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Control de micotoxinas del campo a la mesa
INOFOOD5 de octubre 2015
Nancy ZabeJefa de Servicios Tecnicos y Aplicaciones
VICAM A Waters BusinessVICAM, A Waters [email protected]
2014 Waters Corporation 1

Saludos a los Participantes de INOFOOD 2015 , desde Massachusetts y el noreste de los EE.UU.!!!y o o
Pemaquid Point Lighthouse, Pemaquid, Maine (C t t d EE UU )
(Costa noreste de EE.UU.)

The presence of mycotoxins in commodities is presently unavoidable and, therefore, to avoid their occurrence in therefore, to avoid their occurrence in the food chain requires management strategies that would prevent contaminated commodities from entering food and feed processing facilities. Testing of the commodities is required to accomplish this process is required to accomplish this process.
The Council for Agricultural Science and Technology report #139, 2003
Traduccin:La presencia de micotoxinas en commodities actualmente es inevitable, y evitar su ocurrencia en la cadena de alimentos requiere de estrategias de
i i id d i d l i l i gestin, que impida que productos contaminados entren en las instalaciones de procesos de alimentos y forrajes. El anlisis de estos commodities es indispensables para lograr este proceso.
Informe del Consejo para la Ciencia Agrcola y Tecnologa #139, 2003

Qu son las micotoxinas? Dnde se encuentran las micotoxinas? Dnde se encuentran las micotoxinas? Regulaciones de micotoxinas Mtodos de anlisis de micotoxinas Controlar las micotoxinas

Qu son las micotoxinas?
Mi t i t b lit d id h
Q
Micotoxinas son metabolitos producidos por hongos que se encuentran presentes en alimentos deteriorados, y que inducen respuestas toxicas cuando son consumidos por animales o personas.
Cientos de micotoxinas han sido identificados; se dividen en muchas clases qumicas diferentes, e inducen una amplia variedad de respuestas txicas.

Historia de las micotoxinas
Ergotismo (Fuego San Antonio) en la Edad Media Ergotismo (Fuego San Antonio) en la Edad Media Aleukia toxica alimentaria en Rusia durante la Segunda
Guerra Mundial (T-2) Sindroma del Pavo X en Inglaterra en 1960 (aflatoxina) Sindroma del Pavo X en Inglaterra en 1960 (aflatoxina) Intoxicacin por aflatoxina en Kenia en 2004 Brote de aflatoxina en comida para perros en EE.UU. en
2006

Micotoxinas AFLATOXINAS DEOXINIVALENOL FUMONISINAS OCRATOXINA T 2/HT 2 ZEARALENONAMicotoxinas AFLATOXINASB1, B2, G1, G2, M1
DEOXINIVALENOL FUMONISINASB1, B2, B3
OCRATOXINA A
T-2/HT-2 ZEARALENONA
Mohos que producen toxinas
Aspergillus flavus,Aspergillus
Fusarium graminearum
Fusarium verticillioides
Aspergillus ochraceusPenicillium
Fusarium y otros especies de hongo
Fusarium graminearum
toxinas Aspergillus parasiticus
Penicillium verrucosum
de hongo
Alimentos susceptibles a
Maz, man,
Maz, trigo, b d
Maz y otros d
Maz, trigo, b d
Maz, trigo, b d
Maz, trigo, b dsusceptibles a
la contaminacin
nueces, semilla de algodn, especias, leche, trigo, avena cebada
cebada,cebada malteada y avena
granos de cereal
cebada, cerveza,avena, sorgo, frutos secos, pasas, el vino, caf y cacao
cebada, avena,arroz, sorgo, y otros granos de cereal
cebada,grano y sorgo
avena, cebada y arroz
caf y cacao
Efectos en la salud
Cncer y dao del hgado
Dao del tracto digestivo
Cncer en ratonesDegradacin
Dao de rin y cncerInmunosupre
Lesiones cutneas y orales en
Impacto negativo de la reproduccin hgado
InmunosupresinDisminuye Produccin de leche y
digestivo, medula sea, bazo, rganos reproductivosPerdida de peso, vmitos
Degradacin del cerebro en caballosCongestin de pulmones en cerdos
Inmunosupresin
orales en ganadera y humanosAleukiatoxica alimentaria en
reproduccin, el desarrollo fetal y la salud de recin nacidosCausa
leche y huevos
peso, vmitosy rechazo de forraje
en cerdosCncer del esfago en humanos
alimentaria en humanosConsiderada 10x ms toxica que DON
Causa feminizacin en animales a 1 ppm

Micotoxinas: Riesgos econmicos y sanitariosy
Factores biolgicosFactores ambientalesTemperaturaHumedad
CosechaMadurez del cultivoCultivo susceptible +
Hongo compatible y toxico
HumedadLesin mecnicaDao insectos/avesHongo
Madurez del cultivoTemperaturaHumedadDeteccin/Diversin
AlmanecimientoTemperaturaHumedadDeteccin/Diversin
Distribucin-ProcesamientoDistribucin ProcesamientoDeteccin/Diversin
Productos animales
2014 Waters Corporation 8Figura 6.1. Factores afectando la ocurrencia de micotoxinas en la caneda de alimentos (Pestka y Casale, 1989).
HumanosAnimales

Regulacin mundial de micotoxinasg
Figura 8.1 Pases con regulacin vigente para micotoxinas en alimentos y forraje (amarillo), pases donde no se sabe si hay regulacin (verde) y
(CAST report, 2003)
naciones donde no hay regulacin especifica vigente (rojo).

