Plante Modificate Genetic

download Plante Modificate Genetic

of 22

Transcript of Plante Modificate Genetic

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    1/22

    R E F E R A T

    STUDENT:TURESCU

    IONUT

    PLANTELE MODIFICATEGENETIC IN RAPORT CU

    AGRICULTURA SI MEDIUL

    Biologie moleculara

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    2/22

    INTRODUCERE

    Transformarea genetic a plantelor a cunoscut un progres spectaculos, de la obinerea

    primelor gene himere, n anii 70 ai secolului trecut, la regenerarea primelor plante

    transformate genetic purtnd gene strine (Gasser i Fraley, 1989). n ultimul deceniu s-a

    ajuns la eliberarea n cmp i cultivarea pe scar larg a plantelor transgenice, de la 1,7 ha n

    anul 1996 pn la 114,3 mil ha n anul 2007.

    Descoperirea structurii de dublu helix a ADN de ctre Watson i Crick, la nceputul

    anului 1950, a dus la cunoaterea fundamentului biologic al speciei umane, dar i al altor

    specii, iar dezvoltarea biotehnologiilor a fcut posibil intervenia n genom n cadrul

    tehnicilor de inginerie genetic. Aplicarea acestor tehnici la plante a fcut posibil obinerea

    unor specimene modificate genetic.

    Odat cu nceputul anilor 1970, o serie de tehnici ale geniului genetic (adic

    manipularea direct a genelor de ctre om) permit extragerea unei gene din genomul unui

    organism i reintroducerea ei n genomul unui alt organism, aparinnd unei alte specii sau

    chiar altui regn. Acest transfer de gene este numit transgenez, pentru c el presupune

    traversarea barierelor care, pn nu demult, mpiedicau schimburile de gene ntre speciidiferite, mai ales ntre cele aparinnd unor regnuri diferite.

    Avnd n vedere existena unor opinii diferite privind introducerea n cultur i pe

    pia a unor plante, dar i la adresa alimentelor i furajelor modificate genetic, este necesar

    informarea publicului asupra avantajelor i dezavantajelor obinerii i utilizrii organismelor

    modificate genetic, aa cum prevd dispoziiile legale n vigoare. Pentru aceasta se impune, n

    primul rnd, prezentarea noiunii de organism modificat genetic, aa cum este cunoscut pe

    plan internaional i naional.n Germania, OMG (organisme modificate genetic) sunt definite ca fiind organisme

    al cror material genetic a fost modificat ntr-un mod care nu exista n natur n condiii

    naturale sau de recombinare natural. Organismul modificat genetic trebuie sa fie o unitate

    capabil de autoreplicare sau transmitere a materialului genetic .

    n Statele Unite, plantele i animalele care conin gene transferate de la alte specii,

    pentru a obine anumite caractere, precum rezistena la anumite pesticide i erbicide

    constituie organisme modificate genetic.

    2

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    3/22

    n Romnia (conform OG nr.49/2000), organismul modificat genetic este un

    organism care conine o combinatie nou de material genetic, obinut prin tehnicile

    biotehnologiilor moderne care i confer noi caracteristici.

    Aplicat recoltelor, termenul de OMG se refer la plantele la care una sau mai multe

    gene de la specii diferite au fost introduse stabil ntr-un genom gazd folosind tehnici de

    transfer genetic i unde, n multe cazuri, asemenea gene introduse au fost capabile de a

    produce o protein. Acest proces de introducere a genelor n specii diferite (nenrudite) i de

    punere a lor n funciune este cunoscut sub numele de transformare genetic.

    Obiectivul principal a fost acela de protejare a culturilor, prin crearea rezistenei

    mpotriva bolilor i dunatorilor la plante (insecte i virusuri) sau prin crearea unei mai bune

    tolerane la erbicidele utilizate n agricultur.

    Rezistena mpotriva insectelor s-a obinut prin ncorporarea n planta utilizat ca

    materie prim pentru alimente, a unei gene ce induce producerea unei toxine, gen prelevat

    de la un microorganism (Bacillus thuringiensis-Bt). Aceast toxin este utilizat de mult timp

    ca un insecticid convenional n agricultur, fiind netoxic pentru consumul uman. Culturile

    modificate genetic care produc permanent aceast toxin, s-au dovedit a avea nevoie de

    cantiti mult mai mici de alte insecticide, folosite pentru situaii specifice, cnd presiunea

    unor populaii mari de duntori este mare.

    Rezistena mpotriva virusurilor se obine prin introducerea de gene de la anumite

    virusuri care provoac bolile plantelor. Creterea rezistenei mpotriva virusurilor face

    plantele mai puin vulnerabile la boli cauzate de acestea, mrind astfel productivitatea.

    Tolerana la erbicide se obine prin introducerea unei gene de la o bacterie care

    manifest rezisten la unele erbicide. n situaiile n care a fost imperativ utilizarea

    erbicidelor, cantitile necesare de erbicid au fost mult mai mici.

