B. Aparicio Hernández

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AC ANTICITOPLASMÁTICOS INFORMACIÓN QUE PUEDEN APORTARNOS Dra Mª Belén Aparicio Hernández Complejo Universitario Salamanca Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015

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AC ANTICITOPLASMÁTICOS INFORMACIÓN QUE PUEDEN APORTARNOS

Dra Mª Belén Aparicio Hernández Complejo Universitario Salamanca

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¿DE QUÉ HABLAMOS CUANDO NOS REFERIMOS A AC ANTICITOPLASMÁTICOS?

CÉLULA COMPLETA NÚCLEO CELULAR

CITOPLASMA CELULAR BIO RAD LABORATORIES

Education and Training Tools

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CICLO CELULAR

PROFASE

METAFASE

ANAFASE TELOFASE CEL.

DIVIDIDA

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DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS ESTRATEGIA A SEGUIR

• Inmunofluorescencia indirecta (IFI) – Sustratos:

• TRIPLE TEJIDO (ASMA, AMA, LKM)

• HEp-2 (ANA)

• LEUCOCITOS HUMANOS (ANCAS).

– Subjetivo

• Inmunoensayos – ELISA

– Inmunoblot

– Eliminan la variación intra e inter observador de la IFI

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• Informe – Positivo/negativo

– Patrón fluorescencia

– intensidad/título

– intervalos referencia

• Conjugado – Anti IgG humana

– FITC/proteína (3)

– Contenido Ab (30-60 µg/ml)

– Dilución trabajo

Substrato Hep 2 Triple tejido (Riñón/hígado/estómago) Leucocitos humanos.

Muestra Suero

IFI Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015

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Patrones de fluorescencia HEP 2

NUCLEAR homogéneo/periférico, moteado, centromérico, nucleolar, PCNA, nuclear dots, membrana nuclear, granular difuso

CITOPLASMÁTICO moteado, granular, punteado, citoesqueleto.

MITÓTICO huso mitótico, centrosoma, NuMA, cuerpo medio, Cenp-F

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Anticuerpos Citoplasmáticos Células Hep 2

Citoesquel.

Actina

Vimentina

Otros

Vinculina

Citoqueratina

Tropomiosina

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Mitocond M2

Moteado

JO1

RIBOSOMAL

GOLGI LISOSOMAL

SRP

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ANTI JO1 ANTICUERPO Anti Jo-1

ANTÍGENO HISTIDIL-t-RNA SINTETASA

ENFERMEDADES ASOCIADAS

POLIMIOSITIS Y DERMATOMIOSITIS SID. OVERLAP

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN MOTEADO FINO DIFUSO EN TODO EL CITOPLASMA. MATERIAL CROMOSÓMICO NO SE TIÑE.

NOTAS CONSIDERADO UNO DE LOS 6 ENAS INDIVIDUALES. EL MAS FRECUENTE EN LAS MIOSITIS.

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ANTI P- RIBOSOMIAL ANTICUERPO Anti P- RIBOSOMIAL

ANTÍGENO PROTEÍNAS RIBOSOMIALES P0,P1 Y P2

ENFERMEDADES ASOCIADAS

LES ASOCIADO A SÍNTOMAS NEUROLÓGICOS

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN HOMOGÉNEO GRANULAR DENSO EN TODO EL CITOPLASMA. NUCLEOLOS MARCADOS HOMOGÉNEAMENTE.

NOTAS NORMALMENTE NO INCLUIDO EN DETERMINACIONES DE ENA SCREENING. 10-20%. PACIENTES.

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AC APARATO DE GOLGI

ANTICUERPO COMPLEJO DE GOLGI

ANTÍGENO LOCALIZADOS EN EL COMPLEJO DE GOLGI

ENFERMEDADES ASOCIADAS

LES,SÍNDROME SJOGREN. INFECCIONES NEOPLASIAS

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN GRANULAR IRREGULAR FOCALIZADO CERCA DEL NÚCLEO EN CITOPLASMA(INTERFASE). TINCIÓN DIFUSA CITOPLASMÁTICA (CELS DIVISIÓN)

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AC ANTI LISOSOMAL ANTICUERPO LISOSOMAL

ANTÍGENO PROTEÍNAS LISOSOMALES Y LAMPS (ASOCIADOS A LAS PROTEÍNAS DE LAS MEMBRANAS LISOSOMALES)

ENFERMEDADES ASOCIADAS

LES (POCO FREC) SÍN ASOCIACIÓN CLÍNICA IMPORTANTE.

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN GRANULAR IRREGULAR MEDIO, GRUESO EN EL CITOPLASMA.. NO HAY FLUORESCENCIA EN NUCLEO Y NUCLEOLOS.

