,79 1,82 7,16 9,46 CV (%) 0,49 0,45 1,99 1,67

Sensibilidad: 1 µg/dl = 0,00021 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales. Las características de rendimiento obtenidas dependen del analizador utilizado.

Interferencias Las muestras hemolizadas son rechazadas. Una lista de drogas y otras sustancias interferencias con la determinación de hierro ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. Se recomienda usar material desechable. Si se usa material de vidrio, el

material se debe remojar durante 6 horas en HCl diluido (20 % v/v) y luegoenjuagarlo completamente con agua destilada y secarlo antes de usarlo.

2. Para los procedimientos manuales o semiautomáticos, se puede usar elestándar acuoso incluido en el kit de hierro. El estándar no se debeprecipitar. Solo se debe usar en el paso de prueba del procedimiento.

3. En los procedimientos automáticos, use un calibrador de suero (HBC03). Elcalibrador (HBC03) se debe precipitar antes de proceder con el paso deprueba. Use el valor asignado para TIBC, no el valor para hierro.

4. El sobrenadante es estable hasta 1 hora a temperatura ambiente. Si se veturbio, vuelva a centrifugar.

5. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics(CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos queutilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puededescargarse las fichas de automatización de nuestra página web(www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliography 1. Baadenhuinjsen H. et al. Clin Chim 1988: 175: 9-16. 2. Perotta G. Iron and iron-binding capacity. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St

Louis. Torronto. Princeton 1984; 1063-1065 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 4. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.

02.2018, Rev. 5.0



Proteína total Ensayo colorimétrico. Biuret.

Ref. HB019 1 x 1000 ml HB0190 2 x 125 ml


Significado clínico Los niveles de proteínas séricas influyen en el mantenimiento del equilibrio hídrico entre la sangre y los tejidos a través de la regulación de la presión osmótica. Las diferentes fracciones de proteínas séricas varían amplia e independientemente unas de otras, especialmente en caso de enfermedad. Niveles de bajos de proteínas séricas se dan sobretodo en casos de malnutrición, alteraciones de su síntesis, pérdida de sangre (por hemorragia) o una tasa muy elevada de catabolismo de proteínas. Por otro lado, los niveles de proteínas séricas son elevados principalmente en caso de deshidratación. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio Las proteínas séricas forman un complejo de color azul-violeta en una solución alcalina de sulfato de cobre y tartrato (reactivo de Biuret). La intensidad de color de la mezcla resultante es proporcional a la concentración de proteína total de la muestra.

Composición de los reactivos Reactivo 1 BIURET

Tartrato de sodio-potasio ......................... 15 mmol/lHidróxido sódico ..................................... 100 mmol/l Yoduro potásico .......................................... 5 mmol/l Sulfato de cobre (II) ................................... 19 mmol/l

Estándar Albúmina bovina ..................ver valor en la etiqueta Únicamente para uso diagnóstico in vitro. Precaución Reactivo 1: H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. H412: Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P501: Eliminar el contenido/el recipiente en un contenedor apropiado siguiendo las normativas locales pertinentes.


Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con precaución a fin de evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 546 nm es ≥ 0,22, el reactivo debe ser descartado.


Muestras Suero o plasma heparinizado. Estabilidad de 1 mes a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 546 (530-550) nm. Temperatura: 37°C / 15-25°C.


Blanco Estándar MuestraEstándar Muestra R1 Biuret

--- ---

1 ml

25 μl ---

1 ml

---25 μl 1 ml

Mezclar bien e incubar durante 5 minutos a 30-37°C o 10 minutos a temperatura ambiente (15-25°C). Leer la absorbancia de la muestra y el estándar contra el blanco. El color es estable durante una hora como mínimo.

Cálculo

estándar conc. x BlancoAbsEstándarAbsBlancoAbsMuestraAbs

(g/dl) total Proteína



Valores de referencia Adultos: 6,6 – 8,3 g/dl Recién nacidos: 5,2 - 9,1 g/dl


Características del ensayo Rango de medición: de 0.008 g/dl (límite de detección) a 15 g/dl (límite de linealidad). Si los resultados obtenidos son mayores que 15 g/dl; diluir la muestra a 1:2 con solución salina, repetir la determinación y multiplicar el resultado obtenido por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (g/dl) 6,46 4,77 6,52 4,78

SD 0,129 0,092 0,162 0,114CV (%) 1,99 1,92 2,49 2,39

Sensibilidad: 1 g/dl = 0,056 Abs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales. Las características de rendimiento obtenidas dependen del analizador utilizado.