    3

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    4/22

    TEHNOLOGII UTILIZATE PENTRU TRANSFORMAREA

    GENETIC A PLANTELOR

    Transformarea genetic este echivalent cu schimbarea structurii genetice a unui

    organism prin transferul i integrarea stabil a unor gene manipulate in vitro. Pentru a obine

    i a confirma statutul de plant transformat genetic, este nevoie de:

    tehnici de transfer al genelor;

    tehnici de cultur in vitro a celulelor, protoplatilor, esuturilor, organelor, plantelor

    intregi;

    tehnici de confirmare a integrrii stabile i a expresiei genelor transferate n genomul

    plantelor regenerate.

    Pn n prezent, au fost inventariate peste 21 de tehnici de transfer al genelor la

    plante. Niciuna dintre acestea nu are nsa un caracter universal. O tehnic ideal ar trebui s

    ndeplineasc urmtoarele condiii:

    s fie independent de genotip, pentru ca genele s poat fi transferate n elite;

    s asigure obinerea unui numr mare de plante transgenice, pentru ca ansele apariiei

    unor niveluri de expresie utile ale genei transferate s fie, i ele, ct mai mari (fiecare

    individ obinut fiind un eveniment de transformare, nivelul de expresie a transgenei

    depinde de locul n care aceasta se integreaz n genom);

    s necesite un numr ct mai mic de manipulari in vitro, care sunt laborioase,

    mutagene i presupun realizarea unor culturi compatibile cu tehnicile curente de

    transformare (Badea M. i colab., 2001).

    Transferul genelor la plante se poate face la nivelul protoplatilor, celulelor sau

    esuturilor, fie indirect, prin intermediul vectorilor biologici, fie direct, prin metode fizice i

    chimice (Christou P., 1996).

    Cei mai utilizai vectori de transformare la plante sunt:

    sistemul Agrobacterium, cu vectori binari;

    virusurile.

    Cele mai des aplicate metode chimice i fizice sunt:

    incubarea protoplatilor cu polietilen glicol (PEG);

    electroporarea protoplatilor, celulelor i esuturilor;

    4

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    5/22

    microinjecia ADN exogen n protoplati, polen , embrioni;

    electroforeza embrionilor;

    bombardamentul cu particule purttoare de ADN exogen (metoda biolistic);

    agitarea esuturilor n amestec cu fibre de carbid silicon i ADN exogen.

    1.1. Transferul genelor la plante prin intermediul vectorilor biologici

    Sistemul Agrobacterium

    Genul Agrobacterium (fig. 1) include bacterii care triesc n sol i infecteaz, la

    nivelul leziunilor, plantele dicotiledonate. Specia Agrobacterium tumefaciens (fig. 2)induce

    tumori la nivelul coletului, iar specia Agrobacterium rhizogenes induce dezvoltarea unor

    rdcini firoase. Aceste manifestri patologice sunt, de fapt, urmrile unor autentice procesede inginerie genetic natural: bacteria transfer n genomul celulelor vegetale informaia

    genetic adecvat sintezei substanelor ce-i sunt necesare (Schimmel H. i colab., 2002).

    Fig. 1. Imagine electrono-microscopic a bacteriilor din genulAgrobacterium.

    5

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    6/22

    Fig. 2. Imagine electrono-microscopic a bacteriilorAgrobacterium tumefaciens.

    Informaia genetic transferat de bacterii este coninut, dup caz, de o plasmid Ti

    (Tumor-inducing, la Agrobacterium tumefaciens) sau de o plasmid Ri (Root-inducing, la

    Agrobacterium rhizogenes). Regiunea specific de ADN transferat (ADN-T), care se

    integreaz n genomul celulei vegetale, conine gene ce codific enzime implicate n

    biosinteza fitohormonilor.

    Expresia acestor gene determin formarea tumorilor sau a rdcinilor firoase,

    adevrate nie ecologice ale bacteriilor. De asemenea, ADN-T conine i gene care codific

    enzime implicate n producerea i secreia opinelor (derivai ai aminoacizilor), opine pe care

    bacteriile le utilizeaz ca surse de carbon i azot. Agrobacterium rhizogenes mai posed n

    ADN-T genele rol, a cror funcionare este mai puin cunoscut (Tepfer D., 1990). Nici una

    dintre aceste gene nu este implicat n transferul i integrarea ADN-T n genomul celulei

    vegetale (fig. 3). n excizia i transferul ADN-T sunt implicate extremitile lui, n lungime

    de cte 25 de perechi de baze i regiunea vir (regiunea de virulent) (Hamilton C. M., 1996).

    Genele din regiunea vir sunt activate de un mesager chimic acetosiringona - emis de o

    plant ranit. Unul dintre produii acestor gene este o endonucleaz, care va decupla osingur caten din ADN-T, opernd dou tieturi, la nivelul celor dou extremiti. Acest

    segment de ADN-T monocatenar va fi transferat n celula vegetal (Bulman M. P., Neill S. J.,

    1996).

    6

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    7/22

    Fig. 3. Reprezentarea schematic a procesului de infecie cuAgrobacterium.

