RANDOX Manual Tecs. Química Clínica-2013

OF 3

ALBUMINA (ALB) Verde de Bromocresol

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

La determinacin cuantitativa in vitro de albmina en suero y

plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin de forma

manual y en el analizador Rx Monza.

Cat. No.

AB 362 R1. BCG Concentrado 6 x 13.5 ml

6 x 100 ml CAL Patrn 1 x 5.5 ml

SIGNIFICADO CLINICO (1)

La albmina es la protena srica ms abundante representando

el 55-65% de las proteinas totales. Se sintetiza en el hgado y

tiene una vida media de 2 a 3 semanas. Las principales funciones biolgicas de la albmina son mantener

el equilibrio de agua en suero y plasma, transportar y almacenar

una amplia variedad de ligandos ej: acidos

grasos,calcio,bilirrubina y hormonas como tiroxina. La albmina

tambin es una fuente endgena de aminocidos.

La hipoalbuminemia est asociada con las siguientes condiciones

:analbuminemia; sintesis deteriorada de albmina en el higado;

enfermedades hepaticas; malnutricin o malabsorcin; shock

generalizado; quemaduras o dermatitis; enfermedades renales e

intestinales .La hiperalbuminemia tiene poca relevancia

diagnstica excepto tal vez en deshidratacin.

PRINCIPIO(2)

La medicin de albmina en suero se basa en su unin

cuantitativa con el indicador 3,3',5,5'-tetrabromo-m cresol

sulfontaleina (verde de bromocresol BCG). El complejo

albmina-verde de bromocresol presenta una absorcin mxima

a 578 nm, siendo la absorbancia directamente proporcional a la

concentracin de albmina en la muestra.

PREPARACION Y EXTRACCION DE LA MUESTRA

Suero, plasma heparinizado o plasma con EDTA. Se pueden

utilizar los procedimientos normales de recogida y

almacenamiento del suero para las muestras que se vayan a

analizar con este mtodo. El suero es estable durante 3 das a

una temperatura de entre 2 y 8 C, o durante 6 meses a -20C.

COMPOSICIN DEL REACTIVO

Componentes Concentracin inicial de las soluciones

R1. Verde de Bromocresol (BCG) concentrado

Tampn succinato 75 mmol/l, pH 4.2

Verde de bromocresol (BCG) 0.15 mmol/l

Brij 35

Conservante

CAL Patrn Especifico para cada lote

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD

Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar

las precauciones normales necesarias, que se requieren al

manejar reactivos de laboratorio.

Atencin: Patrn

El material de origen humano del que se deriva este producto ha

sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de

Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antgeno de

Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de

Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO.

Los mtodos utilizadon estn aprobados por FDA.

Sin embargo, dado que ningn mtodo puede ofrecer una

seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este

material y todas las muestras de pacientes se debern manejar

como posibles transmisores de enfermedades infecciosas y

eliminar apropiadamente.

Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.

Los reactivos deben utilizarse solamente para su

propsito por personal de laboratorio cualificado, y bajo

condiciones de laboratorio apropiadas.

ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO Y

DEL PATRON

R1. Concentrado BCG

Diluya el contenido de una botella con 87 ml de agua

destilada. Estable durante 3 meses si se conserva entre

+15 y +25C.

CAL. Estandard

Contenido listo para su uso. Etable hasta la fecha de

caducidad si se conserva entre +15 y +25C.

MATERIALES SUMINISTRADOS

Concentrado BCG

Patron Albumina

MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

Pipetas para dispensar volumenes 10 l y 3,0 ml. Cronmetro y bao de agua o bloque de calentamiento para

mantener la temperatura entre 20 - 25C.

Espectrfotmetro con una capacidad de longitud de onda de

600 a 650 nm

Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y Nivel

3 (No. Cat. HE 1532)

Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351).

OF 3

MANUAL AB 362

PROCEDIMIENTO(2)

Utilice H2O de doble destilacin para realizar una nueva

calibracin de la ganancia en el modo cubeta. Seleccione ALB en

la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a cabo un blanco de

agua de la forma indicada.

Pipetee en una cubeta:

Blanco de reactivo S0 Patrn S1 Muestra

H2O de doble destilacin 3 l - - Patrn - 3 l -

Muestra - - 3 l

Reactivo 1000 l 1000 l 1000 l

Mzclelo e incbelo durante 20 minutos a 20-25 oC o durante

10 minutos a 37 oC.

Introdzcalo en el soporte de la celda de flujo de RX Monza y

pulse Read (Leer) en un plazo de 60 minutos.

CALIBRACIN PARA RX MONZA

Se recomienda llevar a cabo una calibracin diaria mediante el

patrn CAL que se proporciona en el kit o mediante el suero de

calibracin de nivel 3 de Randox.

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 578 nm o 623 nm

Espectrofotmetro: 630 nm (600 - 650 nm)

Cubeta: 1 cm de espesor

Temperatura de incubacin: 20 - 25C

Medicin: Frente al blanco de reactivo

Pipetear en tubos de ensayo:

Reactivo Patrn Muestra

H2O destilada 0,01 ml --- ---

Patrn (CAL) --- 0,01 ml ---

Suero o Plasma --- --- 0,01 ml

Reactivo de BCG (R1) 3,00 ml 3,00 ml 3,00 ml

Mezclar e incubar durante 5 min entre +20 y +25C. Medir la

absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrn

(Apatrn) frente al blanco de reactivo

CLCULO MANUAL

La concentracin de albmina en la muestra puede

calcularse utilizando la frmula siguiente:

Conc. de albmina (g/l o g/dl)

Amuestra

= x Concentracin

Apatrn del patrn

NORMALIZACIN

El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en

el material de referencia DA470 de la albmina (IFCC).

CONTROL DE CALIDAD

Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros

Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deber de analizar dos

niveles de controles al menos una vez al da. Los valores

obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si

los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye

error, se debern seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.

2. Comprobar que todo material est limpio.

3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de

bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.

4. Comprobar la temperatura de reaccin

5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.

6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de

los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28

94422413.

INTERFERENCIA

Se analizaron los siguientes analitos hasta los siguientes niveles y se encontr que no interfieren:

Bilirrubina 500 mol/l Intralpido 1,2%

Triglicridos 22,75 mmol/l

Hemoglobina 6 g/l

VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO(2)

Adultos 38 - 44 g/l (3,8 4,4 g/dl)

Recin nacidos 38 - 42 g/l (3.8 - 4.2 g/dl)

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

de referencia para considerar las diferencias en edad, sexo, dieta

y localizacin geogrfica.

CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE

FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante

el analizador Rx Monza a una temperatura de 37 oC.

LINEALIDAD

Este mtodo es lineal hasta 7,55 g/dl. Si la concentracin

sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 1 con una

solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de nuevo.

Multiplique el resultado por 2.

SENSIBILIDAD

La concentracin mnima detectable de albmina con un nivel

aceptable de precisin se ha determinado en

0,287 g/dl.

OF 3

MANUAL AB 362

PRECISION (Suero)

Anlisis (Intra)

Nivel 1 Nivel 2

Media (g/dl) 2,86 4,36

DE 0,036 0,031

CV (%) 1,28 0,71

n 20 20

Anlisis (Inter)

Nivel 1 Nivel 2

Media (g/dl) 2,86 4,36

DE 0,129 0,174

CV (%) 4,52 3,99

n 20 20

CORRELACION

Se compar el mtodo Randox (Y) con un mtodo comercial

disponible (X). Se analizaron 51 muestras con valores

abarcando un rango de 22 a 46 g/l en un analizador Hitachi 747. El anlisis de regresin lineal de los datos result en la siguiente

ecuacin:

Y = 1,073 X + 0,204

con un coeficiente de correlacin r = 0.9910

Se analizaron 40 muestras con valores de entre 1,66 y 4,51 g/dl.

REFERENCIAS

1. Grant G.H., et al Amino Acids and Proteins; Fundamentals of

Clinical Chemistry, Tietz N.W. Editor, Third Edition, WB

Saunders Company Philadelphia USA, 328-329, 1987

2. Doumas, B.T., Watson, W.A., Biggs, H.G., Clin. Chim. Acta.

1971; 31: 87.

Revised 10 Sep 10 bm

Rev. 001

OF 3

FOSFATASA ACIDA

(ACP) Mtodo Colorimtrico

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el anlisis cuantitativo in vitro de Fosfatasa Acida en el suero.

Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador

Rx Monza.

No. Cat.

AC 1011 R1. Tampn 1 x 70 ml

20 x 3 ml R2. Sustrato 20 x 3 ml

R3. Tartrato 10 frascos

SAM STAB Estabilizador 1 frasco

METODO COLORIMETRICO

PRINCIPIO(1)

fosfatasa cida

1-naftil-fosfato + H2O fosfato + 1-naftol

1-naftol+sal de 4-cloro-2-metilfenildiazonio*

colorante azo

* = Sal TR Fast Rojo

PREPARACION DE LA MUESTRA

Suero. La muestra puede ser estabilizado mediante la adicin de

1 gota de cido actico estabilizador (STAB SAM) a 1 ml de

suero. Estable durante 3 das a +2 y +8C 24 horas a +15 y

+25C.

