Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

download Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

of 37

Transcript of Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    1/37

    1

    Universitatea de Medicin i Farmacie Carol Davila Bucureti

    Facultatea de Farmacie

    DISCIPLINA: FARMACOGNOZIE, FITOCHIMIE, FITOTERAPIE

    Analiza farmacognostic a unui fitopreparat

    cu aciune antiulceroas

    Ceai gastric

    Zamfir Teodora

    Gr.13, an III

    Prof.coord.conf.univ. Dutu Ligia Elena

    Bucureti 2014

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    2/37

    2

    Cuprins

    Capitolul 1:Date generale privind produsele vegetale component ale amestecului

    1.1 Calendula flos.......pag 3

    1.2. Hyperici herba ..............pag 4

    1.3. Symphyti radix. pag 6

    Capitolul 2:Analiza farmacognostic a produselor vegetale

    componente ale fitopreparatului ...................................................................................pag 8

    2.1.Examen macroscopic.........pag8

    2.1.1 Calendula flos...pag 8

    2.1.2 Hyperici herba..pag 8

    2.1.3 Symphyti radix..pag 9

    2.2 Examen microscopic....pag 10

    2.2.1 Calendula flos..pag 10

    2.2.2 Hyperici herba pag 11

    2.2.3. Symphyti radix. pag 122.3. Analiza chimic calitativ a soluiei extractive apoase..Pag 13

    2.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor......pag 23

    2.5. Determinarea cantitativ a flavonelor.pag 26

    Capitolul 3:Stabilirea formulei de fitopreparat..pag 28

    3.1 Raportul dintre produsele vegetale componente ale fitopreparatului..pag 28

    3.2 Analiza chimic calitativ a fitopreparatului...Pag 29

    3.3 Determinarea cantitativ a flavonelor din fitopreparatpag 33

    3.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor din fitopreparatpag 33

    Capitolul 4:Corelaii ntre principiile active identificate

    i potenialele efecte terapeutice induse.......................................................................pag 34

    Capitolul 5:Concluzii.........pag 35

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    3/37

    3

    Capitolul 1

    Date generale privind produsele vegetale component ale amestecului

    1.1 Calendula flos

    Reprezint inflorescena cu sau fr receptacul, uscat dup recoltare de la specia

    Calendula officinalis L., glbenele(Asteraceae).Trebuie sa conin cel puin ;23% substane

    solubile sau cel puin0,4% flavonoide exprimate n hiperozid.

    Compoziie chimic :

    n produsul vegetal predomin saponozidele triterpenice pentaciclice (2-10%),representative fiind calendulozidele (A-H) (Calendulozidele sunt mono- i bidesmozidele

    acidului oleanolic)

    Steroli Derivai flavonici ( glucozidele izoramnetolului i cvercetolului) Carotenoide ( licopina, i carotene, luteina, violaxantina, flavoxantina,

    crizantemxantina);

    Compui poliinici (acid calendulic); Cumarine (umbeliferona, esculetol, scopoletol); APFC-urireprezentate de acid clorogenic; Tanin; Mucilagii; 0,2-0,3% ulei volatile cu derivai sesquiterpenici ( -cadinol, constituent majoritar)

    Aciune:

    Cicatrizant prin saponozide, carotenoide, flavone; Antiinflamatoare; Antiedematoas; Antibacterian prin saponozide, flavone, tanin, ulei volatil; Coleretic prin acid clorogenic, umbeliferon;

    Acid calendulic

    Fig.33 (1)

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    4/37

    4

    Imunostimulatoare; Mucoprotectoareprin mucilagii; Antispastic prin flavone i cumarine; Capilaroprotectoareprin flavone; Antioxidant prin flavone;(3)

    ntrebuinri :

    n tratamentul plgilor, arsurilor, gastritei colecistitei, cistitei, ulcerului gastro-duodenali varicose, tulburari menstruale, n special n dismenoree;

    n dermatocosmetic.Mod de administrare :

    Infuzieobinut dintr-un gram de produs vegetal la 150 de ml ap; Tinctur diluat n ap(2-4 ml tinctur la 250-500 ml ap); Unguent (Pentru ungent se prevede un coninut n principia active corespunztoare la

    2-5 g produs vegetal);(3)

    1.2. Hyperici herba

    Reprezint somitile florale uscate dup recoltare de la specia Hypericum perforatum L.,

    suntoare, pojarni; conine cel puin 0,08% hipericine, exprimate n hipericin.

    Compoziie chimic :

    0,10-0,505 naftodiantrone, reprezentate de hipericinai pseudohipericin, localizate in punctele negre de pe

    petale;

    0,1-0,3% ulei volatile bogat n hidrocarburimonoterpenice ;

    Hipericin

    Fig.34(2)

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    5/37

    5

    4-5% flavone reprezentate de hiperozid, rutozid,isocvercotrozid, biflavone;

    Xantone (1,3,6,7tetrahidroxixantona) Proantociani; 6-15% tanin de tip catehic; APFC-uri reprezentate de acid cafeic i clorogenic; Carotenoide 2-4% hiperforin (derivat defloroglucinol)(3)

    Actiune :

    Colagogcoleretic - prin acid cafeic iclorogenic;

    Cicatrizant prin flavone, carotenoide, tanin; Antipruriginoas prin ulei volatile;

    Antidepresiv i fotosensibilizatoare prin hipericin i pseudohipericin; Antibacterian prin hiperforin si ulei volatile; Capilaroprotectoare, diuretic prin flavone, cateholi;

    ntrebuinri:

    Intern in tratamentul :- Colitei;- Colicistitei;- Ulcerului gastro-duodenal;- Stri depressive ( la vrsta a III-a)

    Extern - n arsuri.

