Manual Biofarmacia

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Manual de Prcticas Laboratorio de

Biofarmacia

DR. GERMAN L MADRIGAL REDONDO

UNIVERSIDAD LATINA DE COSTA RICA

ESCUELA DE FARMACIA

2011

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ndice

Introduccin ............................................................................................................................ 355

Reglas para el trabajo en el Laboratorio ....................................................................... 36

Cronograma .............................................................................................................................. 47

Prctica No 1 ............................................................................................................................. 48

Introduccin a la Biofarmacia ............................................................................................ 48

Prctica No 3 ............................................................................................................................. 62

Determinacin del log D de una Droga ......................................................................... 62

Prctica No 4 ............................................................................................................................. 71

Modelo In Vitro de Absorcin Percutneo ..................................................................... 71

Prctica No 5 ............................................................................................................................. 82

Modelo in vitro de Absorcin Oral ................................................................................... 82

Utilizacin de un Modelo Hidrulico para Representar un Modelo Farmacutico in vitro (Va Oral) ................................................................................................................ 88

Prctica No 6 ............................................................................................................................. 94

Modelo In Vitro de Liberacin Percutneo .................................................................... 94

Modelo in vitro de Liberacin Percutnea ................................................................ 104

Prctica No 7 ........................................................................................................................... 110

Modelo In Vitro de Liberacin Oral ................................................................................ 110

Modelo in vitro de Liberacin Oral .............................................................................. 114

Prctica No 8 ........................................................................................................................... 120

Modelaje de la cintica de Disolucin de una forma Farmacutica Esfrica . 120

Prctica No 9 ........................................................................................................................... 137

Perfiles de Disolucin .......................................................................................................... 137

Bibliografa ............................................................................................................................... 149

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INTRODUCCIN La presente obra es el resultado de la experiencia en la enseanza de la

Biofarmacia, el mismo est basado fundamentalmente en el texto Manual de Laboratorio de Biofarmacia y Farmacocintica de la Universidad de Costa Rica

escrito por el Dr. Gustavo Carazo Berrocal, Dr. Jos Manuel Fallas, Dra. Lorena Berrocal y Dra. Lidiette Fonseca que los autores de este texto han adquirido a travs de los aos, por lo cual le agradezco a ellos el haberme permitido adaptar

esta obra a las necesidades de otras facultades de Farmacia del pas lo que permite un desarrollo de los cursos de Farmacocintica de una forma ms didctica, y

mejorar de esta forma el aprendizaje significativo de los contenidos de esta rea tan importante de la Farmacia.

Esta obra es una gua que ser usada en el laboratorio y permitir al estudiante desarrollar nuevas habilidades y destrezas, relacionar lo aprendido en la

parte terica del curso con los resultados obtenidos experimentalmente y a la vez integrar conocimientos de los cursos requisitos para esta materia.

Cada experimento tiene una discusin que ilustra los objetivos y principios tericos en que se fundamentan y al final de cada uno se presenta un cuestionario

que pretende orientar al estudiante a descubrir su capacidad de investigacin, su inters en la observacin del experimento y a usar la literatura cientfica a su disposicin.

Se espera que este trabajo sirva para que el estudiante en este curso tenga

un mejor aprovechamiento de su tiempo y esfuerzo personal. Por lo que es conveniente que cada prctica sea conocida desde aspectos prcticos como tericos con anticipacin y que sepan corresponder a este esfuerzo aprovechando al mximo

todas las facilidades de que disponen.

Queremos expresar nuestro agradecimiento a los colegas, estudiantes y personal administrativo, que por su colaboracin han contribuido a la culminacin de este manual en especial el Dr. Gustavo Carazo Berrocal, Dr. Jos Manuel Fallas,

Dra. Lorena Berrocal y Dra. Lidiette Fonseca, Dr. Nils Ramrez por su trabajo en la consecucin de este material actualizado adems de la revisin y correccin del ya

existente.

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REGLAS PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO

Al trabajar en un laboratorio es necesario cumplir con ciertas reglas que

permiten desempearse con orden, eficiencia y sobre todo seguridad.

Las siguientes son reglas que deben cumplirse en el curso Laboratorio de Biofarmacia:

1) Al laboratorio debe traerse todo lo necesario para efectuar un trabajo seguro y eficiente.

2) Las mesas, equipo de vidrio y aparatos en general deben permanecer

siempre limpios y en ptimas condiciones.

3) Los reactivos que hay en el laboratorio deben permanecer siempre

acomodados en su respectivo lugar y en condiciones de luz y temperatura adecuadas.

4) Todo recipiente que contenga reactivos debe estar etiquetado. El contenido de recipientes sin etiqueta se debe desechar.

5) Nunca debe devolver sobrantes al recipiente original.

6) De los frascos originales de reactivos se debe tomar estrictamente la cantidad que necesite en un beaker, pero nunca se deben introducir en

estos pipetas, goteros y otros con tal fin.

7) Sobre la mesa de trabajo slo debe permanecer lo estrictamente necesario

para la realizacin de la prctica.

8) Todo material biolgico (sangre, orina, jeringas, etc) debe ser autoclavado antes de desecharlo.

9) Al concluir cada prctica de laboratorio todo el material utilizado debe quedar limpio y acomodado. Los aparatos deben apagarse y desconectarse.

Las pilas deben quedar limpias y los tubos cerrados para evitar derrames de agua.

Normas de Seguridad para el Laboratorio

Todos los laboratorios son escenario frecuente de accidentes, la mayora de los cuales apenas tienen importancia. Algunos, no obstante, revisten especial

gravedad. Lo que denominamos accidentes, no es algo que ocurre casualmente, sino que es ocasionado por procedimientos inadecuados o realizados sin cuidado. Si se observa cuidadosamente, las precauciones que se enumeran en este apartado

evitar contratiempos y el alumno aprender, el hbito de adoptar medidas de seguridad, que le resultarn de un valor inestimable no solo en el laboratorio, sino

tambin en cualquier lugar de trabajo. La regla principal indica que ante cualquier accidente, debe procederse

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racionalmente y con calma, notificando inmediatamente al asistente o la persona a

cargo en ese momento.

1. Manipulacin de material punzo cortante:

Cuando se manipula vidrio, para introducirlo en tapones o mangueras, se debe lubricar con glicerina o agua y proteger las manos con una toalla. Las manos no deben trabajar muy prximas a materiales punzo cortantes para evitar lesiones

por contacto accidental.

2. Proteccin de los ojos Los ojos deben ser protegidos durante todo el periodo de laboratorio, sea o no

peligroso lo que se est haciendo. Los anteojos corrientes son aceptables pero preferiblemente utilizar los de seguridad.

3. Precauciones generales

a. Mantener los grifos del gas y del agua, cerrados cuando no se estn utilizando. Asignar un encargado de abrir y cerrar los grifos respectivos al

inicio y al final de la prctica. b. Los desechos insolubles, tales como papeles de filtro, cerillas o similares,

deben desecharse en las papeleras o cubos de basura, pero nunca en las pilas de desage.

c. Mantener siempre limpia las mesas y aparatos de laboratorio. Sea limpio en

su trabajo. Si salpica algo, lmpielo.

d. Coloque sobre la mesa de trabajo, slo aquellos utensilios que sean

indispensables para la realizacin de la prctica. e. Maneje cuidadosamente, con pinzas u otros utensilios, los objetos calientes y

colquelos sobre una lmina de asbestos.

f. Nunca se debe trabajar sin que haya otra persona en el laboratorio. Se debe

trabajar cerca de otras personas para que en caso de accidente se den cuanta rpidamente y puedan brindar ayuda.

g. Lavarse con abundante agua las manos despus de utilizar los reactivos o

despus de salpicarse con uno de ellos.

h. Al determinar el olor de un compuesto conocido certificado como no txico,

coloque el recipiente a no menos de una cuarta de la nariz y suavemente lleve con la otra mano un poco del aire que est sobre el recipiente. Inhale lentamente, si no se detecta olor alguno, puede acercar ms la botella pero

nunca inhale profundamente.

4. Precauciones contra incendios

a. Nunca deje el quemador encendido si no lo est usando.

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b. Debe evitarse el uso de mangas flojas o pauelos sueltos y el cabello largo debe amarrase hacia atrs.

c. El fumado se prohbe dentro del laboratorio.

d. Nunca arrojar fsforos a canales o pilas.

e. Nunca dirija un tubo de ensayo o la boca de un matraz con lquidos en ebullicin o material en reaccin, hacia el vecino o hacia s mismo. Puede

proyectarse el contenido.

f. Antes de encender el quemador, est seguro de que no se est manipulando

disolventes en su cercana. Los vapores orgnicos son ms pesados que el aire y descienden rpidamente y sobre las mesas se pueden inflamar a varios

metros de distancia.

g. Se debe estar familiarizados con la localizacin de los extintores, mantas,

aspersores de agua y otros sistemas de extincin de fuego.

5. Como combatir el incendio e. Un fuego pequeo se puede apagar tapando la zona con una toalla hmeda.

Se deben cerrar las llaves de quemadores vecinos.

f. Se puede aplicar el chorro de anhdrido carbnico de un extintor en fuegos de mayor extensin, siempre que la aplicacin se haga a una distancia prudente (a no menos de un metro) y no sea por disolventes inflamables.

g. En caso de que se encienda la ropa de una persona, se debe cubrir con una

toalla hmeda, envolver con una manta apropiada mientras tanto y si no se extingui el fuego, se la puede trasladar bajo la ducha de agua.