Suero. La muestra se estabiliza aadiendo una gota de cido

actico (estabilizador 4) a 1 ml de suero. Es estable durante 3

das entre +2 y +8C 24 horas entre +15 y +25C.

COMPOSICION DEL REACTIVO

Componentes Concentraciones en la prueba

R1 Tampn

Tampn citrato 75 mmol/l, pH 5,2

R2. Sustrato

1-naftilfosfato 10 mmol/l

Sal TR Fast Rojo 2,5 mmol/l

R3. Tartrato

Tartrato sdico 135 mmol/l

SAM STAB Estabilizador

Acido actico 3 mmol/l


Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar

las precauciones normales requeridas para el manejo de

reactivos de laboratorio.


Los reactivos deben ser utilizados slo para los

propsitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de

laboratorio.

ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE REACTIVOS

R1. Bufer

Contenios listos para su uso. Estable hasta la fecha de

caducidad si se conserva entre +2 to +8C.

Para la Fosfatasa cida total:

R2. Substrato (R2A) Disuelva el contenido de 1 botella de sustrato R2 en 3 ml

de tampn R1. Estable durante 5 das si se conserva entre

+2 y +8C o 24 horas entre +15 to +25C, Conservese

protegido de la luz.

Para la Fosfatasa cida no prosttica:

R2. Substrato (R2B)

Disuelva el contenido de 1 botella de sustrato R2 en 3 ml de tampn R1. A continuacin, transfiera el contenido a un

vial de tartrato R3. Estable durante 5 das si se conserva

entre +2 to +8C o 24 horas entre +15 y +25C,

Conservese protegido de la luz.

MATERIALES SUMINISTRADOS Tampn

Sustrato

Tartrato Estabilizador


Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y

Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)


PRPROCEDIMIENTO

FOSFATASA CIDA TOTAL

Seleccione ACP en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a

cabo un blanco de agua de la forma indicada.

Pipetee en un tubo de ensayo:

Muestra 0,05 ml

Reactivo 0,5 ml

Mzclelo, incbelo durante exactamente 5 minutos a 37 C o

durante 10 minutos a 20-25 C y asprelo en Rx Monza.

FOSFATASA CIDA NO PROSTTICA

Seleccione NACP en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y

lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.


Muestra 0,05 ml

Reactivo 0,5 ml

Mzclelo, incbelo durante exactamente 5 minutos a 37 C o

durante 10 minutos a 20-25 C y asprelo en Rx Monza.


Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de calibracin

de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es aconsejable cambiar

el lote del reactivo para la calibracin o seguir lo indicado por los

procedimientos de control de calidad.

OF 3

MANUAL/ RX MONZA AC 1011

FOR MANUAL USE

Longitud de onda: Hg 405 nm


Temperatura: 30/37C

Medicin: frente al aire


Macro Semi Micro

Muestra 0,20 ml 0,10 ml

Solucin de reactivo R2 2,00 ml 1,00 ml

Mezclar, verter en la cubeta e incubar durante 5 min a 30/37C.

Leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar el tiempo

simultneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min.

CLCULO MANUAL

Para calcular la actividad de la fosfatasa cida en la muestra

utilizar las frmulas siguientes:

Fosfatasa cida total:

U/l = 743 x Asol.2a/min Fosfatasa prosttica:

U/l = 743 x (Asol.2a/min - Asol.2b/min)

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel

3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de

controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern

encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se

encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se

debern seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara


3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.


5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los

Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.

INTERFERENCIA

Sueros hemolticos e ictricos (bilirrubina > 3 mg/dl) interfieren

en la prueba.

VALORES NORMALES EN SUERO (2)

30C 37C

Fosfatasa cida total

Hombre Hasta 4,2 U/l Hasta 4,7 U/l

Mujer Hasta 3,0 U/l Hasta 3,7 U/l

Fosfatasa cida

prosttica Hasta 1,5 U/l Hasta 1,6 U/l


de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad

geogrfica de la poblacin.

CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un analizador RX monza. FOSFATASA CIDA TOTAL LINEALIDAD El mtodo es lineal hasta una concentracin de 159 U/I. Si la concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 4 con una solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5. SENSIBILIDAD La concentracin detectable mnima de fosfatasa cida con un nivel aceptable de precisin se determin en 2,53 U/l. PRECISION Intraensayo Nivel 2 Nivel 3 Media (U/l) 15.9 43.6 DE 0.717 1.90 CV(%) 4.51 4.35 n 20 20 Interensayo Nivel 2 Nivel 3 Media (U/l) 15.9 43.6 DE 1.05 3.04 CV(%) 6.59 6.98 N 20 20 CORRELACIN Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin lineal: Y = 0.9723 X + 0.5527 y un coeficiente de correlacin de r = 0,9925 se analizaron 42 muestras de pacientes abarcando un rango de 2,5 a 93,9 U/l. FOSFATASA CIDA NO PROSTTICA LINEALIDAD El mtodo es lineal hasta una concentracin de 80,8 U/I. Si la concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 4 con una solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5. SENSIBILIDAD La concentracin detectable mnima de fosfatasa cida con un nivel aceptable de precisin se determin en 1,76 U/l. PRECISION Intraensayo Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 6.65 17.8 DE 0.289 0.765 CV(%) 4.34 4.30 n 20 20 Interensayo Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 6.65 17.8 DE 0.295 0.892 CV(%) 4.43 5.01 n 20 20

OF 3

MANUAL/ RX MONZA AC 1011

CORRELATION

Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial

disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin

lineal:

Y = 0.9653 X + 0.1849

y un coeficiente de correlacin de r = 0,9971.

se analizaron 40 muestras de pacientes abarcando un rango de

2,1 a 80,2 U/l.

REFERENCIAS

1. Hillmann, G.J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1971; 9: 273.

2. Silver, D., et al., J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21: 519.

Revisado 05 Sep 11 bm

Rev. 002

OF 2

ALDOLASA (ALS) Fructosa-1,6-difosfato aldolasa

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el anlisis cuantitativo in vitro de Aldolasa en suero y plasma.

Este producto es adecuado para su utilizacin de forma Manual y

en el analizador RX monza.

No. Cat.

AD 189 R1. Tampn/Sustrato 5 x 20 ml

5 x 20 ml R2. NADH 2 x 1 ml

R3. GDH/TIM/LDH 1 vial

PRINCIPIO

La aldolasa convierte la fructosa-1,6-difosfato (F-1,6-DP) en gliceraldehdo-3-fosfato (GAP) y dihidroxiacetona fosfato (DAP).

La adicin de triosafosfato isomerasa (TIM), glicerolfosfato

deshidrogenada (GDH) y NADH convierte la dihidroxiacetona

fosfato en glicerol-1-fosfato. El grado de la reaccin de la aldolasa

se mide por la disminucin de la absorbancia a 340 nm como

consecuencia de la conversin de NADH en NAD+.

aldolasa

F-1,6-DP GAP + DAP

TIM

GAP DAP

GDH

2DAP + 2NADH + 2H+ 2Glicerol-1-P + 2 NAD+

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma.


Componentes Concentracin en la prueba

R1. Tampn/Sustrato

Tampn colidina 51 mmol/l, pH 7,4

Monoyodoacetato 0,27 mmol/l

F-1,6-DP 2,7 mmol/l

R2. NADH 0,23 mmol/l

R3. GDH/TIM/LDH

GDH 326 mU/ml

TIM 4,35 U/ml

LDH 616 mU/ml

Ammonium Sulphate > 35%


Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.

Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren

al manejar reactivos de laboratorio.

Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se

desean.


propsito por personal de laboratorio cualificado, y bajo

condiciones de laboratorio apropiadas.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD

R1. Tampn/Sustrato

Reconstituir un vial de Tampn/Sustrato 1 con 20 ml

e agua bidestilada. Es estable durante 2 semanas si se

conserva entre +2 y +8C.

R2. NADH Reconstituir un vial de NADH 2 con 1 ml de agua

bidestilada. Es estable durante 4 semanas entre +2 y +8C.

R3. GDH/TIM/LDH

Componentes listos para su uso. Es estable hasta la

fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8C.

ESTABILIDAD Y PREPARACIN DEL REACTIVO EN

FUNCIONAMIENTO PARA RX MONZA

Prepare el reactivo en funcionamiento como se indica en la tabla

siguiente:-

Tampn/Sustrato NADH GDH/TIM/LDH

R1 R2 R3 2.5ml 0.05ml 0.01ml

5.0ml 0.1ml 0.02ml

10.0ml 0.2ml 0.04ml

Estable durante 8 horas entre +2 y +8C.

