for ThaiScience/Article/2/10015085.pdf · ˘8˘ % ˜c % ˜7 ˘˘ 8 ˜ j ˘3 7 j˘ ’ ˙ ˆ ˘ ˆ...

Post on 25-Aug-2020

1 views 0 download

Transcript of for ThaiScience/Article/2/10015085.pdf · ˘8˘ % ˜c % ˜7 ˘˘ 8 ˜ j ˘3 7 j˘ ’ ˙ ˆ ˘ ˆ...

� ���������������� � �������� ������ ������� ���� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �<

" ����������%�&��� ��� ������ ������$'��� �����(����� �����

���������� ��)��������� ����������������

���������8��������%�����C������� �%������

��7�������8���������

��

J������3� ��� ����7�������J����

��'����������������������������(���������������������������������������������������������+�������� �������

�'������������������������ ���������(���������������������������������������������������������+�������

�� ���������'����������2����/������������������������(����������2���������������������������������������+�������

�� ���������������������������� !�����������"�������#���������$���3�������/&

%�����1��(/������.���0��������.�)������.���

��������

�!"�����#��A���!A���������$�����!����� �� ���� ��������$������������ ���!#�$�������$�#����&

����������!A��������%��������#���� ��� �"������������ �!� ��B #��������1���4�����,�����������!��

% ���������B#� &�'���������$�����"���������� ��������������������������"���#��#��� ��� ���B#� ��$�������

�����"� � $��!������,��!A�#������� ����"���#���� ��!A�0�� ����"���#����,� #�!"��� � ���1���4����&'��� ��� ����� ���$������ �#��� ����� ����!�� �% �!�������� ����������� ��%��� � �$$�#�� �������������

� ������� �� � ���� ��� ����� ���$������ �#��� ����� ��� � � ��!#������ � ���!#� #�� ���� � �#�

% ����� ������&�'����������� �!��������������%����$��!������������� ���� $$����#������������$�������#��� &

'�����B#� ��$�%����$��!�������������������������� &��.��#�!"����������1���4�����,��!A�0������"���#���

����� �������!�� �������$���B#� �%������������"�����������$������#������B#� ��� ����#������ �#� �!������

����&� ��!"�����#��A�#�������"���#��������� � ����� ������ ��B#� �#�!"��� � ��� ����#�!!��#��� ������%��

�!A� $��!������&�'��� �������� �������� ������!A�����"���#���� ����� #������� ��� �� #������!������ ����

���$�������#��� �%��������������B#���"�#��� ��������"�#�����������������B#� �#�!"��� �����!A� ��B #������&

C!"� �#�����������"���#����������������������#�� ����#�!"��!�� �!#�&��'�� ����������� ����� �#���

�$�����!������ �������$�����!#��!����"��%�%� � ������%� ����$�#�� ���������"�� !������������������ �#�

�#��� ��� ���B#� &��'������������$�������� �� #����������!A�0������"���#�������������"�����������%�#�!�

������%��� ���� ����� �� ���!�$����!A,�%���!�������(������ � �$����� �#�����$�����"���#����4���$�����#�����

���� �������#����������$$#�# ��� � �#���������� ���$$�#��&

���� ����!"�����#��A,�0������,�����"���#��,�1�������$�#���,��������� ������

�����������

0���������������������������������������������������������� �������������������

��������������� �������������������������� ���������63#��������������)�����������

�������� �� �������*6<7#��������$�������������������������� ����� ����������������������

����� ���������������������������������������������������������������������4�����

�����$��.''59�����������.''&#$��6���������%�����������������+��*�+#���������2�������� ��

���������������������������������������������(������$��.'''9����������.''/#$�*�����������*�+

��������������������%����������������������������������������( ����������������������0���2���#$

�������������������������������������������������������������������������(���� ��7����� !!!#$

����������������������������������������������*�+���������������������������������(���� $�������

������%�����������������������������*�+��*�+��������*�������������*%������#������%��

����������� ��������������������������������G�����������$�� !!?#$�;��������� ����������������

��������� ������)����������������������0���2���$�8�������������������������8�7#�*�+