6. Primeros auxilios

a. Cortaduras

Lavar la herida con abundante agua fra y aplicar un vendaje antisptico. b. Quemaduras

Las quemaduras causadas en la piel por agentes qumicos se tratarn segn

la naturaleza de los mismos, por lo tanto si son de: NATURALEZA CIDA, luego de lavar con abundante agua, se debe aplicar una pasta de bicarbonato de sodio y agua, dejarla unos minutos sobre la

piel y lavar con agua NATURALEZA BSICA, luego de lavar con agua en abundancia, se debe

aplicar una solucin al 1% de cido brico y despus con agua nuevamente. Aplicar finalmente unas gotas de aceite de oliva estril, que contenga 1% de para-aminobenzoato de etilo. Para esterilizar el aceite se

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habr calentado previamente a 110 C y se tendr guardado en

condiciones aspticas.

c. Quemaduras extensas

Aplicar sobre la parte afectada una crema de sulfanilamida, jalea de violeta cristal de genciana o de sulfadiazina de plata, o una solucin de cido tnico al 5%. Si el caso lo requiere, acostar al accidentado, abrigarlo y suministrarle

una bebida caliente.

d. Incendio en la ropa

Hacer rodar a la vctima por el suelo. De ninguna manera que corra. Cubrir

inmediatamente con una toalla o una manta la parte que est ardiendo. El extintor de dixido de carbono puede ser muy til.

e. Salpicadura en los ojos por cidos o bases

Aplicar agua en abundancia sobre la parte afectada. Si es de carcter cida, aplicar una solucin diluida de bicarbonato de sodio y despus nuevamente

agua en abundancia. Si es de carcter bsico, una solucin de cido brico y agua en gran cantidad.

f. Para cristales que se hayan introducido en los ojos

Si no se pueden extraer fcilmente, hacer que el ojo se mantenga constantemente abierto, sujetando los prpados hasta la llegada del mdico.

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UNIVERSIDAD LATINA DE COSTA RICA

CARRERA DE FARMACIA PROPUESTA PROGRAMTICA

CURSO: BIOFARMACIA TEORIA y LABORATORIO CDIGO: F- CRDITOS:

PERODO : II CUATRIMESTRE AO: 2011

HORAS TOTALES: 135 HORAS HORAS LAB: 60 HORAS HORAS TEORIA: 75 HORAS

REQUISITOS: DOCENTES: DRA. LORENA BERROCAL B.

DR. GERMAN MADRIGAL R. DR. ROLANDO VARGAS Z TIPO CURSO: COLEGIADO

DESCRIPCIN DEL CURSO

El curso de Biofarmacia (F - ) es un curso terico, complemento del curso prctico de Laboratorio de Biofarmacia y se encuentra ubicado en el cuatrimestre

del plan de estudios de la Licenciatura en Farmacia de la UNIVERSIDAD LATINA DE COSTA RICA. Se imparte en 5 horas tericas y 4 horas prcticas y/o laboratorio

semanales. Para lograr un mximo aprovechamiento del mismo, se requiere de conocimientos bsicos adquiridos en los cursos de Matemtica, Histologa, Bioqumica, Fisiologa,

Fsico Farmacia y Biofarmacia. En el curso de Farmacocintica el estudiante aplicar aspectos biofarmacuticos y

estudiar mediante un anlisis cuantitativo la relacin cuerpo frmaco. Esto le permitir resolver problemas relacionados con la administracin de los medicamentos y comprender el comportamiento de los mismos en el organismo al

involucrarse en su estudio la cintica de absorcin de los frmacos, su distribucin y eliminacin.

El curso se iniciar con un repaso de conceptos bsicos de Fisiologa y continur con la explicacin de cada uno de los puntos que intervienen en el sistema LADME,

dando nfasis en la Liberacin y absorcin de frmacos por diferentes vas, as como en su metabolismo, excrecin y distribucin.

OBJETIVO GENERAL

Familiarizar al estudiante con la utilizacin de los modelos matemticos que permitan entender y describir el destino de los medicamentos en el organismo

despus de ser administrados por diferentes vas, as como resaltar la importancia del estudio y desarrollo de la Biofarmacia como campo del profesional en Farmacia

en su bsqueda por lograr una mejor utilizacin de los medicamentos.

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OBJETIVOS ESPECFICOS

1. Conocer e identificar los factores que pueden modificar los procesos

Biofarmacuticos de un frmaco como son: factores fisiolgicos, procesos patolgicos e interaccin con medicamentos administrados conjuntamente.

2. Conocer, comprender y manejar matemticamente los procesos de

liberacin, absorcin, distribucin, metabolismo y excrecin.

3. Conocer, entender e identificar el comportamiento Biofarmacutico de

algunos frmacos y sus implicaciones teraputicas. METODOLOGA.

En este curso se utilizar la exposicin magistral y material audiovisual para el

planteamiento de los diferentes temas y la resolucin de problemas y casos clnicos. Se estimular la participacin activa de los estudiantes dejando material de lectura

y asignaciones de investigacin que podrn ser evaluadas en forma oral o escrita a criterio del profesor en cada sesin terica. Adems se programarn sesiones

experimentales y virtuales de laboratorio as como sesiones para la discusin de artculos cientficos que ilustren los temas planteados en la teora. Se le facilitar al estudiante prcticas elaboradas con ejemplos que ilustren los

tpicos cubiertos en los diferentes temas y que le permitan evacuar las dudas que tengan en cuanto a la materia cubierta en cada sesin terica, as como de un

protocolo de laboratorio, reactivos y el equipo e instruccin correspondiente para cada sesin experimental.

CRITERIOS DE EVALUACIN

La nota final para aprobar el curso tendr un valor de 70 y se obtendr con un 75% de la evaluacin del curso terico de Farmacocintica y el 25% del curso prctico o Laboratorio correspondiente.

A su vez para evaluar y obtener el 75% del total de la nota final, se realizarn exmenes cortos, tareas o trabajos de investigacin, dos exmenes parciales y un

examen final cuya ponderacin ser la siguiente:

Exmenes cortos 10% Tareas o Trabajos de Investigacin 10%

I Examen parcial 25 % II Examen parcial 25 %

Examen Final 30 % ________________

Total 100%

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LABORATORIO DE BIOFARMACIA

DURACIN: 60 Horas dividido en sesiones de 4 horas por 15 semanas. DOCENTES: DR.GERMAN L MADRIGAL REDONDO

DR. ROLANDO VARGAS ZIGA DRA. LORENA BERROCAL BARRANTES

TIPO CURSO: COLEGIADO DESCRIPCIN DEL CURSO:

El curso de laboratorio de Biofarmacia es complemente del curso terico de

Biofarmacia y busca desarrollar las habilidades prcticas del estudio de la Biofarmacia y Farmacocintica mediante, prcticas de laboratorio, prcticas virtuales de laboratorio, uso de software, desarrollo de ejercicios, resolucin de

problemas, anlisis de casos clnicos, artculos cientficos o material cientfico relevante, discusin de casos y otras formas que complementen el desarrollo

terico. Para el aprovechamiento del curso el estudiante debe tener claro los conocimientos previos de matemtica, biologa, fisiologa, anatoma, histologa, qumica general,

qumica orgnica, fisicofarmacia, y otros curos relacionados.. Especialmente debe tener claros los conceptos de ecuaciones diferenciales, cintica qumica y fisiologa

para poder entender con claridad los conceptos del curso. OBJETIVO GENERAL

Familiarizar al estudiante con las principales aplicaciones del Sistema LADME que

permitan entender y describir el destino de los medicamentos en el organismo mediante el uso de actividades como prcticas de laboratorio, prcticas virtuales de laboratorio, software, estudio de casos, estudio de casos clnicos, artculos de

revista, revisiones y otro material cientfico, as como resolucin de problemas o ejercicios, discusiones de grupo, entre otros, para resaltar la importancia del estudio

y desarrollo de la farmacocintica como campo del profesional en farmacia en su bsqueda para lograr una mejor utilizacin de los medicamentos.

OBJETIVOS ESPECFICOS:

Realizar actividades que le permitan al estudiante entender el destino de los medicamentos en el organismo, mediante prcticas de laboratorio prcticas

virtuales de laboratorio, software, estudio de casos, estudio de casos clnicos, artculos de revista, revisiones y otro material cientfico, as como resolucin de problemas o ejercicios, discusiones de grupo, entre otros, para resaltar la

importancia del estudio y desarrollo de la Biofarmacia como campo del profesional en farmacia en su bsqueda para lograr una mejor utilizacin de los medicamentos

Conocer y describir el Sistema LADME que le permitan al estudiante entender el destino de los medicamentos en el organismo, mediante prcticas de laboratorio prcticas virtuales de laboratorio, software, estudio de casos, estudio de casos

clnicos, artculos de revista, revisiones y otro material cientfico, as como resolucin de problemas o ejercicios, discusiones de grupo, entre otros, para

resaltar la importancia del estudio y desarrollo de la Biofarmacia como campo del profesional en farmacia en su bsqueda para lograr una mejor utilizacin de los medicamentos.

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Entender y comprender el diseo del Sistema LADME que le permitan al estudiante

entender el destino de los medicamentos en el organismo, mediante prcticas de laboratorio prcticas virtuales de laboratorio, software, estudio de casos, estudio de

casos clnicos, artculos de revista, revisiones y otro material cientfico, as como resolucin de problemas o ejercicios, discusiones de grupo, entre otros, para

resaltar la importancia del estudio y desarrollo de la Biofarmacia como campo del profesional en farmacia en su bsqueda para lograr una mejor utilizacin de los medicamentos.

CONTENIDOS DEL CURSO

PROGRAMA TENTATIVO DE PRCTICAS DE LABORATORIO El orden y contenido de las prcticas de laboratorio puede variar para adaptarse al

aprendizaje de los estudiantes, los recursos materiales disponibles, y el avance de los contenidos del curso terico:

Semana Contenido

1 Presentacin del Curso Laboratorio Virtual Introduccin Biofarmacia Sistema

LADME y Formas de Dosificacin

2 Prctica Determinacin del log P de una Droga

3 Prctica Determinacin del Log D de una Droga

4 Prctica Modelo de Absorcin Percutnea In vitro

5 Prctica Modelo Absorcin Oral in vitro

6 Prctica Modelo de Sistemas de Liberacin

Percutnea parte 1

7 Prctica Modelo de Sistemas de Liberacin

percutnea parte 2

8 Prctica Modelo de Sistemas de Liberacin oral parte

1

9 Prctica Modelo de Sistemas de Liberacin oral parte

2

10 Prctica Determinacin de la cintica de Disolucin

de una forma de dosificacin

11 Prctica Perfiles de Disolucin parte 1

12 Prctica Modelo Perfiles de Disolucin parte 2


14 Exposiciones

15 Examen Laboratorio

METODOLOGA:

En este curso se utilizarn diferentes tcnicas para desarrollar los contenidos del curso, entre las actividades a realizar estn prcticas de laboratorio prcticas virtuales de laboratorio, software, estudio de casos, estudio de casos clnicos,

artculos de revista, revisiones y otro material cientfico, as como resolucin de problemas o ejercicios, discusiones de grupo, entre otros.

