immulite 1000 3

FSH

For use on the IMMULITE®

and IMMULITE® 1000 systems

IMMULITE®/IMMULITE® 1000 FSH

2 IMMULITE/IMMULITE 1000 FSH (PILKFS-8, 2005-03-15)

English

Intended Use: For in vitro diagnostic usewith the IMMULITE and IMMULITE 1000Analyzers — for the quantitativemeasurement of follicle stimulatinghormone (FSH, follitropin) in serum, as anaid in the diagnosis and treatment ofpituitary and gonadal disorders.Catalog Number: LKFS1 (100 tests),LKFS5 (500 tests)Test Code: FSH Color: Light GrayCDC Analyte Identifier Code: 1908CDC Test System Identifier Code: 10159CLIA Complexity Category: Moderate

Summary and ExplanationFollicle stimulating hormone (follitropin,FSH) is secreted by the β-cells of theanterior pituitary under the control of thegonadotropin releasing hormone producedin the hypothalamus. FSH facilitates thedevelopment and maintenance of gonadaltissues, which synthesize and secretesteroid hormones. Circulating levels ofFSH are controlled by a negative feedbackmechanism on the hypothalamus bysteroidal hormones. Although FSH and LHare required for normal sexual function inboth males and females, the secretorypatterns are very different for the twosexes.In mature females, FSH initiates thegrowth and development of ovarianfollicles. During ovulation, when the follicleis ruptured, the follicle, now called thecorpus luteum, secretes estradiol andprogesterone, which control the circulatinglevels of FSH by a negative feedbackeffect on the hypothalamus. Inmenopause, with diminished ovarianfunction, there is a resulting decrease inestradiol secretion. Due to the lack of anegative feedback effect, with diminishedestradiol, the circulating FSH levelsbecome significantly increased.

In the mature male, FSH is associatedwith the stimulation and maintenance ofspermatogenesis. Testosterone andestradiol have the role of providing thenegative feedback signal to the

hypothalamus for controlling the release ofFSH. Infertility in males may be due tohypogonadism as a result of primarytesticular failure. Testicular failure may befunctional failure to mature, or a result ofgerm cell damage. Whatever the etiology,the conditions of hypogonadism have thenet result of dramatically raising thecirculating FSH levels, due to the lack of anegative feedback effect.

Principle of the ProcedureIMMULITE/IMMULITE 1000 FSH is asolid-phase, two-site chemiluminescentimmunometric assay.Incubation Cycles: 1 × 30 minutes.

Specimen CollectionThe use of an ultracentrifuge isrecommended to clear lipemic samples.

Hemolyzed samples may indicatemistreatment of a specimen before receiptby the laboratory; hence the results shouldbe interpreted with caution.

EDTA plasma should not be used as asample type.Centrifuging serum samples before acomplete clot forms may result in thepresence of fibrin. To prevent erroneousresults due to the presence of fibrin,ensure that complete clot formation hastaken place prior to centrifugation ofsamples. Some samples, particularlythose from patients receivinganticoagulant therapy, may requireincreased clotting time.Blood collection tubes from differentmanufacturers may yield differing values,depending on materials and additives,including gel or physical barriers, clotactivators and/or anticoagulants.IMMULITE/IMMULITE 1000 FSH has notbeen tested with all possible variations oftube types. Consult the section onAlternate Sample Types for details ontubes that have been tested.

Volume Required: 50 µL serum. (Samplecup must contain at least 100 µL morethan the total volume required.)Storage: 7 days at 2–8°C or2 months at –20°C.

IMMULITE/IMMULITE 1000 FSH (PILKFS-8, 2005-03-15) 3

Warnings and PrecautionsFor in vitro diagnostic use.Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.

Follow universal precautions, and handleall components as if capable oftransmitting infectious agents. Sourcematerials derived from human blood weretested and found nonreactive for syphilis;for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitisB surface antigen; and for antibodies tohepatitis C.Sodium azide, at concentrations less than0.1 g/dL, has been added as apreservative. On disposal, flush with largevolumes of water to prevent the buildup ofpotentially explosive metal azides in leadand copper plumbing.Chemiluminescent Substrate: Avoidcontamination and exposure to directsunlight. (See insert.)Water: Use distilled or deionized water.

Materials SuppliedComponents are a matched set. Thebarcode labels are needed for the assay.

FSH Test Units (LFS1)Each barcode-labeled unit contains onebead coated with monoclonal murine anti-FSH. Stable at 2–8°C until expiration date.LKFS1: 100 units. LKFS5: 500 units.

Allow the Test Unit bags to come to roomtemperature before opening. Open bycutting along the top edge, leaving theziplock ridge intact. Reseal the bags toprotect from moisture.

FSH Reagent Wedge (LFS2)With barcode. 7.5 mL alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to murine monoclonalanti-FSH antibody in buffer, withpreservative. Store capped andrefrigerated: stable at 2–8°C untilexpiration date. Recommended usage iswithin 30 days after opening when storedas indicated.LKFS1: 1 wedge. LKFS5: 5 wedges.

FSH Adjustors (LFSL, LFSH)Two vials (Low and High), 3.0 mL each, ofFSH in a nonhuman serum matrix, withpreservative. Stable at 2–8°C for 30 days

after opening, or for 6 months (aliquotted)at –20°C.LKFS1: 1 set. LKFS5: 2 sets.

Kit ComponentsSupplied Separately

FSH Sample Diluent (LFSZ)For the manual dilution of patient samples.One vial containing 25 mL of an FSH-freenonhuman serum matrix, withpreservative. Stable at 2–8°C for 30 daysafter opening, or for 6 months (aliquotted)at –20°C.LSUBX: Chemiluminescent SubstrateLPWS2: Probe Wash ModuleLKPM: Probe Cleaning KitLCHx-y: Sample Cup Holders (barcoded)LSCP: Sample Cups (disposable)LSCC: Sample Cup Caps (optional)CON6: Tri-level, multi-constituent controlAlso RequiredSample transfer pipets, distilled ordeionized water, controls.

Assay ProcedureNote that for optimal performance, it isimportant to perform all routinemaintenance procedures as defined in theIMMULITE or IMMULITE 1000 Operator'sManual.See the IMMULITE or IMMULITE 1000Operator's Manual for: preparation, setup,adjustment, assay and quality controlprocedures.Visually inspect each Test Unit for thepresence of a bead before loading it ontothe system.

Recommended Adjustment Interval:4 weeks.Quality Control Samples: Use controlsor sample pools with at least two levels(low and high) of FSH.

Expected ValuesReference ranges were generated usingIMMULITE FSH (mono/poly) in a multi-national study involving women inapparent good health (age: 16 – 44years), who volunteered to have bloodsamples drawn, on a daily basis,throughout one complete ovulatory cycle.(See “Menstrual Cycle” graph.)


FSH, mIU/mL

Ovulatory Cycles n* Median Central 95%

Follicular Phase 54 (762) 6.2 2.8 – 11.3

Follicular Phase,Days 2 to 3 54 (108) 6.6 3.0 – 14.4

Midcycle 54 (54) 13.6 5.8 – 21

Luteal Phase 54 (604) 3.4 1.2 – 9.0*Number of subjects (total number of results)

The table below summarizes results foradult males and (untreated)postmenopausal females from studies withIMMULITE FSH (mono/poly). The rangesfor women on oral contraceptives and forpostmenopausal women on ERT arebased on the assay's relationship toDPC's Coat-A-Count FSH IRMA.

FSH, mIU/mL

Group n Median Central 95%

Adult Males 135 3.8 0.7 – 11.1

Adult Females:

Postmenopausal* 76 90.5 21.7 – 153

Postmenopausal(ERT)

16 27 9.7 – 111

Oral Contraceptives 12 1.7 ND – 4.9*PreliminaryND: not detectable

A cross-sectional study of pediatric valuesperformed with IMMULITE FSH(mono/poly) at a "wellness" clinic in thesouthwestern United States yielded thefollowing results.

FSH, mIU/mL

Group Age (yr) n Median Central 95%

Females Cord 30 ND

0.1 – 3 57 2.3 0.11 – 13

4 – 9 28 0.8 0.11 – 1.6

Males Cord 37 0.24 ND – 1.2

0.1 – 3 72 0.6 ND – 5.5

4 – 9 31 0.23 ND – 1.9

Combined Cord 67 0.11 ND – 1.1

0.1 – 3 129 1.1 ND – 10

4 – 9 59 0.5 ND – 1.8

ND: not detectable

Consider these limits as guidelines only.Each laboratory should establish its ownreference ranges.

LimitationsIn certain cases of infertility, treatment withhuman gonadotropins poses a potentialproblem for the accurate measurement ofFSH levels. The FSH that is administeredcan cause the patient to produceantibodies to FSH which will interferedirectly with the assay.Because of pulsatile secretion, samplesobtained within the same day from thesame patient may fluctuate widely withinthe reference range, reflectingphysiological variation rather than errors intechnique or methodology.

Because EDTA would have a significanteffect on results, it should not be used asan anticoagulant.Heterophilic antibodies in human serumcan react with the immunoglobulinsincluded in the assay components causinginterference with in vitro immunoassays.[See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinelyexposed to animals or animal serumproducts can demonstrate this type ofinterference potentially causing ananomalous result. These reagents havebeen formulated to minimize the risk ofinterference; however, potentialinteractions between rare sera and testcomponents can occur. For diagnosticpurposes, the results obtained from thisassay should always be used incombination with the clinical examination,patient medical history, and other findings.

Performance DataSee Tables and Graphs for datarepresentative of the assay's performance.Results are expressed in mIU/mL. (Unlessotherwise noted, all were generated onserum samples collected in tubes withoutgel barriers or clot-promoting additives.)Calibration Range: up to 170 mIU/mL(8.9 ng/mL) [WHO 2nd IRP 78/549][interim replacement code 94/632].Analytical Sensitivity: 0.1 mIU/mL

High-dose Hook Effect: None up to50,000 mIU/mL.Precision: Samples were assayed induplicate in 40 runs for a total of 80replicates. (See “Precision” table.)


Linearity: Samples were assayed undervarious dilutions. (See "Linearity" table forrepresentative data.)Recovery: Samples spiked 1 to 19 withthree FSH solutions (150, 600 and1,800 mIU/mL) were assayed. (See"Recovery" table for representative data.)Specificity: The antibody is highly specificfor FSH. (See "Specificity" table.)Bilirubin: Presence of bilirubin inconcentrations up to 200 mg/L has noeffect on results, within the precision of theassay.Hemolysis: Presence of hemoglobin inconcentrations up to 600 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.Lipemia: Presence of triglycerides inconcentrations up to 3,000 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.Alternate Sample Type: To assess theeffect of alternate sample types, bloodwas collected from 24 volunteers intoplastic Becton Dickinson plain serum,heparinized, EDTA and SST® vacutainertubes. All samples were assayed by theIMMULITE FSH procedure(Heparin) = 1.10 (Serum) + 0.65 mIU/mL

(SST) = 0.94 (Plain Tubes) + 0.12 mIU/mL

(EDTA) = 0.88 (Serum) + 0.57 mIU/mL

Means:11.7 mIU/mL (Serum)13.5 mIU/mL (Heparin)11.5 mIU/mL (SST)10.8 mIU/mL (EDTA)

EDTA plasma should not be used as asample type.Method Comparison: The IMMULITEFSH mono/mono assay was compared toDPC's IMMULITE FSH mono/poly assayon 431 samples. (Concentration range:approximately 0.7 to 130 mIU/mL. Seegraph.) By linear regression:

(IML m/m) = 0.90 (IML m/p) + 0.35 mIU/mLr = 0.990

Means:31.4 mIU/mL (IMMULITE mono/mono)34.5 mIU/mL (IMMULITE mono/poly)

