Manual de Bioquimica

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PRACTICAS DE BIOQUIMICA M.C ALICIA ROMERO ALEGRE M.C LEONEL CAMPOS LOPEZ 1 ELABORÓ: M.C ALICIA ROMERO ALEGRE M.C. LEONEL CAMPOS LOPEZ FEBRERO 2013

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Manual de bioquímica aplicada a nivel bachillerato.

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PRACTICAS DE BIOQUIMICA M.C ALICIA ROMERO ALEGRE

M.C LEONEL CAMPOS LOPEZ

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ELABORÓ: M.C ALICIA ROMERO ALEGRE M.C. LEONEL CAMPOS LOPEZ

FEBRERO 2013

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INTRODUCCION El plan general del manual contempla la referencia a los fundamentos teóricos de la química y metabolismo de las sustancias en estudio. Dado que el estudiante deberá presentar un informe para cada práctica, se describe el análisis de manera lo más completa posible, con el ánimo de que el estudiante tenga un margen amplio de independencia, y facilitar el desarrollo de competencias en el mismo. Se da un enfoque acerca de la finalidad del análisis, con lo que se pretende reforzar la enseñanza de la materia. COMPETENCIAS A LAS QUE CONTRIBUYE Niveles de Desempeño El conjunto de prácticas del presente manual te permitirá llegar a un desempeño de nivel 4 de acuerdo la clasificación de CONOCER, a saber “Nivel 4 Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que mostrar creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe tener habilidad para motivar y dirigir grupos de trabajo”. Las razones por las que asumimos que obtendrás un nivel de desempeño tan alto son: 1. La realización de las prácticas en forma y tiempo presupone el dominio de diferentes habilidades y conocimientos. 2. La elaboración de un informe por práctica requiere de disciplina y laboriosidad, así como la utilización de herramientas computacionales. 3. Las prácticas deberán ser realizadas en equipo, lo que requiere de la participación armónica de los elementos. La capacidad de liderazgo deberá ser usada en forma óptima para realizar los diversos pasos de la práctica

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INDICE DE PRÁCTICAS

1. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS…………. Pág. 5

2. RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS………………………….. Pág. 9

3. VITAMINA C EN JUGOS DE FRUTAS…………………..…. Pág. 13

4. IDENTIFICACION DE PROTEINAS……………………..… Pág. 15

5. EXTRACCIÓN DE ADN VEGETAL………………………... Pág. 20

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PRECAUCIONES GENERALES EN EL LABORATORIO 1. Es obligatorio el uso de bata en el laboratorio de prácticas. 2. Es importante leer detenidamente la práctica que se va a realizar con el fin de conocer la toxicidad de los reactivos así como los posibles riesgos en el manejo del material de laboratorio: mecheros, aparatos, etc. 3. Limpiar el material antes y después de usarlo para evitar contaminaciones de reactivos y riesgos de quemaduras con material sucio. 4. No pipetear NUNCA con la boca. 5. Los reactivos orgánicos NUNCA deben ser calentados a la llama ya que son muy inflamables. 6. En algunos casos será necesario el uso de material protector: gafas, guantes, etc. 7. Alejar de la mesa de laboratorio aquel material que no se vaya a utilizar, como pueden ser carpetas, ropa, etc. 8. Está prohibido comer, beber o fumar en el laboratorio. 9. Si se producen quemaduras en la ropa el laboratorio dispone de una ducha. 10. Si hubiera algún fuego en el laboratorio se dispone de un extintor.

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PRACTICA 1

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS INTRODUCCION: Los carbohidratos son compuestos orgánicos formados por carbono, hidrógeno y oxígeno. Estos forman parte e intervienen en una gran cantidad de procesos de los seres vivientes. Los más importantes son de tres tipos: energéticos, de reserva y estructurales. Desde el punto de vista energético uno de los carbohidratos más sencillos, la glucosa constituye el material de más rápido aprovechamiento en el organismo y su oxidación satisface las necesidades energéticas y calóricas del mismo. Como materiales de reserva, los carbohidratos existen en reino vegetal en forma de almidones y en el reino animal en forma de glucógenos; tanto uno como el otro son susceptibles de convertirse en glucosa para poder ser utilizados. Y en el aspecto estructural, los carbohidratos llevan a cabo una importante función en los vegetales debido a que la célula, que es su estructura leñosa o esqueleto, está constituida por cadenas de azúcares simples. En los animales también sucede lo anterior, así tenemos que el exoesqueleto de muchos artrópodos está constituido también por cadenas de carbohidratos simples. OBJETIVOS:

1. Identificación de glúcidos. 2. Hidrólisis del enlace de un disacárido

MATERIALES:

ℋ Muestras de glúcidos: (5 gr. en 100 ml.) (glucosa, maltosa, lactosa sacarosa, almidón).

