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Dra. Gabriela Maria Santiso Unidad Micologia Hospital Muñiz
Centro de Referencia CABA Laboratorio H.I.G.A Evita Lanus
MICOSIS OPORTUNISTAS
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Clasificación
Superficiales Localmente
invasoras
Sistémicas endémicas
Oportunistas
MICOSIS
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ETIOLOGIA
Hongos miceliales
Hongos levaduriformes
Pneumocystis jirovecii
Hongos dimorfos
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Hongos levaduriformes
Candida sp Cryptococcus sp
Malassezia sp
Trichosporon sp
Geotrichum sp
Rhodotorula sp
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Hongos miceliales
Hialinos tabicados
Aspergilosis Hialohifomicosis
Pigmentados tabicados
Cenociticos
Mucormicosis
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Hongos dimorfos
Histoplasma capsulatum
Paracoccidioides brasiliensis
Coccidioides sp Penicillium marneffei
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Factores predisponentes
Alteraciones de inmunidad innata o adquirida
Endocrinopatías
Enfermedades de base: linfomas, leucemias, tumores órganos sólidos, colagenopatías
Tratamientos con corticosteroides, antibióticos de amplio espectro, inmunosupresores, radioterapia
Alteraciones anatómicas o fisiológicas
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Alteración Factor
predisponente
Afección micótica
Barrera cutáneo Mucosa
Quemados Candidiasis
mucormicosis
Uso de catéteres endovenosos
Sonda vesical.
Candidiasis
Enf metabólicas Diabetes
Acidosis metabólica
Candidiasis
mucormicosis
Enf. Oncohematológicas
Leucemia
Linfomas
Transplantes MO
Candidiasis
mucormicosis
Aspergilosis
Hialo feohifomicosis
Alteración de inmunidad celular
SIDA
Candidiasis
Neumocistosis
Criptococosis
Micosis sistémicas endémicas
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Factores Predisponentes
Uso de inmunosupresores
Trasplante de órgano sólido Candidiasis, Aspergilosis,
Criptococosis Hialo feohifo
Alt de la biota normal Uso de antibióticos de amplio
espectro Candidiasis
Alteración del número o función de los neutrófilos
Uso de inmunosupresores o corticoides
Candidiasis, aspergilosis
Neumocistosis
Neutropenia
Enf. Granulomatosa crónica
Candidiasis
Aspergilosis
Fusariosis
Cigomicosis Trichosporonosis
Alteración Factor predisponente Afección micótica
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Infecciones asociadas al cuidado de la salud
Uso irracional de antibióticos
Falta de cumplimiento de las normas de prevención de infecciones hospitalarias
Grado de complejidad del hospital
Hongos levaduriformes
Aparición de especies emergentes
Contagio por vía horizontal
Hongos miceliales
Enfermedades asociadas a las malas condiciones del tratamiento del aire y el agua
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Diagnóstico
• Presencia de elementos fúngicos compatibles en el examen directo
• Obtención de cultivos puros
• Hallazgos reiterados
• Positividad de reacciones serológicas
• Comprobación de la invasión tisular
• Adecuada respuesta al tratamiento instituido
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Diagnóstico
• Obtener materiales de sitios habitualmente estériles
• Histopatología para comprobar invasión
• Utilización de métodos de sensibilización de los exámenes directos: blanco de calcoflúor
• Utilización de técnicas moleculares o combinación de métodos
• Detección de b 1-3 glucano
• Detección de antígenos o metabolitos fúngicos
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Factores que afectan al diagnóstico
• No siempre es posible arribar al diagnóstico de certeza
• Algunas de estas micosis son muy difíciles de comprobar
• En ocasiones hay criterios: posible, probable, probada.
• La formación de anticuerpos suele no ser adecuada por el tipo y grado de inmunosupresión del paciente o en formas muy agudas.
