14-Structure of a full-length cDNA clone for the preproal(I) chain.pdf
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8/10/2019 14-Structure of a full-length cDNA clone for the preproal(I) chain.pdf
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B i o c h e m . J . 1 9 8 8 ) 2 5 3 ,
9 1 9 - 9 2 2
P r i n t e d i n
G r e a t B r i t a i n )
S t r u c t u r e
o f
a
f u l l - l e n g t h cDNA c l o n e f o r
t h e
p r e p r o a l I )
c h a i n
o f human
t y p e
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p r o c o l l a g e n
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C l i n t o n T .
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D a r w i n
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*
D e p a r t m e n t o f B i o c h e m i s t r y
a n d
M o l e c u l a r
B i o l o g y ,
J e f f e r s o n
I n s t i t u t e o f M o l e c u l a r M e d i c i n e , Thomas
J e f f e r s o n U n i v e r s i t y ,
J e f f e r s o n
M e d i c a l
C o l l e g e ,
P h i l a d e l p h i a ,
PA
1 9 1 0 7 , U . S . A . ,
a n d
t
W h i t e h e a d
I n s t i t u t e f o r
B i o m e d i c a l R e s e a r c h
a n d
D e p a r t m e n t
o f
B i o l o g y ,
M a s s a c h u s e t t s
I n s t i t u t e
o f
T e c h n o l o g y , C a m b r i d g e ,
MA
0 2 1 4 2 ,
U . S . A .
A f u l l - l e n g t h cDNA c l o n e f o r t h e
human
p r e p r o c a l I ) c h a i n o f t y p e
I p r o c o l l a g e n
w a s
c h a r a c t e r i z e d .
N u c l e o t i d e s e q u e n c i n g
o f t h e f i r s t 1 5 0 0 n u c l e o t i d e r e s i d u e s o f t h e
5 - e n d o f t h e cDNA c l o n e
p r o v i d e d
7 2 9
n u c l e o t i d e r e s i d u e s a n d t h e c o d o n s f o r 2 4 3
a m i n o a c i d
r e s i d u e s
n o t
p r e v i o u s l y
d e f i n e d f r o m
a n y
s p e c i e s .
T h e
d a t a m a d e i t
p o s s i b l e ,
f o r t h e
f i r s t t i m e ,
t o
c o m p a r e c o m p l e t e l y
c o d o n u s a g e f o r t h e human o c l I ) a n d z 2 I
c h a i n s .
INTRODUCTION
T y p e
I
c o l l a g e n
i s
t h e
m a j o r c o m p o n e n t
o f
b o n e ,
t e n d o n ,
s k i n a n d d e n t i n e f o r r e v i e w s
s e e
P r o c k o p
K i v i r i k k o ,
1 9 8 4 ;
B u r g e s o n M o r r i s , 1 9 8 6 ) . I t
i s
a
h e t e r o t r i m e r w i t h t h e c h a i n
c o m p o s i t i o n [ a l I ) ] 2 a 2 I ) ,
a n d
i t i s
f i r s t
s y n t h e s i z e d a s
a p r o c o l l a g e n c o m p r i s e d o f
t w o
p r o a c l I ) a n d
o n e p r o a 2 I )
c h a i n s .
A l t h o u g h
d a t a o n
t h e
c o m p l e x
s t r u c t u r e o f
t y p e
I
c o l l a g e n
a r e now a v a i l a b l e ,
a
c o m p l e t e
n u c l e o t i d e s e q u e n c e
f o r
t h e
p r e p r o a l
1 I
cDNA
h a s n o t
h i t h e r t o b e e n
d e t e r m i n e d .
