8/16/2019 Green Tea Fix

1/3

Review Jurnal

Characterization of Binding Interactions of (−)-Epigallocatechin 3-gallate fro

!reen "ea and #ipase

Kasus obesitas telah meningkat dan mengkhawatirkan dalam beberapa tahun

terakhir sehingga menjadi ancaman serius di berbagai negara. Di negara-negara Asia,

teh hijau dapat digunakan untuk membantu dalam menurunkan berat badan. Teh hijau

diketahui memiliki banyak manfaat kesehatan, termasuk antioksidan, antikanker, anti-

inflamasi, dan antibakteri. Efek kesehatan dari teh hijau dikaitkan dengan aktiitas dari

 polienol sebagai antioksidan yang kuat. Katekin adalah polifenol yang dominan dalam

teh hijau dan terdiri epigallocatechin gallate !E"#"$, epigallocatechin, epicatechin

gallate, dan epicatechin. E"#" adalah konstituen yang paling melimpah dalam teh

hijau.

!a$ar % &tru'tur E!C!

Teh hijau memiliki kemampuan yang kuat untuk berinteraksi dengan en%im pencernaan, yang mengurangi pernyerapan makanan. &olifenol dari teh hijau dapat

mengurangi pencernaan lipid dengan menghambat aktiitas lipase. E"#" merupakan

komponen yang paling aktif dari teh hijau. Aktiitas penghambatan lipase dengan

E"#" ditandai interaksi antara E"#" dan lipase babi yang dianalisis menggunakan

spektroskopi fluoresensi, circular dichroism !#D$, isotermal titrasi kalorimetri !'T#$,

dan analisis docking molekuler.

8/16/2019 Green Tea Fix

2/3

Dalam penelitian ini, lipid yang digunakan yaitu (,)-dinitrophenyl butirat

!D*&+$, ditambahkan dengan ,mg lipase, serta dibandingkan hasilnya bila ditambahn

E"#" atau tidak. eaksi dilakukan pada suhu /0 o#, suhu normal tubuh. &enghambatan

aktiitas lipase dihitung sebagai 1inhibisi.

∈hibisi= Aktivitaskontrol

 Aktivitasuji  x100

2asil pengamatan yang terjadi yaitu aktiitas lipase semakin terhambat seiring

dengan meningkatnya E"#", yaitu rasio penghambatan dengan E"#" adalah //1

dalam 3 4g5m6.

7elain itu, dari hasil analisis dengan spektroskopi fluoresensi, seiring dengan

meningkatnya konsentrasi E"#" akan mengakibatkan penurunan intensitas fluoresensi

 pada lipase. 2ubungan antara intensitas fluoresensi dengan konsentrasi E"#" dapat

dijelaskan oleh persamaan 7tern-8olmer 9 lg!: ; :$5: < lgKa = n lg>?@, menunjukkan

hubungan yang linier. Data yang diperoleh yaitu E"#" berinteraksi dengan lipase

dengan perbandingan 9 . Konstanta ikatan !Ka$ E"#" dan lipase adalah /,3 B ) 6

mol-.

Cntuk menentukan pola penghambatan E"#", maka dilakukan pemahaman

tentang kinetika reaksi lipase. Cntuk konsentrasi E"#" yang berbeda mempunyai nilai

K m yang mirip, sehingga dapat dikatakan bahwa hambatan E"#" pada lipase bersifat

nonkompetitif.

8/16/2019 Green Tea Fix

3/3

2asil analisis #D !#ircular Dichroism$ menunjukkan perubahan konformasi

antara sebelum dan sesudah pengikata E"#" dengan en%im lipase. &erubahannya

antara lain struktur -heliks dari lipase berubah dari ( menjadi )1, penurunan F-sheet

dari ()1 menjadi )1, turn dari (1 menjadi 01 dan random coil berubah dari /3

menjadi (1

2asil analisis dari 'T# !Titrasi Kalorimetri 'sotermal$ menunjukkan bahwa G"

 bernilai negatif !interaksinya bersifat spontan$. Entalpi yang dihasilkan !-3,/ kH mol-$

terlalu rendah untuk pembentukan ikatan koalen !( - ) kH mol I$ menunjukkan⁻

 bahwa interaksi E"#" dan lipase adalah non koalen. G7 bernilai positif !J0,0(H mol -

K -$ dan G2 bernilai negatie !-3,/ kH mol -$ pada suhu /0o# menghasilkan nilai G"

negatif !-(,(J kH mol I$. 'mobilisasi parsial dari protein dan ligan terjadi pada langkah⁻

awal yang melibatkan interaksi hidrofobik yang menghasilkan G7 positif. Di kompleks

interaksi berikutnya, kontribusi G2 negatif terhadap keseluruhan A" dapat dikaitkan

dengan interaksi an der aals dan ikatan hidrogen.

2asil docking menunjukkan bahwa E"#" dikelilingi oleh 8al(, "ln((, 'le(,

Arg, "ln33, "ln((, #ly3J, &ro30, Thr3, dan "ln(( di lipase. 'nteraksi

ikatan hidrogen muncul diantara 8al(, "ln33, dan "ln(( sehingga dapat

meningkatan afinitas pengikatan antara E"#" dan lipase. G" yang dihitung untuk 

ikatan E"#"-lipase adalah -(),00 kH mol-, hampir sama dengan hasil data dari 'T#.

7itus katalitik lipase babi merupakan residu 7er), 2is)/J, dan Asp/(./3

menunjukkan bahwa situs ini tidak mengelilingi E"#". 7erta, penemuan kinetika untuk 

lipase menunjukkan bahwa penghambatan E"#" dari lipase adalah nonkompetitif.

Lleh karena itu, E"#" menghambat aktiitas lipase babi dengan tidak mengikat situs

katalitik lipase. Konformasi en%im tergantung pada interaksi non koalen dan koalenantara sisi asam amino en%im. Aktiitas en%im akan berubah jika terjadi perubahan

konformasi spesifik. Mekanisme utama protein pengikat polifenol teh adalah interaksi

non koalen. 'katan non koalen seringkali lemah dan tidak spesifik, tetapi kombinasi

dari beberapa ikatan nonkoalen dapat mengubah konformasi dan fungsi protein.