10. Validasi Metoda Analisa

8/17/2019 10. Validasi Metoda Analisa

1/26


2/26

VALIDASI METODE ANALISAVALIDASI METODE ANALISA

Tujuan Validasi Metode Analisa:Tujuan Validasi Metode Analisa:

Menunjukkan bahwa semua metodeMenunjukkan bahwa semua metode

tetap yang digunakan sesuai dengantetap yang digunakan sesuai dengan

tujuan penggunaannya dan selalutujuan penggunaannya dan selalu

memberikan hasil yang dapat dipercayamemberikan hasil yang dapat dipercaya

1


3/26


Penyusunan Metode Analisa Berdasarkan:Penyusunan Metode Analisa Berdasarkan:1.1.iambil !iambil !adopsi adopsi " dari berbagai literatur resmi#" dari berbagai literatur resmi#

misalnya $armakope %ndonesia !$%"# &nite 'tatemisalnya $armakope %ndonesia !$%"# &nite 'tate

Pharmacopea !&'P"# British Pharmacopea !BP"Pharmacopea !&'P"# British Pharmacopea !BP"

dan lain(lain !dan lain(lain !kompendial kompendial "").).Berasal dari pengembangan sendiri !Berasal dari pengembangan sendiri !Eksporasi Eksporasi ""

*.*.Modi+ikasi dari prosedur pengujian yang telahModi+ikasi dari prosedur pengujian yang telah

ada !ada !Modifikasi Modifikasi ""

2


4/26


,uang -ingkup Validasi Metode Analisa:,uang -ingkup Validasi Metode Analisa:Validasi Metode Analisa dilakukan untuk 'M&AValidasi Metode Analisa dilakukan untuk 'M&A

metoda analisa yang digunakan untuk pengawasanmetoda analisa yang digunakan untuk pengawasan

kegiatan produksi# termasuk metode analisis yangkegiatan produksi# termasuk metode analisis yang

digunakan dalam menetapkan residu /at akti+ padadigunakan dalam menetapkan residu /at akti+ pada

0alidasi prosedur pembersihan0alidasi prosedur pembersihanilakukan dengan semua peralatan yang telahilakukan dengan semua peralatan yang telah

dikalibrasi dan diuji kesesuaian sistemnya !alat dandikalibrasi dan diuji kesesuaian sistemnya !alat dan

sistem sudah dikuali+ikasi"sistem sudah dikuali+ikasi"Menggunakan bahan baku pembanding yang sudahMenggunakan bahan baku pembanding yang sudah

dibakukan dan disimpan ditempat yang sesuaidibakukan dan disimpan ditempat yang sesuai 3


5/26


Validasi Metode AnalisisValidasi Metode Analisis ilakukan terhadapilakukan terhadap

jenis jenis 2egiatan2egiatan::

1. &ji identi+ikasi1. &ji identi+ikasi &ntuk memastikan identitas analit dalam&ntuk memastikan identitas analit dalam

sampelsampel Biasanya dilakukan dengan membandingkanBiasanya dilakukan dengan membandingkan

karakteristik sampel !misal: spektrum# pro+ilkarakteristik sampel !misal: spektrum# pro+il

kromatogram# reaksi kimia# dan lain(lain"kromatogram# reaksi kimia# dan lain(lain"

terhadap baku pembandingterhadap baku pembanding

4


6/26


).). &ji kuantitati+ kandungan impuritas&ji kuantitati+ kandungan impuritas

!kemurnian"!kemurnian"

ilakukan melalui uji kuantitati+ilakukan melalui uji kuantitati+

atau uji batas impuritas dalamatau uji batas impuritas dalamsampelsampelBertujuan mere+leksikan secaraBertujuan mere+leksikan secara

tepat karakteristik kemurniantepat karakteristik kemurniansampelsampel 5


7/26


*. &ji batas impuritas*. &ji batas impuritas

• 2arakteristik 0alidasi diperlukan2arakteristik 0alidasi diperlukan

untuk uji kuantitati+ dibandinguntuk uji kuantitati+ dibanding

untuk uji batas impuritasuntuk uji batas impuritas

6


8/26


. &ji kuantitati+ /at akti+ dalam sampel. &ji kuantitati+ /at akti+ dalam sampel

bahan atau obat ataubahan atau obat atau komponenkomponen

tertentu dalam obattertentu dalam obat

ProsedurProsedur penetapan kadar bertujuanpenetapan kadar bertujuanuntuk menentukan kadar analit dalamuntuk menentukan kadar analit dalam

sampelsampel Penetapan kadar menunjukkanPenetapan kadar menunjukkan

pengukuran komponen utama yangpengukuran komponen utama yangterkandung dalam bahan akti+ obatterkandung dalam bahan akti+ obat

