FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA J.M VARGAS.

CÁTEDRA DE HISTOLOGÍA Y EMBRIOLOGÍA NORMAL

Prof . Jaime Zalchendler

Estudio de los Cromosomas

Humanos

Recordando ….

CICLO CELULAR

Mitosis(ecuacional)

Meiosis(ecuacional

y reduccional)

46 c

46 c

46 c

46 c 23 c

CROMOSOMA HUMANOCélula somática: diploide ------ (2n)

22 pares de autosomas 1 par de cromosomas sexuales Cada par: 2 homólogos

Uno de origen paterno Uno de origen materno

Gametos: haploide ------ (n) Espermatozoides: 23 cromÓvulo: 23 crom

23 pares = 46

citogenética

¿Qué disciplina estudia los cromosomas?

Cambios en el númeroCambios en la estructura

Alteraciones congénitas o adquiridas.

Producidas en todas las células del organismo o sólo

en algunas.

NORMAL

ALTERACIONES

Por lo general condicionan una patología pero no

siempre

CARIOTIPO MASCULINO NORMAL

46,XY

CARIOTIPO FEMENINO NORMAL

46,XX

Brazo corto (p)

Centrómero

Brazo largo (q)

Partes de un Cromosoma

Telómero

Telómero

Existen tres tipos de cromosomas humanospor el tamaño de sus brazos “p” y “q”

Metacéntrico Submetacéntrico Acrocéntrico

p = q p < q p <<< q

Grupos

A: 1 – 2 - 3

B: 4 - 5

Los dividimos en 7 grupos:Por su longitud: De mayor a menor

C: 6 – 12 , X

D: 13 – 14 – 15

E: 16 – 17 – 18

F: 19 – 20

G: 21 – 22 – Y

Todos los cromosomas son distintos

Marcas claras y oscuras = BANDAS CROMOSÓMICAS

Banda clara

Banda oscura

Banda clara

Banda oscura

Banda oscura

Citogenética ConvencionalMuy utilizada desde los años 1960 hasta la actualidad por ser altamente informativa

Se basa en el uso de tinciones (Bandeo) para analizar número y estructura de los cromosomas.

Banda G (de rutina)

Banda R

Banda C

Banda T

Bandeo

¿Cómo se hace un cariotipo ?

TÉC

NIC

A

¿Cuándo hacer un CARIOTIPO?

INDICACIONES PARA EL ESTUDIOCITOGENÉTICO

El triple Screening es una prueba donde se miden los niveles de estriol conjugado, alfafetoproteína y gonadotrofina coriónica, es una prueba predictiva, no de diagnóstico definitivo. Es decir, si hay una valor alterado hay que realizar Amniocentesis genética para Dx de alteraciones cromosómicas (las más frecuente trisomías 21,18 y 13) y ecosonografía de alto nivel para detección de defectos del Tubo neural (Meningocele,mielomeningocele, encefalocele, etc.)

INDICACIONES PARA EL ESTUDIOCITOGENÉTICO

INDICACIONES PARA EL ESTUDIOCITOGENÉTICO

INDICACIONES PARA EL ESTUDIOCITOGENÉTICO

INDICACIONES PARA EL ESTUDIOCITOGENÉTICO

Ca M

ama

Ca C

olon

infertilidad

Hibridación in situ fluorescente e hibridación

genómica comparada

Hibridación in situ fluorescente “FISH”

• Es una técnica ampliamente empleada en la que un fragmento marcado de DNA especifico de un cromosoma (sonda) se expone a cromosomas desnaturalizados en metafase, profase o interfase.

• La FISH proporciona una resolución considerablemente superior a la de las técnicas de bandas de alta resolución; característicamente puede detectar deleciones de tamaño tan pequeño como 1 millón de pares de bases (1 MB).

• Dado que mediante FISH pueden detectarse aneuploidias empleando cromosomas en interfase, no es necesario estimular a las células para que se dividan con el fin de obtener cromosomas en metafase.

Hibridación genómica comparada “CGH”

• Las perdidas o duplicaciones de regiones cromosómicas especificas pueden detectarse mediante esta técnica.

• El DNA que se va a analizar se marca una sustancia que muestra un color en el microscopio de fluorescencia; el DNA de las células de control normales se marca con un segundo color.

