1

GAMBARAN HISTOLOGIS TULANG VERTEBRAE DAN PROFIL HORMON

ESTROGEN PADA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) OVARIEKTOMI SETELAH

MENDAPAT TERAPI TEPUNG TULANG IKAN

TUNA MADIDIHANG (THUNNUS ALBACARES)

Histologic Image Of Vertebrae Bone And Estrogen Hormone Profile on Ovarietomy

Rats (Rattus norvegicus)) After Yellowfin

Tuna (Thunnus albacares) Fish Bone Meal Theraphy

1Yulinar Risky Karaman*,

1Agung Pramana W.M; *,

1Aulanniam, 1Program Studi Pendidikan Dokter Hewan, Program Kedokteran Hewan, Universitas Brawijaya

2Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya

*yulinar_karaman@yahoo.com

ABSTRAK

Osteoporosis merupakan suatu kondisi yang terjadi pada tulang akibat pengurangan

massa tulang, mineral maupun matriks tulang sehingga kepadatan tulang berkurang dan tulang

menjadi keropos. Metode penyembuhan osteoporosis sampai saat ini masih belum diketahui.

Salah satu suplemen yang diyakini dapat memperlambat pembongkaran kalsium pada

osteoporosis bisa dikurangi dengan mengkonsumsi tepung tulang ikan tuna madidihang. Tepung

tulang ikan tuna madidihang merupakan pengolahan limbah hasil industri pengolahan ikan yang

memiliki kandungan kalsium 13,19%, fosfor 0,81%, natrium 0,36%, dan zat besi 0,03%. Untuk

mengkaji efek tepung tulang ikan digunakan hewan model osteoporosis. Hewan model

osteoporosis adalah tikus yang diovariektomi. Tepung tulang ikan dimasukkan langsung ke

dalam lambung tikus melalui sonde. Pemberian tepung tulang ikan dilakukan selama 30 hari

dengan 4 kelompok perlakuan, yaitu : kelompok kontrol dan 3 kelompok terapi dengan dosis

terapi 400; 800; dan 1600 mg/kg BB/hari. Setelah hari ke 31 dilakukan euthanasia dan

pengambilan organ tulang vertebrae untuk pembuatan preparat histologis dan pengambilan

sampel darah untuk pemeriksaan hormon estrogen. Hasil dari penelitian ini menunjukkan adanya

penebalan pada dinding tulang vetebrae lumbal yang ditandai dengan perbedaan lebar dinding

sel pada tikus kontrol dan tikus dengan perlakuan. Terapi tepung tulang ikan tuna madidihang

meningkatkan kadar estrogen dalam darah pada tikus kontrol dan tikus perlakuan dan terdapat

perbedaan signifikan antar perlakuan (p

2

calcium, 0.81% phosphor, 0.36% natrium, and 0.03% iron. To assess the effect of fish bone

meal used animal models of osteoporosis. An animal model for osteoporosis an ovariectomized

rat so that the levels of estrogen is decreased and calcium absorption process occurs in the bones,

resulting in osteoporosis. Fish bone meal give directly into the rats stomach. Provision of fish bone meal made for 30 days with 4 treatment groups and the control group is 3 treatment groups

with therapeutic doses were 400,800,1600 mg / kg / day. After 31 days of treatment all rats are

sacrified and then bone vertebrae were taken for histological slide and blood sampling for

examination estrogen hormone. Results of this study showed a thickening of the walls of the

lumbar spine vetebrae characterized by wide differences in the tissue wall of control rats and rats

with treatment. Yellowfin tuna fish bone meal therapy increases estrogen levels in the blood of

control rat and rat treated and there was a significant difference between treatments (p

3

Tingkat kepadatan tulang dapat diketahui

dari gambaran histologis tulang dan

mengukur tingkat Ca yang terkandung

dalam tulang. Pemberian suplemen kalsium

juga diharapkan dapat memberikan feedback

terhadap produksi hormon estrogen pada

bagian korteks organ adrenal yang diinduksi

dari reseptor estrogen yang terdapat pada

sel-sel osteoblast.