    Odat elucidat acest mecanism de excizie i transfer al ADN-T, a devenit limpede

    faptul c orice gene care vor fi amplasate ntre cele dou extremiti vor fi transferate i

    integrate n nucleul celulei vegetale. Pe de alt parte, s-a constatat c regiunea vir rmne

    funcional i atunci cnd este plasat pe un replicon diferit de cel care conine ADN-T. Cu

    alte cuvinte, ADN-T i regiunea vir se complementeaz n poziie trans pentru a determina

    apariia fenotipului de oncogenitate. Dar plasmidele Ti, de mari dimensiuni (140 - 235 kb),

    sunt greu de manipulat, iar din celule tumorale nu pot fi regenerate plante normale. Pentru

    valorificarea acestui sistem natural de transfer de gene, au fost deci necesare cteva

    modificri. Mai precis, s-a procedat la:

    dezarmarea plasmidelor Ti, prin eliminarea ADN-T;

    construirea unor vectori binari, din plasmide de mici dimensiuni provenite de la

    bacteriaEscherichia coli;

    transferul vectorilor binari n tulpini deAgrobacterium cu plasmide Ti dezarmate, dar

    capabile s exercite funcia de virulena n poziie trans.

    Cei mai cunoscui vectori de transformare sunt plasmide de mici dimensiuni, existente

    ntr-un numr mare de copii/celul, ce conin gene marker pentru bacterie (gene care

    7

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    8/22

    determin rezistena la ampicilin), plasmide care sunt folosite ca vectori de clonare la

    Escherichia coli (pBR 322 i pUC).

    Genele de interes codific proteine a cror sintez confer plantelor transformate

    caractere importante din punct de vedere economic (tolerana la erbicide, rezistena la

    salinitate, rezistena la dunatori i/sau ageni patogeni etc.).

    Genele marker selectabile codific proteine care detoxific substane chimice incluse

    n mediul de cultur, permind selecia celulelor n ai cror nuclei au fost integrate. Cele mai

    folosite codific enzime ce confer celulelor rezistena la antibiotice i erbicide.

    Genele raportor (gene marker identificabile) codific proteine care determin

    formarea unui produs vizibil, ce permite identificarea celulelor transformate.

    Promotorii constitutivi cei mai utilizai la plante sunt: 35S (de la virusul mozaicului

    conopidei), pentru dicotiledonate, cel al genei actinei (de la orez) i cel al genei ubiquitinei

    (de la porumb) pentru monocotiledonate.

    n construciile genetice folosite pentru transformare cu ajutorul sistemului

    Agrobacterium se introduc i cele dou extremiti, n lungime de 25 de perechi de baze,

    provenite de la ADN-T din plasmida Ti (fig. 4), amplasate astfel nct s delimiteze

    segmentul de ADN care trebuie s ajung n genomul celulei vegetale ce trebuie transformat

    (Raicu P. i colab., 1999).

    Pentru ca Agrobacterium s constituie un sistem eficient de transfer al genelor la

    plante, trebuie:

    s existe compatibilitate ntre tulpina bacterian i genotipul la care se intenioneaz

    transferul genelor (exist tulpini cu spectru de gazde specific);

    s se aplice o presiune de selecie n favoarea celulelor transformate;

    s fie regenerate plante din celulele transformate (celulele s fie competente att

    pentru transformare ct si pentru regenerare).

    8

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    9/22

    Fig. 4. Reprezentarea schematic a unei plasmide Ti de laA. tumefaciens.

    Rata transformrii, evaluat, n final, prin numrul de plante transgenice obinute, este

    influenat de muli factori, cum ar fi:

    genotip;

    tip de explant (embrioni imaturi, hipocotile, cotiledoane, discuri foliare etc.);

    tulpin deAgrobacterium;

    tip de vector;

    condiii de cultur.

    Pentru fiecare specie vegetal, trebuie elaborat un sistem de transformare care s

    permit obinerea unui numr mare de plante. Indiferent de specie, etapele unui protocol de

    transformare sunt:

    incubarea esutului vegetal n suspensia bacterian (timp de cteva minute, pn la

    cteva ore);

    cocultura esutului vegetal cu bacteria (timp de 48 de ore, pn la 7-8 zile);

    selecia celulelor transformate pe medii de cultur care conin dou antibiotice (unul

    pentru eliminarea bacteriei i altul pentru eliminarea celulelor netransformate);

    regenerarea plantelor, fie direct, din celulele explantului, fie indirect, via calus.

    Comparativ cuA. tumefaciens, A. rhizogenesprezint dou avantaje:

    spectrul su de gazde este foarte mare;

    9

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    10/22

    fiecare rdcin deriv dintr-o celul iniial transformat i, fiind uor de recunoscut,

    face inutil utilizarea markerilor de selectie.

    Virusurile vectori pentru transferul genelor la planteVirusurile fitopatogene au ca material genetic ARN (ribovirusurile) sau ADN

    (adenovirusurile) i se transmit prin intermediul insectelor sau prin contactul cu zonele rnite

    ale plantelor. Majoritatea (75 %) sunt ribovirusuri. ARN viral poate funciona ca ARNm (la

    virusurile ARN+) sau poate servi ca matri pentru ARNm (la virusurile ARN-).

