cultivo Claviceps purpurea

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there has been lot of talk about LSD synthesis lately. I guess as an conclusion it can be said that the synthesis can be carried out with good chemistry knowledge and laboratory. Then the problem is where to get lysergic acid derivative for the synthesis. The full synthesis of the lysergic acid is too difficult. Lysergic acid amides can be extracted from the seeds of morning glory or hawaiian baby wood rose, but it is not practical, because the huge amount of seeds needed to get enough lysergic acid amides for the LSD synthesis. To my opinion the only feasible possibility is to cultivate ergot. What I would like to know is how difficult it is to cultivate Claviceps purpurea for example. Is it harder than growing psychedelic mushrooms? Is the following procedure any good and how hard it is to carry out? Any constructive comments? Michael Valentine Smith: Psychedelic Chemistry From pages 105-107: The Culture and Extraction of Ergot Alkaloids Make up a culture medium by combining the following ingredients in about 500 milliliters of distilled water in a 2 liter, small-neck flask: Sucrose .......................................... 100 grams Chick pea meal .................................... 50 grams Calcium nitrate ..................................... 1 gram Monopotassium phosphate ......................... 0.25 grams Magnesium sulphate .............................. 0.25 grams Potassium chloride ............................. 0.125 grams Ferrous sulphate heptahydrate ................... 8.34 milligrams Zinc sulphate heptahydrate ...................... 3.44 milligrams Add water to make up one liter, adjust pH 4 with ammonia solution and citric acid. Sterile by autoclaving. Inoculate the sterilized medium with Claviceps purpurea under sterile conditions, stopper with sterilized cotton and incubate for two weeks periodically testing and maintaining pH 4. After two weeks a surface culture will be seen on the medium. Large-scale production of the fungus can now begin. Obtain several ordinary 1 gallon jugs. Place a two-hole stopper in the necks of the jugs. Fit a short (6 inch) glass tube in one hole, leaving 2 inches above the stopper. Fit a short rubber tube to this. Fill a small (500 milliliter) Erlenmeyer flask with a dilute solution of sodium hypochlorite, and extend a glass tube from the rubber tube so the end is immersed in the hypochlorite. Fit a long, glass tube in the other stopper hole. It must reach near the bottom of the jug and have about two inches showing above the stopper. Attach a rubber tube to the glass tube as short or as long as desired, and fit a short glass tube to the end of the rubber tube. Fill a large, glass tube (1 inch x

Transcript of cultivo Claviceps purpurea

  • there has been lot of talk about LSD synthesis lately.

    I guess as an conclusion it can be said that the synthesis can be

    carried out with good chemistry knowledge and laboratory. Then the

    problem is where to get lysergic acid derivative for the synthesis.

    The full synthesis of the lysergic acid is too difficult. Lysergic

    acid amides can be extracted from the seeds of morning glory or

    hawaiian baby wood rose, but it is not practical, because the huge

    amount of seeds needed to get enough lysergic acid amides for

    the LSD synthesis. To my opinion the only feasible possibility is

    to cultivate ergot.

    What I would like to know is how difficult it is to cultivate

    Claviceps purpurea for example. Is it harder than growing psychedelic

    mushrooms? Is the following procedure any good and how hard it is

    to carry out? Any constructive comments?

    Michael Valentine Smith: Psychedelic Chemistry

    From pages 105-107:

    The Culture and Extraction of Ergot Alkaloids

    Make up a culture medium by combining the following ingredients in about

    500 milliliters of distilled water in a 2 liter, small-neck flask:

    Sucrose .......................................... 100 grams

    Chick pea meal .................................... 50 grams

    Calcium nitrate ..................................... 1 gram

    Monopotassium phosphate ......................... 0.25 grams

    Magnesium sulphate .............................. 0.25 grams

    Potassium chloride ............................. 0.125 grams

    Ferrous sulphate heptahydrate ................... 8.34 milligrams

    Zinc sulphate heptahydrate ...................... 3.44 milligrams

    Add water to make up one liter, adjust pH 4 with ammonia solution and

    citric acid. Sterile by autoclaving.

