HEMOCULTURA

Meio de cultura destinado ao isolamento de microrganismos em amostras de sangue.Registro ANVISA:

10097010-137

Apresentação:

530133 - HEMOCULT I TSB 45mL CX 10FR

530135 - HEMOCULT I TSB 90mL CX 10FR

530138 - HEMOCULT I I BHI 45mL CX 10FR

530141 - HEMOCULT I PEDIATRICO TSB 9mL CX 10FR

HEMOCULTURA

Meio de cultura destinado ao isolamento de microrganismos em amostras de sangue.Registro ANVISA:

10097010-137

Hemocultura é um exame que pesquisa bactérias

no sangue através do uso de meios de cultura

específ icos.

A cultura do sangue é um dos exames

bacteriológicos mais importantes, porque o achado

de um microrganismo é geralmente bastante

signif icat ivo. Sabe-se que a part i r do sangue as

bactérias podem atingir qualquer sít io do

organismo, produzindo o que se chama de focos

infecciosos, podendo agravar o quadro clinico e

até mesmo levar a óbito. As bactérias responsáveis

pela infecção podem ser identi f icadas pela

real ização da hemocultura e são úteis no

diagnóstico etiológico e na escolha da terapia.

Normalmente o sangue circulante humano é estéri l ,

mas no t ranscorrer de algumas doenças

infecciosas, eventualmente, o sangue pode ser

invadido por microrganismos. Uma invasão

passageira da corrente sanguínea é denominada

bacteremia, ao passo que, a situação em que o

microrganismo além de invadir se mult ipl ica na

corrente circulatória denomina-se septicemia. As

causas de bacteremia ou septicemia são variáveis.

A hemocultura é importante principalmente em

casos graves aonde há persistência de febre, sinais

hematológicos e clínicos de infecção, porém, com

resultados de exames microbiológicos t radicionais

inconclusivos.

HEMOCULTURA

AMOSTRA

NÚMERO DE AMOSTRAS

Para maior clareza, definimos neste documento que a coleta de uma

amostra de hemocultura corresponde a uma punção. Cada punção

corresponde a dois frascos para adultos ou um frasco para pacientes

pediátricos até 13kg.

Recomenda-se coletar no mínimo duas até quatro amostras por episódio

infeccioso, o que permite o isolamento do agente bacteriano ou fúngico

em mais de 95% dos eventos.

Estudos de décadas anteriores indicaram que ao se

obter somente uma hemocultura, havia cerca de 80 a

90% de chance de recuperação, em duas amostras

aumentaria signif icat ivamente para > 88% e em t rês

amostras em até > 99% de recuperação.

Já estudos mais recentes, têm mostrado que as

chances de recuperação com somente uma amostra

f ica em torno de 70% , duas amostras em torno de 80 a

90% , t rês amostras entre 96 a 98 % e quatro amostras

>99% , desafiando-se os conceitos t radicionais de que

2 a 3 amostras eram suficientes, sugerindo que podem

ser necessárias de 3 a 4 amostras para ótima

recuperação dos agentes.

Acredita-se que possíveis explicações para este fato

sejam que com as metodologias atuais mais sensíveis,

tornou-se possível a detecção de baixos níveis de

bacteremia com mais pacientes em uso prévio de

antimicrobianos e talvez pela diferença metodológica

de análise dos estudos. Concluindo, o número de

amostras deve ser de no mínimo 2 e no máximo 4

mostras por episódio infeccioso.

O número de hemoculturas positivas em função do número total de amostras

coletadas (punções em diferentes sítios) é uma ferramenta muito útil para

interpretação do significado clínico, pois ao contrário dos casos de pacientes

com bacteremias verdadeiras, os contaminantes geralmente crescem somente

em uma amostra (quando duas ou mais são obtidas).