MATERIALES SUMINISTRADOS Tampn/Sustrato

NADH

GDH/TIM/LDH


Calibrador de aldolasa de Randox (No. Cat. AD 5000)

Control de Aldolasa Randox Nivel 2 (Cat. No. AD 5001) y Nivel

3 (Cat. No. AD 5002)

0.9% Solucin NaCl.

PROCEDIMIENTO

Seleccione ALS en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a

cabo un blanco de agua de la forma indicada.


SO* Patrn Muestra

S1

H2O de doble destilacin 35l --- ---

ALS CAL --- 35 l ---

Muestra --- --- 35 l

Reactivo en funcionamiento 450 l 450 l 450 l

Mzclelo, incbelo durante 5 minutos a 37C o 10 minutos a 20-

25C y asprelo en RX monza.

*blanco de reactivo


El uso de solucin salina y Randox Aldolasa srica de calibracin

se recomienda para la calibracin. LA calibracin se recomienda

a los cambios en el lote del reactivo como se indica en los


OF 2

MANUAL/ RX MONZA AD 189

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 340 nm (Hg 365 nm o Hg 334 nm)


Temperatura: 37C

Medicin: frente a muestra blanco


Muestra Blanco Calibrador Muestra

Muestra 0,2 ml 0,2 ml 0,2 ml

Tampn/Sustrato (R1 - 2,50 ml 2,50 ml

Solucin NaCl 0,9% 2,50 ml - -

NADH (R2) - 0,05 ml 0,05 ml

GDH/TIM/LDH (R3) - 0.01 ml 0,01 ml

Mezclar la muestra, R1, R2 y R3 y se incuba durante 5 minutos a

37C y leer la absorbancia A1 contra el blanco de muestra.

Dejar reposar a 37C durante exactamente 20 minutos. despus

de la primera lectura y entonces medir la absorbancia A2 frente

al blanco.

* Si A1 es < 0,95 diluir 1+1 con NaCl al 0,9% y repetir el test.

Multiplicar el resultado por 2.

MANUAL DE CLCULO

Para calcular la actividad aldolase utilizar la siguiente frmula:

(A1 - A2) Muestra

x Conc. de calibrador

(A1 - A2) Calibrador

CONTROL DE CALIDAD

Los controles de Aldolasa Randox Niveles 2 y 3 se recomiendand

para el control de calidad diario. Se deberan procesar 2 niveles de

control al menos una vez por da. Los valores que se obtengan

deberan entrar dentro de un rango especfico. Si los valores no estan dentro de este rango, y la repeticin excluye el error, se

deberan lleva a cabo los siguientes pasos:

1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.


3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano

puede contribuir a la inexactitud de los resultados.



6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los

Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.

INTERFERENCIA

La hemlisis interfiere en la prueba.

VALORES DE REFERENCIA(1)

Suero: Hasta 7,6 U/l (37C)


de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad


CARACTERSTICAS DE RENDIMIENTO ESPECFICAS

Se obtuvieron las siguientes caractersticas de rendimiento

mediante un analizador RX monza y un modo de clula de flujo

a 37C.

LINEALIDAD

El mtodo es lineal hasta una concentracin de 106 U/l. Si la

concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir

1+4 con una solucin de NaCl del 0,9% y debe someterse a

ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.

SENSIBILIDAD La concentracin detectable mnima de Aldolasa con un nivel aceptable de precisin se determin en 1,73 U/l.

PRECISION Precisin intraensayo Nivel 2 Nivel 3 Media (U/l) 6.36 19.1 DE 0.295 0.854 CV(%) 4.64 4.47 n 20 20 Precisin interensayo Nivel 2 Nivel 3 Media (U/l) 6.36 19.1 DE 0.402 1.35 CV(%) 6.32 7.09

n 20 20

CORRELACIN

El mtodo de Randox (Y) se compar con otro mtodo

comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de

regresin lineal:

Y = 0,9815 X + 0,183

y un coeficiente de correlacin r = 0,9917.

Se analizaron 42 muestras con valores de entre 2,46 y 89,86 U/l.

REFERENCIA

1. Feissli, S., et al., (1966). Klin. Wschr. 44: 390.

Revisado el 15 de Sep 2010 bm

Rev. 001

OF 2

ALT Alanina Aminotransferasa

IFCC

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el anlisis cuantitativo in vitro de Alanina

Aminotransferasa en el suero y plasma. Este producto es

adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

AL 1200 R1a. Tampn/Substrato 1 x 70 ml

20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/

-oxoglutarato 20 x 2 ml

AL 1205 R1a. Tampn/Substrato 1 x105 ml









METODO UV

Este es un mtodo estandard optimizado de acuerdo con las

concentraciones recomendadas por la IFCC.

PRINCIPIO

ALT

-oxoglutarato + L-alanina L-glutamato + piruvato LD

piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+

MUESTRA

Suero, plasma heparinizada o plasma EDTA.


Componentes Concentracin en la Prueba

R1a. Tampn/Substrato

Tampn Tris 100 mmol/l, pH 7,5

L-alanina 0,6 mol/l

R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato -oxoglutarato 15 mmol/l LD 1,2 U/ml

NADH 0,18 mmol/l


Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.

Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo

de reactivos de laboratorio.

La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el

contacto con la piel o las membranes mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante

agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar

atencin mdica inmediatamente.

La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las

caeras, formando cidos potencialmente explosivos. Cuando

se desechen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes

de agua para evitar la formacin de cidos. Las superficies

metlicas expuestas, debern limpiarse con hidrxido de sodio

al 10%.

Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles


propsito por personal de laboratorio cualificado, y

bajo condiciones de laboratorio apropiadas.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y

ESTABILIDAD

R1a. Tampn/Substrato

Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad

cuando se conserva entre +2 y+8C

R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/

-oxoglutarato R1b con el volumen apropiado de Tampn/Substrato R1a:

2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AL 1200)

10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AL 1205) 20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AL 1268)

Estable durante 14 das entre +2 y+8C e 24 horas

entre+15 y +25C.

Cat. No. AL 2360 5 x 100 ml

Reconstituir un vial of Enzima/Coenzima/-oxoglutarato R1b con una parte de Tampn/Substrato R1a y despus

transferir todo el contenido a la botella R1a, enjuagando la

botella R1b varias veces. Estable durante 14 das entre +2

y+8C e 24 horas entre+15 y +25C.

R1 = Bufer/Substrato/Enzima/Coenzima/-oxoglutarato R2 = Ninguno


Tampn/Substrato

Enzima/Coenzima/-oxoglutarato




Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

Salino RX series (Cat. No. SA 3854)

OF 2

MANUAL AL 1200

PROCEDIMIENTO Aspire H2O de doble destilacin y realice una nueva calibracin de la ganancia en el modo de clula de flujo. Seleccione ALT en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada. Pipetee en un tubo de ensayo: Muestra 0,05 ml Reactivo 0,5 ml Mzclelo y asprelo en Rx Monza.

CALIBRACIN PARA RX MONZA Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de calibracin de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibracin o seguir lo indicado por los procedimientos de control de calidad. PARA USO MANUAL Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm o Hg 365 nm) Cubeta: 1 cm de espesor

Temperatura: 30/37C Medicin: frente al aire Pipetear en la Cubeta: Macro Micro Muestra 0,2 ml 0,1 ml R1. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2,0 ml 1,0 ml Mezclar. Leer la absorbancia inicial despus de 1 minuto. Leer de nuevo tras 1, 2 y 3 minutos. Observar si el cambio de absorbancia por minuto est entre 0,11 y 0,16 a 340 nm/Hg 334 nm 0,06 y 0,08 a Hg 365 nm usar slo los valores para los 2 primeros minutos del clculo. CLCULO MANUAL Para calcular la actividad de la ALT utilizar la siguiente frmula: U/l = 1746 x A 340 nm/min U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min NORMALIZACIN El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en el material de referencia JSCC TS01 de ALT. CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara. 2. Comprobar que todo material est limpio. 3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.

4. Comprobar la temperatura de reaccin 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de

los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

INTERFERENCIA

Evitar la hemlisis ya que interfiere con el anlisis.

VALORES DE NORMALIDAD EN SUERO(1)

25C 30C 37C

Hombres hasta 22 U/l hasta 29 U/l hasta 40 U/l

Mujeres hasta 17 U/l hasta 22 U/l hasta 31 U/l

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio

rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad


CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante

un analizador Rx Monza en funcionamiento a 37 C.

SENSIBILIDAD La concentracin detectable mnima de ALT con un nivel

aceptable de precisin se determin en 7,99 U/l.

LINEALIDAD

Este mtodo es lineal hasta 500 U/l. Si la concentracin

sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + x con una solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de

nuevo. Multiplique el resultado por x + 1.

PRECISION

Anlisis (Intra) Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 38.9 134

DE 1.79 1.59

CV(%) 4.61 1.19

n 20 20

Anlisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 38.9 134

DE 1.78 5.22

CV(%) 4.58 3.90

n 20 20

CORRELACIN

Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial


lineal:

Y = 0,99 X + 17,2

y un coeficiente de correlacin r = 0,9935

Se analizaron 47 muestras de pacientes con valores de entre

18 y 522 U/l.

