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LABORATORIO DE ANALISIS VETERINARIOS DR. BARBA C/Puerto Liner a, 14. 28935. Mostoles (Madrid). Phone 913645835. Fax 913658821 clientes@lbbarba.es www.lbbarba.es Fecha de recepci6n: 02-02-2018 ldentificaci6n de la muestra: 2289834 Animal: Milindres Especie: canina Propietario: Asociaci6n Refugio de Pedro Murioz Cu Galle Reyes Catolicos, 31 13620 Pedro Munoz (Ciudad Real) por almacenamiento o tratatamiento.Si cespues de 4 meses del tratamiento adulticida el test sigue siendo positivo, se recomienda repetir el lest 2 meses despues, y si aun as! es positivo, repetir el tratamiento. Determinaci6n de anticuerpos lgG anti "Leishmania inf antum", en suero, por inmunofluorescencia indirecta Resultado: 1/40 Valores de referencia indicativos: ANIMALES NO TRATADOS: Titulo inferior a 1/ 40: Negativo. Titulo 1/40 o 1 /80: probable animal expuesto. Se debe hacer un analisis hemato-bioqufmico (perfi l de leishmania completo) con ei finde valorar posibles alteraciones y el estadio en quese encuentra. Titulo 1/160, 1/320 o 1/640: Anima! expuesto o inf ectado. Se debe hacer un analisis hemato-bioquimico (perfil de leishmania completo) con el fin de valorar posibles alteraciones y el estadfo en que se encuentra. Si es posible se debe realizar tarnbien PCR (perfil de leishmania completo con PCR). Titulo 1/1280 o superior: animal inf ectado. Se debe hacer un analisis hemato-bioquimico (perfil de leishmania completo) con el fin de valorar posibles alteraciones y el estadio en quese encuentra. Si es posible se debe realizar tambien PCR (perfil de leishmania completo con PCR). Diagn6stico y tratamiento de Ja leishmaniosis canina (Protocolo del Grupo de Trabajo de Leishmaniosis Canina, existen otros protocolos igualmente valides) Etapa A (Expuesto): Sin alteraciones clinico-patol6gicas, no se detec tan parasitos y el tltulo no es rnavor de 4 veces el cut -orr (1/640). Son perros que no se tr atan. Etapa B (lnf ectado): Sin alteraciones cl fnico-patol6gicas. Se detectan parasitos (microscopia, cultivo o PCR) o titulos mayores de 4 veces el cut-off (1/640). Se siguen los protocolos de trat amientos habituales con antimoniales y alopurinol o alternativamente miltefosina y alopurinol o alopurinol solo. Etapa C (signos clinicos): Se observan alteraciones clinico-patol6gicas compatibles con leishmaniosis y adernäs detecci6n de parasitos (microscopia, cultivo o PCR) o titulos mayores de 4 veces el cut-off (1/640). Se siguen los protocolos de tratamientos habituales con antimoniales (pero puede ser aconse jable subdividir en dos dosis diarias y eventualmente duplicar la duraci6n) y alopurinol o alternativamente miltefosina y alopurinol o alopurinol solo. Etapa D (signos clinicos severos): Se observan alt eraciones clinico-patol6gicas con alguno de los siguientes problemas: 1) Nefropatia con proteinuria; 2) Fallo renal cr6nic o; 3) Trastorno ocular severo; 4) Trastorno articular severo; 5) Enfermedades concurrentes. En estos casos el tratamiento f alla con frecuencia. Etapa E (tratamient o total o parcialmente f allido): Deben tratarse las enf ermedades concurrent es en caso de existir y consider ar terapia alternativa. Monitorizaci6n de las etapas B y C: Despues de 4 a 8 semanas: Examen fisico completo y analisis hemato-bioquimico (proteinograma, hemograma, urea, creatinina y GPT) al terminar el tratamiento. Si los valores son normales se continüa tratamiento con alopurinol. Si los pararnetros no se normalizan o tienden a Ja normalizaci6n entonces el perro se asigna a la etapa E. f\ \ :' lABOHtOJUO o, :· · sÄis!1 \ ~ -· ,, l C/. PU$t t0 Linera, 14 \ ~- ~ Empr esa con sisterna de gesti6n de calidad certificada sequn norma UNE-EN ISO 9001:2008 por Bur eau Veritas con ell n~ ~i ~ M l l~ 'tc il~~&M ,_ · Carlos Barba, Procedimientos tecnicos aplicados en su realizaci6n: 23, 25, 584, 593. Alcance de la certificaci6n: diserio yJla rea~ p $Ma~ ~ rios de hematologia, bioquimica, microbiologia, seroloqla, PCR, inmunoensayo y parasitologia. Gestion de analisls de histopatqlogia. ,: -11,,.. 01 ".l~ A ?i Pag.2/3