Interferencias Concentraciones de hemoglobina de hasta 22 mg/dl no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de proteína total ha sido publicada por Young et al.


Bibliografía Koller A. Total serum protein. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1316-1324 and 418. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 08.2015



Triglicéridos Líq. Ensayo enzimático colorimétrico. GPO-POD



Uso destinado Determinación cuantitativa de la concentración de triglicéridos en suero y plasma. Únicamente para uso diagnóstico in vitro. Solamente para utilización profesional.

Significado clínico Los triglicéridos, ésteres de glicerol con 3 ácidos grasos, son los principales constituyentes de las reservas lipídicas de los tejidos y sirven como fuente de energía para el organismo. Los triglicéridos son transportados por el torrente sanguíneo en forma de lipoproteínas junto con otros lípidos. La relevancia clínica de los triglicéridos y otros lípidos se debe a que contribuyen al desarrollo de patologías de las arterias coronarias y trastornos de lipoproteínas. Algunas enfermedades o condiciones relacionadas con niveles elevados de triglicéridos incluyen diabetes tipo 2, obesidad, embarazo, presencia de infecciones, procesos inflamatorios, síndrome nefrótico, fallo renal crónico, obstrucción de los conductos biliares y cirrosis hepática. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio Los triglicéridos de la muestra son hidrolizados enzimáticamente a glicerol y ácidos grasos libres por acción de la lipoproteína lipasa. El glicerol liberado es fosforilado por la glicerol kinasa y subsiguientemente oxidado por la glicerol-3-fosfato oxidasa, lo que resulta en la formación de H2O2. El H2O2 toma parte en una reacción de Trinder modificada que da lugar a la formación de un colorante quinonimina rojo. La intensidad de color resultante es proporcional a la concentración de triglicéridos de la muestra.

LPL Triglicérido + 3H2O Glicerol + 3 Ácidos grasos

GK Glicerol + ATP Glicerol 3-fosfato + ADP

GPO Glicerol-3-fosfato + O2 DHAP + H2O2

POD H2O2 + 4-AAP + DHBS Colorante quinonimina + 2H2O

Composición de los reactivos Reactivo

PIPES pH 7.0...................................................... 50 mmol/l DHBS ................................................................... 1 mmol/l Lipoproteína lipasa (LPL) ................................... 1500 U/l Glicerol kinasa (GK) ............................................... 700 U/l Glicerol-3-fosfato oxidasa (GPO) ....................... 1500 U/l Peroxidasa (POD) ................................................ 2000 U/l 4–Aminoantipirina (4-AAP) ............................ 0,8 mmol/l ATP ................................................................... 1,5 mmol/l

Estándar Glicerol, solución acuosa ................................. 200 mg/dl


Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con cuidado para evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 510 nm es ≥ 0.23, el reactivo debe ser descartado.


Muestras Suero o plasma. La estabilidad de la muestra es de 5 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 510 (500-550) nm. Temperatura: 37°C / 15-25 °C. Cubetas


Blanco Estándar MuestraEstándar nota 1

Muestra Reactivo

--- --- 1 ml

10 μl --- 1 ml

---10 μl 1 ml

Mezclar bien, incubar durante 5 minutos a 37°C o 10 minutos a temperaturaambiente (15-25°C). Leer la absorbancia (Abs) de la muestra y el estándar contra el blanco. El color es estable durante 30 minutos como mínimo.



(mg/dl) dosTriglicéri



Valores de referencia <150 mg/dl Normal 150-199 mg/dl Elevado 200-499 mg/dl Hipertrigliceridémico >499 mg/dl Muy elevado



Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (mg/dl) 114 210 116 213

SD 1,30 2,65 1,08 2,66CV (%) 1,14 1,26 0,93 1,25


Interferencias Concentraciones de bilirrubina de hasta 10 mg/dl y de hemoglobina hasta 6 g/l no interfieren con el ensayo. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de triglicéridos ha sido publicada por Young et al.