    Adenovirusurile pot avea ADN monocatenar (geminivirusurile) sau dublu catenar

    (caulimovirusurile, dintre care, cel mai cunoscut este virusul mozaicului conopidei).

    Genomurile virale codific patru sau mai multe proteine, care funcioneaza n diferite etape

    ale ciclului de infecie. Toate codific ns proteinele implicate n replicarea acidului nucleic

    viral. ARN viral este replicat cu ajutorul unor ARN polimeraze dependente de ARN numite

    replicaze. Geminivirusurile se replic via ADN complementar. Caulimovirusurile se replic

    via intermediari ARN, care sunt transcrii n ADN de ctre revers transcriptazele codificate

    de virusuri.

    Majoritatea celorlalte gene virale intervine n adaptarea repliconului viral la planta

    gazd. Proteina nveliului viral, numit capsid, protejeaz acidul nucleic viral n timpul

    deplasrii virusului de la o plant la alta. La unele virusuri, ea poate determina i

    specificitatea vectorului. Alte virusuri codific ns una sau mai multe proteine care

    faciliteaz transmiterea prin intermediul vectorilor.

    Multe virusuri codific i proteine care le faciliteaza deplasarea de la o celul la alta,

    interacionnd specific cu plasmodesmele. Exist, de asemenea, i produi ai genelor virale

    ale cror funcii nu sunt cunoscute. Sinteza proteinelor virale de ctre ribozomii celulelor

    infectate se poate face pe dou ci. Calea cea mai frecvent folosit presupune translarea

    informaiei genetice virale sub forma unei unei singure poliproteine, care este ulterior clivat

    cu ajutorul proteazelor, codificate i ele de gene virale (Badea E. M. si colab, 2001).

    Utilizarea virusurilor ca vectori nu a depit stadiul de studiu de fezabilitate,

    deoarece acest sistem prezint, pe lng avantaje, i unele limite.

    Avantaje:

    infecia sistemic determin formarea unui numr mare de copii ale transgenei n

    fiecare celul (cele ce echivaleaz cu sinteza unei cantiti mari de produs genetic);

    nu se mai pune problema regenerrii plantelor din celulele transformate.

    10

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    11/22

    Limitele acestui sistem de transformare a plantelor sunt legate de specificitatea de

    gazd; neintegrarea stabil a genei transferate n genomul plantei nu asigur transmiterea

    la descendeni; riscul inducerii simptomelor bolii virale; imposibilitatea tranferrii unor

    fragmente de ADN de mari dimensiuni; n cazul ribovirusurilor, imposibilitatea utilizrii

    directe ca vectori (n asemenea situaii, ARN viral trebuie transformat, n prealabil, n

    ADN complementar).

    1.2.Transferul direct al genelor la plante

    Pentru ca ADN plasmidial care conine gena de interes s traverseze peretele celular

    i membrana plasmatic i s se integreze funcional n genom, pot fi utilizate mai multe

    metode:

    transformarea protoplatilor;

    bombardamentul cu particule pe care se precipit ADN plasmidial;

    microinjecia;

    electroporarea celulelor i tesuturilor.

    Cele mai utilizate sunt primele dou.

    1.2.1. Transformarea protoplatilorProtoplatii sunt celule vegetale ai cror perei celulari au fost nlturai prin digestie

    enzimatic. Absena peretelui celular face posibil folosirea protoplatilor n experimente de

    inginerie genetic pentru hibridare somatic i transfer de gene, cu condiia existenei unor

    tehnici eficiente de cultur i regenerare.

    Pentru facilitarea ptrunderii ADN transformant prin membrana plasmatic se

    utilizeaz polietilen glicol (PEG) sau se aplic electroporarea. n primul caz, protoplatii

    proaspt izolai sunt incubai cu ADN plasmidial n prezena PEG i a ionilor de Ca2+ sau

    Mg2+, la un pH optim (6,0-6,5). n al doilea caz, suspensiei care conine protoplati i ADN

    plasmidial i se aplic ocuri electrice, care induc formarea unor pori reversibili n membrana

    plasmatic (Cornea C.P., 2002).

    n cazul tratamentului cu PEG, frecvena transformarii depinde de: concentraia ADN;

    raportul ADN / protoplati; concentraia PEG (25 %) i greutatea molecular a PEG.

    n cazul aplicrii electroporrii, eficiena transformrii depinde de: durata i numrul

    impulsurilor electrice; tensiunea folosit (200-600 V/cm2); mediul utilizat; concentraia ADN

    11

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    12/22

    plasmidial (1-10 mg/ml); dimensiunile i configuraia plasmidei (superrsucit sau

    linearizat); densitatea protoplatilor n mediu (0,5 106/ml).

    Ca i celelalte metode de modificare genetic, transformarea protoplatilor prezint

    att avantaje ct i limite.

    Avantaje:

    permite manipularea unui numr mare de celule;

    asigur obinerea unui numr mare de plante transformate;

    nu necesit echipamente speciale.