    Mod de administrare:

    Infuzie- obinut din 2-4 g produs vegetal la 150 ml de ap;

    Pseudoipericin

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    6/37

    6

    - se administreaz 1-2 cni de infuzie proaspt preparat/zi, de preferat dimineaai seara;

    ulei de suntoare (obinut prin macerarea produsului vegetal ntr-un ulei vegetal) extract standardizat in hipericin;

    1.3. Symphyti radix

    Reprezint rdcinile si rrizomii proaspei sau uscai dup recoltare de la specia

    Symphytum officinale L., ttneas, iarba lui Tatin(Boraginaceae)

    Compozitie chimic:

    Produsul vegetal conine :

    0,6-0,8% alantoin; Alantoin Poliholozide; 4-6% tanin; 0,2-0,6 % alcalozi pirolizidinici; Derivai triterpenici; Aminoacizi; Asparagin 1-3% asparagin;

    Aciune :

    Cicatrizant prin alantoin i poliholozide; Antiulceroas prin alantoin; Antipruriginoas prin poliholozide; Antiinflamatoareprin acizi polifenolici; Astringent, antimicrobian prin tanin.

    ntrebuinri:

    n medicina tradiional produsul vegetal este frecvent utilizat n tratamentul ulcerului,gastritelor, afeciuni respiratorii (bronit, tuse de diferite etiologii)

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    7/37

    7

    Extern se folosete sub form de cataplasme sau unguente; se ntrebuineaz in tratareaplgilor infectate n curs de cicatrizare, arsurilor, ulcerului varicos, furunculozei;

    Mod de administrare:

    Infuzie obinut din 4-5 g produs vegetal la 250 de ml ap; timpul de infuzare este de10-15 min; se administreaz 2-3 cani de infuzie pe zip e o durat limitat de

    tratament;

    Extern, se recomand ca preparatele s se aplice pe dermul integru;

    Durata limitat de tratament este datorat alcaloizilor pirolizidinic care, laadministrarea ndelungat aprodusului vegetal, induc hepatotoxicitate;

    Doza zilnic de alcaloizi pirolizidinic nu trebuie s depeasc 100 demicrograme;

    Durata tratamenului nu trebuie s depeasc 4-6 sptmni. Se presupune c administrarea timp de un an a unei cantitai de 1 microgram de

    alcaloizi pirolizidinici pe zi ar putea avea efect cancerigen.(4)

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    8/37

    8

    Capitolul 2

    Analiza farmacognostica produselor vegetale componente ale

    fitopreparatului

    2.1.Examen macroscopic

    Prin acest examen, se urmrete stabilirea caracterelor morfologice (observate cu ochiul

    liber sau la lup) i a caracterelor organoleptice ale produselor vegetale. Examinarea presupune

    stabilirea aspectului, dimensiunilor, culorii, mirosului si gustului (3).

    2.1.1 Calendula flos

    Aspectul produsului vegetal: produsul vegetal

    prezint un aspect neomogen, sub form de concissum.

    Florile au corola galben, galben-portocalie sau

    galben roiatic.

    Culoarea produsului vegetal: este predominant

    galben datorit florilor de glbenele.

    Mirosul produsului vegetal: este specific glbenelelor,

    acestea prezentnd un miros balsamic puternic.

    Gustul produsului vegetal: gust amrui- srat, uor mucilaginos

    2.1.2 Hyperici herba

    Aspectul produsului vegetal: produsul

    vegetal prezint un aspect neomogen, sub form de

    concissum.

    Pe toat suprafaa frunzei se observ

    punctuaii translucide corespunztoare pungilor

    secretoare, care i confer un aspect perforat.Florile sunt dispuse in dichazii;dichaziul terminal,

    mpreun cu ramurile laterale terminate in dichazii

    formez un corimb, sau mai rar o panicul.Caliciul

    este format din 5 sepale lanceolate, ascuite,

    Fig 11.Produs vegetal de tip

    concissumHyperici herba

    Fig 10.Produs vegetal de tip

    concissumCalendula flos

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    9/37

    9

    glabre, cu punctuaiuni translucide i rare punctuaiuni negre.Corola este format din 5 petale

    galben-aurii , care prezint pe margini mici puncte brun-negricioase.

    Culoarea produsului vegetal: este galben-verzuie, culoare datorat mrunirii prilor

    aeriene ale suntoarei;

    Mirosul produsului vegetal: miros caracteristic

    Gustul produsului vegetal: aromat, amar, astringent.

    2.1.3 Symphyti radix

    Aspectul produsului vegetal: produsul vegetal prezint un

    aspect neomogen, sub form de concissum.

    Culoarea produsului vegetal: este gri-brun, culoare

    datorat mrunirii rizomului si a rdcinii;

    Mirosul produsului vegetal: produsul vegetal uscat nuprezint miros characteristic;

    Gustul produsului vegetal: amar.

    Concluzie : n urma examenului macroscopic, a fost identificat fiecare produs vegetal

    menionat de productor, un factor important reprezentndu-l forma de concissum sub care sunt

    prezentate plantele medicinale mrunite.

