Prick tests, Intradermoréactions, Patch tests (tests...

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27/04/2018 1 Diagnostic de l’allergie Les tests cutanés en pratique Prick tests, Intradermoréactions, Patch tests (tests épicutanés) Pr NICOLAS Service Allergologie et Immunologie Clinique CHU LyonSud Dr FERRIER LE BOUEDEC Service Dermatologie CHU Estaing ClermontFerrand Papillary Dermis Epidermis Stratum corneum Blood vessel Lymphatic Microvascular dermal unit 1. Anatomie de la peau La couche cornée: barrière cutanée

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Diagnostic de l’allergieLes tests cutanés en pratique

Prick tests, Intradermoréactions, Patch tests (tests épicutanés)

Pr NICOLAS Service Allergologie et Immunologie Clinique

CHU Lyon‐Sud

Dr FERRIER LE BOUEDECService Dermatologie

CHU Estaing ‐ Clermont‐Ferrand

PapillaryDermis

Epidermis

Stratum corneum

Blood vessel

Lymphatic

Microvascular dermal unit

1. Anatomie de la peauLa couche cornée: barrière cutanée

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MastT cells

Prick‐testpiqûre superficielle au travers d'une goutte d'allergène

Patch‐testapplication de l'allergène sous occlusion par voie épicutanée

IDRinjection intradermique de l'allergène de façon stérile

Prick tests

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Prick tests

• Tests à lecture rapide 

(15 à 20 mn )

• Explorent les allergies dites « immédiates » IgE dépendantes

• Puncture à travers une goutte d’allergène

• Evalués sur le diamètre de la réaction papuleuse corrélé à des tests témoins (positif et négatif)

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Indications des prick tests

• Dépistage d’un terrain atopique

‐ Recherche de sensibilisations à des pneumallergènes (acariens, pollens...)

‐ Positivité inconstante

‐ Pas de corrélation directe systématique entre  

l’exposition à ces allergènes et les poussées   

de la maladie

• Diagnostic de l’allergie immédiate– Rhinite, conjonctivite, asthme: maladies topiques (pneumallergènes)

– Aliments (trophallergènes)

– Hyménoptères (abeille, guepe, frelon)

– Médicaments 

Equipment• Sterile lancets 1 mm tip

• Marker pen for the skin

• Ruler for measuring

• Swabs/tissues with alcohol for cleaning skin

• Dry tissues for wiping solutions

• (Gloves)

• (Protection glasses)

• Recording sheet

• Test solutions 

• 26‐28g needles for IDT

Pictures of Equipment will be inserted here

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How to do the skin prick testing• Clean the skin with alcohol

• Mark the skin (min 2 cm apart each mark)

– Allergen

– saline – neg ‐ control

– histamine – + control

• Add one drop of each solution next to the mark on the skin

• Prick the skin with clean lancet and medium weight push throug the drop (NB: do not drawblood)

• Use a new lancet for each allergen 

• Blot the allergen/control drops off the skin witha dry tissue

• Read the result after 15‐20 mins

• Read histamine first, must be positive

• Measure the wheal. Wheal  >3mm (median longest diameter) = positive

INTERPRETATION 

• Le témoin négatif : absence de dermographisme 

• Les témoins positifs 

‐Le phosphate de codéine à 9 % (réactivité cutanée +la dégranulation mastocytaire)

‐Le chlorhydrate d’histamine à 10 mg/ml (la réactivité cutanée.)

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• PRICK POSITIF ‐diamètre > à 3 mm et témoin négatif bien négatif‐OU lecture semi‐quantitative (compare le diamètre de la papule vs témoin positif). Méthode moins objective

PRICK NEGATIF s’il est inférieur à la moitié du diamètre du témoin positifPRICK POSITIF s’il est supérieur au diamètre du témoin positifEntre les deux: faiblement positif

Méthodologie des tests à lecture immédiate, Annales de dermatologie et de vénéréologie (2009) 136, 661—667

Tests cutanés aux pneumallergènes chez un patient atopique 

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Les PRICK TEST en pratique:Service d’immunologie allergologie-Lyon Sud

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1.

2.