    Limite:

    existena unui protocol reproductibil protoplast plant-condiie nc nendeplinit

    la multe plante importante din punct de vedere economic; integrarea frecvent a ADN plasmidial n genom sub form trunchiat i ntr-un mare

    numr de copii.

    1.2.2. Metoda biolistic

    Principiul acestei metode l reprezint accelerarea unor microparticule pe care este

    precipitat ADN plasmidial purttor al genei de interes, pentru a traversa neletal pereii

    celulelor i membranelor plasmatice. Datorit acestui mod de operare, metoda are mai multe

    denumiri: accelerarea particulelor; bombardamentul cu microproiectile; gene-gun (Cornea

    C.P., 2002).

    Pentru accelerarea particulelor, se recurge la:

    explozia unui cartu;

    propulsia prin intermediul unui gaz (aer, heliu) sub presiune;

    energia eliberat de explozia unei picturi de ap plasat ntre cei doi poli ai unui

    condensator.

    Eficiena transformrii depinde de mai multi factori:

    natura chimic i proprietile fizice ale particulelor de metal utilizate ca purttori ai

    ADN plasmidial;

    concentraia i modul de ataare a ADN plasmidial la particulele purttoare;

    condiiile de cretere a plantelor donor de explante ce vor fi bombardate; natura explantelor ce vor fi bombardate;

    12

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    13/22

    condiiile de cultur a explantelor pre-i postbombardament;

    profunzimea la care ptrund particulele n explantele bombardate.

    1.2.3. Regenerarea plantelor din celule transformateObinerea plantelor transgenice este condiionat de capacitatea esutului transformat

    de a parcurge etapa de regenerare. Pentru ca o metod de transformare genetic sa fie aplicat

    cu succes ntr-un program de ameliorare, este necesar o regenerare eficient i

    reproductibil.

    1.3. Etapele parcurse pentu obinerea unui soi transgenic

    Pentru ca agricultura s beneficieze de posibilitile oferite de tehnologia transferuluide informaie genetic, genele de interes trebuie ncorporate n varieti comerciale. Apoi,

    trebuie demonstrat c ele funcioneaz eficient i c tot acest proces nu a afectat celelalte

    caracteristici ale varietilor n cauz. Cu alte cuvinte, o linie transgenic trebuie s-i

    demonstreze valoarea parcurgnd o serie de teste, care ncep n laborator i se continu n

    cmp, pe suprafee tot mai mari, n condiii de producie. Ultimul test va fi dat, desigur, n

    cultura comercial, dup nscrierea n catalogul naional al soiurilor i lansarea pe piaa.

    Orice experiment de transformare genetic se ncheie cu analiza molecular i

    biochimic a populaiei de plante obinute, care urmrete stabilirea:

    prezenei transgenei n genom;

    numrului de copii ale transgenei;

    nivelului de expresie a transgenei;

    prezenei proteinei codificate de transgen;

    activitii proteinei codificate de transgen.

    Pentru stabilirea prezenei transgenei n genom se recurge la utilizarea reaciei PCR,cu primeri oligonucleici specifici genei int. ADN amplificat este evideniat prin

    electroforez n gel de agaroz.

    Pentru confirmarea faptului c transgena este funcional, se pune n eviden proteina

    prin hibridare de tip Western, utilizndu-se un anticorp corespunztor, iar activitatea proteinei

    codificate de transgen este cuantificat prin teste biochimice i biologice, teste care pot fi

    folosite ulterior i pentru identificarea sau detectarea unor culturi de plante transgenice n

    cmp (Badea E. M. i colab., 2001).

    13

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    14/22

    PLANTELE MODIFICATE GENETIC N RAPORT CU

    AGRICULTURA I MEDIUL

    3.1. Stadiul actual al suprafeelor cultivate cu plante modificate genetic

    n 1996, a fost realizat primul test experimental, n condiii de deplin izolare, al unei

    plante transgenice. De atunci, au mai fost transferate i testate plante din peste 60 de specii

    diferite (tabelul 6).

    Tabel 6. Plante modificate genetic aflate n testele de cmp n UE, SUA i Canada, pn nanul 1999 (dup Badea E. M. i colab.,2001)

    CerealePlante

    tehnice ifurajere

    Plantemedicinale

    Legume

    Arbori,arbuti

    fructiferi ivia de vie

    ArboriPlante

    ornamentale

    OrzPorumb

    OvzOrezGru

    LucernBumbac

    InSfeclfuraj.CartofRapi

    Sfecl dezahar

    Trestie dezahar

    Fl.soareluiCartofdulceTutunSoia

    BelladonnaMustarNegru

    CalendulMustar alb

    BrocolliVarz

    MorcovConopidCicoare

    CastraveiVineteLinteSalatPepeneCeap

    MazreArdei

    DovleacTomatePepeneverde

    Zucchini

    MrViinCafeaAfinKiwi

    MslinPortocalPapayaArahide

    PrAnanas

    PrunZmeurCapunNuc

    Via de vie

    MesteacnEucalipt

    PinPlop

    Molid

    VioleteafricaneGaroafe

    CrizantemeGladiolePetunia

    Plantele transgenice fac obiectul a 98,3% dintre testele experimentale ale unor

    organisme modificate genetic. n fruntea listei se afl Zea mays (38%),Brassica sp. (13%),

    Solanum tuberosum (12%),Lycopersicon aesculentum (10%), Glicine max (9%), Gossypium

    hirsutum (7%),Nicotiana tabacum (5%),Beta vulgaris (2%) i altele.