ℋ Reactivo de Fehling A y Fehling B

ℋ Lugol (solución yodada)

ℋ HCl al 10 %

ℋ 15 Tubos de ensayo

ℋ Pinzas para tubo de ensayo

ℋ gradilla

ℋ vaso de precipitados

ℋ mechero

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PROCEDIMIENTO

1.- AZUCARES REDUCTORES

Reacción de Fehling:

Fundamento: Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y de la mayoría de los disacáridos (excepto la sacarosa). Si el glúcidos que se investiga es reductor, se oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre (II), de color azul, a óxido de cobre (I), de color rojo-anaranjado, es decir de ion cúprico a cuproso

1. Tomar 2 ml. De las muestra que se requieren (glucosa, maltosa, lactosa, sacarosa, almidón).

2. Añadir 1 ml de Fehling A y 1 ml. de Fehling B. El líquido del tubo de ensayo adquirirá un fuerte color azul.

3. Calentar el tubo suavemente con un mechero. 4. La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo. 5. La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-

verdoso.

Después de calentar observar los resultados. Figura 3. Estos resultados nos indican que los azúcares: glucosa, maltosa y lactosa

tienen carácter reductor.

Figura 3

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2.- AZUCARES NO REDUCTORES

Fundamento:

La sacarosa en presencia del ácido clorhídrico (HCl) y en caliente, se hidroliza descomponiéndose en los dos monosacáridos que la forman (glucosa y fructosa).

Desarrollo:

Tomar una muestra de sacarosa y añade unas 10 gotas de ácido clorhídrico al 10%.

Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos.

Dejar enfriar y realizar la Prueba de Fehling.

Observa el resultado de la sacarosa (Figura 5). La reacción positiva nos dice que hemos conseguido romper el enlace O-glucosídico de la sacarosa.

Figura 5

3.- POLISACARIDOS (ALMIDON)

Fundamento

El polisacárido almidón se colorea de azul-violeta en presencia de yodo, debido no a una reacción química, sino a la fijación del yodo en la superficie de la molécula del almidón, fijación que sólo tiene lugar en frío.

Procedimiento

Colocar en una gradilla muestras de distintos glúcidos 2 ml. (glucosa, maltosa, lactosa sacarosa, almidón).

Añadir 5 gotas de Lugol en cada uno de los tubos de ensayo. Observar los resultados. Figura 7. Con este método puede identificarse el almidón

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Figura 7

ACTIVIDAD:

Completar el siguiente cuadro de acuerdo a los resultados obtenidos en cada una de las pruebas realizadas escribiendo si la reacción es positiva o negativa:

Glúcido Fehling Fehling + HCl Lugol

GLUCOSA

MALTOSA

LACTOSA

SACAROSA

ALMIDON

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

1. ¿Cuáles son las principales funciones biológicas de los glúcidos? 2. Cita un polímero de interés biológico para las células animales que esté

constituido por glucosa e indica la función que desempeña. 3. Explica la importancia biológica de los siguientes glúcidos: glucosa, ribosa y

celulosa. 4. Definir e indicar la función biológica de la sacarosa. 5. Tipos de enlaces para constituir polisacáridos. 6. Cita alguna prueba para reconocer los glúcidos

FECHA_______________________ FIRMA DEL PROFESOR________________________

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PRACTICA 2

RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS

INTRODUCCION Además del agua, los carbohidratos y las proteínas, los seres vivos están constituidos por otras moléculas que, aunque en menor cantidad, desempeñan funciones muy importantes. Los lípidos son biomoléculas insolubles en agua que se encuentran en los seres vivos y desempeñan funciones diversas como: ser componentes estructurales de membranas, almacenan energía, separan, por sus condiciones de insolubilidad en agua regiones donde tiene lugar reacciones diferentes. Funcionan también como cubierta protectora en el caso de algunos animales mamíferos.

OBJETIVO

Poner de manifiesto algunas propiedades de los lípidos, las cuales pueden servirnos para su identificación.

MATERIAL

ℋ Baño María.

ℋ Mechero.

ℋ Gradillas con 5 tubos de ensayo

ℋ 2 Vasos de precipitado

ℋ Aceite vegetal

ℋ Solución de Sudán III en frasco cuentagotas

ℋ Tinta roja en frasco cuentagotas

ℋ Solución de Hidróxido sódico al 20%.