H e r e w e
r e p o r t
t h e
p a r t i a l s e q u e n c e
o f
a
f u l l - l e n g t h
human
cDNA c l o n e c o d i n g f o r
a
p r e p r o a c l I )
c h a i n
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p r e v i o u s l y S t a c e y
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T h e
i n f o r m a t i o n
p r o v i d e d
b y
t h e
s e q u e n c i n g
o f
t h i s c l o n e w i l l b e
o f
g r e a t
h e l p
i n
s t u d y i n g
m u t a t i o n s
i n
t y p e I
p r o c o l l a g e n
g e n e s
i n
d i s e a s e s s u c h a s
o s t e o g e n e s i s i m p e r f e c t a , E h l e r s - D a n l o s
s y n d r o m e
a n d M a r f a n
s y n d r o m e s e e P r o c k o p
K i v i r i k k o , 1 9 8 4 ; B y e r s
B o n a d i o ,
1 9 8 5 ; P r o c k o p
K u i v a n i e m i ,
1 9 8 6 ) .
MATERIALS
AND
METHODS
N u c l e o t i d e s e q u e n c i n g
o f
cDNA c l o n e f o r p r e p r o c l I )
c o l l a g e n
T h e i s o l a t i o n
a n d p a r t i a l
c h a r a c t e r i z a t i o n
o f t h e
f u l l -
l e n g t h human p r e p r o a l I ) cDNA
c l o n e
p H U C I )
h a s
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F i g .
1 .
S e q u e n c i n g
s t r a t e g y
u s e d
a n d
p a r t i a l
r e s t r i c t i o n
map
o f
t h e
cDNA
c l o n e f o r
p r e p r o a l I
c h a i n
p H U C I )
a )
S e q u e n c e
s t r a t e g y
u s e d f o r t h e a b o u t 1 . 5 k b E c o R I / X h o I
f r a g m e n t
o f
p H U C I .
A r r o w s
s t a r t i n g
w i t h
X
i n d i c a t e c l o n e s
t h a t
w e r e
g e n e r a t e d b y
t h e
S e q u e n e s t
t r a n s p o s o n - d e l e t i o n
s y s t e m .
O t h e r
a r r o w s i n d i c a t e c l o n e s
s t a r t i n g
a t
c o r r e s p o n d i n g
r e s t r i c t i o n
s i t e s .
b )
P a r t i a l r e s t r i c t i o n
m ap
f o r e n t i r e
p H U C I . C ] ,
U n t r a n s l a t e d
r e g i o n .
T h e
r e g i o n s
c o d i n g
f o r
t h e
p r o t e i n
d o m a i n s a r e
i n d i c a t e d b y s h a d i n g a n d h a t c h i n g : X, p r o p e p t i d e s ; U , t e l o p e p t i d e s ; C , t r i p l e - h e l i c a l
d o m a i n ;
E ,
s i g n a l
p e p t i d e .
A l s o
s h o w n
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t h e
r e l a t i v e
s i z e s o f t w o c l o n e s
p r e v i o u s l y r e p o r t e d
C h u
e t
a l . ,
1 9 8 2 ;
B e r n a r d
e t
a l . , 1 9 8 3 b )
f o r t h e
human
p r o a l I )
c h a i n
H f 4 0 4
a n d
H f 6 7 7 ) . S y m b o l s : A v ,
A v a I
s i t e ;
B a ,
BamHI
s i t e ; E ,
E c o R I
s i t e ; P ,
P v u I I
s i t e ;
R ,
R s a I
s i t e ; X ,
X h o I
s i t e .
t
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c o r r e s p o n d e n c e
s h o u l d b e a d d r e s s e d .
T h e s e
s e q u e n c e
d a t a
h a v e b ee n
s u b m i t t e d
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E M B L / G e n B a n k
L i b r a r i e s .
V o l .