• Un cultivo positivo no las confirma
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Criptococosis
Micología USAL
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Criptococosis
La criptococosis en una micosis sistémica que comparte características con el grupo de las micosis endémicas
pero que se presenta con mucha mayor frecuencia en huéspedes
inmunocomprometidos.
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Definición
Micosis sistémica de distribución universal
Ocasionada por un grupo heterogéneo de levaduras capsuladas pertenecientes al género Cryptococcus
Las infecciones graves se producen en huéspedes con alteraciones importantes de la inmunidad mediada por células (sida, linfomas, receptores de trasplantes, sarcoidosis, lupus)
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Género Cryptococcus
Clasificación taxonómica del género Cryptococcus.
División Basidio mycota
Teleomorfo Anamorfo Serotipo
Filobasidiella neoformans
C. neoformans v. grubii
A
A-D Filobasidiella
neoformans C. neoformans v.
neoformans D
Filobasidiella bacillispora
C. gattii B y C
Filobasidiella uniguttulatum
C. uniguttulatus
C. laurentii
C. albidus
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Complejo Cryptococcus neoformans/Cryptococcus gattii
C.neoformans y C.gattii
• Grupos de riesgo, son diferentes
• Las afecciones por C. gattii, son independientes del grado de inmunosupresión, sólo se detecta en ciertas áreas endémicas.
• Se los puede separar por pruebas bioquímicas.
• Forma perfecta 2 especies diferentes
Filobasidiella neoformans
Filobasidiella bacillispora
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Diferencias entre variedades*
Característica Cn var.grubii Cn.var.neoformans C. gattii
Serotipo A D B,C
Distribución
geográfica Universal
Europa
septentrional
Tropical y
subtropical
Forma
perfecta (Mt)
F.neoformans var
neoformans (a)
F.neoformans var neoformans
(a y a)
F. neoformans v. bacillispora
(a y a)
Crecimiento
en GCB/GCF No crece No crece Crece
CDBT No crece Crece (naranja) Crece
(az.ver)
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Fases teleomorfa y anamorfa
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Epidemiología
C.neoformans var. grubii y var. neoformans
• Distribución universal
• En deyecciones de palomas y otras aves
• Aisladas de árboles, frutas
• Serotipo A > 90% en SIDA
• Incidencia aumentó 40-50 veces (en VIH+)
C. gattii
• Endémico en reg. subtropicales de África, Australia, sur de California, parte de Sudamérica
• Relacionado con especies de Eucaliptus y otros árboles.
• Afecta mas frecuentemente a personas VIH negativas
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Factores de virulencia
• Más estudiados:
• Cápsula
• Síntesis de melanina
• Crecimiento a 37ºC
• Ureasa
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Patogenia
• Penetración: vía inhalatoria
• Diseminación: vía linfohemática
• Gran afinidad por SNC
• Factores de virulencia: cápsula (inmunosupresora: impide fagocitosis MQ). Producción de melanina
• Mecanismos inmunes: TNF-a, interleuquinas proinflamatorias, INF-g, NK
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Glucuronoxilomanano
Principal componente de la patogénesis
del C neoformans
• de la linfoproliferación
• de la fagocitosis
• de la migración leucocitaria (inh. del
desplazamiento y trasvasación del neutrófilo al
sitio de infección)
• de la producción de citoquinas pro-inflamatorias
(TNFα)
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levaduras desecadas, basidiosporas de F. neoformans
Macrófagos alveolares
PATOGENIA
Deficit inmune (receptores
de trasplantes, sida...) →
diseminación a meninges y
otros órganos.
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Criptococosis
Hongo ambiental (suelo, excretas de palomas y materia orgánica) Factores de virulencia: cápsula de mucopolisacáridos que inhibe la fagocitosis
Infección pulmonar inicial (habitualmente no diagnosticada) Meningitis como principal manifestación clínica
Frecuente compromiso cutáneo en trasplante
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Criptococosis
En nuestro medio es producida por la levadura capsulada Cryptococcus neoformans var grubii (90 % de los
casos). Raras veces es debida a C.neoformans var. neoformans
Aparece en el 8 a 10 % de los pacientes HIV + que requieren internación y presentan < 150
CD4/µL .La criptococosis aumentó su incidencia 50 veces desde la
aparición de la pandemia.