ℋ Éter

1.- REACCION DE SAPONIFICACION

Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que la forman: glicerina y los ácidos grasos. Estos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en definitiva las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos.

La reacción es la siguiente:

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PROCEDIMIENTO

1. Colocar en un tubo de ensayo 2ml.de aceite vegetal y 2ml. de una solución de hidróxido sódico al 20%.

2. Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos. 3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior

clara, que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada; la superior amarilla de aceite no utilizado, y la intermedia, de aspecto grumoso, que es el jabón formado

.

Nota: Cuando ya se ha visto como se forma el jabón, se puede ir echando en un vaso de precipitado el contenido de los tubos de ensayo, se remueve bien y se deja calentar hasta que se haga un buen trozo de jabón.

2.- TINCION DE LIPIDOS Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado Sudan III. PROCEDIMIENTO

1. Colocar en una gradilla dos tubos de ensayo, agregando en ambos 2ml. de aceite.

2. Añadir a uno, 4 o 5 gotas de solución alcohólica de Sudán III. Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja. Agitar ambos tubos y dejar reposar.

3. Se observará en el tubo al que se le añadió Sudán, que todo el aceite aparece teñido. En cambio en el frasco al que se añadió tinta roja, la tinta se habrá ido al fondo y el aceita aparecerá sin teñir.

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3.- SOLUBILIDAD DE LIPÍDOS Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotitas formando una "emulsión" de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sitúa sobre la de agua. Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol, cloroformo, etc. PROCEDIMIENTO:

1. Tomar dos tubos de ensayo y poner en cada uno de ellos 2-3 ml. de agua y en el otro 2-3ml.de éter u otro disolvente orgánico.

2. Añadir a cada tubo 1 ml. de aceite y agitar fuertemente. Observar la formación de gotitas o micelas y dejar en reposo. Se verá como el aceite se ha disuelto en el éter y en cambio no lo hace en el agua, y el aceite subirá debido a su menor densidad.

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ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

1. ¿Qué es el tejido adiposo? ¿Cuál es su función y su importancia en los mamíferos?

2. Que alimentos tienen alto contenido de lípidos? 3. Características generales de los lípidos 4. Funciones más importantes de los lípidos. 5. Son correctas las denominaciones de colesterol "bueno" y colesterol "malo".

¿Qué significan realmente? FECHA_______________________ FIRMA DEL PROFESOR________________________

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PRACTICA 3

VITAMINA C EN JUGOS DE FRUTAS

INTRODUCCION Las vitaminas pertenecen a uno de los grupos constituyentes de los alimentos que provocan más controversias, debido en gran medida al desconocimiento de su función. Las vitaminas empezaron a adquirir importancia cuando se observó que la carencia de estas sustancias en la dieta provocaba cuadros clínicos dramáticos. Bajo esta designación se agrupan trece compuestos que tienen estructuras químicas orgánicas muy disímbolas; tienen funciones catalíticas en concentraciones muy bajas ya que, comparadas con las proteínas, los hidratos de carbono y los lípidos en conjunto, solo representan de 0.015 a 0.02% de la dieta del individuo. No producen energía ni son parte de la estructura, pero actúan en el control y la catálisis de diversas reacciones propias del anabolismo y del catabolismo. OBJETIVO Evaluar cualitativamente el contenido de vitamina C en diferentes frutas y hortalizas. MATERIAL Y REACTIVOS

Materiales

ℋ 1 Baño maría

ℋ 1 Mechero bunsen

ℋ 1 Tela de asbesto

ℋ 1 tripié

ℋ 3 Vasos de precipitado 500 ml

ℋ 4 vasos de precipitado de 100 ml

ℋ 1 mortero

ℋ 1 pistilo

ℋ 1 probeta de 250 ml

ℋ 1 pipeta de 1 ml

ℋ 1 pipeta de 5 ml

ℋ 1 frasco gotero

Reactivos

ℋ 2.5 g almidón soluble

ℋ 1 gotero de solución de yodo recién preparada

ℋ Solución de vitamina C o tableta de vitamina C de 250 mg, recién adquiridas

TRAER POR EQUIPO DE TRABABJO

ℋ 1 naranja

ℋ 1 Toronja

ℋ 1 Pimiento verde

ℋ 10 Uvas moradas

ℋ 10 fresas

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PROCEDIMIENTO 1. Vierte aproximadamente 0.5 g de almidón en un vaso de precipitado con 50 ml de

agua. 2. Coloca la mezcla a fuego lento y remueve su contenido hasta que el almidón se

disuelva por completo. Vierte la solución en un frasco y espera a que se enfríe. 3. En otro vaso de precipitado mezcla 5 ml de solución de almidón con 240 ml de

agua y 4 gotas de yodo. Al añadir el yodo, la solución de almidón y agua se volverá azul, creando un test estándar que te servirá para detectar la presencia de vitamina C mediante un proceso llamado dosificación o análisis volumétrico.