MATERI DAN METODE

Persiapan Hewan Coba

Hewan coba dibagi menjadi empat

kelompok, yaitu kelompok kontrol

ovariektomi, kelompok ovariektomi yang

diberi terapi tepung tulang ikan Tuna

Madidihang (Thunnus albacares) dengan

dosis 400 mg/kgBB/hari, 800mg/kg BB/hari

dan 1600mg/kg BB/hari. Hewan coba

diadaptasi terhadap lingkungan selama tujuh

hari dengan pemberian makanan berupa

ransum basal pada semua tikus. Komposisi

ransum basal disusun berdasarkan standar

AIN (2005) yaitu mengandung karbohidrat,

protein, lemak, mineral, vitamin, dan air.

Pembuatan tepung tulang

Tulang ikan segar yang terdiri dari

bagian tulang punggung sampai tulang ekor

kemudian dicuci dengan air mengalir.

Tulang ikan dikukus selam 10 menit.

Tulang dibersihkan dari sisa daging yang

menempel dan bagian lainnya yang tidak

dibutuhkan kemudian dicuci dengan air

mengalir. Tulang ikan yang telah

dibersihkan dimasukkan ke dalam air

mendidih dan direbus selama 30 menit

pada suhu 1000 C. Tulang dipotong dengan

ukuran 5 cm. Potongan tulang dimasukkan

ke dalam panci presto lalu dipanaskan

sampai matang, kemudian dilanjutkan

dipresto selam 2 jam dengan api yang lebih

kecilkan. Potongan tulang dikeringkan

menggunakan oven dengan suhu 1200 C

selama 35 menit. Potongan tulang yang

sudah kering dihaluskan menggunakan

blender hingga halus. Tepung yang

dihasilkan diayak menggunakan ayakan

dengan ukuran 100 mesh sehingga

didapatkan tepung tulang ikan yang

homogen (Thalib, 2009).

Pembuatan Hewan Model Ovariektomi

Seminggu pasca adaptasi pakan,

dilakukan ovariektomi (pengambilan

ovarium) yaitu dengan membuat sayatan

pada lateral abdomen ke arah caudal. Tikus

dianastesi yang menggunakan ketamin

dengan dosis 0.6-1 ml/kg BB secara

intravena pada vena cocygea. Selanjutnya

rambut di area bedah dicukur pada sisi

lateral tikus, pada daerah insisi dilakukan

desinfeksi dengan alcohol 70%. Insisi

dilakukan pada area bedah yaitu 2 cm

mengikuti tulang belakang dan berjarak 1,5

cm dari tulang belakang, dicari ovarium

kemudian ikat dengan benang cat gut.

Ovarium yang telah diikat lakukan

pemotongan kemudian disisihkan. Langkah

selanjutnya menjahit otot dengan cut gut

kromik dengan tipe jahitan sederhana

terputus dan menjahit kulit dengan benang

silk dengan tipe jahitan sederhana terputus

(Sabri, 2011). Untuk pemulihan luka pada

tikus berlangsung selama 10 hari. Setelah

dilakukan ovariektomi untuk memastikan

tikus mengalami osteoporosis dilakukan

rontgen. Hasil foto rontgen menunjukkan

bahwa setelah 3 bulan setelah perlakuan

ovariektomi tulang menunjukkan penurunan

densitas yang ditandai dengan gambar

rontgen yang menunjukkan gambar tulang

vertebrae terlihat radiolucent

Pemberian Terapi tepung tulang ikan Tuna

Madidihang (Thunnus albacares)

Pemberian terapi tepung tulang ikan

Tuna Madidihang (Thunnus albacares)

kepada tikus penelitian dilakukan per oral

melalui sonde modifikasi langsung ke

lambung tikus sebanyak 2 cc per ekornya

dengan konsentrasi tepung yang berbeda

4

yaitu kelompok kontrol tidak diberi

perlakuan, kelompok 2 dengan dosis 400

mg/kg BB, kelompok 3 dengan konsentrasi

800 mg/kg BB dan kelompok 4 dengan

konsentrasi 1600 mg/kg BB. Tepung tulang

ikan tuna mandidihang (Thunnus albacares)

diberikan sebagai terapi selama satu bulan.