Su incidencia se mantiene elevada en los bolsones de pobreza, bajó en
los países desarrollados y es muy alta en Africa (33 % de los casos de
SIDA).
Cryptococcus gattii: se asocia al SIDA con baja frecuencia, endémico
en la Argentina.
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Síndrome neurológico: cefaleas, vómitos, convulsiones, alteraciones de la conciencia, rigidez de nuca, fotofobia, etc.
Síndrome infeccioso: fiebre, adelgazamiento, astenia, hepatosplenomegalia, adenomegalias, lesiones cutáneas moluscoides.
Síndrome respiratorio: tos, expectoración, disnea, derrame pleural, infiltrados pulmonares, cavidades,
![Page 29: MICOSIS OPORTUNISTAS - Microred · PDF fileCoccidioides sp Penicillium marneffei . Factores predisponentes Alteraciones de inmunidad innata o adquirida Endocrinopatías Enfermedades](https://reader030.fdocuments.in/reader030/viewer/2022012315/5a7b8dd07f8b9a4d628c1e58/html5/thumbnails/29.jpg)
Diagnostico
• LCR escasas modificaciones químicas y citológicas, con frecuencia < 20 células/µL (100 % linfocitos
• Examen del sedimento del LCR con tinta china, positivo para levaduras capsuladas en > 80 %.
• Cultivos de LCR positivos para C. neoformans en el 90 %.
• Búsqueda de antígeno en sangre, LCR y orina, positivos en > 90 %.
• Hemocultivos positivos en el 80 %.
• BAL (no se estudia de rutina).
• Mielocultivos positivos con frecuencia (investigación no rutinaria).
• Urocultivo, positivo en 40 % (después de masaje prostático).
• Citodiagnóstico con Giemsa de las lesiones cutáneas.
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Examen con tinta china de LCR
![Page 31: MICOSIS OPORTUNISTAS - Microred · PDF fileCoccidioides sp Penicillium marneffei . Factores predisponentes Alteraciones de inmunidad innata o adquirida Endocrinopatías Enfermedades](https://reader030.fdocuments.in/reader030/viewer/2022012315/5a7b8dd07f8b9a4d628c1e58/html5/thumbnails/31.jpg)
Citodiagnóstico de Tzanck
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Presentaciones clínicas de la criptococosis
Pulmonar Asintomática o subclínica (30% de los pacientes). Fiebre, tos, expectoración.
Meningitis o meningo-encefalitis
Comienzo insidioso, fiebre, cefalea sorda bilateral y difusa, estado de confusión y mareo. Aumento de la presión intracraneal (indicador de gravedad).
Cutánea Lesiones múltiples pequeñas maculopapulares, a veces úlceras
Osteomielitis En el 5-10% de los pacientes con criptococosis diseminada. Lesión osteolítica única en columna vertebral.
Ocular En ≤ 40% de los pacientes con criptococosis meníngea. Endoftalmitis con evolución a la ceguera
Otras presentaciones Prostatitis asintomática e infecciones en glándulas suprarrenales, endocardio, hígado y bazo
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Criptococosis meníngea en pacientes HIV+ y HIV-
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HIV +
• Síndrome meníngeo incompleto
• Fiebre
• Cefalea
• Evolución más aguda (< 2 semanas)
• Peligro de muerte en las primeras 3 semanas (hipertensión endocraneana)
• Rto. CD4+: <100/mL
• TAC: atrofia cerebral y dilatación ventricular
• Compromiso ocular (CMV)
HIV -
• Síndrome meníngeo completo
• Fiebre
• Cefalea
• Evolución crónica
• Signos de foco (Convulsiones)
• TAC y RNM pueden mostrar lesiones seudotumorales (C.gattii)
• Compromiso del nervio óptico con posible pérdida de la visión
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Diagnóstico por microscopía
• Levaduras capsuladas (con tinta china) en el sedimento del LCR u otros líquidos corporales.