4. Para comprobar tu solución de muestra, disuelve la solución o la tableta de 250 mg de vitamina C (previamente pulverizada) en 240 ml de agua fría.

5. Vierte 30 ml de la solución de almidón en un vaso de plástico pequeño, añade una gota de la solución de vitamina C disuelta y remueve la mezcla. El color azul de la solución desaparecerá.

6. Coloca un poco de jugo de cada fruta y verdura en vasos de plástico separados. Coloca el pimiento verde en un mortero y tritúralo hasta que hayas extraído el zumo.

7. Repite el paso 5 pero sustituyendo la solución de vitamina C por los jugos de las muestras. Usa un vaso de plástico limpio y solución de almidón para cada muestra de jugo. Cuenta el número de ml del jugo de cada fruta que debes añadir para que desaparezca el color azul de la solución de muestra.

8. Compara las dosis necesarias de cada jugo para eliminar el color azul de la solución test estándar y repórtalo en una tabla comparativa.

9. Establece cualitativamente cual fruto contiene mayor cantidad de vitamina C y compara con lo indicado en la bibliografía.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

1. ¿Qué factores influyen en el mecanismo de degradación de la Vitamina C? 2. ¿Por qué se considera la Vitamina C como la más inestable de todas las vitaminas? 3. ¿Qué relación existe entre la degradación oxidativa de la vitamina C y la presencia de pigmentos obscuros en los alimentos? 4. ¿Cómo se podría evitar la oxidación del ácido ascórbico? 5. ¿Qué importancia biológica tiene la Vitamina C?

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PRACTICA 4

IDENTIFICACION DE PROTEINAS INTRODUCCION: Las proteínas son elementos vitales para los organismos, encontrándose en plantas y animales en una proporción elevada. Hay una gran variedad de proteínas y cada una desempeña una función biológica específica que puede ser de reserva, de sostén, transporte, estructural, etc. Químicamente las proteínas están constituidas por combinaciones complejas de carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y otros elementos en menor proporción como son azufre, cobre, fósforo y fierro. Cuando la estructura de la proteína se desorganiza, se dice que se encuentra desnaturalizada y esto trae como consecuencia la pérdida de la actividad biológica. La desnaturalización puede lograrse por medios físicos como el calor o químicos como una variación de pH, observándose una disminución en la solubilidad y la formación de un coagulo. Este método es utilizado para demostrar la presencia de proteínas. También se pueden identificar proteínas mediante el uso de sustancias que al ponerse en contacto con ellas, producen una coloración específica; tal es el caso de la Reacción de Biuret. En esta técnica, se agrega hidróxido sódico y sulfato cúprico a la proteína; el cobre se combina con ella y toma una coloración púrpura. OBJETIVOS: Determinar la presencia de proteínas en la albúmina de huevo MATERIAL:

ℋ 5 tubos de ensayo

ℋ Gradilla

ℋ Pinzas para tubo de ensayo

ℋ Baño maría

ℋ Mechero

REACTIVOS:

ℋ Hidróxido de sodio 40%.

ℋ Ácido acético

ℋ Hidróxido sódico al 20%. HNO3

ℋ Sulfato cúprico diluida al 1%

ℋ Acetato de plomo al 5%.

1.- COAGULACION DE PROTEINAS

Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70°C o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.

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La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria.

PROCEDIMIENTO Para ver la coagulación de las proteínas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir más volumen puede prepararse para toda la clase una dilución de clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla aún espesa.

1. Colocar en un tubo de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (2 ml). 2. Añadir 5 gotas de ácido acético y calentar el tubo a la llama del mechero.

2.- REACCIONES COLOREADAS A.- REACCION XANTOPROTEICA FUNDAMENTO Es debida a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo, cuando las proteínas son tratadas con ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos bencénicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali vira a un color anaranjado oscuro.

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PROCEDIMIENTO

1. Poner en el tubo de ensayo de 2 ml. de solución problema (clara de huevo). 2. Añadir 1 ml. de HNO3 concentrado. 3. Calentar al baño maría a 100° C 4. Enfriar en agua fría 5. Añadir gota a gota una disolución de hidróxido de sodio al 40%.

