Prolactin A

Prolactin

For use on the IMMULITE®

and IMMULITE® 1000 systems

IMMULITE®/IMMULITE® 1000 Prolactin

2 IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactin (PILKPR-5, 2005-05-16)

English

Intended Use: For in vitro diagnostic usewith the IMMULITE and IMMULITE 1000Analyzers — for the quantitativemeasurement of prolactin in serum, as anaid in the diagnosis and treatment ofpituitary disorders.

Catalog Number: LKPR1 (100 tests),LKPR5 (500 tests)Test Code: PRL Color: Dark BlueCDC Analyte Identifier Code: 4915CDC Test System Identifier Code: 10159CLIA Complexity Category: Moderate

Summary and ExplanationHuman prolactin is a polypeptide hormoneof the anterior pituitary with a molecularmass of about 22,800. It plays anessential role in the secretion of milk andhas the ability to suppress gonadalfunction. The very existence of prolactinas a substance distinct from humangrowth hormone was established only in1970. Since that time, determination ofprolactin has become an important tool inthe investigation of amenorrhea,galactorrhea and hypothalamic-pituitarydisorders.As a reference range for circulatingprolactin, the literature suggestsconcentrations up to approximately20 ng/mL. Values are distinctly elevated atbirth but decline to adult levels in less thanthree months.Women are reported to have slightlyhigher mean levels than men, with a slightrise at puberty — apparently estrogenrelated — and a corresponding fall atmenopause. During pregnancy, theprolactin level climbs steadily to ten ortwenty times its former value, then dropsback down to normal after delivery —within three weeks in nonnursing mothers.In those who breast-feed, the decline tonormal is more gradual because of theprompt and dramatic surges in prolactinrelease induced by suckling. Womentaking oral contraceptives or underestrogen treatment may have prolactinlevels higher than normal.

In assessing the significance of moderateelevations, it is important to keep in mindthat prolactin is a stress hormone. Notonly surgery, but events no moredistressing than venipuncture or a clinicalinterview have been reported to occasiona transient rise. Moreover, the release ofprolactin is inherently episodic, and day-to-day fluctuations with CVs as high as30% have been encountered. Finally,there is a sleep-related diurnal variation:prolactin levels increase during sleep andreach their lowest a few hours afterwaking. The advice sometimes given todraw samples "between nine and noon" isbased on the assumption that subjectsobserve reasonably normal waking hours.

Principle of the ProcedureIMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactin is asolid-phase, two-site chemiluminescentimmunometric assay.Incubation Cycles: 1 × 30 minutes.

Specimen CollectionThe use of an ultracentrifuge isrecommended to clear lipemic samples.Hemolyzed samples may indicatemistreatment of a specimen before receiptby the laboratory; hence the results shouldbe interpreted with caution.EDTA plasma should not be used as asample type.Centrifuging serum samples before acomplete clot forms may result in thepresence of fibrin. To prevent erroneousresults due to the presence of fibrin,ensure that complete clot formation hastaken place prior to centrifugation ofsamples. Some samples, particularlythose from patients receivinganticoagulant therapy, may requireincreased clotting time.Blood collection tubes from differentmanufacturers may yield differing values,depending on materials and additives,including gel or physical barriers, clotactivators and/or anticoagulants.IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactin hasnot been tested with all possible variationsof tube types. Consult the section on

IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactin (PILKPR-5, 2005-05-16) 3

Alternate Sample Types for details ontubes that have been tested.

Volume Required: 25 µL serum. (Samplecup must contain at least 100 µL morethan the total volume required.)Storage: 7 days at 2–8°C or3 months at –20°C.

Warnings and PrecautionsFor in vitro diagnostic use.

Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.Follow universal precautions, and handleall components as if capable oftransmitting infectious agents. Sourcematerials derived from human blood weretested and found nonreactive for syphilis;for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitisB surface antigen; and for antibodies tohepatitis C.Sodium azide, at concentrations less than0.1 g/dL, has been added as apreservative. On disposal, flush with largevolumes of water to prevent the buildup ofpotentially explosive metal azides in leadand copper plumbing.

Chemiluminescent Substrate: Avoidcontamination and exposure to directsunlight. (See insert.)Water: Use distilled or deionized water.

Materials SuppliedComponents are a matched set. Thebarcode labels are needed for the assay.

Prolactin Test Units (LPR1)Each barcode-labeled unit contains onebead coated with monoclonal murine anti-prolactin antibody. Stable at 2–8°C untilexpiration date.LKPR1: 100 units. LKPR5: 500 units.Allow the Test Unit bags to come to roomtemperature before opening. Open bycutting along the top edge, leaving theziplock ridge intact. Reseal the bags toprotect from moisture.

Prolactin Reagent Wedge (LPR2)With barcode. 7.5 mL mL alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to polyclonal goat anti-prolactin antibody in buffer, withpreservative. Store capped and

refrigerated: stable at 2–8°C untilexpiration date. Recommended usage iswithin 30 days after opening when storedas indicated.LKPR1: 1 wedge. LKPR5: 5 wedges.

Prolactin Adjustors (LPRL, LPRH)Two vials (Low and High), of lyophilizedhuman prolactin in a serum/buffer matrix.Reconstitute each vial with 2.0 mL distilledor deionized water. Mix by gentle swirlingor inversion until the lyophilized material isfully dissolved. Aliquot and freeze. Stableat –20°C for 60 days after reconstitution.LKPR1: 1 set. LKPR5: 2 sets.

Kit ComponentsSupplied Separately

Prolactin Sample Diluent (LPRZ)For the manual dilution of patient samples.25 mL of a prolactin-free serum/buffermatrix, with preservative. Stable at 2–8°Cfor 30 days or for 6 months (aliquotted) at–20°C.LSUBX: Chemiluminescent SubstrateLPWS2: Probe Wash ModuleLKPM : Probe Cleaning KitLCHx-y: Sample Cup Holders (barcoded)LSCP: Sample Cups (disposable)LSCC: Sample Cup Caps (optional)CON6: Tri-level, multi-constituent controlAlso RequiredSample transfer pipets, distilled ordeionized water, controls.

Assay ProcedureNote that for optimal performance, it isimportant to perform all routinemaintenance procedures as defined in theIMMULITE or IMMULITE 1000 Operator'sManual.

See the IMMULITE or IMMULITE 1000Operator's Manual for: preparation, setup,dilutions, adjustment, assay and qualitycontrol procedures.

Visually inspect each Test Unit for thepresence of a bead before loading it ontothe system.Recommended Adjustment Interval:4 weeks.

Quality Control Samples: Use controlsor sample pools with at least two levels(low and high) of prolactin.


Expected ValuesBased on its relationship to DPC's Coat-A-Count Prolactin IRMA, the assay can beexpected to have the following preliminaryreference range for men.

Group n Median 95% Range

6.2 ng/mL 2.5 – 17Adult Males 19

131 mIU/L 53 – 360

A study17 performed with IMMULITEProlactin yielded the following referencerange for women.

Group n Median 95% Range

9.4 ng/mL 1.9 – 25Adult Females 115

199 mIU/L 40 – 530

As summarized in DPC's technical reportZB157,17 in a study which followed normalovulating women on a daily basisthroughout one complete cycle, somewhathigher values were obtained—an outcomeconsistent with the increasingly stressfulsample collection process entailed by thestudy design.A cross-sectional study of pediatric fertilityvalues performed with IMMULITEProlactin at a "wellness" clinic in thesouthwestern United States yielded thefollowing results.

Prolactin, ng/mL

Group Age (yr) n Median Central 95%

Females Cord 28 380 200 – 675

0.1 – 0.5 28 15 1 – 140

0.6 – 9 55 11 2 – 43

Males Cord 27 295 150 – 565

0.1 – 0.5 36 19 4 – 65

0.6 – 9 55 8 0.6 – 29

Combined Cord 55 340 160 – 665

0.1 – 0.5 64 117 2 – 125

0.6 – 9 110 9 1 – 40

Prolactin, mIU/L

Group Age (yr) n Median Central 95%

Females Cord 28 8,056 4,240 – 14,310

0.1 – 0.5 28 318 21 – 2,968

0.6 – 9 55 233 42 – 912

Males Cord 27 6,254 3,180 – 11,978

0.1 – 0.5 36 403 85 – 1,378

0.6 – 9 55 170 13 – 615

Combined Cord 55 7,208 3,392 – 14,098

0.1 – 0.5 64 2,480 42 – 2,650

0.6 – 9 110 191 21 – 848

Consider these limits as guidelines only.Each laboratory should establish its ownreference ranges.

LimitationHeterophilic antibodies in human serumcan react with the immunoglobulinsincluded in the assay components causinginterference with in vitro immunoassays.[See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinelyexposed to animals or animal serumproducts can demonstrate this type ofinterference potentially causing ananomalous result. These reagents havebeen formulated to minimize the risk ofinterference; however, potentialinteractions between rare sera and testcomponents can occur. For diagnosticpurposes, the results obtained from thisassay should always be used incombination with the clinical examination,patient medical history, and other findings.

Performance DataSee Tables and Graphs for datarepresentative of the assay's performance.Results are expressed in ng/mL. (Unlessotherwise noted, all were generated onserum samples collected in tubes withoutgel barriers or clot-promoting additives.)Conversion Factor:ng/mL × 21.2 → mIU/LCalibration Range: Up to 150 ng/mL(3,180 mIU/L) [WHO 3rd IS 84/500].


Analytical Sensitivity: 0.5 ng/mL(11 mIU/L).

High-dose Hook Effect: None up to22,000 ng/mL.Intraassay Precision (Within-Run):Statistics were calculated for samplesfrom the results of 20 replicates in a singlerun. (See “Intraassay Precision” table.)Interassay Precision (Run-to-Run):Statistics were calculated for samplesassayed in 26 different runs. (See“Interassay Precision” table.)

Linearity: Samples were assayed undervarious dilutions. (See "Linearity" table forrepresentative data.)Recovery: Samples spiked 1 to 19 withthree prolactin solutions (129, 270 and610 ng/mL) were assayed. (See"Recovery" table for representative data.)Specificity: The antibody is highly specificfor prolactin. (See "Specificity" table.)

Bilirubin: Presence of bilirubin inconcentrations up to 200 mg/L has noeffect on results, within the precision of theassay.

Hemolysis: Presence of packed red bloodcells in concentrations up to 30 µL/mL hasno effect on results, within the precision ofthe assay.