Pembuatan Preparat Histopatologis Tulang

Vertebrae

Proses pembuatan preparat diawali

dengan mematikan tikus kemudian

dilakukan pembedahan dan diambil tulang

vertebrae lumbalis. Tulang vertebrae

dimasukkan pada larutan PFA

(Paraformaldehida) 4%. Setelah organ

disimpan dilakukan fiksasi dengan

meletakkan preparat tulang vertebrae yang

telah diisolasi, kedalam botol kaca kecil.

Proses pembuatan preparat histologi terdiri

dari fiksasi, dehidrasi dan infiltrasi,

penjernihan, infiltrasi paraffin, embedding,

sectioning, penempelan di gelas objek, serta

pewarnaan hematoxilin eosin.

Pengambilan sampel darah

Sampel darah didapatkan setelah tikus

dianastesi menggunakan ketamin, darah

langsung diambil dari jantung melalui

bagian apex sebanyak 3ml dengan

menggunakan disposable syringe 5 ml.

Sampel darah tikus yang diambil dari

jantung kemudian dimasukkan ke dalam

tabung reaksi dan ditunggu selama 3 jam

hingga keluar serumnya. Kemudian serum

disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm,

pada suhu ruang selama tiga puluh menit

dengan Hettich Zentrifugen. Proses

sentrifugasi dilakukan untuk mendapatkan

serum yang murni. Selanjutnya serum

dimasukkan kedalam tabung eppendrof dan

disimpan di dalam lemari es pada suhu 4C.

Analisis Profil Hormon Estrogen

Untuk mengetahui profil hormon estrogen

pada tikus yang mendapat terapi tepung

tulang ikan madidihang dilakukan

pemeriksaan dengan metode ELISA

indirect. Antigen diperoleh dari serum yang

berasal dari sampel darah yang diambil dari

jantung. Sampel darah diambil dari seluruh

hewan coba yang mendapat perlakuan.

Pengujian ELISA Indirect dilakukan dengan

menggunakan 100L antigen dalam coating

buffer dengan perbandingan 1:9 lalu

dimasukkan dalam sumuran plate ELISA

dan diinkubasi semalam pada suhu 40C.

Setelah itu dicuci dengan PBS-Tween

sebanyak 3 kali. Ditambahkan 50L

blocking buffer (BSA 1% dalam PBS).

Selanjutnya dicuci dengan PBS-Tween

sebanyak 3 kali. Kemudian ditambah 100

L antibodi primer dalam larutan PBS-BSA

1% dengan perbandingan 1 : 500 dan

diinkubasi selama 2 jam. Selanjutnya dicuci

dengan PBS-Tween sebanyak 3 kali,

ditambah 100L antibodi sekunder dalam

Tris Buffer salin dengan perbandingan

1:2500 dan dinkubasi selama 1,5 jam.

Kemudian dicuci dengan PBS-Tween

sebanyak 2 kali. Ditambah 50L substrat

Pnpp, dilakukan inkubasi selama 30 menit,

ditambah NaOH 1N sebanyak 50L sebagai

penghenti reaksi. Kemudian dibaca

absorbansinya dengan ELISA reader pada

panjang gelombang 405 nm (Albert, 1998).

Analisis Data

Variabel yang dipelajari dalam

penelitian ini meliputi perubahan kadar

hormon estrogen menggunakan ELISA dan

gambaran histopatologis organ vertebrae.

Untuk pengamatan preparat hitopatologis

dilakukan dengan pengamatan kualitatif

ditunjang dengan data kuantitatif yaitu

jumlah sel ostosit pada satu lapang pandang.

Data kuantitatif yang diperoleh dari hasil

perlakuan ditabulasi dengan menggunakan

Microsoft Office Excel dan dianalisis

5

menggunakan SPSS 20,0 for Windows

dengan analisis ragam ANOVA. Apabila

terdapat perbedaan nyata uji dilanjutkan

dengan pembandingan berganda uji Tukey

atau Beda Nyata Jujur (BNJ) = 0.05% (Kusriningrum, 2010).

HASIL DAN PEMBAHASAN

Pengaruh Pemberian Tepung Tulang

Ikan Tuna Madidihang (Thunnus

albacares) Terhadap Kadar Hormon

Estrogen Tikus Model Ovariektomi

Hasil pengukuran kadar hormon

estrogen pada tikus yang telah diovariektomi

pada 4 kelompok yaitu tikus kontrol

(ovariektomi), ovariektomi+terapi dosis 400

mg/kg BB/hari, ovariektomi+terapi dosis

800mg/kg BB/hari , ovariektomi+terapi

dosis 1600 mg/kg BB/hari tercantum pada

Tabel 1.