2 5 3
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S l y
A l a
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c h i c k e n
-
-
-
b o v i n e
3 2 8
1 1 9 3
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G G C C C C
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G G T C C C C AA
humn
G l y
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P r o P r o
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S l y Ph e
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A l a L y s G l y
G l u
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S l y
- -
-
3 5 8
1 2 8 3
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6M
G G T C C C
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G GC C CT
G C T G G A
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h u m a n
S l y
P r o
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S l y
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3 8 8
1 3 7 3
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b o v i n e
- S e r
-
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4 4 8
1 5 3 6
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G
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P r o
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G l y
G l u G l u S l y
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A rg G iy A l a
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b o v i n e
- - - -
-
T h r
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I l e
- 4 7
4 7 2
1 9 8 8
-
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cDNA f o r
p r e p r o a l
c h a i n o f h u m a n
t y p e
I
p r o c o l l a g e n
b e e n d e s c r i b e d
p r e v i o u s l y S t a c e y
e t
a l . ,
1 9 8 7 ) . F o r
s e q u e n c i n g ,
t h e c l o n e w a s
i n s e r t e d i n t o t h e S e q u e n e s t
t r a n s p o s o n - d e l e t i o n
v e c t o r s
c a l l e d p A A - P Z 6 1 8 a n d
p A A - P Z 6 1 9
G o l d
B i o T e c h n o l o g y , S t . L o u i s ,
MO,
U . S . A . ; P e n g
Wu ,
1 9 8 6 ) . D e l e t i o n s w e r e g e n e r a t e d
a c c o r d i n g
t o m a n u f a c t u r e r s
r e c o m m e n d a t i o n s .
S i n g l e -
s t r a n d e d t e m p l a t e s
f o r
s e q u e n c i n g
w e r e
o b t a i n e d
b y
s i n g l e - s t r a n d r e s c u e b y
u s e o f t h e h e l p e r
b a c t e r i o p h a g e
MI 3 K 0 7
a n d
s e q u e n c e d b y u s i n g
a
p r i m e r
s p e c i f i c
f o r
t h e
v e c t o r s
p A A - p Z 6 1 8
a n d
p A A - p Z 6 1 9 .
S u b s e q u e n t l y ,
f r a g m e n t s
o f
pHUCI
w e r e
s u b c l o n e d i n t o b a c t e r i o p h a g e s
Ml3mpl8 a n d M 1 3 m p l 9 ,
a n d s e q u e n c e d b y
u s i n g
u n i v e r s a l
p r i m e r s S a n g e r
e t
a l . ,
1 9 7 7 ; M e s s i n g , 1 9 8 3 ) .
RESULTS
AND
DISCUSSION
R e s t r i c t i o n
map a n d
n u c l e o t i d e s e q u e n c e
o f t h e
cDNA
T h e c l o n e
pHUCI h u m a n c o l l a g e n ) i s
a
cDNA
c l o n e
c o r r e s p o n d i n g
t o t h e c o m p l e t e
4 . 8
k b h u m a n
p r o a l I )
mRNA S t a c e y e t a l . , 1 9 8 7 )
F i g .
1 .
To
e s t a b l i s h
t h a t
t h e
c l o n e w a s f u l l
l e n g t h
a n d
c o d e d
f o r
a f u n c t i o n a l
a l I )
c o l l a g e n
mRNA,
i t
w a s c l o n e d i n t o a r e t r o v i r a l v e c t o r
c a p a b l e o f
e x p r e s s i n g
i n s e r t e d
s e q u e n c e s
i n
h o s t m o u s e
c e l l s .
I n f e c t i o n
o f
Movi3
m o u s e
c e l l s
H a r b e r s
e t a l . ,
1 9 8 4 ;
S c h n i e k e
e t a l . ,
1 9 8 7 )
w i t h t h e v e c t o r r e s u l t e d
i n
t h e
p r o d u c t i o n
o f
s t a b l e t y p e
I
c o l l a g e n c o n s i s t i n g
o f
t w o
human
a l I
c h a i n s a n d
o n e m o u s e
a 2
c h a i n
S t a c e y
e t a l . ,
1 9 8 7 ) .
T h e
p r e v i o u s l y
a n a l y s e d
cDNAs c o v e r e d
t h e
c o d o n s
f o r
a m i n o
a c i d r e s i d u e s
2 4 7 - 1 0 1 4
o f t h e a - c h a i n
d o m a i n ,
t h e 2 6 a m i n o
a c i d r e s i d u e s o f
t h e C - t e r m i n a l
t e l o p e p t i d e ,
t h e 2 4 6
a m i n o a c i d r e s i d u e s
o f t h e
C - p r o p e p t i d e
a n d
F i g .