HEMOCULTURA

COLETAS

INTERVALO ENTRE COLETAS

De forma prática, a coleta deve ser indicada precocemente ao início dos

sintomas de infecção e antes do início da antibioticoterapia. Se o paciente

estiver em vigência de antimicrobianos, as hemoculturas devem ser obtidas

imediatamente antes da administração da próxima dose.

Anota ai :

Os frasc

os devem

ser

apropriad

os para re

ceber

volumes de

10ml cad

a,

respeitan

do a prop

orção

volume de

sangue/vo

lume

de meio d

e cultura

e

quantidade

de

anticoagu

lante.

Poucos estudos aval iam sistematicamente a hora e

o intervalo ótimo entre amostras sucessivas. Alguns

autores classicamente recomendam a coleta de

amostras em intervalos arbitrár ios de 30 a 60

minutos.

No entanto, Thomson e col. observaram que não há

diferenças signif icat ivas entre os índices de

posit ividade de hemoculturas obtidas em diferentes

tempos em relação ao pico febri l e Li e col.

demonstraram que não há diferenças na

recuperação de hemoculturas num período de 24

horas quando obtidas simultaneamente ou em

intervalos separados.

O estado clínico do paciente é que vai determinar o momento e o intervalo entre

as coletas. Em geral, nas infecções agudas, recomenda-se a coleta de duas a três

amostras (dois frascos por punção/amostra) em curto espaço de tempo, ou seja,

sequenciais ou dentro de 1 hora.

A coleta de hemoculturas em intervalos maiores de 1 a 2 horas entre as amostras

pode ser recomendada para monitorar ou documentar bacteremia contínua em

pacientes com suspeita de endocardite ou infecção endovascular associada a

dispositivos invasivos (ex.: cateter vascular).

HEMOCULTURA

PROCEDIMENTO

PROCEDIMENTOS PARA COLETA

Fazer a antissepsia da tampa de borracha do frasco com álcool 70%, desprezar

o algodão usado e deixar outro sobre a tampa até a inoculação do sangue;

Não deve ser feita a t roca de agulha após a coleta

de sangue para inoculação no f rasco, pois não há

decréscimo signif icat ivo na taxa de contaminação

quando a t roca é feita e aumenta-se o r isco de

acidentes para o profissional , além de elevar o

custo do exame.

A t ransferência da amostra para os f rascos de

hemoculturas deve ser feita primeiro no f rasco de

anaeróbio, sem t roca da agulha ; se a coleta foi

real izada com sistema de coleta fechado, inocular

primeiro no f rasco aeróbio.

É importante lembrar que, nesse caso, o f rasco de

hemocultura deve permanecer em pé durante toda

a coleta para evitar ref luxo para a veia do paciente ;

observar o volume correto, analisando o guia de

demarcação na etiqueta do próprio f rasco ;

Escolher o vaso a ser puncionado;

Colocar luva de procedimento ou estéril; se a luva a ser usada for a estéril, deve-

se lembrar de que não se pode tocar em materiais que não sejam estéreis;

Fazer a antissepsia da pele com algodão embebido em álcool isopropílico a

70%, fazendo movimentos centrífugos a partir do local escolhido para a punção.

Repetir o procedimento usando outro algodão com álcool 70% ou outro

antisséptico, como solução de tintura de iodo 1 a 2%, clorexidine alcoólico a

0,5%, etc., e deixando secar por um minuto;

Fazer a punção e a coleta da amostra de sangue e, depois, a remoção da solução

de iodo da pele. Caso tenha sido utilizado clorexidine, este passo não se faz

necessário;

HEMOCULTURA

PROCEDIMENTO

PROCEDIMENTOS PARA COLETA

A coleta deve ser realizada logo no início dos sintomas, preferencialmente antes

do início da antibioticoterapia

Não é recomendada a técnica de coleta através de

cateteres ou cânulas quando se podem uti l izar

punções venosas.

Punções arter iais não t razem benefícios na

recuperação dos microrganismos quando

comparadas com punções venosas.