    Fig 12.Produs vegetal de tip

    concissumS m h ti radix

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    10/37

    10

    2.2 Examen microscopic

    Examenul micoscopic are ca scop stabilirea esuturilor i elementelor anatomice

    caracteristice unui anumit tip de produs vegetal. Se poate realiza pe seciune, preparat superficial

    (concissum) i pulbere (3). n cazul de fa examenul microscopic se realizeaz pe pulbere

    clarificat cucloralhidrat.

    Dup pulverizarea unei mici cantiti din produsul brut, din pulbere se presar cu un ac

    spatulat peste o lam de microscop peste care se aduce iniial cteva picturi de cloralhidrat

    800g/l.

    Preparatul rezultat se trece cu micri succesive prin flacra unui bec de gaz, prin micri

    circulare, pn se percepe un miros slab caracteristic de reactiv i se observ degajarea unor

    vapori albicioi rezultai prin descompunerea claralhidratului. Nu se insist cu nclzirea

    deoarece claralhidratul poate cristaliza pe lama ceea ce mpiedic obinerea unui preparat

    microscopic corespunztor. Apoi se oprete nclzirea, se mai adaug cteva picturi de

    cloralhidrat dac este nevoie i floroglucin clorhidric pentru evidenierea elementelor

    lemnoase, se pune lamela peste preparat, i apoi se examineaz la microscop

    2.2.1 Calendula flos

    Caractere microscopice :n urma examenului microscopic am

    regsit majoritatea elementelor specifice unui

    preparat de tip flos:

    Grauncioare de polen; Peri glandulari specifici

    fam.Asteraceae

    Fragmente de endoteciu ; Fragmente de epiderm cu aspect

    variat;

    Parenchim clorofilian ; Vase de lemn de calibru mic;

    Fig 1.Gruncior de polen observate

    la Calendulae flos

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    11/37

    11

    2.2.2 Hyperici herba

    n urma examenului microscopic am regsit majoritatea elementelor specifice unui

    preparat de tip herba:

    Elementele comune pentru produsevegetale de tip folium : epiderma cu stomatele;-fragmente de parenchim clorofilian;-fragmente detesut palisadic si lacunar; si elementele comune pentruproduse vegetale de tip flores.

    Elemente comune de flores: fragmentede endoteciu, grauncioare de polen, fragmente de

    epiderma cu aspect variat, parenchim clorofilianprovenit de pe sepale, vase de lemn de calibru mic;

    Fig 2. Fragment de endoteciu

    observat la Calendulae flos

    Fig 3. Peri glandulari specifici fam

    Asteraceae

    Fig 4.Pungi secretoare cu

    hipericin observate la

    Hyperici herba

    Fig 6.Vase de lemn de calibru mic

    observate la Hyperici herbaFig 5. Anter observat la

    Hyperici herba

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    12/37

    12

    2.2.3. Symphyti radix

    n urma examenului microscopic am regsit

    majoritatea elementelor specifice unui preparat de tip

    radix:

    Vase de lemn de calibru mare; Suber; Parenchim cortical;

    Fig 7. Gruncioare de polen

    observate la Hyperici herba

    Fig 9. Suber observat la

    Symphyti radix

    Fig 8. Vase de lemn de calibru mare

    observate la Symphyti radix

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    13/37

    13

    2.3. Analiza chimic calitativ a soluieiextractive apoase

    Examenul chimic calitativ are ca scop stabilirea principalelor grupe de principii active, prin

    reacii chimice specifice. Realizarea acestui obiectiv are la baz dou etape:

    produsul vegtal este supus unor extracii succesive cu solveni de polariti diferite, de laapolar spre polar (n general eter etilic, metanol, ap etc.)

    n fiecare soluie extractiv se efectueaz reacii chimice specifice diferitelor clase deprincipii active. Aceste reacii de identificare vor fi descrisen continuare.

    n prima faz este necesar obinerea unei infuzii conform specificaiilor productorului:

    se iau 2 linguri de produs vegetal peste care se adaug 250 ml ap fierbinte i se las la infuzat

    timp de 15 minute, la temperatura camerei, apoi se strecoar (3).

    Indentificarea compuilor reductori:

    Reacia cu reactivul Fehling

    Principiul reaciei: are la baza proprietatea ozelor de a reduce reactivul Fehling (hidroxid

    amino-cupric) la oxid cupros.

    Tehnica de lucru: peste soluia extractivse aduce reactiv Fehling (obinut extempore din

    Fehling I + Fehling II n cantiti egale). Amestecul se ncalzete la flacrmic.

    Rezultate:

    a) Calendula flos :precipitat rou-

    crmiziu cum se

    poate observa n Fig.

    13 (3).

    b) Hyperici herba :precipitat rou-

    crmiziu cum se

    poate observa n Fig.

    14 (3).

    c) Symphytum radix:precipitat rou-

    crmiziu cum se

    poate observa n Fig.

    15 (3).

    Fig 13.Reacia

    cu FeCl3

    Fig 15.Reacia

    cu FeCl3

    Fig 14.Reacia

    cu FeCl3

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    14/37

    14

    Observaii: n cazul n care reacia este pozitiv, dar se obine o cantitate mic de

    precipitat, poate demonstra c infuzia nu conine compui reductori n cantitate foarte mare.