2 .
N u c l e o t i d e a n d
a m i n o a c i d sequence o f t h e
cDNA c l o n e
f o r t h e
p r e p r o o c l I )
c h a i n
p H U C I )
T h e n u c l e o t i d e s ar e n u m b e r e d
f r o m t h e s t a r t
s i t e
f o r
t r a n s c r i p t i o n
C h u
e t
a l . ,
1 9 8 5 )
a n d
t h e
a m i n o
a c i d s
f r o m
t h e f i r s t a m i n o
a c i d
o f
t h e
p r e p r o a l I )
c h a i n .
T h e 1 5 0 0
b p
n u c l e o t i d e
sequences
f r o m t h e 5 - e n d o f
t h e human cDNA
c l o n e ar e i n d i c a t e d
i n t h e
s e c o n d
l i n e . T h e
o v e r l a p
w i t h
p r e v i o u s l y p u b l i s h e d
sequences
f r o m
H f 4 0 4
B e r n a r d e t
a l . ,
1 9 8 3 b )
s t a r t s
a t n u c l e o t i d e
p o s i t i o n
1 3 9 2
a m i n o
a c i d
r e s i d u e 4 2 5 ) . T h e a m i n o
a c i d
sequence
e n c o d e d f o r
b y
t h e
c l o n e
i s i n d i c a t e d
b e l o w t h e n u c l e o t i d e
sequence.
L i n e 1 :
n u c l e o t i d e
sequences
f o r t h e c h i c k e n
p r e p r o a l I )
c h a i n
w h e r e
t h e y
ar e
known
b a s e s 2 7 - 5 7 1 ;
F i n e r
e t
a l . ,
1 9 8 7 )
a n d d i f f e r
f r o m t h e human
s e q u e n c e .
L i n e s
2
a n d 3 :
n u c l e o t i d e a n d a m i n o a c i d
sequences
o f
pHUCI d e f i n e d
i n
t h e
p r e s e n t
w o r k .
L i n e
4 :
a m i n o
a c i d
sequences
o f t h e
c h i c k e n
p r e p r o a l I )
c h a i n w h e r e
t h e y
ar e
k n o w n ,
t h e s e
b e i n g
r e s i d u e s 1 - 15 1 d er i v e d
f r o m
g e n o m i c
c l o n e
F i n e r
e t
a l . ,
1 9 8 7 )
a n d
r e s i d u e s
1 5 8 - 3 0 1
d e f i n e d
b y Edman
d e g r a d a t i o n
o f
p e p t i d e
f r a g m e n t s s e e
G a l l o w a y , 1 9 8 2 ) .
L i n e
5 :
a m i n o
a c i d sequence
o f
t h e
b o v i n e
p r o a l I )
c h a i n
t h a t was d e f i n e d
t y
Edm4n
d e g r a d a t i o n
o f
p e p t i d e
f r a g m e n t s
s e e G a l l o w a y , 1 9 8 2 ) . S y m b o l s :
- ,
i d e n t i c a l
a m i n o
a c i d ;
- ,
m i s s i n g
n u c l e o t i d e s
i n t h e
human
or
c h i c k e n
cDNA; * ,
m i s s i n g
amino
a c i d ;
e m p t y s p a c e
i n
a m i n o
a c i d
sequence,
n o t
k n o w n ;
6 1 a n d
1 0 3 , p o s s i b l e
s t a r t
s i t e s f o r t r a n s l a t i o n
t h a t
b o t h
e n d
i n
a
s t o p
codon
a f t e r
1 2
n u c l e o t i d e
r e s i d u e s ;
1 2 0 ,
s t a r t
s i t e f o r
t r a n s -
l a t i o n ;
v e r t i c a l
l i n e s ,
b e g i n n i n g s
o f
e x o n s
i n d i c a t e d ,
w h e r e
known
C h u
e t
a l . , 1 9 8 4 ) ;
V
c l e a v a g e
s i t e
f o r
s i g n a l
p e p t i d a s e ;
+ ,
c l e a v a g e
s i t e f o r
p r o c o l l a g e n
N - p r o t e i n a s e ;
l ,
b e g i n n i n g
o f
a - c h a i n
d o m a i n .