B.- REACCION DE BIURET

FUNDAMENTO La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada biuret, de fórmula:

Que en contacto con una solución de sulfato cúprico diluida, da una coloración violeta característica.

PROCEDIMIENTO

1. Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 ml De albúmina de huevo. 2. Añadir 2ml. De solución de hidróxido sódico al 20%. 3. A continuación 4 ó 5 gotas de solución de sulfato cúprico diluida al 1%. 4. Debe aparecer una coloración violeta-rosácea característica.

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C.- REACCION DE LOS AMINOACIDOS AZUFRADOS Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual al reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.

PROCEDIMIENTO

1. Poner en el tubo de ensayo de 2 ml. de albúmina de huevo (clara de huevo). 2. Añadir 2 ml. de solución de hidróxido sódico al 20%. 3. Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%. 4. Calentar el tubo hasta ebullición. 5. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado

sulfuro de plomo, utilizándose el azufre de los aminoácidos, lo que nos sirve para identificar proteínas que tienen en su composición aminoácidos con azufre.

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ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

1. Describir y explicar mediante un esquema la reacción entre el Reactivo de Biuret y los enlaces peptídico.

2. Explique porque cada proteína se comporta de diferente manera en las reacciones de Biuret y Xantoproteica.

3. Explique la desnaturalización de las proteínas, contestando razonadamente a las siguientes cuestiones: concepto; factores que pueden desnaturalizar a las proteínas; tipos de enlaces que se rompen durante el proceso; posibilidades de ser reversible.

4. Explique a qué se refiere la especificidad de las proteínas y por qué puede plantear problemas en los transplantes de órganos.

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PRACTICA 5

EXTRACCIÓN DE ADN VEGETAL

INTRODUCCION: La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula. Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas. y separado de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza alcohol isoamílico, probablemente el único reactivo de esta práctica que no suele haber en una cocina. OBJETIVO: Aprender un método de extracción de material genético (ADN) en células vegetales. MATERIAL:

ℋ Muestra vegetal

ℋ Agua destilada

ℋ Sal de mesa

ℋ Bicarbonato sódico

ℋ Detergente líquido

ℋ Alcohol isoamílico a 0°

ℋ Batidora

ℋ Baño Maria

ℋ Colador

ℋ Vaso precipitados

ℋ Hielo

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PROCEDIMIENTO A.- PREPARACION DE LA SOLUCION TAMPON

Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en el refrigerador o en un baño de hielo triturado:

120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.

1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura. 5 g de bicarbonato sódico. 5 ml de detergente líquido o shampoo

B.- PREPARACION DE LA MUESTRA 1.- Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos. 2.-. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente. 3. -Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante. 4.- Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamílico enfriado a 0º C Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón. 5.- Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado. RESULTADOS. El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN. Esquematiza lo realizado e indica que sucede en cada paso. FECHA_______________________ FIRMA DEL PROFESOR________________________

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FUENTES CONSULTADAS

∞ http://iesgarciamorato.org/Bio%20y%20Geo/Pract_bioquimica.htm

∞ http://www.gpo13.com/biok.gif imagen

∞ http://www.um.es/molecula/gluci09.htm

∞ http://www.unav.es/bioquimica/bqfarmacia/pagina_5.html

∞ http://www.uaa.mx/direcciones/dgdp/escuelas/descargas/manuales/MANUAL_PRACTICAS_BIOLOGIA_I.pdf

∞ www.benavente.edu.mx/colegio/secundaria/practicaslab/segundos/biologia/practicas/2B4IDP-P.doc

∞ http://www.arrakis.es/~rfluengo/bioquimica.html

∞ www.geocities.com/micadesa/educacion/edudna.html

∞ html.rincondelvago.com/extracion-del-adn-genomico-y-electroferesis-en-gel.html - 29k

∞ http://www.um.es/molecula/lipi08.htm

∞ http://www.um.es/molecula/indice.htm

∞ www.uhu.es/08007/documentos%20de%20texto/practicas/guion_de_practicas_05_06%20(1).doc

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∞ http://perceianadigital.com/index.php/el-rincon-de-las-ciencias/262-practica-de-laboratorio-el-agua

∞ http://es.scribd.com/doc/19504761/Practicas-de-Laboratorioquimicaalimentos

∞ http://francisthemulenews.wordpress.com/category/ciencia/biologia/bioquimica/