• Las cápsulas pueden ser muy pequeñas.
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Diagnóstico por microscopía
• Otras tinciones son muy útiles para observar criptococos en muestras histológicas:
– Mucicarmin de Mayer
– Azul Alcián
– Metenamina de plata de Gomori-Grocott
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Muestras
• LCR: Claro, hiperproteinorraquia, hipoglucorraquia, pleocistosis linfocitaria.
• Hemocultivos
• Escarificación cutánea
• Médula ósea
• Biopsias
• Orina
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Hallazgos en el LCR
HIV-
• proteínas, glucosa,
cloruros.
• Pleocitosis linfocitaria: 50-200 cél/mL
• Produce red de fibrina (velo de novia)
HIV+
• Escasas alteraciones fisicoquímicas y citológicas
• Alta presión de apertura (>200 mmH2O)
• Pleocitosis: <20 cél/mL
• Puede haber gran cantidad de levaduras (cuidado con contadores celulares)
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Examen micológico
HIV+
• Tinta china: positiva
• Lesiones multifocales: hemocultivo, urocultivo, LCR, esputo, etc. positivos
• Antígeno polisacárido capsular: altos títulos en suero y LCR
• Agente causal: C.neoformans var grubii 98% casos
HIV-
• LCR: T. china: +/- Cultivo: +;
• Hemocultivo, urocultivo: negativos.
• Antígeno polisacárido capsular: títulos bajos
• Agente causal: C.neoformans y C. gattii
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Coloración de Giemsa
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Mucicarmin Alcian blue
Metenamina de plata de Grocott
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Cultivos
• Levadura capsulada
• Producción de ureasa
• Desarrollo a 37°C
• Producción de fenol-oxidasa
C. neoformans
C. gattii
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Diferenciación entre C. neoformans y C. gattii
• Utilización de D-prolina
• Desarrollo en medio GCB
• Desarrollo en medio GCF
C. gattii
• Serotipificación
– B-C: C.gattii
– A-D: C.neoformans
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Diferenciación de variedades
C.neoformans var. grubii
• Serotipo A
• Medio CDBT: no crece
• No asimila timina
• Genotipificación
C.neoformans var. neoformans
• Serotipos D y AD
• Medio CDBT: crece (vira al anaranjado)
• Asimila timina
• Genotipificación
Serotipo A-D comparte características de ambos
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Detección de antígenos
Detección de antígeno capsular (glucuronoxilomanano): Prueba de
aglutinación con partículas de látex
sensibilizadas con anticuerpos anti-polisacáridos
> 90 % sensibilidad y especificidad
Se puede detectar en suero, orina y LCR
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NEUMOCISTOSIS
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Neumocistosis
• Enfermedad respiratoria cosmopolita que afecta a pacientes con inmunodepresión grave. Es la infección respiratoria más frecuente en el mundo en este tipo de enfermos
• Agente causal: Pneumocystis jirovecii
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Neumocistosis
• Pneumocystis jirovecii • Contagio Interhumano
• No cultivable hasta la fecha
• Afecta únicamente al ser humano y es especie específico.
Es una infección-enfermedad del hombre
NO se propaga entre las diferentes especies del reino animal
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• Parásito de mamíferos
• Se transmite por vía inhalatoria
Numerosas especies específicas de huésped
•Hábitat: el alvéolo pulmonar
. Taxonomía: Archiascomycetes, Pneumocystidales
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Ubicación taxonómica en el Reino Fungi
• Secuencia de ARN ribosomal
• Pared contiene b 1-3glucanos
• Genes que codifican b tubulina y enzimas esenciales como las de hongos
• ADN mitocondrial similar al ADN fúngico
• Determinantes antigénicos de pared idénticos a los de levaduras
• Membrana sin ergosterol.