REFERENCIAS

1. International Federation of Clinical Chemistry, Scientific

Committee. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1980; 18:

521-534.

Revisado el 04 Apr 11, bm

Rev. 004

AMONIACO (NH3) Mtodo Enzimtico - UV

MANUAL

PARA SU USO

Para la determinacin cuantitativa in vitro de Amonaco en plasma.

Este producto es adecuado para su utilizacin en Manual.

No. Cat.

AM 1054 R1a. Reactivo 20 x 3 ml

20 x 3 ml R1b. Tampn 70 ml

R2. GLDH 1,0 ml

CAL. Patrn 5,5 ml

RELEVANCIA CLNICA

La mayor fuente de amoniaco en circulacin es el tracto

gastrointestinal. En condiciones normales, el amoniaco se

metaboliza a la urea por las enzimas hepticas. Muchas

enfermedades, tanto heredadas como adquiridas, causan un

incremento en los niveles de amoniaco (hiperamonemia). Las

deficiencias heredadas de las enzimas del ciclo de la urea son la mayor causa de hiperamonemia en nios. La hiperamonemia

adquirida est provocadas por una enfermedad heptica,

insuficiencia renal o el sndrome de Reye. Un nivel de amoniaco

elevado resulta txico para el sistema nervioso central.

PRINCIPIO(1)

GLDH

-oxoglutarato + NH3 + NADH glutamato + NAD+

El amonaco se combina con -oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD

+. La correspondiente disminucin

de la absorbancia a 340 nm es proporcional a la concentracin de amonaco en plasma.

(1)

MUESTRA(2)

Plasma heparinizado o EDTA plasma.

Se obtiene sangre venosa sin estancar y se conserva en un bao

de hielo. El plasma se separa dentro de 30 min. El ensayo de

amonaco debera llevarse a cabo inmediatamente. El plasma

puede conservarse durante 2 horas a +4C.


Componentes Concentracin inicial de las soluciones

R1a. Reactivo

NADH 0,16 mmol/l

-oxoglutarato 2 mmol/l R1b. Tampn

Trietanolamina 0,15 mol/l, pH 8,6

R2. GLDH 1200 U/ml

CAL. Patrn See lot specific insert





Las soluciones R1b, R2 y CAL contienen azida sdica. Evitar su

ingestin o contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto

con la piel, lavar inmediatamente el rea afectada con agua

abundante. En caso de ingestin o contacto con los ojos llamar

inmediatamente a un mdico.

La azida sdica reacciona con el cobre y el plomo de las tuberas,

lo que podra producir azidas explosivas. Cuando se desheche

este reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la

formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan

sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas

con hidrxido sdico al 10%.


desean.

Por favor, desechar todos los materials Biolgicos y Qumicos de acuerdo a las pautas locales.

Los reactivos deben ser utilizados solo para los

propsitos indicados por personal adecuado cualificado

de laboratorio bajo condiciones apropiadas de

laboratorio

ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS

R1a. Reactivo

Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo R1a con

3 ml de Tampn R1b. Es estable 24 horas entre +15 y

+25C 2 das entre +2 y +8C.

R1b. Tampn


especificada cuando se conserva entre +2 y +8C.

R2. GLDH



CAL. Patrn



R1 = Reactivo/Tampn

R2 = GLDH


Reactivo

Tampn

GLDH

Patrn

MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

PROPORCIONADOS

Controles Randox de Amonio Etanol:

NIvel 1 (Cat. No. EA 1366)

Nivel 2 (Cat. No. EA 1367)

Nivel 3 (Cat. No. EA 1368)

MANUAL - AMONIACO - AM 1054 PAGINA 2 DE 2

PROCEDIMIENTO

Longitud de onda: 340 nm


Temperatura: 25/30/37C

Medicin: Frente al aire

Procedimiento Macro

Pipetear en la cubeta:

Blanco de Patrn Muestra

Reactivo

Muestra --- --- 0,2 ml

Agua destilada 0,2 ml --- ---

Patrn --- 0,2 ml ---

Reactivo (R1) 3,0 ml 3,0 ml 3,0 ml

Mezclar, dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial

de la muestra y del blanco (A1).

GLDH (R2) 0,02 ml 0,02 ml 0,02 ml

Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la

muestra y del blanco (A2).

Procedimiento Semi Micro

Pipetear en la cubeta: Blanco de Patrn Muestra

Reactivo Muestra --- --- 0,1 ml Agua destilada 0,1 ml --- ---

Patrn --- 0,1 ml --- Reactivo (R1) 1,5 ml 1,5 ml 1,5 ml Mezclar, y dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial

de la muestra y del blanco (A1). GLDH (R2) 0,01 ml 0,01 ml 0,01 ml

Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la muestra y del blanco (A2). CONTROL DE CALIDAD

Los controles Randox de Amonio Etanol Nivel 1, Nivel 2 y

Nivel 3 se recomiendan para el control diario de calidad Deberan

utilizarse como mnimo dos niveles de controles una vez al da. Los

valores obtenidos deberan entrar dentro de un rango determinado.

Si estos valores se salen de ese rango aun habindolo repetido, se

deben seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar los ajustes del instrumento y el foco de luz.

2. Comprobar la limpieza de todo el equipo.

3. Comprobar el agua y la presencia del algn posible agente

contaminante que pueda interferir en los resultados.

4. Comprobar la temperatura de reaccin.

5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y los componentes del

mismo.

6. Contactar con el Servicio Tcnico de Laboratorios Randox.

Irlanda del Norte (028) 94422413.

CLCULOS

Ablanco = Blanco A1 - Blanco A2

Amuestra = Muestra A1 - Muestra A2

Utilizando un patrn:

Amuestra - Ablanco

Conc. de x Patrn de conc.

Amonaco = Apatrn - Ablanco

INTERFERENCIA

La hemlisis interfiere con el anlisis.

En muestras normales se observa un pequeo cambio de

absorbancia. Esto puede ser aumentado aadiendo 0,3 ml de

muestra en vez de 0,2 ml. para el procedimiento macro y 0,15 ml

de muestra en vez de 0,1 ml para el procedimiento semi micro.

Para utilizar un mtodo completamente automatizado de

amonaco recomendamos No. Cat. AM 1015.

VALORES NORMALES (2)

Amonaco en plasma: 10 - 47 mol/l 0,17 -0,80 g/ml


que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la

poblacin.

LINEALIDAD

El mtodo es lineal hasta 1180 mol/l (20 g/ml).

REFERENCIAS

1. Dewan J.G., Biochem J., 1938; 32: 1378.

2. Mondzac A., Ehrlich G.E., Seegmiller J.E., J Lab Clin. Med.,

1965; 66: 526.

Revisado el 26 Abril 2010 bm

Rev. 001

PGINA 1 DE 3

ANTITROMBINA III (AT III) SEMIAUTOMTICO

INDICACIONES Determinacin cuantitativa in vitro de la antitrombina III (AT III) en plasma humano mediante el mtodo cromognico. El producto es adecuado para uso con mtodos manuales o semiautomticos.

Nm. cat. ANT 2754 R1a. Reactivo de trombina 4 x 2 ml 26 ml R1b. Tampn 1 x 10 ml R2. Sustrato 4 x 2 ml

RELEVANCIA CLNICA La antitrombina III es un inhibidor de las proteasas plasmticas del tipo serina. Una funcin importante de la antitrombina III es inhibir la actividad de la trombina. Por lo general, la velocidad de inhibicin de la trombina causada por la antitrombina III es lenta (actividad antitrombina progresiva). Sin embargo, dicha velocidad puede aumentar miles de veces en presencia de heparina (actividad cofactor de la heparina). Tolefsen y Blank(1) han descubierto otro inhibidor rpido de la trombina que depende de la heparina, el cofactor II de la heparina, en el plasma humano. Esta protena puede interferir en las mediciones de antitrombina III, especialmente a concentraciones de heparina elevadas (2 unidades/ml USP).

PRINCIPIO En este mtodo de dos fases(2) se aade trombina a la solucin diluida de plasma que contiene antitrombina III en presencia de exceso de heparina. Tras un perodo de incubacin inicial (fase 1) la actividad residual de la trombina se determina con un sustrato cromognico especfico de la trombina (fase 2). La actividad residual de la trombina es inversamente proporcional a la concentracin de antitrombina III. Con el fin de conferir especificidad para la antitrombina III, este sistema de ensayo utiliza un concentracin final de heparina ms baja, en la cual la inactivacin de la trombina aumentada por heparina, debida al cofactor II de la heparina, es desdeable. Adems, el cofactor II de la heparina humana reacciona ms fcilmente con la trombina humana que con la bovina(3). As, este sistema de ensayo presenta mayor especificidad para la antitrombina III al utilizar trombina bovina.

MUESTRA Plasma citrado. Plasma diluido 1+40 en NaCl al 0,9%.

