POLIMORFISMO DEL GEN MAD 1 EN UNA POLIMORFISMO DEL GEN MAD 1 EN UNA

POBLACION INFANTIL LOJANAPOBLACION INFANTIL LOJANA

Autor: Milton Leonardo Yaguana Cuenca

Loja – Ecuador

Mitosis

Adecuada Segregación Cromosómica

CHECKPOINT Inestabilidad Cromosómica

A N E U P L O I D I A S

MITOTIC ARREST DEFICIENT 1 (MAD 1)

• Polipéptido 718 aa

• Codifica una proteína de 83 kDa MAD1

MAD2

CDC20

MAD1

APC/C

En condiciones normales…En condiciones normales…

SEPARASASEPARASA

SE

CU

RIN

A

CDC20

APC/C

MAD2

MAD1

SEPARASASEPARASA

SE

CU

RIN

A

Cuando se detecta un error…Cuando se detecta un error…

POLIMORFISMO MAD1

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19+?

0.414.43 2.66 3.12

1.291.670.162.61

64k 80k 23k 12.4k 21.3k 22.7k

...gcc agg cag cgc ctg cgc gag gac cac agc cag ctg cag gcg gag tgc gag cga ctg cgc ggg ctc ctg cgc...

A R Q R L R E D H S Q L Q A E C E R L R G L L R

...gcc agg cag cgc ctg cac gag gac cac agc cag ctg cag gcg gag tgc gag cga ctg cgc ggg ctc ctg cgc...

A R Q R L H E D H S Q L Q A E C E R L R G L L R

553 576558558R

558H

Zipper de LeucinaZipper de Leucina

Zipper de LeucinaZipper de Leucina

Iwanaga, et al. (2002). J. Biol. Chem. 277(34): 31005-13.

OBJETIVOS

GENERAL:

Determinar el polimorfismo del gen Mad1 en niños menores de 12 años que acudieron al laboratorio clínico de la Unidad de

Medicina Familiar (UMF) de la UTPL.

ESPECIFICO:

Determinar la frecuencia del polimorfismo del gen Mad1 en niños menores de 12 años acudieron laboratorio clínico de la Unidad de

Medicina Familiar (UMF) de la UTPL.

MATERIALES Y MÉTODOS

Análisis de Resultados

Obtención de Sangre Periférica

Extracción DNA Genómico

PCR

Digestión con Enzimas de Restricción

Determinación

del genotipo

Cálculo de frecuencias

Equilibrio Hardy-Weinberg

X 2-Cuadrado

Amplificación del Exon 17 del Mad1

Fragmento de 241 pb

Digestión con Mvn I

4343

CGCGCGCG

CACGCACG

136136

9494 42421212

5050

43435050

558 G (R)558 G (R)

558 A (H)558 A (H)

1212

GG AA GA

FrecuenciaFrecuencia

GenotípicaGenotípica

GA

GG

AA

Nº. Ind.

2929

1818

99

%

51.7951.79

32.1432.14

16.0716.07

51,79

32,14

16,07

0

10

20

30

40

50

60

PO

RC

EN

TA

JE

GA (Het) GG (WT) AA (Mut)

GENOTIPO

Frecuencia Genotípica MAD1

RESULTADOS Y DISCUSION

FrecuenciaFrecuencia

AlélicaAlélica

G

A

%

42.042.0

58.058.0

FRECUENCIA ALELICA MAD1

G58%

A42%

Genotipo Observado Esperado (O-E) (O-E)2 (O-E)2/E

GG 18 18.86 -0.86 0.7396 0.03922

GA 29 27.28 1.72 2.9584 0.1084

AA 9 9.86 -0.86 0.7396 0.0750

Total 56 0 X2 = 0.22

p = 0.70

ANALISIS ESTADISTICO:

CONCLUSIONES

Se observo un grado de expresión mayor del genotipo heterocigoto (GA = 51.79%), comparado con los otros genotipos homocigotos dominante y recesivo (GG = 32.14% & AA = 16.27%), respectivamente.

Por tanto no :

La variante polimórfica del gen La variante polimórfica del gen Mad1Mad1 es muy es muy frecuentefrecuente

No es resultado del proceso de transformación No es resultado del proceso de transformación malignamaligna

Hay PolimorfismoHay Polimorfismo

PERSPECTIVAS

Screening genéticoScreening genético

Determinar el genotipo Determinar el genotipo

Efectos de mad1 normal y mutanteEfectos de mad1 normal y mutante

AnálisisAnálisis

Nocodazol Nocodazol

AnálisisAnálisis