V o l .
2 5 3
T a b l e 1 . C o d o n u s a g e
i n
t h e
t r i p l e - h e l i c a l d o m a i n o f t h e p r o a l I )
a n d
p r o a 2 W )
h u m a n
t y p e
I p r o c o U a g e n
D a t a f o r t h e
t r i p l e - h e l i c a l d o m a i n
o f
t h e p r o a
l I ) c h a i n a r e
f r o m K u i v a n i e m i
e t
a l .
1 9 8 8 ) a n d B e r n a r d
e t
a l .
1 9 8 3 a ) .
T h i r d
Amino a c i d a l I )
a 2 I ) b a s e
G l y
0 . 5 0
0 . 5 1
U
0 . 2 8
0 . 2 2 C
0 . 1 8
0 . 2 2
A
0 . 0 3 0 . 0 5 G
C o d o n s e x a m i n e d
3 4 2
3 4 2
P r o t o t a l ) 0 . 6 0 0 . 6 2
U
0 . 3 8
0 . 2 1
C
0 . 0 2
0 . 1 6
A
0 0 . 0 1
G
C o d o n s e x a m i n e d 2 3 5
1 9 9
P r o Y a a
p o s i t i o n )
0 . 8 4 0 . 7 3
U
0 . 1 3 0 . 0 9
C
0 . 0 3 0 . 1 6
A
0 0 . 0 2 G
C o d o n s
e x a m i n e d
1 1 7
9 1
A l a 0 . 7 5 0 . 7 6
U
0 . 2 0
0 . 1 5 C
0 . 0 5 0 . 0 8
A
0
0
G
C o d o n s e x a m i n e d
1 1 8 1 0 7
2 2 4 b p
o f
t h e
3 - n o n - t r a n s l a t e d
r e g i o n
o f
t h e
mRNA. I n
t o t a l ,
t h e y
i n c l u d e d 3 3 4 4
b p
o f
t h e
mRNA
a n d c o d o n s
f o r
1 0 4 0 a m i n o
a c i d r e s i d u e s
C h u
e t
a l . ,
1 9 8 2 ; B e r n a r d
e t
a l . , 1 9 8 3 b ) .
I n
t h e p r e s e n t w o r k w e d e t e r m i n e d
7 2 9
n u c l e o t i d e r e s i d u e s
a n d . t h e
c o d o n s
f o r 2 4 3 a m i n o
a c i d s
r e s i d u e s
n o t
p r e v i o u s l y d e f i n e d
r e s i d u e s
1 8 2 - 4 2 4
i n F i g .
2 ) f r o m
a n y s p e c i e s .
I n a d d i t i o n ,
w e r e - e x a m i n e d t h e
s e q u e n c e
o f
6 2 6
b p
d e f i n e d b y s e q u e n c i n g
g e n o m i c
c l o n e s
c o n t a i n i n g
e x o n s
t o 6 C h u e t
a l . ,
1 9 8 4 ,
1 9 8 5 ) .
A s i n d i c a t e d i n F i g . 1 , t h e e n t i r e 1 5 0 0
b p
w a s
s e q u e n c e d
i n
b o t h
d i r e c t i o n s .
C o m p a r i s o n
o f
c o d o n
u s a g e b e t w e e n t h e h u m a n a l I )
a n d
o c 2 1
cDNAs
T h e d a t a
d e v e l o p e d h e r e m a d e
i t p o s s i b l e , f o r
t h e
f i r s t
t i m e ,
t o c o m p a r e c o m p l e t e l y c o d o n u s a g e f o r
t h e
human
a l I )
c h a i n
w i t h
t h a t
f o r t h e
h u m a n a 2 I ) c h a i n . T h e
r e s u l t s T a b l e 1 d e m o n s t r a t e d
a m a r k e d p r e f e r e n c e
f o r
U a s
a t h i r d
b a s e
i n
c o d o n s
f o r
g l y c i n e , p r o l i n e
a n d
a l a n i n e ,
i n
t h a t
U
w a s
u s e d
f o r 0 . 5 0 - 0 . 8 4
o f
t h e s e
c o d o n s
i n b o t h
c h a i n s .