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AC ANTI SRP ANTICUERPO SIGNAL RECOGNITION

PARTICLE

ANTÍGENO COMPLEJO DE 6 POLIPÉPTIDOS DE RIBONUCLEOPROTTEÍNAS

ENFERMEDADES ASOCIADAS

POLIMIOSITIS. RARO: DERMATOMIOSITIS ESCLEROSIS SITÉMICA FIBROSIS PULMONAR INTERSTICIAL

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN MOTEADO GRANULAR CITOPLASMÁTICO. NÚCLEO NEGATIVO.

NOTAS PATRÓN MOTEADO CITOPLASMÁTICO. INMUNOBLOT.

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AC ANTI F ACTINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO

CITOESQUELETO.

ANTÍGENO F ACTINA

ENFERMEDADES ASOCIADAS

HEPATITIS AUTOINMUNE 1 CIRROSIS BILIAR PRIMARIA ENFS TJ CONECTIVO

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN DE MICROFILAMENTOS RECTILÍNEOS Y PARALELAS. NÚCLEO Y NUCLEOLOS NEGATIVOS.

NOTAS 20% PACIENTES CON HAI Y ASMA NO SON F ACTINA. IFI HEP 2, INMUNOBLOT o ELISA.

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AC ANTI VIMENTINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO

CITOESQUELETO

ANTÍGENO VIMENTINA

ENFERMEDADES ASOCIADAS

HEPATITIS AUTOINMUNE ARTRITIS REUMATOIDE SIND FATIGA.

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN DE FILAMENTOS INTEMEDIOS CON TINCIÓN PERINUCLEAR DENSA Y FIBRILAR CITOPLASMÁTICA.

NOTAS SU PRESENCIA TIENE UNA CORRELACIÓN INCIERTA.

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AC ANTI CITOQUERATINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO

CITOESQUELETO

ANTÍGENO CITOQUERATINA

ENFERMEDADES ASOCIADAS

HEPATOPATÍA ALCOHÓLICA ARTRITIS REUMATOIDE PSORIASIS INDIVIDUOS SANOS.

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN CON TINCIÓN PERINUCLEAR DENSA Y RETICULAR CITOPLASMÁTICA.

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AC ANTI TROPOMIOSINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO

CITOESQUELETO

ANTÍGENO TROPOMIOSINA

ENFERMEDADES ASOCIADAS

INDIVIDUOS SANOS. COLITIS ULCEROSA ARTRITIS REUMATOIDE ESCLEROSIS SISTÉMICA

PATRÓN TÍPICO HEP 2. MARCAJE DE LAS FIBRAS DE ESTRÉS POR DEBAJO DE LA MEMBRANA CITOPLASMÁTICA. INTERFASE Y METAFASE NEGATIVO.

NOTAS INTERACTÚA CON OTRAS MOLÉCULAS EN LA CONTRACCIÓN MUSCULAR

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AC ANTI VINCULINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO

CITOESQUELETO

ANTÍGENO VINCULINA

ENFERMEDADES ASOCIADAS

INDIVIDUOS SANOS. MIASTENIAS GRAVIS TROMBOCITOPENIA INMUNE

PATRÓN TÍPICO HEP 2. FIBRAS FLUORESCENTES A LO LARGO DE LA MEMEBRANA CITOPLASMÁTICA DIRIGIDAS HACIA EL NÚCLEO

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AC ANTIMITOCONDRIALES ANTICUERPOS ANTIMITOCONDRIALES

9 TIPOS M1-M9. 96% M2

ANTÍGENO COMPLEJO PIRUVATO DEHIDROGENASA (PDC).

ENFERMEDADES ASOCIADAS

CIRROSISBILIAR PRIMARIA (CBP) ESCLERODERMIA,CREST, LES,SIND. SJOGREN,SIND OVERLAP.

PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN CITOPLASMÁTICO GRANULAR IRREGULAR DESDE EL NUCLEO POR TODO CITOPLASMA.

NOTAS CONFIRMAR EN TRIPLE TEJIDO: TINCIÓN GRANULAR CITOPLASMÁTICA EN HEPATOCITOS, TÚBULOS RENALES Y CEL. PARIETAL ESTÓMAGO.