References1) Santner S, Santen R, Kulin H, Demers L. Amodel for validation of radioimmunoassay kit

reagents: measurement of follitropin and lutropinin blood and urine. Clin Chem 1981;27:1892-5. 2) Odell W, et al. Radioimmunoassay forluteinizing hormone in human plasma or serum.J Clin Invest 1967;46:248-55. 3) Davidsohn I,Henry J, editors. Clinical diagnosis by laboratorymethods. 15th ed. Philadelphia: W.B. Saunders,1974: 704. 4) Nankin H, et al. Repetitiveluteinizing hormone elevations in serum ofnormal men. J Clin Endo Metab 1972;33:558-60. 5) Beitens I, et al. Gonadotropin determinationsin timed 3-hour urine collections during themenstrual cycle and LHRH testing. J Clin EndoMetab 1976;43:46-55. 6) Chipman J, et al.Interrelationship of plasma and urinarygonadotropins: correlations for 24 hours, forsleep/wake periods, and for 3 hours afterluteinizing hormone-releasing hormonestimulation. Clin Endo Metab 1981;52:225-30. 7) Kulin H, et al. Integration of pulsatilegonadotropin secretion by timed urinarymeasurements: an accurate and sensitive 3-hour test. J Clin Endo Metab 1975;40:783-9. 8)Kulin H, Santner S. Timed urinary gonadotropinmeasurements in normal infants, children, andadults, and in patients with disorders of sexualmaturation. J Pediatrics 1977;90:760-5. 9)Urban M, et al. Comparison of estimates ofgonadotropin levels by isolated blood samples,integrated blood concentrations, and timedurinary fractions. J Clin Endo Metab1979;48:732-5. 10) Rebar R, Yen S. In: DorothyKrieger, editor. Endocrine rhythms. New York:Raven Press, 1979. 11) Odell WD, et al.Radioimmunoassay for human follicle-stimulating hormone: physiological studies. JClin Invest 1968;47:2551-62. 12) Sutaria UE,Crooke AC. Selection of patients for treatmentwith human gonadotrophins. Int J Fertil1971;16:42-6. 13) Babson, AL. The IMMULITEAutomated Immunoassay System. J ClinImmunoassay 1991;14:83-88. 14) NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards.Procedures for the collection of diagnostic bloodspecimens by venipuncture; approved standard.4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA:NCCLS, 1998.

Technical AssistanceIn the United States, contact DPC'sTechnical Services department.Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828Fax: 973.927.4101. Outside the UnitedStates, contact your National Distributor.Manufactured by EURO/DPC Ltd. under aQuality System registered to ISO 13485:2003.


Tables and Graphs

Precision (mIU/mL)

Within-Run1 Total2

Mean3 SD4 CV5 SD CV

1 5.7 0.15 2.6% 0.33 5.8%

2 19.4 0.59 3.0% 1.04 5.4%

3 38.5 0.89 2.3% 2.13 5.5%

4 58.8 2.14 3.6% 3.60 6.1%

5 87.0 3.18 3.7% 5.81 6.7%

Linearity (mIU/mL)

Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 8 in 85 8.95 — —

4 in 8 4.50 4.48 100%

2 in 8 2.36 2.24 105%

1 in 8 1.16 1.12 104%

2 8 in 8 13.6 — —

4 in 8 7.42 6.80 109%

2 in 8 3.73 3.40 110%

1 in 8 1.95 1.70 115%

3 8 in 8 27.8 — —

4 in 8 14.9 13.9 107%

2 in 8 7.67 6.95 110%

1 in 8 3.81 3.48 109%

4 8 in 8 53.8 — —

4 in 8 26.8 26.9 100%

2 in 8 13.9 13.5 103%

1 in 8 7.11 6.73 106%

5 8 in 8 68.1 — —

4 in 8 37.2 34.1 109%

2 in 8 21.0 17.0 124%

1 in 8 11.1 8.51 130%

6 8 in 8 109 — —

4 in 8 53.1 54.5 97%

2 in 8 28.7 27.3 105%

1 in 8 14.7 13.6 108%

Recovery (mIU/mL)

Solution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 — 1.45 — —

A 9.42 8.88 106%

B 30.8 31.4 98%

C 98.1 91.4 107%

2 — 4.34 — —

A 12.9 11.6 111%

B 34.6 34.1 101%

C 107 94.1 114%

3 — 4.88 — —

A 12.5 12.1 103%

B 33.4 34.6 97%

C 105 94.6 111%

4 — 52.8 — —

A 60.0 57.7 104%

B 83.8 80.2 104%

C 169 140 121%

Specificity

Added2

Compound1 ng/mL

ApparentFSH

ng/mL% Crossreactivity3

HCGmIU/mL

2,000200,000

21521,538

NDND

NDND

TSHuIU/mL

10200

2.040.5

NDND

NDND

LHmIU/mL

75300

7.630.5

NDND

NDND

Prolactinng/mL

25200

25200

NDND

NDND

HGHng/mL

5.050

5.050

NDND

NDND

HPLng/mL

10,00050,000

10,00050,000

NDND

NDND

ND: not detectable.4


Menstrual Cycle

IMMULITE FSH (LKFS)

Cycle Day: Normalized to LH Peak-24 -18 -12 -6 0 6 12 18

Follit

ropi

n, m

IU/m

L [7

8/54

9]0

510

1520

Method Comparison

0

50

100

150

0 50 100 150

IMMULITE FSH (m/p), mIU/mL

IMM

ULIT

E FS

H (m

/m)

(IML m/m) = 0.90 (IML m/p) + 0.35 mIU/mLr = 0.990

Deutsch. Intraassay Precision: 1Mittelwert,2SD (Standardbereich), 3CV(Variationskoeffizient). Interassay Precision:1Mittelwert, 2SD (Standardbereich), 3CV(Variationskoeffizient). Linearity: 1Verdünnung,2Beobachtet (B), 3Erwartet (E), 4% B/E, 58 in 8.Recovery: 1Lösung, 2Beobachtet (B), 3Erwartet(E), 4% B/E. Specificity: 1Verbindung,2zugesetzte Menge, 3AusgewieseneKonzentration, 4% Kreuzreaktivität, 5NN: Nichtnachweisbar. Method Comparison: FSH: FSH.

Español. Intraassay Precision: 1Media, 2DS,3CV. Interassay Precision: 1Media, 2DS, 3CV.Linearity: 1Dilución, 2Observado (O), 3Esperado(E), 4%O/E, 58 en 8. Recovery: 1Solución,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E.Specificity: 1Compuesto, 2Cantidad añadida,3Concentración aparente, 4% Reacción cruzada,5ND: no detectable. Method Comparison: FSH:FSH.

Français. Intrraassay Precision: 1Moyenne,2SD, 3CV. Interassay Precision: 1Moyenne,2SD, 3CV. Linearity: 1Dilution, 2Observé (O),3Attendu (A), 4%O/A, 58 dans 8. Recovery:1Solution, 2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A.

Specificity: 1Composé, 2ajouté, 3 Concentrationapparente, 4Réaction croisée%. 5ND: nondétectable. Method Comparison: FSH: FSH.

Italiano. intraassay Precision: 1Media, 2SD(Deviazione Standard), 3CV (Coefficiente diVariazione). Interassay Precision: 1Media, 2SD(Deviazione Standard), 3CV (Coefficiente diVariazione). Linearity: 1Diluizione, 2Osservato(O), 3Atteso (A), 4%O/A, 58 in 8. Recovery:1Soluzione, 2Osservato (O), 3Atteso (A), 4%O/A.Specificity: 1Composto, 2quantità aggiunta, 3Concentrazione apparente, 4Percentuale diCrossreattività, 5ND: non determinabile. MethodComparison: FSH: FSH.

Português. Intraassay Precision: 1Média,2Desvio padrão, 3Coeficiente de variação.Interassay Precision: 1Média, 2Desvio padrão,3Coeficiente de variação. Linearity: 1Diluição,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E, 58 em 8.Recovery: 1Solução, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E. Specificity: 1Composto,2Quantidade adicionada, 3ApparentConcentration, 4Percentagem de reacçãocruzada, 5ND: não detectável. MethodComparison: FSH: FSH.

Deutsch

FSH IMMULITEAnwendung: Zur in vitro-Diagnostik unterVerwendung der IMMULITE undIMMULITE 1000 Systeme – zurquantitativen Messung von Follikelstimulierendes Hormon (Follitropin, FSH)im Serum, als Hilfe bei der Diagnose undBehandlung von Störungen derHypophysen- und Gonadenfunktion.

Artikelnummern:LKFS1 (100 Tests)LKFS5 (500 Tests)Testcode: FSH Farbe: hellgrau

Klinische RelevanzFollikel stimulierendes Hormon (Follitropin,FSH) wird durch die B-Zellen desvorderen Hypophyselappensausgeschieden und unterliegt derKontrolle durch das GonadotropinReleasing Hormon des Hypothalamus.FSH ermöglicht die Entwicklung undErhaltung des gonadalen Gewebes, dasdie Steroidhormone synthetisiert undfreisetzt. Die zirkulierenden FSH-Spiegelwerden durch die steroidalen Hormoneüber einen negativenRückkopplungsmechanismus auf den


Hypothalamus gesteuert. Obwohl FSHund LH zur normalen sexuellen Funktionbeider Geschlechter erforderlich sind,zeigen sich erhebliche Unterschiede imsekretorischen Muster für Männer undFrauen.Bei Frauen im fertilen Alter, initiiert dasFSH das Wachstum und die Entwicklungovarieller Follikel. Während der Ovulation,nach dem Aufbrechen des Follikels,produziert der Follikel, jetzt Corpusluteum, Östradiol und Progesteron. Diesebeiden Hormone regulieren diezirkulierenden FSH-Spiegel über einenegative Rückkopplung auf denHypothalamus. In der Menopause kommtes auf Grund der verringerten ovariellenFunktion zu einer merklichenAbschwächung der Östradiol-Freisetzung.Das Fehlen einer Östradiol gesteuertennegativen Rückkopplung, verursachteinen beträchtlichen Anstieg der FSH-Konzentrationen.Im erwachsenen Mann ist das FSHassoziiert mit der Stimulation undAufrechterhaltung der Spermatogenese.Testosteron und Östradiol haben dieAufgabe das negativeRückkopplungssignal zum Hypothalamuszu unterstützen, um die Freisetzung desFSH zu kontrollieren. Die Infertilität beiMännern kann in einem Hypogonadismusbegründet sein, der auf primäre testikuläreStörungen zurückzuführen ist. TestikuläreStörungen können funktionelle Störungenin der Reifung zugrundeliegen. Aber auchdie Zerstörung von Keimzellen kann zugleichen Symptomen führen. Was auchimmer die ätiologische Ursache ist, Hypo-gonadismus führt im Ergebnis zu einemdramatischen Anstieg der meßbaren FSH-Konzentrationen, da der negativeRückkopplungseffekt nicht greifen kann.

MethodikDer IMMULITE/IMMULITE 1000 FSH istein Festphasen-, Zweischritt-,Chemilumineszenz-, ImmunometrischerAssay.Inkubationszyklen: 1 × 30 min.

ProbengewinnungDer Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zurKlärung von lipämischen Probenempfohlen.

Bei hämolysierten Proben besteht dieMöglichkeit einer unsachgemäßenHandhabung vor Eintreffen im Labor,daher sind die Ergebnisse zurückhaltendzu interpretieren.