E v e n m o r e
s t r i k i n g
w a s t h e r a r e u s e
o f G
f o r t h e t h i r d
b a s e
o f
t h e
s a m e
c o d o n s .
G
w a s
f o u n d
i n
o n l y
n i n e o f 3 4 2
g l y c i n e
c o d o n s
i n t h e
a l
I I )
c h a i n . I t
w a s
n o t u s e d f o r
a n y
o f
t h e t o t a l 3 5 3
p r o l i n e
a n d
a l a n i n e
c o d o n s . T h e
r e s u l t s t h e r e f o r e i n d i c a t e a
s t r o n g
s e l e c t i v e
p r e s s u r e
a g a i n s t
t h e
u s e o f
G
i n
t h e s e
c o d i n g s e q u e n c e s .
T h e r e w a s
a l s o
a
p r e f e r e n c e
f o r
U
i n
t h e
t h i r d
p o s i t i o n
o f
c o d o n s
f o r
p r o l i n e
t h a t w e r e i n
t h e Yaa
p o s i t i o n
o f
t h e
r e p e a t i n g
- G l y - X a a - Y a a -
_ s e q u e n c e
o f
t h e
c o l l a g e n
a -
c h a i n s .
T h e
p r e f e r e n c e
h a d
b e e n
n o t e d
i n t h e
s e q u e n c e
o f
t h e
a 2 I )
c h a i n
K u i v a n i e m i
e t
a l . , 1 9 8 8 ) ,
b u t w a s e v e n
m o r e
p r o n o u n c e d
i n t h e
s e q u e n c e
o f
t h e
a l I )
c h a i n .
9 2 1
-
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4/4
9 2 2
G .
T r o m p
a n d
o t h e r s
T h e
w o r k
p r e s e n t e d
h e r e w a s
s u p p o r t e d
i n
p a r t
b y
N . I . H .
R e s e a r c h G r a n t
A R - 3 8 1 8 8 a n d b y a g r a n t f r o m
t h e M a r c h o f
D i m e s - B i r t h D e f e c t s
F o u n d a t i o n .
REFERENCES
B e r n a r d ,
M .
P . ,
M y e r s , J . C . , C h u ,
M . - L . ,
R a m i r e z ,
F . ,
E i k e n b e r r y ,
E . F .
P r o c k o p ,
D .
J .
1 9 8 3 a )
B i o c h e m i s t r y
2 2 ,
1 1 3 9 - 1 1 4 5
B e r n a r d ,
M. P . ,
C h u ,
M . - L . , M y e r s ,
J .
C . ,
R a m i r e z ,
F . ,
E i k e n b e r r y , E . F .
P r o c k o p ,
D . J .
1 9 8 3 b ) B i o c h e m i s t r y
2 2 ,
5 2 1 3 - 5 2 2 3
B u r g e s o n , R . E .
M o r r i s , N . P . 1 9 8 6 )
i n C o n n e c t i v e
T i s s u e
D i s e a s e :
M o l e c u l a r P a t h o l o g y o f
t h e E x t r a c e l l u l a r
M a t r i x
U i t t o ,
J .
P e r e j d a ,
A . J . , e d s . ) , p p .
3 - 2 8 ,
M a r c e l D e k k e r ,
Ne w Y o r k
B y e r s ,
P . H . B o n a d i o ,
J .
F .
1 9 8 5 )
i n G e n e t i c
a n d
M e t a b o l i c
D i s e a s e s
i n
P e d i a t r i c s L l o y d ,
J .