    Inoculate the sterilized medium with Claviceps purpurea under sterile

    conditions, stopper with sterilized cotton and incubate for two weeks

    periodically testing and maintaining pH 4. After two weeks a surface

    culture will be seen on the medium. Large-scale production of the

    fungus can now begin.

    Obtain several ordinary 1 gallon jugs. Place a two-hole stopper in

    the necks of the jugs. Fit a short (6 inch) glass tube in one hole,

    leaving 2 inches above the stopper. Fit a short rubber tube to this.

    Fill a small (500 milliliter) Erlenmeyer flask with a dilute solution

    of sodium hypochlorite, and extend a glass tube from the rubber tube

    so the end is immersed in the hypochlorite. Fit a long, glass tube in

    the other stopper hole. It must reach near the bottom of the jug and

    have about two inches showing above the stopper. Attach a rubber tube

    to the glass tube as short or as long as desired, and fit a short glass

    tube to the end of the rubber tube. Fill a large, glass tube (1 inch x

  • 6 inches) with sterile cotton and fit 1-hole stoppers in the ends.

    Fit the small, glass tube in end of the rubber tube into 1 stopper of

    the large tube. Fit another small glass tube in the other stopper.

    A rubber tube is connected to this and attached to a small air pump

    obtained from a tropical fish supply store. You now have a set-up for

    pumping air from the pump, through the cotton filter, down the long

    glass tube in the jug, through the solution to the air space in the top

    of the jug, through the short glass tube, down to the bottom of the

    Erlenmeyer flask and up through the sodium hypochlorite solution into

    the atmosphere. With this aeration equipment you can assure a supply

    of clean air to the Claviceps purpurea fungus while maintaining a

    sterile atmosphere inside the solution.

    Dismantle the aerators. Place all the glass tubes, rubber tubes,

    stoppers and cotton in a paper bag, seal tight with wire staples

    and sterilize in an autoclave.

    Fill the 1-gallon jugs 2/3 to 3/4 full with the culture medium and

    autoclave.

    While these things are being sterilized, homogenize in a blender the

    culture already obtained and use it to inoculate the media in the

    gallon jugs. The blender must be sterile. Everything must be sterile.

    Assemble the aerators. Start the pumps. A slow bubbling in each jug

    will provide enough oxygen to the cultures. A single pump can, of

    course, be connected to several filters.

    Let everything sit a room temperature (25 C) in a fairly dark place

    (never expose ergot alkaloids to bright light - they decompose) for

    a period of ten days.

    After ten days adjust the culture to 1% ethanol using 95% ethanol

    under sterile conditions. Maintain growth for another two weeks.

    After total of 24 days growth period the culture should be considered

    mature. Make the culture acidic with tartaric acid and homogenize in

    a blender for one hour.

    Adjust to pH 9 with ammonium hydroxide and extract with benzene or

    chloroform/iso-butanol mixture.

    Extract again with alcoholic tartaric acid and evaporate in a vacuum

    to dryness. The dry material in the salt (i.e., the tartaric acid salt,

    the tartrate) of the ergot alkaloids, and is stored in this form because

    the free basic material is too unstable and decomposes readily in the

    presence of light, heat, moisture and air.

    To recover the free base for extraction of the amide of synthesis to

    LSD, make the tartrate basic with ammonia to pH 9, extract with chloroform

    and evaporate in vacuo.

    If no source of pure Claviceps purpurea fungus can be found, it may be

    necessary to make a field trip to obtain the ergot growths from rye or

  • other cereal grasses. Rye grass is by far the best choice. The ergot will

    appear as a blackish growth on the tops of the rye where the seeds are

    and are referred to as "heads of ergot." From these heads of ergot sprout

    the Claviceps purpurea fungi. They have long steams with bulbous heads when

    seen under a strong glass or microscope. It is these that must be removed

    from the ergot, free from contamination, and used to inoculate the culture

    media. The need for absolute sterility cannot be overstressed. Consult any

    elementary text on bacteriology for the correct equipment and procedures.