TECNICA DE FISH

- PREPARACION PREVIA DE LA MUESTRA- PREPARACION DE LAS PLACAS- PREPARACION DE LAS SONDAS- HIBRIDACION- LAVADOS POST-HIBRIDACION- DETECCION- TINCION DE CONTRASTE (yoduro de propidium o DAPI)- VISUALIZACION (microscopio de epifluorescencia)

TIPOS DE SONDAS

PAINTING o COATING

SONDAS REPETITIVAS DE DNA ALFA SATELITE

SONDAS DE DNA DE SECUENCIA UNICA

GEN SRY EN CROMOSOMA X

CROMOSOMA X: SONDA ROJACROMOSOMA Y: SONDA VERDECROMOSOMA 18: SONDA CELESTE

SONDA DELECION CROMOSOMA 15

DELECION EN EL CROMOSOMA 15

DELECION DEL LOCUS KAL EN EL CROM. X

EL FISH NOS PERMITE RESPONDER PREGUNTAS

IMPOSIBLES DE RESOLVER CON TÉCNICAS DE

CITOGENÉTICA CLÁSICA, ES MENOS LABORIOSO

Y MAS RÁPIDO QUE LOS BANDEOS DE ALTA

RESOLUCIÓN, ES UNA TÉCNICA FACTIBLE Y

PODEROSA EN RESOLUCIÓN.

¿Qué podemos diagnosticar?

AnomalíasCromosómicas

Numéricas

Estructurales

TrisomíasMonosomíasPoliploidías

DeleciónInserción

TranslocaciónInversión

DuplicaciónAnillos

Isocromosomas

Numéricas¿ Dónde se producen ?

Profase Metafase Anafase Telofase

En los gametos ubicados en Ovario

y Testículo

NORMAL

NO DISYUNCIÓN

Numéricas

MetafaseAnafase

gametos

23

LA ALTERACIÓN EL NÚMERO DE

CROMOSOMAS EN LOS GAMETOS SE

PRODUCE POR “NO DISYUNCIÓN”

(FALTA DE SEPARACIÓN) 24

24

22

22

NO DISYUNCIÓN

Combinación de defectos congénitos.

Retardo mental.

Rasgos faciales

Defectos cardíacos

Cromosomas 21 adicional

El Síndrome de Down

S. Down Meiosis Normal2n

n n

Anormal2n

2n

n n n n

46,XY 46,XX 47,XY,+21

+45,XY,-21

92%. No disyunción de células germinativas durante la gametogénesis materna

(trisomía libre)

5%Translocación de cromosomas

acrocéntricos

3%Mosaicismo

Riesgo de Recurrencia No Disyunción1 - 2%

Translocación5 - 100%

Mosaicismo1%

46,XY,t(14;21)(q10;q10),+21

Las mujeres con S. DOWN pueden concebir:47, XX, + 21

Los varones con S. DOWN son infértiles:47, XY, + 21

Linea Palmar transversal única:

Una línea atraviesa toda la palma .

Normal

Linea simiana

Trisomía 13 y 18La T18 y la T13 presentan combinación de defectos congénitos.Retardo mental severo y problemas sistémicos.

20% y 30% de los nacidos mueren en el primer mes de vida90% muere al año

5% y 10% de los nacidos sobreviven al primer año de vida.

Trisomía 13 Trisomía 18

La Trisomía del par 18 ó “Síndrome de Edwards“1/4 000 – 1/5000 nacimientos.

47,XY,+18

Trisomía 18

Síndrome de Edward(18) Muy raro

I en 10,000 nacidos vivos, la mayoría mueren in útero

La mayoría muere dentro de los 6 meses siguientes

Características físicas inusuales

El primer y quinto dedos unidos sobrelapando al tercero y cuarto dedo

Ha sido atribuido a una no-disyunción en la meiosis II del Oocito

grupo “D”,

La Trisomía del par 13 ó “Síndrome de Patau“1/7500 – 1/10000 nacimientos.

47,XX,+13

Trisomía 13Síndrome de Patau

Muy raro I en 15,000

nacidos vivos, la mayoría mueren in útero

Letal La mitad

muere dentro del mes siguiente

La medio de sobrevivencia es de 6 meses

La frecuencia se incrementa con la edad de los padres

Se presenta en las niñas.