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Igualmente el estudiante realizar una exposicin de manera grupal o individual, a

escogencia del profesor, y del nmero de estudiantes del grupo de laboratorio sobre temas selectos de farmacocintica, que le sern tiles para cumplir los objetivos del

curso terico y de laboratorio. Para la realizacin de la exposicin el estudiante en la sesin de laboratorio correspondiente realizar la presentacin de forma oral frente

a sus compaeros y el, o los docentes del curso. El estudiante debe exponer la presentacin de la forma ms innovadora posible y debe tener una duracin mnima de media hora, adems debe presentar un

resumen original del trabajo de al menos tres pginas donde describa la informacin recolectada (este debe compartirse con los compaeros del grupo), incluyendo las

fuentes de informacin consultadas. Finalmente debe adjuntar al trabajo tres artculos cientficos recientes sobre el tema en cuestin (estos solo deben entregarse al profesor del curso).

Aspectos relacionados con el laboratorio a) Es requisito realizar las prcticas de laboratorio para aprobar el curso, el

laboratorio no es opcional. El estudiante que no se presente a una sesin de laboratorio sin justificacin perder automticamente el curso, tanto terico como el de laboratorio. Es requisito presentar el pre-reporte de la prctica de la semana en

cuestin, y el reporte completo de la sesin anterior para poder ingresar al laboratorio de no presentarlos el estudiante no podr ingresar , y se tomar como si

no se presentar al laboratorio sin justificacin alguna y por tanto perder automticamente el curso. b) La entrada al laboratorio ser a la hora establecida en el programa. Se darn

10 minutos de tiempo y luego se proceder a cerrar las puertas y el estudiante no podr realizar la prctica. Si existiera una justificacin de peso para la llegada tarda

podr reponer el laboratorio en el horario que se le indique, si el profesor del curso considera que la justificacin es vlida. c) Una vez iniciada la prctica, si el estudiante requiere salir, debe solicitar

permiso al respectivo profesor o en su ausencia al asistente del grupo (no debe salir sin autorizacin y sin un motivo justificado)

d) El estudiante que no asista a una prctica de laboratorio deber justificarla ante el profesor, antes de que se lleve a cabo la prctica, el cual le indicar cuando debe reponerla. No se permitir la salida de ningn estudiante antes de la

conclusin de la prctica. Si hubiese terminado la prctica correspondiente, proceder a iniciar la elaboracin de su reporte dentro del laboratorio.

e) Al finalizar cada sesin prctica de laboratorio y antes de que el estudiante abandone el laboratorio se har una sesin de discusin sobre los resultados

obtenidos con el fin de que el profesor pueda darse cuenta si los conceptos tericos quedaron claros y permita que el estudiante sugiera en caso de no haber obtenido los resultados esperados, posibles fuentes de error y como corregirlas.

f) La evaluacin de reportes busca evaluar otros aspectos relacionados con el trabajo de laboratorio, tales como la puntualidad en la entrega, presentacin y

contenido global de los mismos. Estos se entregarn para su revisin a ms tardar una semana despus de la realizacin de la prctica correspondiente. El docente brindar las instrucciones necesarias para la elaboracin de dichos reportes. El

reporte debidamente corregido ser devuelto 10 das despus de su entrega. Por cada da de atraso en la entrega del reporte se rebajarn 30 puntos a la nota total

del respectivo reporte. g) Para trabajar en el laboratorio se requiere traer: Gabacha, pao de limpieza, marcador, papel semilogartmico y milimtrico, jabn lquido o detergente, papel

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toalla, etiquetas, pera. Se exigir utilizar en todas las prcticas anteojos de

seguridad y mascarillas cuando sea necesario

OBLIGACIONES DEL ESTUDIANTE:

1. Conocer y cumplir con las reglas mnimas de seguridad en el laboratorio, las cules se incorporaran como un documento del manual del laboratorio. Estas normas de seguridad podrn ser parte de la evaluacin del curso en cualquier

momento. 2. Al finalizar la prctica debe almacenar los reactivos que utiliz acomodados

en su respectivo lugar. 3. Trabajar ordenado y al finalizar dejar las mesas limpias. 4. Debe verificar que antes de salir del laboratorio los aparatos elctricos estn

desconectados los aparatos elctricos utilizados 5. Debe realizar el trabajo de forma ordenada en los fregaderos, deben evitarse

los derrames de agua y deben quedar limpios y ordenados. 6. Es responsabilidad del estudiante verificar que los instrumentos y equipos estn lavados antes de utilizarlos y luego lavarlos y secarlos muy bien, todo el

material que utiliz en la prctica y entregarlo en perfectas condiciones al asistente. 7. Al realizar las prcticas debe ser comedido con el uso de reactivos y no

desperdiciar los reactivos. CRITERIOS DE EVALUACIN:

1 Examen Final........................................ 40% Trabajo de investigacin 20% Reportes ...40% Total 100%

Contenido del Reporte Los reportes de los laboratorios o prcticas virtuales es la impresin de las actividades realizadas en papel, as como la resolucin de los ejercicios, o

cuestionarios que adjunte el profesor al momento de realizar la prctica dichas prcticas deben realizarse en el laboratorio.

Los reportes de las prcticas de laboratorio son realizados a manuscrita y constan de las siguientes partes:

Partes Generales: Curso y Universidad

Ttulo de la prctica Fecha de Realizacin:

Nombre del estudiante Carn Profesor Nota Obtenida

Estas partes son obligatorias aunque no poseen un valor propio de no presentarse alguna el Reporte perder automticamente un valor del 20% sobre la nota final.

Prereporte: Es un resumen de los procedimientos a realizar en el laboratorio debe estar escrita en la libreta de laboratorio, la cual debe tener numeradas las pginas ,

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debe incluir un esquema del procedimiento, la tabla de las constantes fisicoqumicas

de los reactivos a utilizar: Nombre, peso molecular, frmula , punto de fusin, punto de ebullicin, solubilidad, densidad, toxicidad ( frases R y S). Tambin debe incluir

las precauciones especiales y los manejos o cuidados en la prctica. El pre-reporte incluye las observaciones hechas durante la prctica. 10%

Cuestionario: Preguntas hechas en la prctica de laboratorio, o que se adjuntan antes o en el momento de realizar la misma, Debe presentarse en hoja parte .20% Resultados: Son las tablas y grficos con los resultados de la prctica En este

apartado se descontar los errores cometidos por el estudiante durante la realizacin de la prctica hoja aparte. 35%

Discusin y Conclusiones; Fundamentada: La discusin de los resultados de la prctica fundamentada con referencias bibliogrficas cientficas validadas y reales, sobre la comprobacin o no de lo esperado en la prctica de laboratorio. Debe

incluir la bibliografa en caso de no incluirla se obtendr un cero en este apartado. Debe incluir las conclusiones dela prctica. Hoja aparte 35%

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA

1. -Aiache, J.M. Biofarmacia. Traducido de la Segunda Edicin Edit, El Manual Moderno, Mxico, D.F. 1983.

2. -Gibaldi, Milo: Biopharmaceutics and Clinical Pharmacokinetics., 2 Edicin. Lea & Febiger. Philadelphia. 3.-Gibaldi, Milo and Donald Perrier. Farmacocintica. 1 Edicin en

Espaol, Editorial Reverte, Espaa, 1970. 4.-Swarbrick James. Current Contents in the Pharmaceutical Sciences

Biopharmaceutics. Lea & Febiger. Philadelphia, 1970. 5.-Rowland, M.; Toger, T. Clinical Pharmacokinetics. Concepts and Applications. Lea & Febiger. Philadelphia, 1980.

6.-Shargel, L. YU A. Applied Bipharmaceutics and Pharmacokinetics, 5 Edicin, Appleton-Century Crofts/Nor walk. Connecticut, 2005.

7.-Cid Crcamo Edison. Cintica de Disolucin de Medicamentos. Secretaria Regional de Desarrollo Cientfico y Tecnolgico. Washington, D.C. 1981. 8- Glosario de Trminos especializados para la evaluacin de medicamentos.

Organizacin Panamericana de la Salud, Washington, D.C. 1990. 9- Aulton, Michael,E. Pharmaceutics The Science of Dorage Form Design,.

Churchill Livinsgtone, Londres, Gran Bretaa,2008. 10-Berrocal, Lorena; Fonseca, Lidiette. Farmacocintica,. Editorial

Universidad de Costa Rica, San Jos, Costa Rica, 2011. 11-Berrocal, Lorena; Fonseca, Lidiette, Carazo Gustavo, Fallas , Jos Manuel. Manual de Prcticas de Laboratorio de Biofarmacia y Farmacocintica,. Facultad de

Farmacia Universidad de Costa Rica, San Jos, Costa Rica, 2011. 12-Domeech,J ;Martnez , J Pla Delfina, J. Biofarmacia y Farmacocintica , Vol1

Farmacocintica , Editorial Sintsis, Madrid , Espaa, 1997. 13- Sinko, Patrick. Martins Physical Pharmacy: Physical Chemical Principles in the Pharmaceutical Science. Sexta edicin. Lippincott Williams & Wilkins,

Filadelfia,Estados Unidos de Amrica 2011 Material y textos seleccionados y recomendados por el profesor.

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CRONOGRAMA

Semana Actividad / Prctica Laboratorio

1 Presentacin del Curso Laboratorio Virtual introduccin Biofarmacia Sistema LADME y

Formas de Dosificacin

2 Prctica Determinacin del log P de una Droga

3 Prctica Determinacin del Log D de una Droga

4 Prctica Modelo de Absorcin Percutnea In vitro

5 Prctica Modelo Absorcin Oral in vitro

6 Prctica Modelo de Sistemas de Liberacin Percutnea parte 1

7 Prctica Modelo de Sistemas de Liberacin percutnea parte 2

8 Prctica Modelo de Sistemas de Liberacin oral parte 1

9 Prctica Modelo de Sistemas de Liberacin oral parte 2

10 Prctica Determinacin de la cintica de Disolucin de una

forma de dosificacin


12 Prctica Modelo Perfiles de Disolucin parte 2


14 Exposiciones

15 Examen

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PRCTICA NO 1 LABORATORIO VIRTUAL

Introduccin a la Biofarmacia Sistema LADME y Formas de Dosificacin

Objetivo General: Conocer la importancia del estudio de la Biofarmacia para la prctica

profesional farmacutica mediante el uso de herramientas modernas y as facilitar el aprendizaje significativo de los contenidos de estudio.