RECOGIDA DE MUESTRAS Y PREPARACIN (4) Mezcle nueve partes de sangre recin extrada con una parte de citrato trisdico al 3,2% (0,109 mol/l). Evite la hemlisis y la contaminacin de la muestra sangunea con fluidos corporales. Se deben rechazar las muestras que contengan menos del 90% del volumen previsto de llenado. Centrifugue la sangre durante 15 minutos a 1500 g. Realice el anlisis en un lapso de 4 horas, si las muestras se conservan entre 20 y 25C. Si la prueba no se realiza antes de las 4 horas, el plasma puede mantenerse congelado a -20C hasta 2 semanas, o a -70C durante un mximo de 6 meses. Para obtener ms detalles sobre la recogida de muestras consulte el documento NCCLS H21-A3.

No postergue el mezclado de la sangre con el anticoagulante.

Evite la formacin de espuma en la muestra. Utilice exclusivamente recipientes de plstico o de vidrio

siliconado. Las muestras turbias, ictricas, lipmicas y hemolizadas

pueden generar resultados errneos. La congelacin y consiguiente descongelacin de

muestras de plasma que contengan clulas residuales podra generar membranas celulares daadas que pueden afectar a los resultados.

El las muestras de plasma con un hematocrito fuera del intervalo del 20 al 55% puede que la concentracin de anticoagulante errnea, por lo que debe ajustarse el anticoagulante segn proceda.


Contenido Concentracin inicial

de las soluciones

R1a. Reactivo de trombina

Trombina bovina liofilizada 8 UI/ml

R1b. Tampn

Tampn tris 90 mmol/l, pH 8,2

R2. Sustrato

Tosyl-Gly-Pro-Arg-4-nitranilida

acetato 2,5 mmol/l

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DE

SEGURIDAD

Solo para uso diagnstico in vitro. No pipetee con la boca.

Aplique las precauciones habituales necesarias para la

manipulacin de reactivos de laboratorio.

El reactivo tampn de la antitrombina III (R1b) contiene acida

sdica. Evite la ingestin o el contacto con la piel o las

mucosas. En caso de contacto con la piel, lave el rea

afectada con abundante agua. En caso de contacto con los

ojos o ingestin, busque atencin mdica de inmediato.

La acida sdica reacciona con las tuberas de plomo y cobre,

con el consiguiente riesgo de generacin de acidas explosivas.

Al eliminar estos reactivos, hgalo con gran cantidad de agua

para evitar la acumulacin de acidas. Las superficies

expuestas de metal deben limpiase con hidrxido sdico al

10%.

Estn disponibles, previa peticin, las fichas tcnicas de salud

y seguridad.

Los reactivos deben utilizarse solo para la finalidad

prevista y por personal de laboratorio

adecuadamente cualificado, en unas condiciones de

laboratorio apropiadas.

PGINA 2 DE 3

MANUAL ANT 2754

ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS

REACTIVOS

R1a. Reactivo de trombina

Reconstituya un vial de reactivo de trombina (R1a) con

2 ml de tampn (R1b).

Estable durante 2 das entre +15 y +25C; 14 das

entre +2 y +8C; 30 das a -20C.

R1b. Tampn

Contenido listo para su uso. Estable hasta la fecha de

caducidad cuando se almacena a una temperatura entre

+2 y +8C.

R2. Sustrato

Reconstituya un vial de sustrato (R2) con 2 ml

de agua desionizada.

Estable durante 8 das entre +15 y +25C; 14 das

entre +2 y +8C; 90 das a -20C.

Precaliente las partes alcuotas de reactivo de

trombina (R1a) y sustrato (R2) a +37C antes de

utilizarlas.


Reactivo de trombina

Tampn

Sustrato


Calibrador de coagulacin Randox (N. cat. CG5037)

Controles de coagulacin Randox de nivel 1, 2 y 3 (N. cat.

CG5021, CG5022 y CG 5023)

Micropipetas

Micropuntas

Analizador de coagulacin foto-ptico

Temporizador

PROCEDIMIENTO

Pipetear en una cubeta

Muestra diluida/control/calibrador 100 l

Reactivo de trombina (R1) 100 l

Mezclar bien e incubar a +37C durante 3 minutos, aadir

sustrato (R2) 100 l

Mezclar bien y tras 5 segundos leer la absorbancia inicial a

405 nm. Volver a leer la absorbancia transcurridos 30

segundos.

Determinar la velocidad de cambio de absorbancia

(Abs/min)

Siga las instrucciones del fabricante del instrumento

para realizar la prueba.

CALIBRACIN

Para la calibracin se recomienda el calibrador de coagulacin

Randox (valor especfico de lote). Use salino como calibrador

del 0%, con el calibrador de coagulacin Randox como 50% y

100%. Se recomienda calibrar cambiando el lote de reactivo o

tal como indican los procedimientos de control de calidad.

CLCULO DE LOS RESULTADOS

Trace el grfico de la Abs/min obtenida con cada calibrador

de antitrombina III frente al % de antitrombina III

correspondiente en papel de escala lineal.

La antitrombina III en las muestras de plasma del paciente se

puede determinar mediante la interpolacin de la curva de

calibracin.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los controles de coagulacin Randox de nivel

1, 2 y 3 para el control de calidad diario. Deben analizarse

tres niveles de controles al menos una vez al da. Los valores

obtenidos deben situarse dentro de un intervalo

determinado. Si estos valores estn fuera del intervalo y la

repeticin excluye un posible error, debe procederse como

sigue:

1. Comprobar los parmetros del instrumento.

2. Comprobar que todo el equipo utilizado est limpio.

3. Comprobar los contaminantes, como un crecimiento

bacteriano, que pueden contribuir a la obtencin de

resultados imprecisos.

4. Comprobar la temperatura de la reaccin.

5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y su contenido.

6. Pngase en contacto con el servicio tcnico de atencin

al cliente de Randox Laboratories, llamando al telfono

+44 (0) 28 9442 2413 (Irlanda del Norte).

VALORES PREVISTOS

Los valores normales con el reactivo Randox AT III estn

comprendidos dentro del 75 y 125%.


rango de referencia, ya que pueden existir diferencias entre

instrumentos, laboratorios y poblaciones locales.

INTERFERENCIA

Evite utilizar muestras fuertemente hemolizadas y lipmicas,

ya que pueden interferir con el ensayo.

Se comprobaron los siguientes analitos, hasta los niveles que

se indican, sin encontrar interferencias:

Bilirrubina conjugada 12 mg/dl

Bilirrubina libre 12 mg/dl

Intralpidos 300 mg/dl

Triglicridos 320 mg/dl

Hemoglobina 140 mg/dl

CARACTERSTICAS DE RENDIMIENTO

Se han obtenido los siguientes datos de rendimiento

mediante un coagulmetro semiautomtico a +37C.

SENSIBILIDAD

La actividad mnima detectable de la antitrombina III se

determina como 30,0%.

LINEALIDAD

Este mtodo es lineal hasta un 130% de actividad de la

antitrombina III. Si la muestra excede este valor, diluya las

muestras previamente diluidas (1+40) de plasma an ms 1+1

con salino al 0,9% y repita el anlisis. Multiplique el resultado

por 2.

PGINA 3 DE 3

MANUAL ANT 2754

PRECISIN

Intraensayo

Normal Patolgica

Media (%) 102 65,5

DE 1.89 2,35

CV (%) 1.86 3,59

n 20 20

Interensayo

Normal Patolgica

Media (%) 85.0 59.4

DE 1.86 2.24

CV (%) 2.19 3.77

n 20 20

CORRELACIN

Este mtodo (Y) se ha comparado con otro mtodo

disponible en el mercado (X) y se ha obtenido la siguiente

ecuacin de regresin lineal:

Y = 1,00X + 0,22

y un coeficiente de correlacin de 1,00

Se analizaron 40 muestras de pacientes que abarcaron un

rango del 38,3 al 113,7%

REFERENCIAS

1. Tolefsen DM and Blank MK, J. Clin. Invest. 68: 589-596,

1981.

2. Odegard OR, Lie M and Abildgaard U: Thromb Res. 6:

287-294, 1975.

3. Friberger P, Egberg N, Holmer E, Hellgren M and

Blomback M, Thromb. Res. 25: 433-436, 1982.

4. Rosemary Biggs, Human blood Coagulation,

Haemostasis and Thrombosis, Blackwell Scientific

Publications, Oxford, England, 1972.

Revisado 25 may 12 rw

Rev. 002

ALP Fosfatasa Alcalina

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el anlisis cuantitativo in vitro de la Fosfatasa Alcalina

(ALP) en suero yl plasma. Este producto es adecuado para un

uso manual o en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

AP 542 R1a. Tampn 1 x 70 ml

20 x 3 ml R1b. Substrato 20 x 3 ml

AP 307 R1a. Tampn 1 x 105 ml


METODO COLORIMETRICO (1)

Este es una mtodo estndar optimizado de acuerdo a las

recomendaciones del Deutsche Gesellschaft fr Klinische

Chemie.