EDTA-Plasma ist als Probenart nichtgeeignet.Die Zentrifugation der Serumproben vordem völligen Abschluss der Gerinnungkann zu Fibringerinnseln führen. Umfehlerhaften Analysenergebnissen infolgevon Gerinnseln vorzubeugen, istsicherzustellen, dass die Gerinnung vorder Zentrifugation der Proben vollständigabgeschlossen ist. Insbesondere Probenvon Patienten unter Antikoagulantien-therapie können eine verlängerteGerinnungszeit aufweisen.Blutentnahmeröhrchen von verschiedenenHerstellern können differierende Werteverursachen. Dies hängt von denverwendeten Materialien und Additiven(Gel oder physische Trennbarrieren,Gerinnungsaktivatoren und /oderAntikoagulantien) ab.IMMULITE/IMMULITE 1000 FSH sindnicht mit allen möglichenRöhrchenvariationen ausgetestet worden.Details der getesteten Röhrchenarten sinddem Kapitel "Alternative Probenarten" zuentnehmen.Erforderliche Menge: 50 µl Serum.(Inhalt der Probenschale mussmindestens 100 µl über der erforderlichenGesamtmenge liegen.)Lagerung: 7 Tage bei 2–8°C oder2 Monate bei –20°C.

Hinweise undVorsichtsmaßnahmenZur In-vitro-Diagnostik.

Reagenzien: Bei 2–8°C lagern. UnterEinhaltung der geltenden gesetzlichenVorschriften entsorgen.Die generell geltendenVorsichtsmaßnahmen sind einzuhaltenund alle Komponenten als potenziellinfektiös zu behandeln. Alle ausmenschlichem Blut gewonnenenMaterialien wurden auf Syphilis,Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2,Hepatitis-B-Oberflächenantigen undHepatitis-C-Antikörper untersucht undnegativ befundet.


Bestimmten Komponenten wurdeNatriumazid (<0,1 g/dl) hinzugefügt. Umdie Bildung von explosiven Metallaziden inBlei- und Kupferrohren zu vermeiden,sollten die Reagenzien nur zusammen mitgroßen Wassermengen in die Kanalisationgespült werden.Chemilumineszenz-Substrat:Kontamination und direkteSonneneinstrahlung vermeiden. SiehePackungsbeilage.Wasser: Destilliertes oder deionisiertesWasser verwenden.

Im Lieferumfang enthaltenDie Komponenten sind aufeinanderabgestimmt. Die Barcode-Etikettenwerden für den Assay benötigt.

FSH Testeinheiten (LFS1)Jede mit Barcode-Etikette verseheneEinheit enthält eine mit monoklonalemAnti-FSH-Mausantikörper beschichteteKugel. Bei 2–8°C bis zum Ablaufdatumhaltbar.LKFS1: 100 Testeinheiten.LKFS5: 200 Testeinheiten.Verpackte Testeinheiten vor dem Öffnenstehen lassen, bis sie Zimmertemperaturerreicht haben. Oben entlang der Kanteaufschneiden, ohne den Plastikverschlusszu beschädigen. Verpackungen wiederdicht verschließen, damit der Inhalttrocken bleibt.

FSH- Reagenzbehälter (LFS2)Mit Barcode. 7,5 ml mit alkalischerPhosphatase (Rinderkalbsdarm)konjugiertes FSH Antikörper (monoklonal,Maus) in Pufferlösung mitKonservierungsmittel. Verschlossen undgekühlt aufbewahren: Bei 2–8°C bis zumAblaufdatum haltbar. Bei entsprechenderLagerung beträgt die empfohleneAufbrauchsfrist nach dem Öffnen 30 Tage.LKFS1: 1 Behälter.LKFS5: 5 Behälter.

FSH-Kalibratoren (LFSL, LFSH)Zwei Fläschchen (niedrig und hoch) à3,0 ml FSH in einer nichthumanen Serum-Matrix (mit Konservierungsmittel). 30 Tagenach dem Öffnen bei 2–8°C haltbar oder6 Monate bei –20°C (aliquotiert).LKFS1: 1 Set.LKFS5: 2 Sets.

Separat erhältliche Testsystem-Komponenten

FSH Verdünnungspuffer (LFSZ)Zum manuellen Verdünnen derPatientenproben. Ein Fläschchen (25 ml)mit FSH-freier nichthumaner Serum-Matrix, mit Konservierungsmittel. 30 Tagenach dem Öffnen bei 2–8°C oder6 Monate bei –20°C haltbar.LSUBX: Chemilumineszenz-SubstratLPWS2: PipettenwaschlösungLKPM: PipettenreinigungssetLCHx-y: Halterungen für dieProbenschalen (mit Barcodierung)LSCP: Probenschalen (Einwegartikel)LSCC: Verschlüsse für die Probenschalen(optional)CON6: Multikomponentenkontrolle in dreiKonzentrationen.Ebenfalls benötigtTransferpipetten für die Proben;destilliertes bzw. deionisiertes Wasser;Kontrollen.

TestdurchführungFür eine optimale Funktion des Gerätes istunbedingt zu beachten, dass dieWartungen, wie im IMMULITE oderIMMULITE 1000-Handbuch beschrieben,regelmäßig durchgeführt werden.

Das Handbuch für das IMMULITE oderIMMULITE 1000 enthält die A`gen für:Vorbereitung, Geräteeinstellungen,Kalibrierung, Testdurchführung undQualitätskontrollen.Überprüfen Sie jedes Testeinheiten aufdas Vorhandensein der Polystyrol-Kugelvor dem Einsetzen in das Gerät.

Empfohlenes Kalibrationsintervall:4 WochenProben zur Qualitätskontrolle:Kontrollen oder Poolseren mit FSH inmindestens zwei Konzentrationen (niedrigund hoch) verwenden.

ReferenzwerteDie Referenzbereiche wurden in einerinternationalen Multicenter-Studie mit demIMMULITE-FSH Assay (mono/poly)bestimmt. Es wurden täglich während desgesamten Ovulationszykluses Proben vonoffensichtlich gesunden Frauen (Alter


16 – 44 Jahre) entnommen. (Siehe Grafik“Menstruationperiode”).

FSH, mIU/ml

Ovulationszyklen n* Median95%-

Bereich

Follikelphase 54 (762) 6,2 2,8 – 11,3

Follikelphase, 2,bis 3. Tag

54 (108) 6,6 3,0 – 14,4

Mittelzyklus 54 (54) 13,6 5,8 – 21

Lutealphase 54 (604) 3,4 1,2 – 9,0

*Anzahl der Versuchpersonen (Gesamtsahl derErgebnisse)

Eine weitere Studie mit dem IMMULITEFSH Assay (mono/poly) ergab fürerwachsene Männer undpostmenopausale Frauen (unbehandelt)folgende Ergebnisse. Die Werte fürFrauen unter Kontrazeptiva und fürpostmenopausale Frauen unter HRTbasieren auf der Korrelation zum DPCCoat-A-Count FSH IRMA.

FSH, mIU/ml

Gruppe n Median 95%-Bereich

Männer 135 3,8 0,7 – 11,1

FrauenPostmenopause* 76 90,5 21,7 – 153

Postmenopause(HRT)

16 27 9,7 – 111

OraleKontrazeptiva

12 1,7 NN – 4,9

*Vorläufig NN: Nicht nachweisbar

Für eine altersabhängige Studie wurde ineiner "Wellness"-Klinik im Südwesten derUSA mit Hilfe des IMMULITE-FSH(mono/poly) folgende Werte ermittelt.

FSH, mIU/ml

GruppeAlter

(Jahre) n Median95%-

Bereich

Frauen Schnur 30 NN

0,1 – 3 57 2,3 0,11 – 13

4 – 9 28 0,8 0,11 – 1,6

Männer Schnur 37 0,24 NN – 1,2

0,1 – 3 72 0,6 NN – 5,5

4 – 9 31 0,23 NN – 1,9

Kombiniert Schnur 67 0,11 NN – 1,1

0,1 – 3 129 1,1 NN – 10

4 – 9 59 0,5 NN – 1,8

NN: Nicht nachweisbar

Diese Grenzwerte sind lediglich alsRichtlinien aufzufassen. Jedes Laborsollte seine eigenen Referenzbereicheetablieren.

Grenzen der MethodeIn bestimmten Fällen der Infertilität kanndie Behandlung mit menschlichenGonadotropinen ein potentielles Problemfür die genaue Messung der FSH-Spiegeldarstellen. Das zugegebene FSH kanneine FSH-Antikörperbildung im Patientenhervorrufen. Dies kann eine Störung desAssays bewirken.Wegen der pulsatiler Sekretion des LHkönnen Proben, die am gleichen Tag vomgleichen Patienten kommen, weitinnerhalb des Referenzbereichesschwanken. Dies entspricht derphysiologischen Variabilität des LH.EDTA würde die Resultate erheblichverfälschen und sollte daher nicht alsAntikoagulans verwerdet werden.

Heterophile Antikörper in Humanserenkönnen mit Immunglobulinen aus denAssaykomponenten reagieren undInterferenzerscheinungen innerhalb des invitro Immunoassays verursachen. (Clin.Chem. 1988:34:27-33) Proben vonPatienten, die häufig mit Tier- bzw.Tierserumprodukten zu tun haben, könnendie erwähnten Interferenzen verursachenund zu anomalen Resultaten führen. Dieverwendeten Reagenzien sind sokonzipiert, dass das Risiko einerInterferenz mit den zu messenden Probenminimiert ist. Dennoch können potentiellInteraktionen zwischen seltenen Serenund den Testkomponenten auftreten. Zudiagnostischen Zwecken sollten die mitdem Assay erhaltenen Ergebnisse immerin Kombination mit der klinischenUntersuchung, der Patientenanamneseund anderen Befunden gesehen werden.

LeistungsdatenSiehe Tabellen und Grafiken mitrepräsentativen Daten für den Assay. DieErgebnisse sind als mIU/ml ausgedrückt.(Alle Daten wurden – sofern nicht andersangegeben – aus Serumproben inRöhrchen ohne Gelbarrieren odergerinnungsfördernde Zusätze gewonnen.)


Messbereich: Bis 170 mIU/ml (8,9 ng/ml)[WHO 2nd IRP 78/549] [Interims-Ersatzcode 94/632].Analytische Sensitivität: 0,1 mIU/mlHigh-Dose-Hook-Effect: Bis50 000 mIU/ml keiner.Präzision: Die Proben wurden in 40Ansätzen in Doppelbestimmung, ingesamtalso in 80 Tests, gemessen. (SieheTabelle „Precision.“)Linearität: Proben wurden inverschiedenen Verdünnungen getestet.(Repräsentative Daten entnehmen Siebitte der Tabelle „Linearity“.)Wiederfindung: Die getesteten Probenwaren mit drei FSH-Lösungen 1:19versetzt (150, 600 und 1 800 mIU/ml).(Repräsentative Daten entnehmen Siebitte der Tabelle „Recovery“.)Spezifität: Hochspezifischer Anti-FSH-Antikörper (siehe Tabelle „Specificity“).

Bilirubin: Bilirubin hat in Konzentrationenbis zu 200 mg/l keinen Einfluss auf dieErgebnisse, der größer als die Impräzisiondes Assays selbst ist.

Hämolyse: Hämoglobin hat inKonzentrationen bis zu 600 mg/dl keinenEinfluss auf die Ergebnisse, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.

Lipämie: Triglyceride haben inKonzentrationen bis zu 3 000 mg/dlkeinen Einfluss auf die Ergebnisse, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.Alternativer Probentyp: Um den Einflussvon alternativen Probentypen zuüberprüfen, wurde 24 reiwilligen Blut inPlastik-Röhrchen ohne Zusatz (BectonDickinson), Heparin-Röhrchen, EDTA-Röhrchen und SST Vacutainer-Röhrchenentnommen. Alle Proben wurden mit derIMMULITE FSH Methode bestimmt.(Heparin) = 1,10 (Serum) + 0,65 mIU/ml

(SST) = 0,94 (einfachen Röhrchen) + 0,12 mIU/ml

(EDTA) = 0,88 (Serum) + 0,57 mIU/ml

Mittelwerte:11,7 mIU/ml (Serum)13,5 mIU/ml (Heparin)11,5 mIU/ml (SST)10,8 mIU/ml (EDTA)

EDTA-Plasma ist als Probenart nichtgeeignet.