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GOLGI

LC-1 LKM-1 GSTT-1

CEL PARIETAL GÁSTRICA

HEPATOCITO

PATRONES AC CITOPLASMÁTICOS

HEP 2

MOTEADO PUNTEADO CITOESQUELETO GRANULAR

DIFUSO FINO MIT LISOSOMAL GW ACTINA OTRAS

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Report of the first international consensus on standardized nomenclature of antinuclear antibody HEp-2 cell patterns 2014–2015

Edward K. L. Chan1, Jan Damoiseaux2, Orlando Gabriel Carballo3,4, Karsten Conrad5, Wilson de Melo Cruvinel6, Paulo Luiz Carvalho Francescantonio6, Marvin J. Fritzler7, Ignacio Garcia-De La Torre8, Manfred Herold9, Tsuneyo Mimori10,11, Minoru Satoh12, Carlos A. von Mühlen13 and Luis E. C. Andrade14,15* Frontiers in Immunology August

2015. Volume 6. Article 412. The 12th International Workshop on Autoantibodies and Autoimmunity

held in Sao Paulo, Brazil, on August 28, 2014,

Frontiers in immunology. August 2015,Vol 8, Article 412. Chan et al.

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Recordando y Participando

1. Cuál de los siguientes autoanticuerpos son criterios diagnósticos de HAI tipo 1

A. ANA y ASMA.

B. LKM3 y ASMA.

C. LKM-1 y LC-1.

D. LKM-1 y ANA.

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IFI AutoAc Hepatitis Autoinmune

R. Liberal et al. / Autoimmunity Reviews 13 (2014) 435–440

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2. Se considera criterio diagnóstico definitivo de HAI cuando un paciente presenta una de las siguientes respuestas:

A. IgG en concentraciones menores a 1 vez el límite

superior normal. B. Presentar hepatotoxicidad por alcohol o fármacos. C. Presencia de autoanticuerpos a títulos inferiores a

1/40. D. Ninguna de las anteriores.

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HEPATITIS AUTOINMUNE

Completa +2

Recaída al suspender el tratamiento +3

Hepatitis de

Interfase +3

Infiltrado linfoplasmocitario predominante +1

Rosetas (aspecto seudoglandular) +1

Ninguno de los anteriores -5

Alteraciones biliares -3

Otros hallazgos que sugieran otra

etiología -3

ANA, SMA O LKM -1 >1/80 +3 1/80 +2 1/40 (niños) +1 1/40 (adultos) 0 AMA + -4 Positividad para otros autoanticuerpos definidos (sólo si autoAc clásicos -) (pANCA, anti.LC1, anti-SLA, etc.) +2 HLA DR3 o DR 4 +1 (sólo si autoAc -) Marcadores de hepatitis vírica Positivo -3 Negativo +3

FA/ALT (AST)

<1.5 +2

1.5-3 0

>3 -2

Gammaglobulina o IgG

>2 +3

1.5-2 +2

1-1.5 +1

<1 0

Sexo femenino +2

Fármacos

Sí -4

No +1

Alcohol

<25g/día +2

>60g/día -2

Otras enfermedades autoinmunes +2

Respuesta al tratamiento

Parámetros histológicos

Parámetros inmunológicos y virológicos

Parámetros bioquímicos

Parámetros clínicos

Diagnostic criteria of autoimmune hepatitis. R. Liberal et al. Autoimmunity Reviews,13,435-440.2014

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3.Los anticuerpos mitocondriales positivos en riñón en IFI de triple tejido afectan:

A. Los túbulos renales proximales y distales.

B. Túbulos renales proximales.

C. Túbulos renales distales.

D. Ninguna de las anteriores.

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IFI TRIPLE TJ RATA

MITOCONDRIALES

LKM 1 MITOCONDRIALES

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4. Cuál de estos anticuerpos no son anticitoplasmáticos:

A. Ac Anti f-actina.

B. Ac Anti citoqueratina

C. Ac Anti histona

D. Ac Anti mitocondriales

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Anticuerpos Citoplasmáticos Células Hep 2

Citoesquel.

Actina

Vimentina

Otros

Vinculina

Citoqueratina

Tropomiosina

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Mitocond M2

Moteado

JO1

RIBOSOMAL

GOLGI LISOSOMAL

SRP

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5. Ante una sospecha clínica, analítica o histológica de HAI se deben determinar los anticuerpos:

A. ANAS

B. ASMA

C. ANTI LKM1

D. Todas las anteriores.

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AUTOANTICUERPOS ASOCIADOS HAI

Hepatitis Autoinmune

Autoanticuerpos asociados

Prevalencia HAI

TIPO I ASMA ANA ANTI-SLA/LP

40-90% 5-70% 10-30%

TIPO II ANTI LKM-1 ANTI LC-1 ANTI SLA/LP

2-4% 1-2% 10-30%

Los Tipos se establecen de acuerdo a los anticuerpos

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Muchas Gracias Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015