Proses ovariektomi dapat menurunkan

kadar hormon estrogen hal ini dikarenakan

ovarium sebagai penghasil utama hormon

estrogen tidak berfungsi, sehingga kadar

estrogen pada tikus model ovariektomi akan

menurun secara drastis. Penurunan kadar

estrogen pada hewan model ovariektomi

telah dibuktikan oleh penelitian Hartiningsih

(2010). Berdasarkan data yang diperoleh

diketahui bahwa kadar estrogen kelompok

kontrol adalah yang paling rendah

dibandingkan dengan kelompok yang lain,

menurut penelitian yang dilakukan oleh

Suarsana (2011) kadar estrogen pada tikus

normal adalah berkisar antara 132-140

g/ml darah. Penurunan kadar estrogen pada

semua kelompok perlakuan diakibatkan oleh

proses ovariektomi yang menyebabkan

produksi estrogen menurun secara drastis

karena ovarium yang merupakan penghasil

hormon estrogen terbesar dalam tubuh telah

diambil.

Pada kelompok terapi terjadi perbedaan

kadar estrogen dimana pada semua

kelompok terapi memiliki rata-rata kadar

estrogen yang lebih tingi dibandingkan

kelompok tanpa perlakuan. Dari data

tersebut diketahui kelompok dosis terapi

1600 mg/kg BB/hari memiliki kadar

estrogen yang paling tinggi dibandingkan

dengan kelompok yang lain. Adanya kadar

estrogen dalam tubuh setelah dilakukan

proses ovariektomi dikarenakan adanya

produksi hormon estrogen dari korteks

adrenal ( Kawiyana, 2009).

Organ penghasil hormon estrogen

antara lain adalah ovarium, korteks adrenal,

dan pada sel-sel adiposit dimana pada organ

tersebut akan menghasilkan estrogen pada

saat ovarium tidak memproduksi estrogen

(Nelson, 2001). Produksi estrogen terjadi

saat terdapat kolesterol yang nantinya akan

diubah menjadi androstenedione yang

merupakan bakal dari hormon reproduksi.

Hormon androstenedione akan diubah

menjadi hormon estrogen pada sel-sel

granulosa.

Pemberian tepung tulang ikan Tuna

Madidihang yang mengandung kalsium

tinggi memiliki korelasi dengan kadar

hormon estrogen. Menurut Kawiyana (2009)

tingginya kadar kalsium dalam tulang akan

menyebabkan terjadinya ikatan antara

kalsium dengan estrogen reseptor (ER-) yang terdapat pada sel osteoblast.

Tabel 1. Rata-rata nilai kadar estrogen dalam darah pada masing-masing kelompok perlakuan

Kelompok Rata-rata Kadar Estrogen dalam darah (g/mL darah)

Kontrol (ovariektomi) 64,242661,395a

400 mg/kg BB 69,148580,681b

800 mg/kg BB 76,082880,701c

1600 mg/kg BB 85,769210,857d

Keterangan: Perbedaan notasi menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan antar perlakuan terhadap

nilai kadar kalsium darah (p

6

Ikatan tersebut akan menginduksi

feedback positif pada korteks adrenal

sehingga akan menghasilkan hormon

estrogen sehingga kadar hormon estrogen

akan meningkat. Hal ini menunjukkan

bahwa pemberian tepung tulang ikan Tuna

Madidihang berpengaruh terhadap kadar

hormon estrogen.

Pengaruh Pemberian Tepung Tulang

Ikan Tuna Madidihang (Thunnus

albacares) Terhadap Gambaran

Histologis Vertebrae Tikus Model

Ovariektomi

Pengaruh pemberian terapi tepung

tulang ikan Tuna Madidihang pada

gambaran histologis organ vertebrae tikus

model ovariektomi dapat diamati melalui

pewarnaan Hematoksilin-Eosin (HE). Pada

pewarnaan HE dapat terlihat adanya

perbedaan gambaran histopatologis antara

tikus ovariektomi yang tidak diterapi dan

yang diterapi dengan tepung tulang ikan

Tuna Madidihang. Pada tikus kontrol

ovariektomi tanpa terapi menunjukkan tebal

dinding corpus vertebrae sebesar 1,84 mm,

dan tikus dengan perlakuan dosis 1600

mg/kg BB/hari memiliki tebal 3,18 mm.