• Archiascomycete
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La infección por Pneumocystis jirovecii es una causa frecuente de neumopatía en los pacientes HIV-positivos con recuentos de células CD4 inferiores a 200/uL. Antes del TARV en el 60% de los pacientes en estas condiciones era la 1º enfermedad marcadora. Su incidencia bajó
La infección se produce por vía inhalatoria a partir de otra persona infectada, puede haber transmisión intra-hospitalaria. Solo hay infección interhumana, las especies del genero Pneumocystis son específicas de cada especie animal. Infección es frecuente y asintomática en personas sanas
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Determina una neumopatía subaguda intersticial, con aumento del espesor de los tabiques inter-alveolares, con ocupación de la luz alveolar por proteínas espumosas e infiltrados inflamatorios inter-alveolares con células mononucleares, en especial plasmocitos
Síntomas más frecuentes: fiebre, disnea progresiva y tos no productiva, dolor torácico. La evolución es aguda o subaguda, esta última más común
Tasa de mortalidad del 10%.
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• Huésped inmunocomprometido enfermo
• Huésped inmunocompetente infectado asintomático (“portador”)
• Quistes? del medio ambiente
Huésped susceptible
Fuente de infección
Se menciona la transplacentaria ? neumocistosis congénita
Infección exógena
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CICLO BIOLÓGICO DEL P jirovecii
EL CICLO SE REALIZA EN EL HOSPEDERO HUMANO O ANIMAL
form
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Patogenia • Las formas tróficas se adhieren a las células alveolares
tipo 1.
• Los residuos manosa de las glicoproteinas (120 kdal) presentes de la superficie del P. jirovecii se unen al receptor de manosa presente sobre los macrófagos alveolares.
• Se produce infiltración mononuclear, edema, engrosamiento, fibrosis del septo alveolar y disminución en la sustancia surfactante. (sustancia que previene el colapso alveolar y mantiene la permeabilidad del pulmón)
• Se altera el intercambio de gaseoso.
• Raramente puede ocurrir diseminación hemática a bazo, hígado, médula ósea, corazón, ojos y oídos.
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Singosintomatología Formas respiratorias
• Síndrome toxi-infeccioso: – Fiebre (74%) – Sudores nocturnos – Astenia – Anorexia – Pérdida de peso
• Síndrome respiratorio – Disnea (Asistencia respiratoria) (65%) – Tos (74%) – Taquipnea – Presión torácica inspiratoria – Aumento de nivel de LDH (hipoxemia <70 pO2)
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Lesiones extrapulmonares
• Pacientes con nebulizaciones pentamidina
• Orgános: Hígado, Bazo, Pleura, Médula ósea, Ojos
• Ataque multiorgánico: agudo y fatal. Hay fiebre y deterioro del estado general, disminución de agudeza visual, hepatosplenomegalia y derrame pleural
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Diagnóstico • Examen microscópico de LBA o esputo inducido por nebulizaciones
con solución salina hipertónica: blanco calcofluor; Gram Weigher; Giemsa; metenamina de plata de Grocott; Azul de Toluidina o inmunofluorescencia con anticuerpos monoclonales. Sensibilidad > al 90%.
• En los niños lavados faringeos para buscar ADN por PCR específica.
• Raras veces biopsia trans-bronquial y estudio histopatológico con H&E y Grocott.