Avec un stylo de peau:‐témoins positif‐témoins négatif‐emplacements des allergènes

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• Batterie PNA:‐Acarien DP DF‐Alternaria‐Latex‐Chat‐Chien‐Bouleau‐Cyprès‐Olivier‐5 graminée‐Armoise‐Ambroisie‐Plantin‐Platane

• Batterie TPA:‐Soja‐Blanc d’œuf‐Celeri rave‐Farine de lupin‐Jaune d’œuf‐Moutarde‐Noix de cajou‐Noisette

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Prick‐test – Conseils pratiques pour le praticien

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Les INTRADERMO REACTION en pratique

Service d’immunologie allergologie‐Lyon Sud

1. Désinfection 2. Ecrire concentration

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3.Purger 4.Piquer

5. Injecter 0,3 ml 6. Délimiter la  Papule

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0,3 ml = PAPULE

Lecture à 20 minute

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How to do the intrademal testing• Add 2 marks for the IDT to the same 

arm as for SPT

• Min 3 cm apart and from each otherand from any of the SPTs

• Start with the 0.01 mg/mL LTX‐315 concentration

• Inject 0.02‐0.03 mL of 0.01 mg/mLconcentrarion at 5‐15°angle into theskin

• A bulge is created in the intradermallayer of the skin

• Read the result after 15‐20 min

• If the first IDT is negative, then repeatwith 0.1 mg/mL concentration

A positive control is not necessary if the histamine positive control of the SPT was positive (>3mm)

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C5a

CD88

Substance P, VIP, Somatostatine, 

Quinolones, Curares, 48/80 

TLR

IgEIgG

FcεRI

CMH I et II

MASTOCYTE

CD48

MRGPRX2

CD2

[Ca2+]

CIC

Lymphocyte T 

TCR

Opiacés,codéine

BactériesPAMPS

MASTOCYTESRécepteurs et activation

EXOCYTOSE‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐HISTAMINE

MEDIATEURS PREFORMES

Phase immédiate

CYTOKINES CHIMIOKINES

Phase tardive

LEUCOTRIÈNESPROSTAGLANDINES

Phase intermédiaire

STAT6

STAT6

Activation immunologique

Activation nonimmunologique

Œdème, Prurit Infiltrat cellulaire

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Gab2

Gab2

Pi3K SphK

S1P [Ca2+]

Réorganisation du cytosquelette 

Dégranulation

HISTAMINEPhase précoce

IP3 DAG

Gab2

Gab2

Pi3K

AKT

PKC

CYTOKINES / CHIMIOKINESRecrutement d’infiltrats 

leucocytairesPhase retardée

NFκB

Facteurs de transcription 

[Ca2+]

CalmodulineCalcineurinecFos

STAT 1/3/5GATA

PLA2

RAS

SHC

SOS

RAF

PLCγ

SLP76

SLP76

Gads

VAV

Activation de lacascade MAP Kinase(ERK / JNK / p38)

LEUCOTRIÈNESPROSTAGLANDINESPhase intermédiaire

GrbGrb2

PKC

LAT

βγ γ

PIP2PIP3

α FcεRI

βγ γ

α FcεRI

MASTOCYTESVoies d’activation et signalisation

Tests épicutanésou

Patch tests

1. Tests épicutanés classiques2. Tests semi‐ouverts3. Tests d’usage (ROAT)

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1. Tests épicutanés

• Exploration de l’allergie de contact retardée

• Reproduisent 1 eczéma de contact lors de l’exposition à un allergène

• Consistent à exposer la peau par contact simple à des allergènes suspectés

• Lecture retardée pour permettre à la réaction de se constituer

• Nombreux allergènes potentiels

Modalités des tests de contact:tests épicutanés ou patch tests

• En peau saine au niveau du dos

ou éventuellement des bras

• A distance d’une poussée (qq semaines )

• Après arrêt des dermocorticoïdes dans la zone de tests depuis au moins 7 jours

• Après arrêt des corticoïdes généraux depuis au moins 7 jours (ou dose < 20 mg /j prednisolone )

• Les traitements immunosuppresseurs contre-indiquent en général les tests

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• Allergènes déposés dans des cupules ou chambres occlusives disposées sur 1 sparadrap hypoallergénique