Alternate Sample Type: To assess theeffect of alternate sample types, bloodwas collected from 36 volunteers intoplain, heparinized and Becton DickinsonSST® vacutainer tubes. Equal volumes ofthe matched samples were spiked withvarious concentrations of prolactin, toobtain values throughout the calibrationrange of the assay, and then assayed bythe IMMULITE Prolactin procedure.(Heparin) = 0.97 (Serum) + 0.24 ng/mLr = 0.98

(SST) = 0.93 (Plain Tubes) + 0.39 ng/mLr = 0.96

Means:12.1 ng/mL (Serum)12.0 ng/mL (Heparin)11.7 ng/mL (SST)

EDTA: Because EDTA would have asignificant effect on results, it should notbe used as an anticoagulant.Method Comparison: The assay wascompared to DPC's IMMULITE 2000

Prolactin on 148 samples. (Concentrationrange: approximately 1 to 125 ng/mL. Seegraph.) By linear regression:(IML) = 0.98 (IML 2000) + 1.97 ng/mLr = 0.988

Means:45 ng/mL (IMMULITE)44 ng/mL (IMMULITE 2000)

References1) Cowden E, et al. Laboratory assessment ofprolactin status. Ann Clin Biochem1979;16:113–21. 2) Cowden E, et al. Tests ofprolactin secretion. Lancet 1979;1155–8. 3)Djursing H. Short- and long-term fluctuations inplasma prolactin concentration in normalsubjects. Acta Endocrinol 1981; 97:1–6. 4)Greer ME, et al. Prevalence ofhyperprolactinemia in anovulatory women.Obstet Gynecol 1980;56:65–9. 5) HarringtonRA, et al. Metoclopramide: an updated review.Drugs 1983;25:451–94. 6) Healy DL, et al.Pituitary autonomy in hyperprolactinemiasecondary amenorrhea: results of hypothalamic-pituitary testing. J Clin Endocrinol Metab1977;44:809–18. 7) Kleinberg DL, Noel GL,Frantz AG. Galactorrhea: a study of 235 cases.N Engl J Med 1977;296:589–600. 8) Knuth UA,Friesen HG. Prolactin and pregnancy. Curr TopExp Endocrinol 1983;4:69–96. 9) Maxson WS,Hammond CB. Hyperprolactinemia. ContempOb/Gyn 1982 Jan;19(1):49–63, 19:67–83. 10)Pepperell RJ. Prolactin and reproduction. FertilSteril 1981;35:267–74. 11) Babson, AL. TheIMMULITE Automated Immunoassay System. JClin Immunoassay 1991;14:83-8. 12) ThornerMO. Prolactin: clinical physiology andmanagement of hyperprolactinemia. In: MartiniL, Besser GM, et al, editors. Clinicalendocrinology. New York: Academic Press,1977;319–61. 13) Tolis G, Franks S. Physiologyand pathology of prolactin secretion. In: Tolis G,et al, editors. Clinical endocrinology: apathophysiological approach. New York: RavenPress, 1979;291–317. 14) Tolis G, et al. Aspectsof prolactin pathophysiology. PeriodicumBiologorum 1983;85 Suppl 1:29–36. 15) YenSSC. Neuroendocrine regulation ofgonadotropin and prolactin secretion in women:disorders in reproduction. In: Vaitukaitis J,editor. Clinical reproductive endocrinology. NewYork: Elsevier Biomedical, 1982;137–76. 16)Zacur HA. Use of the human prolactinimmunoassay. J Clin Immunoassay 1983Spring;6(1):63–67. 17) Vankrieken L. IMMULITEreproductive hormone assays: multicenterreference range data. Los Angeles: DiagnosticProducts Corporation, 2000. Document No.ZB157-D.


Technical AssistanceIn the United States, contact DPC'sTechnical Services department.Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828Fax: 973.927.4101. Outside the UnitedStates, contact your National Distributor.Manufactured by EURO/DPC Ltd. under aQuality System registered to ISO 13485:2003.

Tables and Graphs

Intraassay Precision (ng/mL)

Mean1 SD2 CV3

1 8.0 0.54 6.8%

2 16.3 1.00 6.1%

3 36.6 2.07 5.7%

Interassay Precision (ng/mL)

Mean1 SD2 CV3

1 14.1 1.36 9.6%

2 22.2 2.10 9.5%

3 51.0 3.26 6.4%

Linearity (ng/mL)

Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 8 in 85 30.3 — —

4 in 8 15.1 15.1 100%

2 in 8 6.6 7.6 87%

1 in 8 3.5 3.8 92%

2 8 in 8 39.9 — —

4 in 8 21.3 20.0 107%

2 in 8 10.3 10.0 103%

1 in 8 4.3 5.0 86%

3 8 in 8 139.3 — —

4 in 8 72.6 69.7 104%

2 in 8 36.8 34.8 106%

1 in 8 20.7 17.4 119%

Recovery (ng/mL)

Solution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 — 16.6 — —

A 24.3 22.2 110%

B 29.6 29.3 101%

C 45.0 46.3 97%

2 — 18.9 — —

A 26.3 24.4 108%

B 34.1 31.5 108%

C 58.6 48.5 121%

3 — 37.1 — —

A 42.4 41.7 102%

B 51.9 48.8 106%

C 76.5 65.8 116%

Specificity

Compound1ng/mLAdded2

Apparentng/mL 3

% Cross-reactivity4

FSH 1,000 ND ND

HCG 35,000 ND ND

HGH 1,000 ND ND

HPL 200,000 ND ND

LH 500 ND ND

TSH 1,000 ND ND

ND: not detectable.5

Method Comparison

IMMULITE 2000 Prolactin, ng/mL 0 30 60 90 120 150

IMM

ULI

TE P

rola

ctin

0

30

60

90

120

150

(IML) = 0.98 (IML 2000) + 1.97 ng/mLr = 0.988

Deutsch. Intraassay Precision: 1Mittelwert, 2S(Standardbereich), 3CV (Variationskoeffizient).Interassay Precision: 1Mittelwert, 2S


(Standardbereich), 3CV (Variationskoeffizient).Linearity: 1Verdünnung, 2Beobachten (B),3Erwarten (E), 4% B/E, 58 in 8. Recovery:1Lösung, 2Beobachten (B), 3Erwarten (E), 4%B/E. Specificity: 1Verbindung, 2zugesetzteMenge, 3 Ausgewiesene Konzentration, 4%Kreuzreaktivität, 5NN: Nicht nachweisbar.Method Comparison: Prolactin: Prolaktin.

Español. Intraassay Precision: 1Media, 2DS,3CV. Interassay Precision: 1Media, 2DS, 3CV.Linearity: 1Dilución, 2Observado (O), 3Esperado(E), 4%O/E, 58 en 8. Recovery: 1Solución,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E.Specificity: 1Compuesto, 2Cantidad añadida,3Concentración aparente, 4% Reacción cruzada,5ND: no detectable. Method Comparison:Prolactin: Prolactina.

Français. Intrraassay Precision: 1Moyenne,2SD, 3CV. Interassay Precision: 1Moyenne,2SD, 3CV. Linearity: 1Dilution, 2Observé (O),3Attendu (A), 4%O/A, 58 dans 8. Recovery:1Solution, 2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A.Specificity: 1Composé, 2ajouté, 3 Concentrationapparente, 4Réaction croisée%. 5ND: nondétectable. Method Comparison: Prolactin:Prolactine.

Italiano. intraassay Precision: 1Media, 2SD(Deviazione Standard), 3CV (Coefficiente diVariazione). Interassay Precision: 1Media, 2SD(Deviazione Standard), 3CV (Coefficiente diVariazione). Linearity: 1Diluizione, 2Osservato(O), 3Atteso (A), 4%O/A, 58 in 8. Recovery:1Soluzione, 2Osservato (O), 3Atteso (A), 4%O/A.Specificity: 1Composto, 2quantità aggiunta, 3Concentrazione apparente, 4Percentuale diCrossreattività, 5ND: non determinabile. MethodComparison: Prolactin: Prolattina.

Português. Intraassay Precision: 1Média,2Desvio padrão, 3Coeficiente de variação.Interassay Precision: 1Média, 2Desvio padrão,3Coeficiente de variação. Linearity: 1Diluição,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E, 58 em 8.Recovery: 1Solução, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E. Specificity: 1Composto,2Quantidade adicionada, 3ApparentConcentration, 4Percentagem de reacçãocruzada, 5ND: não detectável. MethodComparison: Prolactin: Prolactina.

Deutsch

ProlaktinAnwendung: Zur in vitro-Diagnostikunter Verwendung der IMMULITE undIMMULITE 1000 Systeme – zurquantitativen Messung von Prolaktin imSerum, zur Untersuchung undTherapiekontrolle von pituitärenStörungen.

Artikelnummern:LKPR1 (100 Tests), LKPR5 (500 Tests)Testcode: PRL Farbe: dunkelblau

Klinische RelevanzHumanes Prolaktin ist ein Polypeptid-Hormon der vorderen Hypophyse miteinem Molekulargewicht von ca. 22 800.Es ist von essentieller Wichtigkeit für dieProduktion von Muttermilch und kanngonadale Funktionen unterdrücken. Diegenaue Definition von Prolaktin, als einevom menschlichen Wachstumhormon zuunterscheidende Substanz, gelang erst1970. Seit diesem Zeitpunkt, wurde dieBestimmung von Prolaktin eine wichtigeMethode in der Diagnostik derAmenorrhoe, Galactorrhoe undHypothalamus-, bzw.Hypophysendysfunktionen.Als Referenzwertebereich fürzirkulierendes Prolaktin werden in derLiteratur Konzentrationen bis annähernd20 ng/ml angegeben. Die Prolaktinspiegelsind zum Zeitpunkt der Geburt deutlicherhöht, sinken aber auf normaleErwachsenenwerte in weniger als 3Monaten.Für Frauen werden geringfügig höhereDurchschnittswerte angegeben, mit einemleichten Anstieg während der Pubertätund ein entsprechender Abfall nach derMenopause, als für Männer. Während derSchwangerschaft steigen dieProlaktinwerte beständig bis zum 10- oder20-fachen der Ausgangswerte an. Nachder Geburt fallen die Werte für nichtstillende Mütter innerhalb 3 Wochen aufein normales Niveau. Bei stillendenMüttern ist der Rückgang auf normaleWerte verzögert, da das Saugen desKindes zu einem schnellen unddramatischen Anstieg derProlaktinfreisetzung führt. Frauen dieKontrazeptiva einnehmen bzw. unterÖstrogenbehandlung stehen, weisenebenfalls erhöhte Prolaktinspiegel auf. Inder Beurteilung geringfügigerKonzentrationsanstiege sollte immerberücksichtigt werden, daß Prolaktin einStreßhormon ist.Nicht allein das Stillen sondern auchgeringfügige Eingriffe wie Blutentnahmeoder eine Anamnesebefragung, sind alsUrsache für kurzfristigeKonzentrationserhöhungen registriert


worden. Überdies ist die Freisetzung vonProlaktin von Natur aus episodisch. VonTag zu Tag wurden Fluktuationen mitVariationskoeffizienten höher als 30%beobachtet. Schließlich gibt esschlafabhängige tägliche Variationen: DieProlaktinkonzentrationen steigen währenddes Schlafes und erreichen ihreniedrigsten Werte wenige Stunden nachdem Aufwachen. Die Empfehlung Probenzwischen 9,00 und 12,00 Uhr zuentnehmen, beruht auf der Annahme„normaler“ Aufwachzeiten.

MethodikIMMULITE/IMMULITE 1000 Prolaktin istein Festphasen, Zwei-phasenChemilumineszenz immunometrischerAssay.Inkubationszyklen: 1 × 30 minuten.

ProbengewinnungDer Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zurKlärung von lipämischen Probenempfohlen.

Bei hämolysierten Proben besteht dieMöglichkeit einer unsachgemäßenHandhabung vor Eintreffen im Labor,daher sind die Ergebnisse zurückhaltendzu interpretieren.EDTA-Plasma ist als Probenart nichtgeeignet.Die Zentrifugation der Serumproben vordem völligen Abschluss der Gerinnungkann zu Fibringerinnseln führen. Umfehlerhaften Analysenergebnissen infolgevon Gerinnseln vorzubeugen, istsicherzustellen, dass die Gerinnung vorder Zentrifugation der Proben vollständigabgeschlossen ist. Insbesondere Probenvon Patienten unter Antikoagulantien-therapie können eine verlängerteGerinnungszeit aufweisen.Blutentnahmeröhrchen von verschiedenenHerstellern können differierende Werteverursachen. Dies hängt von denverwendeten Materialien und Additiven(Gel oder physische Trennbarrieren,Gerinnungsaktivatoren und /oderAntikoagulantien) ab.IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolaktin sindnicht mit allen möglichenRöhrchenvariationen ausgetestet worden.Details der getesteten Röhrchenarten sind

dem Kapitel "Alternative Probenarten" zuentnehmen.