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LABORATORIO DE ANALISIS VETERINARIOS DR. BARBA C/Puerto Linera, 14. 28935. Mostoles (Madrid). Phone 913645835. Fax 913658821 [email protected] www.lbbarba.es

Fecha de recepci6n: 02-02-2018

ldentificaci6n de la muestra: 2289834

Animal: Milindres Especie: canina Propietario:

Asociaci6n Refugio de Pedro Murioz Cu Galle Reyes Catolicos, 31

13620 Pedro Munoz (Ciudad Real)

por almacenamiento o tratatamiento.Si cespues de 4 meses del tratamiento adulticida el test sigue siendo positivo, se recomienda repetir el lest 2 meses despues, y si aun as! es positivo, repetir el tratamiento.

Determinaci6n de anticuerpos lgG anti "Leishmania infantum", en suero, por inmunofluorescencia indirecta

Resultado: 1/40

Valores de referencia indicativos: ANIMALES NO TRATADOS:

Titulo inferior a 1/40: Negativo. Titulo 1/40 o 1 /80: probable animal expuesto. Se debe hacer un analisis hemato-bioqufmico (perfil de leishmania completo) con ei finde valorar posibles alteraciones y el estadio en quese encuentra. Titulo 1/160, 1/320 o 1/640: Anima! expuesto o infectado. Se debe hacer un analisis hemato-bioquimico (perfil de leishmania completo) con el fin de valorar posibles alteraciones y el estadfo en que se encuentra. Si es posible se debe realizar tarnbien PCR (perfil de leishmania completo con PCR). Titulo 1/1280 o superior: animal infectado. Se debe hacer un analisis hemato-bioquimico (perfil de leishmania completo) con el fin de valorar posibles alteraciones y el estadio en quese encuentra. Si es posible se debe realizar tambien PCR (perfil de leishmania completo con PCR).

Diagn6stico y tratamiento de Ja leishmaniosis canina (Protocolo del Grupo de Trabajo de Leishmaniosis Canina, existen otros protocolos igualmente valides)

Etapa A (Expuesto): Sin alteraciones clinico-patol6gicas, no se detectan parasitos y el tltulo no es rnavor de 4 veces el cut-orr (1/640). Son perros que no se tratan. Etapa B (lnfectado): Sin alteraciones clfnico-patol6gicas. Se detectan parasitos (microscopia, cultivo o PCR) o titulos mayores de 4 veces el cut-off (1/640). Se siguen los protocolos de tratamientos habituales con antimoniales y alopurinol o alternativamente miltefosina y alopurinol o alopurinol solo. Etapa C (signos clinicos): Se observan alteraciones clinico-patol6gicas compatibles con leishmaniosis y adernäs detecci6n de parasitos (microscopia, cultivo o PCR) o titulos mayores de 4 veces el cut-off (1/640). Se siguen los protocolos de tratamientos habituales con antimoniales (pero puede ser aconsejable subdividir en dos dosis diarias y eventualmente duplicar la duraci6n) y alopurinol o alternativamente miltefosina y alopurinol o alopurinol solo. Etapa D (signos clinicos severos): Se observan alteraciones clinico-patol6gicas con alguno de los siguientes problemas: 1) Nefropatia con proteinuria; 2) Fallo renal cr6nico; 3) Trastorno ocular severo; 4) Trastorno articular severo; 5) Enfermedades concurrentes. En estos casos el tratamiento falla con frecuencia. Etapa E (tratamiento total o parcialmente fallido): Deben tratarse las enfermedades concurrentes en caso de existir y considerar terapia alternativa.

Monitorizaci6n de las etapas B y C:

Despues de 4 a 8 semanas: Examen fisico completo y analisis hemato-bioquimico (proteinograma, hemograma, urea, creatinina y GPT) al terminar el tratamiento. Si los valores son normales se continüa tratamiento con alopurinol. Si los pararnetros no se normalizan o tienden a Ja normalizaci6n entonces el perro se asigna a la etapa E.

f\\ :' lABOHtOJUO o,:··sÄis!1 \ ~ -· ,, l C/. PU$tt0 Linera, 14 \ ~- ~

Empresa con sisterna de gesti6n de calidad certificada sequn norma UNE-EN ISO 9001:2008 por Bureau Veritas con elln~~i~Mll~'tcil~~&M ,_ · Carlos Barba, Procedimientos tecnicos aplicados en su realizaci6n: 23, 25, 584, 593. Alcance de la certificaci6n: diserio yJla rea~p $Ma~~rios de hematologia, bioquimica, microbiologia, seroloqla, PCR, inmunoensayo y parasitologia. Gestion de analisls de histopatqlogia. ,:-11,,..