Methodenvergleich: Der IMMULITE FSHmono/mono Assay wurde unterVerwendung von 431 Patientenproben mitDPC's IMMULITE FSH mono/polyverglichen. Konzentrationsbereich ca. 0,7– 130 mIU/ml. Siehe Grafik.) Durch lineareRegression:

(IML m/m) = 0,90 (IML m/p) + 0,35 mIU/mlr = 0,990

Mittelwerte:31,4 mIU/ml (IMMULITE mono/mono)34,5 mIU/ml (IMMULITE mono/poly)

AnwendungsberatungBei Rückfragen wenden Sie sich bitte anIhre DPC Niederlassung.Hergestellt von Euro/DPC Ltd. unter demQualitätssystem ISO 13485:2003.

Español

FSHUtilidad del análisis: Para su uso en eldiagnóstico in vitro con los analizadoresIMMULITE e IMMULITE 1000 — para lamedición cuantitativa de hormonaestimulante del folículo (Follitropina, FSH)en suero, como una ayuda en eldiagnóstico y tratamiento de lasafecciones pituitarias y gonadales.Referencia: LKFS1 (100 tests),LKFS5 (500 tests)Código del Test: FSHCódigo de Color: Gris claro

Resumen y Explicacióndel TestLa hormona estimulante del folículo(Follitropina, FSH) es secretada por lascélulas B de la hipófisis anterior bajo elcontrol de la hormona liberadora degonadotropinas (Gn-RH) producida en elhipotálamo. La FSH favorece el desarrolloy mantenimiento de los tejidos gonadales,que sintetizan y seccretan las hormonasesteroideas. Los niveles séricos de FSHestán controlados en el hipotálamo por unmecanismo de retroacción negativo de lashormonas esteroideas. Aunque la FSH yla LH se requieren para una normalfuncionalidad sexual, tanto en hombrescomo en mujeres, los patrones de


secrección son muy diferentes en los dossexos.

En las mujeres adultas, la FSH promueveel crecimiento y desarrollo de los folículosováricos. Durante la ovulación, cuando elfolículo es liberado, el folículo, ahoradenominado cuerpo lúteo, segregaestradiol y progesterona, quienescontrolan los niveles circulantes de laFSH, en el hipotálamo, mediante unmecanismo de retroacción negativo. En lamenopausia, donde la función ováricaestá disminuida, hay un decaimiento en lasecrección de estradiol. Debido a lacarencia del mecanismo de reatroacciónnegativo, al estar los niveles de estradioldisminuidos, los niveles de FSH circulanteempiezan a incrementarseconsiderablemente.

En el hombre adulto, la FSH estáasociada con la estimulación ymantenimiento de la espermatogénesis.La Testosterona y el estradiol tienen elpapel de generar la señal de retroacciónnegativa al hipotálamo para controlar laliberación de FSH. La infertilidad en loshombres puede ser debida a unhipogonadismo como resultado de un fallotesticular primario. Cualquiera que sea laetiología, el hipogonadismo tiene unresultado neto del aumento drástico de losniveles séricos de FSH, debido a laausencia de retroacción negativa.

Principio del análisisIMMULITE/IMMULITE 1000 FSH es unensayo inmunométrico con dos sitios deunión, quimioluminiscente en fase sólida.Ciclos de incubación: 1 × 30 minutos.

Recogida de la muestraSe recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestraslipémicas.Las muestras hemolizadas podrían indicaruna mala manipulación de la muestraantes de ser recibida por el laboratorio; eneste caso, los resultados debeninterpretarse con precaución.El plasma con EDTA no deberia ser usadocomo muestra.

La centrifugacion de las muestras desuero antes de que se forme el coagulopuede ocasionar la presencia de fibrina.

Para evitar resultados erroneos debidos ala presencia de fibrina, asegurarse que seha formado el coagulo completamenteantes de centrifugar las muestras.Algunas muestras, particularmenteaquellas de pacientes sometidos a terapiaanticoagulante, pueden requerir mayortiempo de coagulacion.

Los tubos para recoger sangre dedistintos fabricantes pueden producirvalores diferentes, dependiendo delmaterial del tubo y de los aditivos,incluyendo barreras de gel o barrerasfísicas, activadores de la coagulación y/oanticoagulantes. El FSHIMMULITE/IMMULITE 1000 no ha sidoanalizado con todos los distintos tipos detubos. Para obtener detalles sobre lostipos tubos que se han analizado,consulte la sección de Tipos de MuestrasAlternativos.Volumen requerido: 50 µl de suero.(El recipiente de la muestre debecontener, como mínimo, 100 µl más queel volumen total requerido).Conservación: 7 días a 2–8°C, o2 meses a –20°C.

Advertencias y precaucionesPara uso diagnóstico in vitro.

Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desecharde acuerdo con las normas aplicables.Siga las precauciones universales ymanipule todos los componentes como sifueran capaces de transmitir agentesinfecciosos. Los materiales derivados desangre humana han sido analizados y sonnegativos para sífilis; para anticuerposfrente al HIV 1 y 2; para el antígeno desuperficie de hepatitis B y para losanticuerpos de hepatitis C.Se ha usado Azida sodica, enconcentraciones menores de 0,1 g/dl,como conservante. Para su eliminacion,lavar con grandes cantidades de aguapara evitar la constitucion de residuos deazidas metalicas, potencialmenteexplosivas, en las cañerías de cobre yplomo.

Sustrato quimioluminiscente: evite lacontaminación y exposición a la luzdirecta del sol. (Ver el prospecto.)Agua: Use agua destilada o desionizada.


Materiales suministradosLos componentes representan un juegocompleto. Las etiquetas de código debarras son necesarias para el ensayo.

Unidades de análisis de FSH (LFS1)Cada unidad etiquetada con código debarras contiene una bola recubierta deanticuerpos monoclonales murinos anti-FSH. Estable a 2–8°C hasta la fecha decaducidad.LKFS1: 100 unidades.LKFS5: 500 unidades.Espere a que las bolsas de las unidadesde análisis alcancen la temperaturaambiente antes de abrirlas. Ábralascortando por el extremo superior, dejandoel borde del cierre de cremallera intacto.Vuelva a cerrar las bolsasherméticamente para protegerlas de lahumedad.

Vial de reactivo de FSH (LFS2)Con código de barras. 7,5 ml de fosfatasaalcalina (de intestino de ternera)conjugada con monoclonal murino anti-FSH en solución tampón, conconservante. Guardar tapado yrefrigerado: estable a 2–8°C hasta lafecha de caducidad. Se recomiendautilizarlo antes de que pasen 30 díasdespués de abrirlo cuando se guardasegún lo indicado.LKFS1:1 vial. LKFS5: 5 viales.

Ajustadores de FSH (LFSL, LFSH)Dos viales 3,0 ml (bajo y alto) de FSH enun suero matriz no humano, conconservante. Estable a 2–8°C durante30 días después de abrise, o hasta6 meses (alicuotados) a –20°C.LKFS1:1 juego. LKFS5: 5 juegos.

Componentes del kit que sesuministran por separado

Diluyente para muestras de FSH (LFSZ)Para la dilución manual de las muestrasde los pacientes. Un vial (25 ml) de unamatriz de suero no humana en solucióntampón, libre de FSH, con conservante.Estable a 2–8°C durante 30 días despuésde abrise, o hasta 6 meses (alicuotados) a–20°C.

LSUBX: Sustrato quimioluminiscenteLPWS2: Lavado de sonda

LKPM: Kit de limpieza de sondaLCHx-y: Soportes de recipientes demuestras (con códigos de barras)LSCP: Recipientes de muestras(desechables)LSCC: Tapas para los recipientes demuestras (opcionales)CON6: control multiconstituyente de tresniveles.

También necesariosPipetas de transferencia de muestras;agua destilada o desionizada; controles.

EnsayoAviso: para obtener el funcionamientoóptimo, es importante realizar todos losprocedimientos del mantenimiento generalsegún lo definido en el manual deloperador de IMMULITE o IMMULITE1000.

Ver el Manual del Operador delIMMULITE o IMMULITE 1000 para:preparación, procesamiento, ajuste,procedimientos de ensayo y control decalidad.Inspeccionar visulamente cada unidad derección para asegurarse de que hay unabola antes de introducirla en el Sistema.

Intervalo de ajuste recomendado:4 semanas.Muestras de Control de calidad: Usecontroles o pools de muestrasro con dosniveles diferentes, como mínimo, de FSH(bajo y alto).

Valores esperadosLos valores de normalidad de la FSHIMMULITE (mono/poli) fueron obtenidosen un estudio multinacional, con mujeresvoluntarias en aprente buen estado desalud, edades comprendidas entre 16 y44 años y con tomas de sangre diariashasta completar un ciclo completoovulatorio. (Véase gráfico “PeriodoMenstrual”)


FSH, mIU/ml

Ciclosovulatorios n* Mediana Central 95%

Fase folicular 54 (762) 6,2 2,8 – 11,3

Fase folicular,Días 2 a 3

54 (108) 6,6 3,0 – 14,4

Ciclo medio 54 (54) 13,6 5,8 – 21

Fase lútea 54 (604) 3,4 1,2 – 9,0

*Número de individuos (número total deresultados)

Otro estudio realizado con la FSHIMMULITE (mono/poli) ha establecido lossiguientes resultados para hombresadultos y mujeres postmenopaúsicas notratadas. Los rangos para mujerestomando anticonceptivos orales y mujerespostmenopaúsicas en tratamientosustitutivo de estradiol están basadas enla correlación del kit FSH IMMULITE conel kit de DPC Coat-A-Count FSH IRMA.

FSH, mIU/ml

Grupo n Mediana Central 95%

Hombres 135 3,8 0,7 – 11,1

Mujeres

Postmenopaúsicas 76 90,5 21,7 – 153

Postmenopaúsicas(ERT)

16 27 9,7 – 111

Anticonceptivosorales

12 1,7 ND – 4,9

*Preliminar ND: no detectable

Un estudio sectorial sobre los valoresnormales de fertilidad pediátrica llevadosa cabo con la FSH IMMULITE (mono/poli)en indiviuos aparentemente sanos ensuroeste de los Estados Unidos dió lugara los siguientes resultados.

FSH, mIU/ml

GrupoEdad(años) n Mediana

Central95%

Mujeres Cordón 30 ND

0,1 – 3 57 2,3 0,11 – 13

4 – 9 28 0,8 0,11 – 1,6

Hombres Cordón 37 0,24 ND – 1,2

0,1 – 3 72 0,6 ND – 5,5

4 – 9 31 0,23 ND – 1,9

Combinado Cordón 67 0,11 ND – 1,1

0,1 – 3 129 1,1 ND – 10

4 – 9 59 0,5 ND – 1,8

ND: no detectable.

Estos límites han de considerarse sólocomo una guía. Cada laboratorio deberáestablecer sus propios intervalos dereferencia.

LimitacionesEn ciertos casos de infertilidad, eltratamiento con gonadotropinas humanasplantea un problema potencial para lamedición precisa de los niveles de FSH.La FSH que se administra puede causarque el paciente produzca anticuerposcontra la FSH, los cuales interferirándirectamente con el ensayo.Debido a la secrección pulsátil, muestrasde un mismo indiciduo tomadas el mismodía pueden variar considerablementedentro de los valores de normalidad, loque refleja una variación fisiológica másque un error en la técnica o en lametodología.Como EDTA tendría un efecto significativoen los resultados, no debe usarse comoanticoagulante.Los anticuerpos heterofílicos en el suerohumano pueden reaccionar con lasinmunoglobulinas de los componentes delensayo provocando interferencias con losinmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Las muestras de lospacientes que frecuentemente estánexpuestos a animales o a productosséricos animales pueden presentar estetipo de interferencia que potencialmenteocasione un resultado anómalo. Estosreactivos han sido formulados paraminimizar el riesgo de interferencia, noobstante, pueden darse interaccionesanómalas entre sueros conflictivos y loscomponentes del ensayo. Con fines dediagnóstico, los resultados obtenidos coneste ensayo siempre deben ser usados encombinación con el examen clínico, lahistoria médica del paciente y cualquierotro dato clínico relevante.