2. Este método mide también los niveles de glicerol libre presente en las muestra. En individuos sanos, los niveles endógenos de glicerol representan típicamente una sobreestimación ≤ 10 mg/dl de triglicéridos.

3. La utilización de determinados recipientes de plástico conlleva en ocasiones un cambio en el color del reactivo. Por consiguiente, utilizar contenedores de vidrio para tomar alícuotas de reactivo siempre que sea posible (por ejemplo, siempre que se sigue el protocolo manual).


Bibliografía 1. Trinder P. Ann. Clin. Biochem. 1969, 6(1): 24-27 2. Barham D. and Trinder P. Analyst 1972, 97(151): 142-145 3. Bucolo G. and David H. Clin. Chem. 1973, 19(5): 476-482 4. Megraw R. et al. Clin. Chem. 1979, 25(2): 273-278 5. Fossati P. and Prencipe L. Clin. Chem. 1982, 28(10): 2077-2080 6. McGowan M.W. et al. Clin. Chem. 1983, 29(3): 538-542 7. Kaplan A. et al. Triglycerides. Clin. Chem. The C.V. Mosby Co. St. Louis. Toronto. Princeton

1984; 437 and Lipids 1194-1206 8. Young D.S. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC Press 1995 9. Young D.S. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001 10. Wu A.H.B. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th ed. Saunders Elsevier 2006 11. Burtis C.A. and Bruns D.E. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry and Molecular

Diagnostics, 7th ed. Elsevier 2015 10.2016, Rev. 3.0



Urea Berthelot

Ensayo enzimático colorimétrico.

Ref. HB022 4 x 250 ml Ref. HB029 2 x 125 ml

Almacenar a 2-8°C. Estándar incluido. Liofilizado.

Uso destinado Determinación cualitativa de los niveles de urea en muestras de suero, plasma heparinizado o orina. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Significado clínico La urea es el producto final del catabolismo de proteínas y su formación tiene lugar en el hígado. Elevados niveles de urea en sangre (uremia) reflejan una dieta con exceso de proteínas, enfermedades renales, fallo cardiaco, hemorragia gastrointestinal, deshidratación u obstrucción renal. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La urea es hidrolizada en CO2 y amonio, el cual reacciona con salicilato e hipoclorito para dar lugar a un indofenol verde. La coloración obtenida es directamente proporcional a la concentración de urea de la muestra.

Ureasa Urea + H2O CO2 + 2 NH4

+ Nitroprusiato

NH4+ + Salicilato + NaClO Indofenol


Fosfato pH 6.7 ..................................................... 50 mmol/l EDTA .........................................................................2 mmol/l Salicilato sódico ............................................... 400 mmol/l Nitroprusiato sódico ......................................... 10 mmol/l

Reactivo 2 NaClO

Hipoclorito sódico ........................................... 140 mmol/l Hidróxido sódico .............................................. 150 mmol/l

Reactivo 3 Enzimas

Ureasa ................................................................... 30000 U/l

Estándar Urea, solución acuosa ........................................ 50 mg/dl


Preparación y estabilidad Disolver el contenido de un vial de R3 (enzimas) en un vial de R1 (buffer). Tapar y agitar suavemente hasta disolver su contenido. La estabilidad del reactivo de trabajo (R1+R3) es de 4 semanas a 2-8°C o 1 semana a temperatura ambiente (15-25°C). R2 y estándar están listos para su uso.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con precaución para evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 580 nm es ≥ 0.32, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 580 nm - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico- Equipamiento general de laboratorio Nota 1

Muestras Suero o plasma heparinizado: no utilizar sales de amonio o fluoruro como anticoagulante. Orina:diluir la muestra a 1:50 con agua destilada. Mezclar.Multiplicar los resultados por 50 (factor de dilución). Conservar las muestras de orina a un pH <4. La urea es estable durante 5 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 580 nm. Temperatura: 37°C / 15-25°C. Cubetas de 1 cm de

camino óptico. 2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada.3. Pipetear en una cubeta:

Blanco Estándar MuestraReactivo de trabajo 1,00 ml 1,00 ml 1,00 ml Estándar --- 10 μl ---Muestra --- --- 10 μl

Mezclar bien, incubar durante 5 minutos a 37°C o 10 minutos a temperatura ambiente (15-25°C). Añadir el reactivo 2: Reactivo 2 1,00 ml 1,00 ml 1,00 ml Mezclar, incubar durante 5 minutos a 37°C o 10 minutos a temperatura ambiente (15-25°C). Leer la absorbancia (Abs) de las muestras y el estándar contra el blanco. El color es estable a 15-25°C durante 30 minutos como mínimo.