����������������������������������%���������������������������� ��������������������������

�0������H������7�������7��������7�����.''59�0������H������7�������7�����������������$��.''5#$

���������������������%��������������������� �� ���������*�+���������������������������������

����������������������������������������$��������������������������������������������������

*�+��������������������������������������%���������%����������$�C���������%�����������������

������ �������������������$�6������(���������������� ���������������������������������������������

��� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � ���������������� � ���������������������������� ������ � �������� ������ ������ � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � ��

���%�������������� ����������������������� �� ����������H������.'''#$�������%,��������������

���� ������������������������������������������ ������������������������������������������

� ����������������������������������������������(���� ����*�+�-��������������������������

�����������������*�+�������������0���2����#$

����� ������������

1��������

*�����������+����� ���������� �����7������;7*$�-������� �����������������

5'�'''��!&B������� �����#��������������������*)�����������+��������������$�0���2���

���� ����������������4��(���#�������%�����������+�������1 ����7)��%%�-���� ����+�(���

=����� �G�%�������������� $�1�����6-#���������������% ���������*�����8�%������ �-�����

+��������������$

������������������*�����������+������������

����*�+�-�����������������������������% ������� ���������� �����)������ ����

�����������$�����������������������������������% ��������������������������%�������������������

��������������������������� �����������(�����������$��+����� ������ ������������������*�+

�������� ������(�����<17=#���������� '���:��#���������������'$'"&���������(�����������

�)��������������� B��:�#����(��������'$"&&���������2��������$�������������������������

��������� ������������A''����$������'$ ��������)�����������������������'$.&�B��:�#����������

��������� ��� ���� �������������������������� �������� ���� &�������$�0��� ������������� ��

������ �������������������&B��:�#���������������$������������������%���2���*�+������������

��������� 2��$���������������� ������ ��� �������������� ������������������� ��� �� ����

��������������&B�:�$������������������������������2������ ������2������'$/��%��

��� �5'�-�����./������$����� � ������2�������������������� ������� ������������������/

�-$

������������ ������2���*�+��������������������������������������������2�����&'A�@�!�������

��� ��������� ����(����'$'.&$

)����������������������

���� �� ����� ������� � ���0���2���� ���*�+�-��� ����������� ��������������

����������% ������������������������%��������01���������*�--� '.5'$�G���������%�������

01������������ ( '�����:����������������% ����������������������������� ����A''�����7�%�����

��(������%���������������������������������������%��������5&�-�����/?��$

)��������������������� �������

7 ������������������������������������������������ �������%������������������������

�0������H��������������������$��.''5#$�+����� ��������5'�/'��#�������������������� ��,����������

����������������������� ���������������������������� &'���:��$�7 ���������������������

���� �������% � ���������� �������������01��������� �&( '�� �����:�����#$�0���2����

*�+�-����������������������������������������������������� ��,������������������

$'���:���/���������������������������������������������$�*�������������������������������

���������% ����������������������������������������������������/�������������� ����������������

����������������./��������������������������$�����������������%����������� /��� ����������

� ����������������������� ���������������% ������������������������������������������$��<������

����������������'����&����������������% ���������%��������9�'�O�������� �O�������� �����������

������%���)����� �����������������������#��.�O���������� ����������� ����������������

����������������������#��5�O���� ��������������%�������������������������������#��/�O��(������

����������������������������������������#����&�O������$��*������(����������������������

% �����4�������-��������������������;������� $

��������� ������ � �������� ������ ������ � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �9

*�������������(����

7�����������,���������������������������0���2�������*�+�-��������������� ��/����

?���:��#������������������������&�?������6-���������������5'�/'������������������$�4���

������������������������)���������������������������*�+�-������������������������

�,�����������������������������������$�<������������������������� ����� /��� �$�6���������

�������������������������������������������������� ���������%������������������+;�#���

����������������-�#����������������������%��������������%�������������������������� � /$

����� ��������D���(���� ������������%���������

<�������������%�����������+-#������������������������ �������%����0������H������7������

7�����������������$��.''5#$�������+-�����������������������������������������%�������

��������+7#�����������������+7��������������������&'B$�0���2�������*�+�-��������������

�������������� �A'���:�����������������+-������������������������� B���������������$����

��(������������������%���������5"��-�����.'���$�-����� ����������������% ����������������������

��������%����������� �����������������������% �����������������5'''���������&�����������

�������%����������������������������������������������������� ����&/ ��$ ''B�� �������

���������������������������$

7�������������� ���

������������������������������������������������������������������������������������

�� ���� ����������������*�=3*#$��7�������������������������������I�'$'&$

���� ��

)����������������������

��������������������������� ��������01������������*�+�-����������������������������

��������0���2���$���������������%���� ��������������16-#����0���2�������*�+�-��

����������������������(������ �'$ &A���:������'$ &'���:��������������� $��-�������������

������������������������������������� $

�������������������� ����������������������

7 ��������������������������������� �������������������������������������������

�-Q�����������������#$���������������������������������������������������������%�����������

������������������������������������������������������������������� �������������������������$

- ����������������������������������������������� ����%��� #$�*��������������������

01������������&( '�������:���������������������������� ''B��������� ���-Q�����������������

�7�������������$��.'' #��������������� ��������&'B��������� ��������(��������������������

�������%������������%��� #$�7��������� ������ ����������������������������������������������

���������������������������������������������������$���������������������� ������������������

��������������0���2�������*�+�-������������������������������������� ���������������

����������������������������������������������������-����������������������������������������

�����������������%���������������$�������������������*�+�-������������������������������������

0���2���$�+���������� �����������������0������ *#����������������������������0������ +#�

�������������������������������������������� $

3�� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � ���������������� � ���������������������������� ������ � �������� ������ ������ � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � 3�

Table 1 Curing and mortality of fungal infected mice

Note.Each mice received treatment 4 h after fungal infection.

Figure 1 Antifungal activity in systemic candidiasis mice. Degree of sickness of each mouse was monitored after intravenous administration of single dose 4 h after fungal infection (A) or multiple doses (indicated by arrows) for 4 consecutive days (B) of Fungizone®, AmB-Chi nanoparticles or Chi nanoparticles. Degree of sickness scale 0 to 5 is normal to death and numbers in the between are different levels of sickness. Each point represents the mean+SEM of eight mice.

Numbers of sick/death�

Treatments�Day 7� Day 14� Day 21�

Cyclophosphamide 0 / 0 0 / 0 0 / 0

C. albicans 8 / 0 7 / 1 4 / 4

C. albicans+Fungizone® 0 / 0 0 / 0 0 / 0

C. albicans+AmB-Chi nanoparticles 1 / 0 0 / 0 0 / 0

C. albicans+Chi nanoparticles 8 / 0 8 / 0 7 / 1

C

C

C

C

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 200

1

2

3

4

5

Day after fungal infection

Deg

ree

of S

ickn

ess

A

C

C

C

C

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 200

1

2

3

4

5

Day after fungal infection

Deg

ree

of S

ickn

ess

C

C

C

C

C

C

C

C

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 200

1

2

3

4

5

Day after fungal infection

Deg

ree

of S

ickn

ess

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 200

1

2

3

4

5

Day after fungal infection

Deg

ree

of S

ickn

ess

A

C. albicans

C. albicans+Chi nanoparticle

C. albicans+ Fungizone®

C. albicans+AmB-Chi nanoparticle

Days after fungal infection

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 200

1

2

3

4

5

Deg

ree

of S

ickn

ess

B

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 200

1

2

3

4

5

Deg

ree

of S

ickn

ess

B

Days after fungal infection

C. albicans

C. albicans+ Fungizone

C. albicans+AmB-Chi nanoparticle

��������� ������ � �������� ������ ������ � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � 3�

)��������(���� D�����������+-����%����

+����0���2���� ���*�+�-������������������� ����� ����)���� � ����������

�� ����� ���� ���������������������������0������.#$��&'B������ ���������������% �0���2���

����*�+�-���������������������������&$AA���:������"$!5���:��������������� $�-������

������������������������������������*�+�������������������������������������������+-