7


9/26


Parameter &jiParameter &ji 0alidasi yang perlu diperhatikan:0alidasi yang perlu diperhatikan:

1. Akurasi1. Akurasi

). Presisi). Presisi

*. ,ipitabilitas*. ,ipitabilitas

.. Intermediate precisionIntermediate precision

5.5. ,eprodusibilitas3keterulangan,eprodusibilitas3keterulangan !reproducibility"!reproducibility"

44. 'pesi+isitas. 'pesi+isitas 3 selekti+itas 3 selekti+itas

55. Batas deteksi. Batas deteksi

66. Batas kuantitasi. Batas kuantitasi

77. -inearitas. -inearitas

1818. ,entang. ,entang 8


10/26


Akurasi:Akurasi:Merupakan kemampuan suatu metode analisa untukMerupakan kemampuan suatu metode analisa untuk

memperoleh nilai yang sebenarnya !ketepatanmemperoleh nilai yang sebenarnya !ketepatan

pengukuran"pengukuran"inyatakan sebagai persentase !9" perolehan kembaliinyatakan sebagai persentase !9" perolehan kembali

!!recovery recovery ""Akurasi dinilai dengan menggunakan sedikitnya 7Akurasi dinilai dengan menggunakan sedikitnya 7

penentuan dengan sedikitnya * tingkat konsentrasi dalampenentuan dengan sedikitnya * tingkat konsentrasi dalam

rentang pengujian metode analisis tersebut !misalnya *rentang pengujian metode analisis tersebut !misalnya *

konsentrasi3* replikasi untuk tiap prosedur analisiskonsentrasi3* replikasi untuk tiap prosedur analisis

lengkap"lengkap" 9


11/26


Akurasi:Akurasi:2etepatan metode analisa dihitung2etepatan metode analisa dihitung

dari besarnya rata(rata !dari besarnya rata(rata !mean, x mean, x ""

kadar yang diperoleh dari serangkaiankadar yang diperoleh dari serangkaianpengukuran dibandingkan denganpengukuran dibandingkan dengan

kadar sebenarnyakadar sebenarnya

10


12/26


Metode Penentuan Akurasi:Metode Penentuan Akurasi:Menggunakan metode analisis untuk menetapkanMenggunakan metode analisis untuk menetapkan

kadar analit dalam bahan baku berkhasiat yangkadar analit dalam bahan baku berkhasiat yang

diketahui kemurniannya !misalnya bahan bakudiketahui kemurniannya !misalnya bahan baku

pembanding sekunder"pembanding sekunder"Bahan baku berkhasiat atau cemaran dalam jumlahBahan baku berkhasiat atau cemaran dalam jumlah

yang diketahui ditambahkan kedalam plasebo.yang diketahui ditambahkan kedalam plasebo.

Metode analisis ini akan digunakan untuk penetapanMetode analisis ini akan digunakan untuk penetapan

kadar bahan baku berkhasiat3cemaran dalam produkkadar bahan baku berkhasiat3cemaran dalam produk

obatobat

11


13/26


Metode Penentuan Akurasi:Metode Penentuan Akurasi:Bila plasebo tidak bisa diperoleh# 0eri+ikasiBila plasebo tidak bisa diperoleh# 0eri+ikasi

akurasi metode dapat dilakukan denganakurasi metode dapat dilakukan dengan

teknik standar adisi# yaitu denganteknik standar adisi# yaitu dengan

menambahkan sejumlah tertentu analit kemenambahkan sejumlah tertentu analit kedalam produk obat yang telah diketahuidalam produk obat yang telah diketahui

kadarnya. Metode analisis ini digunakankadarnya. Metode analisis ini digunakan

untuk penetapan kadar bahan bakuuntuk penetapan kadar bahan baku

berkhasiat3cemaran dalam produk obatberkhasiat3cemaran dalam produk obat 12


14/26


Metode Penentuan Akurasi:Metode Penentuan Akurasi:

Menambahkan cemaran dalam jumlahMenambahkan cemaran dalam jumlah

tertentu ke dalam bahan bakutertentu ke dalam bahan baku

berkhasiat3produk obat. Metode analisisberkhasiat3produk obat. Metode analisisini digunakan untuk penetapan kadarini digunakan untuk penetapan kadar

cemaran dalam bahan baku berkhasiatcemaran dalam bahan baku berkhasiat

dan produk obatdan produk obat

13


15/26


Metode Penentuan Akurasi:Metode Penentuan Akurasi:

Membandingkan dua metode analisis untukMembandingkan dua metode analisis untuk

mengetahui eki0alensinya# yaitu membandingkanmengetahui eki0alensinya# yaitu membandingkan

hasil yang diperoleh dari metode analisis yanghasil yang diperoleh dari metode analisis yang

di0alidasi terhadap hasil yang diperoleh dari metodedi0alidasi terhadap hasil yang diperoleh dari metodeanalisis yang 0alid !akurasi metode analisis yanganalisis yang 0alid !akurasi metode analisis yang