Cálculo

Serum o Plasma: stand.) (conc. 50 x BlancoAbsEstándarAbsBlancoAbsMuestraAbs

(mg/dl) Urea

Orino 24h:

x V ) dil.fact ( 50x ) ) g/l ( conc. stand. ( 0,050x Blanco AbsMuestra AbsBlanco AbsMuestra Abs

(g/24h) Urea

V= Vol urine (l)/24 h

BUN [mg/dL] = Urea [mg/dL] / 2.14 = Urea [mmol/L] / 0.356 Factor de conversión: mg/dl x 0.1665 = mmol/l.


Valores de referencia Suero o plasma: 15 – 45 mg/dl (2,49 – 7,49 mmol/l) Orina: 20 – 35 g/24hr Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.


Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (mg/dl) 39 126 40.0 127 SD 0.55 2.12 0.93 2.48CV (%) 1.43 1.68 2.33 1.96


Interferencias Se recomienda el uso de heparina como anticoagulante. No utilizar sales de amonio o fluoruro como anticoagulante. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de urea ha sido publicada por Young et al.

Notas 1. El material de vidrio y agua destilada empleados durante el ensayo deben estar

libres de amonio y sales de amonio. 2. La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos en

sistemas automatizados. En estos casos, se recomienda el uso de sueros decalibración (HBC03).

Bibliografía Kaplan A. Urea. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1257-1260 and 237 and 418 Tabacco A et al. Clin Chem 1979 ; 25 : 336-337 Fawcett JK et al. J. Clin. Path. 1960, 13, 156-169. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.

09.2017, Rev. 12.0


Urea Líq. Ensayo cinético U.V. Ureasa-GLDH. Líquido.

Código HBL03 1 x 160 ml + 1 x 40 ml

Almacenar a 2-8°C. Estándar incluido. Líquido.

Uso destinado Determinación cuantitativa de los niveles de urea en muestras de suero, plasma heparinizado o orina. Únicamente para uso diagnóstico in vitro y utilización profesional.

Significado clínico La urea es el producto final del catabolismo de proteínas y su formación tiene lugar en el hígado. Elevados niveles de urea en sangre (uremia) reflejan una dieta con exceso de proteínas, enfermedades renales, fallo cardiaco, hemorragia gastrointestinal, deshidratación u obstrucción renal1,4,5. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio La urea es hidrolizada enzimáticamente a amonio (NH4

+) y CO2. El amonio reacciona con α-cetoglutarato para formar L-glutamato en una reacción catalizada por la glutamato deshidrogenasa (GLDH) que implica una oxidación simultánea de NADH a NAD+.

Ureasa Urea + H2O + 2H+ CO2 + 2 NH4

+

GLDHNH4

+ + α-cetoglutarato + NADH H2O + NAD+ + L-glutamato

La disminución de la concentración de NADH es proporcional a la concentración de urea de la muestra1.


Reactivo 1 Buffer

TRIS pH 7,4 ............................................ 80 mmol/l α-cetoglutarato ....................................... 6 mmol/l Ureasa ..................................................... 75000 U/l

Reactivo 2 Enzimas

GLDH ....................................................... 60000 U/l NADH .................................................. 0,32 mmol/l

Estándar Urea, solución acuosa ............................. 50 mg/dl

Preparación Reactivo de trabajo: Mezclar 4 volúmenes de R1 (buffer) con 1 volumen de R2 (enzimas). Después de mezclar, deje reposar por 30 minutos antes de usar. La solución de trabajo es estable durante 1 mes a 2-8°C o 1 semana a temperatura ambiente (15-25°C). El estándar está listo para su uso.

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con precaución para evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 340 nm es < 1.00, el reactivo debe ser descartado.

Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para lecturas a 340 nm - Cubetas de 1.0 cm de camino óptico - Equipamiento general de laboratorio Nota 1

Muestras Suero o plasma heparinizado1: no utilizar sales de amonio o fluoruro como anticoagulante. Orina1: diluir la muestra a 1:50 con agua destilada. Mezclar. Multiplicar los resultados por 50 (factor de dilución). Conservar las muestras de orina a un pH < 4. La urea es estable durante 5 días a 2-8°C.

Procedimiento 1. Longitud de onda: 340 nm. Temperatura: 37°C / 15-25°C. Cubetas de 1 cm de

camino óptico.2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco Estándar MuestraReactivo de trabajo 1,00 ml 1,00 ml 1,00 ml EstándarNota2 --- 10 μl ---Muestra --- --- 10 μlMezclar y accionar el cronómetro. Leer la Abs. 1 tras 30 segundos y la Abs. 2 tras 90 segundos desde la adición de la muestra.

Cálculo Calcular la Δ Abs = (Abs. 2 – Abs. 1).

Suero y plasma: Urea (mg/dl)

= Δ Abs Muestra - Δ Abs Blanco

x50 (conc. estándar (mg/dl)) Δ Abs Estándar - Δ Abs Blanco

Orina 24 h: Urea (g/24h)

= Δ Abs Muestra - Δ Abs Blanco

x0,050 (conc. estándar (g/l)) x50 (fact.dil)xV Δ Abs Estándar - Δ Abs Blanco

V= Volumen Orina (l)/24h

BUN [mg/dl] = Urea [mg/dl] / 2.14 = Urea [mmol/l] / 0.357 Factor de conversión: mg/dl x 0,1665 = mmol/l


Valores de referencia Suero o plasma: 15 – 45 mg/dl (2,5 – 7,5 mmol/l) Orina: 26 - 43 g/24hr (428 – 714 mmol/24h) Estos valores sólo son orientativos. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia.


Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20) Media (mg/dl) 37,5 120 40,0 126 SD 1,05 0,92 1,06 2,07CV (%) 2,79 0,77 2,65 1,65

Sensibilidad: 1 mg/dl = 0,00180 ΔAbs Exactitud: Los resultados obtenidos utilizando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas en comparación con los obtenidos utilizando otros reactivos comerciales. Las características de rendimiento obtenidas dependen del analizador utilizado.

Interferencias Se recomienda el uso de heparina como anticoagulante. No utilizar sales de amonio o fluoruro como anticoagulante1. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de urea ha sido publicada por Young et al2,3.

Notas 1. El material de vidrio y agua destilada empleados durante el ensayo deben

estar libres de amonio y sales de amonio.2. La calibración con el estándar acuoso puede causar errores sistemáticos en

sistemas automatizados. En estos casos, se recomienda el uso de sueros decalibración (HBC03).

3. Use puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación. 4. Para mejor uso de este kit en un analizador de Cypress Diagnostics

(CYANSmart, CYANStart, CYANPro, CYANExpert 130) le aconsejamos queutilice las fichas de especificaciones del analizador correspondiente. Puededescargarse las fichas de automatización de nuestra página web(www.diagnostics.be) tras registrarse.

Bibliografía 1. Kaplan A. Urea. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton

1984; 1257-1260 and 237 and 418. 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995. 3. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001. 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999. 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.

06.2018, Rev. 4.0



Ácido úrico Líq. Ensayo enzimático colorimétrico. URICASA-POD. Líquido.



Significado clínico El ácido úrico es el producto final del metabolismo de las purinas. Casi la mitad de la cantidad total de ácido úrico es diariamente eliminada vía excreción renal o degradación microbiana en el tubo digestivo y reemplazado metabólicamente. Niveles elevados de ácido úrico están asociados a una alta retención de nitrógeno y se relacionan además con la concentración de urea, creatinina y otros constituyentes no proteicos en el organismo. La cuantificación de ácido úrico sirve como auxilio para el diagnóstico de gota, función renal disminuida, y otras condiciones en las que la causa de hiperuricemia no se conoce bien1,5,6. Como con todo ensayo clínico, un diagnóstico definitivo no debe basarse en los resultados de un solo test, sino que deberá realizarlo un médico tras evaluar todas las observaciones clínicas y de laboratorio de que disponga.

Principio El ácido úrico es oxidado por una uricasa en alantoína y peróxido de hidrógeno, el cual es utilizado por una peroxidasa (POD) para oxidar 2,4-diclorofenolsulfonato (DCPS) y 4-aminopenazona (4-AP), dando lugar a un compuesto quinonimina rojo.

