Post on 04-Apr-2015
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Méthodes de dosage d’un antigène par ELISA
(Enzyme-linked immunosorbent assay)
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Principe généralDosage d’un antigène par le test ELISA en sandwich
(sans compétition)
(1) Fixation de l’anticorps de capture (+ lavage)(2) Ajout de l’échantillon à tester (+ lavage)(3) Ajout d’un anticorps de détection (+ lavage)(4) Ajout de l’anticorps secondaire lié à l’enzyme (+ lavage)(5) Ajout du substrat de l’enzyme => mesure du signal et
report sur la courbe d’étalonnage => dosage
Jeffrey M. Vinocur
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Principe généralDosage grâce au test ELISA par compétition
Source : BMedia
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Applications
• Dosage de protéines en recherche
(nécessité de contrôles)
• Dosage d’allergènes alimentaires
• Dépistage de nombreuses
pathologies en particulier du VIH
• Exemples d’enzymes utilisées : peroxydase, béta-galactosidase
plaque de microtitrage à 96 puits
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Avantages
• Test simple, rapide, peu coûteux
• Détection spécifique
• Technique sensible
• Pas besoin d’appareil spécialisé pour détecter
le signal
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Inconvénients
• Dépendante des conditions du milieu
• Limité par la disponibilité en anticorps
spécifique
• Risque de faux positifs
• Limite de détection moins bonne qu’en RIA