Objetivos especficos:

Comprender la definicin de Biofarmacia para poder aplicar este concepto para determinar los procesos que lleva el frmaco en el organismo

mediante el uso de herramientas modernas. Entender el trnsito que tiene el principio activo dentro del cuerpo humano

para poder aplicar estos conceptos en el clculo de parmetros Biofarmacuticos mediante el uso de herramientas modernas.

Justificacin

Existen varia definiciones que datan desde 1961 cuando Wagner dio su primera definicin. Sin embargo la ms usada es:

Biofarmacia es el estudio de los factores que influyen la Biodisponibilidad de un frmaco en el hombre y los animales y el uso de esta informacin para optimizar

la actividad famacolgica o teraputica de la forma farmacutica en la aplicacin clnica. O sea estudia la variabilidad de la respuesta farmacolgica en funcin de la

forma farmacutica. No estudia la respuesta farmacolgica.

De modo que la Biofarmacia incluye el estudio de:

1. Todos los factores fsico - qumicos que influyen en la administracin de los

frmacos bajo deferentes formas farmacuticas. 2. Todos los posibles efectos de la forma farmacutica en la respuesta bilgica.

3. Los factores fisiolgicos que pueden afectar al frmaco contenido en las

diferentes formas farmacuticas. 4. La forma farmacutica propiamente dicha en la cual el frmaco es

administrado.

Se sabe que cuando un frmaco se administra por la misma va bajo diferentes formas farmacuticas puede mostrar diferentes grados de biodisponibilidad. As si un frmaco es administrado va oral en tabletas, cpsulas o

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suspensin, mostrar diferentes niveles sanguneos y por lo tanto diferentes grados

de accin o actividad teraputica.

Tambin es posible que an bajo una misma forma dosificada un frmaco muestre diferente biodisponibilidad debido a los procesos de manufactura utilizados

por cada fabricante. En general un frmaco administrado por va oral en diferentes formas

farmacocinticas mostrar una Biodisponibilidad que desciende en el siguiente orden:

Solucin > Suspensin > Cpsulas > Tabletas Sencillas > Tableta con cubierta

entrica.

Todas estas consideraciones nos llevan a definir Biodisponibilidad

BIODISPONIBILIDAD

Se define como: la cantidad relativa y la velocidad a la cual un frmaco entra al torrente sanguneo a partir de una farmacutica dada. Abarca dos conceptos :

a Fraccin de dosis administrada que accede inalterada a la circulacin sistmica ( fraccin que se absorbe inalterada ) y que ser la que dar la respuesta

farmacolgica. b Velocidad a la que se produce este proceso de acceso a la circulacin sistmica.

La biodisponibilidad se determina por los niveles del frmaco en sangre

(niveles plasmticos) y los de excrecin urinaria. FORMA FARMACUTICA O FORMA DOSIFICADA:

Es el sistema de liberacin del frmaco.

Es la presentacin fsica de un medicamento y sirve de soporte a la

administracin del principio activo. Ejemplos de diferentes formas farmacuticas son : supositorios, jarabes,

inyectables, cremas, tabletas, cpsulas, etc.

VIAS DE ADMINISTRACION.

Se denominan vas de administracin de las drogas los lugares del organismo donde son aplicadas, ya sea para ejercer una accin local en el sitio de aplicacin o

bien una accin sistmica o general despus de su absorcin. La va de administracin que se escoge debe ser aquella que permita una

50

buena absorcin del principio activo y por ende una mayor biodisponibilidad. La

naturaleza de la respuesta farmacolgica y su intensidad a menudo es determinada en gran medida por la ruta o va de administracin que se escoja. Esto nos lleva a

tomar en cuanta un sin nmero de factores, entre los cuales se encuentra:

a) Las caractersticas anatomofisiolgicas del lugar de administracin. b) El aporte sanguneo que le corresponde al lugar de administracin.

Estas caractersticas deben de tomarse en cuanta a la hora de escoger la va

de administracin de un frmaco dado.

Las principales vas de administracin se pueden clasificar en:

1. Vas de administracin enterales: Son aquellas que tienen que con estructuras del tracto gastrointestinal como son la: va oral, la va sublingual y la va rectal.

2. Vas de administracin parenteral: Entre estas estn: va intravenosa, va

intramuscular, va subcutnea, intratecal, intraarterial, tpica o percutnea, intracardaca, intradrmica y las intralaciones.

INTRAARTERIAL : va a arterias como la heptica al tratar generalmente cnceres como el de hgado con quimioterapia.

INTRATECAL : directamente en fludo cerebro espinal, puncin lumbar.

La va oral es la ms utilizada en la administracin de frmacos, por ser la va ms cmoda.

La va intravenosa y la intraarterial se utiliza cuando se quiere una rpida aparicin del efecto ya que se elimina el problema de la absorcin puesto que el

frmaco es puesto directamente en el torrente sanguneo.

La administracin intramuscular y la subcutnea se emplean tambin con frecuencia cuando se desea una respuesta rpida y la va intravenosa se considera

peligrosa o bien cuando no se puede utilizar la va oral debido a la naturaleza de la sustancia ( que se destruya por enzimas digestivas, inestabilidad en el medio cido del estmago, etc ) o algn problema del paciente ( lcera gstrica, gastritis ).

Cada una de las vas de administracin de frmacos presenta caractersticas

propias. Estas deben conocerse para poder escoger la va ptima a la hora de establecerse un determinado rgimen de dosificacin.

Procedimiento

El estudiante deber presentarse a la hora que corresponda con una computadora con acceso a internetal laboratorio, el da en que tiene el laboratorio matriculado

51

para realizar la auto-evaluacin correspondiente a este tema. Al final del laboratorio

el profesor podr realizar preguntas orales con respecto al material revisado por el estudiante y la calificacin obtenida contar como participacin activa del estudiante

en la prxima sesin experimental.

I parte. 40 minutos. Vas de administracin. Ingrese a Mdulos de MB, seccin Farmacocintica. Ingrese a Administracin.

Realice una revisin detallada de las ventajas y desventajas de cada va de

administracin (dando clic a cada una de las siguientes vas de administracin: nasal, ocular, bucal o sublingual, transpulmonar, intraarterial, intramuscular, intravenosa, subcutnea, intraperitoneal, tpica, espinal,

vaginal, rectal), as como el concepto y clasificacin de cada una de las vas como enteral o parenteral.

Parte II. Formas Farmacuticas. Ingrese a Mdulos de Mb, seccin Sistemas de Administracin Oral.

- Formas de Administracin oral. Revise y analice la informacin que se encuentra en los apartados Cpsulas, Comprimidos, Excipientes. Analice

los eventos y procesos que se llevan a cabo en cada una de estas secciones y que relacin e importancia tienen para la biofarmacia.

- Cesin controlada. En este apartado deber analizar la importancia y

caractersticas de cada uno de los procesos de la Introduccin relacionados con cesin sostenida, cesin controlada, cesin de orden cero y cesin

de primer orden. Adems de analizar la seccin de Factores en donde se exponen temas que afectan la administracin enteral.

Parte III. El profesor proceder a realizar una sesin de preguntas con respecto al material revisado por los estudiantes.

- Parte IV. El profesor y los estudiantes realizarn una discusin de los temas estudiados durante el laboratorio con el fin de concluir las ideas y aclarar conceptos

importantes de destacar del material revisado por los estudiante.

Bibliografa

1. Cid C., E.: Introduccin a la Farmacocintica. Secretaria General de la O.E.A., Programa Regional de Desarrollo Cientfico y Tecnolgico, Washington D.C., 1982, pp. 23-28.

2. Cook & Martin: Farmacia Prctica de Rmington. Unin topogrfica, Mxico, 1963, pp. 1545-1554.

3. Fonseca, L; Berrocal, L; Carazo ,G; Fallas, J; Manual de Laboratorio de Biofarmacia y Farmacocintica; Universidad de Costa Rica .Facultad de Farmacia San Jos , Costa Rica, 2011.

4. Gibaldi, M.; Perrier, D.: Farmacocintica. Ed. Revert S.A., Espaa, 1982, pp. 28-32.

5. Shargel, L.: Aolied Biopharmaceutics and Pharmacokinetics. Appleton Century Crofts, New York, 1980, pp. 138-149

52

Prctica No 2

Determinacin del log P de una Droga

Objetivo General:

Describir mediante un modelo Fisicoqumico los principios bsicos del reparto de una droga en las membranas biolgicas para el aprendizaje de

este concepto fundamental en la prctica profesional farmacutica mediante el uso de herramientas modernas y as facilitar el aprendizaje significativo de los contenidos de estudio.


Encontrar experimentalmente el log de P de un frmaco con un modelo fisicoqumico mediante el uso de herramientas modernas y as facilitar el

aprendizaje significativo de los contenidos de estudio.

Calcular experimentalmente el log de P de un frmaco con un modelo fisicoqumico mediante el uso de herramientas modernas y as facilitar el aprendizaje significativo de los contenidos de estudio

Equipo de Seguridad: Lentes de Seguridad, Gabacha, Zapatos Cerrados,

Pantalones, Jabn para Manos, Guantes Desechables, Pao para Derrames.

Justificacin

Cuando una disolucin de yodo en agua se agita con tetracloruro de carbono que es

inmiscible con el agua, el yodo se distribuye entre las capas de agua y tetracloruro

de carbono, de manera que en el equilibrio, la relacin de concentraciones de yodo

en dichas capas es constante a una temperatura dada. Esta distribucin de un

soluto entre dos solventes inmiscibles o ligeramente miscibles puede realizarse con

cualquier soluto para el cual el par de solventes inmiscibles es adecuado.

De acuerdo con Michalowski (1), las extracciones lquido-lquido para sistemas que

consisten en dos disolventes, usualmente se describen utilizando un modelo

sobresimplificado, fundamentado en las siguientes presunciones: los disolventes

son completamente inmiscibles; el volumen total del sistema luego de mezcladas

ambas fases es una propiedad aditiva; y la composicin de ambas fases es

constante, excepto por la especie transferida.