    Primele teste de cmp n condiii de izolare au avut ca obiect plante care sintetizau

    proteine marker, n special proteinele codificate de genele GUS i NPT II, ca i de genele

    care confer rezisten la erbicide (Badea E.M. i colab., 1999). Rezultatele acestor teste

    14

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    15/22

    preliminare au stabilit msura n care procedeul de transformare genetic a modificat

    creterea, dezvoltarea i biologia reproducerii plantelor la care a fost aplicat. Cu excepia

    tomatelor, la care a fost modificat un caracter - procesul de coacere - n beneficiul

    consumatorilor, la toate celelalte specii transformrile au urmrit conferirea de noi caractere

    agronomice n beneficiul produciei agricole i industriei de prelucrare a acesteia.

    n majoritatea cazurilor, sunt supuse testelor de cmp soiuri transgenice caracterizate

    printr-o nou rezisten la erbicide, insecte, virusuri, plante transgenice androsterile, utile n

    procesul de producere a seminei hibride i linii transgenice de tomate cu procesul de coacere

    modificat (Dale P. J., 1993).

    Avizele referitoare la comercializarea plantelor transgenice i a produselor derivate

    din acestea se bazeaz pe evaluarea impactului lor asupra mediului, ca i asupra sanatii

    omului i animalelor (James C., 2000).

    ncepnd din 1996, ISAAA (International Service for the Acquisition or Agri-biotech

    Application) public anual un raport referitor la suprafeele alocate plantelor modificate

    genetic pe glob. Conform raportului din anul 2007 aceste suprafee nsumeaz 114,3 milioane

    ha.

    n intervalul 1996-2007, suprafaa total pe care au fost cultivate plante modificate

    genetic a crescut de 67 de ori, de la 1,7 milioane ha (n 1996) la 114,3 milioane ha (n 2007).

    Aceast cretere reflect faptul ca tot mai muli fermieri, att din rile puternic industrializate

    ct i din rile n curs de dezvoltare, accept aceast tehnologie. n acelai interval de timp a

    sporit i numrul rilor n care se cultiv OMG, de la 6 (n 1996) la 23 (n 2007).

    La nceputul anului 2008 ISAAA a emis un raport conform cruia suprafaa global

    cultivat cu plante modificate genetic nu s-a modificat fa de anul precedent, rmnnd n

    cuantum de 114,3 milioane ha.

    Analitii anticipeaz o extindere a suprafeei cultivate cu plante modificate genetic, la

    sfritul anului 2020, la aproximativ 350 milioane ha (Dunwel J. L., 1999).Potrivit ISAAA, n anul 2007 SUA deinea cea mai mare suprafa cultivat cu plante

    transgenice (57,7 mil ha), ceea ce reprezint aproximativ 50% din suprafaa global. Urmeaz

    Argentina (19,1 mil ha), Brazilia (15,0 mil ha), Canada (7,0 mil ha), India (6,2 mil ha), China

    (3,8 mil ha), Paraguay (2,6 mil ha), Africa de Sud (1,8 mil ha) i celelalte ri care cultiv

    suprafee

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    16/22

    n perioada 1996-2000, cea mai mare parte din suprafaa global pe care au fost

    cultivate plante modificate genetic a fost ocupat de soia rezistent la erbicide. Concret, n

    anul 2007:

    soia transgenic a fost cultivat pe 58,6 milioane ha (64% din suprafaa globalcultivat cu plante modificate genetic), suprafa neschimbat fa de anul precedent.

    rile cele mai mari cultivatoare de soia modificat genetic au fost: Brazilia (15 mil

    ha) i Paraguay (2,6 mil ha);

    porumbul transgenic a fost cultivat pe o suprafa de 35,2 milioane ha (cu 10

    milioane ha mai mult dect n anul 2006) preponderent n America de Sud, Africa de

    Sud i Filipine;

    bumbacul transgenic a ocupat o suprafa de 15 milioane de ha (fa de 13,4 milioane

    ha, n 2006). India a cultivat n 2007 o suprafa de 2,4 milioane ha, iar China 0,3

    milioane ha de bumbac;

    suprafaa cultivat cu rapi modificat genetic a crescut de la 4,8 milioane ha n

    2006, la 5,5 milioane ha. Zonele de cultur se gsesc predominant n Canada i SUA.