Características analíticasPara ver resultados representativos de lascualidades del ensayo, consulte las tablasy los gráficos. Los resultados se expresanen mIU/ml. (A no ser que se indique locontrario, todos los resultados fuerongenerados en muestras de suero


recogidas en tubos sin geles oactivadores de la coagulación).

Intervalo de calibración: hasta170 mIU/ml (8,9 ng/ml). Estandarizado entérminos de la WHO 2° IRP 78/549[código interino de cambio 94/632].Sensibilidad: 0,1 mIU/ml.

Efecto de gancho a altas dosis:Ninguno hasta 50 000 mIU/ml.Precisión: Las muestras fueronanalizadas por duplicado en 40 tandaspara un total de 80 replicados. (Ver latabla "Precision.")Linealidad: las muestras fueronanalizadas con varias diluciones. (Véasela tabla " Linearity " para resultadosrepresentativos).

Recuperación: Se han analizado lasmuestras cargadas 1 a 19 con tressoluciones de FSH (150, 600 y1 800 mIU/ml). (Ver la tabla "Recovery"para resultados representativos).Especificidad: El anticuerpo es altamenteespecífico para FSH. (Véase la tabla"Specificity").

Bilirrubina: La presencia de bilirrubina,en concentraciones hasta 200 mg/l, notienen ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.

Hemólisis: La presencia de hemoglobina,en concentraciones hasta 600 mg/dl, notienen ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.

Lipemia: La presencia de triglicéridos enconcentraciones hasta 3 000 mg/dl notiene efecto alguno en los resultados, enlo correspondiente a la precisión delensayo.Tipo de Muestra Alternativa: Paraevaluar el efecto de los tipos de muestraalternativos, se extrajo sangre a 24voluntarios en tubos de plástico BectonDikinson secos, con heparina, con EDTAy tubos SST vacutainer. Todas lasmuestras fueron analizadas con el ensayode FSH IMMULITE.(Heparina) = 1,10 (Suero) + 0,65 mIU/ml

(SST) = 0,94 (tubos simples) + 0,12 mIU/ml

(EDTA) = 0,88 (Suero) + 0,57 mIU/ml

Medias:11,7 mIU/ml (Suero)13,5 mIU/ml (Heparina)

11,5 mIU/ml (SST)10,8 mIU/ml (EDTA)

El plasma con EDTA no deberia ser usadocomo muestra.

Comparación de los métodos: Elprocedimiento de IMMULITE FSHmono/mono ensayo se ha comparado conel IMMULITE FSH mono/poli de DPC en431 muestras de pacientes. (Intervalo deconcentración: aproximadamente 0,7 a130 mIU/ml. Ver la gráfico). Por regresiónlineal:

(IML m/m) = 0,90 (IML m/p) + 0,35 mIU/mlr = 0,990

Medias:31,4 mIU/ml (IMMULITE mono/mono)34,5 mIU/ml (IMMULITE mono/poli)

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IMMULITE FSHDomaine d'utilisation : Pour le dosagequantitatif de l'hormone folliculostimulante(FSH) dans le sérum. Ce test est réservéà un usage diagnostic in vitro avecl'Analyseur IMMULITE ou de IMMULITE1000 et constitue une aide au diagnosticet au traitement des troubleshypophysaires et gonadiques.

Ce réactif est enregistré auprès del'AFSSAPS.Référence catalogue : LKFS1 (100 tests),LKFS5 (500 tests)Code produit : FSH.Code couleur : gris clair.

IntroductionL'hormone folliculostimulante (FSH) estsécrétée par les cellules β del'antéhypophyse sous le rétrocontrôle del'hormone gonadotrophine releasing(GnRH) produite par l'hypothalamus. LaFSH facilite le développement et lefonctionnement du tissu gonadique, lequelsynthétise et sécrète les hormonesstéroïdiennes. Le taux circulant de FSH


est régulé par un rétrocontrôle négatif surl'hypothalamus déclenché par leshormones stéroïdiennes. La FSH et la LHsont nécessaires au fonctionnementsexuel normal à la fois chez l'homme etchez la femme, mais les modalitéssécrétoires sont différentes suivant lesexe.

Chez la femme mature, la FSH est àl'origine du développement des folliculesovariens. Pendant l'ovulation, le folliculeest rompu, il évolue vers le corps jaune ensécrétant l'estradiol et la progestéronelesquels contrôlent le taux circulant deFSH par un rétrocontrôle négatif surl'hypothalamus. Au cours de laménopause, il y a diminution de lafonction ovarienne, il en résulte unediminution de la sécrétion d'estradiol. Unebaisse du rétrocontrôle négatif initié par ladiminution de la concentration d'estradiolentraîne une augmentation significative dutaux de FSH circulant.Chez l'homme mature, la FSH estassociée à la stimulation et au maintien dela spermatogenèse. La testostérone etl'estradiol sont à l'origine du rétrocontrôlenégatif sur l'hypothalamus et contrôlentainsi la sécrétion de FSH. La stérilitémasculine peut être due à unhypogonadisme lié à une insuffisancetesticulaire. L'insuffisance testiculaire peutêtre liée soit à une insuffisancefonctionnelle acquise ou être le résultatd'une infection microbienne. Quelle quesoit son étiologie, l'insuffisance testiculairea une incidence très nette sur les tauxcirculants de FSH qui sont augmentés defaçon spectaculaire en raison de l'absencede rétrocontrôle négatif.

Principe du testIMMULITE/IMMULITE 1000 FSH est undosage chimiluminescentimmunométrique, en deux étapes, enphase solide.Cycles d'incubation : 1 × 30 minutes.

Recueil des échantillonsIl est recommandé de clarifier leséchantillons hyperlipémiques parultracentrifugation.

Des échantillons hémolysés peuvent êtrerévélateurs d'une préparation inadéquatedu prélèvement avant son envoi au

laboratoire ; il faudra donc interpréter lesrésultats avec prudence.

Les echantillons ne doivent pas etre desplasmas EDTA.La centrifugation des échantillonssériques avant la formation complète ducaillot peut entraîner la présence defibrine. Pour éviter les résultats erronésdûs à la présence de fibrine, s'assurer dela formation complète du caillot avant decentrifuger les échantillons. Certainséchantillons, en particulier ceux provenantde patients sous anti-coagulants, peuventnécessiter un temps plus long pour laformation du caillot.Des tubes pour prélèvements sanguinsprovenant de fabricants différents peuventdonner des résultats différents, selon lesmatériaux et additifs utilisés, y comprisgels ou barrières physiques, activateursde la coagulation et/ou anticoagulants. Lecoffret FSH IMMULITE/IMMULITE 1000n'a pas été testé sur tous les types detubes possibles. Veuillez consulter lechapitre intitulé Autres Typesd'Échantillons pour plus derenseignements sur les tubes qui ont étéévalués.Volume nécessaire : 50 µl sérum.(L'unité-échantillon doit contenir au moins100 µl de plus que le volume totalnécessaire.)Conditions de conservation : 7 joursà +2°C/+8°C ou 2 mois à –20°C.

Précautions d'emploiRéservé à un usage diagnostique in vitro.Réactifs : conserver les réactifs à +2°/+8 °C. Eliminer les déchets conformémentà la réglementation en vigueur.

Respecter les précautions d'emploi etmanipuler tous les composants du coffretcomme des produits potentiellementinfectieux. Les réactifs dérivés de produitshumains et utilisés dans ce coffret ont subiun test sérologique pour la Syphilis et destests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti-VHC et pour l'antigène desurface de l'hépatite B, qui se sont tousavérés négatifs.

De l'azide de sodium à des concentrationsinférieures à 0,1 g/dl a été ajouté commeconservateur ; lors de l'élimination,l'évacuer avec de grandes quantités d'eau


pour éviter une accumulation d'azidesmétalliques explosifs dans lescanalisations.Substrat chimiluminescent : éviter lescontaminations et l'exposition directe à lalumière solaire (voir la fiche technique).

Eau : utiliser uniquement de l'eau distilléeou désionisée.

Matériel fourniLes composants de la trousse ne peuventêtre utilisés que conjointement. Lesétiquettes à l'intérieur du coffret sontnécessaires au dosage.

Tests unitaires FSH (LFS1)Avec code-barre. Chaque unité-testcontient une bille revêtue d'anticorpsmononclonal murin anti-FSH. Stable à+2°C/+8°C jusqu'à la date de péremption.LKFS1 : 100 unités. LKFS5 : 500 unités.Porter les sachets à température ambianteavant d'ouvrir. Ouvrir le sachet avec desciseaux en préservant le dispositif defermeture. Refermer les sachets pour lesprotéger de l'humidité.

Cartouche à réactif FSH (LFS2)Avec code-barres. 7,5 ml de phosphatasealcaline (intestins de veau) conjuguée àun anticorps monoclonal murin anti-FSHdans un tampon, avec conservateur.Conserver bouché et réfrigéré : stable à+2°C/+8°C jusqu'à la date de péremption.A utiliser de préférence dans les 30 joursqui suivent l'ouverture, si lesrecommandations de stockage sontrespectées.LKFS1 : 1 cartouche.LKFS5 : 5 cartouches.

Ajusteurs FSH (LFSL, LFSH)2 flacons ("haut" et "bas"), 3 ml chacun,de FSH dans une matrice de sérum nonhumain, avec conservateur. Stable à +2/+8 C pendant 30 jours après ouverture, ou6 mois (aliquoté) à –20 °C.LKFS1 : 1 jeu. LKFS5 : 2 jeux.

Composants du coffret fournisséparément

Diluant échantillon FSH (LFSZ)Pour la dilution manuelle des échantillonspatients. Un flacon contenant 25 ml d'unematrice sérique non-humaine sans FSH

avec conservateur. Stable à +2°C/+8°Cpendant 30 jours après ouverture ou6 mois (aliquoté) à –20 °C.LSUBX : Substrat chimiluminescentLPWSM : Solution de lavageLKPM : Coffret de décontamination del'aiguille de prélèvementLCHx-y : Supports pour unitéséchantillons (avec code-barre)LSCP : unités échantillons (à usageunique)LSCC : Bouchons pour unités échantillons(optionnel)

CON6 : Contrôle multiparamétrique à troisniveauxEgalement requisPipettes pour le transfert des échantillons ;eau distillée ou désionisée ; contrôles.

Protocole de dosageNoter que pour des performancesoptimales, il est important de réalisertoutes les procédures de maintenance deroutine selon les instructions du Manueld'Utilisation de l'IMMULITE ou del'IMMULITE 1000.Voir le manuel d'utilisation de l'IMMULITEou de l'IMMULITE 1000 pour lapréparation, le démarrage du système, lesajustements, le dosage et les procéduresde contrôle de qualité.

Vérifier visuellement que chaque Unité-Test contient bien une bille avant de lacharger dans l'automate.Intervalle d'ajustement recommandé :4 semaines.

Echantillons pour le contrôle de qualité :Utiliser des contrôles ou des pools desérums avec au moins deux niveaux deconcentration (faible ou élevé) de FSH.

Valeurs de référenceLes valeurs de référence ont étédéterminées en utilisant le test IMMULITEFSH (mono/poly) dans une étudeinternationale incluant des femmesapparemment en bonne santé (âge : 16 –44 ans), volontaires pour un prélèvementde sang journalier pendant un cycleovulatoire complet. (Voir graphique “Cyclemenstruel” graphique.)