Erforderliche Menge: 25 µl Serum.(Inhalt der Probenschale mussmindestens 100 µl über der erforderlichenGesamtmenge liegen.)

Lagerung: 7 Tage bei 2–8°C oder3 Monate bei –20°C.

Hinweise undVorsichtsmaßnahmenZur In-vitro-Diagnostik.

Reagenzien: Bei 2–8°C lagern. UnterEinhaltung der geltenden gesetzlichenVorschriften entsorgen.Die generell geltendenVorsichtsmaßnahmen sind einzuhaltenund alle Komponenten als potenziellinfektiös zu behandeln. Alle ausmenschlichem Blut gewonnenenMaterialien wurden auf Syphilis,Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2,Hepatitis-B-Oberflächenantigen undHepatitis-C-Antikörper untersucht undnegativ befundet.Bestimmten Komponenten wurdeNatriumazid (<0,1 g/dl) hinzugefügt. Umdie Bildung von explosiven Metallaziden inBlei- und Kupferrohren zu verhindern,sollten die Reagenzien nur zusammen mitgroßen Wassermengen in die Kanalisationgespült werden.Chemilumineszenz-Substrat:Kontamination und direkteSonneneinstrahlung vermeiden (SiehePackungsbeilage).Wasser: Destilliertes oder deionisiertesWasser verwenden.

Im Lieferumfang enthaltenDie Komponenten sind aufeinanderabgestimmt. Die Barcode-Aufkleberwerden für den Assay benötigt.

Prolaktin Testeinheiten (LPR1)Jede mit Barcode-Etikette verseheneEinheit enthält eine mit beschichtet mitProlaktin-Antikörpern (monoklonal, Maus).beschichtete Kugel. Bei 2–8°C bis zumAblaufdatum haltbar.LKPR1: 100 Testeinheiten.LKPR5: 500 Testeinheiten.


Verpackte Testeinheiten vor dem Öffnenstehen lassen, bis sie Zimmertemperaturerreicht haben. Oben entlang der Kanteaufschneiden, ohne den Plastikverschlusszu beschädigen. Verpackungen wiederdicht verschließen, damit der Inhalttrocken bleibt.

Prolaktin - Reagenzbehälter (LPR2)Mit Barcode. 7,5 ml mit alkalischerPhospatase konjugierter Anti-Prolaktin-Antikörper (polyklonal, Ziege) im Puffer(mit Konservierungsmittel). Verschlossenund gekühlt aufbewahren: Bei 2–8°C biszum Ablaufdatum haltbar. Beientsprechender Lagerung beträgt dieempfohlene Aufbrauchsfrist nach demÖffnen 30 Tage.LKPR1: 1 Behälter. LKPR5: 5 Behälter.

Prolaktin Kalibratoren (LPRL, LPRH)Zwei Fläschchen jeweils mit lyophilisiertemhumanem Prolaktin in einer Serum-/Puffer-Matrix. Fläschchen mit je 2,0 mldestilliertem oder deionisiertem Wasserrekonstituieren. Zum Mischen leichtschwenken oder umdrehen, bis daslyophilisierte Material vollständig aufgelöstist. Aliquotieren und einfrieren. NachRekonstituierung 60 Tage bei –20°Chaltbar.LKPR1: 1 Set. LKPR5: 2 Sets.

Separat erhältliche Testsystem-Komponenten

Prolaktin–Verdünnungspuffer (LPRZ)Zum manuellen Verdünnen derPatientenproben. 25 ml einerprolaktinfreien Serum-/Puffermatrix (mitKonservierungsmittel). 30 Tage nach demÖffnen bei 2–8°C haltbar oder 6 Monatebei –20°C (aliquotiert).LSUBX: Chemilumineszenz-SubstratmodulLPWS2: WaschmodulLKPM: ReinigungsmodulLCHx-y: Halterungen für dieProbenschalen (mit Barcodierung)LSCP: Probenschalen (Einwegartikel)LSCC: Verschlüsse für die Probenschalen(optional)CON6: 3 Konzentrationen, MultikontrolleEbenfalls benötigt:Transferpipetten für die Proben;

destilliertes bzw. deionisiertes Wasser;Kontrollen.

TestdurchführungFür eine optimale Funktion des Gerätes istunbedingt zu beachten, dass dieWartungen, wie im IMMULITE oderIMMULITE 1000-Handbuch beschrieben,regelmäßig durchgeführt werden.Das Handbuch für das IMMULITE bzw.IMMULITE 1000 enthält die Anweisungenfür: Vorbereitung, Geräteeinstellungen,Verdünnungen, Kalibrierung,Testdurchführung und Qualitätskontrollen.Überprüfen Sie jedes Testeinheit auf dasVorhandensein der Polystyrol-Kugel vordem Einsetzen in das Gerät.

Empfohlenes Kalibrationsintervall:4 Wochen.Proben zur Qualitätskontrolle:Kontrollen oder Seren mit Prolaktin inzumindest zwei Konzentrationen (niedrigeund hohe) verwenden.

ReferenzwerteBasierend auf der Korrelation zum DPCCoat-A-Count Prolaktin, sind für den Assayfolgende Referenzwerte für Männer inng/ml und in mIU/l zu erwarten.

Gruppe n Median 95%-Bereich

6,2 ng/ml 2,5 – 17Männer 19

131 mIU/l 53 – 360

In einer Studie17 wurden mit demIMMULITE- Prolaktin Assay folgendeReferenzwerte für Frauen ermittelt.

Gruppe n Median 95%-Bereich

9,4 ng/ml 1,9 – 25Frauen 115

199 mIU/l 40 – 530

In einer Multicenter Studie der DPC,dargestellt im DPC Technical ReportZB157,17 wurden etwas höhere Wertebeobachtet. Bei dieser Studie wurde einetägliche Blutabnahme durchgeführt undder Stress einer täglichen Blutentnahme,die durch das Studiendesign notwendigist, kann zu erhöhten Werten führen.

Für eine altersabhängige Studie wurde ineiner "Wellness"-Klinik im Südwesten der


USA mit Hilfe des IMMULITE-Prolaktinfolgende Werte ermittelt.

Prolaktin, ng/ml

GruppeAlter

(Jahre) n Median95%-

Bereich

Frauen Schnur 28 380 200 – 675

0,1 – 0,5 28 15 1 – 140

0,6 – 9 55 11 2 – 43

Männer Schnur 27 295 150 – 565

0,1 – 0,5 36 19 4 – 65

0,6 – 9 55 8 0,6 – 29

Kombiniert Schnur 55 340 160 – 665

0,1 – 0,5 64 117 2 – 125

0,6 – 9 110 9 1 – 40

Prolaktin, mIU/l

GruppeAlter

(Jahre) n Median 95%-Bereich

Frauen Schnur 28 8 056 4 240 – 14 310

0,1 – 0,5 28 318 21 – 2 968

0,6 – 9 55 233 42 – 912

Männer Schnur 27 6 254 3 180 – 11 978

0,1 – 0,5 36 403 85 – 1 378

0,6 – 9 55 170 13 – 615

Kombiniert Schnur 55 7 208 3 392 – 14 098

0,1 – 0,5 64 2 480 42 – 2 650

0,6 – 9 110 191 21 – 848

Betrachten Sie diese Grenzwerte nur alsRichtlinien. Jedes Labor sollte eigeneReferenzbereiche ermitteln.

Grenzen der MethodeHeterophile Antikörper in Humanserenkönnen mit Immunglobulinen aus denAssaykomponenten reagieren undInterferenzerscheinungen innerhalb des invitro Immunoassays verursachen. (Clin.Chem. 1988:34:27-33) Proben vonPatienten, die häufig mit Tier- bzw.Tierserumprodukten zu tun haben, könnendie erwähnten Interferenzen verursachenund zu anomalen Resultaten führen. Dieverwendeten Reagenzien sind sokonzipiert, dass das Risiko einerInterferenz mit den zu messenden Probenminimiert ist. Dennoch können potentiellInteraktionen zwischen seltenen Serenund den Testkomponenten auftreten. Zu

diagnostischen Zwecken sollten die mitdem Assay erhaltenen Ergebnisse immerin Kombination mit der klinischenUntersuchung, der Patientenanamneseund anderen Befunden gesehen werden.

LeistungsdatenRepräsentative Daten zum Testentnehmen Sie bitte den Tabellen undgraphischen Darstellungen im englischenTeil dieser Anleitung. Die Ergebnisse sindin ng/ml angegeben. (Sofern nicht andersangegeben, wurden hierfür Serumprobenin Röhrchen ohne Geltrennung undGerinnungshilfen eingesetzt.)

Umrechnungsfaktor:ng/ml × 21,2 → mIU/lMessbereich: bis 150 ng/ml(3 180 mIU/l) [WHO 3rd IS 84/500].Analytische Sensitivität: 0,5 ng/ml(11 mIU/l).

High-Dose-Hook-Effekt: Keiner bis zu22 000 ng/ml.Präzision im einzelnen Testansatz(intraassay): Statisik aus einem einzelnenTestansatz mit 20 Einzelmessungen(Siehe Tabelle “Intraassay Precision“).Präzision zwischen Testansätzen(interassay): Statistik aus 26verschiedenen Testansätzen. (SieheTabelle “Interassay Precision“).Linearität: Proben wurden inverschiedenen Verdünnungen getestet.(Repräsentative Daten entnehmen Siebitte der Tabelle “Linearity“.)Wiederfindung: Die getesteten Probenwaren mit drei (129, 270 und 610 ng/ml)Prolaktin -Lösungen 1:19 versetzt. (SieheTabelle ”Recovery”.)Spezifität: Der Assay ist hochspezifischfür Prolaktin. (Siehe Tabelle ”Specificity”.)Bilirubin: Bilirubin hat in Konzentrationenbis zu 200 mg/l keinen Einfluss auf dieErgebnisse, der größer als die Impräzisiondes Assays selbst ist.Hämolyse: Erythrozytenkonzentratehaben in Konzentrationen bis zu 30 µl/mlkeinen Einfluss auf die Messung, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.Alternativer Probentyp: Um dieAuswirkungen von verschiedenen


Probenarten zu untersuchen, wurde Blutvon 36 Freiwilligen in Röhrchen ohneAdditiva, in Heparin- und BectonDickinson SST® Vacutainer-Rörchengesammelt. Gleiche Volumina derjeweiligen Proben wurden mitverschiedenen Konzentrationen anProlaktin versetzt, um Werte im gesamtenKalibrationsbereich zu erhalten, und dieProben anschließend mit dem IMMULITEAssay für Prolaktin gemessen.(Heparin) = 0,97 (Serum) + 0,24 ng/mlr = 0,98

(SST) = 0,93 (einfachen Röhrchen) + 0,39 ng/mlr = 0,96

Mittelwerte:12,1 ng/ml (Serum)12,0 ng/ml (Heparin)11,7 ng/ml (SST)

EDTA: EDTA würde die Resultateerheblich verfälschen und sollte dahernicht als Antikoagulans verwerdet werden.Methodenvergleich: Der Assay wurdeauf der Basis von 148 Patientenprobenmit dem IMMULITE 2000 Prolaktin Assayder DPC verglichen.(Konzentrationsbereich: ca. 1 bis125 ng/ml Siehe Grafik.). Durch lineareRegression:(IML) = 0,98 (IML 2000) + 1,97 ng/mlr = 0,988

Mittelwert:45 ng/ml (IMMULITE)44 ng/ml (IMMULITE 2000)

AnwendungsberatungBei Rückfragen wenden Sie sich bitte anIhre DPC Niederlassung.Hergestellt von Euro/DPC Ltd. unter demQualitätssystem ISO 13485:2003.