    Contribuia plantelor modificate genetic la o agricultur durabil

    Industrializarea agriculturii - utilizarea unor varieti mai performante, asociat cu

    inputuri ca ngrmintele, pesticidele, irigaiile, tehnologia nalt - a determinat sporirea

    constant a produciilor agricole i salvarea de la nfometare a milioane de oameni, cu efecte

    negative asupra mediului ns i fr a rezolva definitiv problema hrnirii unei populaii n

    continu cretere. Mai precis, au fost poluate apele freatice i de la suprafa, a fost sever

    redus biodiversitatea, a fost erodat stratul fertil de la suprafaa solului, a fost redus

    fertilitatea solului, peste 800 milioane de oameni sufer n prezent de malnutriie cronic.

    Astfel, cum statisticile demografice prognozeaz, pentru urmtorii 40 de ani, sporirea

    populaiei umane a planetei spre 8 - 10 miliarde, este imperativ creterea produciei de

    hran, o cretere posibil fie prin extinderea suprafeelor agricole, fie prin sporirea

    produciilor pe terenurile deja aflate n circuitul agricol. Evident, prima soluie ar avea

    consecine dramatice asupra mediului. Prin urmare trebuie s se recurg la a doua soluie,

    bazat pe ameliorarea semnificativ a plantelor cultivate prin asocierea metodelor

    convenionale cu biotehnologiile moderne. Practic, se impune realizarea unei a doua

    revoluii verzi, care s determine creterea productivitii agriculturii n condiiile

    16

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    17/22

    conservrii agroecosistemelor. Cu alte cuvinte, se impune practicarea unei agriculturi

    durabile, o agricultur care, conform definiiei FAO, presupune schimbri tehnologice i

    instituionale orientate spre satisfacerea continu a nevoilor ntregii populaii umane a Terrei,

    att ale generaiilor prezente, ct i ale celor viitoare, ceea ce presupune conservarea

    pmntului, a apei, a resurselor genetice animale i vegetale, prezervarea mediului, adecvare

    tehnologic, viabilitate economic i acceptabilitate social. Altfel spus, practicarea

    agriculturii durabile nseamn trecerea de la agricultura proces industrial la agricultura

    proces ecologic (Ellstrand N. C. i colab., 1999).

    17

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    18/22

    REGLEMENTAREA LEGISLATIV A UTILIZRII

    ORGANISMELOR MODIFICATE GENETIC

    n ceea ce privete legislaia cu privire la organismele modificate genetic, se cunoate

    faptul c la data de 5 iunie 1992, la Rio de Janeiro, a fost semnat Convenia asupra

    Diversitaii Biologice (CDB). Printre semnatari se numra i Romnia.

    De asemenea, n 1995, la Djakarta, a fost constituit un grup de lucru nsrcinat cu

    pregtirea Protocolului Naiunilor Unite referitor la Securitatea Biologic, protocol care urma

    s integreze aspectele de mediu, pia i dezvoltare asociate folosirii Organismelor

    Modificate Genetic (OMG).

    Protocolul privind Securitatea Biologic, cunoscut i sub numele de Protocolul de la

    Cartagena, a fost definitivat n ianuarie 2000 la Montreal i a fost deschis spre semnare la 24

    mai 2000, n cadrul celei de-a 5-a reuniuni a Conferinei Prilor de la CDB, desfurat la

    Nairobi (Kenya). Acest document, care are la baz pricipiul precauiei, stabilete norme i

    proceduri de transfer, manipulare i utilizare a organismelor vii modificate genetic care

    ar putea avea o inciden nefast asupra biodiversitii.

    Conform Protocolului, nainte de a-i expedia produsele, exportatorii de organisme vii

    modificate genetic trebuie s obin acordul prealabil al rilor de destinaie.

    n data de 12 iunie 2007, la ntlnirea Consiliului de Agricultur, minitri europeni au

    stabilit c alimentele ecologice vor putea conine OMG, fr a fi etichetate ca atare. Minitri

    au czut de acord asupra unui nou cadru legislativ care va permite ca hrana ecologic s fie

    contaminat cu OMG pn la un nivel de 0,9% - n mod accidental sau tehnic inevitabil,

    fr a avertiza consumatorii. Votul Romniei a fost pentru permiterea contaminrii culturilor

    ecologice cu OMG. Dintre statele membre UE doar Belgia, Italia, Ungaria i Grecia au fost

    mpotriv.

    4.1. Legislaia n Uniunea European

    O serie de ri au adoptat legislaia preexistent pentru reglementarea obinerii,

    testrii, utilizrii i comercializrii OMG-urilor prin tehnicile biotehnologiei moderne,

    precum i a produselor derivate din acestea. n Europa, a fost conceput ns o legislaie

    specific, menit s anticipeze i s controleze riscurile pentru sntatea oamenilor i pentru

    mediu generate de aceste activiti i s creeze o pia comun a biotehnologiilor moderne.

    18

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    19/22

    Legislaia european permite statelor membre interzicerea OMG pe teritoriul lor, prin

    activarea cauzei de salvgardare reglementat prin Directiva 18/2001. Statele se pot preleva de

    principiul precauiei pentru a proteja astfel mediul i consumatorii.