PRINCIPIO

ALP

p-nitrofenilfosfato + H2O fosfato + p-nitrofenol

MUESTRA(2)

Suero o plasma heparinizado.

Las muestras son estables durante 5 das cuando se conservan

entre +2 y +8C.


Componentes Concentraciones en la Prueba

R1a. Tampn

Tampn Dietanolamina 1 mol/l, pH 9,8

MgCl2 0,5 mmol/l

R1b. Substrato

p-nitrofenilfosfato 10 mmol/l





La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el

contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante





se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes



al 10%.

La Solucin R1a contiene dietanolamina que puede daar

seriamente los ojos y que es daino si se traga. Evitar la

ingestin y llevar proteccin adecuada para los ojos.



propsito por personal de laboratorio cualificado, y

bajo condiciones de laboratorio apropiadas.

ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS

REACTIVOS

R1a. Tampn


cuando se conserva entre +2 y +8C.

R1b. Substrato

Reconstituir un frasco de Substrato R1b con el

volumen apropiado de Tampn R1a:-

3 ml para el kit de 20 x 3 ml (AP 542) 10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AP 307)

Estable durante 30 das entre +2 y +8C 3 das entre

+15 y +25C.


Tampn

Substrato

MATERIALES NECESARIOS PERO NO

SUMINISTRADOS




Salino (Cat. No. SA 3854)

PROCEDIMIENTO

Aspire H2O de doble destilacin y realice una nueva

calibracin de la ganancia en el modo de clula de flujo.

Seleccione ALP en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y

lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.


Muestra 0,01 ml

Reactivo 0,5 ml

Mzclelo y asprelo en Rx Monza.

CALIBRACIN PARA RX MONZA Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de calibracin de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibracin o seguir lo indicado por los procedimientos de control de calidad.

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: Hg 405 nm


Temperatura: 25C, 30C, 37C


Pipetear en la cubeta: Macro Semi- Micro

Micro

Muestra 0,05 ml 0,02 ml 0,01 ml

Reactivo (25C, 30C, 37C) 3,00 ml 1,00 ml 0,50 ml

Mezclar, leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar

simultneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 minutos.

MANUAL / RX MONZA - ALP - FOSFATASA ALCALINA - AP542 / AP 307 PAGINA 2 OF 2

MANUAL CALCULO

Utilizar la siguiente formula para calcular la actividad

de ALP:

U/l = 3300 x A 405 nm/min MACRO U/l = 2760 x A 405 nm/min SEMI-MICRO U/l = 2760 x A 405 nm/min MICRO

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y

Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al da. Los valores




1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara


3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los

resultados.




los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte (028) 94422413.

INTERFERENCIA

Evitar la hemlisis ya que interfiere con el anlisis. Los

siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y

se encontr que no interfieren:

Bilirrubina 300 mol/l (17 mg/dl) Intralpidos 2%

Triglicridos 22,75 mmol/l (2010 mg/dl)

Hemoglobina 1 g/l (100 mg/dl)

VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO

25C 30C 37C

Hombres/Mujeres 60-170 U/l 73-207 U/l 98-279 U/l


rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad


CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA Los siguientes datos de rendimiento se obtuvieron mediante el

analizador Rx Monza a una temperatura de 37 oC.

SENSIBILIDAD

La concentracin mnima detectable de ALP con un nivel

aceptable de precisin se ha determinado en 49,9 U/l

LINEALIDAD

El mtodo es lineal hasta 1609 U/l. Si la concentracin

sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 9 con una

solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de

nuevo. Multiplicar el resultado por 10.

PRECISION

Anlisis Intra

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 262 486

DE 8.11 9.49

CV(%) 3.10 1.95

n 20 20

Anlisis Inter

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 262 486 DE 11.59 17.01

CV(%) 4.43 3.50

n 20 20

CORRELATION

Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en

el mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin

lineal:

Y = 1.076X - 14.5

y un coeficiente de correlacin de r = 0.9975

se hicieron anlisis a 43 pacientes abarcando un rango de 52 a 965 U/l.

REFERENCIAS

1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1972;

10: 182.

2. Englehardt A., et al, Aerztl Labor 1970 16 42.

Revisado el 10 Sep 2010 bm

Rev. 001

AST Aspartato Aminotransferasa IFCC MANUAL PARA SU USO Para el anlisis cuantitativo in vitro de aspartato aminotransferasa (AST) en suero y plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin de forma manual y en el analizador Rx Monza. Cat. No. AS 1202 R1a. Tampn/Sustrato 1 x 70 ml 20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 20 x 2 ml -oxoglutarato AS 1204 R1a Tampn/Sustrato 1 x 105 ml 10 x 10 ml R1b Enzima/Coenzima/ 10 x 10 ml -oxoglutarato AS 1267 R1a Tampn/Sustrato 1 x 105 ml 5 x 20 ml R1b Enzima/Coenzima/ 5 x 20 ml -oxoglutarato AS 2359 R1a Tampn/Sustrato 5 x 100 ml 5 x 100 ml R1b Enzima/Coenzima/ 5 x 100 ml -oxoglutarato METODO UV Este es un mtodo estndar optimizado segn las concentraciones recomendadas por la IFCC. SIGNIFICADO CLINICO(1,2,3,4)

Las aminotransferasas son un grupo de enzimas que catalizan las

inter conversiones de aminocidos y -oxocidos por medio de la transferencia de grupos amino. La GOT (aspartato aminotransferasa o transaminasa de oxaloacetato glutamato) se ha encontrado en el citoplasma y mitocondrias de las clulas estudiadas. En caso de un ligero dao del tejido como por ej. el hgado, la forma predominante de la GOT en suero es la del citoplasma, con una cantidad ms pequea proviniente de las mitocondrias. Un dao ms severo del tejido dar como resultado una mayor liberacin de enzima mitocondrial. Los niveles elevados de AST pueden ser una seal de infarto de miocardio, enfermedad heptica, distrofia muscular y dao de rganos. Los msculos del corazn son los que muestran ms actividad de sta enzima, sin embargo tambin se ha encontrado en el cerebro, hgado, mucosa gstrica, tejido adiposo y riones humanos. La IFCC recomienda actualmente (1980) procedimientos estandarizados para los anlisis de GOT incluyendo:- 1. optimizacin de las concentraciones de substrato. 2. Empleo de tampones Tris (en lugar de fosfato, el cual se ha

demostrado que inhibe la recombinacin de la apoenzima con el fosfato piridoxal).

3. Preincubacin de suero y tampn combinado para permitir que tengan lugar posibles reacciones con NADH.

4. Substrato de inicio (-oxoglutarato) 5. Activacin de fosfato piridoxal opcional. Este es un mtodo estndar optimizado de acuerdo a las

recomendaciones de la IFCC. PRINCIPIO

El -oxoglutarato reacciona con la L-aspartato en presencia de GOT para formar L-glutamato mas oxaloacetato. La reaccin indicadora utiliza el oxaloacetato para la determinacin cintica del consumo de NADH.

AST -oxoglutarato + L-aspartato L-glutamato + oxaloacetato

MDH oxaloacetato + NADH + H+ L-malato + NAD+

EXTRACCION Y PREPARACION DE MUESTRAS (5)

Suero:- Use serum free from hemolysis.

Plasma:- Se puede utilizar EDTA o heparina como anticoagulante.

El plasma se deger separar de las clulas durante la

hora siguiente a su extraccin. Las muestras se debern

refrigerar si no se utilizan inmediatamente:-

Las muestras que se almacenen durante ms de 3 das se

debern congelar a -20C.


Componentes Concentraciones en la prueba

R1a. Tampn/Sustrato

Tampn Tris 80 mmol/l, pH 7,5

L-aspartato 240 mmol/l

R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato -oxoglutarato 12 mmol/l MDH 420 U/l

LD 600 U/l

NADH 0,18 mmol/l





La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o

contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,

lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En

caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente

a un mdico.

La Azida Sdica reacciona con el cobre y el plomo de las

tuberas, lo que podra producir azidas explosivas. Cuando se

deseche este reactivo enjuagar abundantemente con agua para

evitar la formacin de estas azidas explosivas. Las superficies

metlicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sdica

deben ser lavadas con hidrxido sdico al 10%.

Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si

se desean.




laboratorio.

MANUAL/RX MONZA - AST - AS 1202/ AS 1204/ AS 1267/ AS 2359 PAGE 2 OF 3

ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS

R1a. Tampn/Sustrato

Listo para su uso. Estables hasta la fecha de caducidad

cuando se conservan entre +2 y +8C.