���%������������������#$

��������'�B#� ����DA0��$��!A�$��!�������&�?�!�� ����������$�1���4������� ��!A�0������"���#���

������ #�� �#�� � ��� �������7!�� #��#�����������$��!A&�;��� #��#�����������$��!A������"�����

���������M���!�� ��&�C�#��"������"������������!���G:C*��$��������B"��!����&

)�������(���� D���������(����

6����������������������� �����������*�+�-���������������������������� �����������

��������(���� ��������������������������������0���2���$�1�����,�����������*�+�-�������������

������������ ��/����?���:����(��%����������������������(���� ����������,�������������������������

���0���2������0������5#$������������������������������������ ���:��#����������������(���� 9

����������������������������/���:�����������%����A&�"'B���������$��������������������������

����������������������?���:���������.�������������$�������������� �������������������������

������������������ �-����������������������������/���:��$�����������������������������

��������������?���:���������� ��������������������$

*��������������������������������������� ���B�������������0���2�������*�+�-��

�������������0������5#�������������� ����������% �0���2��������������� �������������������

*�+�-������������������������� ���������������0������/#$

������(���� ����*�+������������

7��������������������������� � /������������������(���� �������������������������� 2��

����%������������������+;�#����-������������%���.#$��1�����,�������������������������0���2���

�������������� ������������������������������������$�*������������+;�������������������

�������������������������� �������������������������������������������������������������������

�������������������/���:��$����������������������������������������(���� ������0���2���

������������$�=����������� ��������+;�����-�� ������������������������*�+�-�����

-��������������������������������������������������������(���������������������������������$

7�����+;��������������%������������ ������������������������������ ��������������������

������������������(������ �"$.���:��$�6���������%����������������0���2�������*�+�-��

������������(�����������������������������������������������������������������������������

������������ ���������$

100.5

0

20

40

60

80

100

A

F

Log (Amphotericin B), mM

% H

emol

ysis

101.0 102.0101.5100.0 100.5

0

20

40

60

80

100

A

F

Log (Amphotericin B), mM

% H

emol

ysis

101.0 102.0101.5100.0

AmB-Chi nanoparticle

Fungizone®

3�� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � ���������������� � ���������������������������� ������ � �������� ������ ������ � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � 3�

��������� ������ � �������� ������ ������ � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � 33

��������

������������������������� ������������������������������������� ������(���� ����*�+�-��

����������������������������������������*�+�������������0���2���$������������������

����� ����� ����� ����������� ���%���� � ������������ �16-#��������01��������� ��� %���

�������������������������$������������������������ ������*�+������������������������������������

�������������������� ������������������������%�����������������������$

�������������������������������������� ������������������������������ ������

�����������% �-Q������������$��7��������%�����������(������������������� ����������� �&'B

���������������������������������������������������������������������������� ����������%���

%�������������� ��������������������$���������(�����������������������������������������������

*�+�-����������������������������*�+�������������0���2���#������������������������

������������� �����������������$�4�����������������������������������������������������������

������� �������������$�7��������� ��������������������������������� ���������������������������

������������������������� ������������� ��������,������/������������������������$�-����������

��������� ���������������������������������������������������������������������������

������C��������$��.''5#$�6��������������������%������������������� ����������%������������� �%��

��������������01�������������������������������������%���� ����������������������������������%����

����������$

=����� ���� ��������� ��� �����������*�+�-��� ���������������� ��� �������*�+

��(���� $�C�������������������������������(���� �������������0���2���$�=�������������������

0���2�������*�+�-����������������������������������(���� $��������(���� ����*�+�����%��

�������������%����������������������������������*�+��������,���������������+�����2������$�� !!.#$

C������������*�+���*�+�-����������������������������0���2��������������������

���������� ����������������������������������%�����������#$�C��������%���������������

�������� �������������% ����( ��������*�+�����������������������������% �*�+��������

�����������$��0�������������������������������*�+�������%����������������������� ��������

���������������������������������������������� ���������)������������������������������������

���( ��������������������0���2�������������������������� ����� �����(���� $�������� ���������������

%���������������������������%���������$������������������������%�������(�����������������������

���������������*�+�-���������������������+;�����-�����������������������������������$

0���2�������������� ���������������(���� ���������������������������������%������$

6���������� ��������������%����*�+�������������������������������������������� ����� ��

� �����������������&'B������ �������*�+�-�������������������������� �������������������

0���2���$�-�������������(������� ������������������������������������(���� �����������

���������+;�������������������%��������� ��������������$��6��������������� �����������������

����������������������������������������������������������������������������������$�� !!!#$

�����������������������������%����������������������������������������������������������$

C��%������������������������������%��������������� ���������������������%���� �����������������������

����������������������%��������������������������������������������% �������������������

�����������2�$�C���������������������������������������������������������������������,�����

������%����������������������%���������������%����������������% ����������������$��������������������

�����������������������������������%��������������������%����������������%���������������$

���� �����

*�+�-�����������������������%�������������������� �� ������������������������

� �����������������$�*��������������������(���� �������������������� �������������������������

*�+������������������������������������������������������(���� $��C����������������������������

�����������% �����������������������������2���������������%������������������� ����������

��(���� �����������������������������������$

3�� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � ���������������� � �������������������

������ ���������

�����������������������������������$�����4$�J���������������������������������������

����������������������$���������� ���������������% �������������������������-��������

G������4�����������+���������� ��+������#���������$

����������

+�����2��J$��-���������7$����G������6$�� !!.#$�4����������������������������������������������+��

������(���� ��������$�.�����������.��������0�������������4��.5 '�.5 &$

4��������$��G��%����J$������������<$��.''5#$�4���������� �����������������������������

��������� ������������������������������$����+�����)������ ��������������A?&�"'.$

0�������$��H�������$�������������$��7�������*$��7������7$���������Q$�������$��.''5#$�-��������

���8�7�*�+D�*�����������������������������������������+���������������������

�8�7#�� ����� ����������� ������%����� �����������$� )����������� ! ���� �

�������� ������#4(�� ' � .$

0�������$��H�������$��7�������*$��7������7$����7�����J$��.''5#$�*������������� �� ��������

������������+�����������������������8�7#$�)�����������! ������������� �����

#4,��5"�/&$

0�������$��H�������$��7�������*$��7������7$���������Q$����7�����J$��.''5#$�4���������������

������� � ��� ��(���� ���� ������������+� ������������ �� ���������������� �8�7#$

)�����������! ������������� ������#4���& �A'$

G�������1$��+�,����7$��7�����7$��0��������*$�J$����7�����1$�� !!?#$�<����������������������

������������+�����������$�! �����"��������� �������&,�� 5"� & $

��������� J$�$� �.''/#$�*�������� ���������D������������� ����$6����� ;%����������7<�

&��� &�..$

����H������1$��$�3$� �.'''#$�*� ��������������������������������������$'����������

= ����������������84�� �."$

�(��J$��$��C�������$�J$��7�%����J$�<$��0�������7$�G$�����������$�G$��<���������C$�4$�������$��.'''#$

�������������������������������������������������$�6���������<��������7����� ����*������$

0�������)������ ������������3��AA.�A"?$

����������1$�<$��.''&#$�-�������������������������� ���������������������$����! ����

�.�����������0������������,4�7����$� #���&�� $

����������7$�-$��H��%����$�3$����<�����$�� !!!#$������������������������������������������

��<�*�������� �� ����D�+���������%���� ��%�� �������%���������%���� ����������(���

��������<�*$�)�����������! ������������� ������&(���.5 �./5$

7���������Q$����7������4$��.'' #$��������������(�������������������������������������

+���������������(�����������������������������$����! �����.�����������

0������������8���./&�.& $

7�����<$� � !!!#$� 8�����%����� ������������+� ���� ���� ��������� ��� ������ ��������$

����������������&*��5'A�5.5$

C����J$��$��C����-$�C$��8�����$�-$����Q������$��$��.''5#$�+�����������1G�A5��������� ��:

��������%���������%����$� ! ���� �9��������"��������'�����������.�

,8��A'A�A &$