    Legislaia european referitoare la OMG i la alimentele derivate din acestea

    cuprinde:

    Directiva 90/219 EEC, amendat, Utilizarea micoorganismelor modificate genetic,

    n condiii de izolare;

    Directiva 90/220 EEC, amendat, Introducerea deliberat a OMG n mediu ( pentru

    cercetare , dezvoltare i n scop comercial ) ;

    Reglementarea nr. 258/97, Noi alimente i ingrediente alimentare ;

    Reglementarea nr. 1139/98, Etichetarea alimentelor produse din soia RoundupReady i porumb Bt .

    4.2.Legislaia din Romnia privind OMG

    n prezent legislaia din Romnia nu permite utilizarea de OMG n agricultura

    ecologic.

    Aceasta prevede etichetarea produselor modificate genetic nc din iunie 2006 (Legea

    106/2002), prevederile legate de OMG fiind nlocuite de Hotrrea de Guvern 173/2006. Cutoate acestea ns, nici un produs de pe piaa romneasc nu este etichetat ca i OMG.

    OUG nr. 44/2007 (MO nr. 438/28.06.2007) privind utilizarea n condiii de izolare a

    microorganismelor modificate genetic;

    OUG nr. 43/2007 (MO nr. 435/28.06.2007) privind introducerea deliberat n mediu

    i introducerea pe pia a organismelor modificate genetic;

    Legea nr. 3/2008 (MO nr. 21/11.01.2008) pentru aprobarea Ordonanei de Urgen a

    Guvernului nr. 44/2007 privin utilizarea n condiii de izolare a microorganismelor

    modificate genetic;

    Legea nr. 266/2002 privind producerea, prelucrarea, controlul i certificarea calitii,

    comercializarea seminelor i materialului sditor, precum i inregistrarea soiurilor

    de plante-MO nr. 343/23.05.2002;

    HG nr. 106/2002 privind etichetarea alimentelor, Anexa nr. 3 Norme metodologice

    privind informaiile suplimentare care se indic obligatoriu prin etichetare n cazul

    alimentelor obinute din organisme modificate genetic sau care conin aditivi i

    19

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    20/22

    arome modificate genetic ori obinute din organisme modificate genetic-MO nr.

    407/12.06.2002;

    HG nr.497/2007 (MO nr. 398/13.06.2007) privind stabilirea unor msuri pentru

    aplicarea Regulamentului Parlamentului European i al Consiliului (CE) nr.1.946/2003 din 15 iulie 2003 privind micarea transfrontier a organismelor

    modificate genetic;

    OM nr. 923/2005 (MO nr. 937/20.10.2005) pentru aplicarea Formularului de

    prezentare a rezumatului notificrii privind introducerea pe pia a organismelor

    modificate genetic, ca atare sau n produse;

    OM nr. 1295/2005 (MO nr. 42/17.01.2006) pentru aprobarea Formularului de

    prezentare a rezumatului notificrii privind introducerea deliberat n mediu a

    organismelor modificate genetic, n alte scopuri dect introducerea pe pia;

    OM nr. 606/2005 (MO nr. 704/04.08/2005) privind aprobarea Formularului pentru

    prezentarea rezultatelor introducerii deliberate n mediu a plantelor superioare

    modificate genetic, n alte scopuri dect introducerea pe pia;

    OM nr. 55/2007 (MO nr. 81/01.02.2007) pentru nfiinarea Registrului naional al

    informaiei cu privire la modificarile genetice din organismele modificate genetic i

    transmiterea nformaiei ctre Comisia Europeana;

    OM nr. 1.829/2007 (MO nr. 856/13.12.2007) al Ministerului Mediului i Dezvoltarii

    Durabile pentru aprobarea ndrumarului privind evaluarea riscului asupra mediului i

    sntii umane ,datorate introducerii deliberate n mediu i pe pia a organismelor

    modificate genetic.

    20

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    21/22

    BIBLIOGRAFIE

    1. Abelson P. H., A third technological revolution, Science, 279, 2019, 1998.

    2. Ahmed F. E. i colab., Detection of genetically modified organisms in food, Trends

    in biotechnology 5, 215-230, 2002.

    3. Badea M. i Sndulescu D., Biotehnologii vegetale, Fundaia Biotech, Bucureti,

    276-283, 2001.

    4. Carpenter J., Felsot A., Goode T., Haming M., Onstad D. i Sankula S., Comparative

    Environmental Impacts of Biotechnology Derived and Traditional Soybean, Corn

    and Cotton Crops , Council for Agricultural Science and Technology, Ames, Iowa-

    USA, 2002.

    5. Carpenter J. E., Case studies in benefits and risks of agricultural biotechnology:

    Roundup Ready soybeans and Bt field corn, 2001.

    6. Chonard T., Yaniv M., Le controle de lexpression des genes, La Recherche, vol.

    25, 620-635, 1994.

    7. Cochran G. W., Sampling Techniques , Third Edition, J. Wiley and Sons Inc., New

    York-USA, 1977.

    8. Community Bureau of Reference (BCR), Guideline for the Production andCertification of BCR Reference Materials, 1997.

    21

  • 7/28/2019 Plante Modificate Genetic

    22/22

    22