FSH, mUI/ml

Cycle ovulatoire n* MédianeCentré à

95%

Phase folliculaire 54 (762) 6,2 2,8 – 11,3

Phase folliculaire,Jours 2 à 3

54 (108) 6,6 3,0 – 14,4

Milieu de cycle 54 (54) 13,6 5,8 – 21

Phase lutéale 54 (604) 3,4 1,2 – 9,0

*Nombre de sujets (total des résultats).

Le tableau ci-dessous résume lesrésultats d'une étude réalisée avec le testIMMULITE FSH (mono/poly) sur deshommes adultes et lds femmespostménonausées non traitées. Lesdomaines pour les femmes souscontraception orale et les femmespostménopausées sous ERT ont étéétablis sur la corrélation entre le dosageIMMULITE FSH et le dosage Coat-A-Count FSH IRMA de DPC.

FSH, mUI/mL

Groupe n MédianeCentré à

95%

Hommes (adultes) 135 3,8 0,7 – 11,1

Femmes (adultes)

postménauposées * 76 90,5 21,7 – 153

postménauposées(ERT)

16 27 9,7 – 111

Sous contraceptionorale

12 1,7 ND – 4,9

*PréliminairesND: non détectable

Une étude en pédiatrie sur les valeurs defertilité, réalisée avec le test IMMULITEFSH (mono/poly) dans une clinique du sudouest des Etats-Unis, a donné lesrésultats suivants.

FSH, mUI/mL

GroupeÂge(année) n Médiane Centré à 95%

Filles Cordon 30 ND

0,1 – 3 57 2,3 0,11 – 13

4 – 9 28 0,8 0,11 – 1,6

Garçons Cordon 37 0,24 ND – 1,2

0,1 – 3 72 0,6 ND – 5,5

4 – 9 31 0,23 ND – 1,9

Total Cordon 67 0,11 ND – 1,1

0,1 – 3 129 1,1 ND – 10

4 – 9 59 0,5 ND – 1,8

ND: non détectable

Utiliser ces valeurs à titre indicatifuniquement. Chaque laboratoire devraitétablir ses propres valeurs de référence.

LimitesDans certains cas de stérilité, le traitementavec des gonadotrophines humaines posedes problèmes pour la mesure du tauxexact de FSH. La FSH qui est administréepeut entraîner la production parl'organisme d'anticorps anti-FSH quiinterfèrent dans le dosage.Du fait de la sécrétion pulsatile, deséchantillons de sérums prélevés le mêmejour chez une même patiente, peuventfluctuer largement à l'intérieur du domainede référence, reflétant ainsi les variationsphysiologiques plus qu'une erreurtechnique ou méthodologique.L'EDTA étant susceptible d'avoir unimpact significatif sur les résultats, il nedevrait pas être utilisé comme anti-coagulant.Les anticorps hétérophiles du sérumhumain peuvent réagir avec lesimmunoglobulines faisant partie descomposants du coffret et interférer avecles immunodosages in vitro. [Voir BoscatoLM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Les échantillonsprovenant de patients fréquemmentexposés aux animaux ou aux produitssériques d'origine animale peuventprésenter ce type d'interférence pouvantpotentiellement donner un résultatanormal. Ces réactifs ont été mis au pointafin de minimiser le risque d'interférence,cependant des interactions potentielles


entre des rares sérums rares et lescomposants du test peuvent se produire.Dans un but diagnostique, les résultatsobtenus avec ce dosage doivent toujoursêtre utilisés en association avec unexamen clinique, l'histoire médicale dupatient et d'autres résultats.

Performances du testConsulter les tableaux et graphiques pourobtenir les données représentatives desperformances du test. Les résultats sontdonnés en mUI/ml. (En l'absence deprécision supplémentaire, tous lesrésultats ont été obtenus sur deséchantillons sériques prélevés sur tubessans gel, ni activateur de la coagulation).Domaine de mesure : jusqu'à170 mUI/ml (8,9 ng/ml). Conforme auxnormes de la 2ème IRP 78/549 del'O.M.S. [code de remplacementintermédiaire 94/632].Sensibilité analytique : 0,1 mUI/ml

Effet-crochet aux doses élevées : aucunjusqu'à 50 000 mUI/ml.Précision : Les échantillons ont été dosésen double essai lors de 40 séries soit untotal de 80 résultats. (Voir le tableau« Precision ».)Linéarité : les échantillons ont été testésavec des taux de dilution variés. (Voir letableau “ Linearity ” pour des donnéesreprésentatives.)Récupération : les échantillons testés ontété chargés dans un rapport de 1 à 19avec trois solutions de FSH (150, 600 et1 800 mUI/ml). (Voir le tableau“ Recovery ” pour des donnéesreprésentatives.)Spécificité : l'anticorps est hautementspécifique de la FSH (Voir le tableau“ Specificity ”).Bilirubine : La présence de bilirubine neprésente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 200 mg/l.Hémolyse : La présence d'hémoglobinene présente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 600 mg/dl.Lipémie : La présence de triglycéridesjusqu'à une concentration de 3 000 mg/dl

n'interfère ni sur la précision du dosage, nisur les résultats.

Autres types d'échantillons : Afin dedéterminer l'incidence d'autres typesd'échantillons, des prélèvements sur 24volontaires ont été effectués sur tubessériques secs en plastique BectonDickinson, sur tubes de hépariné, surtubes EDTA et sur tubes vacutainersSST®. Tous les échantillons ont été dosésavec la procédure IMMULITE FSH.(Héparine) = 1,10 (Sérum) + 0,65 mUI/ml

(SST) = 0,94 (tubes ordinaires) + 0,12 mUI/ml

(EDTA) = 0,88 (Suero) + 0,57 mUI/ml

Moyennes :11,7 mUI/ml (Sérum)13,5 mUI/ml (Héparine)11,5 mUI/ml (SST)10,8 mUI/ml (EDTA)

Les echantillons ne doivent pas etre desplasmas EDTA.Comparaison de méthodes : leIMMULITE FSH mono/mono dosage a étécomparé à l'IMMULITE FSH mono/poly deDPC sur 431 échantillons (intervalle deconcentrations : 0,7 à 130 mUI/ml environ.Voir graphique). Par régression linéaire :

(IML m/m) = 0,90 (IML m/p) + 0,35 mUI/mlr = 0,990

Moyennes :31,4 mUI/ml (IMMULITE mono/mono)34,5 mUI/ml (IMMULITE mono/poly)

Assistance techniqueEn France distribué par DPC France 90bd National 92257 La Garenne-ColombesFabriqué par EURO/DPC Ltd. dans le cadre d'unSystème Qualité enregistré sousISO 13485:2003.

Italiano

FSHUso: Ad uso diagnostico in vitro con gliAnalizzatori IMMULITE ed IMMULITE1000 — per per la misurazionequantitativa dell'ormone follicolostimolante, FSH, nel siero, quale ausilionella diagnosi e cura dei disturbi ipofisari egonadici.


Codice:LKFS1 (100 test), LKFS5 (500 test)

Codice del Test: FSHColore: grigio chiaro

Riassunto e spiegazione delTestL'ormone follicolo stimolante (follitropina,FSH) è secreto dalle cellule b dell'ipofisianteriore sotto il controllo dellagonadotropina prodotta dall'ipotalamo.L'FSH facilita lo sviluppo ed ilmantenimento dei tessuti gonadici chesintetizzano e secernono gli ormonisteroidei. I livelli di FSH in circolo sonocontrollati da un meccanismo di feedbacknegativo sull'ipotalamo da parte degliormoni steroidei. Benchè l'FSH e l'LHsiano richiesti per una funzionalitàsessuale normale sia nell'uomo che nelladonna, i meccanismi di rilascio sono moltodiversi nei due sessi.Nella donna adulta, l'FSH avvia la crescitae lo sviluppo dei follicoli ovarici. Durantel'ovulazione, quando il follicolo si rompe, ilfollicolo, ora chiamato corpo luteo, secernel'estradiolo ed il progesterone, checontrollano i livelli circolanti di FSH con uneffetto di feedback negativo sull'ipotalamo.In menopausa, con una diminuzione dellafunzionalità ovarica, si ha una conseguentediminuzione della secrezione di estradiolo.A causa della mancanza di feedbacknegativo, con una diminuzionedell'estradiolo, i livelli di FSH in circoloaumentano notevolmente.Nell'uomo adulto, l'FSH è associato allastimolazione ed al mantenimento dellaspermatogenesi. Il Testosterone el'Estradiolo hanno il ruolo di fornire ilsegnale di feedback negativo all'ipotalamoper il controllo del rilascio di FSH.L'infertilità maschile può essere dovutaall'ipogonadismo quale risultato di anomalieprimarie dei testicoli. Le anomalie deitesticoli possono essere un'incapacità diportare a termine la maturazione dellecellule spermatiche o il risultato di dannialle cellule germinali. Qualsiasi sial'eziologia, le condizioni di ipogonadismoportano ad un drammatico innalzamentodei livelli di FSH in circolo, dovuti allamancanza di un feedback negativo.

Principio del procedimentoIMMULITE/IMMULITE 1000 FSH è undosaggio immunometrico inchemiluminescenza in fase solida adoppio sito.Cicli d'incubazione: 1 × 30 minuti.

Prelievo dei CampioniSi consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifugaper schiarire i campioni lipemici.

I campioni emolizzati posson indicare iltrattamento non idoneo del campioneprima dell'arrivo al laboratorio; per questomotivo, i risultati devono essereinterpretati con prudenza.

I campioni di plasma EDTA non devonoessere utilizzati.La centrifugazione dei campioni del sieroprima che la coagulazione sia completapuò produrre fibrina. Per evitare risultatierrati dovuti alla presenza di fibrina,assicurarsi che il processo dicoagulazione sia completo prima dicentrifugare i campioni. Alcuni campioni,in modo particolare quelli di pazientisottoposti a terapia con anticoagulanti,possono richiedere tempi di coagulazionepiù lunghi.Provette per il prelievo di sangue diproduttori diversi possono dare valoridifferenti, a seconda dei materiali e degliadditivi usati, incluso gel o barriere fisiche,attivatori di coaguli e/o anticoagulanti.L'IMMULITE/IMMULITE 1000 FSH non éstato verificato con tutte le possibilivariazioni di tipi di provette. Consultare lasezione riguardante Campioni Alternativiper dettagli sulle provette testate.Volume richiesto: 50 µL di siero. (Il portacampione deve contenere almeno 100 µLpiù del volume totale richiesto).

Conservazione: 7 giorni a 2–8°C o2 mesi a –20°C.

Avvertenze e PrecauzioniPer uso diagnostico in vitro.Reagenti: Conservare i reagenti a 2–8°C.Eliminare in conformità alle leggipertinenti.

Seguire le precauzioni generali emanipolare tutti i componenti come sefossero potenzialmente infetti. I materialiderivati dal sangue umano sono stati


testati con esito negativo per la sifilide, glianticorpi anti-HIV 1 e 2, l'Antigene diSuperficie dell'Epatite B e gli anticorpiAnti-Epatite C.E' stata aggiunta Sodio Azide aconcentrazioni inferiori a 0,1 g/dL comeconservante. Al momentodell'eliminazione, irrorare con molta acquaper evitare la formazione di azidimetalliche potenzialmente esplosive nelletubature di piombo e di rame.Substrato Chemiluminescente: Evitarela contaminazione e l'esposizione alla lucesolare diretta. (Vedi metodica.)

Acqua: Utilizzare solo acqua distillata odeionizzata.

Materiali FornitiI componenti sono un gruppo accoppiato.Le etichette del codice a barra sononecessarie per la prova.