Español

ProlactinaUtilidad del análisis: Para su uso en eldiagnóstico in vitro con los analizadoresIMMULITE e IMMULITE 1000 – para lamedición cuantitativa de prolactina ensuero, como una ayuda en el diagnósticoy tratamiento de las afecciones pituitarias.

Números de Catálogo: LKPR1 (100 tests),LKPR5 (500 tests)

Código del Test: PRL Color: Azul oscuro

Resumen y Explicacióndel TestLa prolactina humana es una hormonapolipeptídica de la pituitaria anterior conun peso molecular de 22 800 daltons.Juega un papel esencial en la secreciónde la leche y tiene la habilidad de suprimirla función gonadal. La existencia de laprolactina como una sustancia distinta dela hormona de crecimiento humana fuedemostrada en 1970. Desde esa fecha, ladeterminación de prolactina se haconvertido en una herramienta importanteen la investigación de la amenorrea, lagalactorrea y las enfermedadeshipotalámico -pituitarias.Como rango de normalidad de laprolactina sérica, las publicacionessugieren concentraciones hastaaproximadamente 20 ng/ml. Los nivelesde prolactina son elevados en elnacimiento y van cayendo hasta losniveles adultos en menos de tres meses.Las mujeres tienen unos nivelessignificativamente superiores que losvarones, con una elevación en la pubertad— aparentemente relacionada con losestrógenos — y una drástica caída en lamenopausia. Durante el embarazo, elnivel de prolactina se eleva entre diez yveinte veces su valor, volviendo a caer pordebajo de la normalidad después delparto — en un periodo de tres semanasen mujeres que no dan el pecho. En lasque dan el pecho, la caída a los valoresnormales es más gradual porque lasucción induce a la liberación deprolactina. Las mujeres tomandoanticonceptivos orales o bajo terapiaestrogénica pueden tener niveles deprolactina por encima de lo normal.Debe tenerse en cuenta el significado deun incremento moderado, ya que laprolactina es una hormona de estrés,elevándose transitoriamente, no solo enprocesos quirúrgicos, sino también encircunstancias menos traumáticas como lavenipunción o las pruebas clínicas.Además, la secreción de prolactina espulsátil, habiéndose encontradofluctuaciones diarias con CVs superioresal 30%. Finalmente, hay una variacióndiurna relacionada con el sueño: losniveles de prolactina se incrementan


durante el sueño y alcanzan su valor másbajo unas horas después de despertarse.La advertencia de tomar las muestrasentre las nueve y las doce del mediodíase debe a que se asume que losindividuos hace tiempo que estándespiertos.

Principio del análisisIMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactina esun ensayo inmunométrico con dos sitiosde unión, quimioluminiscente en fasesólida.Ciclos de incubación: 1 × 30 minutos.

Recogida de la muestraSe recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestraslipémicas.

Las muestras hemolizadas podrían indicaruna mala manipulación de la muestraantes de ser recibida por el laboratorio; eneste caso, los resultados debeninterpretarse con precaución.El plasma con EDTA no deberia ser usadocomo muestra.La centrifugacion de las muestras desuero antes de que se forme el coagulopuede ocasionar la presencia de fibrina.Para evitar resultados erroneos debidos ala presencia de fibrina, asegurarse que seha formado el coagulo completamenteantes de centrifugar las muestras.Algunas muestras, particularmenteaquellas de pacientes sometidos a terapiaanticoagulante, pueden requerir mayortiempo de coagulacion.

Los tubos para recoger sangre dedistintos fabricantes pueden producirvalores diferentes, dependiendo delmaterial del tubo y de los aditivos,incluyendo barreras de gel o barrerasfísicas, activadores de la coagulación y/oanticoagulantes. El ProlactinaIMMULITE/IMMULITE 1000 no ha sidoanalizado con todos los distintos tipos detubos. Para obtener detalles sobre lostipos tubos que se han analizado,consulte la sección de Tipos de MuestrasAlternativos.Volumen requerido: 25 µl suero. (Elrecipiente de la muestre debe contener,como mínimo, 100 µl más que el volumentotal requerido).

Conservación: 7 días a 2–8°C, o3 meses a –20°C.

Advertencias y PrecaucionesPara uso diagnóstico in vitro.

Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desecharde acuerdo con las normas aplicables.Siga las precauciones universales ymanipule todos los componentes como sifueran capaces de transmitir agentesinfecciosos. Los materiales derivados desangre humana han sido analizados y sonnegativos para sífilis; para anticuerposfrente al HIV 1 y 2; para el antígeno desuperficie de hepatitis B y para losanticuerpos de hepatitis C.Se ha usado Azida sódica, enconcentraciones menores de 0,1 g/dl,como conservante. Para su eliminación,lavar con grandes cantidades de aguapara evitar la constitución de residuos deazidas metálicas, potencialmenteexplosivas, en las cañerías de cobre yplomo.

Substrato quimioluminiscente: Evitar lacontaminación y exposición a la luzdirecta del sol. (Ver el prospecto).Agua: Usar agua destilada o desionizada.

Materiales SuministradosLos componentes representan un juegocompleto. Las etiquetas incluidas en lacaja son necesarias para el ensayo.

Unidades de análisis de Prolactina(LPR1)Cada unidad etiquetada con código debarras contiene una bola recubierta derecubiertas con anticuerpo monoclonalmurino anti-prolactina. Estable a 2–8°Chasta la fecha de caducidad.LKPR1: 100 unidades.LKPR5: 500 unidades.Espere a que las bolsas de las unidadesde análisis alcancen la temperaturaambiente antes de abrirlas. Ábralascortando por el extremo superior, dejandoel borde del cierre de cremallera intacto.Vuelva a cerrar las bolsasherméticamente para protegerlas de lahumedad.


Vial de reactivo de Prolactina (LPR2)Con códigos de barras. 7,5 ml defosfatasa alcalina (de intestino de ternera),conjugada con anticuerpo policlonal decabra anti-prolactina, en solución tampón,con conservante. Guardar tapado yrefrigerado: estable a 2–8°C hasta lafecha de caducidad. Se recomiendautilizarlo antes de que pasen 30 díasdespués de abrirlo cuando se guardasegún lo indicado.LKPR1: 1 vial. LKPR5: 5 viales.

Ajustadores de Prolactina (LPRL,LPRH)Dos viales (bajo y alto) de prolactinahumana liofilizada en una matriz desuero/solución tampón. Reconstituya cadavial con 2,0 ml de agua destilada odesionizada. Mezcle por agitación oinversión suave hasta que se hayadisuelto completamente el materialliofilizado. Alicuote y congele. Estable a–20°C durante 60 días tras sureconstitución.LKPR1: 1 juego. LKPR5: 2 juegos.

Componentes del kit que sesuministran por separado

Diluyente de Prolactina (LPRZ)Para la dilución manual de muestras depacientes. 25 ml de una matriz de suero,libre de prolactina, en solución tampón,con conservante. Estable a 2–8°C durante30 días después de abrirse, o hasta6 meses (alicuotados) a –20°C.LSUBX: Substrato quimioluminiscenteLPWS2: Lavado de sondaLKPM: Kit de limpieza de sondaLCHx-y: Soportes de recipientes demuestras (con códigos de barras)LSCP: Recipientes de muestras(desechables)LSCC: Tapas para los recipientes demuestras (opcionales)

CON6: control multiconstituyente de tresnivelesTambién necesarioPipetas de transferencia de muestras;agua destilada o desionizada; controles.

EnsayoAviso: para obtener el funcionamientoóptimo, es importante realizar todos losprocedimientos del mantenimiento general

según lo definido en el manual deloperador de IMMULITE o IMMULITE1000.Ver el Manual del Operador delIMMULITE o IMMULITE 1000 para:preparación, procesamiento, diluciones,ajuste, procedimientos de ensayo ycontrol de calidad.Inspeccionar visulamente cada unidad derección para asegurarse de que hay unabola antes de introducirla en el Sistema.Intervalo de ajuste recomendado:4 semanas.Muestras de Control de Calidad: Utilizarcontroles o pooles de sueros con almenos dos niveles diferentes deprolactina (bajo y alto).

Valores EsperadosBasado en su relación con el kit Coat-A-Count Prolactina IRMA de DPC, se puedeesperar que el ensayo tenga el siguienteintervalo preliminar de referencia para loshombres.

Grupo n Mediana Central 95%

6,2 ng/ml 2,5 – 17Hombres 19

131 mIU/l 53 – 360

Un estudio17 realizado con IMMULITEProlactina dio el siguiente intervalo dereferencia para las mujeres.

Grupo n Mediana Central 95%

9,4 ng/ml 1,9 – 25Mujeres 115

199 mIU/l 40 – 530

Como se resume en el informe técnico deDPC ZB157,17 en un estudio que siguiódiariamente a mujeres normales queovulan durante un ciclo completo, seobtuvieron valores algo mayores, unresultado que es coherente con el cadavez más estresante procedimiento derecogida de muestras implicado por eldiseño del estudio.


Los siguientes resultados se obtuvieronen un estudio representativo de valoresde fertilidad pediátrica realizado conIMMULITE Prolactina en una clínica en elsudoeste de los Estados Unidos.

Prolactina, ng/ml

GrupoEdad(años) n Mediana

Central95%

Mujeres Cordón 28 380 200 – 675

0,1 – 0,5 28 15 1 – 140

0,6 – 9 55 11 2 – 43

Hombres Cordón 27 295 150 – 565

0,1 – 0,5 36 19 4 – 65

0,6 – 9 55 8 0,6 – 29

Combinado Cordón 55 340 160 – 665

0,1 – 0,5 64 117 2 – 125

0,6 – 9 110 9 1 – 40

Prolactina, mIU/l

GrupoEdad(años) n

Mediana

Central95%

Mujeres Cordón 28 8 056 4 240 – 14 310

0,1 – 0,5 28 318 21 – 2 968

0,6 – 9 55 233 42 – 912

Hombres Cordón 27 6 254 3 180 – 11 978

0,1 – 0,5 36 403 85 – 1 378

0,6 – 9 55 170 13 – 615

Combinado Cordón 55 7 208 3 392 – 14 098

0,1 – 0,5 64 2 480 42 – 2 650

0,6 – 9 110 191 21 – 848

Estos límites han de considerarse sólocomo una guía. Cada Laboratorio deberáestablecer sus propios rangos dereferencia.

LimitaciónLos anticuerpos heterofílicos en el suerohumano pueden reaccionar con lasinmunoglobulinas de los componentes delensayo provocando interferencias con losinmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Las muestras de lospacientes que frecuentemente estánexpuestos a animales o a productosséricos animales pueden presentar estetipo de interferencia que potencialmente

ocasione un resultado anómalo. Estosreactivos han sido formulados paraminimizar el riesgo de interferencia, noobstante, pueden darse interaccionesanómalas entre sueros conflictivos y loscomponentes del ensayo. Con fines dediagnóstico, los resultados obtenidos coneste ensayo siempre deben ser usados encombinación con el examen clínico, lahistoria médica del paciente y cualquierotro dato clínico relevante.

Características AnalíticasPara ver resultados representativos de lascualidades del ensayo ver las tablas y losgráficos. Los resultados se expresanen ng/ml. (A no ser que se indique locontrario, todos los resultados fuerongenerados en muestras de suerorecogidas en tubos sin geles oactivadores de la coagulación).