• Tests laissés en place 48h puis retirés et repérés

• 1ère lecture à 48 h

• 2ème lecture à 96 h

• +/- 3ème lecture J7

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• Lecture selon des critères internationaux évaluant l’intensité de la réaction

+/- réaction douteuse

+ réaction modérée

++ réaction forte

+++ réaction très forte

• Les contraintes des tests

-Ne pas appliquer de crème dans le dos le

jour des tests

-Ne pas mouiller les tests

-Eviter le sport

-Porter de préférence un T-shirt ou une

chemise coton

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• Les produits testés

- allergènes standardisés commercialisés par les laboratoires dans des véhicules appropriés et à concentration déterminée

- produits apportés

personnels ou professionnels

avec étiquetage (+/- fiche technique )

Batterie standard européenne

• 29 allergènes• Métaux: chrome , nickel, cobalt

• Marqueurs d’allergie pour plantes et parfums : baume du pérou, fragrance mix 1 et 2, lactone mix, lyral, colophane , primine

• Composants de caoutchouc : mercapto mix, mercaptobenzothiazole, thiuram mix , IPPD

• Résines de colles et plastiques : epoxy, pt BPF

• Conservateurs: formaldéhyde, parabens, clioquinol, quaternium15 methylchloroisothiazolinone et methylisothiazolinone,dibromoglutaronitrile

• Excipient : lanoline

• Colorant : para phénylènediamine

• Corticoïdes: budesonide, tixocortol pivalate

• Autres: neomycine, benzocaine

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Batterie Standard

• Allergènes les plus fréquemment retrouvés dans la population testée Réactualisée périodiquement

Batteries complémentaires orientées

• selon la profession

• selon le type de produits suspectés

• Produits apportés

selon le type de produits :

- Tests tels quels

- Produits dilués selon des règles de bonne

pratique pour éviter un effet irritant

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Le TRUE TEST ®

• Epidermotest prêt à l’emploi, disponible en pharmacie, non remboursé

• 2 Bandes de 12 tests

• Peu utilisé en France

• Différent de la Batterie standard Européenne

• Les batteries de tests permettent d’identifier

des allergènes potentiellement en cause

• Si positivité d’un produit apporté, il faut tester si possible les différents composants pour identifier l’allergène:

-soit composants présents dans des batteries commercialisées,

-soit composants fournis par les fabricants

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• Etude de pertinence indispensable:

corrélation des résultats des tests à l’histoire clinique

actuelle et passée

degré de pertinence:

absente, douteuse, probable, certaine

• Difficultés d’interprétation des tests

- Peau sensible et produits +/- irritants

- Chaleur et sudation

- Peau irritable avec tests faussement positifs sans pertinence : à refaire à distance

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• Complications possibles des tests

- Tests irritatifs

- Réactivation transitoire de l’eczéma

- Folliculites du dos sur peau grasse

- Troubles de pigmentation temporaires

- Test persistant (> 7 jours)

- Sensibilisation active très rare

2. TESTS SEMI-OUVERTS(variante technique du test épicutané)

• Souvent réalisés avec les produits apportésTouche avec le produit pur ( PH contrôlé)

Laisser sécher – pas d’occlusionRecouvrir de micropore

ex: produits d’hygiène, produits ménagers, peintures, encres …

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3. Tests d’usage

R.O.A.T TEST «repeated open application test»

• Test d’application répétée

• Au pli du coude matin et soir pendant 7 jours

• Utile si

1. Patch test douteux

2. Patch test négatif et forte suspicion clinique d’allergie de contact

(ex: collyres, cosmétique …)

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R.O.A.TCollyre

Intérêt d’un bilan complet

• Polysensibilisation possible• Allergène pas toujours suspecté à

l’interrogatoire• Permet de bien cibler les évictions qui

permettent la guérison de l’eczéma de contact

• Indispensable dans les eczémas professionnels ( problème de changement de poste ou de reclassement )

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Indications des tests épicutanés

• Les eczémas des mainschroniques ou récidivants

rythmés par le travail

rythmés par une activité particulière

résistants aux dermocorticoïdes

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Eczéma de contactsec chronique