Não se recomenda a t roca de agulhas entre a

punção de coleta e distr ibuição do sangue no

f rasco de hemocultura.

Método de coleta do sangue e o volume coletado

inf luenciam diretamente no sucesso de

recuperação de microrganismos e uma

interpretação adequada dos resultados.

Cada inst i tuição deverá ter suas normas de coleta

part icular izadas de acordo com o t ipo de sistema

uti l izado (manual x automatizado) e do t ipo de

paciente

Pacientes com quadro agudo de sepse ou outra condição (osteomielite,

meningite, pneumonia ou pielonefrite): coletar duas hemoculturas

consecutivamente de dois sítios anatômicos diferentes antes de iniciar a

antibioticoterapia

Pacientes com endocardite bacteriana subaguda, febre de origem

desconhecida (abcessos ocultos, febre tifóide, brucelose) ou fungemia: coletar

três hemoculturas, de sítios anatômicos diferentes, duas simultâneas e uma em

intervalo de aproximadamente 1 a 2 horas

Pacientes em antibioticoterapia: coleta deve ser feita na menor concentração do

agente, ou seja, minutos antes da próxima dose de antimicroabiano.

2x

3x

HEMOCULTURA

VOLUME

VOLUME DE SANGUE

Neonatos a 1 ano (

HEMOCULTURA

TRANSPORTE

VOLUME DE SANGUE

Inocular diretamente em meio de cultura próprio

Armazenar o frasco com o sangue em temperatura ambiente e enviar ao setor

de microbiologia TA e enviar ao setor de microbiologia em 12h.

Para f ins de t ransporte, o produto pode permanecer

em temperatura ambiente por até 72h. No laboratório

os f rascos devem ser armazenados em temperatura

ambiente, condições em que se mantém estáveis até

a data de vencimento expressa em rótulo, desde que

isento de contaminação de qualquer natureza.

Recomenda-se manter o produto protegido de

incidência direta de luz (natural ou art i f icial) e evitar

grandes variações de temperatura até a uti l ização.

Armazenamento e estabil idade

HEMOCULTURA

MÉTODO MANUAL

PROCESSAMENTO DE HEMOCULTURAS PELO MÉTODO MANUAL

Os resultados falsamente posit ivos ou negativos

podem ocorrer , com maior f requência, nas

seguintes situações:

Tempo longo entre a semeadura da amostra e

análise. Ao uti l izar colônias isoladas em um

período superior a 24 horas, o metabolismo

bacteriano pode f icar comprometido e a lei tura de

alguns parâmetros podem consequentemente f icar

defasados ou até mesmo não ocorrer . Em colônias

recentes ( infer ior ao período de 18 horas) não se

encontram com o metabolismo bem definido, e

algumas provas podem não ocorrer .

Incubação em temperatura inadequada.

Sobrecarga de inóculo ou falta de inóculo.

Placas com inóculos mais carregados podem gerar

resultados falsamente posit ivos e inóculos em

menor quantidade podem fornecer resultados

falsamente negativos.

Interpretação equivocada de resultados.

Técnica de assepsia inadequada.

HEMOCULTURA

MÉTODO MANUAL

PROCESSAMENTO DE HEMOCULTURAS PELO MÉTODO MANUAL

Tempo excessivo ou insuficiente de incubação.

Tempo excessivo de incubação fornece

resultados falsamente posit ivos e tempo

insuficiente fornece resultados falsamente

negativos.

Uti l ização de material vencido, contaminado ou

em condições inadequadas.

Contaminação cruzada por uso de acessórios

não esteri l izados corretamente ou ambiente não

asséptico.

Uti l ização de meios de cultura com aparência

alterada.

Não aguardar para que os materiais atinjam a

temperatura ambiente no momento do uso.

Erro na conservação do produto pode ocasionar

desidratação do meio e alteração das

propriedades dos componentes