Factor de Conversión:ng/ml × 21,2 → mIU/lIntervalo de calibración:Hasta 150 ng/ml (3 180 mIU/l).[WHO 3º IS 84/500].Sensibilidad: 0,5 ng/ml (11 mIU/l).

Efecto de gancho a altas dosis:Ninguno hasta 22 000 ng/ml.Precisión intraensayo (dentro de unatanda): Se han calculado datosestadísticos para las muestras a partir delos resultados de 20 replicados en unasola tanda. (Ver la tabla de "IntraassayPrecision").

Precisión entre ensayos (de una tandaa otra): Se han calculado datosestadísticos para las muestras analizadasen 26 tomas distintas. (Ver la tabla de“Interassay Precision”).Linealidad: Las muestras fueronanalizadas en varias diluciones. (Ver latabla de “Linearity” para resultadosrepresentativos.)

Recuperación: Se analizaron muestrassobrecargadas 1 en 19 con tressoluciones (129, 270 y 610 ng/ml). (Ver latabla de “Recovery” para resultadosrepresentativos.)Especificidad: El ensayo es altamenteespecífico para prolactina (Ver la tabla de“Specificity”).


Bilirrubina: La presencia de bilirrubina,en concentraciones hasta 200 mg/l, notienen ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.Hemolisis: La presencia de eritrocitoshasta concentraciones de 30 µl/ml notiene efecto en los resultados, en loconcerniente a la precisión del ensayo.Tipo de Muestra Alternativa: paraevaluar el efecto de los diferentes tipos demuestras alternativos, se recogió sangrede 36 voluntarios en tubos normales,tubos con Heparina y tubos vacutainerSST® de Becton Dickinson. Volúmenesiguales de las diferentes muestras fueronsobrecargadas con diferentesconcentraciones de Prolactina, con lafinalidad de cubrir todo el rango decalibración del ensayo, y procesadas conel procedimiento Prolactina IMMULITE.(Heparina) = 0,97 (Suero) + 0,24 ng/mlr = 0,98

(SST) = 0,93 (tubos simples) + 0,39 ng/mlr = 0,96

Medias:12,1 ng/ml (Suero)12,0 ng/ml (Heparina)11,7 ng/ml (SST)

EDTA: Como EDTA tendría un efectosignificativo en los resultados, no debeusarse como anticoagulante.

Comparación del Método: El ensayo fuecomparado con el IMMULITE 2000Prolactina de DPC en 148 muestras depacientes. (Rango de Concentración:aproximadamente 1 a 125 ng/ml. Ver elgráfico.) Por regresión linear:(IML) = 0,98 (IML 2000) + 1,97 ng/mlr = 0,988

Medias:45 ng/ml (IMMULITE)44 ng/ml (IMMULITE 2000)

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IMMULITE ProlactineDomaine d'utilisation : Dosagequantitatif de la prolactine dans le sérum.Ce test est réservé à un usage in vitroavec l'Analyseur IMMULITE et deIMMULITE 1000 et constitue une aide audiagnostic et au traitement des diverstroubles hypophysaires.Ce réactif est enregistré auprès del'AFSSAPS.

Référence catalogue :LKPR1 (100 tests), LKPR5 (500 tests)Code produit : PRL.Code couleur : bleu foncé.

IntroductionLa prolactine humaine est une hormonepolypeptidique sécrétée parl'antéhypophyse, d'un poids moléculairede 22 800 Daltons. Elle joue un rôleessentiel dans la sécrétion du lait et a lepouvoir suppresseur sur les fonctionsgonadiques. La prolactine a été reconnuecomme hormone distincte de l'hormone decroissance dans les années 1970. Depuisle dosage de la prolactine est devenu unoutil important dans la détermination descauses d'aménorrhées, de galactorrhéeset des désordres de l'axe hypothalamo-hypophysaire.Dans la littérature, les valeurs normalesde la prolactine circulante vont jusqu'à desconcentrations maximales de 20 ng/ml.Les concentrations en prolactine sontélevées à la naissance mais diminuenttrès vite, en moins de trois mois, jusqu'auxvaleurs trouvées chez l'adulte.Les femmes ont, en moyenne, des valeurslégèrement plus élevées que les hommes.Une légère augmentation de ces valeursest observée chez la femme à la puberté,apparemment liée aux œstrogènes et unediminution à la ménopause. Pendant lagrossesse, le taux de prolactine augmenteprogressivement pour atteindre 10 à 20fois sa valeur de base, puis rechute, dansles trois semaines après l'accouchement,vers une valeur normale chez les femmesqui n'allaitent pas. Par contre chez lesfemmes qui allaitent, la baisse du taux de


prolactine est beaucoup plus étalée dansle temps du fait des sécrétions ponctuellesde prolactine induites par les allaitements.Les femmes qui utilisent des contraceptifsoraux ou sous thérapie oestrogéniquepeuvent avoir des taux de prolactine plusélevés que la normale.Il est important de ne pas oublier que laprolactine est une hormone du stress, cequi explique certaines élévationsmodérées. Des élévations transitoires del'hormone ont été rapportées nonseulement dans un contexte chirurgicalmais également par le stress duprélèvement sanguin. De plus la libérationde l'hormone est proprement épisodique,avec des fluctuations d'un jour à l'autreallant parfois jusqu'à 30%. D'autre part, ilexiste un rythme circadien dans lasécrétion de prolactine : le taux del'hormone augmente pendant le sommeilet atteint son niveau le plus bas quelquesheures après le réveil Le conseil donnéparfois de prélever les échantillons entre 9heures du matin et midi se base surl'hypothèse que les patients ont desheures de réveil régulières.

Principe du testIMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactine estun dosage chimiluminescentimmunométrique, en deux étapes, enphase solide.Cycles d'incubation : 1 × 30 minutes.

Recueil des échantillonsIl est recommandé de clarifier leséchantillons hyperlipémiques parultracentrifugation.Des échantillons hémolysés peuvent êtrerévélateurs d'une préparation inadéquatedu prélèvement avant son envoi aulaboratoire ; il faudra donc interpréter lesrésultats avec prudence.Les echantillons ne doivent pas etre desplasmas EDTA.La centrifugation des échantillonssériques avant la formation complète ducaillot peut entraîner la présence defibrine. Pour éviter les résultats erronésdûs à la présence de fibrine, s'assurer dela formation complète du caillot avant decentrifuger les échantillons. Certainséchantillons, en particulier ceux provenantde patients sous anti-coagulants, peuvent

nécessiter un temps plus long pour laformation du caillot.

Des tubes pour prélèvements sanguinsprovenant de fabricants différents peuventdonner des résultats différents, selon lesmatériaux et additifs utilisés, y comprisgels ou barrières physiques, activateursde la coagulation et/ou anticoagulants. Lecoffret Prolactine IMMULITE/IMMULITE1000 n'a pas été testé sur tous les typesde tubes possibles. Veuillez consulter lechapitre intitulé Autres Typesd'Échantillons pour plus derenseignements sur les tubes qui ont étéévalués.Volume nécessaire : 25 µl sérum. (Legodet échantillon doit pouvoir contenir aumoins 100 µl de plus que le volume totalnécessaire.)Conservation : 7 jours à +2°C/+8°C ou3 mois à –20°C.

Précautions d'emploiRéservé à un usage diagnostique in vitroRéactifs : conserver les réactifs à +2/+8 °C. Eliminer les déchets conformémentà la réglementation en vigueur.Respecter les précautions d'emploi etmanipuler tous les composants du coffretcomme des produits potentiellementinfectieux. Les réactifs dérivés de produitshumains et utilisés dans ce coffret ont subiun test sérologique pour la Syphilis et destests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti-HCV et pour l'antigène desurface de l'hépatite B, qui se sont tousavérés négatifs.De l'azide de sodium à des concentrationsinférieures à 0,1 g/dl a été ajouté commeconservateur ; lors de l'élimination,l'évacuer avec de grandes quantités d'eaupour éviter une accumulation d'azidesmétalliques explosifs dans lescanalisations.Substrat chimiluminescent : éviter lacontamination et l'exposition directe ausoleil. (Voir notice).

Eau : utiliser de l'eau distillée oudésionisée.

Matériel fourniLes composants de la trousse ne peuventêtre utilisés que conjointement. Les


étiquettes à l'intérieur du coffret sontnécessaires au dosage.

Tests unitaires Prolactine (LPR1)Avec code-barre. Chaque unité contientune bille revêtue d'un anticorpsmonoclonal murin anti-prolactine. Stable à+2°C/+8°C jusqu'à la date de péremption.LKPR1: 100 unités. LKPR5: 500 unités.Porter les sachets à température ambianteavant d'ouvrir. Ouvrir le sachet avec desciseaux en préservant le dispositif defermeture. Refermer les sachets pour lesprotéger de l'humidité.

Cartouche à Réactif Prolactine (LPR2)Avec code-barres. 7,5 ml d'un anticorpspolyclonal de chèvre anti-prolactinemarqué à la phosphatase alcaline dans untampon, avec conservateur. Conserverbouché et réfrigéré : stable à +2°C/+8°Cjusqu'à la date de péremption. A utiliser depréférence dans les 30 jours qui suiventl'ouverture, si les recommandations destockage sont respectées.LKPR1: 1 cartouche.LKPR5: 5 cartouches.

Ajusteurs Prolactine (LPRL, LPRH)2 flacons d'ajusteurs (« haut » et « bas »)de prolactine humaine lyophilisée dansune matrice sérum/tampon. Reconstituerchaque flacon avec 2,0 ml d'eau distilléeou désionisée. Mélanger en imprimant unléger mouvement circulaire ou enretournant délicatement jusqu'à complètedissolution de la substance lyophilisée.Aliquoter et congeler. Stable à –20°Cpendant 60 jours après reconstitution.LKPR1: 1 jeu. LKPR5: 2 jeux.

Composants du coffret fournisséparément

Diluant échantillon Prolactine (LPRZ)Pour la dilution manuelle des échantillonsde patient. 25 ml de matrice tampon/sérum sans prolactine avec conservateur.Stable à +2°C/+8°C pendant 30 joursaprès ouverture ou 6 mois (aliquoté) à–20°C.LSUBX : Substrat chimiluminescentLPWSM : Solution de lavageLKPM : Coffret de décontamination del'aiguille de prélèvementLCHx-y : Supports pour godetséchantillons (avec code-barre)

LSCP : Godets échantillons (à usageunique)LSCC : Bouchons pour godetséchantillons (optionnel)CON6 : Contrôle multiparamétrique à troisniveaux

Egalement requisPipettes pour le transfert des échantillons ;eau distillée ou désionisée ; contrôles.

Protocole de dosageNoter que pour des performancesoptimales, il est important de réalisertoutes les procédures de maintenance deroutine selon les instructions du Manueld'Utilisation de l'IMMULITE ou del'IMMULITE 1000.

Voir le manuel d'utilisation de l'IMMULITEou de l'IMMULITE 1000 pour lapréparation, le démarrage du système, lesajustements, le dosage et les procéduresde contrôle de qualité.Vérifier visuellement que chaque Unité-Test contient bien une bille avant de lacharger dans l'automate.

Intervalle d'ajustement recommandé :4 semaines.Echantillons pour le contrôle de qualité :Utiliser des contrôles ou des pools desérums avec au moins deux niveaux deconcentration (faible ou élevé) deprolactine.

Valeurs de référenceCompte tenu de sa relation avec le testCoat-A-Count Prolactine IRMA de DPC, letest doit avoir les mêmes valeursattendues pour les hommes.