Eczéma de contact suintant en poussée

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Pulpite

Dyshidrose

Test semi ouvert positif à 96 h avec résine utilisée

Tests épicutanés positifs pour des acrylates

Eczéma des mains et des paupières chez une

onglière par allergie de contact aux résines manipulées

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Kinésithérapeute

Allergies de contact -conservateurs-composants de parfums

Methylchloroisothiazolinone‐methylisothiazolinone

• Les eczémas des piedsChroniques ou récidivants

Aggravés en été

Résistant aux dermocorticoïdes

Sels de chrome des cuirs ++

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• Mesures d’éviction en fonction des allergènes retrouvés:

Sels de chrome (cuirs )

Composants de caoutchouc

Résine de colle néoprène

Diméthylfumarate (contaminant ) …

• Les eczémas du visage Atteinte isolée des paupières chronique ou très

récidivante

Atteinte péribuccale chronique

Lésions rythmées par le travail ou activité particulière

Poussées vésiculeuses

Réaction aux colorants d’ une teinture capillaire

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• Les eczémas sur sites d’ application de topiques médicamenteux ou antiseptiques

Après les tests

• Compte-rendu écrit avec résultats positifs et négatifs

• conseils et fiches d’éviction

• risques de réactions croisées

• liste de produits à utiliser

• moyens de protection

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Tests de contact chez l’enfant

• Allergie de contact très rare avant 3 ans

• Augmente avec âge

• indications: eczémas chroniques ou très

récidivants ou rebelles aux dermocorticoides

( avec 1 facteur de contact suspecté)

• Tests orientés ++

• Batterie enfant

• Tests parfois difficile à lire (irritation)

• 3 ans 1/2

• Eczéma de contact après piercing des oreilles

• Allergie de contact

Biseptine +++

Cobalt ++

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Eczéma plantaire chronique 11 ans

allergie à des composants de caoutchouc des baskets

Photopatch tests

• Indications : eczémas photosensibles• Réaction révélée par exposition à 1 allergène

et exposition aux UV

• Batterie de phototests +/- produits suspectés

• 1 batterie de tests non irradiée, 1 batterie

irradiée à 24 h en UVA

• Lecture à 48 et 96 h

• Comparaison résultats des tests non irradiés et

des tests irradiés

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Tests non irradiés

Fragrance mix1 +Baume du pérou +Ketoprofen -Ketum gel -

Tests irradiés UVA

Ketoprofen +++Ketum gel +++

Atopy patch tests

• Dépistage d’une hypersensibilité retardée aux pneumallergènes et trophallergènes chez l’atopique

• Développés surtout chez l’enfant initialement

• Standardisation imparfaite

• Pertinence clinique incertaine

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• Atopy Patch Tests

- Pneumallergènes : acariens, graminées , chat ....

Standardisés

Faible pertinence clinique en pratique

Eviction très inconstamment efficace

Patch acariens positif

Patch graminées positif

- Atopy patch tests :Trophallergènes

Diallertest ® :

allergènes du lait de vache

patch prêt à l’emploi disponible en pharmacie

Dépistage de l’allergie retardée au lait de vache

de l’enfant ( troubles digestifs +/- eczéma)

Lecture difficile à 72 h

Sensibilité moyenne > lait natif

Aliments natifs :

patch avec blanc d’oeuf , arachide, soja, blé ...

sensibilité moyenne , lecture délicate

Tests de provocation orale indispensables

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• Dans la dermatite atopique les Atopy Patch Tests semblent plus intéressants que les prick tests

• Résultats dissociés possibles

• Réalisation et interprétation plus difficile

• Pratique moins courante

• Indications et intérêt dans la prise en charge de la dermatite atopique restent à préciser

• Prick tests

diagnostic des eczémas de contact à des

protéines

Ex: lait , farines, poissons et viandes ...