El equilibrio dinmico que se establece en las dos fases es alcanzado cuando la

velocidad a la cual las molculas del soluto pasan del primer solvente al segundo,

es igual a la velocidad a la cual pasan del segundo disolvente al primero. Al

establecerse el equilibrio dinmico no se produce ningn otro cambio en la

53

concentracin, al permanecer constante la temperatura. Este comportamiento es

una consecuencia de los requisitos termodinmicos de equilibrio. Para verlo ms

claramente, consideremos un par de solventes en contacto A y B que contienen la

misma sustancia en disolucin. El potencial qumico (energa libre molar) del

soluto en el lquido A, A, se representa as:

A = A + RT ln aA

Donde A es el potencial qumico estndar y aA es la actividad del soluto en el solvente A. En forma anloga, el potencial qumico parcial del soluto en el

segundo lquido, B, se escribe as:

B = B + RT ln aB

Expresin en la cual todas las cantidades tienen el mismo significado anterior, slo

que ahora se refieren al lquido B. Como para el equilibrio entre las capas debemos

tener A = B a temperatura y presin constantes, se deduce que:

B + RT ln aB = A + RT ln aA

Usando las propiedades de los logaritmos, queda pues:

ln[aB/aA] = (A- B)/RT

Sin embargo, a una temperatura constante dada, A y B son constantes para una

sustancia en un solvente particular. De ah que podemos indicar lo siguiente:

ln[aB/aA] = constante

Finalmente, sacando antilogaritmos, queda que:

aB/aA = K

Esta ecuacin constituye la formulacin matemtica de la Ley de distribucin de

Nernst, la cual establece que una sustancia se distribuye entre dos solventes hasta

que en el equilibrio se alcanza una relacin constante de las actividades de la

sustancia en las dos capas, a una temperatura establecida (2). La constante K se

llama coeficiente de distribucin o de reparto, que en muchos libros de texto se

ejemplifica o simboliza como: Kd. Si consideramos como solventes el agua y un

lquido orgnico inmiscible con ella, tenemos:

54

Kd = ao/aa

donde ao y aa son las actividades en la fase orgnica y acuosa, respectivamente (en soluciones diluidas o muy diluidas, se sabe que la actividad es prcticamente igual

a la concentracin estequiometria). La relacin es arbitraria, pues perfectamente

pudo haberse establecido invirtiendo los trminos. En todo caso, Kd depende

tambin de la naturaleza del soluto y de los lquidos comprendidos.

Walther Nernst hizo notar que la ley de distribucin es vlida slo cuando el soluto

no lleva a cabo cambios, tales como disociacin y asociacin (2). Si un soluto se

disocia en iones o molculas ms simples o se asocia en molculas ms complejas,

no se aplica la ley a las concentraciones totales de las dos fases sino nicamente a

las concentraciones de la especie particular que sea comn en ambas fases (3). As,

si una sustancia A se disuelve en un solvente sin ningn cambio en la forma

molecular, y en otro disolvente inmiscible lo hace con una asociacin particular,

como por ejemplo A2, el coeficiente de reparto de la distribucin no estar dado por

la relacin de las concentraciones totales en las dos fases, sino por la concentracin

total en el primer solvente dividida por la concentracin de las molculas no

asociadas en el segundo; o lo que es igual, por la relacin de las concentraciones de

las molculas de idntico peso molecular en los dos solventes.

La ley de distribucin se ha aplicado a los procesos farmacuticos de extraccin, en

los cuales se desea remover un soluto a partir de un sistema heterogneo formado

por agua y un solvente orgnico. Una importante consecuencia de la ley de

distribucin es que si se dispone de cierto volumen de solvente, se obtiene mayor

eficiencia en la extraccin si se emplea un cierto nmero de extracciones separadas,

en lugar de usarlo todo el volumen de una sola vez. Supongamos que una

disolucin contiene W gramos de una sustancia en V1 mL de disolucin, y que se

agita repetidamente con V2 mL de un solvente puro inmiscible hasta lograr el

equilibrio. Despus de n extracciones el peso Wn de soluto que permanece sin

extraer ser:

nW = n

VKVKVW 211 /

K es el cociente de las concentraciones del soluto en el solvente original y en el

solvente de extraccin (4).

En la presente prctica trataremos de determinar en qu medida se cumple la ley de

distribucin en el sistema cido benzoico-aceite-agua. Se presentan dos situaciones

con el cido benzoico; en la fase acuosa, por ser un cido dbil, tiende a disociarse

55

en iones benzoato e iones hidronio, y en la fase orgnica tiende a dimerizar. La

primera situacin la podemos hacer despreciable disminuyendo el pH del agua a un

valor entre 5 y 6, por medio de un cido fuerte. Para la segunda situacin debemos

hacer las siguientes consideraciones:

Kd = Co/Ca

Al dimerizar el cido benzoico, el equilibrio que se establece en la fase orgnica es

el siguiente: 2HA = (HA)2 para el cual la constante de equilibrio K1 ser igual a K1

= [(HA)2]/[HA]2, donde [HA], la concentracin monomolecular de cido benzoico

en esa fase ser:

[HA]2 = [(HA)2] / K1; donde, [HA] = K2 x [(HA)2]

1/2

Luego, sabemos que: [HA] t, eq, oleoso = concentracin total de cido benzoico al

equilibrio en ciclohexano es:

[HA] t,eq, oleoso = 2[(HA)2] + [HA]

En el aceite el cido benzoico est mayoritariamente dimerizado, eso permite hacer

la siguiente afirmacin que ayuda a simplificar los clculos:

2[(HA)2] >>> [HA]

Por lo que:

[HA] t, eq, oleoso 2[(HA)2]

[(HA)2] [HA] t, eq, oleoso 2

Kd = ([HA]/[HA]a)

Sustituyendo el valor de [HA] en el ciclohexano determinado atrs, resulta la

siguiente expresin:

Kd = (K2 x [(HA)2]1/2

/[HA]a)

Kd = K2 x ([HA] t, eq, oleoso)1/2

(2)1/2

[HA]a

Reagrupando los trminos constantes, resulta finalmente:

56

K`d = ( [HA] t, eq, oleoso )1/2

[HA]a

El coeficiente de reparto encontrado ser el correspondiente a la temperatura

ambiente del laboratorio y como tal debe ser registrado. Los coeficientes de

particin por lo general no varan rpidamente con la temperatura, por lo tanto no

es necesario el uso de un termostato en la prctica (5). Procedimiento

1. Realice una curva de calibracin a 297 nm usando cido saliclico a concentraciones de 5, 10, 15 25, 30 y 35 ppm usando agua acidulada como

blanco.

2. Preparar disoluciones 0,004 y 0,002 mol L-1 de cido saliclico en agua. En la medida de lo posible ya las encontrar preparadas, Determine su

absorbancia a 297 nm utilizando como blanco agua. 3. En un embudo separador de al menos 100 mL, colocar un volumen de 25 mL de

una de las disoluciones de cido saliclico en agua y tambin 25 mL de 1-

octanol. Realizar lo mismo para la otra disolucin de cido benzoico en agua,

pero en otro embudo separador.

4. Agitar vigorosamente la mezcla por una hora. 5. Dejar en reposo la mezcla por espacio de cuarenta y cinco minutos. 6. Separar la fase acuosa de la fase orgnica y depositar en un vaso de

precipitados.

7. Medir exactamente a partir de la fase acuosa, tres alcuotas de 5 mL, y colocar en tres erlenmeyer debidamente etiquetados.

8. Determinar la absorbancia a 297 nm en espectrofotmetro, utilice como blanco el agua acidulada.Calcule el promedio de las absorbancias y rstelo a la

absorbancia original para obtener la absorbancia en el octanol.

9. Calcular el valor de la constante de distribucin y el log de P correspondiente. Bibliografa

1. Michalowski, T. J. Chem. Educ. 2002, 79, pp. 1267-1268. 2. Maron, S. Fundamentos de Fisicoqumica; Editorial Limusa: Mxico D.F., 1984;

pp. 306-310. 3. Freid, V. Physical Chemistry; Macmillan Publishing Co.: New York, 1977; pp.

244-247.

4. Jimnez, J. Curso de Fisicoqumica Experimental; McGraw-Hill: Mxico D.F., 1974; pp. 118-123.

5. Bender, P.; Cornwell, D. Curso de Fisicoqumica Experimental; McGraw-Hill: Mxico D.F., 1972; pp. 117-122.

57

PREREPORTE Y GUA PARA REALIZAR EL REPORTE

DETERMINACIN DEL LOG DE P DE UNA DROGA

Nombre del estudiante:_________________________ Carn:________________

Laboratorio___________________________ Fecha:________________

Esquema del Procedimiento

Resultados

Tabla I. Absorbancia de cido salicilicilico

Fase Absorb1 Absorb 2 Absorb 3

Acuosa

inicial 0,002

Acuosa final0,0002

Oleosa final 0,002

Acuosa inicial 0,004

Acuosa final0,0004

Oleosa final 0,004

Fuente:

Calculo Kd, Kd y log P y log P:

58

Clculos, indique todos los clculos necesarios para obtener los parmetros

anteriores:

59

Discusin y Conclusiones

60

Materiales Laboratorio semana 2.

Nmero de estudiantes mximo por Mesa 2 Prctica Determinacin del Log P de una Droga

Nmero Mximo de Mesas por Laboratorio 8

Materiales Cantidad por Mesa de laboratorio

Pipeta volumtrica 25,00 mL 2

Embudo separador 100 mL 2

Beaker 100 mL 1

Prensa universal 2

Soporte metlico 2

Espectrofotmetro UV-Visible 1

Cubetas cuarzo ultravioleta 2

Pizeta con agua destilada 100 mL 1

Beaker lavados 100 mL 1

Peras 2

Agua Destilada acidulada pH 5-6 1Litro

Solucin de cido saliclico en agua acidulada 0,004 mol / Litro

200 mL

Solucin de cido saliclico en agua acidulada 0,002 mol /Litro

200 mL

1- Octanol 200 mL

Papel toalla 1 Rollo

Termmetro de 0 a 100 C 2

Materiales curva de Calibracin a 297 nm


Balones aforados 100,00 mL 5

Pipeta graduada 5,00 mL 1

Goteros de vidrio 6

Espectrofotmetro UV -Visible 1




Solucin madre cido saliclico 0,004 mol/Litro

100 mL

Agua destilada acidulada pH 5-6 1 Litro

Papel Toalla 1

Preparacin Reactivos

Agua destilada Acidulada Utilizar agua destilada levemente acidulada pH entre 5 a 6 a 25C (verificar pH con

pH metro antes de hacer la preparacin), en caso de no estar al pH correcto agregar una gota de HCl diluido 1x10-5 mol /Litro hasta alcanzar el pH deseado. Preparar 2 litros por mesa. Etiquetar adecuadamente.