Groupe n MédianeDomaine à

95%

6,2 ng/ml 2,5 – 17Hommes 19

131 mUI/l 53 – 360

Une étude17 réalisée avec le testIMMULITE Prolactine a donné les valeursde référence suivantes pour les femmes.

Groupe n MédianeDomaine à

95%

9,4 ng/ml 1,9 – 25Femmes 115

199 mUI/l 40 – 530


Comme rapporté dans le bulletintechnique de DPC ZB15717 (IMMULITE etFertilité : Valeurs de référence), dans uneétude suivant des femmes au cours d'uncycle ovulatoire complet, le protocole del'étude a créé un stress qui augmentantavec le nombre de prélèvements amenaità observer des valeurs plus élevées.

Une étude en pédiatrie sur les valeurs defertilité, réalisée avec le test IMMULITEProlactine dans une clinique du sud ouestdes Etats-Unis, a donné les résultatssuivants.

Prolactine, ng/ml

GroupeÂge

(année) n Médiane Centré à 95%

Filles Cordon 28 380 200 – 675

0,1 – 0,5 28 15 1 – 140

0,6 – 9 55 11 2 – 43

Garçons Cordon 27 295 150 – 565

0,1 – 0,5 36 19 4 – 65

0,6 – 9 55 8 0,6 – 29

Total Cordon 55 340 160 – 665

0,1 – 0,5 64 117 2 – 125

0,6 – 9 110 9 1 – 40

Prolactine, mUI/l

GroupeÂge

(année) n Médiane Centré à 95%

Filles Cordon 28 8 056 4 240 – 14 310

0,1 – 0,5 28 318 21 – 2 968

0,6 – 9 55 233 42 – 912

Garçons Cordon 27 6 254 3 180 – 11 978

0,1 – 0,5 36 403 85 – 1 378

0,6 – 9 55 170 13 – 615

Total Cordon 55 7 208 3 392 – 14 098

0,1 – 0,5 64 2 480 42 – 2 650

0,6 – 9 110 191 21 – 848

Utiliser ces valeurs à titre indicatifuniquement. Chaque laboratoire devraitétablir ses propres valeurs de référence.

LimitesLes anticorps hétérophiles du sérumhumain peuvent réagir avec lesimmunoglobulines faisant partie descomposants du coffret et interférer avecles immunodosages in vitro. [Voir BoscatoLM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a

problem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Les échantillonsprovenant de patients fréquemmentexposés aux animaux ou aux produitssériques d'origine animale peuventprésenter ce type d'interférence pouvantpotentiellement donner un résultatanormal. Ces réactifs ont été mis au pointafin de minimiser le risque d'interférence,cependant des interactions potentiellesentre des sérums rares et les composantsdu test peuvent se produire. Dans un butdiagnostique, les résultats obtenus avecce dosage doivent toujours être utilisés enassociation avec un examen clinique,l'histoire médicale du patient et d'autresrésultats.

Performances du testConsulter les tableaux et graphiques pourobtenir les données représentatives desperformances du test. Les résultats sontdonnés en ng/ml. (En l'absence deprécision supplémentaire, tous lesrésultats ont été obtenus sur deséchantillons sériques prélevés sur tubessans gel, ni activateur de la coagulation).

Facteur de conversion :ng/ml × 21,2 → mUI/lDomaine de mesure : jusqu'à 150 ng/ml(3 180 mUI/l) [WHO 3rd IS 84/500].Sensibilité analytique : 0,5 ng/ml(11 mUI/l).

Effet-crochet : aucun jusqu'à22 000 ng/ml.Précision intra-essai : les valeurs ont étéétablies pour chacun des échantillons àpartir de 20 doublets dosés au cours d'unemême série. (Voir le tableau « IntraassayPrecision ».)Précision inter-essais : les valeurs ontété établies pour chacun des échantillonsdosés dans 26 séries différentes. (Voir letableau « Interassay Precision ».)Linéarité : les échantillons ont été testésavec des taux de dilution variés. (Voir letableau « Linearity » pour des donnéesreprésentatives.)Récupération: les échantillons testés ontété chargés dans un rapport de 1 à 19avec trois solutions (129, 270 et610 ng/ml). (Voir le tableau « Recovery »pour des données représentatives.)


Spécificité : le test est hautementspécifique de la Prolactine (Voir le tableau« Specificity ».)Bilirubine : La présence de bilirubine neprésente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 200 mg/l.Hémolyse : La présence d'agrégatd'hématies jusqu'à une concentration de30 µl/ml, n'a aucun effet sur les résultatsquant à la précision du dosage.Autres types d'échantillons: pourestimer l'effet de l'utilisation de différentstype d'échantillons, 36 volontaires ont étéprélevés sur tubes secs, héparinés et surtubes vacutainer SST® Becton Dickinson.Des volumes égaux de ces différentséchantillons ont été mélangés avecplusieurs concentrations d' Prolactine pourobtenir des valeurs à l'intérieur dudomaine de mesure du test puis dosésavec le protocole l'IMMULITE Prolactine.(Hépariné) = 0,97 (Sérum) + 0,24 ng/mlr = 0,98

(SST) = 0,93 (tubes ordinaires) + 0,39 ng/mlr = 0,96

Moyennes :12,1 ng/ml (Sérum)12,0 ng/ml (Hépariné)11,7 ng/ml (SST)

EDTA: L'EDTA étant susceptible d'avoirun impact significatif sur les résultats, il nedevrait pas être utilisé comme anti-coagulant.Comparaison de méthodes : le test a étécomparé au test IMMULITE 2000Prolactine de DPC sur 148 échantillons(intervalle de concentrations : 1 à125 ng/ml. Voir graphique.) Par régressionlinéaire :(IML) = 0,98 (IML 2000) + 1,97 ng/mlr = 0,988

Moyennes :45 ng/ml (IMMULITE)44 ng/ml (IMMULITE 2000)

Assistance techniqueEn France distribué par DPC France 90bd National 92257 La Garenne-Colombes.Fabriqué par EURO/DPC Ltd. dans le cadre d'unSystème Qualité enregistré sousISO 13485:2003.

Italiano

ProlattinaUso: Ad uso diagnostico in vitro con gliAnalizzatori IMMULITE ed IMMULITE1000 — per la misurazione quantitativadella prolattina nel siero quale ausilio nelladeterminazione e nel trattamento didisturbi ipofisari.Codice: LKPR1 (100 test), LKPR5 (500test)Codice del Test: PRL Colore: Blu Scuro

Riassunto e Spiegazione delTestLa prolattina umana è un ormonepolipeptidico dell'ipofisi anteriore con unamassa molecolare di circa 22 800. Giocaun ruolo essenziale nella secrezione dellatte ed ha la capacità di sopprimere lafunzione delle gonadi. L'esistenza dellaprolattina come sostanza distintadall'ormone della crescita è stata stabilitasolo nel 1970. Da quel momento, ildosaggio della prolattina è diventato unostrumento importante nell'indaginedell'amenorrea, galactorrea e dei disturbiipotalamico-ipofisari.

Come range di riferimento per la prolattinain circolo, la letteratura suggerisceconcentrazioni fino a circa 20 ng/mL. Ivalori sono elevati in maniera netta allanascita, ma declinano a livelli da adultidopo tre mesi.Le donne risultano avere livelli medileggermente più elevati degli uomini, conun lieve innalzamento intorno alla pubertà– apparentemente legato agli estrogeni –ed una corrispondente caduta durante lamenopausa. Durante la gravidanza, i livellidi prolattina salgono in maniera notevoleda 10 a 20 volte il valore iniziale, quindiscendono a valori normali dopo il parto –entro tre settimane nelle donne che nonallattano. Per coloro che allattano, ildeclino verso valori normali è più gradualea causa del pronto e repentino rilascioindotto dall'allattamento. Le donne chefanno uso di contraccettivi o sonosottoposte a terapia estrogenica possonoavere livelli di prolattina più elevati delnormale.


Stabilendo la significatività di moderatiinnalzamenti, è importante tenerepresente che la prolattina è un'ormoneindotto da situazioni di stress. Non solo lachirurgia, ma eventi fonte di minore stressquali un prelievo o un colloquio clinicohanno fatto registrare un innalzamentomomentaneo. Inoltre, è stato riscontratoche il rilascio della prolattina è episodico,e che possono verificarsi fluttuazioni digiorno in giorno con CV del 30%. Infine,esiste una variazione diurna legata alsonno: i livelli di prolattina si innalzanodurante il sonno e raggiungono i livelli piùbassi poche ore dopo il risveglio. L'avvisodi prelevare campioni “tra le nove emezzogiono” si basa sulla considerazioneche i pazienti osservino un ciclo normaledi veglia e sonno.

Principio del procedimentoIMMULITE/IMMULITE 1000 Prolattina èun dosaggio immunometrico inchemiluminescenza in fase solida adoppio sito.Cicli d'incubazione: 1 × 30 minuti.

Raccolta del CampioneSi consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifugaper schiarire i campioni lipemici.I campioni emolizzati posson indicare iltrattamento non idoneo del campioneprima dell'arrivo al laboratorio; per questomotivo, i risultati devono essereinterpretati con prudenza.

I campioni di plasma EDTA non devonoessere utilizzati.La centrifugazione dei campioni del sieroprima che la coagulazione sia completapuò produrre fibrina. Per evitare risultatierrati dovuti alla presenza di fibrina,assicurarsi che il processo dicoagulazione sia completo prima dicentrifugare i campioni. Alcuni campioni,in modo particolare quelli di pazientisottoposti a terapia con anticoagulanti,possono richiedere tempi di coagulazionepiù lunghi.Provette per il prelievo di sangue diproduttori diversi possono dare valoridifferenti, a seconda dei materiali e degliadditivi usati, incluso gel o barriere fisiche,attivatori di coaguli e/o anticoagulanti.L'IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolattinanon é stato verificato con tutte le possibili

variazioni di tipi di provette. Consultare lasezione riguardante Campioni Alternativiper dettagli sulle provette testate.Volume richiesto: 25 µL di siero. (Il portacampioni deve contenere almeno100 µL più del volume totale richiesto).

Conservazione: 7 giorni a 2–8°C o3 mesi a –20°C.

Avvertenze e PrecauzioniPer uso diagnostico in vitro.Reagenti: Conservare i reagenti a 2–8°C.Eliminare in conformità alle leggipertinenti.Seguire le precauzioni generali emanipolare tutti i componenti come sefossero potenzialmente infetti. I materialiderivati dal sangue umano sono statitestati con esito negativo per la sifilide, glianticorpi anti-HIV 1 e 2, l'Antigene diSuperficie dell'Epatite B e gli anticorpiAnti-Epatite C.

E' stata aggiunta Sodio Azide aconcentrazioni inferiori a 0,1 g/dL comeconservante. Al momentodell'eliminazione, irrorare con molta acquaper evitare la formazione di azidimetalliche potenzialmente esplosive nelletubature di piombo e di rame.

Substrato Chemiluminescente: Evitarela contaminazione e l'esposizione alla lucesolare diretta. (Vedi metodica.)Acqua: Utilizzare solo acqua distillata odeionizzata.

Materiali FornitiI componenti costituiscono un unico set.Le etichette all'interno della confezionesono necessarie per eseguire i dosaggi.

Test Unit Prolattina (LPR1)Ogni test unit con codice a barre contieneuna sferetta coattata con un anticorpomonoclonale murino anti-prolattina.Stabile a 2–8°C fino alla data di scadenza.LKPR1: 100 unit. LKPR5: 500 unit.