    I denti f icarea ozelor si poliholozidelor :

    Reacia Molish

    Principiul reaciei: sub aciunea acidului sulfuric concentrat, ozele i poliholozidele se

    deshidrateaz, cu formarea furfuralului (pentoze) sau hidroximetil-furfuralului (hexoze); acetia,

    prin cuplare cu timol, formeaz compui colorai n rou-purpuriu.

    Tehnica de lucru: 35 ml soluie extractiv se concentreaz n capsul. Peste reziduu se

    aduce 1 ml acid sulfuric concentrat i se menine n repaus cel puin 5 minute. Apoi se trateaz

    cu 1-2 picturi timol 1%.

    Rezultate: rezult un compus colorat n rou-violaceu sau rou-portocaliu pentru

    Calendula flos i Symphytum radix

    a) Calendula flos : seobserv apariia unui

    precipitat rou-crmiziu

    cum se poate observa n

    Fig. 16 (3).

    b) Hyperici herba :nu seobserv apariia unui

    precipitat rou-crmiziu

    cum se poate observa n

    Fig. 17 (3).

    c) Symphytumradix: se observ

    apariia unui

    precipitat rou-

    crmiziu cum se

    poate observa n

    Fig. 18 (3).

    Fig.16 Reacia Molish

    Fig.18 Reacia MolishFig.17 Reacia Molish

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    15/37

    15

    Observaii: n urma reacei s-a format un compus rou-portocaliu, reacia fiind pozitiv

    pentru Calendula flos i Symphytum radix.

    I dentif icarea mucil agii lor:

    Reacia de precipitare n alcool

    Principiul reaciei: mucilagiile precipit n prezena alcoolului sau a acetonei.

    Tehnica de lucru: ntr-o eprubet ce conine 10 mL metanol sau aceton se toarn n fir

    subire, sub continu agitare 2- 3 mL soluie extractivconcentrat.

    Rezultate:

    a) Calendula flos : seformeaz un precipitat

    voluminos, dup cum

    se observ n fig.20

    b) Hyperici herba : seformeaz un precipitat

    voluminos, dup cum

    se observ n fig.21

    c) Symphytum radix: seformeaz un precipitat

    voluminos, dup cum

    se observ n fig.22

    Observaii: reacia este pozitiv pentru toateprodusele vegetale.

    I dentif icarea ODP-ur il or:

    Reacia cu reactivul Arnow

    Principiul reaciei: n prezena acidului azotos (format in situ n sistem din reacia

    azotitului de sodiu cu acidul clorhidric), acidul cafeic formeaz nitrozoderivai. Acetia, nmediualcalin, tautomerizeaz la izonitrozoderivai, compui colorai n rou intens.

    Tehnica de lucru: 1 mL soluie extractiv se trateaz

    cu 1 mL acid clorhidric 0,5 N, 1 mL

    reactiv Arnow i 1 mL hidroxid de sodiu 0,5 N. Apare o coloraie roie ca urmare a formrii

    oximei acidului cafeic.

    Fi .20 Fi .22Fi .21

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    16/37

    16

    Rezultate:

    a) Calendula flos : seformeaz coloraie

    roie, dup cum se

    observ n fig.20

    b) Hyperici herba : seformeaz coloraie

    roie, dup cum se

    observ n fig.20

    c) Symphytum radix: seformeaz coloraie

    roie, dup cum se

    observ n fig.20

    Observaii: intensitatea coloraiei este dependent de cantitatea de ODP-uri din produs

    vegetal (3). n aceast situaie reaciile sunt pozitive.

    I dentif icarea proantocianilor :

    Reacia Bath-Smith

    Principiul metodei: n mediu acid i la cald se transformn antociani.

    Tehnica de lucru :la 1 ml soluie extractiv se adaug 1 ml soluie de acid clorhidric 3

    mol/l. proba astfel obinut se menine30 de minute pe baia de ap n fiebere.

    Fig.23 Fig.24 Fig.25

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    17/37

    17

    clorur de cianidol

    Rezultate : se obine o coloraie , mai intens n mediu de alcool n-butilic pentru

    Hyperici herba.

    I denti fi carea fl avonelor:

    1. Formarea fenoxizilor

    Principiul reaciei: flavonozidele i agliconii formeaz n mediu alcalinfenoxizi colorai

    n galben.

    Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv apoas se adaug 0,5 ml soluie de hidroxid

    de sodiu 100 g/l.

    Rezultate: se observ intensificarea coloraiei galbenepentru toate cele trei produse

    vegetale (3).

    I dentif icarea antocianilor:

    Reacia virajului de culoare:Principiul reaciei: prin variaia pH-ului au loc modificri structurale nsoite de

    modificarea culorii.

    Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv apoas se adaug 1-2 picturi soluie de acid

    clorhidric 1 mol/l i se observ intensificarea coloraiei roii.

    Rezultate: schimbrile nu au fost vizibile ;

    cvercetol

    Conc.

    Cl

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    18/37

    18

    I dentif icarea taninuri lor:

    Reacia cu clorur feric (III)

    Principiul reaciei: n prezena cationului Fe+3taninurile catehice formeaz precipitate

    i/sau coloraie verde-negricioas, iar cele galice precipitate i/sau coloraie albastr-negricioas.

    Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv se adaug 0,5 ml soluie de clorur de fer (III)

    10 g/l

    Rezultate: se obine un precipitat i/sau coloraie diferit n funcie de tipul de tanin.

    a) Calendula flos : - seobine o coloraie

    verde -negricioas

    b) Hyperici herba : - seobine o coloraie

    verde -negricioas

    c) Symphytum radix:- se obine o coloraie

    verde -negricioas

    Observaii: dac n soluia extractiv se gsesc att taninuri catehice ct i galice, aceast

    reacie de culoare nu este concludent i se impune separarea acestora (3). Proba analizat

    conine tanin catehic.

    Fig.26 Fig.27

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    19/37

    19

    I denti f icarea saponozidelor :

    Proba de spumefiere

    Principiul reaciei: o soluie apoas coninnd saponozide, prin agitare energic timp de

    15 secunde, formeaz o coloan de spum persistent cel puin 15 minute.

    Tehnica de lucru: 5 ml soluie extractiv apoas se agit timp de 15 secunde, apoi se las

    n repaus.

    Rezultate:

    Observaii: proprietile spumefiante, detergente ale saponozidelorlor se explic prin

    tensioactivitatea; poliholozidele se comport asemntor, dar spuma nu este persistent (3).

    a) Calendula flos :existena unei spume

    persistente i

    dupa 15 minute, denot

    prezena saponozidelor

    b) Hyperici herba :existena unei spume

    persistente i

    dupa 15 minute, denot

    prezena saponozidelor

    c) Symphytum radix:Nu se formeaz spuma

    persistent reacia este

    negativ => nu sunt

    prezente saponozide

    Fig. 28. Proba des umefiere

    Fig. 29. Proba des umefiere

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    20/37

    20

    I denti f icarea carotenoidelor:

    Reacia cu reactivul Carr-Price

    Principiul reaciei: la tratare cu triclorura de stibiu, carotenoidele formeaz compui

    colorai n albastru, care trec n rou-purpuriu i apoi n rou-brun.

    Tehnica de lucru: 1-2 mL soluie extractiv apoasse aduce la reziduu, ntr-o capsul de

    porelan, pe baie de apa. Peste reziduu se adaug 1-2 picturi reactiv Carr-Price.

    Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre, care

    vireaz rapid n rou-purpuriu i apoi n rou-brun (4).

    Observaii: n cazul acestui preparat reacia este negativ pentru toate cele trei produse

    vegetale.

    I denti f icarea alcaloizil or:

    Reacii generale de precipitare

    Principiul reaciei: n prezena reactivului (R. Mayer, R. Bertrand), alcaloizii sruri

    formeaz precipitate.

    Tehnica de lucru: Peste 1 ml soluie apoas acid se adaug treptat reactivul de

    precipitare (1-2 picturi) i se urmrete modificarea aspectului soluiei n raportcu o soluie

    martor.Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se formeaz un precipitat (4).

    Observaii: n cazul reaciilor cu reactivii Mayer i Bertrand se formeaz precipitate albe

    sau alb-glbui, solubile n exces de reactiv; n cazul n care proba are un coninut mic de

    alcaloizi, se va observa doar o opalescen, nu un precipitat.Reacia relizat pe probelede

    analizat estepozitiv pentru Symphyti radix.

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    21/37

    21

    Nr.

    Crt.Principiul activ

    cutatReacia chimic

    realizatProdus vegetal Rezultat Observaii

    1Compui

    reductori

    Reacia cu reactiv

    Fehling

    Calendula flos Pozitiv (+)Precipitat rou-

    crmiziu

    Hyperici herba Pozitiv (+)Precipitat rou-

    crmiziu

    Symphyti radix Pozitiv (+)Precipitat rou-

    crmiziu

    2 Oze Reacia Molish

    Calendula flos Pozitiv (+)Compus rou-

    portocaliu

    Hyperici herba Negativ (-)Compus rou-

    portocaliu

    Symphyti radix Pozitiv (+)Compus rou-

    portocaliu

    3 MucilagiiReacia de

    precipitare n alcool

    Calendula flos Pozitiv (+)

    Precipitat voluminosHyperici herbaPozitiv (+)

    Symphyti radix Pozitiv (+)

    4 ODP-uriReacia cu reactivul

    Arnow

    Calendula flos Pozitiv (+)

    Compus rouHyperici herbaPozitiv (+)

    Symphyti radixPozitiv (+)

    5 Proantociani Reacia Bath-Smith

    Calendula flos Negativ (-)

    Hyperici herba Pozitiv (+)

    Coloraie mai

    intens dect a

    martorului

    Symphyti radix Negativ (-)

    6 Flavone

    Formarea

    fenoxizilor

    Calendula flos Pozitiv (+)Intensificarea

    coloraiei galbeneHyperici herba Pozitiv (+)

    Symphyti radix Pozitiv (+)

    7 AntocianiReacia de viraj de

    culoare

    Calendula flos Negativ (-)

    Hyperici herba Negativ (-)

    Symphyti radix Negativ (-)

    Tabel Irezultate analiz chimic calitativ

    pe produse vegetale

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    22/37

    22

    8 Taninuri Reacia cu FeCl3

    Calendula flos Pozitiv (+)Coloraie

    verde-negricioasHyperici herbaPozitiv (+)

    Symphyti radix Pozitiv (+)

    9 Alcaloizi Reacii generale deprecipitare

    Calendula flos Negativ (-)

    Precipitatalb/alb-galbui

    Hyperici herba Negativ (-)

    Symphyti radix Pozitiv (+)