Regulacin Chilena para micotoxinas en alimentos para humanos*p
Micotoxinas Alimento LimiteAflatoxinas totales (B1, B2, Cereales, especias, man, 10ppbG1, G2) almendras, nueces, avellanas,
pistachos, higos secos y nueces de Brasil
Aflatoxina M1 Leche 0,5ppb
Zearalenona Cereales 200ppb
Patulina Jugos, concentrados, pur de manzanas, peras, nsperos y membrillos
50ppb
Ocratoxina Cereales, cacao, pasas, jugos, nctares y concentrado de uva, caf en grano
5ppb
Ocratoxina Caf soluble (instantneo) 10ppbOcratoxina Caf soluble (instantneo) 10ppb
Deoxinivalenol Cereales 750ppb
Fumonisinas Maz no elaboradoMaz y sus derivados para consumo directo
4000ppb1000ppb
consumo directo
* Exportadores deben cumplir las regulaciones de pases importadores

Micotoxinas mas comnmente reguladas en alimentos globalmenteg
Micotoxina Nmero depases
Aflatoxina total 76Aflatoxina B1 61Aflatoxina M1 60
liPatulina 48Ocratoxina A 37Deoxinivalenol 37Zearalenona 17Zearalenona 17Fumonisina 6
(FOA Food and Nutrition Paper #81)

Tecnologas para el anlisis de micotoxinasg p
Costo y mayor complejidad Ms informacin
Costo y menorcomplejidad Menos informacin
LC-MSUPLC-MS-MS
HPLCo UPLC
Tiras reactivas cuantitativas oColumnas de
Tiras reactivas cualitativas Columnas de
inmunoafinidadcon fluormetro
cualitativas

Consideraciones para elegir un buen mtodop g
Tiempo de anlisis
Mano de obra Capacitacin Nivel de formacin
Costo Capital de inversin y consumibles
Entorno de prueba en laboratorio o en terreno
Requiere un mtodo oficial?
Precisin, exactitud y limite de deteccin requerida para
el mtodo
Tipo de informacin cualitativo o cuantitativo, toxinas
totales o individuales

Mtodo tiras reactivas cualitativasAflaCheckAflaCheck
Muestra de maz 5g 10mL 70% MeOH(10ppb LOD)
Agitar, 1 min.( pp )
Negativo
ExtraccinDilucin con agua
Prueba tira: 3-10 min.Positivo

En la ausencia de micotoxinasT C
Lnea de Lnea deGotas de muestra Lnea de prueba oscura
Lnea de control plida
Gotas de muestra limpia
conjugadomicotoxina-
protena
Anticuerpo etiquetado Anti-anticuerpo
protena

En la presenca de micotoxinas
T C
L d bGotas de muestra Lnea de prueba plida o ausente
Lnea de control oscura
Gotas de muestra contaminada
micotoxina
conjugadomicotoxina-
protena
Anticuerpo etiquetado Anti-anticuerpo
micotoxina
protena

Tiras de flujo lateral se pueden leer con un lector para resultados cuantitativos

Mtodo tiras reactivas cuantitativas Afla-V
5g de 5g + 25mL Vortex Recoger 5g de muestra* 70% MeOH 2 minutos
Recoger Filtrar
100uL filtrado100uL de diluyente
Afla V
Transferir 100uL
al dispositivo
Leer resultado
despus de
Afla-V al dispositivo despus de 5 min
*man, almendras, maz, trigo y arroz

Caractersticas de tiras reactivas cuantitativas
Se pueden utilizar en terreno Tiras deben ser refrigeradasp Rpido- menos de 10 minutos Da un resultado numrico Fcil- Cualquier persona puede
g Precisin ms baja que mtodos
instrumentales Disponible para cuantificar Fcil Cualquier persona puede
ser entrenado rpidamente para hacer la prueba
Barato
Disponible para cuantificar aflatoxinas totales, fumonisina, DON y Ocratoxina (Afla-V, Fumo-V, DON-V y Ochra-V)Barato
Permite tomar decisiones en terreno
No requiere lavar los insumos
Mtodos de extraccin con agua tambin disponibles
Afla-V es certificado USDA-GIPSA No requiere lavar los insumos todo es desechable

Columnas de inmunoafinidad nicas para cuantificacin de micotoxinas con fluormetroo HPLCo HPLC
Aflatoxina (agujero angosto o ancho) Aflatoxina (aguje

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