Medios de cultivo
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Uno de los sistemas más importantes
para la identificación de
microorganismos es observar su
crecimiento en sustancias
alimenticias artificiales preparadas en
el laboratorio. El material alimenticio
en el que crecen los microorganismos
es el Medio de Cultivo y el crecimiento
de los microorganismos es el Cultivo.
Objetivos concretos de la práctica
1. Preparar medios de cultivo como
soporte y fuente de nutrientes para el
desarrollo de los microorganismos in vitro.
2. Manejar los instrumentos de uso
rutinario, a la vez que imprescindibles, en el
laboratorio de microbiología.
3. Hacer un primer acercamiento a la
manipulación de microorganismos. Adquirir
la idea de la importancia del trabajo en
condiciones de esterilidad y las técnicas
más comunes para realizarlo.
MATERIALES:
-Mechero de Bunsen y Fisher
-Tripie
-Tela de asbesto
-Algodón
-Gasa
-Papel estraza
-Cinta testigo
-Cajas Petri
-Olla exprés
-Asa de siembra
-2 Matraz Erlenmeyer de 250 ml
-Agitador de vidrio
-Vidrio de reloj
SON FENOMENOS FISICOS Y
QUIMICOS QUE ENCUADRADOS EN UN
MARCO BIOLOGICO.
1)NUTRIENTES:Los nutrientes para las
bacterias son proporcionados de
acuerdo a sus exigencias.
Aquellos microorganismos que utilizan
metabolitos orgánicos son
denominados ORGANOTROFICOS y los
que utilizan metabolismos inorgánicos
son denominados LITOTROFICOS.
NITROGENO ,AZUFRE Y FOSFORO
ESTOS ELEMENTOS VAN HACER
NECESARIOS PARA LA SINTESIS DE ADN
Temperatura
para obtener un desarrollo
optimo es necesario tomar
encuenta e tipo de germenque
se esta manipulando como las
bacterias mesófilos crecen de
forma óptima a temperaturas
entre 15 y 43ºC. Otros como los
psicrófilos crecen a 0ºC y los
temófilos a 80ºC o incluso a
temperaturas superiores
(hipertemófilos). En líneas
generales, los patógenos
humanos crecen en rangos de
temperatura mucho más cortos,
alrededor de 37ºC, y los
saprofítos tienen rangos más
amplios.
AEROBIAS Estas son bacterias que se
desarrollan en presencia de oxigeno
libre .
ANAEROBIAS bacterias que se
desarrollan en ausencia de oxigeno libre
ANAEROBIAS FACULTATIVAS estas son
bacterias que se desarrollan tanto en
presencia como en ausencia de
oxigeno libre
pH
La concentración de iones hidrógeno
es muy importante para el crecimiento
de los microorganismos. La mayoría
de ellos se desarrollan mejor en
medios con un pH neutro, aunque los
hay que requieren medios más o
menos ácidos. No se debe olvidar que
la presencia de ácidos o bases en
cantidades que no impiden el
crecimiento bacteriano pueden sin
embargo inhibirlo o incluso alterar sus
procesos metabólicos normales.
LUZ AMBIENTAL
La mayoría de los microorganismos
crecen mucho mejor en la oscuridad
que en presencia de luz solar. Hay
excepciones evidentes como sería el
caso de los microorganismos
fotosintéticos.
OBSCURIDAD
otros microorganismos precisan de
obscuridad para desarrollar su
pigmentaciones colonias estas
llamadas COTOCROMAGENOS
M. líqM. LÍQUIDOS M. SÓLIDOS
M. SEMISÓLIDOS
El más
utilizado es
el caldo
nutritivo
(compuesto
de carne,
peptona y
agua)
Llevan un
agente
solidificante
que es el Agar
(polímero
acídico),
gelidifica por
debajo de 45°
C.
Preparados a
partir de los
medios
líquidos,
agregando un
agente
solidificante
en menor
proporción.
NATURALES ARTIFICIALES
Existen como
tales en la
naturaleza :
agua, suelo,
papa , huevos
leche, sangre,
etc.
Compuestos
por sustancias
manipuladas
por el hombre
en el laboratorio
EMPÍRICOS SINTÉTICOS SEMISITÉTICOS
Aparecen
sustancias
orgánicas
Aparecen
sustancias
químicas
definidas
Aparecen
moléculas
de
naturaleza
hidrolizada
s
Enriquecidos nutrientes simples
presentan enriquecedores. Diferenciales o de aislamiento contienen
colorantes, azúcares e inhibidores. Transporte y mantenimiento utilizados en la
recogida, transporte y recolección de las muestras biológicas.
Filtros de membrana Permiten un examen
de grandes volúmenes con una baja concentración de microorganismos.
Medio basal: posee un solo elemento básico
Medio enriquecido: posee una o más sustancias
nutritivas permite desarrollar los gérmenes.
Medio selectivo: posee sustancias inhibidoras que
permite el desarrollo de un solo tipo de gérmenes.
Medio diferencial: posee sustancias inhibidoras
que diferencia los gérmenes.
Medio de enriquecimiento: medios complejos con
adictivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados microorganismos.
A)A
GU
A D
E P
EP
TON
AS
AG
AR
Derivado de proteínas de la acción de la pepsina del jugo gástrico y pancreático sobre las proteínas
Es un polisacárido se
obtiene de algas que
contienen un coloide ,
se emplea en Japón
como medios de cultivos
mezclados con sangre,
sueros y peptonas,etc.
MEDIOS LIQUIDOS
*CALDO LACTOSADO: caldo nutritivo
*CALDO DE SANGRE: caldo nutritivo de
sangre desfibrinada de conejo ,caballo.
*CALDO DE BILIS: caldo nutritivo de buey.
*CALDO GLUCOSADO: caldo nutritivo de
glucosa.
AGAR LACTOSADO:la lactosa es el único carbohidrato presente. permite diferenciar los fermentadores de lactosa de los no fermentadores gracias a la presencia del indicador azul de bromotimol que mira a color amarillo a ph ácido.
AGAR SANGRE: agar base de columbia + 5% sangre desfibrinada
medio rico y diferencial.
la sangre más comúnmente utilizada es la de oveja, al 5%, estéril y desfibrinada.
una vez preparado el medio de cultivo, se enfría hasta 45ºc y se le añade la sangre.
AGAR CHOCOLATE: es sometido hasta una temperutura de 80°c
AGAR BILIS BUEY:
AGAR ASCITIS
MEDIOS DE LOWENSTEIN
MEDIOS DE SABOURAUND
AGAR DE CHAPMN
MEDIOS DE LEVINE
AGAR MAC CONKEY
CAJA PETRI
ASAS BACTERIOLOGICAS
MATAZ
TUBO DE ENSAYO
MECHERO DE BUNSEN