R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2

con el volumen adecuado de Tampn/Sustrato 1:

2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AS1202)



Es estable durante 14 das conservado entre +2 y +8C

24 horas entre +15 y +25C

Cat. No. AS 2359 5 x 100 ml

Disolver el contenido de una botella de Enzima/

Coenzima/-oxoglutarato 2 con un pequeo volumen de Tampn/Sustrato 1 y luego transferir el contenido a la botella 1, enjuagando varias veces la botella 2. Es estable

durante 14 das cuando se conserva entre +2 y +8oC 24

horas entre +15 y +25oC.

MATERIALES SUMINISTRADOS Tampn/Sustrato

Enzima/Coenzima/-oxoglutarato



Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

Salino (Cat. No. SA 3854)

PROCEDIMIENTO

Aspire H2O de doble destilacin y realice una nueva calibracin

de la ganancia en el modo de clula de flujo. Seleccione AST en la

pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a cabo un blanco de

agua de la forma indicada.


Muestra 0.05 ml

Reactivo 0.5 ml

Mix and aspirate into the Rx Monza.


Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de calibracin

de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es aconsejable cambiar

el lote del reactivo para la calibracin o seguir lo indicado por los


PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm Hg 365 nm)


Temperatura: 25/30/37C

Medicin: Frente al aire

Pipetear en cubeta: Macro Micro

Muestra 0,2 ml 0,1 ml

Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2 2,0 ml 1,0 ml

Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 1 min. Leer de

nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. Observar si la variacin de la

absorbancia por minuto se sita entre

0,11 y 0,16 a 340/Hg 334 nm

0,06 y 0,08 a Hg 365 nm

para el clculo usar slo los valores obtenidos durante los 2

primeros minutos.

MANUAL CALCULOS

Para calcular la actividad de la GOT utilizar las frmulas

siguientes:

U/l = 1746 x A 340 nm/min U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min

NORMALIZACIN

El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en

el material de referencia JSCC TS01 de AST.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel

3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de

controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern

encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se

encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se

debern seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.


3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano

puede contribuir a la inexactitud de los resultados.



6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los

Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

ESPECIFICIDAD/INTERFERENCIA(6,7)

La hemlisis bruta producir falsos resultados elevados.

Se deber tomar en consideracin los efectos de varios frmacos

en la actividad de La GOT en los casos de pacientes que estn

recibiendo grandes dosis de frmacos.

Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y

se encontr que no interfieren:

Hemoglobina 250 mg/dl

Bilirrubina libre 25 mg/dl)

Bilirrubina conjugada 25 mg/dl)

Triglicridos 1000 mg/dl)

Intralipid 200 mg/dl

Young et cols y Friedman et cols dan una lista de sustancias y

condiciones que se conoce que afectan a la actividad in vivo de La

GOT . La integridad de esta lista y la exactitud de la informacin

que en ella se suministra no representa necesariamente la

opinin de Randox Laboratories, Ltd.

VALORES NORMALES EN SUERO(8,9)

25C 30C 37C

Hombre: Hasta 18 U/l Hasta 25 U/l Hasta 37 U/l

Mujer : Hasta 15 U/l Hasta 21 U/l Hasta 31 U/l


que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la

poblacin.

CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE

FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA

Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante

el analizador Rx Monza a una temperatura de 37oC.

MANUAL/RX MONZA - AST - AS 1202/ AS 1204/ AS 1267/ AS 2359 PAGE 3 OF 3

LINEALIDAD

Este mtodo es lineal hasta una concentracin de 562 U/l. Si la

concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 +

9 con una solucin de NaCl del 0,9% y debe someterse a ensayo

de nuevo. Multiplicar el resultado por 10.

SENSIBILIDAD

La concentracin detectable mnima de AST con un nivel

aceptable de precisin se determin en 9,3 U/l.

PRECISION

Anlisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 35.6 153

DE 1.66 1.47

CV(%) 4.65 4.63

n 20 20

Anlisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 35.6 153

DE 1.77 7.10 CV(%) 4.86 4.63

n 20 20

CORRELATION

Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en el

mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin

lineal:

Y = 1.07X + 4.9

y un coeficiente de correlacin de r = 0.9975

se hicieron anlisis a 43 pacientes abarcando un rango de 28 a

559 U/l.

REFERENCIAS

1. Wroblewski F, La Due J.S: Ann Intern Med. 1956; 45: 801.

2. Wroblewski F, La Due J.S: Proc Soc Exp Biol Med 1956;

91: 569.

3. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: Clin Chem 1977; 23:

887.

4. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: J.Clin Chem Clin

Biochem 1980; 18: 521-534.

5. Tietz N W: Fundamentals of Clinical Chemistry ed 3.

Philadelphia, WB Saunders Co. 1987, pg 372.

6. Young D S, et al: Clin Chem 1975, 21; No5.

7. Friedman RB, et al: Clin Chem 1980, 26; No4.

8. Wallnofer H, Schmidt.E, Schmidt FW, eds: Synopsis der

Leberkrankheiten Stuttgart, Georg Thieme Verlag, 1974.

9. Thefeld W, et al: Dtsch Med Wschr 1974; 99: 343.

Revisado 10 Sep 10 bm

Rev. 001

OF 2

AMILASA (AMY) Etilideno Bloqueado-pNPG7

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinacin cuantitativa in vitro de la Amilasa en el

suero y orina. Este producto es adecuado para su utilizacin

de forma manual y en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

AY 2751 R1a. Tampn 1 x 50 ml


AY 1580 R1a. Tampn 1 x 105 ml


AY 1582 R1a. Tampn 2 x 105 ml 9 x 20 ml R1b. Substrato 9 x 20 ml

METODO COLORIMETRICO(1,2)

El mtodo utiliza etilideno bloqueado

p-nitrofenil-maltoeptaosida como substrato. Tambin se utiliza

en este mtodo el indicador enzima glucosidasa, utilizado para

liberar el p-nitrofenol. La glucosa terminal del sustrato se

bloquea qumicamente, previniendo la divisin por el enzima

indicador.

-amilasa

etilideno-G7 pNP etilideno -Gx + Gx-pNP

-glucosidase

Gx-pNP glucosa + pNP-glucosido

- glucosidasa

pNP-glucosido glucosa + pNP

G = glucosa

pNP = paranitrofenol

x = 2 to 5

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado u orina.

Diluir la orina 1+2 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el resultado

por 3.


Componentes Concentracin Inicial de los Reactivos

R1a. Tampn

Tampn Pipes 50 mmol/l, pH 7.0 Cloruro de Calcio 5.0 mmol/l Cloruro Sdico 50 mmol/l R1b. Substrato

Tampn Pipes 12.5 mmol/l, pH 7.0

etilideno-G7 pNP 1.0 mmol/l

-glucosidasa 12 U/ml





La Solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el

contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de

contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante





se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes



al 10%.

Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles. Los reactivos deben utilizarse solamente para su propsito por personal de laboratorio cualificado, y bajo condiciones de laboratorio apropiadas. ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO Reconstituir el contenido de un frasco de Substrato R1b con el volumen apropiado de Tampn R1a:- 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AY 2751)

5 ml para el kit de 20 x 5 ml (AY 1580)

20 ml para el kit de 9 x 20 ml (AY 1582) Estable durante 21 das entre +2 y + 8oC.


Tampn

Substrato

MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS


Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) Suero de Calibracin Randox Nivel 3 (No. Cat. CAL 2351).

NOTA

Evitar la hemlisis ya que puede disminuir los resultados.

Evitar la contaminacin del reactivo, muestras y material de

cristal por medio de la saliva o sudor, dado que poseen altos

contenidos de amilasa. No pipetear con la boca.

PROCEDIMIENTO

Seleccione AMY en la pantalla de prueba de funcionamiento y

lleve a cabo un blanco de agua segn las instrucciones.


Muestra 0.01 ml

Reactivo 0.5 ml

Mezclar y aspirar en el Monza RX


Se recomienda el uso de Calibracin Randox nivel 3 para la

calibracin. Se recomienda calibrar cada cambio de lote del

reactivo o como se indica en los procedimientos de control

de calidad.

OF 2

MANUAL/ RX MONZA AY 2751

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 405 nm (400-420 nm)


Temperatura: 37C


Pipetee en una cubeta:

Muestra 0.02 ml

Reactivo 1.0 ml

Mezclar, leer la absorbancia inicial despus de 60 segundos y al

mismo tiempo iniciar el temporizador. Leer de nuevo pasados

1, 2 y 3 minutos.

CLCULO MANUAL

Para calcular la actividad de la amilasa utilizar la siguiente

frmula:

U/l = 4712 x A 405 nm/min

NORMALIZACIN

El suero de Calibracin Randox nivel 3 es trazable a los

materiales de referencia amilasa IFCC456 y BCR476.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros

Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deber de analizar

dos niveles de controles al menos una vez al da. Los valores




1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.


3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de

bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.


5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus

componentes.


los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28

94422413.

VALORES NORMALES

Suero: hasta 95 U / l (37C)

Orina: Aleatorias hasta 490 U / l (37C)

24 horas de orina hasta 450 U/24 horas (37C)


rango de referencia para considerar las diferencias en edad,

sexo, dieta y localizacin geogrfica.

CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE

FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de Rx

Monza en el modo de flujo de clulas a 37C.

LINEARIDAD

El mtodo es lineal hasta una concentracin de 880 U / l.

Diluir las muestras con mayor concentracin en 1 + 9 con

0,9% de Solucin NaCl y repetir el test. Multiplique el resultado por 10.

SENSIBILIDAD

La concentracin mnima detectable de la amilasa con un nivel

aceptable de precisin ha sido determinada en 17.9 U/l.

PRECISION

Intraensayo

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 72.1 251

DE 3.17 7.35

CV (%) 4.39 2.93

n 20 20

Interensayo

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 72.1 251

DE 3.97 8.81

CV (%) 5.50 3.51

n 20 20

CORRELACION

Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial


lineal:

Y = 1.077 X - 8.548


se analizaron 49 muestras de pacientes abarcando un rango de

28 - 838 U/l.

REFERENCIAS

1. Ranscher, E. et al (1986) Fresenius Z. Analyt. Chem. 324:

304.

2. Kruse - Jarres, J.D. et al (1989). J. Clin. Chem. Clin.

Biochem. 27: 103.

Revised 14 Sep 10 bm

Rev. 001

PGINA 1 DE 3

CALCIO (Ca) Mtodo Colorimtrico

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el anlisis cuantitativo in vitro de Calcio en el suero, plasma y

orina. Este producto es adecuado para un uso manual o en el

analizador RX monza.

No. Cat.

CA 590 CAL. Patrn 5.5 ml

200 ml R1. Tampn 1 x 100 ml

R2. Cromgeno 1 x 100 ml

R3. EDTA 10 ml

METODO COLORIMETRICO(1)

O-cresolftalena complexona sin desproteinizacin.

PRINCIPIO Los iones calcio forman un complejo violeta con la

o-cresolftalena complexona en medio alcalino.

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado u orina. Diluir la orina

1 + 1 en NaCl 0,9%. Multiplicar el resultado por 2.


Componentes Concentraciones iniciales

de las soluciones

CAL. Patrn

Calcio Vedi inserto lotto-specifico

R1. Tampn

2-amino-2-metil-

propan-1-ol 3.5 mol/l, pH 10,7

R2. Cromgeno

o-Cresolftalena 0,16 mmol/l

complexona

8-hidroxiquinolina 6,89 mmol/l

Acido clorhdrico 60 mmol/l

R3. EDTA 150 mmol/l



Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren



desean.




laboratorio.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD

Todas las soluciones estn listas para su uso. Mantener las botellas cerradas despus de utilizarlas. Estables hasta la fecha de

caducidad cuando se conservan entre +15 y +25C.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS DE TRABAJO Y

ESTABILIDAD

Mezclar volmenes iguales de las soluciones R1 y R2 en cantidad

suficiente para el nmero de muestras que se vayan a ensayar.

Estable durante 7 das cuando se conserve entre +2 y +8C 3

das entre +15 y +25C.


Patrn

Tampn

Cromgeno

EDTA




Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

PROCEDIMIENTO DE NOTA

Si la muestra tiene un color fuerte intrnseca (hemoglobina: >

200 mg/dl, bilirrubina> 20 mg/dl, o lipemia marcada), un blanco de muestra se debe ejecutar. (Ver abajo)

Esta prueba es muy sensible, por lo tanto el uso de material

desechable es aconsejable. Recipientes de vidrio debern lavarse

con cido clorhdrico diluido y luego enjuagar con agua destilada

antes de su uso.

PROCEDIMIENTO

Seleccione Calcio CPC en la pantalla de Ejecucin de prueba y

llevar a cabo un blanco de agua segn las instrucciones.

Pipetear en la cubeta:

Blanco de reactivo S0 Patrn S1 Muestra

ddH20 12.5 l - -

Muestra - - 12.5 l

Patrn - 12.5 l -

Reactivo 500 l 500 l 500 l

Mezclar, incubar por 5 min a +25, +30 o +37C Inserte la cubeta

en el porta-RX monza celda de flujo y pulse Leer.

Para ejecutar un blanco de muestra:

Despus de medir la absorbancia de la muestra de acuerdo con

el procedimiento de ensayo, aadir una gota de solucin R3

(EDTA) a la muestra y la solucin del reactivo. Cuando las

muestras han convertido incoloro (despus de aproximadamente

10 segundos) insertar la cubeta en el porta-RX monza celda de flujo y pulse leer. Este resultado debe ser manualmente resta de

la muestra para obtener el valor corregido de calcio.


Recomend el uso de CAL Patrn proporcionado en el kit. La

calibracin se recomienda con un cambio en la cantidad de

reactivo o como se indica por procudures de control de calidad.

PGINA 2 DE 3

MANUAL/ RX MONZA CA 590

PARA USO MANUAL Longitud de onda: Hg 578 nm (550-590 nm) Espectrofotmetro: 570 nm Cubeta: 1 cm de espesor Medicin: frente a blanco de reactivo slo se requiere un blanco por serie Temperatura: +20 y +25C/+37C 1. Para ensayos individuales Pipetear en tubos de ensayo: Blanco de Reactivo Patrn Muestra Muestra --- --- 25 l Agua destilada 25 l --- --- CAL --- 25 l --- Solucin R1 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml Solucin R2 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrn (Apatrn) frente al reactivo blanco al cabo de 5 a 50 min. 2. Para ensayos en serie Pipetear en tubos de ensayo: Blanco de Reactivo Patrn Muestra Muestra --- --- 25 l Agua destilada 25 l --- --- Patrn --- 25 l --- Reactivo de trabajo 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrn (Apatrn) frente al reactivo blanco al cabo de 5 a 50 min. Aunque la absorbancia se puede leer durante los 5 a 50 minutos siguientes, el tiempo de intervalo desde la adicin de la muestra a la lectura deber ser exactamente el mismo para el Patrn/Control y Muestra. Para ejecutar un blanco de muestra: Despus de medir la absorbancia de la muestra de acuerdo con el procedimiento de ensayo, aadir una gota de solucin R3 (EDTA) a la muestra y la solucin del reactivo. Cuando las muestras han convertido incoloro (despus de aproximadamente 10 segundos) insertar la cubeta en el porta-RX monza celda de flujo y pulse leer. Este resultado debe ser manualmente resta de la muestra para obtener el valor corregido de calcio. CALCULOS Amuestra Concentracin = x Concentracin del patrn (mmol/l) Apatrn (mmol/l) Amuestra Concentracin = x Concentracin del patrn (mg/dl) Apatrn (mg/dl)

STANDARDISATION

Randox Calibration Serum Level 3 is traceable to Calcium

reference material NIST 909b and NIST 956b.

CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara 2. Comprobar que todo material est limpio. 3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 4. Comprobar la temperatura de reaccin 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los

Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413. INTERFERENCIA/LIMITACIONES Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y se encontr que no interfieren: Bilirrubina 500 mol/l (29 mg/dl) Intralipid 2% Triglicrido 22,75 mmol/l (2010 mg/dl) Hemoglobina 6 g/l (600 mg/dl) Gadodiamida (OMNISCAN: se utiliza en la RM) interfiere con el calcio srico causando que los niveles bajos (3). VALORES NORMALES(2) Suero: 2,02 -2,60 mmol/l (8,10-10,4 mg/dl) Orina: 2,5 -6,2 mmol/24hrs (100 - 249 mg/24 hrs) Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la poblacin. CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE FUNCIONAMIENTO Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante el analizador RX monza en el modo de cubeta a +37C. SUERO LINEALIDAD El mtodo es lineal hasta 5,67 mmol / l (22,7 mg/dl). Las muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 +1 con el 0,9% de NaCl y volver a ensayar, multiplicar el resultado por 2. SENSIBILIDAD La concentracin mnima detectable de calcio con un nivel aceptable de precisin se determin como 1,16 mg/dl (0,290 mmol/l). PRECISION Intra Assay Nivel 1 Nivel 2 Mean (mg/dl) 9.02 12.4 SD 0.220 0.249 CV(%) 2.44 2.01 n 20 20 Inter Assay Nivel 1 Nivel 2 Mean (mg/dl) 9.02 12.4 SD 0.352 0.317 CV(%) 3.91 2.56 n 20 20

MANUAL/ RX MONZA CA 590

PGINA 3 DE 3

CORRELACION

Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en el

mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin

lineal:

Y=0.9914 X -0.089


Se analizaron 42 muestras con valores de entre 4,1 y 16,5 mg/dl.

ORINA

LINEALIDAD El mtodo es lineal hasta 7,13 mmol / l (28,6 mg / dl). Las muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 +1 con el 0,9% de NaCl y volver a ensayar, multiplicar el resultado por 2.

SENSIBILIDAD

La concentracin mnima detectable de calcio con un nivel

aceptable de precisin se de

RANDOX Manual Tecs. Química Clínica-2013

Documents

Transcript of RANDOX Manual Tecs. Química Clínica-2013