    10 Saponozide Proba de spumefiere

    Calendula flos Pozitiv (+) Strat de spum

    persistent 15 min

    (>1cm)

    Hyperici herba Pozitiv (+)

    Symphyti radix Negativ (-)

    11 Carotenoide

    Reacia cu reactiv

    Carr-Price

    Calendula flos Negativ (-)Coloraie

    albastr-verzuie

    Hyperici herba Negativ (-)

    Coloraie

    albastr-verzuie

    Symphyti radix Negativ (-)Coloraie

    verde-albastruie

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    23/37

    23

    2.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor

    ODP-urile sunt esterii monocafeilchinici (acidul clorogenic i izomerii si),

    dicafeilchinici (cinarina i izomerii si), esteri ai acidului cafeic cu acizii tartric i

    2-hidroxi-dihidrocafeic sau derivai glicozidai ai acidului cafeic. n aceast clas sunt inclui de

    asemenea esteri ai acizilor p-cumarinici, ferulic, sinapic (esteri ntre dou sau mai dou sau mai

    multe molecule de astfel de acizi, identici sau diferii).

    Determinarea cantitativ a ODP-urilor se realizeaz pe o soluie extractiv apoas,

    conform productorului.

    Tehnica de lucru:

    - Prepararea probei de analizat: ntr-un balon cotat de 10 ml se introduc 2 ml soluieextractiv, 1 ml soluie acid clorhidric 0,5 N, 1 ml reactiv Arnow, 1 ml soluie hidroxid

    de sodiu 10%. Se campleteaz la volum cu ap.

    - Prepararea probei-martor: ntr-o eprubet se introduce 2 ml soluie extractiv, 1 mlsoluie de acid clorhidric 0,5 N, 1 ml soluie hidroxid de sodiu 10%. Se campleteaz la

    volum cu ap.

    Se citete absorbana probei de analizat, fa de proba-martor, la lungimea de unda de 510

    nm.

    Coninutul n ODP-uri corespunztor la 100 ml soluie se calculeaz conform formulei:

    Unde: c% = coninutul de ODP-uri al soluiei

    Ep= absorbia probei

    Eet = absorbia soluiei de acid cafeic, de concentraie Cetdin curba etalon (tabel III)

    Cet= concentraia soluiei de acid cafeic, rezultat din curba etalon (tabel III)

    Cp= (mp.v.-u%):50 *1/10;

    u%= umiditatea produsului vegetal

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    24/37

    24

    Rezultate :

    a) Calendula flos : n urma masurrii

    absorbanei probei n

    funcie de martor,

    Ep = 0,352 de unde

    rezult c se va alege

    Eet = 0,385, astfel se

    determin i Cet =

    26,72

    b) Hyperici herba : n urma masurrii

    absorbanei probei n

    funcie de martor,

    Ep = 0,893 de unde

    rezult c se va alege

    Eet = 0,963, astfel se

    determin i Cet =

    55,80

    c) Symphytum radix n urma masurrii

    absorbanei probei n

    funcie de martor,

    Ep = 0,207, de unde

    rezult c se va alege

    Eet = 0,193, astfel se

    determin i Cet =

    13,36.

    c% = 0,617 g ODP-uri,

    exprimate n acid cafeic / 100

    ml

    c% =1,388725 g ODP-uri,

    exprimate n acid cafeic / 100

    ml

    c% = 0,306 g ODP-uri,

    exprimate n acid cafeic / 100

    ml

    Concluzie: n soluia apoas extractiv se gseste o cantitate destul de mare de acizi

    polifenolcarboxilici.

    Fig. 30. Dozarea ODP-urilora- martor; b-prob de analizat

    a. b.

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    25/37

    25

    g acid cafeic/ mL Absorbanta

    13,36 0,193

    26,72 0,385

    40,08 0,578

    53,44 0,762

    55,80 0,963

    Tabelul II: variaia extincei n funciede concentrarea soluiei de acid cafeic

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    26/37

    26

    2.5. Determinarea cantitativ a flavonelor

    Determinarea cantitativ a flavonelor se realizeaz pe o soluie extractiv apoas,

    conform productorului.

    Tehnica de lucru:

    - Prepararea probei de analizat: ntr-un balon cotat de 10 ml se introduce 1 ml soluieextractiv i 1 ml soluie clorur de aluminiu 25 g/l. Se completeaz la volum cu ap.

    - Prepararea probei-martor : ntr-un balon cotat de 10 ml se introduce 1 ml soluieextractiv. Se completeaz la volum cu ap.

    Dup 30-45 minute se citete absorbana probei de analizat, fa de proba-martor, la

    lungimea de und de 427nm.

    Coninutul n flavone corespunztor la 100 ml soluie se calculeaz conform formulei:

    Unde: c% = coninutul de flavone al soluiei

    Ep= absorbia probei

    Eet = absorbia soluiei de rutozid, de concentraie Cetdin curba etalon (tabel III)Cet= concentraia soluiei de rutozid, rezultat din curba etalon (tabel III)

    Cp= (mp.v.-u%):50 *2/10;

    u%= umiditatea produsului vegetal

    Cet(g/ml) Eet

    1,00 0,137

    2,00 0,354

    3,00 0,584

    4,00 0,799

    Tabelul III: Variaia extinciei n funciede concentraia soluiei de rutozid

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    27/37

    27

    Rezultate

    a) Calendula flos : n urma masurrii

    absorbanei probei n

    funcie de martor,

    Ep = 0,310, de unde

    rezult c se va alege

    Eet = 0,354, astfel se

    determin i Cet= 2,0

    b) Hyperici herba : n urma masurrii

    absorbanei probei n

    funcie de martor,

    Ep = 0,508, de unde

    rezult c se va alege

    Eet = 0,584, astefel se

    determin i Cet= 3,0.