Pada semua perlakuan menunjukkan hasil

yang sama yaitu tikus perlakuan 400 mg/kg

BB/hari dan tikus perlakuan 800 mg/kg

BB/hari.

Gambar 1. Gambaran histopatologis tulang vertebrae tikus (perbesaran100x); Keterangan. (a) tikus ovariektomi tanpa terapi, (b) terapi dosis 400 mg/kg BB/hari, (c) terapi dosis 800

mg/kg BB/hari, (d) terapi dosis 1600 mg/kg BB/hari. Garis panah merah menunjukkan

bagian dari dinding corpus vertebrae yang diukur tebalnya dalam ukuran milimeter

(mm).

A. B.

D. C.

1,84 mm

2,4 mm

3,18 mm 2,6 mm

7

Hasil pengamatan Histopatologis

terhadap 4 kelompok tikus yaitu tikus

ovariektomi tanpa terapi, terapi dosis 400

mg/kg BB/hari, terapi dosis 800 mg/kg

BB/hari, terapi dosis 1600 mg/kgBB/hari

menunjukkan terdapat korelasi antara tebal

dinding corpus vertebrae dengan terapi

pemberian kalsium. Dosis tertinggi

menunjukkan ketebalan dinding yang paling

tebal diantara perlakuan yang lain.

Ketebalan dinding sel dilakukan dengan

mengukur bagian bawah dinding corpus

vertebrae.

Pemberian terapi tepung tulang ikan

tuna madidihang yang memiliki kadar

kalsium yang tinggi akan meningkatkan

kadar kalsium dalam tubuh. Tingginya kadar

kalsium ini diakibatkan adanya proses

absorbsi kalsium dalam pencernaan.

Kalsium yang telah diserap akan digunakan

dalam proses remodelling tulang. Saat

proses remodelling berlangsung maka

perbaikan tulang akan berjalan lebih cepat.

Proses penebalan dinding corpus

vertebrae berlangsung saat proses

remodelling tulang. Tersedianya kalsium

dalam jejunum akan dapat dapat ditranspor

oleh 1,25 dihidroksikalsiferol yang

diproduksi oleh ginjal. Banyaknya kalsium

yang dapat diserap oleh pencernaan

menyebabkan proses remodelling tulang

berjalan sehingga sel-sel osteosit yang

terdegradasi oleh aktivitas osteoklas dapat

segera tergantikan.

Pada tikus dengan perlakuan

ovariektomi tanpa terapi menunjukkan rata-

rata tebal tulang yang paling rendah yaitu

1,83 mm. Sedangkan pada tikus perlakuan

dengan dosis tertinggi yaitu 1600 mg/kg BB

terlihat bahwa dinding bagian corpus organ

vertebrae lebih tebal jika dibandingkan

dengan tikus kelompok perlakuan yang lain,

yaitu 3,18 mm.

Tebal dinding vertebrae pada tikus

ovariektomi menandakan bahwa terjadi

kerusakan struktur dari tulang vertebrae,

menurut Eklou-Kalonji (1999) tikus yang

diovariektomi akan mengalami pengurangan

massa tulang dan penurunan densitas tulang.

Sedangkan pada tikus yang mendapat terapi

dengan dosis tertinggi yaitu 1600 mg/kg

BB/hari memiliki dinding bagian corpus

yang paling tebal dibandingkan perlakuan

yang lain. Penebalan dinding tersebut

menunjukkan bahwa terapi tepung tulang

ikan Tuna Madidihang memberikan efek

pada proses perbaikan tulang yang

mengalami penurunan densitas akibat efek

dari ovariektomi. Hal ini sesuai dengan

penelitian yang dilakukan oeh (Masyitha,

2006) yang menyatakan bahwa pemberian

pakan dengan rasio fosfat dan kalsium yang

seimbang menunjukkan perbaikan pada

gambaran histopatologis tulang mandibula

Dari gambaran histologis ulang

vertebrae pula dapat diketahui adanya

kerusakan pada struktur sel tulang vertebrae.