Test Unit FSH (LFS1)Ogni test unit con codice a barra contieneuna sferetta coattata con anticorpomonoclonale murino anti-FSH. Stabile a2–8°C fino alla data di scadenza.LKFS1: 100 unità. LKFS5: 500 unità.Le buste delle unità di prova devonoessere a temperatura ambientale prima diaprire. Aprire tagliando lungo il bordosuperiore, lasciando intatto la chiusuraermetica. Risigillare le buste perproteggere contro umidità.

Porta Reagente FSHCon codice a barre. 7,5 mL di fosfatasialcalina (intestino di vitello) coniugata conun anticorpo monoclonale murinoanti-FSH in un tampone, con conservanti.Conservare nel frigorifero con il coperchio:stabile a 2–8°C fino alla data di scadenza.E' raccomandato utilizzare il prodottoentro 30 giorni dall'apertura quando vieneconservato nella maniera indicata.LKFS1: 1 Porta Reagente.LKFS5: 5 Porta Reagenti.

Calibratori FSH (LFSL, LFSH)Due fiale (bassa ed alta), ciascuno con3 mL di FSH in una matrice di siero nonumano, con conservanti. Stabile a 2–8°Cper 30 giorni dopo l'apertura, e per 6 mesi(aliquotato) a –20°C.LKFS1: 1 set. LKFS5: 2 set.

I componenti dei kit sonoforniti separatamente

Diluente dell'FSH (LFSZ)Per la diluzione manuale dei campioni deipazienti. Un flacone contenente 25 mL dimatrice di siero non umano privo di FSH,con conservanti. Stabile a 2–8°C per30 giorni dopo l'apertura, o per 6 mesi(aliquotato) a –20°C.LSUBX: Substrato ChemiluminescenteLPWS2: Tampone di lavaggio dell'AgoLKPM: Kit di Pulizia dell'AgoLCHx-y: Tubi porta campioni (con codicea barre)LSCP: Porta Campioni (monouso)LSCC: Coperchi per Porta Campioni(opzionali)CON6: 3 livelli, controllo multicostituitoMateriali richiestiPipette per la dispensazione di campioni;acqua distillata o deionizzata; controlli.

Procedura del DosaggioAttenzione: per avere prestazioni ottimali,è importante effettuare le procedure dimanutenzione di routine cosiccomedefinito nel Manuale dell'Operatoredell'IMMULITE o IMMULITE 1000.Vedi il Manuale dell'Operatore IMMULITEo IMMULITE 1000 per: preparazione,setup, calibrazione, dosaggio e controllodi qualità.Controllate ogni test unit verificando lapresenza della sferetta prima di caricarlasullo strumento.

Intervallo di Calibrazione Consigliato:4 settimane.Controllo di Qualità: Utilizzare controlli opool di sieri con almeno due livelli (alto ebasso) di FSH.

Valori AttesiI range di riferimento sono stati ottenutiutilizzando il kit IMMULITE FSH(mono/poli) all'interno di uno studio multi-nazionale che ha coinvolto donne inapparente buono stato di salute (età: 16–44 anni), che volontariamente si sonosottoposte ad un prelievo di sanguegiornaliero lungo un intero ciclo ovulatorio.(Vedere “Il ciclo menstruale” grafica.)


FSH, mIU/mL

Cicli Ovulatori n* Mediana Centrale 95%

Fase follicolare 54 (762) 6,2 2,8 – 11,3

Fase follicolare,Giorni da 2 a 3 54 (108) 6,6 3,0 – 14,4

Ciclo centrale 54 (54) 13,6 5,8 – 21

Fase luteinica 54 (604) 3,4 1,2 – 9,0

*Numero di pazienti (numero totale di risultati)

La tabella sottostante riassume i risultatiper pazienti maschi adulti e (non trattati) eper donne postmenopausa ottenuti concon il Kit IMMULITE FSH (mono/poli). Irange per donne che utilizzanocontraccettivi orali e per donne inpostmenopausa su ERT si basano sullarelazione del dosaggio con il kit Coat-A-Count FSH IRMA.

FSH, mIU/mL

Gruppo n Mediana Centrale 95%

Uomini 135 3,8 0,7 – 11,1

Donne

post menopausale* 76 90,5 21,7 – 153

post menopausale(ERT)

16 27 9,7 – 111

Contraccettivi orali 12 1,7 ND – 4,9*Preliminare ND: non determinable

Uno studio inter-disciplinare su valori difertilità pediatrica effettuato con il kitIMMULITE FSH (mono/poli) presso unaClinica nel Sud-Ovest degli Stati Uniti haprodotto i seguenti risultati.

FSH, mIU/mL

Gruppo Età (anni) n Mediana Centrale 95%

Donne Cordone 30 ND

0,1 – 3 57 2,3 0,11 – 13

4 – 9 28 0,8 0,11 – 1,6

Uomini Cordone 37 0,24 ND – 1,2

0,1 – 3 72 0,6 ND – 5,5

4 – 9 31 0,23 ND – 1,9

Combinato Cordone 67 0,11 ND – 1,1

0,1 – 3 129 1,1 ND – 10

4 – 9 59 0,5 ND – 1,8ND: non determinableDetti valori dovrebbero essere consideratisolo come suggerimento. Ogni laboratoriodovrebbe stabilire i propri range diriferimento.

LimitiIn alcuni casi di infertilità, la cura congonadotropine potrebbe causare delledifficoltà nella misurazione accurata deilivelli di FSH. L'FSH somministratopotrebbe far creare nel paziente anticorpianti-FSH stesso, che influenzerebberodirettamente l'analisi.A cause delle secrezioni intermittenti, icampioni ottenuti lo stesso giorno dallostesso paziente possono flutturare inmaniera considerevole all'interno delrange di riferimento, riflettendo variazionifisiologiche piuttosto che errori nellatecnica o nella metodologia.Perchè l'EDTA avrebbe un effettosignificativo sui risultati, non dovrebbeessere utilizzato come un anticoagulante.

Gli anticorpi eterofili presenti nel sieroumano possono reagire con leimmunoglobuline presenti nellecomponenti del dosaggio provocandoun'interferenza con i dosaggi in vitro. [VediBoscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Campioni di pazienti routinariamenteesposti agli animali o a prodotti derivati dasiero di animali possono presentarequesto tipo di interferenza causapotenziale di risultati anomali. Questireagenti sono stati formulati perminimizzare il rischio di interferenze,tuttavia, possono verificarsi interazionipotenziali tra sieri rari e componenti deltest. A scopo diagnostico, i risultati ottenutida questo dosaggio devono sempreessere utilizzati unitamente all'esameclinico, all'anamnesi del paziente e adaltre indagini di laboratorio.

Prestazioni del DosaggioVedere le tabelle e le grafiche per i datirappresentativi delle prestazioni dellaprova. I risultati sono espressi in mIU/mL.(Se non è notato altrimenti, tutti i risultatisono stati generati nei campioni di sieroraccolti in tubi senza barriere di gelatina oadditivi che promuovono la coagulazione.)Range di Calibrazione: fino a170 mIU/mL (8,9 ng/mL). Standardizzatain termini di WHO secondo IRP 78/549[codice sostitutivo ad interim 94/632].Sensibilità analitica: 0,1 mIU/mL


Effetto di dosi forti:Nessun effetto fino a 50 000 mIU/mL.

Precisione: I campioni sono stati dosati induplicato in 40 sedute per un totale di 80replicati. (Vedi tabella "Precision".)Linearità: Sono stati dosati campioni invarie forme diluite. (Vedi la Tabella"Linearity" per dati rappresentantivi.)Recupero: Sono stati dosati campioni aiquali sono state aggiunte tre soluzioni diFSH (150, 600 e 1 800 mIU/mL) 1:19.(Vedi la Tabella "Recovery" per datirappresentantivi.)Specificità: Il dosaggio è estremamentespecifico per l'FSH. (Vedi la Tabella"Specificity".

Bilirubina: La presenza di bilirubina inconcentrazioni fino a 200 mg/L non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Emolisi: La presenza di emoglobina inconcentrazioni fino a 600 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Lipemia: La presenza di trigliceridi inconcentrazioni fino a 3 000 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Tipo di Campione Alternativo: Tipi diCampione Alternativi: Per determinarel'effetto di campioni alternativi, è statoprelevato del sangue da 24 volontari inprovette semplici di plastica per il sieroBecton Dickinson, in provette eparinizzate,EDTA e vacutainer SST®. Tutti i campionisono stati dosati con il dosaggioIMMULITE FSH.(Eparina) = 1,10 (Siero) + 0,65 mIU/mL

(SST) = 0,94 (tubi semplici) + 0,12 mIU/mL

(EDTA) = 0,88 (Siero)) + 0,57 mIU/mL

Valore medio:11,7 mIU/mL (Siero)13,5 mIU/mL (Eparina)11,5 mIU/mL (SST)10,8 mIU/mL (EDTA)

I campioni di plasma EDTA non devonoessere utilizzati.Comparazione di Metodi: La IMMULITEFSH mono/mono prova è stataparagonata al IMMULITE FSH mono/polidella DPC in 431 campioni. (Gamma diconcentrazione: da 0,7 fino a 130 mIU/mL.

Vedi grafico.) Mediante regressionelineare:

(IML m/m) = 0,90 (IML m/p) + 0,35 mIU/mLr = 0,990

Valore medio:31,4 mIU/mL (IMMULITE mono/mono)34,5 mIU/mL (IMMULITE mono/poli)

Assistenza TecnicaAll'estero: Si prega di contattare il proprioDistributore DPC Nazionale.Prodotto dalla EURO/DPC Ltd. nell'ambito di unSistema di Qualità Certificato ISO 13485:2003.

Português

FSHUtilização: Para a medição quantitativade FSH (Hormona folículo-estimulante) nosoro, em diagnósticos in vitro com oAnalisador IMMULITE ou IMMULITE1000, para o diagnóstico in vitro etratamento de doenças da pituitária egónadas.Números de catálogo: LKFS1 (100testes), LKFS5 (500 testes)

Código do teste: FSH.Cor: Cinzento claro

Sumário e explicação do testeA hormona folículo-estimulante (FSH –follicle stimulating hormone) é segregadapelas células da pituitária anterior sobcontrolo da hormona libertadora dagonadotrofina (GRH – gonadotropinreleasing hormone) produzida nohipotálamo. O FSH facilita odesenvolvimento e manutenção dostecidos da gónada, que sintetizam esegregam hormonas esteróides. Osvalores de FSH circulante são controladospor mecanismos de “feed-back” negativo,no hipotálamo, por hormonas esteróides.Embora o FSH e LH sejam essenciaispara o funcionamento sexual normal noshomens e nas mulheres, o padrão desecreção é muito diferente para os doissexos.Na mulher adulta, o FSH inicia ocrescimento e desenvolvimento do folículodo ovário. Durante a ovulação, o folículosofre ruptura, passando a chamar-se


corpus luteum, e segrega estradiol eprogesterona, que controlam os níveis deFSH por “feed-back” negativo nohipotálamo. Na menopausa, comdiminuição do funcionamento do ovário,há um consequente decréscimo dasecreção de estradiol. Devido à falta de“feed-back” negativo, com a diminuição deestradiol, os níveis de FSH circulantetornam-se significativamente mais altos.No homem adulto, o FSH está associadoà estimulação e manutenção daespermatogénese. A testosterona e oestradiol têm a função de fornecer o sinalde “feed-back” negativo ao hipotálamo,controlando os valores de FSH circulante.A infertilidade nos homens pode dever-seao hipogonadismo como resultado deuma deficiência testicular primária. Umadeficiência testicular pode dever-se a umadisfunção na maturação ou a danos dascélulas germinativas. Apesar da etiologia,as condições do hipogonadismo têmcomo resultado final o aumento dramáticodos níveis de FSH circulante, devido àfalta do efeito de “feed-back” negativo.