Solucin de cido saliclico acidulada 0,004 mol /Litro Pesar exactamente una cantidad aproximada de 0,552 gramos de cido saliclico,

colocar lo en un baln aforado de 1 litro y llevarlo a volumen con agua destilada acidulada. De ser necesario para disolver caliente levemente, o utilice ultrasonido

61

Etiquetar adecuadamente...

Esta misma disolucin se utiliza para la curva de calibracin. Solucin de cido saliclico acidulada 0,002 mol /Litro

Mida exactamente 500,00 mL de una solucin de cido saliclico en agua destilada acidulada 0,004 mol/Litro y trasvsela a un baln aforado de un Litro y completar el

volumen con agua destilada acidulada pH 5-6.Etiquetar adecuadamente.

62

PRCTICA NO 3

DETERMINACIN DEL LOG D DE UNA DROGA Objetivo General:

Describir mediante un modelo Fisicoqumico los principios bsicos del reparto de una droga en las membranas biolgicas para el aprendizaje de

este concepto fundamental en la prctica profesional farmacutica mediante el uso de herramientas modernas y as facilitar el aprendizaje

significativo de los contenidos de estudio. Objetivos especficos:

Encontrar experimentalmente el log de D de un frmaco con un modelo

fisicoquimico mediante el uso de herramientas modernas y as facilitar el aprendizaje significativo de los contenidos de estudio.

Calcular experimentalmente el log de D de un frmaco con un modelo fisicoquimico mediante el uso de herramientas modernas y as facilitar el

aprendizaje significativo de los contenidos de estudio Equipo de Seguridad: Lentes de Seguridad, Gabacha, Zapatos Cerrados,

Pantalones, Jabn para Manos, Guantes Desechables, Pao para Derrames.

Justificacin Para el farmacutico, es muy importante estar familiarizado con la influencia que

ejerce el pH sobre el coeficiente de particin de los frmacos que son bases dbiles o cidos dbiles poco solubles.

Dos ejemplos que ilustran la importancia de este conocimiento fsico qumico

son: el papel que juega el pH en la absorcin gastrointestinal y la manera de establecer la cantidad de preservantes en los sistemas coloidales de aceite/agua. (emulsiones), o cualquier otro sistema bifsico (1).

En esta prctica de laboratorio se ilustran de una manera elemental, los

principios tericos que intervienen en la distribucin de un cido dbil, entre una fase acuosa y una fase oleosa. La obtencin de la ecuacin que se utiliza para graficar los datos y para calcular las constantes de equilibrio se comprende

fcilmente.

Considere la distribucin de un cido dbil [HA], entre la fase oleosa y la fase acuosa. Si aceptamos la suposicin, que no se presenta dimerizacin del cido dbil en la fase oleosa, los equilibrios a considerar son los siguientes (2; 3):

oa HAHA dK

AOHOHHA a 32aK

63

Donde Kd es el coeficiente verdadero de participacin y Ka, es la constante de disociacin cida. Los subndices "a" y "o", se refieren a las fases acuosas y

oleosas respectivamente.

La concentracin molar total de cido en la fase oleosa, Co, est dada por:

OCo HA (1)

Y la concentracin total de cido en la fase acuosa, Ca, est dada por:

(2)

Las tres constantes de equilibrio que se emplean

acHA

OHAKd

(3)

acHAO -3 AHKa

(4)

acac AHA O

HAK`d (5)

Donde K'd es el coeficiente aparente u observado experimentalmente. (el

coeficiente de participacin aparente)

Al combinar las tres expresiones anteriores se obtiene la siguiente ecuacin

(2):

OHKd

K

KK

a

dd 3'

11 (6)

-ac ACac HA

64

Esta ltima expresin es una ecuacin lineal de la forma:

y = mx + b (7)

de manera que una representacin grfica de:

OH

vs

d3'

11

(8)

es una lnea recta cuya pendiente es d

a

y la ordenada en el origen es

d1 .

Procedimiento

1. Realice una curva de calibracin a 297 nm usando cido saliclico a concentraciones de 5, 10, 15 25, 30 y 35 ppm usando agua acidulada como blanco.

2. Tabla 1. Volmenes requeridos de la solucin A y de la solucin B, para elaborar amortiguadores Mc-Ilvaine dentro de un intervalo de pH que va de 3,2 - 4,6.

(Para realizar 100 mL de solucin)

3.

pH

Solucin A

(cido ctrico 0,1M)

Solucin B

(Fosfato cido disdico 0,2 M)

3,2 75,3 mL 24,7 mL 3,4 71,5 mL 28,5 mL 3,6 67,8 mL 32,2 mL 3,8 64,5 mL 35,5 mL 4,0 61,4 mL 38,6 mL 4,2 58,6 mL 41,4 mL 4,4 55,9 mL 44,1 mL 4,6 53,2 mL 46,8 mL

Tomado de (4)

4. Nota: La primera parte del procedimiento consiste en la elaboracin de la curva de calibracin que permite determinar colorimtricamente las concentraciones de

salicilato en las diferentes fases acuosas. Para este objeto se debe utilizar la ley Lambert- Beer, para el complejo salicilato-hierro(III), segn se obtuvo en los laboratorios de colorimetra.

5. a. Preparar cinco soluciones de diferente concentracin de salicilato de sodio a distintos valores de pH, de la siguiente manera: pipetee 10,00 mL de salicilato de sodio con una concentracin aproximada a 0,20 M en un baln aforado de

100,0.mL

65

6. b. Preparar 100,0 mL de los amortiguadores de Mac-Ilvaine dentro de un intervalo de pH que vaya de 3,2 a 4,6, en incrementos de 0,2 siguiendo lo

sealado en la tabla 1.

7. c. Aforar los balones anteriores con los diferentes amortiguadores hasta la marca de aforo.

8. d. Colocar exactamente 25,00 mL de cada solucin en sendos embudos separadores de 100 mL, luego adicione exactamente 25,00 mL de aceite

vegetal.

9. e. Agitar vigorosamente los embudos por unos 20 minutos, luego deje 20 minutos en reposo hasta que las fases se separen completamente.

10. f. Tomar aproximadamente 20 mL de la fase acuosa, colquelo en un beaker y determinar el pH con un pHmetro.

11. g. De la fase acuosa realizar diluciones de 1 en 10 para luego determinar la concentracin de salicilato utilizando el procedimiento espectrofotomtrico llevar la disolucin a un pH entre 5 y 6 antes de la medicin agregando HCl diluido 0.1 M.

12. h. Calcular por diferencia la concentracin total de salicilato en la fase oleosa (Co) y obtener el coeficiente de particin aparente (K'd).

13. i. Tabular los datos de K'd ; 1/K'd ; pH; [H3O+

] y 1/[H3O+

].

14. j. Graficar 1/K'd vs 1/[H3O+

] en papel milimtrico y encuentre los

valores de Ka y Kd

15. k. Calcular la recta de mejor ajuste y el r2.

Bibliografa

1. Gennaro, Alfonso. Remington. Farmacia. 20 ed. Madrid: Editorial Panamericana, 2003.

2. Cherng-ju, Kim. Advanced Pharmaceuticals. Boca Raton, Fl.: CRC Press, 2004.

3. Sinko, Patrick. Martin's Physical Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 5th ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 2006.

4. Mcilvaine's Buffer System. Pamela Stanley Lab. [En lnea] [Citado el: 20 de Octubre de 2009.] http://stanxterm.aecom.yu.edu/wiki/index.php?page=McIlvaine_buffer.

5. Sanz, P. Fisicoqumica para Farmacia y Biologa. Barcelona: Ediciones Cientficas y Tcnicas, S.A., 1992.

6. Florence, Alexander y Attwood, David. Physicochemical Principles of Pharmacy. 3a ed. Londres: Pharmaceutical Press, 2006.

66


DETERMINACIN DEL LOG D DE UNA DROGA.

Nombre del estudiante:_________________________ Carn:________________ Laboratorio___________________________ Fecha:________________

Esquema de Procedimiento

Resultados

Tabla 1. Efecto del pH sobre la particin de un electrolito

pH

Amortiguad

or

Mc-Ilvaine

pH fase

acuosa

[H+]-1

/mol-1

L Absorb.

Concentraci

n salicilato

fase

acuosa/_____

Concentraci

n salicilato

fase oleosa

______

Kd 1/Kd

3,2

3,4

3,6

3,8

67

4,0

4,2

4,4

4,6

Ejemplos de clculos

68

Discusin y Conclusin segn las observaciones y resultados:

Materiales Laboratorio semana 3. Nmero de estudiantes mximo por Mesa 2

69

Prctica Determinacin del Log D de una Droga

Nmero Mximo de Mesas por Laboratorio 8



Pipeta Volumtrica 10 mL 6

Embudo separador 100 mL 5

Beaker 100 mL 6

Prensa universal 5

Soporte metlico 5





Peras 2

Agua Destilada 1Litro

Solucin salicilato de sodio en agua

0,20 mol / Litro

200 mL

Solucin Acido ctrico 0,10 mol / Litro 1 Litro

Solucin Fosfato Acido Disdico 0,20 mol / Litro

1Litro

Solucin nitrato Frrico 5% p/v 100 mL

1- Octanol 500 mL

Papel toalla 1 Rollo


Materiales curva de Calibracin



Bureta 50,00 mL 1


Pipeta Volumtrica 2,0 mL 1

Pipeta Volumtrica 1

Gotero de vidrio 6


Peras 3




Solucin madre salicilato de sodio

0,20 mol/Litro

100 mL

Solucin nitrato Frrico 5% p/v

100 mL

Agua destilada acidulada pH 5-6 1 Litro

Papel Toalla 1

Preparacin Reactivos Solucin cido ctrico 0,1 mol /Litro

70

Pesar exactamente aproximadamente la cantidad equivalente a 19,20 gramos de

cido ctrico anhidro y traspasarlo a un baln aforado de 1 litro, llevarlo a volumen con agua destilada. Etiquetar adecuadamente.