Uricasa Ácido úrico + 2H2O + O2 Alantoína. + CO2 + 2H2O2 POD 2H2O2 + 4AP + DCPS Quinonimina + 4H2O

La cantidad de quinonimina roja formada como resultado es proporcional a la concentración de ácido úrico de la muestra1,2.


Reactivo 1 Buffer

PIPES pH 7.0 ...................................................50 mmol/l4-AP ................................................................... 1 mmol/lAscorbato oxidasa (ASO).................................. 1000 U/lPeroxidasa (POD) ............................................... 3800 U/

Reactivo 2 Enzimas

PIPES pH 7.0 ...................................................50 mmol/lDCPS ............................................................... 2,5 mmol/lUricasa (UAO) ...................................................... 250 U/l

Estándar Ácido úrico, solución acuosa ............................ 6 mg/dlÚnicamente para uso diagnóstico in vitro.

Preparación Mezclar un volumen de R1 (buffer) con un volumen idéntico de R2 (enzimas). La solución de trabajo es estable durante 2 meses a 2-8°C o 2 semanas a temperatura ambiente (15-25°C).

Almacenamiento y estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad especificada, si se almacenan bien cerrados, al abrigo de la luz y se previene su contaminación durante su uso. Manipular el estándar con cuidado a fin de evitar su contaminación. El reactivo debe mostrar un aspecto claro. Si se observa turbidez o presencia de precipitados, o si la absorbancia del blanco a 520 nm es ≥ 0.12, el reactivo debe ser descartado.


Muestras Suero o plasma: estabilidad de 3-5 días a 2-8°C o 6 meses a -20°C. Orina (24h): estabilidad de 4 días a 15-25°C, pH>8. Diluir la muestra a 1:50 con agua destilada, mezclar bien y multiplicar los resultados por 50 (factor de dilución). Si la orina es turbia, calentar la muestra a 60°C durante 10 minutos para disolver uratos y ácido úrico que hayan precipitado. No refrigerar.



Blanco Estándar MuestraEstándar Nota 1 Muestra Reactivo de trabajo

--- --- 1.00 ml

25 μl --- 1.00 ml

--- 25 μl 1.00 ml

Mezclar bien, incubar durante 10 minutos a temperatura ambiente (15-25°C) o 5 minutos a 37°C. Leer la absorbancia (Abs) de la muestra y del estándar contra el blanco. El color es estable durante 45 minutos como mínimo.

Cálculo Suero o plasma: Ácido úrico (mg/dl):


(mg/dl) úrico Ácido

Orina 24h: Ácido úrico (mg/24h):

24h orina (dl) x Volestándar) (conc. 6 x BlancoAbsEstándarAbsBlancoAbsMuestraAbs

(mg/24h) úrico Ácido

Factor de conversión: mg/dl x 59.5 = μmol/l.



Valores de referencia Suero o plasma:

Hombres 3.6 – 7.7 mg/dl 214 - 458 μmol/l Mujeres 2.5 – 6.8 mg/dl 149 - 405 μmol/l

Orina: 250-750 mg/24h 1.49 – 4.5 mmol/24h



Intra-ensayo (n=20) Inter-ensayo (n=20)Media (mg/l) 4.37 10.00 4.38 10.10

SD 0,06 0.16 0.04 0.10CV (%) 1.42 1.65 0.98 1.00


Interferencias Concentraciones de bilirrubina hasta 10 mg/dl, hemoglobina hasta 130 mg/dl y ácido ascórbico hasta 10 mg/dl no interfieren con el ensayo2. Una lista de drogas y otras sustancias interferentes con la determinación de ácido úrico ha sido publicada por Young et al3,4.




Bibliografía 1. Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis.

Torronto. Princeton 1984; 1261-1266 and 418. 2. Fossati P et al. Clin Chem 1980 ; 26 :227-231 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 4. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 11.2015



Proteína Total en orina y LCR Test colorimétrico. “Rojo – Pirogalol”


Almacenar a 2-8 ºC. Líquido. Estándar incluido.