    c) Symphytum radix n urma masurrii

    absorbanei probei n

    funcie de martor,

    Ep = 0,202, de unde

    rezult c se va alege

    Eet = 0,137, astefel se

    determin i Cet= 1,0.

    c% = 0,035018 g flavone,

    exprimate n rutozid / 100 ml

    soluie

    c% = 0,02213 g flavone,

    exprimate n rutozid / 100 ml

    soluie

    c% = 0,01579 g flavone,

    exprimate n rutozid / 100 ml

    soluie

    Concluzie: n soluia apoas extractiv se gseste o cantitate destul de mic de flavone.

    Fig. 31. Spectrofotometrul cu care s-aucitit absorbanele dozrilor

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    28/37

    28

    Capitolul 3

    Stabilirea formulei de fitopreparat

    3.1 Raportul dintre produsele vegetale componente ale fitopreparatului

    n urma rezultatelor obinute la determinrile cantitative ale flavonelor i ODP-urilor am stabilit

    mpreun cu coordonatorul de proiect urmtorul raport dintre produsele vegetale studiate :

    suntoare 5 pri; glbenele 4 pri; ttneas 1 parte;

    Fig.32 Amestec produse vegetale

    conform raportului stabilit

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    29/37

    29

    3.2 Analiza chimic calitativ a fitopreparatului

    Indentificarea compuilor reductori:

    Reacia cu reactivul FehlingIdentificarea compuilor reductori se realizeaz conform

    tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

    Rezultate: se observ apariia unui precipitat rou-crmiziu

    Observaii: n cazul n care reacia este pozitiv, dar se obine o cantitate mic de

    precipitat, poate demonstra c infuzia nu conine compui reductori n cantitate foarte mare.

    I denti f icarea ozelor si poliholozidelor:- Identificarea ozelor si poliholozidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n

    capitolul 2.3

    Reacia Molish

    Rezultate: rezult un compus colorat n rou-violaceu sau rou-portocaliu

    Observaii: n urma reacei s-a format un compus rou-portocaliu, reacia fiind pozitiv.

    I dentif icarea mucilagii lor:

    Identificarea mucilagiilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

    Reacia de precipitare nalcool

    Rezultate:

    Observaii: reacia este slab pozitiv, dup cum se poate observa n Fig. 43.

    I dentif icarea ODP-ur il or:

    Identificarea ODP-urilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    30/37

    30

    Rezultate:

    Observaii: intensitatea coloraiei este dependent de cantitatea de ODP-uri din produs vegetal

    (3). n aceast situaie reaciile sunt pozitive.

    I dentif icarea proantocianilor :

    Identificarea proantocianilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

    Rezultate : se obine o coloraie , mai intens n mediu de alcool n-butilic (3).

    Observaii: n acest caz reacia este pozitiv.

    I denti fi carea fl avonelor:

    Formarea fenoxizilor

    Identificarea flavonelor prin formarea fenoxizilor se realizeaz conform tehnicii de lucru

    prezentate n capitolul 2.3

    Rezultate: se observ intensificarea coloraiei galbene.

    I dentif icarea antocianilor:

    Identificarea antocianilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

    Reacia virajului de culoare:

    Rezultate: nu se observ schimbri:

    I dentif icarea taninuri lor:

    Identificarea taninurilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

    Reacia cu clorur feric (III)

    Rezultate: se obine un precipitat de culoare verde-negricioas.

    Observaii: dac n soluia extractiv se gsesc att taninuri catehice ct i galice, aceast

    reacie de culoare nu este concludent i se impune separarea acestora (3).

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    31/37

    31

    I denti f icarea saponozidelor :

    Identificarea saponozidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

    Proba de spumefiere

    Rezultate: existena unei spume persistente i dupa 15 minute, denot prezena

    saponozidelor.

    Observaii: proprietile spumefiante, detergente ale saponozidelorlor se explic prin

    tensioactivitatea;poliholozidele se comport asemntor, dar spuma nu este persistent (3).

    I denti fi carea carotenoidelor:

    Identificarea carotenoidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

    Reacia cu reactivul Carr-Price

    Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre, care

    vireaz rapid n rou-purpuriu i apoi n rou-brun (4).

    Observaii: n cazul acestui preparat reacia este negativ.

    I denti f icarea alcaloizil or:

    Identificarea alcaloizilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

    Reacii generale de precipitare

    Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se formeaz un precipitat (4).

    Observaii: n cazul reaciilor cu reactivii Mayer i Bertrand se formeazprecipitate albe

    sau alb-glbui, solubile n exces de reactiv; n cazul n care proba are un coninut mic de

    alcaloizi, se va observa doar o opalescen, nu un precipitat.Reacia relizat pe proba de analizat

    estepozitiv.

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    32/37

    32

    Nr.