Solucin Fosfato cido disdico anhidro (Na2HPO4) 0,2 mol/Litro Pesar exactamente aproximadamente el equivalente a 28,40 gramos de Fosfato

cido disdico anhidro y trasvasarlo a un baln aforado de 1 Litro, llevarlo a volumen con agua destilada. Solucin Salicilato de Sodio 0,20 mol /Litro

Pesar exactamente aproximadamente la cantidad equivalente a 32,20 gramos de salicilato de sodio y traspasarlo a un baln aforado de un Litro , llevar a volumen

con agua destilada. Etiquetar adecuadamente. Solucin 5 % p/v nitrato frrico Pesar exactamente una cantidad aproximada equivalente a 5 gramos de nitrato

frrico (el nitrato frrico ya este tiende a ser higroscpico y absorbe mucha agua ) y trasvasarlo a un baln aforado de 100 mL, llevar a volumen con agua destilada .

Etiquetar adecuadamente.

71

PRCTICA NO 4

MODELO IN VITRO DE ABSORCIN PERCUTANEO Objetivo General:

Describir mediante un modelo in vitro los clculos biofarmacuticos de absorcin percutneapara el aprendizaje de este concepto fundamental en

la prctica profesional farmacutica mediante el uso de herramientas modernas y as facilitar el aprendizaje significativo de los contenidos de

estudio. Objetivos especficos:

Demostrar experimentalmente la variacin de la absorcin de un frmaco

en piel al pasar el tiempoutilizando vehculos de polaridad diferente. Mostrar esquemticamente el proceso de absorcin percutanea de drogas

en caso de su administracin mediante diferentes vehculos.

Calcular experimentalmente la constante de difusin de diferentes vehculos y compararla entre si

Equipo de Seguridad: Lentes de Seguridad, Gabacha, Zapatos Cerrados, Pantalones, Jabn para Manos, Guantes Desechables, Pao para Derrames.

Justificacin

El sistema farmacutico in vitro que se presenta en estas prcticas de laboratorio es una analoga de una situacin biolgica ideal.

Tal vez la funcin ms importante de una base para ungento es su

capacidad de determinar la rapidez de liberacin de un medicamento incorporado en ella, controlando en esta forma su actividad teraputica.

Por lo general, la base del ungento constituye la mayor porcin de la preparacin farmacutica, por lo que su influencia sobre la eficacia de los agentes

medicinales que se le incorporen es muy grande. A pesar de que los vehculos dermatolgicos por s mismos no pueden

penetrar la piel, el farmacutico sabe muy bien que la eficacia clnica de un frmaco puede variar de acuerdo con el vehculo en el cual se incorpore. Esta variacin debe

atribuirse a la rapidez de liberacin del principio activo, proceso que est determinado en gran medida por las propiedades fsicas y qumicas tanto del frmaco como del vehculo.

Desde luego que la absorcin percutnea tambin se ve modificada por otros

factores como la condicin de la piel del paciente, el sitio y duracin de la aplicacin, etc.

72

El sistema de difusin (o dilisis) para estimar la liberacin de un frmaco, tal

como se utiliza en esta prctica se considera como el ms simple y conveniente. El mtodo consiste en permitir que una droga difunda desde un ungento a una fase

acuosa que est fsicamente separada por medio de una membrana semipermeable. La membrana permite el libre paso del principio activo, pero es impermeable al

ungento. La tendencia de escape de las molculas de la droga desde la fase semislida hacia la fase acuosa, es una medida de la rapidez de liberacin del medicamento. Una vez liberada, la droga est disponible para su absorcin

percutnea. DIFUSIN PASIVA:

La difusin pasiva interviene en el paso de las sustancias susceptibles de disolverse

en los constituyentes de la membrana. Es el proceso ms simple que se lleva a cabo para la mayora de las drogas.

Caractersticas: Es un proceso pasivo ya que se lleva a cabo de una zona de

mayor concentracin a otra de menor concentracin por difusin espontnea (pasiva). Sin ningn gasto de energa hasta llegar a un estado de equilibrio dividido por el medio externo y el medio interno. Es importante precisar que solo la fraccin

libre del frmaco interviene en la gradiente de concentracin.

La difusin pasiva sigue la LEY DE FICK. Esta ley establece que: la cantidad de droga que difunde por unidad de tiempo, es proporcional a la diferencia de concentraciones entre el sitio de absorcin y el torrente sanguneo.

El fenmeno de difusin se ve como la velocidad de desaparicin de droga del

sitio de absorcin ( fenmeno de orden 1 ), al pasar el tiempo esta es proporcional al cambio de concentraciones:

dq / dt * C va a estar determinada por la diferencia de concentraciones,

C = Ca - Cs. Ca >>> Cs. Al pasar el tiempo Ca disminuye y con ella decrece dq / dt.

dq / dt = -K C C = Ca2 - Ca1 Ca >>> Cs

Siendo K la constante de permeabilidad y Ca y Cs las concentraciones respectivas a

ambos lados de la membrana. K = a una constante e involucra el coeficiente de difusin ( D ), A= el rea a

travs de la cual ocurre la difusin; el espesor de la membrana ( X ) y el coeficiente de distribucin ( Kd ).

dq / dt = (-DAKd / x ) (Ca - Cs) pero Ca >>> Cs

73

Ca = concentracin en el sitio de absorcin.

Cs = concentracin en sangre.

entonces dq / dt = K Ca como Ca = Ca2 - Ca1 y Ca2

74

Procedimiento

1. Preparar una curva estndar de cido saliclico a partir de una solucin madre de 0,500g/L.

2. Realizar un espectro de absorcin para el cido saliclico utilizando la solucin de

30 ppm . Medir la absorbancia desde 270 hasta 310 nm cada 5 nm. Curva de Estandarizacin

Conc. (mg/ L) Vol. Sln. Madre(mL) Vol. final (mL)

5

10

15

20

25

30

Utilizar como blanco agua destilada

1. Preparar 50 g de ungento de cido saliclico al 3% de diferentes bases: lipoflica, hidroflica y Cold Cream (que es una emulsin o/w).

2. La celda de difusin est constituida por un pote para pomadas de una onza que

se llena completamente con el ungento que se va a estudiar. La superficie del

ungento se cubre en forma pareja y firme con una lmina de papel celofn, la cual se fija por medio de un anillo constituido por la parte externa de la tapa del

pote. La membrana de dilisis (el papel celofn) se humedece previamente con agua destilada removiendo el exceso con papel absorbente.

3. Mantener constante la agitacin con agitador magntico. Fijar la celda de difusin con una prensa con la superficie de difusin en contacto con 100,0 mL (medidos

con pipeta) de solucin acuosa de nitrato frrico al 2% contenida en una cpsula de porcelana. Evitar la presencia de burbujas de aire entre ambas fases.

4. Cuando se ha liberado (difundido) cido saliclico, la solucin de nitrato frrico se torna de color morado (color caracterstico del complejo salicilato-Fe+3) lo que

permite determinar por espectrofotometra UV-VIS la concentracin de cido saliclico.

5. A intervalos de 5 minutos, recoger cerca de 5 mL de la fase acuosa y medir a una longitud de onda de 525 nm la cantidad de cido saliclico difundido. Despus de

hacer lectura devolver los 5 mL de solucin a la cpsula de porcelana. 6. Realizar 10 determinaciones como mnimo; en las cuales se debe de anotar

cuidadosamente los tiempos y las correspondientes absorbancias obtenidas.

7. Realizar con los otros ungentos el estudio siguiendo el mismo procedimiento.

75

BIBLIOGRAFA

1. Aiache, J.M.: Biofarmacia. 2ed. Ed. El Manual Moderno. Mxico D.F. 1983.

pp: 403-404. 2. Barr M. J Pharm Sci. 1962. 51(395).

3. Billups NF. J Pharm. Sci. 1969. 4(11). 4. Billups NF, Patel NK Am J Pharm. 1971. 35(190). 5. Gennaro AR, et al. Farmacia de Reminaton. L7 ed. Ed. Panamericana SA

Buenos Aires. 1989. 6. Jung H, et al. Bioequivalencia de Productos Comerciales que contienen

cido Acetilsaliclico. Revista Mexicana de Ciencias Farmacuticas. 1984. Vol 14(3). pp: 2-9.

7. Trinder P. Biochem. 1954. 57. pp: 301

8. United States Pharmacopeial Convention Inc.: The United States Pharmacooeial. U.S.A., 1985. pp: 707.

76


MODELO IN VITRO DE ABSORCIN PERCUTANEA

Nombre del estudiante:_________________________ Carn:________________

Laboratorio___________________________ Fecha:________________

Esquema del procedimiento


Resultados

CUADRO I: Datos correspondientes a la curva de calibracin

de la solucin de cido saliclico medidos a 525nm

Concentracin

(g/mL) Absorbancia (UA)

Ecuacin:

r: r2

77

CUADRO II: Medida de la masa del ungento Tipo de

Ungento

Masa de Pote

sin Ungento

Masa de Pote

mas

Ungento

Masa de

Ungento

Hidroflico

Cold Cream

Lipoflico

CUADRO III: Liberacin del cido saliclico a partir del ungento Hidroflico

Tiempo

min. ABS

Concentracin

g / mL

mg

Difundido Q-mg ln(Qmg)

Velocidad

2cmmin

mol

%

Difusin

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

CUADRO IV: Liberacin del cido saliclico a partir del ungento Lipoflico

Tiempo

min. ABS

Concentracin

g / mL

mg


Velocidad

2cmmin

mol

%

Difusin

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

78

CUADRO V: Liberacin del cido saliclico a partir del ungento Cold Cream

Tiempo

min. ABS

Concentracin

g / mL

mg


Velocidad

2cmmin

mol

%

Difusin

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

En el reporte debe aparecer:

1. Esquema del procedimiento.

2. Observaciones.

3. Resultados:

- Curva de calibracin y su grfica.