Princípio do procedimentoA FSH IMMULITE/IMMULITE 1000 é umensaio imunométrico em fase sólidaquimioluminescente de duas voltas.Ciclos de incubação: 1 × 30 minutos.

ColheitaRecomenda-se o uso de uma ultracentrífuga para clarear amostraslipémicas.Amostras hemolisadas podem indicartratamento incorrecto de uma amostraantes do envio para o laboratório; portantoos resultados devem ser interpretadoscom cuidado.O plasma EDTA não deve ser usadocomo um tipo de amostra.

A centrifugação de amostras de soroantes da formação completa do coágulopode resultar na presença de fibrina. Paraprevenir resultados errados devido àpresença de fibrina, certifique-se que aformação do coágulo foi completa antesda centrifugação das amostras. Algumasamostras, em especial as de doentes querecebem terapia anticoagulante podemrequerer um maior tempo de formação docoágulo.

Os tubos para colheita sanguínea dediferentes fabricantes, podem originardiferentes valores, dependendo dosmateriais e aditivos, incluíndo gel oubarreiras fisicas, activadores do coáguloe/ou anti coagulantes. IMMULITE /IMMULITE 1000 FSH não foram aindatestados com todas as possiveisvariações originadas pelos tipos de tubos.Consultar a secção Tipos de AmostrasAlternativas para obter detalhes sobre ostubos que foram testados.Volume de amostra: 50 µL soro. (Elrecipiente de la muestre debe contener,como mínimo, 100 µl más que el volumentotal requerido).

Estabilidade: 7 dias a 2–8°C, ou2 meses a –20°C.

PrecauçõesPara uso de diagnóstico in vitro.Reagentes: Manter a 2–8°C. Elimine deacordo com as normas aplicadas.Manipule com as devidas precauçõestodos os materiais capazes de transmitirdoenças infecciosas. As matérias primasobtidas de soro humano foram testadas,dando resultados negativos para a sífilis,para os anticorpos do vírus daimunodeficiência humana (HIV) 1 e 2;para o antigénio de superfície da hepatiteB (HBsAg) e para os anticorpos do vírusda hepatite C.Azida de sódio foi adicionada comoconservante; para evitar acumulações deazidas metálicas explosivas emcanalizações de cobre e alumínio, osreagentes devem ser rejeitados no esgotoapenas se estiverem diluídos e foremlavados com grandes volumes de água.Substrato quimioluminescente: Evitecontaminação e exposição à luz directa(ver bula).

Água: Utilize água destilada oudesionizada.

Materiais fornecidosOs componentes formam um conjunto unoe indivisível. Os códigos de barras nointerior das caixas são necessárias para oensaio.


Unidades de Teste de FSH (LFS1)Cada unidade rotulada com código debarras contém uma pérola revestida comanticorpo monoclonal de rato anti-FSH.Estável até a data de validade a 2–8°C.LKFS1: 100 unidades.LKFS5: 500 unidades.Permita que as saquetas de Unidade deTeste fiquem à temperatura ambienteantes de as abrir. Abra cortando pelaranhura superior, mantendo o fechointacto. Sele novamente as saquetas paraproteger contra a humidade.

(Embalagem de reagentes de FSH(LFS2)Com código de barras. Contém 7,5 mL defosfatase alcalina (de intestino de vitela)conjugado com anticorpo murinomonoclonal anti-FSH tamponizado, comconservante. Armazene tapado erefrigerado: Estável até à data de validadea 2–8°C. Recomenda-se a utilização até30 dias após aberto quando armazenadode acordo com as indicações.LKFS1: 1 embalagem.LKFS5: 5 embalagens.

Ajustes FSH (LFSL, LFSH)Contém dois frascos (nível alto e baixo),de 3,0 mL cada, com FSH em matriz desoro não-humano, com conservante.Estável, após a abertura, durante 30 diasa 2–8°C, ou por 6 meses (aliquotado) a–20°C.LKFS1: 1 conjunto. LKFS5: 2 conjuntos.

Componentes do kit fornecidosseparadamente

Diluente de amostra para FSH (LFSZ)Para a diluição manual de amostras dedoentes. Um frasco com 25 mL de matrizde soro de origem não humana, sem FSHe com conservante. Estável, após aabertura, durante 30 dias a 2–8°C, ou por6 meses (aliquotado) a –20°C.LSUBX: Sustrato quimioluminiscenteLPWS2: Lavado de sondaLKPM: Kit de limpieza de sondaLCHx-y: Soportes de recipientes demuestras (con códigos de barras)LSCP: Recipientes de muestras(desechables)LSCC: Tapas para los recipientes demuestras (opcionales)

CON6: Controlo multiparamétrico de trêsníveis.

Também necessário :Pipetas de transferência de amostra; águadestilada ou desionizada; controlos.

Procedimento de doseamentoTêr em atenção que para obter umdesempenho óptimo, é importanteefectuar todos os procedimentos demanutenção de rotina conforme definidono Manual de Operador do IMMULITE ouIMMULITE 1000.Ver o Manual do Operador do IMMULITEou IMMULITE 1000 para: preparação,setup, ajustes, procedimento do ensaio econtrolo de qualidade.

Confirme a presença da esfera em cadaUnidade de Teste antes de a colocar nosistema.Intervalo entre ajustes aconselhável:4 semanas.

Amostras de controlo de qualidade:utilize controlos ou "pools" com, pelomenos, dois níveis (alto e baixo) de FSH.

Valores de ReferênciaOs seguintes valores de referência foramobtidos utilizando o FSH IMMULITE(mono/poli) através de um estudo multi-nacional em mulheres saudáveis (idade:16–44 anos), as quais se voluntarizaram auma análise sanguínea diária durante umciclo ovulatório completo. Veja “CicloMenstrual” graph.)

FSH, mIU/mL

CiclosOvulatórios n* Mediano

Central95%

Fase folicular 54 (762) 6,2 2,8 – 11,3

Fase folicular,Dias 2 a 3

54 (108) 6,6 3,0 – 14,4

Meio ciclo 54 (54) 13,6 5,8 – 21

Fase luteal 54 (604) 3,4 1,2 – 9,0

*Número de indivíduos (número total deresultados)

Um outro estudo realizado com o FSHIMMULITE (mono/poli) forneceu osseguintes resultados para homens adultose mulheres pós-menopáusicas semterapêutica de substituição. Os valorespara mulheres sob contraceptivos orais emulheres pós-menopáusicas com


terapêutica de substituição são baseadosna relação do FSH IMMULITE com o FSHCoat-A-Count IRMA da DPC.

FSH, mIU/mL

Sexo n Mediana Central 95%

Homens Adultos 135 3,8 0,7 – 11,1

Mulheres Adultas

Pós-menopausa* 76 90,5 21,7 – 153

Pós-menopausa(TSE)

16 27 9,7 – 111

Anticoncepcionaisorais

12 1,7 ND – 4,9

*Preliminar ND: não é detectável

Um estudo cruzado de valores defertilidade pediátricos realizado com oFSH IMMULITE (mono/poli) numa clínicade Repouso no sudoeste dos E.U.A.,forneceu os seguintes resultados.

FSH, mIU/mL

SexoIdade(anos) n Mediana

Central95%

Mulheres. Cordão 30 ND

0,1 – 3 57 2,3 0,11 – 13

4 – 9 28 0,8 0,11 – 1,6

Homens Cordão 37 0,24 ND – 1,2

0,1 – 3 72 0,6 ND – 5,5

4 – 9 31 0,23 ND – 1,9

Combinados Cordão 67 0,11 ND – 1,1

0,1 – 3 129 1,1 ND – 10

4 – 9 59 0,5 ND – 1,8

ND: não é detectável

Considere estes limites apenas comodirectrizes. Cada laboratório deveestabelecer os seus próprios valores dereferência.

LimitaçõesEm certos casos de infertilidade, otratamento com gonadotrofinas humanas,apresenta um enorme problema para odoseamento exacto dos níveis de FSH. OFSH que é administrado pode provocar aprodução de anticorpos anti- FSH nopaciente, que irão interferir diretamentecom o doseamento.Derivado a uma secreção pulsátil,amostras do mesmo paciente recolhidasno mesmo dia, podem flutuar amplamentedentro de uma zona de referência

reflectindo uma variação fisiológica e nãoerros na técnica ou na metodologia.

Como EDTA teria um efeito significativonos resultados, não deve ser usado comoanticoagulante.Os anticorpos heterófilicos no sorohumano podem reagir com asimunoglobulinas presentes no ensaio,causando interferência com osimunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Amostras de doentesexpostas em rotina a produtos ou sorosde animais podem demonstrar este tipode interferência, potencial causador deresultados anómalos. Estes reagentesforam formulados para minimizar o riscode interferência, contudo podem ocorrerpotenciais interacções entre soros (raros)e componentes do teste. Para fins dediagnóstico, os resultados obtidos nesteensaio devem ser sempre analisados emcombinação com o exame clínico, históriade medicação do doente e outrosachados que possam correlacionar.

Características do ensaioConsulte Tabelas e Gráficos para dadosrepresentativos do desempenho dodoseamento. Os resultados sãoapresentados em mIU/mL. (Salvoreferência em contrário, todos os dadosprovêm de amostras de soro colhidas emtubos sem anticoagulantes, barreiras degel ou aditivos promotores dacoagulação.)Calibração: Até 170 mIU/mL (8,9 ng/mL).Padronizado de acordo com os termos doWHO 2nd IRP 78/549 [código desubstituição interino 94/632].Sensibilidade Analítica: 0,1 mIU/mLEfeito Hook de Alta Dose:Nenhum até 50 000 mIU/mL.Precisão: Amostras foram ensaiadas emduplicado 40 vezes num total de 80réplicas. (Consulte a tabela “Precision.”)Linearidade: As amostras foramdoseadas sob vários níveis de diluição.(Ver a tabela de "Linearity" para dadosrepresentativos.)Recuperação: As amostras foramadicionadas na relação de 1 para 19 comtrês soluções FSH (150, 600 e


1 800 mIU/mL) antes do doseamento.(Ver tabela de "Recovery" para dadosrepresentativos.)Especificidade: O doseamento éespecífico para FSH. (Ver tabela de"Specificity".)

Bilirrubina: A presença de bilirrubina emconcentrações até 200 mg/L não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.

Hemolise: A presença de hemoglobinaem concentrações até 600 mg/dL não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.Lipemia: A presença de trigliceridos emconcentrações até 3 000 mg/dL não temefeito nos resultados, dentro da precisãodo ensaio.Tipo de amostra alternativa: Paradeterminar o efeito de amostrasalternativas, foi colhido sangue de 24voluntários, em tubos lisos de plásticopara soro, com EDTA, heparinizados etubos de vacum SST® da BectonDickinson. Todas as amostras foramdoseadas com o IMMULITE 2000 FSH.(Heparin) = 1,10 (Soro) + 0,65 mIU/mL

(SST) = 0,94 (tubos simples) + 0,12 mIU/mL

(EDTA) = 0,88 (Suero) + 0,57 mIU/mL

Médias:11,7 mIU/mL (Soro)13,5 mIU/mL (Heparin)11,5 mIU/mL (SST)10,8 mIU/mL (EDTA)

O plasma EDTA não deve ser usadocomo um tipo de amostra.Comparação de métodos: O IMMULITEFSH mono/mono doseamento foicomparado ao IMMULITE FSH mono/polida DPC em 431 amostras. (Zona detrabalho: aproximadamente 0,7 a130 mIU/mL. Ver gráfico.) Regressãolinear:

(IML m/m) = 0,90 (IML m/p) + 0,35 mIU/mLr = 0,990

Médias:31,4 mIU/mL (IMMULITE mono/mono)34,5 mIU/mL (IMMULITE mono/poli)

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