Le buste delle test unit devono essereportate a temperatura ambiente prima diaprire. Aprire tagliando lungo il bordosuperiore, lasciando intatta la chiusuraermetica. Risigillare le buste perproteggere le sferette dall'umidità.


Porta Reagente Prolattina (LPR2)Con codice a barre. 7,5 mL di fosfatasialcalina (intestino di vitello) coniugata conun anticorpo policlonale di capra anti-prolattina in tampone, con conservanti.Conservare nel frigorifero con il coperchio:stabile a 2–8°C fino alla data di scadenza.Si consiglia di utilizzare il prodotto entro30 giorni dall'apertura se conservato nellamaniera indicata.LKPR1: 1 Porta Reagente.LKPR5: 5 Porta Reagenti.

Calibratori Prolattina (LPRL, LPRH)Due flaconi (Basso ed Alto), ciascuno conprolattina umana liofila in una matrice disiero/tampone Ricostituire ogni fiala con2,0 mL di acqua distillata o deionizzata.Mescolare agitando delicatamente oinvertendo la miscela finchè il materialeliofilizzato sia completamente dissolto.Aliquotare e congelare. Stabile a –20°Cper 60 giorni dopo la ricostituzione.LKPR1: 1 set. LKPR5: 2 set.

Componenti dei kit fornitiseparatamente

Diluente della Prolattina (LPRZ)Per la diluzione dei campioni dei pazienti.25 mL di matrice siero/tampone priva diprolattina, con conservanti. Stabile a2–8°C per 30 giorni dopo l'apertura, o per6 mesi (aliquotato) a –20°C.LSUBX: Substrato ChemiluminescenteLPWS2: Tampone di Lavaggio dell'AgoLKPM: Kit di Pulizia dell'AgoLCHx-y: Tubi Porta Campioni (con codicea barre)LSCP: Porta Campioni (monouso)LSCC: Coperchi per Porta Campioni(opzionali)CON6: 3 livelli, controllo multicostituitoMateriali richiestiPipette per la dispensazione dei campioni;acqua distillata o deionizzata; controlli.

Procedura del DosaggioAttenzione: per avere prestazioni ottimali,è importante effettuare le procedure dimanutenzione di routine cosiccomedefinito nel Manuale dell'OperatoreIMMULITE o IMMULITE 1000.Vedi il Manuale dell'Operatore IMMULITEo IMMULITE 1000 per: preparazione,

setup, diluizione, calibrazione, dosaggio econtrollo di qualità.

Controllate ogni test unit verificando lapresenza della sferetta prima di caricarlasullo strumento.Intervallo di Calibrazione Consigliato:4 settimane.

Controllo di Qualità: Utilizzare controlli opool di sieri con almeno due livelli (alto ebasso) di prolattina.

Valori AttesiData l'affinità con la Prolattina Coat-A-Count IRMA della DPC ci si attende che ildosaggio abbia gli stessi range diriferimento in ng/mL e mIU/L. Range diriferimento preliminare per gli uomini:

Gruppo n Mediana Centrale 95%

6,2 ng/mL 2,5 – 17Uomini 19

131 mIU/L 53 – 360

Uno studio17 effettuato con il kit IMMULITEProlattina ha prodotto i seguenti risultati.Range di riferimento per le donne:

Gruppo n Mediana Centrale 95%

9,4 ng/mL 1,9 – 25Donne 115

199 mIU/l 40 – 530

Come riassunto nel Technical Report dellaDPC codice ZB157,17 in uno studioeffettuato su donne con ciclo ovulatorionormale su base giornaliera e per unintero ciclo ovulatorio, sono stati ottenutirisultati più elevati a causa di un processodi prelievo dei campioni ad elevato stress.Uno studio inter-disciplinare su valori difertilità pediatrica effettuato con il kitProlattina IMMULITE presso una Clinicanel Sud-Ovest degli Stati Uniti ha prodottoi seguenti risultati.


Prolattina, ng/mL

Gruppo Età (anni) n MedianaCentrale

95%

Donne Cordone 28 380 200 – 675

0,1 – 0,5 28 15 1 – 140

0,6 – 9 55 11 2 – 43

Uomini Cordone 27 295 150 – 565

0,1 – 0,5 36 19 4 – 65

0,6 – 9 55 8 0,6 – 29

Combinato Cordone 55 340 160 – 665

0,1 – 0,5 64 117 2 – 125

0,6 – 9 110 9 1 – 40

Prolattina, mIU/L

GruppoEtà

(anni) n Mediana Centrale 95%

Donne Cordone 28 8 056 4 240 – 14 310

0,1 – 0,5 28 318 21 – 2 968

0,6 – 9 55 233 42 – 912

Uomini Cordone 27 6 254 3 180 – 11 978

0,1 – 0,5 36 403 85 – 1 378

0,6 – 9 55 170 13 – 615Combinato Cordone 55 7 208 3 392 – 14 098

0,1 – 0,5 64 2 480 42 – 2 650

0,6 – 9 110 191 21 – 848

Detti valori dovrebbero essere consideratisolo come suggerimento. Ogni laboratoriodovrebbe stabilire i propri range diriferimento.

LimitiGli anticorpi eterofili presenti nel sieroumano possono reagire con leimmunoglobuline presenti nellecomponenti del dosaggio provocandoun'interferenza con i dosaggi in vitro. [VediBoscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Campioni di pazienti routinariamenteesposti agli animali o a prodotti derivati dasiero di animali possono presentarequesto tipo di interferenza causapotenziale di risultati anomali. Questireagenti sono stati formulati perminimizzare il rischio di interferenze,tuttavia, possono verificarsi interazionipotenziali tra sieri rari e componenti del

test. A scopo diagnostico, i risultati ottenutida questo dosaggio devono sempreessere utilizzati unitamente all'esameclinico, all'anamnesi del paziente e adaltre indagini di laboratorio.

Prestazioni del DosaggioVedi tavole e grafici per i datirappresentativi. I risultati sono indicatiin ng/mL. (Laddove non diversamentespecificato, tutti i dati sono stati generatisu campioni di siero raccolti in provettesenza gel separatore o additivi chefavoriscano la formazione di coaguli.)Fattore di Conversione:ng/mL × 21,2 → mIU/LRange di Calibrazione: fino a 150 ng/mL(3 180 mIU/L) [WHO 3rd IS 84/500].Sensibilità Analitica: 0,5 ng/mL(11 mIU/L).Effetto Gancio per Dosi Elevate:Nessuno fino a 22 000 ng/mL.

Precisione Intradosaggio (All'internodella stessa seduta): Sono statecalcolate statistiche per campioni dairisultati di 20 replicati in un'unica seduta(Vedi la tabella “Intraassay Precision”).Precisione Interdosaggio (Da unaseduta all'altra): Sono state calcolatestatistiche per campioni dai risultati di 26sedute diverse. (Vedi la tabella “InterassayPrecision”).Linearità: Sono stati dosati campioni invarie forme diluite. (Vedi la tabella"Linearity" per dati rappresentantivi.)Recupero: Sono stati dosati campioni aiquali sono state aggiunte tre soluzioni(129, 270 e 610 ng/mL) 1:19. (Vedi latabella "Recovery" per datirappresentantivi.)Specificità: Il dosaggio è estremamentespecifico per la Prolattina (Vedi la tabella"Specificity".)

Bilirubina: La presenza di bilirubina inconcentrazioni fino a 200 mg/L non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Emolisi: La presenza di globuli rossiimpaccati in concentrazioni fino a30 µL/mL non ha effetto sui risultati entro ilrange di precisione del dosaggio.


Tipo di Campione Alternativo: Perdeterminare l'effetto di campionialternativi, è stato prelevato del sangue da36 volontari in provette semplici,eparinizzate e Becton Dickinsonvacutainer SST®. Ad ugual volumi dicampioni misti sono state aggiunte varieconcentrazioni di Prolattina per ottenerevalori lungo l'intero range di calibrazionedel dosaggio e quindi dosati con il kitIMMULITE Prolattina.(Eparina) = 0,97 (Siero) + 0,24 ng/mLr = 0,98

(SST) = 0,93 (tubi semplici) + 0,39 ng/mLr = 0,96

Valore medio:12,1 ng/mL (Siero)12,0 ng/mL (Eparina)11,7 ng/mL (SST)

EDTA: Perchè l'EDTA avrebbe un effettosignificativo sui risultati, non dovrebbeessere utilizzato come un anticoagulante.Paragone dei Metodi: Il dosaggio è statoparagonato alla Prolattina IMMULITE2000 della DPC su 148 campioni dipazienti. (Gamma di concentrazione: da 1fino a 125 ng/mL. Vedi grafico.) Medianteregressione lineare:(IML) = 0,98 (IML 2000) + 1,97 ng/mLr = 0,988

Valore medio:45 ng/mL (IMMULITE)44 ng/mL (IMMULITE 2000)

Assistenza TecnicaAll'estero: Si prega di contattare il proprioDistributore DPC Nazionale.Prodotto dalla EURO/DPC Ltd. nell'ambito di unSistema di Qualità Certificato ISO 13485:2003.

Português

ProlactinaUtilização: Para o doseamento daprolactina em soro, em conjunto com oanalisadores IMMULITE e IMMULITE1000, para o diagnóstico in vitro eseguimento terapêutico de alteraçõespituitárias.Números de catálogo: LKPR1 (100testes), LKPR5 (500 testes)

Código do teste: PRL.Cor: Azul escuro

Sumário e explicação do testeA prolactina humana é uma hormonapolipeptídica da pituitária anterior com umpeso molecular de aproximadamente22 800 D. Desempenha um papelprincipal na secrecção do leite materno etem a capacidade de suprimir a funçãogonadal. A existência real da prolactinacomo uma substância distinta da hormonade crescimento humana, só foiestabelecida em 1970. Desde aí, adeterminação da prolactina tem-setornado uma ferramenta importante nainvestigação da amenorreia, galactorreia edesordens hipotalâmica – pituitárias.

A literatura sugere, como dado dereferência da prolactina circulante,concentrações aproximadamente acimade 20 ng/mL. Estes valores sãodistintamente elevados à nascença masdecaem para valores de adulto em menosde 3 meses.

Os valores médios de prolactinaapresentam-se normalmente em valoresligeiramente superiores na mulher que nohomem, com uma leve subida napuberdade – aparentemente relacionadacom os estrogénios – e correspondentedescida na menopausa. Durante agravidez, os valores da prolactinaaumentam 10 a 20 vezes, voltando aonormal após o parto – num prazo de3 semanas para as mães que nãoamamentam. Para as mães queamamentam, o declínio para o normal égradual devido à secreção em impulsosrápidos induzidos pelo aleitamento. Osníveis de prolactina também poderãosurgir mais altos que o normal emmulheres sob terapia com estrogénios ouusando contraceptivos orais.Relativamente ao significado daselevações moderadas, é importante terem atenção que a prolactina é uma“hormona de stress”. Também poderãoocasionar aumentos transitórios não só acirurgia, mas também a punção venosa ouuma outra intervenção clínica não muitoinvasiva. No entanto, a libertação daprolactina é inerentemente episódica, ediariamente apresenta flutuações comCV's próximos de 30%. Finalmente,encontram-se variações diárias durante o


sono: os valores da prolactina aumentamdurante o sono e atingem os seus valoresmínimos poucas horas após o despertar.Visto isto, e uma vez que os indivíduosem geral acordam aproximadamente àmesma hora, sugere-se que as amostraspara o doseamento da prolactina sejamrecolhidas entre as 9h:00 e as 12h:00.