    Crt.Principiul activ

    cutatReacia chimic

    realizatRezultat Observaii

    1 Compui reductoriReacia cu reactiv

    FehlingPozitiv (+)

    Precipitat

    rou-crmiziu

    2 Oze Reacia Molish Pozitiv (+)Compus

    rou-portocaliu

    3 MucilagiiReacia de precipitare

    n alcoolPozitiv (+) Precipitat voluminos

    4 ODP-uriReacia cu reactivul

    ArnowPozitiv (+) Compus rou

    5 Proantociani Reacia Bath-Smith Pozitiv (+)Coloraie mai intens

    dect a martorului

    6 FlavoneFormarea fenoxizilor

    Pozitiv (+)

    Intensificarea coloraiei

    galbene

    7 AntocianiReacia de viraj de

    culoare

    Negativ (-)

    8 Taninuri Reacia cu FeCl3 Pozitiv (+)Coloraie

    verde-negricioas(tanin catehic)

    9 Saponozide Proba de spumefiere Pozitiv (+)

    Strat de spum

    persistent 15 min

    (>1cm)

    10 Carotenoide

    Reacia cu reactiv

    Carr-Price Negativ (-) Coloraie albastr

    11 AlcaloiziReacii generale de

    precipitarePozitiv (+)

    Precipitat

    alb/alb-galbui

    Tabel IVrezultate analiz chimic

    calitativ pe produse vegetale

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    33/37

    33

    3.3 Determinarea cantitativ a flavonelor din fitopreparat

    Determinarea cantitativ a flavonelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n

    capitolul 2.5Se obin urmtoarele rezultate :

    n urma masurrii absorbanei probei n funcie de martor, Ep = 0,503, de unde rezult cse va alege Eet= 0,0,584, astfel se determin i Cet= 3,0=> c% = 0,02583 g flavone,

    exprimate n rutozid / 100 ml soluie

    3.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor din fitopreparat

    Determinarea cantitativ a APFC-urilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n

    capitolul 2.4Se obin urmtoarele rezultate :

    n urma masurrii absorbanei probei n funcie de martor, Ep = 0,130, de unde rezult cse va alege Eet= 0,193, astfel se determin i Cet= 13,36=>c% = 0,08998 g ODP-uri,

    exprimate n acid cafeic / 100 ml

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    34/37

    34

    Capitolul 4

    Corelaii ntre principiile active identificate i potenialele efecte terapeutice

    induse

    Fitopreparatul obinut prin amestecarea celor trei produse vegetale conine

    urmtoarele principii active: compui reductori,oze, mucilagii, ODP-uri, proantociani,

    flavone, antociani, taninuri, saponozide, alcaloizi.

    Astfel, fitopreparatulpoate avea urmtoarele aciuni:

    Antibacterian prin saponozide, flavone, tanin Coleretic prin Apfc-uri Mucoprotectoareprin mucilagii; Antispastic prin flavone Capilaroprotectoareprin flavone; Antioxidant prin flavone; Cicatrizant prin flavone, carotenoide, tanin; Antiinflamatoareprin acizi polifenolici; Astringent, antimicrobian prin tanin.innd cont i de raportul n care cele trei produse vegetale au fost combinate, putem afirma

    faptul c este posibil ca unele efecte terapeutice s predomine.Suntoarea iflorile de glbenele,

    predominnd in fitopreparat, contribuie prin flavone, tanin la aciunea cicatrizant,prin mucilagii

    la aciunea mucoprotectoare,prin saponozide la aciunea antibacterian,iar ttneasaprin

    poliholozide i alantoin la aciunea antiulceroas

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    35/37

    35

    Capitolul 5Concluzii

    Fitopreparatul, obinut prin amestecarea a cinci pri de suntoare, patru pri de

    glbenele si o parte de ttneas, poate fi folosit cu succes drept adjuvant n terapia afeciunilor

    gastro-intestinale precum: ulcer gastric, gastrit cronic, esofagit de reflux.Dar, innd cont i de

    principiile active identificate i de corelaia lor cu efectele terapeutice, recomand acest

    fitopreparat drept adjuvant in tratamentul ulcerului gastric.

  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    36/37

    36

    Bibliografie

    1. https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-

    50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252Fceai-vrac%252Fceai-galbenele-flori-50gr-stefmar-1032.html%3B1000%3B15002. https://www.google.ro/search?noj=1&tbm=isch&sa=1&q=ceai+de+sunatoare+stefmar&oq=ceai+de+sunatoare+stefmar&gs_l=img.3...35965.35965.0.36450.1.1.0.0.0.0.88.88.1.1.0....0...1c.1.43.img..1.0.0.c4w7MQIqXQk#facrc=_&imgdii=_&imgrc=3ZNb9QXnJjOksM%253A%3BA1J9woaXrmFXZM%3Bhttp%253A%252F%252Fnature.costu.ro%252Fimage%252Fcache%252Fdata%252Fstefmar%252FUNIVERSALA-MEDIE-500x500.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fnature.costu.ro%252Findex.php%253Froute%253Dproduct%252Fproduct%2526path%253D63%2526product_id%253D254%3B500%3B5003. Grd C.E., Duu L.E., Popescu M.L., Tudor I., Iordache A.T.,Costea T.Bazeleteoretice i practice ale analizei farmacognostice, vol. I, Ed. Curtea Veche,Bucureti, 2008, p.4. Grd C.E., Duu L.E., Popescu M.L., Costea T., Iordache A.T., Tudor I.Bazeleteoretice i practice ale analizeifarmacognostice, vol. II, Ed. Curtea Veche, Bucureti, 2008, p.

    https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252
  • 7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului

    37/37