Terlihat bahwa pada kelompok A susunan

tulang vertebrae menunjukkan adanya

kerusakan yang jelas. Terlihat dari gambaran

histopatologi yang ditandai tulang vertebrae

mulai berkurang kepadatannya, sumsum

tulang dan terdapat rongga rongga diantara trabekula (Gambar 1).

Dalam penelitian ini perbedaan

perlakuan kelompok A dan kelompok B,

kelompok C, kelompok D terletak pada

asupan terapi kalsium dari tepung tulang

ikan Madidihang. Hasil penelitian terlihat

adanya perbedaan yang mencolok antara

kelompok kontrol dengan kelompok terapi

pemberian tepung tulang ikan Madidihang.

Tulang tulang vertebrae A terlihat lebih

mengalami kerusakan dan pengurangan

densitas tulang dibanding kelompok yang

lain. Perbedaan perbedaan tersebut timbul

karena pada kelompok A tidak

mendapatkan kalsium yang tinggi (pakan

normal).

8

Perbaikan tulang juga ditandai dengan

adanya peningkatan jumlah sel osteosit

dalam trabekula tulang. Peningkatan jumlah

diketahui dengan melakukan penghitungan

Tabel 2.Rata-rata jumlah sel osteosit tulang vertebrae pada masing-masing kelompok perlakuan

Kelompok Rata-rata jumlah sel osteosit

Kontrol ovariektomi (A) 310,377a

Dosis 400 mg/kg BB/hari (B) 400,89b

Dosis 800 mg/kg BB/hari (C) 440,39b

Dosis 1600 mg/kg BB/hari (D) 591,87c

Keterangan: Sel osteosit dihitung dalam tiap satu lapang pandang (perbesaran 400x).

sel osteosit dan dibandingkan semua

perlakuan. Bagian yang diambil adalah

bagian sisi luar dari dinding corpus

vertebrae. Dari rata-rata penghitungan

jumlah sel osteosit pada satu lapangan

pandang dengan perbesaran 400x didapatkan

data seperti Tabel 2.

Peningkatan jumlah sel osteosit

menandakan adanya perbaikan pada proses

modelling dan remodelling tulang vertebrae.

Dari rata-rata jumlah sel osteosit tulang

vertebrae kelompok A tampak jelas

jumlahnya lebih rendah dari kelompok yang

lain. Perbedaan jumlah sel osteosit tersebut

merupakan efek dari osteoporosis yang

terjadi akibat meningkatnya penyerapan

tulang terlihat dengan menurunnya jumlah

sel osteosit dan trabekula. Seperti

dinyatakan oleh Hartiningsih (2012) bahwa

ovariektomi dapat menyebabkan penurunan

absorbsi Ca usus dan meningkatkan ekskresi

Ca melalui urin. Rendahnya kadar Ca dalam

darah akan menyebabkan peningkatan

resorpsi Ca dari tulang untuk memenuhi

kebutuhan Ca dalam tubuh sehingga akan

menyebabkan menurunnya densitas tulang.

Pemberian dosis 400 mg/kg BB/hari tidak

menunjukkan perbedaan yang signifikan

pada rata-rata jumlah sel, berbeda dengan

kelompok dosis 1600 mg/kg BB/hari yang

menunjukkan perbedaan yang signifikan

Efek dari terapi tepung tulang ikan Tuna

Madidihang terhadap perbaikan sel osteosit

terjadi karena adanya peningkatan

penyerapan kalsium di jejenum. Peningkatan

tersebut terjadi saat ginjal melakukan

resorbsi kalsium akibat kadar kalsium yang

rendah dalam darah sehingga ginjal akan

menghasilkan vitamin D yang berfungsi

melakukan transport aktif kalsium yaitu 1,25

dihidroksikalsiferol. Saat diberikan terapi

tepung tulang Ikan Tuna Madidihang

melalui sonde langsung ke lambung akan

terjadi penyerapan kalsium di jejenum

setelah tikus menghasilkan 1,25

dihidroksikalsiferol akibat rendahnya kadar

kalsium dalam darah akibat proses

ovariektomi. Meningkatnya kadar kalsium

dalam darah akan menyebabkan terjadinya

feedback positif pada organ tiroid, yang

nantinya akan menghasilkan hormon

kalsitonin. Adanya hormon kalsitonin akan

menyebabkan proses remodeling tulang

kembali normal. Hormon kalsitonin akan

meregulasi kalsium yang ada di dalam darah

untuk digunakan oleh tulang dalam proses

remodelling sehingga dapat meningkatkan

densitas tulang yang berkurang akibat

osteoporosis.

Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah

dilakukan dapat disimpulkan bahwa

pemberian terapi tepung tulang ikan tuna

madidihang (Thunnus albacares) dapat

mempengaruhi proses remodelling tulang

dan meningkatkan kadar hormon estrogen

tikus model ovariektomi dengan presentase

7-10%. Pemberian dosis 1600 mg/kg

BB/hari merupakan dosis yang paling

efektif untuk perbaikan tulang.

Ucapan Terima Kasih

Terima kasih kepada teknisi, laboran dan

9

dan staff Laboratorium Biokimia FMIPA

Universitas Brawijaya yang memfasilitasi

pelaksanaan penelitian ini.

DAFTAR PUSTAKA

Albert B. 1998. Molecular biology of the

cell. 3rd

Ed. Garland Publishing,

Inc.New York and London.USA.

Arjmandi BH, Alekel L, Hollis BW, Amin

D, Stacewiez-Sapuntzakis M, Guo P,

Kukreja SC. 1996. Dietary soybean

protein prevents bone loss in an

ovariectomized rat model of

osteoporosis. J Nutr 126:161-167.

DepKes RI . 2004. Analisa Tingkat

Osteoporosis di Indonesia . Puslitbang

Gizi Depkes.

Eklou-Kalonji, Erik Zerath, Colette Colin,.

1999. Calcium-regulating hormones,

bone mineral content, breaking load

and trabecular remodeling are altered

in growing pigs fed calcium-deficient

diets. The Journal of nutrition

1999;129(1):188-93.

Hartiningsih, Devita Anggraini, Irkham

Widiyono. 2010 . Pengaruh

Panhisterektomi dan Konsumsi

Suplemen 1,25-Dihidroksivitamin D3

Selama 1,5 Bulan terhadap Retensi

Kalsium pada Tikus Wistar. Lembaga

Penelitian Universitas Gadjah Mada.

Hartiningsih, Devita A. Dan Dhirgo A.,

2012. Respons Metafisis Tulang

Femur Distalis Tikus Ovariektomi

yang Mengkonsumsi Kalsitriol.

Jurnal Kedokteran Hewan Vol. 6 No.

2.

Kawiyana, IKS. 2009. Osteoporosis

Patogenesis, Diagnosis dan

Penanganan Terkini. Universitas

Udayana. Denpasar

Kusriningrum, R. S. 2010. Perancangan

Percobaa.. Airlangga University

Press. Surabaya

Masyitha, D. 2006. Struktur Mikroskopik

Tulang Mandibula pada Tikus

Ovarektomi dan Pemberian Pakan

Rasio Fosfat/Kalsium Tinggi. Media

Kedokteran Hewan Vol. 22 No. 2

Nelson, NL, Bulun, SE. 2001. Estrogen

Production and Action. J Am Acad

Dermatol. 2001 Sep;45(3

Suppl):S116-24.

Sabri M. 2011. Aktivitas Ekstrak Etanol

Batang Sipatah-Patah (Cissus

Quadrangula Salisb) Sebagai

Antiosteoporosis Pada Tikus (Rattus

Norvegicus) [Skripsi]. Program Studi

Sains Veteriner, Sekolah Pascasarjana.

IPB

Suarsana, Nyoman, I Dharmawan, I

Gorda,B Pontjo Priosoeryanto. 2011.

Tepung Tempe Kaya Isoflavon

MeningkatkanKadar Kalsium, Posfor

dan Estrogen Plasma Tikus Betina

Normal. Jurnal Veteriner Vol. 12 No.

3: 229-234, September 2011.

Thalib, Ahmad. 2009. Pemanfaan Tepung

Tulang Ikan Madidihang (Thunnus

albacares) Sebagai Sumber Kalsium

dan Fosfor Untuk Meningkatkan Nilai

Gizi Makron Kenari. Sekolah

Pascasarjana IPB. Bogor (Thesis)