    Avoid prolonged contact with ergot compounds, as they are poisonous and

    can be fatal.

    se ha hablado mucho sobre la sntesis de LSD ltimamente.

    Supongo como una conclusin, se puede decir que la sntesis puede ser

    llevado a cabo con buenos conocimientos de qumica y de laboratorio. Entonces el

    problema es dnde conseguir derivado del cido lisrgico para la sntesis.

    La sntesis completa del cido lisrgico es demasiado difcil. lisrgico

    amidas de cidos se pueden extraer de las semillas de gloria de la maana o

    madera beb hawaiano rosa, pero no es prctico, debido a la enorme

    cantidad de semillas necesarias para obtener las amidas del cido lisrgico suficientes para

    la sntesis de LSD. Para mi opinin, la nica posibilidad viable es

    cultivar cornezuelo.

    Lo que me gustara saber es lo difcil que es cultivar

    Claviceps purpurea por ejemplo. Es ms difcil que el cultivo psicodlico

    setas? Es el siguiente procedimiento de nada y lo difcil que es

    para llevar a cabo? Cualquier comentario constructivo?

    Michael Valentine Smith: Qumica Psicodlica

    Desde las pginas 105-107:

  • La cultura y la extraccin de alcaloides del cornezuelo de centeno

    Hacer un medio de cultivo mediante la combinacin de los siguientes ingredientes en

    aproximadamente

    500 mililitros de agua destilada en un matraz de 2 litros de pequea cuello:

    Sacarosa .......................................... 100 gramos

    Harina de garbanzo .................................... 50 gramos

    El nitrato de calcio ..................................... 1 gramo

    Fosfato monopotsico ......................... 0,25 gramos

    El sulfato de magnesio .............................. 0,25 gramos

    El cloruro de potasio ............................. 0.125 gramos

    Sulfato ferroso heptahidratado ................... 8,34 miligramos

    Sulfato de zinc heptahidratado ...................... 3,44 miligramos

    Aadir agua para completar un litro ajustar el pH 4 con una solucin de amoniaco y

    cido ctrico. Estril en autoclave.

    Inocular el medio esterilizado con Claviceps purpurea bajo estril

    condiciones, tapar con un algodn esterilizado y se incuba durante dos semanas

    probar peridicamente y mantener el pH 4. Despus de dos semanas una superficie

    la cultura se ver en el medio. La produccin a gran escala de la

    hongo puede comenzar ahora.

    Obtenga varias jarras de 1 galn ordinarios. Coloque un tapn de dos agujeros en

  • los cuellos de las jarras. Coloque un tubo corto de vidrio (6 pulgadas) en un agujero,

    dejando 2 pulgadas por encima del tope. Coloque un tubo corto de goma para esto.

    Llene un pequeo (500 mililitros) erlenmeyer con una solucin diluida

    de hipoclorito de sodio, y extender un tubo de vidrio desde el tubo de goma

    por lo que el extremo se sumerge en el hipoclorito. Colocar un tubo largo y vidrio en

    el otro agujero del tapn. Se debe llegar a la parte inferior de la jarra y

    han cerca de dos pulgadas que muestra arriba del tapn. Conecte un tubo de goma

    al tubo de vidrio tan corto o tan largo como se desee, y coloque un vaso corto

    tubo al extremo del tubo de caucho. Llene un gran tubo de vidrio (1 pulgada x

    6 pulgadas) con algodn estril y en forma tapones de 1 agujero en los extremos.

    Coloque el pequeo tubo de vidrio en el extremo del tubo de goma en 1 tapn de

    el tubo grande. Coloque otro tubo pequeo de vidrio en el otro tapn.