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• En conclusion

- Patch tests et prick tests sont des outils de

dépistage des allergies dans l’eczéma

- Tout eczéma ne nécessite pas des tests

- Les tests sont indispensables en cas de suspicion d’eczéma de contact

- Les tests sont adaptés et interprétés en fonction d’une histoire clinique précise

- La coopération du patient est nécessaire

à un bon résultat

Les PATCH TEST à LYON SUD

Service d’immunologie allergologie

Pavillon 1K

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BATTERIES DISPONIBLES

-Colorants/ textiles

-Coiffure

-Caoutchouc

-Chaussure

-Plante

-Plastique/colle

-Médicaments/ Corticostéroides

-Batterie Cosmétologie:

• -Excipient

• -Antioxydant

• -Antiseptique

• -Conservateur

-Atopy Patch test

-Implant métallique

Conserver au Frigo

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Batterie standard européenne

45 allergènes:

+ (43)Lauryl Sulfate 5%+(44) Isopropanol +(45) Nonanoic acide 90%

Batterie standard européenne

45 allergènes:-allergène vaseline-allergène liquide

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Batterie des implants métallique

1.Préparation de la BSE-poser les patchs sur un plan-les ouvrir

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Allergènes vaseline Allergènes liquides

2. Appliquer les allergènes

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3. Appliquer sur le dos du patient

Appliquer la BSE

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4. Délimiter les plaques de la BSE avec un feutre de peau

5.Recouvrir de sparadraps

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6. Recouvrir du deuxième sparadraps

Le patient repart à domicile avec ses patchs

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CONSIGNES:

-ne pas prendre de bain, ne pas aller à la piscine PAR CONTRE vous pouvez prendre une douche sans mouiller le dos-ne pas faire d’activités physiques -ne pas gratter la zone -ne pas s’exposer au soleil-ne pas passer de dermocorticoïdes -vous pouvez dormir sur le dos, manger normalement

Retirez les patchs la veille, repassez les marques au feutre jusqu’au dernier RDV

6.Photo avec IPOD

+ Schéma remplie par IDE

Pour la lecture à J3 +/-J7

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Les patch tests en pratique

• Expérience du service de Malmö (Suède)

Pr Magnus BRUZE

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Poste de travail tests cutanés prêt à recevoir le patient

Fiche de prescrition du médecin

Tests vaseline Tests liquides

Batterie Suédoise (BSE) Batterie Malmö

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Allergènes vaseline préparés à l’avance

Allergènes liquides préparés

au dernier moment

Schéma corporel – Lieu de pose des bandes

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Préparation des patch liquides

Dispensation des patch liquides

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Application des patchs

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Marquage des bords des bandes patch

Fermeture des patchs

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Eczéma aux cosmétiques

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IMG_2616.MOV

IMG_2617.MOV

IMG_2619.MOV

IMG_2631.MOV

IMG_2632.MOV

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Eczéma des paupières

• Enfant, piscine 3/semaine• Dermato: demande de bilan

– batterie suède – batterie malmö– produits personnels

• Chimiste: prépare les extraits des produits personnels

• Infirmière: – pose les 3 batteries– entre le dossier dans base

de données– donne 2 RDV de lecture

• Dermato: lecture et CAT

Le chimiste

Préparation des éléments à extraire

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Le chimiste

Extraction acétone et alcool

Le chimiste

Concentration de l’extrait

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Le chimiste

Concentration de l’extrait

Le chimiste

Reprise de l’extrait sec en sérum physiologique

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Infirmière

Récupération des 4 extraits à tester

Produits personnels testés

Caoutchouc et extraits de caoutchouc

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Application des tests vaselines

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Schéma corporel

Préparation des tests liquides des batteries Suède et Malmö

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Application des tests liquides des batteries Suède et Malmö et des produits patients

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Marquage et fermeture des patch tests

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Application des tests liquides des batteries Suède et Malmö

Tests cutanés aux médicaments

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MastT cells

Prick-testpiqûre superficielle au travers d'une goutte d'allergène

Patch-testapplication de l'allergène sous occlusion par voie épicutanée

IDRinjection intradermique de l'allergène de façon stérile

Manifestations Cliniques

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Toxidermie érythémateuse Clamoxyl (péni A)

Toxidermie érythémateuseAprès Clamoxyl, Feldene, Remplacé par Bactrim, Surgam

Toxidermie Bristopen/OropivaloneSurgam/Doliprane

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Toxidermie érythémateuseClamoxyl