Princípio do procedimentoA Prolactina IMMULITE/IMMULITE 1000 éum ensaio imunométrico em fase sólidaquimioluminescente de duas voltas.Ciclos de incubação: 1 × 30 minutos.

ColheitaRecomenda-se o uso de uma ultracentrífuga para clarear amostraslipémicas.

Amostras hemolisadas podem indicartratamento incorrecto de uma amostraantes do envio para o laboratório; portantoos resultados devem ser interpretadoscom cuidado.O plasma EDTA não deve ser usadocomo um tipo de amostra.A centrifugação de amostras de soroantes da formação completa do coágulopode resultar na presença de fibrina. Paraprevenir resultados errados devido àpresença de fibrina, certifique-se que aformação do coágulo foi completa antesda centrifugação das amostras. Algumasamostras, em especial as de doentes querecebem terapia anticoagulante podemrequerer um maior tempo de formação docoágulo.

Os tubos para colheita sanguínea dediferentes fabricantes, podem originardiferentes valores, dependendo dosmateriais e aditivos, incluíndo gel oubarreiras fisicas, activadores do coáguloe/ou anti coagulantes. IMMULITE /IMMULITE 1000 Prolactina não foramainda testados com todas as possiveisvariações originadas pelos tipos de tubos.Consultar a secção Tipos de AmostrasAlternativas para obter detalhes sobre ostubos que foram testados.Volume de amostra: 25 µL soro. (Cuvetede amostra deve conter um mínimo de100 µL a mais que o volume total exigido.)

Estabilidade: 7 dias a 2–8°C, ou3 meses a –20°C.

PrecauçõesPara uso de diagnóstico in vitro.Reagentes: Manter a 2–8°C. Elimine deacordo com as normas aplicadas.

Manipule com as devidas precauçõestodos os materiais capazes de transmitirdoenças infecciosas. As matérias primasobtidas de soro humano foram testadas,dando resultados negativos para a sífilis,para os anticorpos do vírus daimunodeficiência humana (HIV) 1 e 2;para o antigénio de superfície da hepatiteB (HBsAg) e para os anticorpos do vírusda hepatite C.Azida de sódio foi adicionada comoconservante; para evitar acumulações deazidas metálicas explosivas emcanalizações de cobre e alumínio, osreagentes devem ser rejeitados no esgotoapenas se estiverem diluídos e foremlavados com grandes volumes de água.Substrato quimioluminescente: Evitecontaminação e exposição à luz directa(ver bula).Água: Utilize água destilada oudesionizada.

Materiais fornecidosOs componentes formam um conjunto unoe indivisível. Os códigos de barras nointerior das caixas são necessários para oensaio.

Unidades de Teste de Prolactina (LPR1)Cada unidade identificada com código debarras contém uma pérola revestida comanticorpo monoclonal de rato anti-prolactina. Estável até a data de validadea 2–8°C.LKPR1: 100 unidades.LKPR5: 500 unidades.Deixe que as saquetas de Unidade deTeste fiquem à temperatura ambienteantes de as abrir. Abra cortando pelaranhura superior, mantendo o fechointacto. Sele novamente as saquetas paraproteger contra a humidade.

Embalagem de reagentes de Prolactina(LPR2)Com código de barras. Contém 7,5 mL defosfatase alcalina (de intestino de vitela)conjugado com anticorpo policlonal decabra anti-prolactina em tampão, com


conservante. Armazene tapado erefrigerado: Estável até à data de validadea 2–8°C. Recomenda-se a utilização até30 dias após aberto quando armazenadode acordo com as indicações.LKPR1: 1 embalagem.LKPR5: 5 embalagens.

Ajustes de Prolactina (LPRL, LPRH)Contém dois frascos (nível alto e baixo)de prolactina humana liofilizada liofilizadanuma matriz humana tamponizada.Reconstitua cada frasco com 2,0 mL deágua destilada ou deionizada. Misture porinversão ou movimentos lentos até omaterial liofilizado dissolvercompletamente. Alíquote e congele.Estável por 60 dias após a reconstituiçãoa –20°C.LKPR1: 1 conjunto. LKPR5: 2 conjuntos.

Componentes do kit fornecidosseparadamente

Diluente de amostra para Prolactina(LPRZ)Para a diluição de amostras de doentes.25 mL de matriz tamponizada de soro,sem prolactina e com conservante.Estável, após a abertura, durante 30 diasa 2–8°C, ou por 6 meses (aliquotado) a–20°C.

LSUBX: Substrato quimioluminescenteLPWS2: Solução de lavagemLKPM: Kit de limpeza do pipetadorLCHx-y: Suportes de cuvetes de amostra(com código de barras)LSCP: Cuvetes de amostra (descartáveis)LSCC: Tampa de cuvete de amostra(opcional)CON6: Controlo multiparamétrico de trêsníveis.Também necessário :Pipetas de transferência de amostra; águadestilada ou desionizada; controlos.

Procedimento de doseamentoTêr em atenção que para obter umdesempenho óptimo, é importanteefectuar todos os procedimentos demanutenção de rotina conforme definidono Manual de Operador do IMMULITE ouIMMULITE 1000.Ver o Manual do Operador do IMMULITEou IMMULITE 1000 para: preparação,

setup, diluições, ajustes, procedimento doensaio e controlo de qualidade.

Confirme a presença da esfera em cadaUnidade de Teste antes de a colocar nosistema.Intervalo entre ajustes aconselhável:4 semanas.

Amostras de controlo de qualidade:utilize controlos ou "pools" com, pelomenos, dois níveis (alto e baixo) deprolactina.

Valores de ReferênciaBaseado na sua relação com a ProlactinaCoat-A-Count IRMA da DPC, pode-seesperar que o doseamento tenha valores dereferência idênticos, em termos de ng/mL emIU/L. São os seguintes os resultadospreliminares para homens:

Grupo n Mediano Central 95%

6,2 ng/mL 2,5 – 17Homens 19

131 mIU/L 53 – 360

Um estudo17 realizado com a ProlactinaIMMULITE forneceu os seguintes valoresde referência para mulheres:

Grupo n Mediano Central 95%

9,4 ng/mL 1,9 – 25Mulheres 115

199 mIU/L 40 – 530

Conforme sumarizado no boletim técnicoZB15717 da DPC, num estudo em queforam seguidas mulheres com ovulaçãonormal, numa base diária, até um ciclocompleto, alguns valores mais elevadosforam obtidos relacionados com oaumento do stress no processo decolheita de amostras de acordo com oestudo proposto.


Um estudo cruzado de valores defertilidade pediátricos realizado com oProlactina IMMULITE numa clínica de“Repouso” no sudoeste dos E.U.A.,forneceu os seguintes resultados.

Prolactina, ng/mL

GrupoIdade(anos) n Mediano

Central95%

Mulheres Cordão 28 380 200 – 675

0,1 – 0,5 28 15 1 – 140

0,6 – 9 55 11 2 – 43

Homens Cordão 27 295 150 – 565

0,1 – 0,5 36 19 4 – 65

0,6 – 9 55 8 0,6 – 29

Combinado Cordão 55 340 160 – 665

0,1 – 0,5 64 117 2 – 125

0,6 – 9 110 9 1 – 40

Prolactina, mIU/L

GrupoIdade(anos) n Mediano Central 95%

Mulheres Cordão 28 8 056 4 240 – 14 310

0,1 – 0,5 28 318 21 – 2 968

0,6 – 9 55 233 42 – 912

Homens Cordão 27 6 254 3 180 – 11 978

0,1 – 0,5 36 403 85 – 1 378

0,6 – 9 55 170 13 – 615

Combinado Cordão 55 7 208 3 392 – 14 098

0,1 – 0,5 64 2 480 42 – 2 650

0,6 – 9 110 191 21 – 848

Estes valores devem ser consideradosapenas como directrizes. Cada laboratóriodeve estabelecer os seus própriosvalores.

LimitaçõesOs anticorpos heterófilicos no sorohumano podem reagir com asimunoglobulinas presentes no ensaio,causando interferência com osimunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Amostras de doentesexpostas em rotina a produtos ou sorosde animais podem demonstrar este tipode interferência, potencial causador deresultados anómalos. Estes reagentes

foram formulados para minimizar o riscode interferência, contudo podem ocorrerpotenciais interacções entre soros (raros)e componentes do teste. Para fins dediagnóstico, os resultados obtidos nesteensaio devem ser sempre analisados emcombinação com o exame clínico, históriade medicação do doente e outrosachados que possam correlacionar.

Características do ensaioVer tabelas e gráficos para dadosrepresentativos da performance dodoseamento. Os resultados sãoapresentados em ng/mL. Salvo referênciaem contrário, todos os dados provêm deamostras de soro colhidas em tubos semanticoagulantes, barreiras de gel ouaditivos promotores da coagulação.Factor de conversão:ng/mL × 21,2 → mIU/LCalibração: Até 150 ng/mL(WHO 3 180 mIU/L) [3rd IS 84/500].

Sensibilidade Analítica: 0,5 ng/mL(11 mIU/L).Efeito Hook de Alta Dose:Nenhum até 22 000 ng/mL.Precisão Intra-ensaio (Entre ensaios):Estatísticas foram calculadas paraamostras dos resultados de 20 réplicasnum único ensaio. (Ver a tabela de“Intraassay Precision”)

Precisão Inter-ensaio (Ensaio aensaio): Estatísticas foram calculadaspara amostras doseadas em 26 ensaiosdiferentes. (Ver a tabela de “InterassayPrecision”).Linearidade: As amostras foramdoseadas sob vários níveis de diluição.(Ver a tabela de "Linearity" para dadosrepresentativos.)Recuperação: As amostras foramadicionadas na relação de 1 para 19 comtrês soluções (129, 270 e 610 ng/mL)antes do doseamento. (Ver tabela de"Recovery" para dados representativos.)Especificidade: O doseamento éespecífico para o prolactina (Ver tabela de"Specificity".)

Bilirrubina: A presença de bilirrubina emconcentrações até 200 mg/L não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.


Hemolise: A Presença de eritrocitos emconcentrações até 30 µL/mL não temefeito no resultado, dentro da precisão doensaio.Tipo de amostra alternativa: Paradeterminar o efeito de amostrasalternatives, foi colhido sangue de 36voluntários em tubos secos, heparinizadose tubos de vacum SST® da BectonDickinson. A volumes iguais das mesmasamostras foram adicionadas váriasconcentrações de Prolactina para obtervalores ao longo da gama de calibraçãodo ensaio. As amostras foram doseadascom o IMMULITE Prolactina.(Heparina) = 0,97 (Soro) + 0,24 ng/mLr = 0,98

(SST) = 0,93 (tubos simples) + 0,39 ng/mLr = 0,96

Médias:12,1 ng/mL (Soro)12,0 ng/mL (Heparina)11,7 ng/mL (SST)

EDTA: Como EDTA teria um efeitosignificativo nos resultados, não deve serusado como anticoagulante.Comparação de Métodos: Odoseamento foi comparado com oProlactina IMMULITE 2000 da DPC em148 amostras de doentes. (Zona detrabalho: aproximadamente 1 a125 ng/mL. Ver gráfico.) Regressão linear:(IML) = 0,98 (IML 2000) + 1,97 ng/mLr = 0,988

Médias:45 ng/mL (IMMULITE)44 ng/mL (IMMULITE 2000)

Assistência TécnicaPor favor contacte o seu DistribuidorNacional.Fabricado pela EURO/DPC Ltd. de acordo como Sistema de Qualidade registado segundo anorma ISO 13485:2003.

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