    Un tubo de goma est conectado a esta y conectado a una bomba de aire pequea

    obtenido a partir de una tienda de suministros de peces tropicales. Ahora tiene una puesta a

    punto para

    bombear aire desde la bomba, a travs del filtro de algodn, por el largo

    tubo de vidrio en la jarra, a travs de la solucin al espacio de aire en la parte superior

    de la jarra, a travs del tubo de vidrio corta, hacia abajo a la parte inferior de la

    Matraz Erlenmeyer y arriba a travs de la solucin de hipoclorito de sodio en

    la atmsfera. Con este equipo de aireacin se puede asegurar un suministro

    aire limpio para el hongo Claviceps purpurea, manteniendo una

    ambiente estril dentro de la solucin.

    Desmontar los aireadores. Coloque todos los tubos de vidrio, tubos de goma,

    tapones y algodn en una bolsa de papel, sello hermtico con grapas de alambre

    y esterilizar en un autoclave.

  • Llenar las jarras de 1 galn de 2/3 a 3/4 de su capacidad con el medio de cultivo y

    autoclave.

    Mientras que estas cosas se estn esterilizados, homogeneizar en una licuadora el

    cultura ya obtuvo y lo utilizan para inocular los medios de comunicacin en el

    vasos de medio litro. El mezclador debe ser estril. Todo debe ser estril.

    Montar los aireadores. Comience de las bombas. Un burbujeo lento en cada jarra

    proporcionar suficiente oxgeno a los cultivos. Una sola bomba puede,

    Por supuesto, estar conectado a varios filtros.

    Que todo se siente una temperatura ambiente (25 C) en un lugar bastante oscuro

    (nunca exponer a los alcaloides del cornezuelo de centeno a la luz brillante - se descomponen)

    para

    un perodo de diez das.

    Despus de diez das ajustar el cultivo a 1% de etanol utilizando etanol al 95%

    en condiciones estriles. Mantener un crecimiento por otras dos semanas.

    Tras total de perodo de crecimiento 24 das la cultura debe ser considerada

    madura. Hacer la cultura cida con cido tartrico y homogeneizar en

    un mezclador durante una hora.

    Ajustar el pH a 9 con hidrxido de amonio y se extrae con benceno o

    mezcla de cloroformo / iso-butanol.

  • Extraer de nuevo con cido tartrico alcohlica y se evapora en el vaco

    a sequedad. El material seco en la sal (es decir, la sal de cido tartrico,

    el tartrato) de los alcaloides del cornezuelo del centeno, y se almacena en esta forma porque

    el material bsico gratuito es demasiado inestable y se descompone fcilmente en el

    presencia de la luz, el calor, la humedad y el aire.

    Para recuperar la base libre para la extraccin de la amida de la sntesis a

    LSD, hacen que el tartrato bsica con amoniaco a pH 9, se extrae con cloroformo

    y se evapora a vaco.

    Si no hay ninguna fuente de pura hongo Claviceps purpurea se puede encontrar, puede ser

    necesario para hacer un viaje de campo para obtener los crecimientos del cornezuelo de centeno

    o

    otras hierbas de los cereales. Rye grass es de lejos la mejor opcin. El cornezuelo se

    aparecer como un crecimiento negruzco en la parte superior de la de centeno en donde las

    semillas son

    y se conocen como "cabezas de cornezuelo." A partir de estos jefes de cornezuelo brote

    el hongo Claviceps purpurea. Tienen vapores largos con cabezas bulbosas cuando

    visto bajo un vidrio fuerte o un microscopio. Son estos los que debe ser eliminado

    del cornezuelo de centeno, libre de contaminacin, y se utiliza para inocular la cultura

    los medios de comunicacin. La necesidad de una esterilidad absoluta no puede ser exagerada.

    Consulte cualquier

    texto elemental sobre la bacteriologa para el equipo y los procedimientos correctos.

    Evite el contacto prolongado con compuestos del cornezuelo del centeno, ya que son venenosos y

    puede ser fatal.