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Candidiasis sistémica invasora
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Definición
• Candidiasis invasora: enfermedad sistémica o localizada, grave, causada por diferentes especies de Candida en personas con grados variable de inmunodeficiencias
• Puede afectar
– Tejidos u órganos: válvulas cardíacas (endocarditis), menínges, riñón, hígado,
– Varios órganos simultáneamente: hígado, riñón, bazo Candidiasis diseminada
– Sistema circulatorio: Candidemia
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Candidemia y candidiasis
Candidemia
Invasión de órganos
Candidemia asociada a
catéter
Candidiasis aguda
diseminada
Candidiasis crónica
diseminada
Candidiasis profunda
multiorgánica
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Candidiasis endógenas
• El origen de la mayoría de las candidiasis es a partir de la colonización de las mucosa.
• Entre el 40-60% de la población sana esta colonizada con levaduras en las mucosa oral, vaginal y/o intestinal. C. albicans ~ 80 %.
• C. parapsilosis , C guilliermondii, C. glabrata y C. tropicalis colonizan la piel/uñas humana.
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Candidiasis exógenas
• La infección se puede adquirir por transmisión vertical u horizontal
–Candidiasis oral neonatal de madres con candidiasis vaginal en el momento del parto.
–Brotes de candidiasis nosocomial en UTI por las manos del personal sanitario u objetos contaminados (fomites).
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Patogenia
• Protección → mecanismos inespecíficos y específicos humorales y celulares.
• Neutrófilos (PMNs): fagocitan y lisan levaduras, controlan las levaduras en la sangre y evitan la diseminación.
• Células T: Control de piel y mucosas.
• Anticuerpos → su papel en la protección de la diseminación es discutido.
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Factores de virulencia del género Candida
• Capacidad de adhesión a diferentes epitelios
• Liberación de enzimas líticas: hexosaminidasa
- Proteinasas- fosfolipasas
• Transformación de formas levaduriformes a miceliales o pseudomiceliales
• Traslocación intestinal (en adultos) y cutánea en neonatos
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Agresión
Lesión
Translocación
Infección
Antibacterianos
Selección
Microbiota
Catéter
Candida
Candidiasis invasora
Enfermedad
Aparato digestivo
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Factores Predisponentes
• Los casos graves o candidiasis invasoras están aumentando como enfermedades nosocomiales con una alta mortalidad por afectar a personas con enfermedades subyacentes graves
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Candidiasis invasoras
• Candidemia • Meningitis • Neumonía
• Endocarditis • Artritis, osteomielitis,
costocondritis, miositis • Peritonitis • Esofagitis
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Candidiasis Diseminada Crónica
• Cuadro clínico post- Neutropenia.
• Acontece después de una diseminación hematógena por Candida.
• El paciente recupera neutrófilos y:
– Persiste febril
– Con hepato y/o esplenomegalia
– Alteraciones del hepatograma
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Diagnóstico
Directo Indirecto
Exámen
Microscópico
directo Cultivo
Histopa-
tología
Búsqueda de
Antígenos
Detección de
Ac. Nucleicos
(PCR)
Serología Intradermorreacion
Muestras Muestras
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Diagnóstico
• En las formas diseminadas:
–Hemocultivos
–Obtención de aislamientos en cultivo a partir de muestras estériles (hemocultivos, LCR, biopsias…)
–Visualización de Candida en biopsias – Detección de antígenos
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Observación microscópica • En fresco
• Tinción rápida (Gram) → facilita la visión de Candida
• Tinciones como PAS o metenamina-plata en las preparaciones histológicas
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Cultivo
• Agar glucosado de Sabouraud con cloranfenicol
• Medios cromógenos:
– CHROMagar Candida
Candida albicans como colonias lisas verdes, Candida tropicalis lisas azules y Candida krusei colonias rosas y rugosas
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Identificación • Métodos morfológicos:
– Test de filamentación o de producción del tubo germinativo (C. albicans)
– Producción de clamidosporas (C. albicans)
– Morfología microscópica
• Métodos fisiológicos: – API 20C AUX
– API ID 32 C
– Vitek 2 (YBC)
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Detección de antígenos
• Manano, D-Arabinitol, D-Manosa, b 1-3 D-Glucano :
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FIN