MastT cells

Prick-testpiqûre superficielle au travers d'une goutte d'allergène

Patch-testapplication de l'allergène sous occlusion par voie épicutanée

IDRinjection intradermique de l'allergène de façon stérile

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SLS

ALLERGIE ET COLLYRES

REVIDAL 29 Juin 2007

Audrey NOSBAUM (IHL)Unité d’Allergologie et d’Immunologie Clinique

Professeur Jean-François NicolasCentre Hospitalier Lyon-Sud

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Monsieur P. 67ans

• Poussées d’eczéma des paupières et conjonctivites suite à des collyres anti glaucomes

• Traité par Timoptol, pendant 4 ans sans problème puis relais en Janvier 2005 par Xalacom conjonctivites et succession de collyres responsables de poussées d’eczéma récidivantes, œdémateuses+++

Liste des collyres utilisés

• Collyre initial:– Timoptol

• Collyres responsables de réaction– Xalacom– Timabak + Larmabak– Euronac

• Collyres bien supportés– Travastan– Alphagan

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Composition des collyres • Collyre initial:

– Timoptol (Timolol, phosphate mono et disodique, chlorure de benzalkonium)

• Collyres responsables de réaction– Xalacom (latanoprost, timolol, chlorure de benzalkonium, hydroxyde

de sodium, phosphate mono et disodique, solution acide chlorhydrique)

Timabak (Timolol, phosphate mono et disodique)

Larmabak (chlorure de sodium, hydrogénophosphate de sodium

– Euronac (acetylcysteine, dithiotheritol, phosphate trisodique, edetate de sodium, hydroxide de sodium, hypromellose, chlorure de benzalkonium)

Composition des collyres

• Collyres bien supportés:

– Travastan (Travastan, huile de ricin, trametamol, edetate

disodique, acide borique, chlorure de benzalkonium )

– Alphagan (brimonidine, chlorure de benzalkonium, alcool polyvinylique, acide citrique monohydrate, chlorure de sodium)

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Tests allergologiques

• Bilan réalisé:– BSE dont benzalkonium chloride:

• ++ Fragrance mix non pertinent

• Benzalkonium chloride: négatif

• Succession de Roat à partir d’avril 2006– 1 application/jour * 15 jours

Larmabak: négatif Timabak: positif

Xalacom: positif

Euronac: positif

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Composition des collyres • Collyre initial:

– Timoptol (Timolol, phosphate mono et disodique, chlorure de benzalkonium)

• Collyres responsables de réaction– Xalacom (latanoprost, timolol, chlorure de benzalkonium, hydroxyde

de sodium, phosphate mono et disodique, solution acide chlorhydrique)

Timabak (Timolol, phosphate mono et disodique)

Larmabak (chlorure de sodium, hydrogénophosphate de sodium

– Euronac (acetylcysteine, dithiotheritol, phosphate trisodique, edetate de sodium, hydroxide de sodium, hypromellose, chlorure de benzalkonium)

ROAT déclinaison Euronac

Acétylcystéine

Hypromellose

Benzalkonium chloride

calcium edetate de sodium

Phosphate trisodique

dithiotreitol

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ROAT déclinaison Timabak

• Négatif à J7 (2 applications/ jour)

• Appel du patient: positif à J9– Timolol: ++

– Phosphate monosodique: négatif

– Phosphate disodique: négatif

Conclusion (1) • Collyre initiale:

– Timoptol (Timolol, phosphate mono et disodique, chlorure de benzalkonium)

• Collyres responsables de réaction– Xalacom (latanoprost, timolol, chlorure de benzalkonium, hydroxyde de

sodium, phosphate mono et disodique, solution acide chlorhydrique)

Timabak (timolol, phosphate mono et disodique)

Larmabak (chlorure de sodium, hydrogénophosphate de sodium

– Euronac (acetylcysteine, dithiotheritol, phosphate trisodique, edetate de sodium, hydroxide de sodium, hypromellose, chlorure de benzalkonium)

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Conclusion (2)

• HSR Timolol, acétylcystéine, hypromellose

• Intérêt des ROAT et testing déclinaison des médicaments

• Rhinofluimicil Eczéma nasal – Rhiofluimicil = acetylcysteine