El Dr. Henry Turner describió el síndrome en 1938, en 1959 se identificó la causa: presencia de un sólo cromosoma X.

Síndrome de Turner

45,X

Sinonimia: "monosomía X“ = S. Turner No se asocia con edad materna

Cromosoma ausente: error meiótico paterno (80%) o materno (20%)

Síndrome de Klinefelter

Principales características de (47,XXY)

Sin entradas

Poco vello

Desarrollo de pechos

Patrón de vellopúbicofemenino

Pequeñotamañotesticular

Lampiños

Hombros estrechos

Caderas anchas

Largos brazos y piernas

47,XXY

Poliploidía: Triploidía

Cariotipo 69,XXX

Mosaico 46,XY/69,XXY

Poliploidía: Triploidía

Mosaicismo:presencia de dos o más líneas celulares en un individuo

Mujeres altasInteligencia normalFértilesAlgunos trastornos de aprendizaje.

46,XX

47,XXXsa

ngre

piel

Estructurales

Cualquier variación en la estructura (bandas) de los cromosomas

Equilibradas: NO pérdida ni ganancia de material genético

Translocación recíprocaInversión

No Equilibradas: pérdida o ganancia de material genético

DeleciónDuplicaciónInserciónCromosoma en anilloIsocromosoma

X

2

X XX

5

X XX X X X

46,XX,t(2;5)(q22;q33)

q22 q3

3

X X

translocados normales

Translocación recíproca

Afe

ctad

os Afectados

Translocación Robertsoniana:

cromosomas 13, 14,15, 21 y 22

46,XX,t(14;21)(q10;q10),+21

Translocación en el síndrome de Down familiar

Se pierden los brazos cortos de dos cromosomas no homólogos y los largos se unen por el centrómero

45,XX,t(13;14)(q10;q10)

InversionesPericéntrica Paracéntrica

Involucra el centrómero Se produce en alguno de los brazos sin involucrar

el centrómero

Algunas veces asociadas a malformaciones menores.Personas no muestran signos ni rasgos característicos de patología.

Deleción

46,XX,del(5)(p15.3)

X X

9 5

pat mat

q13

del(9)46,XX,del(9)(q13)

Pérdida de material genético.

DuplicacionesCausas: rotura-reunión/ recombinación desigual/segregación anormal

Síndrome de la duplicación 10q Síndrome de la duplicación 6q, parcial

Síndrome de la duplicación 10q, Distal

Síndrome de la duplicación 15q, Distal

Síndrome de la duplicación 6q, Distal

Síndrome de la duplicación 15q, Parcial

X X

1 1pat mat

dup(1)46,XX,dup(1)(q22q25)

q22q25q22q25

q22q25

Se le duplica la banda indicada, por lo tanto

tiene el doble de dotación génica

Isocromosoma

El isocromosoma durante su división sufre rearreglos, el

Resultado final:

Un cromosoma con dos brazos idénticos

Se presenta en algunos casos de Síndrome de Turner

X X

X 17

pat mat

i(Xq)46,X,i(X)(q10)

Al final se tiene un cromosoma con dos brazos

idénticos.

47,XY, +i(18p)

Cromosoma cuyas partes terminales (telómeros) se han perdido, por lo tanto el cromosoma forma un "anillo".

La información genética se pierde

Asociado a retardo mental.

Cromosoma en Anillo

Anillo r(X)

Debemos conocer el origen de las enfermedades genéticas

Contamos conherramientas para

su estudio y

diagnóstico

Fórmulas citogenéticas malignas

Cromosoma Philadelphia

Cromosoma Philadelphia (FISH)

La INESTABILIDAD GENÉTICA ◦ Constituye uno de los

fenómenos asociados al inicio y progresión de tumores y de algunas enfermedades hereditarias con predisposición al cáncer. Puede presentarse en dos formas:

La INESTABILIDAD DE MICROSATÉLITES, manifestado por un elevado porcentaje de errores en la replicación de nucleótidos repetidos no reparados.

INESTABILIDAD CROMOSÓMICA,

Donde las alteraciones, de todo tipo, ocurren a nivel de segmentos cromosómicos.

La inestabilidad cromosómica es un proceso progresivo de pérdida y ganancia de todo o parte de uno o muchos cromosomas en cada ciclo celular. 

Gracias