Importancia clínica A través de la regulación de la presión osmótica, las proteínas séricas están implicadas en el mantenimiento de la distribución normal de agua entre sangre y tejidos. Las diversas fracciones de proteínas séricas varían de forma amplia e independiente en caso de enfermedad. Niveles bajos de proteínas se dan principalmente debido a malnutrición, síntesis inadecuada, pérdida (por ej. hemorragia) o catabolismo excesivo de proteínas. Niveles elevados de proteína en orina son causados principalmente por deshidratación.

Principio La reacción entre las proteínas y el Pirogalol /Molibdato provoca la formación de un complejo rojo. La intensidad del color es directamente proporcional a la concentración de proteína.

Composición del reactivo Reactivo 1 Rojo Pirogalol .......................................50 mmol/l

Molibdato de Sodio .......................... 0.04 mmol/lEstándar Disol. acuosa Albúmina / Globulina ....1000 mg/l

Sólo para uso diagnóstico in vitro.


Conservación y Estabilidad Todos los componentes del kit son estables a 2-8 ºC hasta la fecha de caducidad especificada si se conservan perfectamente cerrados, protegidos de la luz y se evitan contaminaciones durante su uso. Manipule el estándar muy cuidadosamente para prevenir su contaminación. El reactivo debe ser una solución clara. Si aparece una turbidez o precipitación o si la absorbancia del blanco a 598 nm es ≥ 0.70, el reactivo debe ser descartado. Equipamiento adicional - Espectrofotómetro o colorímetro para medir a 598 nm. - Cubetas de camino óptico de 1.0 cm. - Equipamiento general de laboratorio

Muestra Orina 24 h: Estabilidad 8 días a 2-8 ºC. Líquido Céfalo-Raquídeo (LCF): Estable 4 días a 2-8 ºC.

Procedimiento 1. Longitud de onda 598 nm; Temperatura 37ºC/15-25ºC;

Cubeta de 1 cm de camino óptico. 2. Ajuste el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetee dentro de una cubeta. Blanco Estándar MuestraEstándar Muestra Reactivo 1

--- --- 1.00 ml

20 μl--- 1.00 ml

--- 20 μl 1.00 ml.

Mezcle e incube 5 minutos a 37ºC o 10 min. a temperatura ambiente (15-25ºC). Mida la absorbancia de las muestras y el estándar contra el blanco. El color es estable al menos 30 minutos.

Cálculo Orina 24 hs: Proteína Total (mg/l)

orina/24h (l) x volestándar) (Conc.1000xBlancoAbs-EstándarAbs

BlancoAbs-MuestraAbs

LCR: Proteína Total (mg/l)

estándar) (Conc. 1000 x BlancoAbsEstándarAbsBlancoAbsMuestraAbs

(mg/l) total Proteína

Control de calidad Cada laboratorio debe establecer su propio esquema de control de calidad y acciones correctivas si los controles no alcanzan las especificaciones aceptables.

Valores de referencia Orina: <100 mg/24h (<150 mg/24 hs en el embarazo) LCR: Niños 300-1000 mg/l

Adultos 150-450 mg/l

Estos valores están dados a título orientador. Cada laboratorio debe establecer su propio rango de referencia.

Características de método Rango de medición: de límite de detección (9.44 mg/l) a límite de linealidad (4000 mg/l). Si los resultados obtenidos son mayores que 4000 mg/l, diluya la muestra 1:2 en NaCl 9g/l, repita la determinación, y multiplique el resultado por 2. Precisión:

Intra-ensayo (n=20)

Inter-ensayo (n=20)

Media(mg/l) 220 536 1014 216 499 1018SD 3.7 4.0 5.2 18.3 26.1 166.1CV (%) 2.28 0.75 0.51 7.35 5.22 16.43

Sensibilidad: 1 mg/l = 0.000261167 Abs Exactitud: los resultados obtenidos usando reactivos de CYPRESS DIAGNOSTICS no mostraron diferencias sistemáticas al ser comparados con otros reactivos comerciales.

Interferencias Hemólisis. Una lista de drogas y otras sustancias que interfieren con la determinación de proteínas ha sido publicada por Young et al.

Bibliografía Orsonneau JL et al. Clin Chem 1989 (35) : 2233-2236 Koller A Total serum protein. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto P. Ann. Clin. Biochem. 1969, 6: 24-33 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et Al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al . Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.

Langdorp, 10.2015.

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