0alid ini telah diketahui". Metode analisis ini0alid ini telah diketahui". Metode analisis ini

digunakan untuk penetapan kadar bahan bakudigunakan untuk penetapan kadar bahan baku

dalam bahan baku berkhasiat# produk obat dandalam bahan baku berkhasiat# produk obat dan

penetapan kadar cemaranpenetapan kadar cemaran

14


16/26


Presisi !2etelitian":Presisi !2etelitian":

oMerupakan kemampuan suatu metode analisisMerupakan kemampuan suatu metode analisis

untuk menunjukkan kedekatan dari suatu seriuntuk menunjukkan kedekatan dari suatu seri

pengukuran yang diperoleh dari sampel yangpengukuran yang diperoleh dari sampel yang

homogenhomogenoPresisi dinyatakan dalam bentuk ,' !Presisi dinyatakan dalam bentuk ,' !relativerelative

standart deviationstandart deviation"# atau ',B !sebaran baku"# atau ',B !sebaran baku

relati+"relati+"

15


17/26


2ategori Pengujian Presisi:2ategori Pengujian Presisi:

2eterulangan !2eterulangan !repeatability repeatability "# dinilai dengan"# dinilai dengan

menggunakan minimum 7 penentuan dalammenggunakan minimum 7 penentuan dalam

rentang penggunaan metode analisisrentang penggunaan metode analisistersebut !misalnya * konsentrasi3* replikasi"tersebut !misalnya * konsentrasi3* replikasi"Presisi Antara# yaitu perbedaan antarPresisi Antara# yaitu perbedaan antar

operator3analis dengan sumber reagensiaoperator3analis dengan sumber reagensia

dan hari yang berbedadan hari yang berbeda16


18/26



,eprodusibilitas# dengan menggunakan,eprodusibilitas# dengan menggunakan

beberapa laboratorium untuk 0alidasi metodebeberapa laboratorium untuk 0alidasi metode

analisis# agar diketahui pengaruh lingkungananalisis# agar diketahui pengaruh lingkungan

yang berbeda terhadap kinerja metodeyang berbeda terhadap kinerja metode

analisisanalisis

17


19/26



18


20/26


'pesi+itas 3 selekti+itas:'pesi+itas 3 selekti+itas:

Merupakan kemampuan suatu metodeMerupakan kemampuan suatu metode

analisa untuk membedakan senyawa yanganalisa untuk membedakan senyawa yang

diuji dengan deri0at3metabolitnyadiuji dengan deri0at3metabolitnyaAdanya perbedaan nyata antara resolusiAdanya perbedaan nyata antara resolusi

antara dua puncak yang berdampingan danantara dua puncak yang berdampingan dan

kemurnian tiap puncak dalam kromatogramkemurnian tiap puncak dalam kromatogram

19


21/26


ontoh 2romatogram &ji spesi+itas yang memenuhi syarat:ontoh 2romatogram &ji spesi+itas yang memenuhi syarat:

20


22/26


ontoh 2romatogram &ji spesi+itas yang tidak memenuhi syarat:ontoh 2romatogram &ji spesi+itas yang tidak memenuhi syarat:

21


23/26


-inearitas:-inearitas: Merupakan kemampuan suatu metodeMerupakan kemampuan suatu metode

analisa untuk menunjukkan hubungan secaraanalisa untuk menunjukkan hubungan secara

langsung atau proporsional antara responslangsung atau proporsional antara respons

detektor dengan perubahan konsentrasi analitdetektor dengan perubahan konsentrasi analitiuji secara statistik# yaitu -inear ,egressioniuji secara statistik# yaitu -inear ,egression

!y ; a < b="> dimana b adalah kemiringan!y ; a < b="> dimana b adalah kemiringan

slopeslope garis regresi dan a adalah perpotongangaris regresi dan a adalah perpotongan

dengan sumbu ydengan sumbu y

22


24/26


-inearitas:-inearitas: Pengujian dilakukan paling tidak denganPengujian dilakukan paling tidak dengan

menggunakan ? kadar yang berbeda#menggunakan ? kadar yang berbeda#

kemudian dilihat apakah memberikankemudian dilihat apakah memberikan

respons yang linear apa tidak# yangrespons yang linear apa tidak# yangditunjukkan dengan nilai r @ 8#76ditunjukkan dengan nilai r @ 8#76

23


25/26


ontoh &ji -inearitas:ontoh &ji -inearitas:

24


26/26

TERIMA K ASIH

THANK YOU

10. Validasi Metoda Analisa

Documents

Transcript of 10. Validasi Metoda Analisa