S c r i v e r ,
C .
R . , e d s . ) , p p .
5 6 - 9 0 ,
B u t t e r w o r t h s , L o n d o n
C h u ,
M . - L . ,
M y e r s ,
J .
C . ,
B e r n a r d ,
M.
P . , D i n g ,
J . - F .
R a m i r e z , F .
1 9 8 2 )
N u c l e i c A c i d s
R e s .
1 0 , 5 9 2 5 - 5 9 3 4
C h u , M . - L . ,
d e W e t ,
W . ,
B e r n a r d , M . , D i n g ,
J . - F . ,
M o r a b i t o ,
M . , M y e r s ,
J . ,
W i l l i a m s , C .
R a m i r e z , F .
1 9 8 4 )
N a t u r e
L o n d o n ) 3 1 0 ,
3 3 7 - 3 4 0
C h u , M . - L . , d e
W e t , W . ,
B e r n a r d ,
M .
R a m i r e z ,
F .
1 9 8 5 )
J . B i o l .
C h e m . 2 6 0 ,
2 3 1 5 - 2 3 2 0
F i n e r , M .
H . , A h o ,
S . ,
G e r s t e n f e l d , L . C . ,
B o e d t k e r , H .
D o t y ,
P .
1 9 8 7 ) J . B i o l .
C h e m . 2 6 2 ,
1 3 3 2 3 - 1 3 3 3 2
G a l l o w a y ,
D .
1 9 8 2 )
i n
C o l l a g e n
i n
H e a l t h
a n d D i s e a s e
W e i s s ,
J .
B .
J a y s o n ,
M. I . V . , e d s . ) ,
p p .
5 2 8 - 5 5 7 , C h u r c h i l l -
L i v i n g s t o n e ,
E d i n b u r g h
H a r b e r s ,
K . , K u e h n , M . ,
D e l i u s , H .
J a e n i s c h , R .
1 9 8 4 ) P r o c .
N a t l .
A c a d .
S c i .
U . S . A . 8 1 ,
1 5 0 4 - 1 5 0 8
K u i v a n i e m i ,
H . ,
T r o m p ,
G . ,
C h u ,
M . - L .
P r o c k o p , D . J .
1 9 8 8 )
B i o c h e m .
J .
2 5 2 , 6 3 3 - 6 4 0
M e s s i n g , J . 1 9 8 3 )
M e t h o d s
E n z y m o l .
1 0 1 , 2 0 - 7 8
P e n g , Z G
W u , R .
1 9 8 6 ) G e n e 4 5 ,
2 4 7 - 2 5 2
P r o c k o p ,
D .
J .
K i v i r i k k o , K .
I .
1 9 8 4 )
N . E n g l . J . M e d .
3 1 1 ,
3 7 6 - 3 8 6
P r o c k o p ,
D .
J .
K u i v a n i e m i , H .
1 9 8 6 ) R h e u m a t o l o g y 1 0 ,
2 4 6 - 2 7 1
S a n g e r ,
F . ,
N i c k l e n ,
S .
C o u l s o n ,
A .
R .
1 9 7 7 )
P r o c .
N a t l .
A c a d .
S c i . U . S . A .
7 4 ,
5 4 6 3 - 5 4 6 7
S c h n i e k e ,
A . ,
D z i a d e k ,
M . ,
B a t e m a n , J . , M a s c a r a , T . ,
H a r b e r s ,
K . , G e l i n a s , R .
J a e n i s c h ,
R .
1 9 8 7 ) P r o c .
N a t l .
A c a d .
S c i .
U . S . A .
8 4 ,
7 6 4 - 7 6 8
S t a c e y ,
A . ,
M u l l i g a n ,
R .
J a e n i s c h ,
R .
1 9 8 7 )
J .
V i r o l .
6 1 ,
2 5 4 9 - 2 5 5 4
R e c e i v e d 5
A p r i l 1 9 8 8 / 2 3
May 1 9 8 8 ; a c c e p t e d
1
J u n e
1 9 8 8
1 9 8 8