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Fecha de recepci6n: 02-02-2018

ldentificaci6n de la muestra: 2289834

Animal: Milindres Especie: canina

Propietario:

Asociaci6n Refugio de Pedro Murioz Cu

Calle Reyes Catolicos, 31

13620 Pedro Munoz (Ciudad Real)

Despues de 6 meses: Examen fisico completo y perfil de leishmania completo (que incluye ademas tftulo de anticuerpos) y si es posible carga parasitaria en ganglio o medula. Si hay recaida volver al protocolo inicial de tratamiento o a uno alternativo.

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i Cl. Puerto t.lnera, 1-4 .. Empresa con sistema de gesti6n de calidad certificada sequn norma UNE-EN ISO 9001:2008 por Bureau Veritas con elln~~~J~SJtit..~~&00 Carlos Barba. Procedimientos tecnicos aplicados en su realizaci6n: 23, 25, 584, 593. Alcance de la certificaci6n: diseiio yfla rea~r ~a~ ~rios e de hematologia, bioquimica, microbiologia, serologia, PCR, inmunoensayo y parasitologia. Gestion de analisis de histopatöloqla. ,:.,.,.. Qi ':tQ<';ua ?i

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Fecha de recepci6n: 02-02-2018

ldentificaci6n de la muestra: 2289834

Animal: Milindres Especie: canina

Propietario:

Asociaci6n Refugio de Pedro Muüoz CiL

Galle Reyes Catolicos, 31

13620 Pedro Munoz (Ciudad Real)

IN FORME DE RESUL TADOS ANALITICOS

DeterminaciÄ3n de DNA de "Leishmania infantum", mediante PCR (ReacciÄ3n en Cadena de la Polimerasa)

Resultado: Negativa

Valores de referencia indicativos: Se trata de una Real-Time PCR en el que se utiliza una sonda para garantizar la especificidad de Ja reacci6n. Sensibilidad: 0.001 parasitos/ml. Correlaci6n con IFI: 90% lnterpretaci6n de resultados:

Carga parasitaria baja: inferior a 30 parasitos/ml. En estos casos debe prevalecer en Ja decisi6n de instaurar o no un tratamiento el estado clinico de! perro. Si no se instaura tratamiento debe repetirse el PCR en un plazo de 3 meses.

Carga parasitaria alta: superior a 30 parasitos/ml. La mayor parte de estos perros deberan tratarse, aunque en ultima instancia Ja decisi6n debe corresponder al veterinario.

Corno queda descrito con claridad en la literatura, existen gran nürnero de perros seropositivos y/o con PCR positive que no tienen sintomas de leishmaniosis, con lo que la decisi6n de tratar o no a estos perros es complicada de tomar, pudiendo apoyarse en el grado de parasitemia como criterio.

Existen casos de leishmaniosis cutaneas y articulares que pueden dar el PCR en sangre negative. En estos casos se recomienda repetir la prueba en piel o liquido sinovial. Esta repetici6n se realizara sin cargo adicional. Para cualquier duda en la interpretaci6n de los resultados Je rogamos que contacte con nosotros. Se utiliza la tecnica descrita en Francino, Alte!, Solano-Gallego y otros, en Veterinary Parasitology (2006).

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Empresa con sistema de gesti6n de calidad certificada sequn norma UNE-EN ISO 9001 :2008 por Bureau Veritas con e1/n.i#~~3~~tQL~~&M . 1d~6n: Carlos Barba. Procedimientos tecnicos aplicados en su realizaci6n: 14, 23, 25, 65, 93, 101, 173, 218, 221, 256, 366, 367,1368, 3fl!f. .. ,7.0{W. 13~. 452, 456, 457, 471, 579, 580, 581, 582, 584, 593. Alcance de la certificaci6n: d.seno y la realizaci6n de anatisis vete1narios~~J<;1si;Ne~

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ldentificaci6n de la muestra: 2289834 Animal: Milindres Especie: canina Propietario:

Asociaci6n Refugio de Pedro Munoz CiL

Galle Reyes Catolicos, 31

13620 Pedro Munoz (Ciudad Real)

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Fecha de recepci6n: 02-02-2018

ldentificaci6n de la muestra: 2289834

Animal: Milindres Especie: canina

Propietario:

Asociaci6n Refugio de Pedro Munoz Cu

Galle Reyes Catolicos, 31

13620 Pedro Munoz (Ciudad Real)

INFORME DE RESUL TADOS ANALiTICOS Prueba Urea Creatinina

Resultado 40 1.91

Unidades mg/100 ml mg/100 ml

GPT (ALT) Protefnas totales

105 5.95

U/1 g/100 ml

Valores de referencia 10 a 50 Razas pequefias {inf a 10 kg): 0.5 a 1.1 Razas medianas (10-25 kg): 0.7 a 1.4 Razas grandes o muy grandes (superior a 25 lsg): O.Ta 1.7 Galqos: 0.7 a 2.0

5 a 90 5,7 a 7,7

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Empresa con sistema de gesti6n de calidad certificada sequn norma UNE-EN ISO 9001:2008 por Bureau Veritas con edn~:i:J~S,i't;Qt,~~,M-' 11fii';i6n: Carlos Barba. Procedimientos tecnicos aplicados en su realizaciön: 14, 23, 25, 65, 93, 101, 173, 218, 221, 256, 366, 367,1368, ~tfü~,;a~. , , 375, ·376, 451, 452, 456, 457, 471, 579, 580, 581, 582, 584, 593. Alcance de la certificacion: diseno y la realizaci6n de anäüsts vete1narios~_J;)J,;1Sef1+e9i~~ogfa, bioqll~iaa.

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ldentificaci6n de la muestra: 2289834

Animal: Milindres Especie: canina

Propietario:

Asociaci6n Refugio de Pedro Murioz Cu

Calle Reyes Catolicos, 31

13620 Pedro Murioz (Ciudad Real)

IN FORME DE RESUL TADOS ANALITICOS

Babesia canis IFI

Resultado: inferior a 1 /40

Valores de referencia indicativos: Tftulo inferior a 1/40: NEGATIVO. Titulo 1 /40 o superior: POSITIVO. lnfecci6n por "Babesia canis". Les recordamos que esta disponible la prueba de piroplasmosis por PCR, que tiene las ventajas de ser 50 veces mäs sensible y ademas detectar todas Ja especies de babesia y theileria. Seqün nuestros datos, solo una parte de las piroplasmosis estas causadas por "B. canis", por lo que es casi imprescindible realizar Ja prueba de PCR en los negativos. Para controlar la eficacia de los tratamientos es necesario realizar Ja prueba de PCR, debido a que los anticuerpos anti-babesia son persistentes.

Determinaci6n de anticuerpos lgG anti Ehrlichia canis, en suero, por inmunofluorescencia indirecta

Resultado: inferior a 1 /20

Valores de referencia indicativos: Titulo inferior a 1/20: NEGATIVO. Tftulo 1/20 A 1/50: sospecha de infecci6n por "Ehrlichia canis" 1/100 o superior: exposici6n a "Ehrlichia canis". Puede indicar o no infecci6n activa. Esta prueba no debe ser utilizada para monitorizar la respuesta al tratamiento, ya que los anticuerpos anti ehrlichia son extremadamente persistentes. Para valorar animales tratados se debe utilizar Ja Ehrlichiosis PCR o el proteinograma.

Determinaci6n de antfgeno de "Dirofilaria inmitis", en suero, por enzimoinmunoanalisis

Resultado: Negativa

Valores de referencia indicativos: Negativo < 31%Dudoso 32-35%Positivo bajo 35-80%Positivo medio 80-150%Positivo elevado >150%Este lest detecta antigeno de adulto de Dirofilaria inmitis, que aparecen en perros a los 5-6 meses de Ja infestaci6n. Despues de 6 meses los adultos maduros pueden reproducirse con otro adulto de distinto sexo y aparecerian microfilarias en sangre periferica. Un resultado positivo sin quese observen microfilarias puede deberse a Ja presencia de parasitos de un unico sexo, destrucci6n inmunomediada de microfilarias, tratamientos larvicidas o a Ja presencia de adultos inmaduros. Un resultado negativo en animal con microfilarias se puede deber a que la filaria es otra que D.inmitis, a Ja formaci6n de complejos Ag/Ac, a tratamientos adulticidas, transferencia prenatal de microfilarias o destrucci6n del Ag

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