- Tabla % difundido vs el tiempo y su grfica. (milimtrico)

- Tabla % por difundir vs tiempo y su grfica. (milimtrico) - Tabla Velocidad de difusin vs tiempo y su grfica. (milimtrico)

4. Conclusiones

79

Materiales Laboratorio semana 4. Nmero de estudiantes mximo por Mesa 2

Prctica Modelo In vitro de Absorcin Percutnea Nmero Mximo de Mesas por Laboratorio 8


Frasco de vidrio capacidad 25 gramos con tapa de rosca perforada segn la

figura

6

Capsula porcelana grande capaz de contener 100 mL

6

Pipeta 5,00 Volumtrica mL 5

Prensa universal 6

Soporte metlico 6





Peras 6

Agua Destilada 1Litro

Vaselina al 3% p/p en cido saliclico 100 g

Crema Cold Cream al 3% p/p en cido saliclico

100 g

Gel Carbopol al 3% p/p acido saliclico 100 g

Papel toalla 1 rollo


Cronometro 1

Papel Celofn 1 pliego

Tijeras 1

Materiales curva de Calibracin a 297 nm



Pipeta graduada 10,00 mL 1

Goteros de vidrio 6

Espectrofotmetro UV -Visible 1




Solucin madre cido saliclico 0,500

g/L

100 mL

Agua destilada 1 Litro

Papel Toalla 1

Preparacin Reactivos Solucin de cido saliclico acidulada 0,004 mol /Litro Pesar exactamente una cantidad aproximada de 0,500 gramos de cido saliclico,

80

colocar lo en un baln aforado de 1 litro y llevarlo a volumen con agua destilada

acidulada. De ser necesario para disolver caliente levemente, o utilice ultrasonido Etiquetar adecuadamente..

Figura 1 Vista superior de la tapa del modelo

Figura 2 Vista normal del frasco del modelo

81

Figura 3 Modelo de absorcin Percutnea in Vitro

82

PRCTICA NO 5

MODELO IN VITRO DE ABSORCIN ORAL

Objetivo General: Describir mediante un modelo in vitro los clculos biofarmacuticos de

absorcin oral para el aprendizaje de este concepto fundamental en la prctica profesional farmacutica mediante el uso de herramientas

modernas y as facilitar el aprendizaje significativo de los contenidos de estudio.


Demostrar experimentalmente la variacin de la absorcin de un frmaco en el tracto gastrointestinal al pasar el tiempo utilizando el mtodo de Wagner Nelson.

Mostrar esquemticamente el proceso de absorcin oral de drogas en caso

de su administracin mediante el mtodode Wagner Nelson. Calcular experimentalmente la constante de absorcin de diferentes de una

droga mediante el mtodo de Wagner-Nelson

Equipo de Seguridad: Lentes de Seguridad, Gabacha, Zapatos Cerrados, Pantalones, Jabn para Manos, Guantes Desechables, Pao para Derrames.

Justificacin

Una de las principales vas de administracin extravasal, es la va oral. En esta va, la entrada del frmaco al organismo no es de forma instantnea, como

ocurre con la administracin intravenosa rpida (bolo i.v.); sino que esta va implica la presencia del proceso de absorcin, el cual consiste en el paso del frmaco a travs de una membrana semipermeable (pared del tracto gastrointestinal); lo cual

produce una disminucin en la cantidad de frmaco que logra llegar a la circulacin sistmica a partir de una dosis administrada. (1,2)

Comnmente, el proceso de absorcin sigue una cintica de orden uno; a

pesar de que muchas formas de dosificacin son slidos, y requieren sufrir un

proceso de disolucin previo a su absorcin. (1,2)

A continuacin se ejemplifica un esquema del proceso de administracin oral:

Ag en sitio de Ka Ac Kel absorcin en cuerpo

D Ael

83

(1,2)

La ecuacin diferencial que describe la cantidad de frmaco en el sitio de

absorcin es la siguiente:

dAg = -Ka * Ag0 dt

que se expresa tambin como,

dAg = -Ka * F * D dt

donde F corresponde a la fraccin de la dosis (D) que se absorbe. Al integrar la anterior ecuacin se obtiene una expresin matemtica, que permite obtener la

cantidad de frmaco con respecto al tiempo en el sitio de absorcin.

Ag = F * D * e-kat

(1,2)

La ecuacin diferencial que describe la cantidad de frmaco en el cuerpo es la siguiente:

dAc = ka * D - Kel * Cp * Vd dt

que al integrarse se convierte en la siguiente expresin matemtica:

Cp = Ka * F * D e-kelt - e-kat

Vd (ka Kel)

La anterior ecuacin describe el comportamiento de un frmaco en el cuerpo, despus de ser administrado por va oral, teniendo una representacin grfica como

la que se describe a continuacin. (1,2)

Tiempo

84

Un mtodo para calcular ka es el mtodo de Wagner-Nelson

Ventajas:

i) Los procesos de absorcin y eliminacin pueden ser muy similares y las determinaciones de ka que se pueden hacer son muy precisas.

ii) El proceso de absorcin no tiene que ser de primer orden. Este mtodo puede ser utilizado para investigar el proceso de absorcin. El orden del proceso no es necesario conocerlo.

Desventajas:

i) La principal desventaja de este mtodo es que necesita conocerse la

constante de eliminacin, a partir de los datos recogidos tras la administracin intravenosa.

ii) Se producen desviaciones cuando el frmaco presenta una cintica bicompartimental.

Teora: Las ecuaciones de trabajo se pueden derivar de la ecuacin de balance de

masa: -

Cantidad Absorbida = Cantidad en el cuerpo + cantidad eliminada 1

La ecuacin 1 ecuacin de balance de masa puede expresarse tambin

2

Diferenciar cada trmino con respecto al tiempo resulta: -

3

Que tambin puede expresarse como:

4

Multiplicando por el diferencial del tiempo dt queda la expresin:

85

5

La integracin de esta ecuacin sera: -

5

La ecuacin 5 seala la cantidad absorbida en funcin del tiempo

o

6

La ecuacin 6 describe la cantidad absorbida dividida por el volumen en funcin del tiempo

Tomando el rea de la curva de cp vs t hasta el infinito, donde Cp es igual a 0

7

Se obtiene la ecuacin 7 que expresa la Cantidad mxima absorbida dividida por el volumen de distribucin

Por ltimo (A max - A), es la cantidad restante por absorberse, tambin puede ser

expresado como la cantidad que queda en el Tracto gastrointestinal = Xg

8

La ecuacin 8 describe la Cantidad restante por absorberse

Podemos usar esta ecuacin para analizar el proceso de absorcin. Si la absorcin es de primer orden

86

o

As, una grfica de ln(A max - A) en funcin del tiempo dar una lnea recta para la absorcin de primer orden con una pendiente =-ka

Procedimiento 1. Preparar una curva estndar de Rojo 40 a partir de una solucin madre de

15mg/L.

2. Realizar un espectro de absorcin para el Rojo 40 utilizando la solucin de 15mg/L. Medir la absorbancia desde 485 hasta 515 nm cada 5 nm.

Curva de Estandarizacin

Conc. (g/ mL) Vol. Sln.

Madre(mL) Vol. final (mL)

2.1 3.5 25 3 5 25 6 10 25

9 15 25 12 20 25 15 25 25

Utilizar como blanco agua destilada.

3. Armar el siguiente equipo:

A

15 mL/min.

B

87

4. Determinar el volumen de distribucin (Va) del cuerpo (A) y (Vb) del cuerpo (B).

5. Graduar la llave de paso del depsito de solvente puro, de manera que la rapidez de flujo sea alrededor de 15 + 1 mL/min.

6. Determinar en el espectrofotmetro UV/VIS a una longitud de onda ptima

(aproximadamente 500 nm), la absorbancia para calcular la concentracin exacta de la solucin en mg/L.

7. Colocar en el beaker A un volumen de solucin de Rojo 40 igual a Va y en el beaker B un volumen de agua equivalente a Vb. Iniciar el proceso y tomar muestras

de 5 mL del recipiente A y del recipiente B a los 3, 6, 9, 12, 15, 20, 25, 30, 40, 50 y 60 minutos. Leer la absorbancia, devolver el contenido y continuar con el proceso. La agitacin debe ser continua.

8. El recipiente C; que representa el sitio de excrecin urinaria, es una probeta de 50 mL, la cual debe sustituirse por otra en cuanto se complete el volumen. Anote cuidadosamente los tiempos de recoleccin de los volmenes excretados y determine su absorbancia.

Bibliografa

1. Berrocal, L. ; Fonseca, L. Farmacocintica. Universidad de Costa Rica. Costa

Rica: 2009; pp 65-77.

2. www.boomer.org/c/p1 3. Gibaldi, M.; Perrier, D.: Farmacocintica. Ed. Revert S.A., Espaa, 1982, pp.

28-32. 4. Shargel, L.: A~olied Biopharmaceutics and Pharmacokinetics. Appleton

Century Crofts, New York, 1980, pp. 138-149.

B

C

88

PREREPORTE Y GUA PARA REALIZAR EL REPORTE UTILIZACIN DE UN MODELO HIDRULICO PARA REPRESENTAR UN MODELO

FARMACUTICO IN VITRO (VA ORAL)

Nombre del estudiante:_________________________ Carn:________________ Laboratorio___________________________ Fecha:_______________________ Objetivo General

Objetivos especficos


Resultados

Cuadro I

Curva de Calibracin del Rojo 40 Disuelto en Agua

Concentracin

(g/mL) Absorbancia (UA)

Ecuacin:

r: r2

89

Tiempo (min)

Absorbancia (UA)

Concentracin plasmtica (Cp) (ug/mL)

3

6

9

12

15

20

25

30

40

50

60

Tiempo (min)

Absorbancia (UA)

Concentracin plasmtica

(Cp) (ug/mL)

3

6

9

12

15

20

25

30

40

50

60

Tiempo (min)

Absorbancia (UA)

Concentracin plasmtica

(Cp) (ug/mL)

3

6

9

12

15

20

25

30

40

50

60

Cuadro II Concentracin Intestinal

de Rojo 40

Cuadro III Cantidad de Rojo 40 Excretado en

Orina

90

Aex.acum t Aex.acum

t tmid

3

3

3

3

3

3

3

3

3

3

3

3

3

3

3

3

3

Manual Biofarmacia

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